REACIA IMUN

Organismul

uman este expus n permanen invaziei diferiilor factori ce pot surveni din mediul extern, dar el dispune de cteva linii de aprare mpotriva lor. Prima linie de aprare este constituit de ctre barierele naturale, anatomice, fiind reprezentat de mucoasa tracturilor: respirator, gastrointestinal, genito-urinar. Aceste suprafee sunt nu numai bariere fizice dar i chimice. Glandele sebacee ale pielii secret acizi grai i acid lactic cu efect antibacterian i antifungic. Perspiraia, lacrimile i saliva conin enzime (lizozim) care atac peretele bacteriilor gram-negative. Totodat, drept rezultat al acestor secreii glandulare, suprafaa pielii este acid (pH = 3-5) devenind neospitalier pentru majoritatea bacteriilor.

Dac o substan chimic nociv, un corp strin sau o bacterie, penetreaz aceast linie de aprare, atunci intervin mecanismele mecanice de ndeprtare. De la nivelul pielii ndeprtarea se face prin descuamare, din aparatul respirator prin tuse, din cel gastrointestinal prin vom iar din tractul urinar eliminarea se face prin urin. Toate mecanismele de aprare enumerate sunt nespecifice, i realizeaz protecia organismul gazd mpotriva oricrui tip de agresiune. Odat compromis aceast prim linie, rspunsul inflamator - inflamaia, apare imediat ca o a doua barier de aprare. Rspunsul inflamator ncepe rapid, n cteva secunde din momentul invaziei i este tot un rspuns nespecific. Cea de-a treia i ultima linie de aprare este reprezentat de sistemul imun. Acesta se instaleaz lent, este specific i confer organismului o protecie permanent sau de lung durat .

 Imunologia,

ca tiin biologic, s-a constituit trziu, abia n secolul nostru, dar dei este considerat o tiin nou, datele acumulate n acest interval relativ scurt de timp, au dus practic la o dezvoltare exploziv, ajungndu-se astazi la o implicare aproape n toate ramurile medicinii, de la alergologie i reumatologie pn la neurologie, cardiologie i chirurgie. Iniiat ca o tiin a mijloacelor specifice de aprare a organismului mpotriva infeciilor, imunologia se dezvolt ulterior, lrgindu-i n ritm alert sfera de interes. Iniial, n termenul de imunitate se includea doar ansamblul mecanismelor, motenite sau dobndite, care concur la apararea organismului contra infeciilor.

Capacitatea organismului uman de a rezista aproape tuturor microorganismelor sau toxinelor care au tendina s-i distrug esuturile i organele, se numete imunitate. O mare parte din imunitate este determinat de un sistem imun special, care formeaz anticorpi i limfocite activate care, la rndul lor, atac i distrug microorganismele specifice sau toxine. Acest tip de imunitate se numete imunitate ctigat. Totui, o parte adiional a imunitii rezult, mai curnd, din procese generale, dect din procesele ndreptate mpotriva unor ageni patogeni specifici. Aceasta se numete imunitate nnscut i include urmtoarele: 1.Fagocitarea de ctre leucocite i celulele sistemului de macrofage tisulare a bacteriilor i a altor ageni patogeni (aa cum s-a descris deja n capitolul precedent). 2.Distrugerea microorganismelor ptrunse n stomac, de ctre secreiile acide ale stomacului i de ctre enzimele digestive.

 3.Rolul

de barier antiinfecioas al pielii. 4.Prezena n snge a anumitor compui chimici, care se ataeaz de microorganismele strine sau toxine, care sunt distruse. Aceast imunitate nnscut d organismului uman rezistena fa de unele infecii virale paralitice ale animalelor, holera porcin, pesta bovin, i jigodia - boal viral care omoar un mare numr din cinii afectai. Pe de alt parte, animalele inferioare sunt rezistente sau chiar complet imune la cele mai multe din bolile umane, cum ar fi poliomielita, oreionul, holera, pojarul i sifilisul, care pentru om sunt grave sau chiar letale.

Pe lng imunitatea nnscut, organismul uman are capacitatea de a dezvolta mecanisme de aprare puternice mpotriva unor bacterii nalt patogene, virusuri, toxine i chiar esuturi strine de specie. Aceasta este imunitatea ctigat. Adesea, imunitatea ctigat poate s acorde o protecie foarte mare. De exemplu, se poate obine imunitate fa de toxina paralizant botulinic sau fa de toxina tetanizant a tetanosului, chiar i atunci cnd acestea ating nivele de 100.000 de ori nivelul la care ele ar fi letale n absena acestei imuniti. Acesta este i motivul pentru care vaccinarea este extrem de important pentru protecia organismului uman mpotriva bolilor i toxinelor. n termenul de imunitate au fost inglobate fenomene fiziologice i patologice, n aparen foarte disparate, dar care au n comun caracterul de "rspuns imun" la contactul cu antigenul. Datorit modalitilor foarte variate de rspuns pe care le manifest organismele la prezena unui antigen a aparut o diversificare corespunztoare a criteriilor de clasificare a fenomenelor imune.

Exist n prezent dou criterii generale de clasificare: 1. dupa originea reactivitii imune, se deosebesc: - imunitatea natural (sau motenit) - imunitatea dobndit; Imunitatea natural - sau motenit. Nu este practic produs de un rspuns imun. Un tip de imunitate natural, care este prezent nc de la natere, este cel specio-dependent. Omul are o imunitate natural fa de unii ageni infectioi care produc mbolnviri la alte specii. De exemplu omul nu se mbolnvete de jigodie canin (boala Care), sau aa cum observase Jenner, omul nu face vaccina bovinelor. Imunitatea dobndit - este considerat ca fiind suma fenomenelor care apar dup o stimulare antigenic cunoscut. -Dup modul de realizare a imunittii dobndite se deosebesc dou tipuri: a. imunitate dobndit natural (postinfecioas) - se instaleaz ca rezultat al trecerii organismului prin boal (forma clinic sau infecie inaparent clinic - febra tifoid, difterie, scarlatin, rujeol etc);

