Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Cuprins
1.Istoria descoperiri...................................................................................................................................3
2.Structura ADN........................................................................................................................................4
2.1.Structura primar.............................................................................................................................4
2.2.Structura secundar.........................................................................................................................4
.................................................................................................................................5
.................................................................................................................................................................5
2.3.Structura teriara..............................................................................................................................5
.............................................................................................................................6
3.Tipuri de ADN.......................................................................................................................................6
3.1.ADN-ul nuclear...............................................................................................................................6
3.2. ADN-ul extranuclear (citoplasmatic).............................................................................................7
3. 3.n funcie de structura teriara .......................................................................................................8
4.Denaturarea ADN...................................................................................................................................8
5. Replicarea..............................................................................................................................................9
5.1.Replicarea la procariote...................................................................................................................9
5.2.Replicarea la eucariote..................................................................................................................11
6.Reparaia ADN.....................................................................................................................................12
7.Bibliografie:.........................................................................................................................................13
1.Istoria descoperiri
n zilele noastre ,toat lumea tie c ADN-ul ,un acid nucleic ,dirijeaz modul de
dezvoltare al celulei. Oamenii de tiin au aflat toate amnuntele despre ADN n
maniera att de obinuit tiinei adic pe cai foarte ocolite .n primul rnd,descoperirea
ADN-lui a necesitat realizarea de progrese n trei domenii complet separate: citologie,
genetic i chimie.
Dup ce Gregor Mendel a redescoperit legile ereditii n 1900,s-a nscut un
considerabil interes pentru cauzele acesteia .Structurile fundamentale implicate n
ereditate cromozomii-au fost descoperite i studiate de Walter Flemming n anii 1880,
dar pe vremea aceea nimeni nu tia c aveau legtur cu ereditatea. Cromozomii nu erau
dect nite structuri lungi i subiri care apreau n timpul diviziunii celulare , devenind
vizibile doar n probele colorate.De asemenea Friedrich Miescher a descoperit acizii
nucleici din nucleele celulelor nc din 1869,dar n-a gsit nici relaia dintre ei i
ereditate, nici pe cea dintre ei i cromozomi-desi Miescher a constatat ulterior ca
substana seminal a somonului este compus aproape n totalitate din acid nucleic, la
care se aduga o protein simpl ,ceea ce ar fi trebuit s fie indiciul existenei unei
legturi cu ereditatea.
n 1907,Thomas Hunt Morgan ,oarecum sceptic n ceea ce privete genetic ,a
nceput s creasc drosofile n scopuri pur experimentale.n scurt timp ,el a constatat c
legile lui Mendel erau valabile ,dar i c unele caracteristici motenite par a avea
legturi unele cu altele .Aceste legturi se comportau ca i cum unitile ereditii, adic
genele,erau aliniate n iruri lungi.Ori o structur celular lung i subire, care s fie n
concordan cu observaia lui i care s poat conine genele ,era cromozomul, aa cum
sugera anterior August Weisman, pornind ns de la alte consideraii. n 1911 ,Morgan a
reuit s arate ca gemele niruite de-a lungul cromozomilor sunt agenii purttori ai
ereditii.
n timp ce pe frontul geneticii se fceau aceste progrese, i n domeniul chimiei se
nregistrau unele realizri. n 1909 ,Phoebus Aaron Theodor Levene a fost primul care a
ajuns la concluzia c acizii nucleici conin o substan zaharoas: riboza.Douzeci de
ani mai trziu ,el constata c ali acizi nucleici conin un alt tip de substan zaharoas:
dezoxiriboza.Deci ,exist dou feluri de acizi nucleici: acidul ribonucleic (ARN) i
acidul dezoxiribonucleic (ADN). De asemenea ,Levene s determinat natura chimic a
altor compui care se gseau n ARN i ADN. Natura lor chimic a fost cercetat apoi
n detaliu ,de Alexander Todd n anii 1930.
