Fisiología de la sangre

Hematologia
FISIOLOGIA DE LOS ERITROCITOS
 Fisiología de la Sangre

Introducción: Importancia de la función del sist hemático

⋆ La Sangre forma parte del sistema circulatorio, está contenida en los

vasos sanguíneos.
▸ Se define como Tejido líquido del organismo.
⋆ Funciones:
▸ 1. Transporte
▸ 2. Hemostasia
▸ 3.Inmunidad (comunicación)
▸ 4. Homeostasis de líquidos (compartimiento extracelular)
▸ 5. Homeostasis de temperatura
▸ 6. Equilibrio ácido-base
⋆ A) Plasma
▸ Componentes del plasma :
– Agua
– Electrolitos
– Proteínas : albúmina, globulinas, fibrinógeno
⋆ B) Células
▸ Serie roja (eritroide)
▸ Serie blanca (leucocitos)
– Granulocitos (Neutros, Eos, Baso)
– Agranulocitos (Linfocitos B, T y NK , Monocitos)
▸ Serie plaquetaria (trombocitos)
Elementos formes de la sangre (células)
Valores Normales
VALORES NORMALES
 Eritrocitos
Vamos a REVISAR

⋆ Génesis
▸ Ontogenia o eritropoyesis
⋆ Síntesis de Hemoglobina
⋆ Metabolismo del Hierro
⋆ Funciones del eritrocito
 Hemopoyesis
⋆ Lugar de la hemopoyesis
▸ MOR, ¿porqué ahí?
▸ Ganglios linfáticos

⋆ Las CsT son pate del sistema hematopoyético y

retículoendotelial.
⋆ Dan origen a células sanguíneas especializadas
⋆ La M.O. consiste de :
▸ Cs del estroma (estromales)

– Adipocitos, fibroblastos, endoteliales, MQ

– Producen las proteínas de la matriz y
factores de crecimiento para la
supervivencia de la célula tallo
▸ Cs Tallo hematopoyéticas.
Células de la Médula Ósea
 Eritrocitos

Generalidades (1)

⋆ El eritrón humano es un tejido altamente especializado responsable

del transporte de O2 (y de hidrogeniones).
⋆ Las células precursoras de la Med ósea bajo regulación humoral y
celular, generan continuamente el número requerido de eritrocitos
circulantes maduros.
⋆ Carecen de núcleo y mitocondria, su sistema metabólico carece de
capacidad para generar ATP
⋆ Emplean el ciclo de Embden- Meyerhoff (2,3 DPG)
⋆ Asistida por varios ligandos, la hemoglobina dentro del GR libera
oxígeno (no todo) en tensiones suficientes para permitir el trabajo de
los sistemas generadores de energía de los tejidos corporales.
Glucólisis Anaeróbica
Vía de Embden-Meyerhoff
2-3 BPG o 2,3-DPG
 Eritrocitos

Generalidades (2)

⋆Forma: Discos bicóncavos., producidos en la médula ósea roja de los

huesos esponjosos (esternon, costillas, vértebras, pelvis, cráneo)
⋆Durante la eritropoyesis pierden el núcleo, sintetizan hemoglobina, se
reducen de tamaño, pierden la maquinaria celular.
⋆Vida media 120 días.
⋆Se destruyen en el bazo (hemólisis extravascular),
⋆Sus desechos son metabolizados y eliminados en el hígado algunos como
bilirrubinas
⋆Se producen 2.5 mill de eritrocitos cada segundo
 Ontogenia inicial

⋆ La hamopoyesis definitiva deriva de una población de c.tallo

hemangiocitoblastos
⋆ Precursoras comunes de Cs endoteliales y hematopoyéticas
⋆ Desde las 6 semanas gasta 6-7 meses de viu el bazo y el hígado son los
órganos hematopoyéticos principales, contínuan activos hasta 2 semanas
posparto.
⋆ Desde 6-7 meses de la vida fetal la MO es el órgano hemopoyético
principal.
⋆ En la infancia toda la MO es hemopoyética, progresivamente se torna
grasa, el proceso puede ser reversible.
 Células Tallo
⋆ Las células embrionarias son
TUTIPOTENCIALES
⋆ En el adulto (hasta ahora) las células
tallo son pluripotenciales y pueden
generar varios tipos de tejidos
(neuronas, hígado, músculo ...
hematopoyéticas)
 Hematopoyesis (extrauterina)