b. imunitate dobndit artificial (postvaccinal) - se instaleaz dup

supunerea organismului la vaccinarea selectiv, cu un anumit tip de antigen. -Dup mecanismul de instalare al imunitii dobndite se deosebesc trei tipuri: a. imunitatea dobndit activ - rezultatul unei stimulri antigenice directe realizat: n mod natural - infecie sau n mod artificial - vaccin, constituie baza profilaxiei bolilor infecioase. Se realizeaz prin vaccinuri cu virus viu atenuat (antipoliomielitic), prin vaccinuri cu virus omort (antipertusis) sau prin vaccinuri cu toxine detoxifiate (antidifteric, antitetanic). b. imunitatea dobndit pasiv - se obine prin transferul de efectori activi (anticorpi sau celule sensibilizate) de la un organism imunizat anterior n mod activ. Transferul de anticorpi de la mam la ft (transplacentar la om) sau de la mam la nou-nscut (prin colostru la animale) este un exemplu de imunitate dobandit pasiv. Este un tip de imunitate de scurt durat i este strict legat de timpul de supravieuire n organismul receptor a moleculelor de anticorpi introdui. c. imunitate adoptiv - este imunitatea dobandit artificial, prin transfer de celule imunocompetente (suspensii celulare din splin, mduv osoas, ganglioni limfatici) provenite de la un organism imunizat activ n prealabil. Acest tip de imunitate reprezint, n prezent, doar un factor experimental, dar de o mare importan teoretic i practic.

se deosebesc:

dupa tipul de efector imunologic,

a.

intermediul anticorpilor) b. Imunitatea celular (realizata prin sistemul limfocitelor T).

Imunitatea umoral (realizata prin

Fig. 11. Celulele implicate n rspunsul imun (Gilbert C., 2005)

Substratul morfologic al imunitii este reprezentat de sistemul limfoid al crui principal component este limfocitul. Acesta i are originea la nivelul ficatului i al splinei n viaa intrauterin i la nivelul mduvei osoase la copil i adult dintr-o celul precursoare, celula stem. Limfocitele astfel formate nu sunt capabile de implementarea rspunsului imun i pentru a deveni imunocompetente ele trebuie s migreze prin intermediul vaselor sanguine sau a celor limfatice la diferite esuturi limfoide ale corpului. Trecnd prin aceste esuturi se matureaz i capt caractere imunocompetente. La o analiz mai riguroas ns rezult c i din acest punct de vedere nu este posibil o delimitare net: aa cum imunitatea dobndit se dezvolt numai pe baza unui fond natural (nnscut) de elemente determinate, tot astfel imunitatea umoral are o origine net celular ( anticorpii).

Populaia celular care compune sistemul imunitar este reprezentat n principal de dou mari categorii: -sistemul limfocitar -sistemul reticulo-endotelial, denumit mai corect sistemul fagocitar mononuclear sau macrofagic, care cuprinde macrofage fixe, de tipul celulelor reticulare i macrofage mobile (din monocitele circulante). Pe plan funcional, activitatea sistemului imunitar se caracterizeaz n primul rnd printr-o extraordinar specificitate. O alt particularitate funcional este memoria imunologic prin care se conserv "amintirea" contactului cu antigenul, orice contact ulterior genernd un rspuns mult amplificat. n cadrul celor dou mari clase de celule limfoide (B i T) exist o mare diversitate de celule; n final se ajunge la constatarea c unei anumite celule imunitare, elementul de baz fiind celular, i corespunde un anume antigen i practic numai acesta. Fiecare celul este deci extrem de specializat, dar de o competen foarte limitat.

 DEZVOLTAREA

IMUNITAR

SISTEMULUI

Plecnd de la celulele primare, de tip "stem" cele dou linii limfocitare, T i B, se separ ca urmare a instruciei suferite n organele limfoide primare, timusul i respectiv bursa Fabricius (Hieronymus Fabricius ab Aquapendente 1537-1619). Bursa este un organ bine definit la psri, situat n regiunea cloacei, dar corespondentul acestui organ la mamifere este greu de identificat strict anatomic, cu toate ca funcional rolul bursei pare a fi deinut de anumite formaiuni limfoide ale tubului digestiv. Dup o perioad de instruire, n timus sau n burs, limfocitele colonizeaz o serie de organe i n special mduva oaselor, splina i ganglionii limfatici pentru ca apoi limfocitele din aceste "organe secundare" s se delimiteze ireversibil n una din seriile liniei limfocitare B sau T.

Ambele linii limfocitare, B i T, dein proprieti definitorii ale reactivitii imunitare i n primul rnd - specificitatea reaciei cu un anumit antigen. Celulele stimulate de antigen se multiplic formnd o clon de celule identice, a cror activitate tinde s elimine antigenul respectiv din organism. Sub aspect efector, stimularea antigenic a limfocitelor T determin producerea unor substane numite limfokine, iar stimularea limfocitelor B duce, printr-un proces de diviziune, la formarea unei clone de celule, care n final, mbrac infiarea plasmocitelor i care secret anticorpi (imunoglobuline). Proliferarea limfocitelor T n timus este extrem de vie (una din cele mai rapide din organism), aceste celule divizndu-se de trei ori n timpul unei zile. ntr-un anumit moment de dezvoltare, limfocitele T se strecoar printre celulele epiteliale i prsesc timusul pe calea capilarelor sanguine. Ele se vor acumula apoi n anumite zone ale ganglionilor limfatici i ale splinei, denumite zone timo-dependente, de unde reintr periodic n circulatia general pe calea vaselor limfatice i a canalului toracic. O bun parte din masa limfocitelor T se afl n stare circulant, putnd veni cu uurin n contact cu antigene din diferite regiuni ale corpului.

