Determinarea calciului prin metoda colorimetric Principiul metodei n mediu neutru, n prezena arsenazei III, Ca 2+ formeaz un compus colorat.

Intensitatea culorii este direct proporional cu concentraia ionilor de Ca2+. Tehnica de lucru Se pregtesc trei eprubete: martor, standard, prob. Se pipeteaz n eprubete conform tabelului I. Reactivi !eacti" !# %p distilat Standard )rob Martor # m$ #& '$ ( ( Standard # m$ ( #& '$ ( Proba # m$ ( ( #& '$

*up agitarea coninutului eprubetelor +i incubarea lor timp de # minut la 2,-C ./&, /0-C1 se msoar e2tinciile probei .3p1 +i standardului .3s1 fa de martor la lungimea de und de 4,& nm, n cu"e de # cm. Calcul C p 5 Ep 6 Es 7 C s unde: Cp 5 concentraia probei Ep 5 e2tincia probei Es 5 e2tincia standardului Cs 5 concentraia standardului .#& mg6d$1 )8n la concentraia de #4 mg6d$ intensitatea coloraiei este direct proporional cu concentraia ionilor de Ca. Valori normale Ser, plasm: calciu total 5 9,9(#&,9 mg6d$ calciu ionic 5 :,2(,,2 mg6d$ urin: calciu 5 #&&(2&& mg62: ore Variaii patologice ;alori crescute ale calciului (hipercalcemii): cre+terea resorbiei osoase:

<iperparatiroidism: tumori .9&= din cazuri1> <iperplazie paratiroidian .2&= din cazuri1> metastaze osoase> <ipersecreia substanelor de natur <ormonal: prostaglandine> parat<ormon?li@e> factor de acti"are> procese osteolitice acti"e tumorale .osteoclaste n mielom, limfoame1> procese osteolitice acti"e infecioase .osteomielit1> <ipertiroidie .acromegalie1> imobilizri prelungite> tratament tiazidic> cre+terea absorbiei intestinale: into2icaie cu "itamina *> boli granulomatoase .prin <iperproducia metabolitului acti" al "itaminei *1: sarcoidoz, berilioz> <ipercalcemia idiopatic a copilului> <ipercalcemie n des<idratri cu <emocencentraie> Aipercalcemia se"er cu "alori mai mari dec8t #, mg6d$ este o urgen metabolic care se asociaz cu disfuncii ner"oase, cardio"asculare +i renale. ;alori fals crescute se obin prin staz prelungit la recoltarea s8ngelui. ;alori sczute ale calciului (hipocalcemii): nlturarea c<irurgical a paratiroidelor6tiroidei .asociat cu descre+terea fosfailor1> <ipoparatiroidism idiopatic prin mecanism autoimun, asociat cu <ipotiroidie, insuficien renal +.a> pseudo<ipoparatiroidism .lipsa de rspuns la parat<ormon1> <ipomagneziemie cu "alori mai mici dec8t &,9 mg6d$ determin scderea sintezei +i aciunii periferice a parat<ormonului> tulburarea metabolismului "itaminei *: scderea aportului alimentar, ra<itism "itamina * rezistent> malabsorbie pentru calciu, fosfor, "itamina *> gastrectomie> pancreatite cronice> afeciuni intestinale> afeciuni <epatice> <ipoalbuminemie .scade fraciunea legat de proteine, fraciunea ionizat rm8n8nd normal1> dezec<ilibru )6Ca .<iperfosfatemia prin consum crescut de lapte de "ac1> gra"iditate> lactaie> tratament cu furosemid, antiepileptice, steroizi.

Manifestri clinice Aipocalcemia cu diminuarea fraciunii ionizabile duce la cre+terea e2citabilitii neuromusculare asociat cu tetanie. !a<itismul apare la copii n cazul deficitului marcat de calciu +i presupune calcifierea defectuoas a oaselor. Bsteomalacia presupune o decalcifiere osoas a adultului +i "8rstnicului .este o boal rar1. Bsteoporoza este considerat n prezent o boal, caracterizat prin reducerea densitii minerale osoase, asociat cu compromiterea structurii osoase trabeculare, ceea ce predispune osul la fractur n urma unui traumatism de mic intensitate sau c<iar n lipsa acestuia. Bsteoporoza apare normal peste "8rsta de 4, de ani +i mai ales la femei o dat cu instalarea menopauzei. Cefrolitiaza calcic poate s apar printr?o dereglare metabolic a organismului, consecuti" unor e2cese alimentare n calciu sau n cadrul unor boli <ormonale .<iperparatiroidie1. Do area magne iului !n ser prin metoda colorimetric Principiul metodei Ionii de magneziu formeaz cu albastru de 2ilidin n mediu bazic un comple2 colorat. Intensitatea culorii obinute este direct proporional cu concentraia ionilor de magneziu din proba analizat. Tehnica de lucru Se pregtesc trei eprubete: martor, standard, prob. Se pipeteaz n eprubete conform tabelului urmtor. Reactivi !eacti" %pa distilat Standard )rob Martor # m$ #& '$ ( ( Standard # m$ ( #& '$ ( Proba # m$ ( ( #& '$

