Sunteți pe pagina 1din 7

Curs Biofizica MG 2008-2009 Fotobiologie

Radiaii. Noiuni generale. Elemente de fotobiologie Radiaie = propagarea n spaiu a unor cmpuri de fore sub form de unde sau a unor fluxuri de particule. Clasificarea radiaiilor Se face dup mai multe criterii: 1. n funcie de natura lor: - Radiaii electromagnetice (EM) propagarea sub form de unde transversale a undelor electromagnetice - Elastice: propagarea sub form de unde longitudinale a vibraiilor unui mediu elastic - Corpusculare: fascicule de particule de mare energie 2. n funcie de energie, n raport efectul lor asupra substanei cu care interacioneaz: - Ionizante cele care sunt capabile s produc ionizarea, datorit energiei mari - Neionizante radiaii de energie mic, incapabile s produc ionizarea. Dualismul und - corpuscul Unda reprezint propagarea n spaiu a variaiei unui parametru fizic. Poate fi declanat de o micare oscilatorie a unor particule materiale, dar se propag n spaiu la distan, particulele rmnnd s oscileze n jurul unor poziii fixe. Prin intermediul interaciunilor fizice specifice, unda determin micri oscilatorii sau alte efecte asupra particulelor aflate n calea ei. Undele pot fi transversale (oscilaia se propag perpendicular pe direcia de naintare a undei; de exemplu lumina und electromagnetic transversal) sau longitudinale (oscilaia se propag paralel cu direcia de naintare a undei; de exemplu unda sonor und mecanic longitudinal). Viteza de propagare a undei difer de viteza de oscilaie a particulelor materiale. Pornind de la incapacitatea fizicii clasice de a explica unele fenomene, de exemplu efectul fotoelectric sau radiaia corpului negru, fizica cuantic modern asociaz fiecrei unde o particul fr masa de repaus (fotonul pentru unda electromagnetic) dualitatea und - corpuscul. Manifestrile ondulatorii sunt evidente la frecvene joase, cele corpusculare la frecvene nalte. Interaciunea radiaiilor cu substana La interaciunea cu substana, radiaia cedeaz o parte din energia sa, n general conform unei legi de absorbie exponeniale: I = I0e-kd unde I0 reprezint intensitatea incident, I intensitatea emergent, d grosimea stratului de substan strbtut, k coeficient specific de atenuare (acesta depinde de natura radiaiei i de caracteristicile substanei) Energia cedat se transform n alte forme de energie, producnd efecte diferite cu att mai importante cu ct energia absorbit de substan este mai mare. Interaciunea radiaie - substan se realizeaz la diferite nivele de organizare a materialului absorbant: - La nivel molecular efecte termice, excitri vibraionale i rotaionale ale moleculelor, reacii chimice; - La nivel atomic, producnd excitri ale ionilor sau ionizri; - La nivel nuclear excitri ale nucleului sau declanarea unor reacii nucleare.
1

Curs Biofizica MG 2008-2009 Fotobiologie

Generarea i propagarea radiaiilor electromagnetice Radiaiile electromagnetice pot fi produse de micri oscilatorii ale unor sarcini electrice. Cmpul electrostatic produs n jurul unei sarcini electrice Q, aflate n repaus, la distana r are valoarea: n cazul n care sarcina efectueaz o micare oscilatorie, intensitatea cmpului electric variaz. Simultan, datorit sarcinii electrice n micare apare i un cmp magnetic a crui inducie B este orientat perpendicular pe directia cmpului electric E. Prin urmare, o sarcin electric oscilant creeaz un cmp electric i un cmp magnetic reciproc perpendiculare. Maxwell a artat c cele dou cmpuri se propag n spaiu cu vitez constant (viteza luminii n vid) pe o direcie perpendicular pe cei doi vectori (Fig. 1) und electromagnetic transversal. Parametrii caracteristici undelor electromagnetice transversale Mrimile caracteristice undelor sunt perioada T (timpul dup care oscilaia se repet), lungimea de und (spaiul parcurs ntr-un interval de timp egal cu o perioad T) i frecvena (inversul perioadei T). Relaiile care exist ntre mrimile caracteristice undelor sunt urmtoarele: unde c reprezint viteza de propagare a undei. Undele electromagnetice sunt unde transversale care au component magnetic i o component electric, vectorii electric i magnetic fiind perpendiculari unul pe cellalt i pe direcia de propagare (Fig. 1). Din punct de vedere al caracteristicilor ondulatorii spectrul radiaiilor electromagnetice se ntinde de la undele radio lungi caracterizate prin frecvene mici i lungimi de und mari (km) pn la razele de mare energie, de frecvene mari i lungimi de und mici () (Fig. 2). Conform relaiei lui Planck, energia unei unde electromagnetice este: E = h = hc/ unde h = 6,62 10-34 Js, constanta lui Planck, iar c = 3 108 m/s, viteza luminii n vid.