Acelai precursor celular primitiv va da natere limfocitelor B, pentru formarea crora este necesar o instrucie primar n burs. Dup instrucia bursal celulele sistemului limfocitar B dobndesc proprietatea de a secreta imunoglobuline. ntr-un stadiu ulterior, o celul sau un grup de celule B va ntlni antigenul corespunztor, va fi stimulat de ctre acesta i va prolifera, genernd n final o clon de plasmocite identice, cu o mare capacitate de a fabrica imunoglobuline. n cursul transformrii limfocitului B n plasmocit, celula ia infiarea aa-numitului limfoblast. ntreaga clon produce un singur tip de anticorp, fiecare plasmocit secretnd circa 2 000 de molecule anticorp pe secund, durata vieii unui plasmocit fiind de cteva zile. O parte din celulele B pstreaz ns trsturile limfocitare, devin aa-numitele celule cu memorie imunologic, au o viata ndelungat i asigur reaciile imune de mare amploare ca rspuns la un nou contact cu antigenul. Imediat dup instrucia bursal, limfocitele, devenite acum limfocite B, sintetizeaz imunoglobuline. Cronologic apar mai nti imunoglobulinele M (IgM) dup care survine virarea funcional spre celelalte clase.

 Dei

proliferarea celulelor imunoformatoare indus de contactul cu antigenul este exploziv, ea este la un moment dat reprimat n primul rnd graie unui mecanism de feed-back prin care, la un anumit nivel, masa de anticorpi inhib proliferarea clonei celulare care o produce.

ANTIGENELE

Este evident c organismul are un mecanism de recunoatere a microorganismelor strine sau toxinelor, deoarece imunitatea ctigat nu apare dect dup invazia acestora. Fiecare toxin sau fiecare tip de organism conine aproape ntotdeauna unul sau mai muli compui chimici specifici n structura lor, care sunt diferii de toi ceilali compui. n general, acetia sunt proteine sau polizaharide mari i sunt cei care iniiaz imunitatea ctigat. Aceste substane se numesc antigene. n general, orice substan strin care declaneaz n organism o reacie imun este denumit antigen(Ag). Substane cu caracter antigenic pot lua natere direct n organism prin apariia unor mutaii somatice, cum sunt cele de tip oncogen.

Antigenele au dou proprieti generale: declaneaz rspunsul imun i reacioneaz specific cu produsele rezultate n urma elicitarii acestuia (anticorpi-Ac sau receptori celulari). Declanarea rspunsului imun presupune n mod obligatoriu trei aspecte: a) - Ag selecteaz dintr-un repertoriu preexistent de limfocite, doar pe cele ce sunt Ag-specifice, respectiv exprim pe suprafaa lor receptori ce pot recunoate i pot stabili legturi cu Ag inductor; acest proces poart denumirea de selecie clonal b) - ca urmare a recunoaterii antigenice, limfocitele selectate sunt activate metabolic; c) - secundar stimulrii activitii metabolice limfocitare, acestea prolifereaz, prin creterea impresionant a numrului de celule realizndu-se expansiunea clonal. Capacitatea antigenelor de a declana rspunsul imun, care implic selecia clonal, activarea clonei selectate i expansiunea acesteia, se numete imunogenitate.

n al doilea rnd, Ag reacioneaz strict cu produsele rezultate ca urmare a elicitrii rspunsului imun, fie c acestea sunt molecule solubile de tipul anticorpilor, fie c sunt molecule ataate membranelor celulare cu funcie de receptori limfocitari T sau B pentru Ag, aceast proprietate este desemnat cu termenul de specificitate. Este cunoscut ns faptul c nu toate antigenele existente n natur se caracterizeaz prin cele dou proprieti generale - imunogenitatea i specificitatea. n funcie de faptul c diversele antigene, posed ambele proprieti generale sau numai una singur, acestea pot fi mprite n dou clase: a) - imunogene sau Ag complete ce prezint dubl capacitate, aceea de a declana un rspuns imun i de a reaciona specific cu produsele rezultate (Ac sau receptorul de membran);

 b)

- haptene sau Ag incomplete - sunt Ag cu greutate molecular mic i foarte mic i care sunt capabile s reacioneze cu imunoglobulinele specifice, dar nu pot iniia un rspuns imun umoral tradus prin producie de Ac, dect dac sunt cuplate cu o macromolecul purttoare (carrier). Un exemplu de hapten l constituie dinitrofenolul (DNP) care reacioneaz specific cu Ac anti-DNP, dar nu poate induce formarea lor, dect dac DNP este cuplat cu un purttor imunogen, cum ar fi serumalbumina. Incapacitatea haptenelor de a elicita ele singure rspunsuri imune se explic prin faptul c n cazul marii majoriti a Ag , (cazul haptenelor) , producia de Ac necesit o cooperare celular ce se poate realiza numai dac Ag prezint un anumit grad de complexitate.

 Este

bine cunoscut n biologie c una dintre cele mai importante caractere ale unei substane antigenice este aceea de a fi strin organismului n care ptrunde. Aceast "origine diferit" a substanei este o condiie necesar dar nu suficient. Exista un numr impresionant de exemple n care substane "strine" ca origine, dar nrudite ca structur chimic cu substanele proprii organismului, au caliti antigenice mult diminuate. Insulina - chiar dac provine de la unele animale mult ndeprtate taxonomic (porc, cal etc.) are o structur chimica foarte apropiat de cea a insulinei umane. Deci condiia esenial ca o substan s aibe caliti antigenice este aceea de a fi diferit din punct de vedere al structurii chimice fa de substanele similare ale organismului receptor.