Se agit coninutul eprubetelor. *up o incubare a eprubetelor timp de # minut la 2,-C ./&, /0-C1 se msoar e2tinciile probei .3p1 +i standardului .3s1 fa de martor la lungimea de und de ,2& nm, n cu"e de # cm. Calcul Cp 5 Ep 6 Es 7 Cs mg Mg"#$$ m% ser 5 Ep 6 Es 7 Cs unde: Cp 5 concentraia probei Ep 5 e2tincia probei Es 5 e2tincia standardului

Cs 5 concentraia standardului .2 mg6d$1 Valori normale ser: #,4(2,, mg6#&& m$ .#,4(2,: m3D6$1 s8nge intergral: /,0(:,0 mg6#&& m$ urin: ,&(#,& mg62: ore Variaii patologice ;alori sczute ale magneziului seric .hipomagneziemie1 apar n: unele sindroame tetanice .deficitul de magneziu ionizat, nu total, poate induce o tetanie nsoit de con"ulsii, dar diferit de cea <ipocalcemic1> ra<itism infantil> nefroz lipoidic> com diabetic> insuficien <epatic .ciroze1> <ipoparatiroidism> <iperaldosteronism> mi2edem> alcoolism> malabsorbie> "rsturi incoercibile> diarei accentuate> pancreatit acut> tratament cu diuretice> plasmocitom> sarcin> idiopatic. ;alori crescute ale magneziului seric .hipermagneziemie1 apar n: oligurie, anurie> insuficien renal acut +i cronic> <ipertiroidie> tratament oral Ede substituieF cu magneziu, la2ati"e +i antiacide> insuficiene renale se"ere> stri uremice> ciroze gra"e> acidoz> tulburri de filtrare glomerular> a"itaminoza *. 32cesul de magneziu administrat parenteral poate duce la paralizie, care se nltur prin adminstrarea de calciu +i potasiu.

Determinarea activitii &%&T 'T(P) prin metoda en imatic Principiul metodei Substraturile participante n reacia catalizat de %$%G .GH)1 sunt: $?alanina +i I? cetoglutaratul .I?o2oglutaratul1. )iru"atul rezultat din reacie, n prezena lactat de<idrogenazei .$*A1, "a reaciona cu C%*A+A+ duc8nd la formarea C%*+ +i $?lactat. ;ariaia absorbanei msurat la lungimea de und de /:& nm este direct proporional cu acti"itatea %$%G .GH)1.
TGP

$?alanina + alfa?cetoglutarat

J
ALAT LDH

piru"at + $?glutamat

piru"at + C%*A+A+ K

$?lactat + C%*+

Proba Ser ne<emolizat )lasm obinut din s8nge recoltat pe 3*G%6<eparin Tehnica de lucru ntr?o eprubet se pipeteaz # ml de amestec de reacti"i !# +i !2 .#:#1 +i #&& 'l de prob de analizat. Se agit coninutul eprubetei +i se incubeaz timp de # minut la /0LC. Se msoar "ariaia absorbanei la lungimea de und de *+, nm fa de ap distilat, n cu"e de # cm, timp de trei minute. Se calculeaz "ariaia absorbanei pe minut .M%6min1. Calcul Cp-"l . '/&"min) 7 *01$ unde: Cp 5 concentraia probei /&"min 5 "ariaia absorbanei pe minut Valori normale aduli: 2 ( #4,, NI copii p8n la , ani: &,2 ( #/ NI Variaii patologice 2 5 *+, nm

