Citologie

Citologia este o tiin fundamental, contemporan avansat, obiectul de studiu fiind structura, funciile i metabolismul celulelor. Teoria celular (1839) prezentat de botanistul Mathias Schleiden i zoologul Theodor Schwann: Corpul tuturor animalelor i plantelor se constituie din celule; Fiecare celul are viaa sa, dar este dominat de interesele ntregului organism; n perioada contemporan, teoria celular a fost completat nc cu 2 postulate noi: Orice celul poate proveni numai din celulele preexistente; Toate celulele unui corp animal sau vegetal provin din oul fecundat.

Componentele structurale ale celulei

Celula este unitatea elementar a lumiii vii, produs al evoluiei, cu o structur complex, aflat ntr-o relaie de autonomie i echilibru dinamic cu mediul nconjurtor. Principalele proprieti ale celulei: Creterea Dezvoltarea Autoreproducerea Celula este contituit din urmtoarele componente principale: Membrana celular (citolema) Citoplasm Nucleu

Diverse tipuri de celule n organismul uman

Membrana celular

Citolema = membran biologic elementar: reprezint ansambluiri de lipide i proteine, care formeaz entiti bidimensionale continue cu proprieti de permeabilitate selectiv. Interaciunea lipidelor cu proteinelor ntr-un mod anumit contribuie la formarea unei structuri specifice denumit membran biologic elementar sau biomembran . n raport de modul de aranjare a moleculelor de lipide i proteine, se deosebesc urmtoarele tipuri de Biomembrane: Extern (citolema) a celulei Organitelor celulare (endomembrane) Speciale (teaca mielinic a fibrelor nervoase, membranele ce formeaz discurile din segmentul extern al celulelor cu bastona din retina ochiului).

La mrimea de 100000 ori cu ajutorul microscopului electronic, citolema apare ca o formaiune trilamelar: 1 2 benzi externe electronodense (ntunecate) = 2,5 nm 2 1 band intern electrononedens (clar) = 3,0 nm Proteine 60% Lipide 40 %: fosfolipide / colesterol / glicolipide = 70 / 25 / 5.

Proteinele biomembranei externe (citolema)

Cantitatea i topografia proteinelor n cadrul stratului bilipidic al unei membrane biologice, determin specificul ei. Conform destinaiei funcionale, proteinele n cadrul membranei biologice de tip plasmalemal, pot fi clasificate n urmtoarele: Proteine structurale Proteine transportori Proteine enzime Proteine receptori

Proteine structurale
Proteine integrale (transmembranare): proteine mari, ce strbat bistratul lipidic al plasmalemei; Proteine periferice: extrinseci i intrinseci.

Glicocalix
Gliconema strat adiacent la suprafaa extern a plasmalemei celulei, constituit din oligozaharide (galactoz, manoz, fructoz, glucoz, galactozamin), grosimea variind de la 7,5 pn la 200 nm cu o sarcin electric, de obicei negativ. Gliconema joac un rol decisiv n controlul asupra traficului transplasmalemal al ionilor. Unele molecule ale glicocalixului funcioneaz ca receptori strict specifici (hormoni). Componena chimic, specificul aranjrii, topografia lanului oligozaharidic asigur specificul funcionrii fiecrui tip de celule, identitatea i individualitatea lor (Ex. Gruppa sanguin).

1. Glicocalix 2. Plasmalema

3. Citoplasma

Scheletul membranei celulare

Scheletul membranei celulare (zona cortical a plasmalemei) reprezint poriunea periferic a scheletului celular n lipsa organitelor celulare. Proteinele scheletului: Actin Spectrin Ankirin Proteinele formnd o reea, atribuie plasmalemei flexibilitate, rezisten, micri locale ale suprafeei. Citolema este format din urmtoarele componente: 1. Glicocalix 2. Biomembrana extern sau plasmalem 3. Scheletul membranei

Funciile membranei celulare

Ca funcii fundamentale ale citolemei sunt menionate: rolul de recepie, de barier i de transport ale diverselor substane din interiorul celulei i extracelular. Funcia de recepie este asigurat de ctre citoreceptori (molecule proteice speciale sau proteine cuplate cu glucidele (glicoproteine), parte component a citomembranei. Prin intermediul citoreceptorilor, celulele detecteaz semnalele venite din extern prin calea umoral sau nervoas, recunosc structurile proprii de cele strin, se recunosc reciproc, determin formaiunile extracelulare (fibronectin, laminin) de care se fixeaz. Citoreceptor canale ionice molecula-semnal = nchiderea sau deschiderea canalelor ionice (localizate la suprafaa citolemei cu participare la formarea sinapselor). Citoreceptori catalitici structur complex (poriunea supramembranar-receptor propriu-zis + citoplasmatic cu caracter de proteinkinaz). Insulina, hormoni de cretere etc. Receptori cuplai cu o protein transmembranar reglatoare proteina C asociat cu canalele ionice sau cu fermeni. Prin modificarea activitii AMP-ciclic din citoplasm de ctre proteina C la fixarea moleculei semnal la citoreceptor, constituie un factor decisiv n realizarea numeroaselor reacii chimice (mecanismul de aciune a majoritilor hormonilor i neuromediatorilor).