 Este

suficient ca o substan s sufere modificri chimice structurale minime ca s devin antigen, chiar fa de organismul care a sintetizat-o. Un alt caracter deosebit de important ce confer calitate antigenic unei substane este gradul de complexitate structural i talia molecular. Din acest punct de vedere proteinele, substane cu talie mare i complexitate structural deosebit, reprezint cel mai elocvent exemplu. Totui este recunoscut faptul c anumite substane chimice simple, cu greutate molecular mic, introduse pe cale parenteral sau chiar aplicate direct pe tegument, prezint un caracter antigenic ridicat. Aceste substane au o capacitate crescut de a se combina cu grupri reactive ale proteinelor tisulare din organismul n care sunt introduse i astfel devin substane antigenice.

n sfrit o alt condiie de antigenitate o reprezint durata de remanen a substanei respective n organismul n care a fost inoculat. Antigenitatea unei substane este afectat prin denaturare sau dac este rapid eliminat din organism. Studiile n care s-au utilizat antigene sintetice formate dintr-o protein i o grupare chimic activ au artat ca nu se poate obine un ser imun dect prin administrarea antigenului complet; inocularea singur a grupri chimice active, fr protein suport, nu conduce la formarea de anticorpi. Dac ns serul imun este pus n contact cu gruparea chimic activ, atunci adugarea ulterioar a antigenului complet nu mai duce la formarea precipitatului antigenanticorp. Procesul este cunoscut sub numele de "reacie de inhibiie" i are la baz capacitatea fragmentului activ de a se cupla specific cu anticorpul, blocnduse potenialul de reacie cu antigenul complet. Asemenea fragmente, chimic active i specifice imunologic, care nu pot induce singure formarea de anticorpi, dar care cuplat cu proteina determin specificitatea imunologic a acesteia, au fost denumite haptene, antigene pariale sau antigene incomplete.

Numeroase substane chimice simple, ntre care i unele medicamente, se comport ca haptene, rolul lor n producerea unor afeciuni alergice fiind bine stabilit. O clasificare a haptenelor mparte aceste substane n dou categorii: 1. Haptene precipitante - sunt haptene complete (se combin cu anticorpul omolog precipitant, dar "in vivo" nu stimuleaz producerea de anticorpi). 2. Haptene inhibitorii, neprecipitante - sunt haptene simple ce nu pot stimula producerea de anticorpi, dar pot reaciona cu anticorpii omologi, pe care i blocheaz fr a forma precipitate. Anticorpii blocai de haptenele inhibitorii nu mai pot reaciona cu antigenul complet ce ia generat i nici cu haptena precipitant a acestuia. Din punct de vedere al stucturii lor chimice antigenele au fost clasificate n dou mari tipuri:

 Antigene complete: proteine nucleoproteine lipopolizaharide polizaharide Antigene incomplete: 1. Haptene complete polipeptide polizaharide lipide acizi nucleici 2. Haptene simple dizaharide compui organici simpli

ANTICORPII

DEFINIIE, ORIGINE Anticorpii (Ac) sau imunoglobulinele (Ig) sunt glicoproteine ce sunt capabile s se combine specific cu Ag a crei recunoatere de ctre sistemul imun a condus la sinteza acestora, rezultatul reaciei specifice Ac-Ag fiind declanarea funciilor efectorii imune (activarea complementului, citotoxicitatea etc.) ce au drept scop final indeprtarea Ag declanant .

 Ac

sunt sintetizai i secretai de ctre limfocitele B dup ce acestea au fost stimulate antigenic i s-au transformat n plasmocite, conversia limfocit B-plasmocit necesitnd de altfel i participarea unui ntreg set de factori nespecifici derivai din cooperarea celular . Dei sinteza unui anumit tip de Ac presupune, n marea majoritate a cazurilor, un contact prealabil cu Ag declanant, acesta ns nu este demonstrabil n totalitatea cazurilor. Un exemplu elocvent, n acest sens, l constituie anticorpii naturali care pot fi detectai chiar din primele zile de via, n afara oricrei stimulri antigenice aparente. n aceast categorie pot fi inclui Ac grupelor sanguine ABO.

 STRUCTURA ANTICORPILOR Imunoglobulinele sau anticorpii

sunt glicoproteine ce sunt sintetizate de ctre plasmocite, acestea provenind din limfocitele B transformate blastic. Imunoglobulinele nou sintetizate au aceeai specificitate antigenic ca cea a Ig exprimate la suprafaa limfocitelor B (lgM sau mai rar IgD). Molecula de baz a Ig este constituit din patru lanuri - dou lanuri grele (H - heavy) cu o greutate molecular cuprins ntre 50 i 70 kDa i dou lanuri uoare (L - light) de 22 kDa, ele fiind solidarizate prin puni disulfurice. Studiile de clivare proteolitic cu papain au artat ca imunoglobulinele sunt constituite din trei fragmente diferite structural, ele avnd particulritile funcionale distincte:

dou fragmente identice Fab (ab - antigen binding) care sunt constituite din extremitatea NH2 terminal a lanurilor grele (H) i cte un lan uor (L), ele fiind solidarizate prin puni disulfurice: funcia fragmentelor Fab este aceea de a recunoate i a angaja legturi cu Ag, aceasta fiind realizat prin intermediul situsului combinativ antigenic situat la extremitatea N-terminal a ambelor lanuri (H i L); - un fragment Fc (c = cristalizabil) care este constituit n exclusivitate din jumtatea COOH terminal a lanurilor grele; acest fragment este purttorul specificitilor antigenice caracteristice fiecrei clase i subclase imunoglobulinice, ct i a celei mai mari pri a situsurilor funcionale ca situsul de activare a complementului, situsul implicat n transportul transplacentar al Ig i altele. Studiile de microscopie electronic i de difracie n raze X au aratat ca molecula de baza a Ig are forma literei Y, fragmentul Fc constituind axul central iar fragmentele Fab ramurile terminale ce prezint la extremitile NH2-terminal cte un situs de recunoatere i combinare cu Ag.

Fig. 12. Structura moleculei de imunoglobulina (Jatinderpal Kalsi et al, 2006)

ANTICORPOGENEZA
Varietatea anticorpilor, pe care un organism este capabil s-i sintetizeze, este probabil de ordinul sutelor de mii, sau chiar a milioanelor. Cu toate aceasta diversitate care corespunde varietii determinantelor antigenice fa de care se declaneaz raspunsul imun, moleculele anticorpilor nu difer structural foarte mult ntre ele, fiind intotdeauna compuse din dou molecule identice de lanuri, denumite uoare i grele. Lanurile uoare (L - light) i grele (H - heavy) sunt asamblate n cadrul moleculei de imunoglobulin prin legturi disulfidice (-S-S-) i necovalente. Toate imunoglobulinele au aceast structur tetrapeptidic i ntotdeauna lanurile perechi H i respectiv L sunt identice.

