UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN VETERINAR FACULTATEA DE AGRICULTUR

PROIECT

MASTERAND,

Du Rzvan - Petru

NDUMTOR, Conf.dr. Roxana Madjar

2013

UNIVERSITATEA DE TIINE AGRONOMICE I MEDICIN VETERINAR FACULTATEA DE AGRICULTUR

PROIECT
ANALIZA COMPARATIV A METODELOR DE DETERMINARE A NITRAILOR DIN PRODUSELE VEGETALE

MASTERAND,

Du Rzvan - Petru

NDUMTOR, Conf.dr. Roxana Madjar

2013

CUPRINS

Introducere ................................................................................................................ 3

Descrierea culturii ( produsului vegetal) ce urmeaz a fi cercetat din punct de vedere agrochimic ................................................................................................................... 5

Obiective .......................................................................................................7

Curba de calibrare .. 11 Curba de etalonare 12 Curba de calibrare... 13

Tabel rezultate experimentale ................................................................................... 14

INTRODUCERE Nitratii sunt componenti naturali ai solului provenind din mineralizarea substantelor azotoase de origine vegetala si animala. Mineralizarea solului se datoreaza in primul rand microorganismelor existente in sol. In tarile cu climat temperat, acest proces se desfasoaracu maximum de intensitate in sezonul cald. In mod natural, intre nitratii din sol, apa si plante se stabileste un echilibru care poate fi insa rupt de utilizarea intensiva in agricultura a ingrasamintelor organice naturale si mai ales a celor azotoase sintetice. Produsii lor de degradare imbogatesc solul si se pot acumula in plantele cultivate pana la niveluri daunatoare pentru consumatori. Azotul ajunge n organismul omului sub form de substan simpl (N2) odat cu aerul inspirat. n afar de forma liber a azotului, celelalte substane anorganice ce-l conin sunt toxice. Azotul ajunge n organism i prin intermediul nitrailor (NaNO3), care la rndul lor, ptrund n corp odat cu apa, legumele, berea, petele afumat i cu produsele farmaceutice. Nitraii nii nu sunt foarte toxici, nu se depoziteaz i sunt uor de eliminat. ns dac acetia nimeresc n organism n cantiti mari, se produce reducerea lor parial pn la nitrii, care sunt de 100 de ori mai toxici dect nitraii. La fel, n intestinul uman, sub influena microflorei intestinale, nitraii se transform n nitrii. Odat ajuni n snge, nitriii interacioneaz cu hemoglobina i i blocheaz funcia respiratorie, transformnd o parte din ea n methemoglobin, care nu este capabil s transporte oxigen. 30-40% din methemoglobin atac esuturile, acestea devenind srace n oxigen (O2) , ceea ce provoac distrugerea sistemului nervos central. Dac n snge se formeaz 15-20% methemoglobin, omul se simte extenuat, avnd nevoie de oxigen curat, pentru ca methemoglobina s se retransforme n hemoglobin. n intestine, nitraii i nitriii pot forma aminonitroze care au o aciune cancerigen. De aceea folosirea sistematic a produselor ce conin nitrai i nitrii poate provoca apariia cancerului. Cele mai multe aminonitroze s-au depistat n carnea afumat i crnciori. Nitritul i nitratul de sodiu se adaug n carne i produsele din carne pentru pstrarea culorii roii. Aciunea aminonitrozelor se manifest mai ales la copiii mici. Sunt cunoscute cazuri de intoxicaii ale copiilor n urma consumului de produse cu o concetraie mare de nitrii i nitrai. Concentraia de nitrai n produsele alimentare (mg/kg) este: Concentraia (mg/kg) Produse
3