Fig. 1 Componentele undei electromagnetice transversale

Curs Biofizica MG 2008-2009 Fotobiologie

Fig. 2 Spectrul radiaiilor electromagnetice Clasificarea radiaiilor electromagnetice Din punct de vedere al energiei transportate, radiaiile electromagnetice se clasific n: I. Radiaii neionizante II. Radiaii ionizante La interacia cu substana, radiaiile electromagnetice cedeaz energie atomilor i moleculelor. Efectele interaciei pot fi: - creterea energiei de agitaie termic a atomilor i moleculelor - excitarea atomilor i moleculelor (electronii ce intr n alctuirea acestora pot trece pe nivele de energie superioare, tranziiile fiind cuantificate) - ionizarea atomilor i moleculelor (extragerea electronilor din nveliurile electronice ale acestora). Elemente de fotobiologie Fotobiologia studiaz interaciunea radiaiilor electromagnetice neionizante cu sistemele biologice. Energia de ionizare a principalilor atomi care intr n structura biomoleculelor este: 13,54 eV pentru hidrogen, 13,17 pentru oxigen, 11,24 pentru carbon i 14,51 pentru azot (1 eV = 1,6 10-19 J). Se observ c energia cea mai mic de ionizare este cea pentru carbon. Se poate calcula lungimea de und a radiaiei care are energia suficient pentru a produce ionizarea carbonului: E = hc/ = hc/E = 6,62 10-34 3 108/11,241,6 10-19= 110 nm n spectrul radiaiilor electromagnetice, numai radiaiile X i ndeplinesc condiia ca lungimea de und s fie mai mic de 100 nm, deci numai acestea pot produce ionizri ale principalilor atomi din componena materiei vii. De aceea, radiaiile X i se numesc radiaii ionizante. Radiaiile cu lungimea de und mai mic de 100 nm , ncepnd cu UV (radiaii ultraviolete) extrem(100-190 nm) i mergnd spre undele radio lungi sunt radiaii neionizante. Radiaiile neionizante din domeniul radiaiilor vizibile i ale celor cu lungimi de und apropiate de acestea i interacia lor cu substana constituie obiectul de studiu al
3

Curs Biofizica MG 2008-2009 Fotobiologie

fotobiologiei. Ele sunt radiaii cu care aproape toate sistemele vii convieuiesc i sunt absorbite selectiv de ctre moleculele componente ale sistemelor vii. Interaciunea radiaiilor neionizante cu substana Se realizeaz prin: 1. Transferul energiei undelor electromagnetice ctre molecule. Energia total a acesora va crete: E = Ee + Ev + Er Ee energia electronilor Ev energia de vibraie Er energia de rotaie Prin creterea energiilor de rotaie i vibraie are loc nclzirea substanei (creterea agitaiei termice): E = Ev + Er Radiaiile infraroii (IR) pot mri numai energiile de vibraie i rotaie ale moleculelor, pe cnd radiaiile ultraviolete pot mri toate tipurile de energie. 2. Transferul energiei undelor electromagnetice ctre electronii periferici ai atomilor i moleculelor, (Ee. Prin acest transfer se produce excitarea atomilor i moleculelor, respectiv trecerea lor pe nivele de energie superioare. Conform principiului de incertitudine al lui Heisenberg, electronii nu pot rmne mult timp n stare excitat (10-8 10-6 s n starea de singlet cu spinii orientai antiparalel- i 10-3 100 s n starea de triplet cu spinii orientai paralel). Dup aceste interval de timp, electronii se dezexcit, iar dezexcitarea poate fi de dou feluri: a dezexcitare radiativ b dezexcitare neradiativ. Dezexcitarea radiativ este numit i fotoluminescen. Absorbia fotonului este urmat de emisia unui foton cu o lungime de und mai mare sau egal cu cea a fotonului absorbit. Exist dou tipuri de fotoluminescen: fluorescena (reemisia din starea singlet) i fosforescena (reemisia din starea triplet). Atunci cnd lungimea de und n reemisie este egal cu cea a fotonului absorbit, fluorescena se numete de rezonan. Durata fluorescenei este foarte mic, practic emisia se face n acelai timp cu excitarea. n fosforescen emisia continu i dup ncetarea excitrii. 3. Transferul energiei undelor electromagnetice ctre molecule, avnd drept rezultat creterea reactivitii chimice a acestora ori producerea unor reacii fotochimice. Dintre aceste reacii fotochimice se pot meniona: izomerizri i rearanjri interne ale moleculei, polimerizri sau combinri ntre molecule, fotosensibilizri. Exemple Reacia cu o alt molecul, reacie care altfel nu s-ar fi produs (M* - molecula fotoexcitat): M* + A D Reacia de dimerizare: M* + M MM Fotosensibilizarea - energia absorbit de M este transferat speciei N care devine reactiv: M* + N M + N* Radiaiile respective sunt absorbite de ctre grupri speciale ale unor molecule, grupri care se numesc cromofori. Exemple de grupri cromofore: - N = N - , = C = O, - N = O
4

