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Tinción de Gram y
Morfología
Bacteriana.

Miguel Ángel Ortiz

Gil.
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TINCION GRAM

• Bacteriólogo danés Christian Gram, 1884.

• Tinción diferencial
• Se fundamenta en la morfología celular
bacteriana.

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Técnica Gram:

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Diferenciación de Gram
positivo y Gram negativo
• La pared celular de las bacterias Gram positivas posee
una gruesa capa de peptidoglucano, además de dos
clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de
la pared celular y unido a la membrana plasmática, se
encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la superficie, el
ácido teicoico que está anclado solamente en el
peptidoglucano (también conocido como mureína).

• Por el contrario, la capa de las Gram negativas tiene una

capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana
exterior por lipoproteínas. La membrana exterior está
hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido.

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PARED CELULAR
• Un microorganismo gram
positivo debe presentar
una pared celular sana. El
mismo microorganismo, si
sufre daño de la pared por
una u otra causa, se
vuelve gram negativo.
Esto indica la importancia
de la pared para la
retención o el escape del
colorante.

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¿QUE SUCEDE DURANTE

LA TINCION DE GRAM?
• La diferencia que se observa en la resistencia a la
decoloración, se debe a que la membrana externa de las
Gram negativas es soluble en solventes orgánicos,
como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa
de peptidoglicano que posee es demasiado delgada
como para poder retener el complejo de cristal
violeta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto
este complejo se escapa, perdiéndose la coloración
azul-violácea. Pero por el contrario, las Gram positivas,
al poseer una pared celular más resistente y con mayor
proporción de peptidoglicanos, no son susceptibles a la
acción del solvente orgánico, sino que este actúa
deshidratando los poros cerrándolos, lo que impide que
pueda escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y
manteniendo la coloración azul-violácea.

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Las células generalmente son tratadas para coagular el

protoplasma antes de teñirlas, proceso llamado fijación. Para
bacterias, la fijación por el calor es lo más común, aunque
también puede fijarse con sustancias químicas como
formaldehído, ácidos y alcoholes.

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Morfología Bacteriana

• Ya hemos visto que la tinción de GRAM aporta

dos ideas básicas para la deficinión
"taxonómica" de las bacterias: el color que
adquieren tras la tinción y la forma que
presentan las células bacterianas.
• Esta diversidad depende de que la división de
las células se dé a lo largo de uno, dos o tres
ejes.
• Formas básicas en que se puede visualizar la
morfología bacteriana en una tinción GRAM:

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Cocos
• Micrococos, aparecen aislados y dispersos tras la división celular.
Diplococos, aparecen por pares. Estreptococoss, tienden a unirse
formando cadenas. Estafilococos, aparecen en grupos irregulares,
a veces de gran tamaño

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Bacilos

• grandes variaciones morfológicas:

fusiformes, estreptobacilos, cocobacilos.

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Espirales
• Utilizamos el término Pleomorfismo para
referirnos a la adopción de diferentes formas en
una misma especie.

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Bibliografía:
• MANUAL DE TÉCNICAS EN MICROBIOLOGÍA
CLÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA.
1990.

• DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO CLÍNICOS POR EL

LABORATORIO. John Bernard Henry, Todd-Sanford-
Davidsohn. Tomo I y II. 8ª Edición. Salvat Editores. 1988.

• DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. TEXTO Y ATLAS

COLOR. Koneman, Allen, Dowell, Sommers. Editorial
Médica Panamericana. 2ª Reimpresión. 1990.

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