Maxim (pn la 5000) Salata, varza, ridichi, spanac, sfecl, mrar, ceapa verde; Medie (600-300) Dovleac, morcov, varza alba, castravei, hrean, guile; Minim (100-80) Cartofi, rosii, ceapa, fructe, pepene galben, pepene rou. Metodele de micorare a coninutului de nitrai din produsele alimentare la prelucrarea bucatelor sunt: Metode de prelucrare Gradul de micorare a coninutului de nitrai 1. Splarea intens a legumelor 10-12% 2. Tratamentul termic (fierberea) 80% 3. Nu se recomand pregtirea bucatelor n vase de aluminiu, deoarece acestea catalizeaz transformarea nitrailor n nitrii ( substan cancerigen) 0% 4. La srare, nitraii trec n saramur, pe care nu o vom folosi. 2,1-2,3% 5. Pstrarea ndelungat a legumelor (2-3 luni) conduce la micorarea coninutului de nitrai, dar i a cantitii de vitamine. 30-50% 6. Nu se recomand ca n fiecare zi s se consume acelai tip de legume. 7. Cartofii se vor pstra ntr-o soluie de 1% sare de buctrie sau n una de acid ascorbic timp de 24 ore, dup care soluia se va arunca. 90% Factorii care influeneaz concentraia de nitrai n plantele alimentare sunt: 1. Timpul sdirii- ntrzierea sdirii cu 10 zile, determin creterea cantitii de nitrai cu 6,2 mg/kg; 2. Alegerea soiurilor de plante- soiurile timpurii acumuleaz nitrai n cantiti mai mari dect cele trzii; 3. Densitatea plantelor densitatea prea mare a plantelor cauzeaz acumularea excesiv de nitrai n ele; 4. Administrarea ngrmintelor este interzis folosirea ngrmintelor minerale pentru legume; 5. Irigarea udarea plantelor pe timp secetos micoreaz cantitatea de nitrai din acestea; 6. Recoltarea se recomand culegerea legumelor coapte i n nici un caz tinere sau rscoapte; 7. Condiii agrotehnice plantele crescute n ser au un coninut mai mare de nitrai dect cele crescute pe cmp deschis.

Intoxicarea alimentar cu nitrai (sau nitrii) poate fi acut sau cronic. Cazurile de intoxicare acut au un caracter ntmpltor. Ele apar de obicei, n urma folosirii greite a srurilor de nitrai i nitrii n locul srii de buctrie. Intoxicarea cronic este cauzat de consumul sistematic de produse alimentare cu un coninut foarte mare de nitrai. Simptomele intoxicrii cu nitrai (nitrii) sunt: -dureri de cap; greuri; vom; ameeli; cianozarea buzelor, a feei; slbiciune total; n cazuri grave pot aprea convulsii i pierderea cunotinei. Aceste simptome pot aprea la 1-6 ore de la consumul produselor alimentare. Descrierea culturii ( produsului vegetal) ce urmeaz a fi cercetat din punct de vedere agrochimic Castravetele (Cucumis sativus) Rcoritor i plin de prospeime, castravetele este unul dintre cele mai populare ingrediente ale salatelor de var. Datorit coninutului ridicat de ap, 90 la sut, contribuie la hidratatarea i oxigenarea organismului. A aprut prima dat n India antic, iar romanii sunt cei care l-au rspndit n toat Europa. Prezint avantajul c poate fi asezonat cu multe condimente - usturoi, mrar, chimen busuioc, oregano, rozmarin, piper, chili, curry etc. Castravetele poate fi combinat att cu legume - roii, ceap, ardei, conopid, ct i cu fructe: pepene, mr, portocal, mango, papaya. Se folosete la prepararea salatelor, a antreurilor i a sandviciurilor. Pentru a prepara o salat de castravei cremoas, se adaug iaurt, smntn sau maionez. Poate fi consumat i gtit - supe, mncruri cu carne, cu orez etc. Un deliciu al artei culinare sunt castraveii murai. Savuroase sunt i sandviurile de castravete, fcute cu pine uns cu unt. Untul poate fi nlocuit cu brnz amestecat cu verdea. Castravetele este leguma cu cel mai bogat coninut n substane alcaline i minerale, datorit crora nutriionitii l-au botezat campionul densitilor mineralei. Fiind slab caloric - 100 g de castravete = 15 kcal, este recomandat n dietele de slbire. Compoziie

Coaja verde i dur a castravetelui este un adevrat recipient pentru ap, miezul fiind
5