⋆ Inicia con una célula pluripotencial

⋆ Es rara; 1 en 20 mill de células
nucleadas de la MO
⋆ Tiene la apariencia de un linfocito
maduro mediano
⋆ Una célula pluripotencial puede
producir 106 células maduras después
de 20 divisiones
⋆ Las pruebas inmunológicas
demuestran : CD 34+ CD 38 -
 Comprometida

⋆ Cel Tallo Pluripotencial (hemangiocitoblasto)

⋆ Puede dar lugar a dos líneas celulares:
▸ Serie linfoide (linfocitos)
▸ Serie Mieloide CFU-GEMM (granulocitos,
eritrocitos monocitos, megacariocitos)
Divisones del hemocitoblasto
dan lugar a las células:
mieloides y linfoides
Regulación de Hematopoyesis
 Citokinas y hematopoyesis

Investigar el rol de
Citokinas en la
hematopoyesis
(regulación de la
hematopoyesis)
 Eritrocitos

Eritropoyesis

⋆ Ontogenia: El tejido eritropoyético

se origina en el mesénquima del
saco vitelino, de ahí durante la vida
fetal cambia al hígado, y bazo,
eventualmente se mueve hacia su
sitio permanente, en la cavidad
medular del esqueleto distal al
axial. El proceso puede ser
reversible. Dura 6-8 días.
 Eritrocitos

Eritropoyesis
Feto 0-2 meses; saco vitelino

Feto 2-7 meses; bazo, hígado

Feto 5-9 meses; médula ósea

Niños MO de todos los huesos

Adultos Vértebras, costillas, esternon,

cráneo, sacro, pelvis, fémur
proximal
 Eritrocitos
Eritropoyesis
⋆ Genealogía: Todas las céls
hematopoyéticas derivan de un
("pool") fondo o reserva común de
células tallo pluripotenciales (stem
cells).
Tienen capacidad
de autorenovarse (tienen aspecto
de célula mononuclear pequeña
parecida al linfocito).
⋆ Las células pluripotenciales son las
primeras de una secuencia de
pasos de maduración.
Los pasos son regulados por
hormonas y citokinas
(EPO, IL-1., IL-3., IL-6., GM-CSF)
 Estímulos para la eritropoyesis

⋆ La hipoxia (pO2 < 50 mmHg) es detectada en los genes de las células

intersticiales del riñón
⋆ Inicia la transcipción - traducción del gen de la EPO
⋆ EPO pertenece a la superfamilia de las citokinas
Efectos de la EPO
Eritropoyesis
 Eritropoyesis
Etapas
⋆ a) Maduración temprana:
⋆ b) Maduración intermedia:
⋆ c) Estadío final:
 Regulación de la eritropoyesis

⋆ 1. Las células renales sensan la hipoxia

⋆ Esto activa en el DNA el gen EPO
⋆ Inicia el proceso de transcripción-
traducción del DNA➙RNAm➙EPO
⋆ 2. EPO➔MOR➔ Células progenitoras
⋆ 3. Desarrollo, maduración, Eritrocitos
⋆ 4. Corrección de la hipoxia
⋆ 5. Se detiene la eritropoyesis
Célula Tallo

0 15 19 21
⋆ La activación de los genes
da lugar a :
▸ Supervicencia,
diferenciación,
proliferación y maduración
de los progenitores y
precursores de los
eritrocitos
Célula Tallo BFU-E CFU-E

0 15 19 21
 Pro-
Célula Tallo BFU-E CFU-E
Eritroblasto

0 15 19 21
 Eritropoyesis

⋆ El PROERITOBLASTO (Normoblasto) Es el elemento precursor eritroide

mas joven.
⋆ Precursor nucleados visibles caracterizables por:
⋆ Citoplasma basófilo, con un halo perinuclear, su cromatina densa y
carencia de gránulos citoplásmicos, en sus etapas finales sintetizan Hb en
el citoplasma.
 Eritropoyesis