Cre+teri importante ale %$%G apar n: <epatita "iral acut> <epatopatia to2ic cu necroz> Cre+teri medii: <epatite cronice> ciroze> icter mecanic> ficat de staz acut> mononucleoza infecioas. Cre+terea aminotransferazelor n afeciunile <epatice: cre+terea %$%G este mai important dec8t cre+terea %S%G n <epatitele infecioase datorit lezrii membranelor celulare> cre+terea %S%G este mai important dec8t cre+terea %$%G n <epatopatiile infiltrati"e datorit lezrii membranelor celulare +i mitocondriale. 3V4*4* Determinarea activitii &S&T 'T(5) prin metoda en imatic Principiul metodei Substraturile participante n reacia catalizat de %S%G .GHB1 sunt $?aspartatul +i I? cetoglutaratul .I?o2oglutaratul1. B2alacetatul rezultat din reacie, n prezena malat?de<idrogenazei .O*A1, "a reaciona cu C%*A+A+ duc8nd la formarea C%*+ +i $?malat. ;ariaia absorbanei msurat la lungimea de und de /:& nm este direct proporional cu acti"itatea %S%G .GHB1
TGO

$?aspartat + I?cetoglutarat
ASAT MDH

o2alacetat + $?glutamat

o2alacetat + C%*A+A+

$?malat + C%*+

Proba Ser ne<emolizat )lasm obinut din s8nge recoltat pe 3*G%6<eparin Tehnica de lucru ntr?o eprubet se pipeteaz # ml de amestec de reacti"i !# +i !2 .#:#1 +i #&& 'l de prob de analizat. Se agit coninutul eprubetei +i se incubeaz timp de # minut la /0LC. Se msoar "ariaia absorbanei la lungimea de und de *+, nm fa de ap distilat, n cu"e de # cm, timp de trei minute.

Se calculeaz "ariaia absorbanei pe minut .M%6min1. Calcul Cp-"l 5 '/&"min) 7 *01$ 2 5 *+, nm

unde: Cp 5 concentraia probei /&"min 5 "ariaia absorbanei pe minut 5bservaii *ac "ariaia absorbanei pe minut la lungimea de und de /:& nm .//: nm1 dep+e+te &,#0 sau la lungimea de und de /4, nm dep+e+te &,&P,, se "a repeta determinarea cu ser diluat cu soluie fiziologic de CaCl n proporie de #:#&, iar rezultatul obinut se "a nmuli cu #&. Valori normale aduli: 2 ( 2& NI copii / luni ( # an: p8n la 29 NI Variaii patologice Cre+teri de #& ( #&& de ori ale %S%G fa de "alorile normale se nt8lnesc n: infarct miocardic .util n diagnosticul infarctului miocardic acut alturi de CQ?OR +i $*A1> <epatita "iral acut> <epatopatii to2ice> Cre+teri moderate: <epatite cronice> ictere colestatice .cre+te de , ( #& ori fa de "alorile normale1> afeciuni distrofice musculare> dup traumatisme, inter"enii c<irurgicale> anemii <emolitice se"ere> "iroze cu tropism <epatic .mononucleoza infecioas1. n afeciunile musculare cre+terile %S%G .GHB1 sunt mai mari dec8t ale %$%G .GH)1. Determinarea activitii 6 glutamiltransfera ei '((T) prin metoda en imatic Principiul metodei n mediu alcalin, S glutamiltransferaza catalizeaz scindarea $?S?glutamil?p?nitroanilidei +i transferul gruprii $?S?glutamil pe glicilglicin, cu punerea n libertate a nitroanilidei de culoare galben. Cre+terea "alorii absorbanei msurat la lungimea de und de :&, nm este direct proporional cu acti"itatea HHG.

Proba Ser ne<emolizat Tehnica de lucru ntr?o eprubet se pipeteaz # ml de amestec de reacti"i !# +i !2 +i #&& 'l de prob de analizat. Se agit coninutul eprubetei +i se incubeaz timp de # minut la /0LC. Se msoar "ariaia absorbanei la lungimea de und de :#& nm fa de ap distilat, n cu"e de # cm, timp de trei minute. Se calculeaz "ariaia absorbanei pe minut .M%6min1. Calcul Cp-"l 5 ./&"min1 7 #**7 unde: Cp 5 concentraia probei /&"min 5 "ariaia absorbanei pe minut Valori normale femei: 0 ( /2 N6l brbai: ## ( ,& N6l Variaii patologice ;alori crescute ale HHG apar n: <epatopatia drog indus .inclusi" etanolic n care apar cre+terile cele mai importante1> ciroza biliar primiti" .cre+teri semnificati"e1> sindroame obstructi"e .cre+te de #& ( /& de ori fa de normal1> <epatite cronice> neoplasm <epatic> steatoz <epatic> staz <epatic n insuficiena cardiac congesti"> afeciuni pancreatice> <ipertrigliceridemie .cre+teri u+oare de #,, ( 2 ori care sugereaz o stimulare a proteosintezei <epatice1. *eterminarea HHG este un test screening al consumului de alcool. HHG este primul parametru care cre+te +i ultimul care scade n cazul consumului de alcool .c<iar dac transaminazele sau alte teste <epatice sunt normale1 2 5 1#$ nm