Cromozomii ,ca i alte structuri celulare ,conin proteine .De asemenea ,ei conin
ADN.Cum despre proteine se tia c sunt molecule complexe biologic foarte active,
toat lumea s-a gndit c genele trebuie s fie proteine-pana n 1944, cnd Oswald
Avery i colaboratorii si au artat c inducerea caracteristicilor ereditare este posibil
numai cu ajutorul ADN-lui pur ,fr a fi implicat nici o protein .Avery a evideniat
faptil ca ,ntr-un fel sau altil, genele trebuie s fie compuse din ADN.
Pe la nceputul anilor 1950 ,civa savani din diferite domenii au diferite domenii
au abordat problema nelegerii ADN-ului.Printre acetia s-a aflat i Linus Pauling,
probabil cel mai bun chimist la vremea aceea .n 1951, Pauling ,care lucra cu B.B
Corey, a ajuns la concluzia c stuctura unei clase de proteine este elicoidala, adic are
forma unei spirale tridimensionale.A fost determinat astfel pentru prima dat structura
3
fizic a unei molecule biologice de dimensiuni mari.Apoi n jurul aceluiai an, Pauling
s-a ntors la studiul ADN-ului,spernd s descopere i structura acestuia.
2.Structura ADN
2.1.Structura primar
Reprezint rezultatul gradului de polimerizare i ordonare a patru tipuri de
nucleotide, formndu-se monocatena polinucleotidica din componena macromoleculei
de ADN.
Nucleotidele se cupleaz prin legturi fosfodiesterice ntre radicalul fosforic al
unui nucleotid i hidroxilul de poziie -3 sau -5 al nucleotidului adiacent. n acest mod
se formeaz scheletul chimic pentru fiecare caten din structura ADN-ului. Prin
esterificarea 3-5-3-5-3-5 ,ntre nucleotidele componente ale fiecrei catene,se
asigura polaritatea moleculei de ADN, polaritate important pentru proprietile fizicochimice i biospecifice ale ADN-ului.
Poziia unui nucleotid n caten de ADN, nu impune cu necesitate n vecintatea sa
prezena unui anumit nucleotid, poziiile adiacente pot fi ocupate de oricare din
cele patru tipuri de dezoxiribonucleotide:
...A-T-C-C-A-T-G-C-A-T-G-T-A-A-T-G-A-T ........
Structura primar a ADN-ului, asigura stocarea unei cantiti inepuizabile de
informaie genetic.
2.2.Structura secundar
Molecula de ADN este format din dou catene polinucleotidice, cu excepia unor
bacteriofagi, la care ADN-ul este monocatenar.Monocatenele polinucleotidice, sunt
legate prin puni de hidrogen ntre bazele azotate pe baz de complementaritate, ntre o
baz purinica i una pirimidinica. Astfel ntre adenina i timina se realizeaz o legtur
dubl (A = T), iar ntre guanina i citozina o legtur tripl (GC), de natur
electrostatic.
Complementaritatea bazelor azotate din molecul de ADN, a fost pus n eviden
de E. Chargaff (1955). Prin analize chimice, Chargaff a gsit valori apropiate de unitate
ntre adenina timina (A/T = 1) i guanina - citozina (G/C = 1).
Structura secundar, prin existena legturilor de hidrogen ntre bazele azotate
complementare, ofer ADN-ului funcii biologice deosebite i anume:
-structura complementara asigura macromoleculei de ADN un mecanism de replicare
semiconservativ. Adic, fiecare caten din molecul de ADN, poate servi ca matria
(tipar) pentru sinteza unei noi molecule complementare, rezultnd n final molecule de
ADN ce vor avea o caten veche i una nou sintetizat, conservndu-se astfel fidel
informaia ereditar;
-prin structura complementara se asigura repararea moleculei de ADN, dac aceasta a
suferit disfuncii pe parcursul procesului de sintez;
-complementaritatea ADN-ului poate fi utilizat ca principiu, n procesele de
hibridare ale acestuia, de la specii diferite.