compus n cea mai mare parte din acest ingredient. Castravetele conine: ap (96%), potasiu, fosfor, calciu, magneziu, fier, zinc, vitamina C, B1, B2, B6, PP, provitamina A. Conine 96 % de ap, potasiu, fosfor, calciu, magneziu, fier, zinc, vitaminele C, B1, B2, B6, PP, provitamina A. Este un hidratant natural al organismului nostru, ca rezultat se poate vorbi despre efectul benefic asupra tenului nostru. Datorit coninutului de potasiu are proprietatea de curare a organismului i de reducere a tensiunii. Aliment i medicament 1. Conine potasiu, fosfor, calciu, magneziu, fier, zinc, vitaminele C, B1, B2, B6, PP, provitamina A. 2. ntruct este bogat n fosfor, calciu i potasiu, ajut la o bun circulaie sanguin. 3. Hidratant natural al organismului, cu efect benefic asupra tenului. 4. Salatele de castravei proaspei, stropii cu ulei de msline, sare i oet de mere (diluat cu ap) sunt un aliment-medicament bun n colicile intestinale, inflamaii, avnd efect laxativ. 5. Decoctul preparat din semine de castravete calmeaz tusea i ajut la expectoraie. Se vor consuma dou cni pe zi. 6. Datorit vitaminei B i provitaminei A, este indicat mpotriva mbtrnirii celulelor. 7. Castravetele este o legum uoar, hipocaloric, nu adaug nici un gram de grsime pe talie. 8. Cura organismul i reduce tensiunea.

Sucul - un diuretic natural! Sucul de castravete este benefic n: mrirea diurezei, detoxifierea organismului, n tratarea iritaiilor cilor urinare i respiratorii, a diabetului i n calmarea durerilor abdominale. Se consum cte dou-trei linguri dimineaa, pe stomacul gol.

OBIECTIVE 1. Compararea metodelor de analiza a nitratilor prin determinari efectuate la o serie de probe de material vegetal. 2. Sensibilitatea metodelor de analiza a nitratilor din produse vegetale cu continut diferit n domeniul de valori. Metode de determinare a nitratilor din produse vegetale
Metoda spectrofotocolorimetrica - este o metoda fizico-chimica al carei principiu se bazeaza pe compararea intensitatii coloratiei probei de analizat cu intensitatea coloratiei unor solutii de concentratii cunoscute si diferite. Metodele colorimetrice masoara absorbtia din domeniul vizibil al luminii. Legea de baza aspectrometriei de absorbtie este legea lui Lambert-Beer: Daca un fascicol de lumina monocromatica de intensitate Io strabate un mediu de absorbtie (solutia de analizat), el va avea la iesirea din mediu o intensitate It , mai mica decat Io, deoarece o parte din radiatii este absorbita de mediu. Cantitatea de radiatie absorbita este in functie de concentratie cat si de grosimea startului strabatut. Scaderea intensittii luminii are aspectul unei curbe exponentiale exprimata prin urmatoarea ecuatie: It = I0 10 cL Determinarea experimentala a concentratiei unei substante cu ajutorul spectofotocolorimetriei se realizeaza prin trei procedee :

Procedeul curbei de etalonare Se realizeaz o scala de diferite concentraii cunoscute ale componentului de dozat si se determina pentru fiecare concentraie extincia corespunztoare. Concentraiile si extinciile obinute se inscriu intr-un sistem de axe de coordonate si prin unirea punctelor respective se obine o dreapta denumita curba de etalonare care indica proportionalitatea directa (intr-un anumit domeniu) dintre extincie si concentraie.

Curba de etalonare este valabila numai pentru lungimea de unda si pentru grosimea stratului de lichid folosite la obinerea sa. Fie c1 c2, c3, c4 concentraii perfect cunoscute si cresctoare ale unei soluii; acestor concentraii le corespund extinciile E1, E2, E3, E4. Se reprezina grafic E = f(c), rezultnd curba de etalonare.

Curba da etalonare Rezulta ca la grosimi egale ale stratului de soluie, extincia este direct proporionala cu concentraia substanei din soluie. Procedeul factorului de panta

Cand numrul probelor de analizat este mare se construiete o singura curba de etalonare, creia I se determina factorul de panta. Prin inversarea relaiei (8) rezulta:

F este o constanta denumita factor de panta, care se obine facand media valorilor tuturor rapoartelor. Cu ajutorul factorului de panta se poate determina concentraia probei de analizat dupa relaia:

Procedeul soluiei etalon Se utilizeaz o soluie etalon de concentraie cunoscuta si cu valoare apropiata cu cea a probei. Se utilizeaz formula de calcul :

Metoda ionometrica - consta in imersarea in solutie extractiva a unui electrod indicator al ionului N-NO3- si al unui electrod de referinta. Diferenta de potential se masoara in milivolti(mv) care sunt apoi transpusi in concentratie, prin ridicarea curbei etalon. Material si metoda Materialul vegetal cercetat este compus din probe proaspete de castraveti. Metodele folosite la determinare nitratilor din materialul vegetal studiat vor fi spectrofotocolorimetria si ionometria.