Determinarea 8&% prin metoda spectrofotometric Principiul metodei 3nzima n mediu bazic catalizeaz <idroliza monofosfailor. n urma reaciei rezult p? nitrofenol +i fosfat anorganic. Ionii de Og++ cresc acti"itatea enzimei. %cti"itatea enzimatic este direct proporional cu cantitatea de p?nitrofenol eliberat, respecti" cu intensitatea coloraiei obinute. Proba Ser ne<emolizat )lasm <eparinizat Tehnica de lucru Se amestec reacti"ul !2 n cantitatea corespunztoare de tampon !# .substrat tamponat1. Se pipeteaz ntr?o eprubet # ml de amestec de reacti"i !# +i !2 +i 2& 'l de prob de analizat. Se agit coninutul eprubetei +i se incubeaz timp de # minut la /0LC .2,, /&LC1. Se msoar "ariaia absorbanei la lungimea de und de :&, ( :#& nm fa de ap distilat, n cu"e de # cm, timp de trei minute. Se calculeaz "ariaia absorbanei pe minut .M%6min1. Calcul Cp -"l 5 ./&"min1 7 *$$$ unde: Cp 5 concentraia probei /&"min 5 "ariaia absorbanei pe minut Valori normale femei ,, ( #0& NI6l brbai 0& ( #0, NI6l copii n perioada cre+terii T 0&& NI6l Variaii fi iologice Cre+terea ni"elului seric al izoenzimei de origine osoas are loc n perioadele de cre+tere .p8n la #, ( #0 ani1, copiii +i mai ales adolescenii prezent8nd "alori duble sau c<iar triple fa de aduli .datorit formrii +i remanierii esutului osos n cadrul procesului de cre+tere al osului n lungime1. Variaii patologice U%$ este unica enzim care se determin uzual pentru diagnosticul afeciunilor osoase. 2 5 1$, nm

;alori crescute: ra<itism> <iperparatiroidism> boala )aget> tumori osteogene nsoite de reacie osteoblastic> metastaze osoase> osteoporoza .modificri nesemnificati"e1> perioada de "indecare a fracturilor> boala oaselor de marmur> osteomieloscleroz> colestaz de orice cauz .U%$ crescut denot staza biliar1: icter obstructi"> <epatit to2ic> metastaze <epatice neoplazice> ciroz biliar> tratament cu epileptice, clorpromazin, estrogeni> insuficien renal> cancer renal. ;alori sczute: <ipofosfatazie congenital .ra<itismul rezistent la tratamentul cu "itamina *1> <ipotiroidie> into2icaii cu plumb> deficit se"er de "itamina C.

Determinarea bilirubinei prin metoda Van den 9ergh direct sau rapid Principiul metodei Rilirubina se afl n ser sub form de bilirubin indirect .neconVugat, liber1, insolubil, legat de proteine +i de bilirubin direct .conVugat1, solubil. Rilirubina conVugat reacioneaz direct cu acidul sulfanilic diazotat form8nd un azopigment colorat. Rilirubina neconVugat .liber1 reacioneaz indirect cu acidul sulfanilic diazotat, numai dup ce a fost desfcut din legtura proteic +i solubilizat. n concluzie, prin tratarea serului direct cu acid sulfanilic diazotat comple2ul colorat format se datoreaz numai bilirubinei conVugate .directe1 iar prin tratarea prelungit a serului cu un accelerator .cofein, benzoat1 +i apoi cu acid sulfanilic diazotat comple2ul colorat format se datoreaz bilirubinei totale. %zopigmentul format are culoare ro+ie n mediu acid sau neutru +i culoare "erde?albastr n mediu alcalin. Se msoar e2tincia azopigmentului neutru, ro+u pentru bilirubina direct +i e2tincia azopigmentului alcalin, "erde?albastru pentru bilirubina total.