Plasmocitul este celula specializat pentru sinteza i secreia de anticorpi circulani. Aceste celule sunt rspndite n tot esutul limfoid: ganglioni limfatici, splin, plcile Payer, mduva osoas i alte organe limfoide, precum i la baza vilozitilor mucoasei intestinale, n jurul capilarelor sanguine, n epiploon i esutul conjunctiv. Plasmocitul prezint toate caracterele morfologice ale unei celule specializat pentru sintez i secreie de proteine. Peste 90 % din proteinele sintetizate de plasmocit sunt anticorpi. Organitul celular al acestei sinteze este reticulul endoplasmatic, extrem de bine reprezentat n plasmocit, fiind un sistem labirintic de canale fine, ocupnd o bun parte din celul i oblignd nucleul s ia o poziie excentric. Acest reticul endoplasmatic rugos prezint de-a lungul pereilor nite granule dense, ribozomii, formai din ARN care dirijeaz direct activitatea de sintez enzimatic. Cu ajutorul ultracentrifugrii s-a putut stabilii c poliribozomii care sintetizeaz lanurile H i L sunt diferii.

Plasmocitul i are originea n limfocitul B, care n contact cu antigenul ce i corespunde, se activeaz, suferind aa-numita transformare blastic i se divide de mai multe ori, realiznd o clon de plasmoblati care se maturizeaz n plasmocite identice. Etapele blastice se caracterizeaz printr-o accentuat sintez de ADN i ARN care se acumuleaz n citoplasma celulelor angajate pe linia unor sinteze active de proteine. Evalund sintezele de ADN s-a constatat c diviziunea plasmoblatilor are loc la interval de aproximativ 10 ore, ceea ce inseamn o rat de multiplicare extrem de vie. Ajuns n faza de plasmocit, celula nu se mai divide, ntreaga energie disponibil fiind consumat pentru sinteza de imunoglobuline, care se acumuleaz n cantiti mari n celul, necunoscndu-se modul de ieire a anticorpilor din celul. Secreia imunoglobulinelor plasmocitare, se pare c are loc prin intermediul aparatului Golgi, unde moleculele de imunoglobuline ajung prin mici vezicule care burjoneaza la suprafaa sacilor ergastoplasmici. Din aceti saci, prin tasare i fragmentare, se formeaz mici sferule, nconjurate de o fin membran: granule de secreie.

Granulele de secretie, eliberate n citoplasm, ajung la nivelul membranei periferice, unde membrana lor fuzioneaz cu cea celular i are loc o deschidere care permite vrsarea coninutului imunoglobulinic al granulelor n mediul extracelular. Imunoglobulinele (Ig) sunt globuline serice care migreaz electroforetic cu fraciunile , sau, mai des . La om se cunosc cinci clase de imunoglobuline: IgG, IgA, IgM, IgD, IgE. Cele cinci clase de Ig se deosebesc n primul rnd printr-o secven diferit a lanului H, simbolizare cu literele greceti echivalente celor care desemneaz clasa: lan pentru IgG, lan pentru IgM, lan pentru IgA, lan pentru IgD i lan pentru IgE. Exist dou tipuri diferite de lanuri L, tipul i tipul ; ntr-o molecul de Ig nu exist niciodat ambele tipuri de lanuri. Structura lanurilor H definete clasa de imunoglobuline: G, A, M, D, E iar deosebirile de secven i de dimensiuni ntre lanurile H definesc subclasele de imunoglobuline: de exemplu au fost identificate patru clase de IgG, notate IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 cu lanurile grele 1, 2, 3, 4.

Fig. 13. Mecanismul de sintez al anticorpilor (Morell, 2004)

1. Imunoglobulina G (IgG) - reprezint 70 - 80% din Ig serice la om. Are o greutate molecular de 140000 - 150000 daltoni. Lanurile L i H sunt unite printr-o singur legatur disulfidic, dar numrul de legturi n cele dou lanuri H variaz n funcie de subclasa respectiv. Anticorpii de tip IgG apar mai ales n timpul rspunsului imun secundar. Ei pot exercita o aciune de inhibare asupra sintezei anticorpilor de tip IgM dezvoltai n cursul rspunsului primar, printr-un mecanism de competiie pentru antigen. IgG n general i IgG1 n special reprezint Ac cei mai eficace n aprarea antibacterian, ei intervenind n aglutinarea i liza germenilor, au funcie de opsonine, neutralizeaz exotoxinele bacteriene i altele. Anumite subclase de IgG au funcie imunomodulatorie, ele avnd efecte inhibitorii asupra rspunsurilor imune umorale n general i mai ales asupra sintezei de IgE, aspect ce este utilizat n practic desensibilizrilor. O funcie esenial a IgG este aceea de eliminare a antigenelor: IgG i mai ales autoanticorpii de tip IgG particip activ la meninerea fenomenului de toleran i la eliminarea autoantigenelor alterate la a cror distrucie de ctre celulele fagocitare i prin declanarea complementului, IgG au o contribuie esenial.

2. Imunoglobulina A (IgA) - se gsete n serul uman sub dou forme: monomer i dimer. Sunt bine caracterizate pn n prezent dou subclase de IgA: IgA1, reprezentnd 93% din ntreaga cantitate de IgA seric i IgA2 n care lanurile uoare sunt dimerizate prin legturi disulfidice i unite de lanurile grele prin puni de hidrogen. Spre deosebire de restul Ig care sunt prezente obinuit numai n ser, IgA este prezent i n diversele secreii, de aceea se disting dou forme de IgA: IgA serice - prezint o structur clasic ca a oricrei Ig, i numai o minoritate (sub 10%) exist sub form polimeric constituit din asamblarea a dou, trei sau chiar patru molecule de baz, reunite ntre ele printr-o pies J analog celei prezente la IgM. Aceste IgA monomerice au o greutate molecular de 174.000 daltoni. Producia zilnicii de IgA este n jur de 25 mg/kilocorp, iar durata sa de via este n jur de 10-12 zile. IgA nu traverseaz placenta i, spre deosebire de alte clase Ig, nu activeaz complementul pe calea direct. Marea majoritate a IgA serice (90%) sunt de tip IgA1.