4
2.3.Structura teriara
Echivalent bazelor observate la ADN din diferite specii a condus la ideea
posibilitii existenei unui nivel de organizare structural a moleculelor de ADN,
compatibile cu unele echivalente bazice i incompatibile cu altele.
ntre anii 1950-1953,R.Franklin i M.H.F.Wilkins au obinut date mai exacte
privind structura ADN-ului prin difracia razelor X.
Pe baza acestor rezultate i a echivalentelor bazice observate de Chargraff,
J.D.Watson i F.H.C Crick au descoperit un model tridimensional al structurii ADN.
Aceast structur era format din dou catene polinucleotidice, rsucite n form
elicoidala n jurul aceleiai axe,spre dreapta i care sunt antiparalele. Cele dou catene
formeaz o dubl spira i nu pot fi separate dect prin derularea helixului. Bazele
purinice i pirimidinice sunt stivuie spre interiorul helixului,planurile lor sunt paralele
i perpendiculare pe axa helixului. Bazele unei catene sunt mperecheate cu bazele
celeilalte catene n aceleai planuri. mperecherea bazelor se face astfel nct numai
anumite perechi de baze se porivesc n interiorul acestei structuri pentru a forma
legturi de hidrogen ntre ele. Dublul helix permite att formarea numrului maxim
posibil de perechi de baze unite prin legturi de hidrogen, ct i formarea acelor perechi
care determin o potrivire i stabilitate maxim. Structura helixului este stabilizata de
legturile de hidrogen dintre perechile de baze complementare, de interaciile
electronice dintre bazele suprapuse i de interaciile hidrofobe.
Structura dublu-helicala a condus la mecanismul prin care informaia genetic
poate fi replicata fidel. Cele dou catene ale ADN fiind complementare i coninnd
informaie complementar s-a presupus c replierea ADN n cursul diviziunii celulare
are loc prin replierea celor dou catene ,astfel fiecare caten iniial s serveasc ca
matria. n final se obin dou molecule dublu-helicale fiice ale ADN, fiecare identic
cu cea a ADN parental, de la care conine cte o caten.
Ipoteza Watson-Crick a avut un impact profund i imediat asupra naturii
experimentului destinat descifrrii aspectelor moleculare ale transferului informaiei
genetice.
5
3.Tipuri de ADN
3.1.ADN-ul nuclear
Este localizat n cromozomi, la nivelul fiecrei cromatide existnd cte un dublu
helix de ADN, care se extinde de la un capt pn la cellalt capt al cromatidei, prin
centromer.La procariote este evideniata o corelaie direct ntre cantitatea de ADN i
numrul de gene. n cazul eucariotelor, datorit structurii complexe a genomului, s-a
evideniat o neconcordan ntre cantitatea de ADN nuclear i numrul genelor cu
semnificaie i funcie genetic.
Asemenea neconcordante au fost evideniate la toate organismele eucariote, la care
exist o mai mare cantitate de ADN nuclear, f]ta de numrul genelor funcionale.Prin
metodele de denaturare i renaturare a ADN-ului nuclear i prin metoda obinerii
hibrizilor moleculari intraspecifici ADN - ADN i ADN - ARN, s-a evideniat ca circa
50% din ADN-ul nuclear eucariot este reprezentat de secvene nucleotidice
informaionale, diferena reprezentnd secvene nucleotidice necodate sau
noninformaionale.Astfel, exist tipuri diferite de ADN: ADN-ul repetitiv i ADN-ul
nerepetitiv.
ADN-ul repetitiv
-este format din secvene nucleotidice (de tip A - T sauG - C), repetate de ordinul a
zecilor sau sutelor de mii ntr-un lan polinucleotidic. n general aceste secvene sunt
considerate lipsite de informaie genetic. n funcie de numrul repetrilor, ADN
repetitiv se clasifica n: ADN nalt repetitiv i ADN moderat repetitiv.