Proba Ser ne<emolizat Valori normale n mod normal bilirubina seric este reprezentat n principal de bilirubina neconVugat .indirect1, insolubil n ap, "e<iculat de serumalbumin. *atorit dimensiunilor mari, acest comple2 nu se filtreaz prin capilarele glomerulare, deci bilirubina este absent n urina normal. Rilirubina conVugat .direct1 este <idrosolubil +i are "alori mici atunci c8nd apare ser. Cele dou forme mpreun formeaz bilirubina total. Rilirubina total .RG1: &,#(# mg6d$ .#,0(#0,# Wmoli6$1 Rilirubina direct .R*1: ma2. &,2, mg6d$ .ma2. /,: Wmoli6$1 Rilirubina indirect se obine prin diferena ntre "alorile bilirubinei totale +i ale bilirubinei directe. $a nou?nscutul normal e2ist o imaturitate a N*) glucuroniltransferazei, enzim necesar formrii bilirubinei conVugate. ;aloarea bilirubinei serice cre+te p8n la 9 mg6#&& ml ser la /(4 zile dup na+tere. $a nou?nscuii prematuri "aloarea bilirubinei serice poate cre+te p8n la #2(#, mg6#&& m$ ser. %ceast "aloare este o entitate recunoscut ca icterul fiziologic al nou n!"cutului. Variaii patologice n cazurile n care bilirubinemia dep+e+te limitele superioare, bilirubina difuzeaz din s8nge n esuturi, produc8nd colorarea intens n galben a tegumentelor +i mucoaselor .sindrom icteric1. Icterul se manifest clinic la o bilirubinemie ce dep+e+te 2(2,, mg6dl. Cu e2ist o corelaie str8ns ntre ni"elul bilirubinemiei +i intensitatea icterului. Oecanismele implicate n apariia <iperbilirubinemiei sunt: <iperproducia .prin <emoliz e2cesi"1 de bilirubin indirect care conduce la icter <emolitic .pre<epatic6supra<epatic1 cu <iperbilirubinemie indirect .neconVugat1> insuficiena de captare, conVugare +i e2creie a bilirubinei necoVugate +i conVugate care conduce la icter <epatic cu <iperbilirubinemie indirect .neconVugat1 +i direct .conVugat1> deficitul de e"acuare a bilei n intestin care conduce la icter mecanic .post<epatic6sub<epatic1, obstructi" cu <iperbilirubinemie direct .conVugat1. %nomaliile genetice ale metabolismului bilirubinei sunt rare. n funcie de tipul de <iperbilirubinemie se nt8lnesc: sindroame ce e"olueaz cu <iperbilirubinemie neconVugat: sindromul Hilbert> sindromul Crigler?CaVVar> sindromul %rias> sindroame ce e"olueaz cu <iperbilirubinemie conVugat: sindromul *ubin?Xo<nson> sindromul !otor> sindromul stocrii <epatice.

;alori crescute bilirubin total anemie <emolitic cronic .cre+tere u+oar sub , mg6d$1> afeciuni <epatocelulare .cre+tere medie de #&(/& mg6d$1> colestaz intra sau e2tra<epatic .cre+tere se"er #&(4& mg6d$ ser p8n la #0&(#&&& mg6d$1. ;alori crescute bilirubin liber .neconVugat, indirect, pre<epatic1 ictere <emolitice> <epatite cronice> ciroze> colestaz> defecte enzimatice cu caracter familial n procesul de transformare a bilirubinei libere n bilirubin conVugat .sindromul Hilbert, sindrom Crigler?CaVVar1. ;alori crescute bilirubin conVugat .direct, post<epatic1: ictere mecanice> <epatite> ciroze> colestaz> n unele cazuri cu defecte familiale n procesul de e2creie al bilirubinei conVugate .sindrom *ubin ( Xo<nson1. ;alorile sczute ale bilirubinei nu au semnificaie clinic.

Do area vitaminei C
;itamina C se mai nume+te "itamina antiscorbutic. )rin structura sa, acidul ascorbic este un deri"at al <e2ozelor. Compusul biologic acti" are configuraia le"ogir: acid $ ( ascorbic.