IgA secretorii (IgAs) - cea mai mare parte a IgAs sunt de tip IgA2 i

ele sunt prezente din abunden n secreiile digestive, saliva, secreiile lacrimale, mucusul bronic ct i n colostru i laptele matern. IgAs se prezint de regul sub form de dimeri reunii printr-o pies de jonciune (J) i o pies de transfer (component secretor) de 60.000 daltoni ce se ataeaz lanurilor grele . Rolul piesei de transfer este acela de a conferi moleculei de IgAs rezisten fa de aciunea enzimelor proteolitice existente n majoritatea secreiilor, mai ales cele digestive. Mai mult de jumtate din IgAs sunt produse de ctre plasmocitele care populeaz formaiunile limfoide asociate mucoaselor tot ele sintetiznd i piesa de jonciune ce intr n constituia IgA. IgAs din colostru i laptele matern sunt sintetizate de ctre plasmocitele care au migrat de la nivelul tractului digestiv matern ctre glanda mamar, proces ce se intensific ctre finele sarcinii i n cursuI alptatului. O mic fraciune din aceste IgAs provin din IgA serice polimerice care ataeaz piesa de transfer n contact cu celulele epiteliale din glanda mamar ce le faciliteaz excreia.

Aceti Ac sunt vehiculai la nivelul tractului digestiv al copilului sub form de microvezicule n citoplasma neutrofilelor i monocitelor din secreia lactat. IgAs astfel transportate sunt eliberate n lumenul intestinal al copilului ca urmare a stimulrii acestor celule secundar contactului lor cu germenii din flora bacterian intestinal. IgA joaca un rol important n aprarea antibacteriana de la nivelul mucoaselor, limiteaz ptrunderea alergenelor exogene (ex: pneumoalergene) i au anumite implicaii asupra meninerii toleranei. 3. Imunoglobulina M (IgM) - este imunoglobulina cea mai raspandit. Se caracterizeaz pintr-o greutate molecular mare i un coninut ridicat de glucide. Anticorpii de tip IgM apar predominant n cursul rspunsului primar, rata sintezei lor fiind controlat prin nivelul IgG. IgM nu traverseaz placenta; n schimb, activeaz intens cascada complementului. IgM nu posed activitate reaginic, ns se fixeaz intens prin fragmentul Fc la membrana diverselor celule ale imunitii (macrofage, limfocite, granulocite). IgM cuprind dou subclase IgM1 i IgM2. Obinuit, n clasa IgM se includ hemaglutininele grupelor sanguine ABO, majoritatea anticorpilor antibacterieni (aglutininele) i anticorpii antivirali. IgM sunt caracteristice rspunsului imun primar, locul lor fiind preluat n cursul rspunsurilor secundare de ctre IgG.

4. Imunoglobulina D (IgD) - prezint o activitate de anticorp, o cretere semnificativ de IgD s-a nregistrat n serul gravidelor, dar numai n timpul travaliului, valoarea sa ante- i postpartum fiind normal. 5. Imunoglobulina E (IgE) - corespunde anticorpilor denumiti "reagine" (anticorpi reaginici) i, mai recent, anticorpi homocitotropi, adic anticorpi care au proprietatea de a se ataa ferm de unele celule (n special mastocite) provenite de la aceeai specie. Pacienii cu boala fnului, astm bronic, eczem atopic au concentraii de IgE semnificativ crescute dar au fost observate niveluri foarte ridicate de IgE i n unele boli parazitare provocate de Ascaris, Toxocara, Echinococus etc. IgE se afl n concentraii extrem de reduse de aproximativ 500 ng/ml. Concentraia sa plasmatic crete n caz de parazitoze, infecii fungice, virale, etc. Producia de IgE este unul dintre procesele cele mai strict controlate, probabil datorit rolului important al acestor Ac n retrocontrolul rspunsului imun ceea ce face ca titrurile mari de IgE s se asocieze numai unor perturbri generate de malfuncia sistemului imun (12).

SISTEMUL LIMFATIC

1.ORGANIZAREA GENERAL A SISTEMULUI LIMFATIC

Din punct de vedere didactic n cadrul sistemului limfatic pot fi distinse trei compartimente majore: - compartimentul celulelor su - care iniial este reprezentat de ficatul fetal, iar ulterior de maduva hematogen, unde se gsesc celule su limfocitare ct i ale celorlalte linii hematopoietice (eritrocitar, granulocitar, trombocitar, monomacrofagic etc.); - compartimentul organelor limfatice centrale - reprezentate de timus, bursa Fabricius sau echivalentele bursale; - compartimentul organelor limfatice periferice - reprezentat att de organe capsulate ca splina i ganglionii limfatici ct i esut limfoid difuz asociat tubului digestiv (GALT = Gut - Associated Lymphoid Tissue), cilor respiratorii (BALT = Branchial Associated Lymphoid Tissue) sau esutului cutanat (SALT = Skin-Associated Lymphoid

Tissue).

 2.

COMPARTIMENTUL CELULELOR SU

Celulele

su ale liniei limfoide deriv din celulele stem pluripotenate (CSP) care sub influena diverilor stimuli hormonali genereaz diversele linii celulare sanguine. Primele celule su se formeaz n sacul vitelin de unde, iniial, migreaz ctre ficat: la om aceast migrare are loc ncepnd cu cea de a 8a sptmn de sarcin. La rndul lor, ntre sptmnile 10-11 i sptmna 20 de via embrionar, aceste celule migreaz din ficatul fetal ctre mduva hematogen, unde prolifereaz i dau natere printre altele, la limfocitele pre-T i pre-B.