Curs Biofizica MG 2008-2009 Fotobiologie

Aceste reacii fotochimice se desfoar conform unor legi. Legile fotochimiei 1. Legea Grotthus-Draper: radiaia trebuie s fie absorbit de o molecul nainte ca reacia fotochimic s aib loc; dac substana iradiat nu absoarbe radiaii, nu se produce reacia fotochimic. 2. Legea Stark-Einstein: radiaia absorbit nu duce n mod obligatoriu la o reacie fotochimic, dac totui se produce reacia, pentru fiecare molecul transformat este necesar un singur foton. n legtur cu aceasta se definete randamentul cuantic : = Nm/Nf Nm numrul de molecule (respectiv moli) care au reacionat Nf numrul de fotoni (respectiv Einsteini) care au fost absorbii 1 Einstein = NA * h 3. Legea Bunsen-Roscoe: cantitatea de substan (Q) care intr ntr-o reacie fotochimic este proporional cu fluxul de energie radiant () i cu timpul de iradiere (t) Q=kt Rezult c viteza unei reacii fotochimice este proporional cu fluxul incident. n sistemele biologice efectele la nivel molecular determin efectele la nivel celular sau la cel al organismului. Efectele radiaiilor vizibile Fotosinteza Const n conversia energiei radiante n energie chimic folosit n sinteza unor molecule complexe. Celulele plantelor verzi conin organite celulare numite cloroplaste, n care se afl pigmeni clorofilieni i carotenoizi. Clorofilele sunt molecule complexe care conin grupri cromofore n sisteme de duble legturi conjugate. Prin absorbia luminii de ctre gruprile cromofore se produce excitarea electronilor pe nivele superioare de energie. Revenirea lor pe nivelul fundamental se face n trepte, de-a lungul lanului transportor de electroni. n fiecare treapt are loc o reacie de fosforilare a ADP cu formare de ATP. Astfel, energia luminoas este transformat n energie chimic nmagazinat n ATP. Fotosinteza se realizeaz prin dou tipuri de reacii: - reacii la lumin, direct dependente de energia luminoas - reacii la ntuneric, n absena luminii ntr-o variant foarte simplificat, reaciile la lumin sunt cele de fotoliz a apei, de formare a NADPH (nicotinamid-adenin dinucleotid-difosfat) i a ATP, n timp ce n reaciile la ntuneric are loc reducerea CO2 cu formarea de polimeri hexozici. 2 H2O + h O2 + 4H+ + 4 e2 NADP + 2 H+ + 2e- 2 NADPH CO2 + 2 NADPH + 2 H+ + 2e- (CH2O) + H2O + 2 NADP h n(H2O) + nCO2 (CH2O)n + nO2 Ionii de H se fixeaz pe NADP i reduc la NADPH, ionii oxidril se combin ntre ei genernd ap, oxigen i electroni care trec de-a lungul lanului de transportori cednd treptat energia pentru sinteza ATP. Bilanul n sinteza moleculei de glucoz este: h C6H12O6 + 6O2 6H2O + 6CO2
5