#itamina $

%cidul ascorbic este un compus nesaturat, cu caracter acid datorit prezenei celor doi <idro2ili enolici capabili de a se disocia cu formarea de ioni de <idrogen, mai ales pe seama <idro2ilului din poziia /. 32istena dublei legturi confer acidului $?ascorbic capacitatea de a se o2ida re"ersibil cu formarea de acid $?de<idroascorbic care are acti"itatea "itaminic. )articiparea acidului ascorbic n diferitele procese bioc<imice este corelat cu proprietile sale reductoare, respecti" cu capacitatea acidului $?ascorbic .forma redus1, a acidului $?de<idroascorbic .forma o2idat1 +i a produsului su intermediar de a forma un sistem o2ido?reductor .redo21 care poate s cedeze +i s primeasc atomi de <idrogen. Uorma predominant n organism este cea redus, care este proteVat contra o2idrii de ctre glutation, cistein +i acid adenilic. Rol biochimic :i fi iologic *atorit proprietilor menionate, "itamina C asigur o desf+urare optim a proceselor de o2idoreducere celular, fiind un puternic agent reductor care neutralizeaz radicalii liberi. %re un efect protector asupra eritrocitelor, deoarece pre"ine o2idarea <emoglobinei. ;itamina C asigur structura +i funciile fibrobla+tilor, osteobla+tilor +i odontobla+tilor .celule ce sintetizeaz colagen1. %re rol de coenzim pentru aciunea unor o2idoreductaze +i <idrolaze care inter"in n sinteza colagenului .)!B, $YS1 +i catecolaminelor. Cre+te aprarea organismului la infecii microbiene +i "irale, precum +i fa de no2e: )b, Ag, benzen. ;ecesarul ilnic Cecesarul zilnic de "itamin C este de 4& ( 9& mg. Cecesarul cre+te la persoane care depun efort fizic intens sau +i desf+oar acti"itatea n frig. Sursele de "itamin C sunt legumele +i fructele proaspete. *e reinut este faptul c "itamina C este solubil +i u+or o2idabil> ea se pierde .inacti"eaz1 n timpul preparrii alimentelor. Carena !n vitamina C Carena de "itamin C conduce la dez"oltarea unei maladii specifice denumit "cor%ut. %feciunea se caracterizeaz prin perturbarea sintezei de colagen +i ruperea pereilor capilarelor, modificri ale esutului conVuncti" +i ale structurii fibrelor de colagen, alterri n procesul de formare a oaselor +i dinilor, fr8narea cre+terii, scderea rezistenei la infecii. Sindromul <emoragic se remarc prin apariia de pete+ii pe tegumente +i mucoase, gingi"oragii, epista2is, re"rsate sanguine intraarticulare +i intramusculare. )apilele interdentare +i gingiile sunt tumefiate, s8ngereaz cu u+urin, se ulcereaz +i se infecteaz, aVung8nd la denudarea rdcinii dinilor .dinii de"in mobili +i cad1. Cicatrizarea plgilor se face defectuos .trama de fibr conVuncti" e rar +i foarte puin rezistent1. Reacia de identificare a vitaminei C cu a otat de argint Principiul metodei ;itamina C, datorit proprietii de a se o2ida u+or, reduce srurile de argint la %g metalic care se depune, form8nd oglinda de argint.

Tehnica de lucru ntr?o eprubet mare se pipeteaz: # ml %gCB/ ,= &,, ml soluie CA/ 2 ml soluie "itamina C Coninutul eprubetei se amestec +i se fierbe timp de , ( #& minute. Se obser" cum se depune argintul pe pereii eprubetei, form8nd oglinda de argint.

Do area vitaminei PP '9*)

;itamina R/ se mai nume+te niacina sau factor &e pre'enire a pelagrei. %parine comple2ului "itaminic R +i pro"ine din piridin. *in punct de "edere c<imic, e2ist 2 forme .n alimente1: acidul piridin?/?carbo2ilic .acid nicotinic ( "itamina )1 +i amida sa denumit nicotinamida ( "itamina )) .forma acti"1.

(icotinami&a n organism aproape toat cantitatea se gse+te sub forma amidei.

'it )* +i ),

4& mg triptofan

# mg "itamin ))

Rol biochimic :i fi iologic n esuturile animale aproape ntreaga cantitate de acid nicotic se gse+te sub forma amidei sale ( nicotinamida, care intr n structura a dou nucleotide .enzimele niacinice1 cu rol n respiraia celular: C%*+ ( nicotinamidadenindinucleotid +i C%*)+ ( nicotinamidadenindinucleotidfosfat. )rin nucleul lor piridinic, C%*+ +i C%*)+ sunt capabile de a participa la reacii de o2idoreducere celular prin transfer de <idrogen. C%*+ +i C%*)+ constituie sisteme coenzimatice .cofermeni1 ale unor importante enzime de o2idoreducere din organism cu rol n metabolismul glucidic, protidic +i lipidic, precum +i n metabolismul alcoolului etilic. )rin unirea lor cu apoenzimele specifice, catalizeaz reacii de transfer a <idrogenului de pe un strat donor pe unul acceptor. Cea mai important funcie biologic a coenzimelor nicotinamidice const n participarea lor la transferul electronilor +i <idrogenului de la substratele care se o2ideaz la o2igen n procesul de respiraie celular.