3. COMPARTIMENTUL ORGANELOR LIMFATICE CENTRALE Timusul i funciile sale

Situat n mediastinul anterior, acest organ este format din doi lobi, fiecare dintre ei fiind divizat n mai muli lobuli ce sunt constituii dintr-o zon cortical periferic i o zon medular central. Timusul are o structur limfoepitelial. Din punct de vedere embriologic, componenta epitelial ia natere n endodermul celei de a treia pungi branhiale sub forma a doi muguri epiteliali care, n jurul celei de a 8-a sptmni de gestaie, i pierd legtura cu epiteliul de emergen i migreaz n torace aprnd la nceput ca o aglomerare de celule epiteliale, care ulterior se organizeaz n grupuri separate. Aceste celule prezint prelungiri care, n ansamblu, creaz un aspect de reea reticular (de aici i numele de celule reticulare), n ochiurile creia migreaz limfocitele pre-T (celule precursoare) i care vor da natere prin multiplicare i difereniere limfocitelor T (helper, supresoare, contrasupresoare i citotoxice). Celulele epiteliale sunt cel mai bine reprezentate la nivelul medularei timusului, ele exprim pe surpafaa lor moleculele MHC de tip II i prezint n citoplasma lor granulaii ce conin din abunden hormoni timici.

Alturi de aceste celule, timusul conine numeroase macrofage, care ca i precedentele, exprima la suprafaa membranelor lor molecelule MHCII. Limfocitele care n mod progresiv colonizeaz timusul sunt iniial distribuite n ariile corticale, aici ele fiind limfocite imature care, pe msur ce migreaz ctre zonele medulare, prolifereaz i sufer n paralel un proces de maturaie. Timusul joac un rol bine definit n procesul de maturaie i difereniere a limfocitelor T (perioada fetal, neonatal i primii ani de via)-astfel incat fiecare tip de limfocit timic dezvolta reactivitate specifica impotriva unui singur tip de antigen. Rolul timusului este susinut de observaii i experiene, care actualmente sunt clasice: a) - deprimarea rspunsului imun celular i a rspunsului umoral la Ag timodependente determinate de anumite anomalii congenitale sau ereditare ale dezvoltrii timice (oarecii nuzi, sindrom Di George); aceleai tipuri de rspunsuri imunologice sunt sever alterate ca urmare a timectomiei neonatale experimentale;

 b)

timectomia realizat mai trziu poate de asemenea s altereze rspunsul imun dar cu o intensitate mult mai mic; practicat la vrsta de adult, ea afecteaz mai ales mecanismele de control ale rspunsului imun, cea mai interesat fiind funcia de supresie, ceea ce poate conduce la elicitarea unor rspunsuri imunitare dirijate fa de antigenele proprii (autoimunitate).

esen, participarea timusului la meninerea homeostaziei imune, poate fi rezumat la dou aspecte funcionale fundamentale: a) realizeaz maturaia precursorilor limfocitari T; b) este implicat n distribuia limfocitelor T ctre anumite arii ale organelor limfoide periferice, graie receptorilor de tip "homing", pe care aceste celule i achiziioneaz pe tot parcursul pasajului lor intratimic, celulele T ocupnd sectoare ale sistemului imun diferite de cele ale limfocitelor B.

Bursa fabricius i echivalenele bursale

Bursa Fabricius este un organ limfo-epitelial care la psri este situat n partea terminal a cloacei. El este populat de limfocite pre-B care se difereniaz n limfocite B (bursodependente) mature care, n final, ca urmare a stimulrii antigenice sunt capabile s se transforme n celule productoare de Ac (plasmocite). Rolul bursei Fabricius este pus n eviden prin experienele de bursectomie neonatal care, dac nu afecteaz rspunsul imun celular, induce n schimb o supresie aproape total a capacitii de rspuns prin Ac. La om diferenierea limfocitelor B se pare c nu necesit nici o etap intermediar, maturaia lor realizndu-se direct chiar la nivelul ficatului fetal, iar mai trziu la nivelul mduvei hematogene, aceast ipotez fiind acreditat de existena unor deficite ale imunitii umorale (agammaglobulinemia sex-linkat) de origine pur medular.

 La

nivelul organelor limfoide centrale, limfocitele pre-B se divid extrem de rapid (la fiecare 4-5 ore) i sufer modificri importante la nivelul genomului (recombinri i mutaii somatice, deleii) care conduc la realizarea extremei diversiti repertoriale a anticopilor. Dup aceast faz de expansiune, limfocitele pre-B se difereniaz n limfocitele B care exprim pe membranele lor Ig, mai nti de tip IgM (sptmna a 9-a de via embrionar) i ulterior (sptmnile 1112) de tip IgG i IgA .

4. COMPARTIMENTUL ORGANELOR LIMFATICE PERIFERICE Splina

Splina este delimitat la exterior de ctre o capsul care conine numeroase fibre musculare netede i care trimite ctre interiorul organului multiple septuri sau trabecule. n cadrul perenchimului splenic se disting dou sectoare distincte att ca structur ct i ca funcie: pulp roie la nivelul creia se realizeaz distrucia eritrocitelor senescente i pulpa alb care conine esut limfoid, acesta fiind dispus n jurul unei arteriole centrale, de aceea poart numele de stratul limfoid periarteriolar (PALS - Periarteriolar Lymphoid Sheath). n cadrul PALS, zona imediat limitrof arteriolei centrale este populat de ctre limfocite T, iar teritoriul de la periferia PALS conine aproape n exclusivitate limfocite B. Acestea sunt grupate, formnd foliculi, fie primari constituii din celule B nestimulate, fie secundari formai din limfocite B activate antigenic constituind ceea ce se mai numete centru germinal. Printre limfocitele B se gsesc din abunden, fie macrofage, fie celule dendritice foliculare, ele fiind eseniale pentru cooperarea celular absolut necesar marii majoriti a rspunsurilor imune umorale. Limfocitele din ambele zone pot prsi PALS prin capilarele de la nivelul zonei marginale care reprezint "mantaua" PALS, aici existnd un amestec al ambelor categorii de limfocite. Unele din limfocitele B stimulate antigenic i transformate n limfoblati pot trece dincolo de zona marginal i s ptrund n pulpa roie care, n afar de eritrocite care sunt celulele majoritare mai conine macrofage, trombocite sau limfocite i plasmocite.