Citoreceptori

Categoriile citoreceptorilor: a) Pentru substane endogene (produse proprii a macroorganismului) b) Pentru substane exogene (ageni patogeni, toxinele lor, droguri etc).

Funcia de barier i de transport

Citolema funcioneaz ca o barier cu permeabilitate selectiv. Transportul transmembranic poate fi: pasiv: prin difuziune simpl (sensul gradientului de concentraie sau electrochimic n lipsa consumului de energie): molecule liposolubile, oxigenul, bioxidul de carbon etc. prin difuziune mediat (determinat de un grup de proteine transmembranare ionofori). Ei pot fi transportatori mobili (crui). Ex. Citolema unui hepatocit conine peste 800000 de astfel de proteine, fiecare din ele transportnd 180 mln de molecule de glucoz. Prezentai sub form de canale (permanent deschise sau canale cu poart, ultimele funcionnd la comand. Ex. O concentraie anumit a ionilor, fixarea unui ligand de citoreceptor etc. prin difuziune facilitat (proteine transmembranare cu aciune enzimatic). Efectul pong i ping prin osmoz

 activ: pot servi pompe ATP-aza de transport, ce regleaz concentraia ionilor de Na i K, prin trecerea forat a ionilor de Na n spaiul extracelular, iar a ionilor de K, intracelular. Astfel, are loc reglarea volumului celulei, homeostazia ei. Ex. Poriunea proximal a nefronului. Transportul cuplat cu gradiente ionice un crru al glucozei fixeaz i Na. Acesta tinde de a trece n celul conform gradientului propriu de concentraie, antrennd la fel i o molecul de glucoz. Ex. Absorbia glucozei la nivelul intestinului subire, absorbia aminoacizilor.

Transportul n mas prin vezicule

Transportul n mas prin vezicule poate fi realizat prin: Endocitoz Exocitoz Transcitoz

Transportul n mas prin endocitoz

Endocitoza forma de captare din mediul nconjurtor a substanelor necesare. Poate fi de 2 tipuri: Fagocitoza internalizarea structurilor de divers natur. Ex. Bacterii, virusuri, macromolecule, celule fragmentate, alterate etc. Sistemul macrofagal: macro- i microfage. Pinocitoza ncorporarea n mas a macromoleculelor de comun cu lichidul celular. Procesul de endocitoza necesit consumarea energiei. Primar are loc fixarea structurii internalizate direct de citoreceptori sau prin intermediul opsoninelor (fam. Ig), apoi are loc activarea citoreceptorilor, care interacioneaz cu actina la nivelul citoscheletului citolemei, cu emiterea faldurilor sau pseudopodelor de ctre celul, nconjurnd astfel materialul menit internalizrii, cu formarea ulterioar a unei vezicule prin fuzionarea pseudopodelor. Vezicula format intracelular endosom. Endocitoza strict selectiv este mediat de receptori concentrai la suprafaa plasmalemei (domenii). Clatrina situat pe versantul intern al domenilor fixeaz poziia receptorilor. Ca urmare a etapelor de endocitoz, are loc formarea complexelor molecule-receptori sau receptozomi sau vezicule acoperite de clatrin. Graie capacitii receptorilor de a fixa selectiv substanele, concentraia lor n interiorul veziculelor este mult mai mare de ct extracelular. Ex. de transport: hormonii steroizi, Ig, factorii de cretere, lipoproteine de densitate mic. Patologie: hipercolesterinemie familial dereglarea transportului de colesterol, urmat de mrirea lui n patul vascular i dezvoltarea aterosclerozei.

Endocitoza

1. Endocitoza mediat de receptori 2. Pinocitoz 3. Fagocitoz

Exocitoza
Exocitoza este procesul opus endocitozei. Endosomii (coninut al produselor proprii sau coninut captat anterior din spaiul extracelular) sunt vehiculai spre membrana bazal i, conflund cu ea, elibereaz coninutul.

Transcitoza
Transcitoza ntrunete endocitoza i exocitoza. Mecanismul ei este acela ca i la procesele nominalizate. Endosomii formai ntr-o regiune a celulei, vehiculeaz spre partea opus a ei, conflueaz cu citoplasma i elimin coninutul su. Transcitoza este un caracter specific pentru celulele endoteliale ale reelei capilare vasculare i limfatice, unde are loc schimbul substanelor dintre snge i esuturi, la nivelul enterocitelor intestinului subire.

Proteine fuzogene
Proteinele ce particip la modificarea plasmalemei n cadrul procesului de endocitoz, exocitoz i transcitoz cu formarea veziculelor fac parte din proteine integrale proteine fuzogene (de confluire).