6
ADN-ul nerepetitiv
-este reprezentat de macromolecule cu secvene unice de nucleotide, reprezentnd 30 80% din totalul ADN-ului celular. Secvenele de ADN nerepetitiv constituie fondul de
gene structurale, operatoare i reglatoare, asigurnd sintez i controlul genetic al
sintezei de proteine.
Funciile secventelor de ADN-nerepetitiv, s-au stabilit prin hibridarea molecular ADN
- ARN mesager. A fost confirmat astfel complementaritatea moleculelor de ARNmesager cu secvenele nerepetitive din molecul de ADN-nuclear.
4.Denaturarea ADN
Moleculele de AND dublu-helical pot suferi modificri importante ale
proprietilor fizice sub aciunea unor factori fizici sau chimici:
1)valori sczute de pH
2)temperature
3)descreterea constantei dielectrice a mediului apos sub influena alcoolilor,cetonelor
4)expunere la aciunea uree, amidelor i a compuilor similari
n aceste cobnditii vscozitatea soluiilor de ADN descrete, rotaia optic capta
valori mult mai negative, iar absorbia luminii la 280 nm i densitatea de plutire cresc.
Aceste modificri ale proprietilor fizice ale ADN-ului sunt numite denaturare; de
remarcat c agenii denaturaii sunt identici cu cei care produc denaturarea i deplierea
proteinelor globulare.
n procesul de denaturare a ADN-ului dublu-helix, cele dou catene se deruleaz
prin ruperea legturilor necovalente, apoi se separ, fr c legturile covalente s fie
afectate.
8
5. Replicarea
5.1.Replicarea la procariote
ADN-ul procariotelor este compus dintr-un singur cromozom circular. Replicarea
ncepe n puncte bine determinate numite regiuni de origine (ori). De aici procesul se
desfoar pa ambele catene ale ADN-ului circular astfel nct la un moment dat un
ADN bacterian poate lua forma literei greceti theta.
Iniierea replicrii ncepe prin desfacerea legturilor de hidrogen dintre
nucleotidele de pe cele dou catene ale ADN-ului mam, n punctul de origine.
Enzimele implicate n acest proces se numesc helicaze. Astfel pe catenele eliberate se
poate construi o nou caten de ADN.
Prin separarea celor 2 catene dubl elice a ADN-ului devine din ce n ce mai
tensionat. Aceast situaie ar putea duce la oprirea replicrii dac nu ar exista
topoizomerazele care detensioneaz ADN-ul.
Odat desfcut i detensionat, pe ADN-ul mama se poate ncepe construirea celor 2
catene a noului ADN. Pentru aceasta este nevoie de mici molecule de ARN numite
primeri sau iniiatori (au 5-10 nucleotide). Acestea sunt realizate cu ajutorul ADN
primazei.
De la captul 3` al ARN-ului iniiator pleac sinteza ADN-ului propriu zis prin
adugarea succesiv a deoxinucleotidelor care se unesc prin legturi fosfodiesterice.
Molecul fiica nou constituit respecta cu strictee ADN-ul matria astfel nct dac pe
ADN-ul mama exist timina acolo va veni adenin, pentru citozina va veni guanin,
s.a.m.d. , conform principiului complementaritii. Enzima necesar este ADN
polimeraza III.
cteva mii la procariote. Fragmentele vor fi reunite dup excizia fiecrui fragment de
ARN iniiator care nsoete lanurile Okazaki. Cu excizia ARN-ului se ocup tot ADN
polimeraza 1 iar cu unirea lanurilor de ADN rmase se ocup ADN ligaza (necesit
cosum de ATP).
n final de pe fiecare caten a ADN-ului mama se construiete cte o caten nou
rezultnd 2 molecule polideoxinucleotidice bicatenare cu un lan vechi (matria sau
mama) i un lan nou sintetizat de complexul enzimatic numit replicare.
ntregul mecanism este extrem de fidel astfel nct erori nu apar dect cu o
frecven de una la un milion -zece miloane de nucleotide. ADN polimeraza are o
extraordinar capacitate de autocontrol astfel nct dac o nucleotid nu este pus
conform principiului complementaritii aceasta este imiediat eliminat i nlocuit cu
nucleotidul corespunztor. Viteza replicrii este de sute de nucleotide pe secund i se
face aproape perfect.