Extractia nitratilor din materialul vegetal In cazul metodei spectrofotocolorimetrice etapele obinerii extractului sunt: - se cantaresc 5g de material vegetal maruntit, se trec in mojar, se adauga 1-2g nisip de cuart si aproximativ 0,5 g carbune animal - se mojareaza, - se trece totul cantitativ prin spalari succesive cu CH3COOH 2% intr-un balon cotat de 100ml, - se lasa n repaus 10-15 minute, dupa care se filtreaza.

Pentru metoda ionometrica extractia consta in : - se cantaresc in baloanele conice cu dop rodat, de capacitate 100 ml, o cantitate de 5g de material vegetal, - se adauga in fiecare proba cate 100 ml solutie de extractie 0,25 molar Al2(SO4) care se masoara cu pipeta , - se filtreaza folosindu-se hartie de filtru de porozitate fina. Determinarea N-NO3 se face direct in paharul in care s-a prins filtrul. Metode de dozare a nitratilor din produsul vegetal Pentru metoda spectrofotocolorimetrica dozarea NO3- cuprinde : - se pipeteaza 1ml din extract intr-o capsula de portelan, - se adauga 5-6 picaturi H2O2 pentru distrugerea substantelor organice, - se evapora la sec, - dup racire se adauga 1ml acid fenol 2,4 disulfonic , - se roteste capsula astfel incat tot reziduul sa vina in contact cu acidul, agitandu-se usor cu o bagheta mica de sticla, - se lasa in repaus 10 minute, - se adauga aproximativ 10ml apa distilata si 20ml NaOH 20% pana ce coloratia galbena nu se mai intensifica, - continutul capsulei se trece cantitativ prin spalari succesive cu apa distilat intr-un cilindru de 100 ml, - se aduce cilindrul la semn cu apa distilata si se omogenizeaz, - se citeste la spectofotocolorimetrul Spekol la lungimea de und =420nm. Dozarea pentru metoda ionometrica : - n 9 baloane cotate de 100 ml, se introduc mai intai 10 ml soluie 0,25 molar Al2(SO4)3. - se introduc cate 5,7,9,10,20,25,50,70,90 ml solutie standard continand 100 micrograme per ml N-NO3. - se aduc baloanele cotate la semn cu apa distilata si apoi se omogenizeaza.

Dupa ce se determina valoarea E corespunzatoare pentru etalonul care contine 100 micrograme per
10

11

12

13

Rezultate experimentale brute .Obtinerea rezultatelor finale. Prelucrarea rezultatelor

Nr. Crt .

Planta

Determinare nitrai spectrofotocolorimet ric Diluie 1:5 C ppm ppm E NNNO3 NO3 0,075 0,030 0,049 0,052 0,056 0,017 0,098 0,032 0,024 0,008 0,165 0,066 0,108 0,114 0,123 0,037 0,216 0,070 0,053 0,017 825 330 540 570 615 185 1080 350 265 85

Determinare nitrai Diluie 1:50 C ppm NNO3 3,69 8 1,50 9 2,41 5 2,63 0 2,74 5 1,20 3 4,78 2 1,57 6 1,21 8 2,48 6 ppm NNO3 813,56 331,98 531,5 578,6 603,9 264,66 1052,0 4 346,72 267,96 546,92

Determinare nitrai Ionometric C ppm NNO3 190,37 5 73,921 121,14 6 43,336 137,00 2 41,595 243,71 5 80,318 60,219 19,845 ppm NNO3 837,65 325,25 533,04 190,67 602,80 183,01 1072,3 4 353,39 264,96 87,31

Diferene +D sau D fa de determinarea colorimetric ppm NNO3 11,44 1,98 - 8,5 8,6 - 11,1 79,66 27,96 - 3,28 2,96 461,9 2 ppm NNO3 12,65 - 4,75 - 6,96 379,3 3 - 12,2 - 1,99 - 7,66 3,39 - 0,04 376,9 2

m V 28 3 30 4 29 3 29 1 29 0 31 8 27 7 30 3 30 9 33 5

m V 16 0 18 3 17 1 16 9 16 8 19 7 15 4 18 1 18 8 21 5

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Castrave i miez Castrave i coaj Castrave i miez Castrave i coaj Castrave i miez Castrave i coaj Castrave i miez Castrave i coaj Castrave i miez Castrave i coaj

Rezultate experimentale determinarea nitrailor din plant

14