Ganglionii limfatici

Ganglionii limfatici fcnd parte dintr-o reea, se dispun sub forma unor multiple filtre dispuse n serie, prin care sunt drenate lichidele tisulare i limfa n drumul lor de la periferie ctre canalul toracic. Din punct de vedere structural ganglionii limfatici sunt mici organe limfoide delimitate de ctre o capsul, care, ca i n cazul splinei, trimite numeroase septuri ctre interiorul perenchimului. n cadrul acestuia pot fi delimitate trei zone distincte: cortexul constituit din limfocite B, zona paracortical populat aproape n exclusivitate de limfocite T i medular care conine limfocite B, T i plasmocite. Cortexul, care este o zon limfocitar B, este organizat n foliculi primari i foliculi secundari sau centrii germinali, acetia avnd o structur foarte asemntoare omonimilor lor splenici din PALS (Peri-Arteriolar Lymphatic Sheats). Limfocitele B din centrii germinali exprim Ig de suprafa, mai ales din clasa IgM i sunt n contact cu APC (antigen presenting cells). mai ales de tipul celulelor dendritice, ct i cu limfocite T CD4+ (helper), toate trei participnd la cooperarea celular necesar rspunsului imun umoral. Zona paracortical cuprinde nu numai limfocite T dar i numeroase APC ce exprim din abunden pe suprafeele lor moleculele MHCII (complexul major de histocompatibilitate), iar zona medular conine un amestec de limfocite T i B i din abunden celule fagocitare, acestea fiind dispuse de-a lungul sinusoidelor de la acest nivel.

SISTEMELE LIMFOIDE ASOCIATE MUCOASELOR I PIELII (IMUNITATEA LOCAL) Actualmente se face o distincie clar ntre imunitatea sistemic la

care particip splina i ganglionii limfatici i ai cror factori efectori (anticorpi i limfocite) sunt vehiculai pe cale sanguin i imunitate local sau asociat mucoaselor i pielii care este asigurat de celule, ce fac parte integrant din structura acestor esuturi, factorii solubili elaborai de ctre acestea fiind produi i acionnd n cea mai mare parte local. Importana acestui sistem imun rezid nu numai din faptul c el reprezint un mijloc eficient de aprare la nivelul principalelor pori de intrare ale organismului ci i din punct de vedere cantitativ, aportul su la meninerea homeostaziei imune nu este deloc neglijabil, ntruct el controleaz contactul cu o multitudine de Ag la nivelul a 1,70 m2 de suprafaa tegumentar i mai mult de 100 m2 de mucoas respiratorie (pentru a lua numai aceste dou exemple). Ca i n cazul imunitii sistemice, funcia acestui sistem imunitar depinde de participarea acelorai dou categorii de factori efectori : anticorpii i limfocitele .

Celule implicate n rspunsul imun Limfocitele

Indiferent de particularitile funcionale, toate limfocitele provin din organele limfoide primare (timus i mduva hematogen), producia zilnic fiind de 109 celule/24h. O parte din aceste celule trecnd n circulaia periferic, migreaz ctre organele limfoide secundare (splina, ganglioni limfatici, amigdale i esuturile limfoide necapsulate), iar restul rmn pentru o perioad n circulaia general ca limfocite circulante unde ele totalizeaz aproximativ 25% din elementele figurante albe. ntre limfocitele circulante i cele aflate n organele limfoide secundare nu exist o separare complet ci numai de moment, ntruct ntre cele dou sectoare exist o recirculare celular permanent controlat de mecanisme specifice operante att n condiii fiziologice ct i n situaii patologice declanate de o stimulare antigenic. O parte din aceste limfocite au o durat de via lung apreciat la caiva ani, ele recirculnd n permanen ntre cele dou sectoare.

Fig. 14. Reglarea sistemului imun, cu evidenierea rolului central al limfocitelor T Helper

Dei examinate microscopo-optic celulele limfoide sunt foarte asemntoare ntre ele, limfocitele reprezint totui o populaie celular cu un pronunat caracter heterogen, ceea ce a permis desigur mprirea acestora n clase i subclase celulare. Limfocitele T iau natere n timus i reprezint aproximativ 70-80% din limfocitele sngelui periferic, respectiv 90% din cele aflate n ductul toracic. La nivelul ganglionilor limfatici se distribuie n ariile paracorticale i reprezint carn 30-40% din totalul limfocitelor, iar la nivelul splinei limfocitele T sunt predominante n zonele periarteriolare ale pulpei albe (PALS - Peri-Arteriolar Lymphatic Sheats), ele reprezentnd n jur de 20-30% din limfocitele aflate n acest organ. Limfocitele B iau natere n mduva hematogen i formeaz aproximativ 10-15% din totalul limfocitelor circulante, iar n ganglionii limfatici ele sunt regsite cu predilecie n centrii germinativi.

 Unele

limfocite T ndeplinesc funcii unice, cum ar fi limfocitele implicate n imunoreglare ca limfocitele T helper (TH), supresoare (TS) i contrasupresoare (TCS) sau cele implicate n funciile efectoare propriu-zise ca limfocitele T citotoxice (TC), celulele LAK (lymphokine activated killer cells), celulele populaiilor limfocitare mixte etc. Tot n aceast categorie pot fi incluse i celulele implicate n supravegherea imunologic (anticanceroas) i aprarea fa de infecia viral ca celulele naturale ucigae (NK- natural killers cells). Altele, ns pot ndeplini funcii aparent disparate ca limfocitele B care, nu numai c sintetizeaz i secret o gam larg de Ig (plasmocitele), dar pot funciona i ca celule prezentatoare de Ag (APC - antigen presenting cells).