Curs Biofizica MG 2008-2009 Fotobiologie

Aceste reacii se produc n nite structuri lamelare (discuri lipoproteice) ale cloroplastelor numite membrane tilacoide sau tilacoizi. Fotorecepia cu ajutorul pigmenilor rodopsinici Rodopsinele vizuale, rodopsina i iodopsinele, fac parte din clasa proteinelor retinale, al cror cromofor este aldehida vitaminei A numit retinal. Sub aciunea radiaiilor luminoase vizibile se produce izomerizarea retinalului din configuraia 11-cis n cea all-trans i desprinderea acestuia de opsin. n acest mod se produce activarea rodopsinei i se declaneaz ciclul de reacii biochimice la ntuneric. Energia radiaiei luminoase este utilizat pentru declanarea excitaiei vizuale. Pentru ntreaga cascad de reacii biochimice ce urmeaz, i care se ncheie cu nchiderea canalelor de Na i Ca i hiperpolarizarea membranei, este utilizat energia metabolic. Efectele radiaiilor ultraviolete (UV) Radiaiile UV se situeaz n spectru dincolo de radiaiile vizibile de lungime de und mic (violet) i din punct de vedere al efectelor biologice sunt clasificate astfel: UV-A, cu lungimea de und cuprins ntre 315-400 nm UV-B, cu lungimea de und cuprins ntre 280 - 315 nm UV-C, cu lungimea de und mai mic de 280 nm. Cea mai mic energie o au radiaiile UV-A i cea mai mare UV-C. Energia radiaiilor UV se afl n domeniul 3-7 eV, deci este mai mic dect energia de ionizare a principalilor atomi constitueni ai biomoleculelor. Radiaiile UV pot produce ruperi de legturi chimice i reacii fotochimice. Dintre efectele radiaiilor UV se pot meniona urmtoarele: - Dimerizarea unor perechi de baze azotate (ex. dimerizarea timinei) cu sudura lanurilor de ADN n locul respectiv. Aceast sudur mpiedic copierea informaiei de pe ADN pe ARN. Una din consecinele dimerizrii este aciunea bactericid a UV ndeprtat (lungimi de und mai mici dect 300 nm), prin mpiedicarea transcripiei este oprit diviziunea celular. Demonstrarea acestui lucru se poate face prin fotoreactivare: bacteriile iradiate cu UV sunt imediat iradiate cu radiaii vizibile (380-450 nm). Se activeaz prin aceasta o enzim care desface dimerii timinei. Reactivarea nu se face ns 100%, eficacitatea procesului fiind determinat prin intermediul unei curbe doz-efect. - Efecte asupra ADN: formare de dimeri, hidratarea bazelor pirimidinice, ruperea legturilor de H, ruperea lanului de ADN, formarea unor legturi cu proteinele (ADN-protein cross-links). - Producere de eritem (arsuri tegumentare) UV-B (290-320 nm). Locul de aciune se presupune a fi fosfolipidele din membranele organitelor celulare care conin hidrolaze, n special lipozomii din celulele epidermice. Tot n aceast zon se observ i efectul cancerigen al radiaiilor UV, 91% din cancerele pielii, n special melanoamele, se afl n zone cu expunere solar mare. Cele mai periculoase sunt radiaiile cu 300 nm. - Pigmentarea pielii (UV-A, 320-420 nm) se datoreaz creterii concentraiei de melanin din piele, sectretat de melanocite. Melanocitele deriv, din punct de vedere embriologic, din sistemul nervos i au prelungiri dendritice prin care injecteaz melanina n celelalte celule ale epidermei. Melanina provine din oxidarea tirozinei, catalizat de tirozinaz. Spectrul de aciune se consider a fi 300 420 nm, acestui domeniu corespunzndu-i ns numai oxidarea unui leucoderivat al melaninei, care d o pigmentare lejer i precoce. Spectrul de formare a melaninei coincide cu spectrul de aciune al eritemului. Pigmentarea datorat melaninei este mult mai intens i mai tardiv reprezentnd o protecie eficient mpotriva eritemului. Dup 10-12 zile de expunere la soare 90% din radiaiile UV sunt absorbite.
6

Curs Biofizica MG 2008-2009 Fotobiologie

- Transformarea ergosterolului n vitamina D2 (antirahitic). Spectrul de aciune are un maximum la 280 nm. Iradierea n UV este folosit pentru prevenirea rahitismului, fiind suficient o doz de 1/20 din cea eritemal, aplicat zilnic pe o suprafa a pielii de 200 cm ptrai. - Inflamaia corneei numit keratit putndu-se ajunge la cecitate tranzitorie sau chiar definitiv. Oftalmia este dat de UV reflectate de zpad, chiar i pe vreme ceoas, la mare altitudine, de aceea se recomand ochelari din sticl special pentru protecie. Protecia cea mai important fa de aciunea nociv a UV de energii mari este realizat prin stratul de ozon (O3) din partea superioar a atmosferei. Oxigenul absoarbe radiaiile UV-C i se produc reaciile: O2 + h O + O O + O2 O3 O - radicali liberi foarte nocivi i activi Ozonul rezultat absoarbe radiaiile UV-B cu lungimi de und mai mici de 300 nm care sunt foarte duntoare pentru organismele vii. h + O3 O2 + O Fotoproduii rezultai reintr n reaciile anterioare. n acest fel radiaiile UV duc la formarea de ozon n straturile superioare ale atmosferei. Cea mai bun protecie se realizeaz prin evitarea expunerii la UV. Se pot folosi ecrane protectoare cum ar fi ochelarii speciali din substane absorbante (colir) prentru protecia ochilor i creme pentru piele. Principalele substane folosite sunt acidul paraaminobenzonic (absoarbe ntre 290 i 315 nm), benzotenona care absoarbe ntregul spectru UV, sau preparate opace pe baz de oxid de zinc sau de titan care asigur o protecie total.