Relaia celul-celul i celul-substana extracelular

Citolema particip activ n fenomenele de recunoatere i adezivitate intercelular. Adezivitatea intercelular este asigurat de proteine speciale, generic numite molecule de adezivitate, care actual se mpart n 4 clase de substane: Integrine (fixarea celulelor de matricea extracelular) Caderine Imunoglobuline interfixarea reciproc a celulelor Selectine

Molecule de adezivitate

Integrine proteine membranare cu destinaie de receptori, constitite din 2 subuniti: A i B. Actual sunt relevate 20 de clase de integrine, fiecare avnd afinitate doar pentru anumite molecule din componena matricei extracelulare. Totodat, domeniul citoplasmatic al fiecrei molecule de integrin este legat cu elemenetele citoscheletului (filamente de actin). Caderine molecule de glicoproteine cu 3 domenii: supramembranar, intramembranar i submembranar, unde are loc cuplarea cu microfilamente de actin. Activarea lor are loc doar sub influiena inolor de Ca. n lipsa lor, are loc degradarea caderinelor. Ele contribuie esenial la aderarea reciproc a celulelor fenotipice ntr-un esut, esenial influennd procesul de diferenciere, lipsa aderrii cu alte tipuri de celule. Imunoglobuline molecule mari, cu domenii extracelulare bine dezvoltate. Selectine glicoproteine membranare de 3 tipuri (L, P, E), ce asigur adezivitatea celular tranzitorie a celulelor sngelui de cele endoteliale. L-selectinele membrana citoplasmatic a leucocitelor; P-selectine caracteristice numai trombocitelor i megacariocitelor; E-selectinele pe suprafaa membranar a endoteliocitelor activate.

Jonciuni intercelulare
Jonciunile intercelulare

Simple

Complexe

Digitiforme
Liniar
Denticulare

Zonula ocludenta
Zonula aderens

Desmozomi
Semidesmozomi GAP sau nexus

Jonciunile simple (de adezivitate)

Se formeaz doar nre celulele identice, care se recunosc reciproc prin intermediul proteinelor receptori. Structura apare ca rezultat al apropierii a 2 membrane citoplasmatice la o distan de 20 -30 nm, cu interaciune la nivelul glicocalixului. Printre spaiul format circul fluidul intercelular. Se disting 3 tipuri de jonciuni simple: Liniare Digitiforme Denticulare

Jonciunile speciale (complexe)

Conform structurii i destinaiei, se clasific n urmtoarele tipuri: Jonciuni strnse (zonula ocludens, zonula aderens) Desmozomi (semidesmozomi) Jonciuni comunicante (nexus, sinapse)

Jonciuni strnse

Jonciunile strnse apar ca rezultat al fixrii membranei citoplasmatice ntre ele, cu obliterarea spaiului intercelular. Rolul principal n organizarea acestor jonciuni li se atribuie proteinelor joncionale (variant a celor integrale) din plasmalem, cu formarea pe versantul extern a unei suduri n fermuar. Din partea intern a membranei, proteinele date sunt sprijinite de microfilamente ale citoscheletului. Totodat, jonciunile strnse se deosebesc prin numrul i gradul de dezvoltare a dispozitivelor de sudur. Ex. Tubii proximali ai nefronului 1-2 iruri de suduri Epiteliul ureterelor, v. urinare 6 iruri de suduri Epiteliul intestinului subire o sudur poligonal nedeformabil.

Desmozomi

Desmozomii sau jonciuni de ancorare, reprezint o structur complex format dintr-un disc situat intercelular (proteine-desmogleine), iar din partea citoplasmei, fiecrei celule cointeresate, se dispune cte o plac dens (proteine-desmoplachine) ancorate de microfilamentele citoscheletului celulei.
1. Spaiul intercelular 2. Disc proteic 3. Microfilamente ale citoscheletului 4. Proteine joncionale

Semidesmozomi

Semidesmozomii sau hemidesmozomii reprezint o variant a desmozomilor, fiind rspndii n locurile de fixare a celulelor epiteliale de membrana bazal.

Jonciuni comunicante

Jonciunile comunicante sau intercomunicante (nexus-GAP) reprezint n microscopia electronic apropierea plasmalemelor celulelor la o distan de 2 -3 nm, spaiul intercelular fiind neobliterat. n citoleme apar dispozitive complexe conexoni, ce reprezint nite prisme hexagonale constituite din 6 uniti proteice (proteine integrale) dispuse n inel, ce formeaz un canal, prin intermediul cruia celulele comunic ntre ele. Nexurile apar i dispar foarte repede (cteva secunde) i sunt multe, n particular n celule n curs de diferenciere, celulele muchiului cardiac, celulele musculare netede, celulele nervoase, endocrine. Complexele joncionale variante mai multe de jonciuni (GAP, strnse, desmozomi), ntlnite ntre celulele epiteliale din intestin, tubii nefronilor rinichilor, celulele secretoare.

Simplastul preparat histologic

Coloraie: hematoxilin feric

Indicai: fibre musculare n seciune longitudinal nucleele fibrei musculare discul izotrop

discul anizotrop
fibre musculare n seciune transversal miofibrile