5.2.Replicarea la eucariote
Se face asemntor cu cea de la procariote. Exist totui o serie de particulariti:
ADN polimerazele: aici sunt n numr de trei , i . polimeraza este
implicat n replicarea ADN-ului nuclear, polimeraza este implicat n replicarea
ADN-ului mitocondrial.
originea replicrii: la eucariote viteza este mai mic
exist un mecanism propus pentru caten 5`-3` a ADN-ului mama n momentul
copierii. Se pare c la nivelul replizomului aceasta caten poate face o bucl care
permite folosirea complexului de sintez n acelai sens ca n cazul catenei 3`-5`.
biosinteza ADN apare n faza S a diviziunii celulare, ntreaga cantitate de ADN i
histone (necesare "mpachetrii") fiind dublat complet.
11
6.Reparaia ADN
Molecula de ADN este relative fragile, uor dedistrus. Cu toate acestea genele
bacteriene pot supavietui, fr vreo modificare, la mai multe milioane de cicluri de
replicare. Integritatea informaiei coninut de ADN este protejat, n mare msur, de
enzime capabile s repare cu acuratee unele defeciuni dintr-o caten atta timp ccat
cealalt caten, care conine informaia complementar, este intact.
Exist trei tipuri principale de mecanisme de reparaie. Primul, fotoreactivitatea
enzimatica, este un process mai degrab neclar, care are loc prin expunerea celulelor la
lumin albastr din vizibil. Fotoreactiviatea necesita prezena unei enzime care se leag
la situsul defective de pe ADN. Enzima absoarbe prin iluminare energie joas, care
iniiaz, ntr-un anumit fel, desfacerea legturilor covalente la locul defectului prezent
ntr-o singur caten.
Un alt tip de mecanism de reparaie este reparaia prin excizie, numit i reparaia
la ntuneric, deoarece este independent la lumin, proces care are loc prin aciunea
secveniala a patru enzime. Dac, de exemplu, defectul este prezena unui dimmer de
timin, acesta este detectat prin aciunea nucleazica 5-3 a ADN polimerazei I, a crei
funcie este de a patrul i de a produce o incizie n poziia 5 a moleculei defecte.
Segmentul defect este tiat, sau excizat, i nlocuit cu perechi de baze unete captul 3
al catenei noi la captul 5 al catenei normale, care a rmas intact. Procesul a fost
denumit taie, peticete, taie i lipete.
n cel de-al treilea tip de proces reparator, un segment mare al unei catene dintr-un
ADN duplex deteriorate este nlocuit cu un segment corespunztor normal dintr-o alt
molecul de ADN; pe scurt, o parte dintr-o gen este nlocuit cu o parte dintr-o alt
molecul de ADN. Procesul, numit reparaie prin recombinare, este un caz mai special
al unui process genetic general prin care gene dintr-un cromozom sunt combinate
covalent ntr-un alt cromozom. Reparaia prin recombinare se produce, de exemplu,
dup vtmarea cromozomului viral n celula gazd.
12
7.Bibliografie:
1.S.Creanga, Genetic, Iai, 2010, Universitatea de tiine Agricole i Medicin
Veterinar Ion Ionescu de la Brad.
2.I.Dabala, Genetica Comportamentului Uman, Cluj-Napoca, 2011, Universitatea
Babes-Bolyai.
3.A.L. Lehninger, Biochimie, vol II, Bucureti, 1987, Editura Tehnic Bucureti
13