!olul deosebit al "itaminei )) n metabolism se traduce +i prin participarea coenzimelor nicotinamidice la structura unor importante enzime: alcoolde<idrogenaze> alde<idde<idrogenaze> glutamatde<idrogenaze> fosfogliceroalde<idde<idrogenaze> lactatde<idrogenaz> malatde<idrogenaz. ;ecesarul ilnic Cecesarul zilnic de "itamin )) este de ,& mg. Sursele de "itamin )) sunt reprezentate de carne +i preparate din carne, lapte, br8nz, ou, cantitate mai mic n legume, fructe, legume uscate +i cereale. Carena !n vitamina PP %nsamblul strilor patologice determinate de deficitul de nicotinamid constituie boala denumit pelagr! +i este datorat profundelor dereglri ale metabolismului proteinelor, lipidelor +i glucidelor. %feciunea este o policaren care apare nr?un regim monoton cu mmlig +i srac n alimente de origine animal. )elagra poart denumirea +i de boala celor / *: dermatit, diaree, demen. *ebutul este nespecific cu apatie, astenie, diaree. )rim"ara apare un eritem pe tegumentele descoperite, care apoi se reduce, iar tegumentele rm8n pigmentate .Epiele de crocodilZ1. Sunt afectate +i mucoasele care mbrac aspecte caracteristice: mucoasa lingual ( Elimba n <art geograficZ> mucoasa gastric ( gastrit cu anaciditate> mucoasa intestinal ( enterocolit cu diaree. )elagra se manifest prin simptome ca: iritabilitate, an2ietate, inapeten, dereglri digesti"e, dermatologice +i ner"oase, n formele se"ere apr8nd delir, agitaie, <alucinaii. Do area vitaminei PP prin metoda volumetric Principiul metodei ;itamina )) n mediu slab alcalin precipit cu sulfatul de cupru, care se adaug n e2ces. 32cesul de sulfat de cupru n mediu acid se titreaz iodometric, n paralel cu o prob n alb, n prezena soluiei de amidon.

3dentificarea vitaminei 9+
;itamina R4 se mai nume+te piri&o-ina. *in punct de "edere al structurii c<imice, pirido2ina reprezint 2?metil, /?<idro2i, :,,?di<idro2imetil pirin. )e l8ng pirido2in, mai posed acti"itate "itaminic nc doi deri"ai ai /?<idro2ipirinei care au n poziia : a inelului piridinic o grupare alde<idic sau aminic +i care se numesc piri&o-al, respecti" piri&o-amin!. Goi ace+ti trei compu+i poart denumirea comun de "itamina R4.

Rol biochimic :i fi iologic n alimente "itamina R4 se gse+te cel mai mult sub form de pirido2in. n organism aceasta se esterific cu acidul fosforic, rezult8nd pirido2alfosfat care reprezint cofermentul multor enzime.

Piri&o-ina ;itamina R4 are rol n metabolismul aminoacizilor> intr8nd n structura unei serii de enzime .transaminaze +i decarbo2ilaze1 catalizeaz importante reacii de transformare a aminoacizilor sub form coenzimatic de pirido2alfosfat. )irido2alfosfatul constituie componenta enzimelor ce particip la decarbo2ilarea +i dezaminarea aminoacizilor. ;itamina R4 are rol n metabolismul glicogenului, prin funcia catalitic a pirido2alfosfatului asupra fosforilazei .enzim ce Voac un rol central n metabolismul glicogenului1. Se presupune participarea acestei enzime +i n metabolismul lipidelor .metabolismul acidului linoleic n acid ara<idonic1. ;ecesarul ilnic Cecesarul zilnic de "itamin R4 este de #,, ( 2 mg. Sursele de "itamin R4 sunt reprezentate de alimente de origine animal .ficat, rinic<i1, droVdia de bere, tr8e, germeni gr8u, soia, alune, nuci, pepene galben. Carena de vitamin 9+ *ez"oltarea <ipo"itaminozei R4 este legat at8t de aportul su insuficient n <ran, c8t +i de o dereglare a biosintezei pirido2alfosfatului n organism. *eficiena n "itamina R4 apare la adulii tratai cu AIC .efect anti"itaminic R 41 +i este nsoit de apariia de: dermatite, stomatite, conVuncti"ite> spasme, con"ulsii> anemie> anomalii ale metabolismului triptofanului. *eficiena poate s apar +i la copiii alimentai cu lapte praf +i se manifest prin: con"ulsii> modificri 33H> anemie prin scderea sintezei <emului>

nt8rzierea cre+terii. Reacia de identificare a vitaminei 9+ cu reactivul 8olin < Cioc!lteu Principiul metodei *in cei trei compu+i care au n comun nucleul piridinic .pirido2alul, pirido2ina, pirido2amina1, doar pirido2ina n prezena carbonatului de sodiu +i a reacti"ului Uolin ( Cioclteu dez"olt o coloraie albastr.

