PCR

ACS: Crstea Doina - Maria

PCR
(Reacie de polimerizare n lan)

Reacia PCR este o metod de amplificare enzimatic in vitro a unei anumite secvene de AND.
Din punct de vedere chimic, reacia PCR este constituit din cicluri succesive de replicare ADN in vitro, folosind 2 primeri (amorse) oligonucleotidici ce hibridizeaz cu cele 2 catene ale secvenei originale -folosit ca matri n replicare.

PCR
(Reacie de polimerizare n lan = polymerase chain reaction)

Kary Mullis

Kjell Kleppe

Componente:

ap nuclease-free tampon de reacie primeri (amorse) oligonucleotidici deoxinucleotidtrifosfati (dNTP) ADN matri ioni de Mg2+ ADN polimeraz termostabil denaturare initial

Etape

elongare final

Aplicaii ale tehnologiei PCR

Diagnosticul unor boli monogenice; Diagnosticul unor infecii umane; Studii de taxonomie, sistematic i filogenie molecular;

Reacie de amplificarea pentru gena ARNr 16S Ordinea probelor: M1- Gene Ruler 1kb DNA Ladder (Fermentas), 1- C16, 2 Ps3d, M3Pseudomonas aeruginosa, 3 CMM2, M4Pseudomonas fluorescens.

Analiza electroforetic a fragmentelor de restricie prin clivarea ampliconului pentru ARNr 16S cu diferite enzime de restricie M1- marker de greutate molecular (1kb Fermentas), M2 Gene Ruler DNA Ladder, Low Range, Fermentas), 1- C16, 2 Ps3d, M3- Pseudomonas aeruginosa ATCC 25619, 3 CMM2, M4- Pseudomonas fluorescens ATCC 13525

Aplicaii ale tehnologiei PCR

Diagnosticul unor boli monogenice; Diagnosticul unor infecii umane; Studii de taxonomie, sistematic i filogenie milecular; Biologia populaiilor; Studii de antropologie

Medicin legal

V mulumesc!