3dentificarea vitaminei &

;itamina % se mai nume+te retinol (e-teroftol). ;itaminele % sunt deri"ai ai carotenilor. Carotenii reprezint pro"itamine %. n alimente se gse+te "itamina % 5 retinol 6 pro"itamina % 5 caroteni. n alimente retinolii .numai n produsele animale1 se prezint sub dou forme structurale denumite retinol ."itamina %#1 +i de<idroretinol ."itamina %21.

#itamina A Sinteza "itaminelor % are loc n intestin sau ficat, sub aciunea unei enzime numit carotenaz. n esuturile organismului, de e2emplu n ficat, "itaminele % se nt8lnesc frec"ent sub form esterificat cu di"er+i acizi .acetic, palmitic, succinic1. 3sterii au o acti"itate biologic mai puternic dec8t "itaminele libere. n pigmentul retinian se gse+te o <eteroprotein numit ro&op"in! .n celulele cu bastona+e1 care reprezint purpurul retinian .include opsina ( o protein +i retinina ( alde<ida "itaminei %1. Rol biochimic :i fi iologic !etinolii ndeplinesc funcii bioc<imice +i fiziologice multiple: stimuleaz procesul de cre+tere> pre"in apariia unor leziuni ale esutului epitelial . @eratinizarea derm +i mucoase1> pre"in scderea rezistenei la infecii> pre"in tulburrile n formarea sc<eletului +i nt8rzierea cre+terii. B mare importan are participarea "itaminei % la procesele de o2ido?reducere, deoarece ea este capabil de a forma pero2izi care accelereaz o2idarea altor compu+i. !etinolii inter"in n funcionarea normal a oc<iului respecti" n bioc<imia procesului "izual. !odopsina se descompune la lumin +i se reface la ntuneric asigur8nd "ederea n lumin crepuscular.

;ecesarul ilnic Cecesarul zilnic de "itamin %: adult: : ( ,&&& NI copii: 2,&& ( :,&& NI gra"ide: 4&&& ( 9&&& NI Sursele de "itamina % .retinolii1 sunt reprezentate de ficat, pe+te gras, lapte +i semipreparate, glbenu+ de ou, unt. )ro"itaminele % .carotenii1 care au un coeficient sczut de utilizare se gsesc n morco"i, tomate, salat, caise, piersici, banane, "i+ine. Carena vitaminei & Carena n "itamin % apare n: regimul srac n caroten> stri de denutriie> insuficien pancreatic> insuficien <epatocelular> obstrucie biliar. $ipsa sau insuficiena "itaminelor % n alimentaie conduce la: tulburri oculare: dereglri ale adaptrii la ntuneric: <emeralopie .orbire nocturn Eorbul ginilorZ1> dereglri degenerati"e ale oc<iului> 2eroftalmie> @eratomalacie> <iper@eratoz cu tegumente +i mucoase aspre, ngro+ate .@eratinizate1, care prezint cruste +i fisuri: tegumente cu aspect de Epiele de ginZ, Ebroasc r8ioasZ> mucoase afectate: bucal, gingi"al, conVuncti"al, aparat respirator, ci urogenitale> infecii> malformaii fetale la gra"ide. =ipervitamino a & Aiper"itaminoza % .<ipercarotenemia1 apare n: regimul bogat n caroten> <iperlipemie pro"ocat de: <ipotiroidie> diabet> ateromatoz. Aiper"itaminoza % este to2ic pentru: SCC .ata2ie, anore2ie, <ipertensiune intracranian1> ficat .<epatomegalie, fibroz1> epitelii> dez"oltarea embrionului.

n into2icaia acut cu "itamina % apar: ameeli> cefalee> somnolen. n into2icaia cronic cu "itamina % apar: pierderi n greutate> tegumente uscate, galbene> leziuni osoase. Reacia de identificare a vitaminei & cu acid tricloracetic Principiul metodei ;itaminele % dau cu acidul tricloracetic o coloraie galben?portocalie care "ireaz n albastru.