Etapas

⋆ a) Maduración temprana: Pronormoblastos (ear shaped) y Normoblastos

basófilos, son grandes (300 a 800 fL)
▸ Con pequeños acúmulos de cromatina nuclear. Los nucleolos no se ven
(só en etapas iniciales)
▸ El citoplasma es de color azulado, no tiene organelos ni gránulos.
 Eritropoyesis

Etapas

⋆ b) Maduración intermedia: Los normoblastos son más pequeños, con

núcleo más compacto y algo de Hb en el citoplasma, lo que les da un
color azul-verdoso. Los normoblastos policromatófilos.
 Eritropoyesis

Etapas

⋆ c) Estadío final: El núcleo continúa reduciéndose de tamaño hasta

convertirse en una masa densa sin estructura. El citoplasma es
predominantemente rosado (Hb) normoblastos ortocromáticos o
esosinofílicos
 Eritropoyesis
⋆ La secuencia se completa cuando :
▸ el núcleo picnótico es eliminado,
Final
▸ en este momento la célula tiene 2/3 del total de la Hb
▸ su volumen aún es alto (150-180 fL) = reticulocito, con trazas de RNA.
▸ Continúa la hemoglobinización y la pérdida final de RNA y mitocondrias.
La célula se encoge.
 Eritropoyesis

⋆ Secuencia de Proliferacion.
▸ Una UFC-E da lugar a
14 -16 células.
Regulación de la Eritropoyesis
 Eritropoyesis

REGULACION por LA Eritropoyetina (EPO)

⋆ Gene p/ EPO: locus en el brazo largo del cromosoma 7.
⋆ - El Eritrón responde a cambios sostenidos del aporte de oxígeno y
demanda tisular de oxígeno, aumentando la concentración de Hb,
(hipoxia- receptor dioxi, deja de disparar en la forma -oxi))
⋆ Esta regulación es realizada por la EPO, glucoproteína de 165 A'A
producida en el riñón (85%) o hígado. (Bazo y gland's salivales sin
RNAm). La producción hepática no
compensa la pérdida de la función renal.
 Eritropoyesis

⋆ Las cel's intersticiales peritubulares (del

riñón detectan las reducciones en la
conc. de O2. (Cel's de Kupfer)
⋆ Estas cél's responden a la reducción en
la cantidad de Oxigeno, que puede ser
extraida de la sangre arterial a una
tensión dada.
⋆ Otros estímulos: alcalosis,
catecolaminas (adrenérgicos),
adenosina., se inhibe por la teofilina.
 Eritropoyesis
Efectos de la eritropoyetina
⋆ EPO estimula BFU-E/CFU-E.
▸ Se une a un receptor en la sup. del CFU- E. La ausencia de EPO
produce apoptosis.
⋆ - Catabolismo: se metaboliza en el hígado,
⋆ Su vida media de es de 5 hs,
⋆ Su efecto dura 2-3 días (No se necesitan niveles sostenidos altos de EPO
sino pulsos)
Hemoglobina
 Eritropoyesis

La Hemoglobina

⋆ El eritrocito es una célula anucleada, sin organelos, contiene una

membrana lípidica en la que se encuentran intercaladas proteínas
transmembrana (Rh)., carbohidratos (Ag's del Sistema ABO).,
glicoforinas., colesterol etc.
⋆ Presenta un citoesqueleto constituido por cuatro proteínas: ankirina,
espectrina, actina, tropomiosina que le dan la capacidad de deformarse
(flip-flop)
⋆ La Hb es la principal proteína citoplásmica eritrocitaria. (33%). Es una
proteina globular, Peso molecular 68,000 d. Tiene dos bloques
estructurales fundamentales: el heme (Fe) y la globina formando 4
subunidades.
 La hemoglobina

Generalidades

⋆ Se ensambla a partir de cuatro cadenas de polipéptidos, c/u contiene un

grupo heme en una bolsa hidrofóbica.
⋆ Cambios conformacionales: con Oxígeno, hidrógeno, CO2., 2,3- DPG.
⋆ - En la deoxiHb los Hidrogeniones establecen puentes de sal entre las
cadenas.
⋆ - El CO2 y el 2,3-DPG se unen a las 2 cadenas cerrando la Hb a su forma
de baja afinidad.
⋆ - Al captar O2 cambia la estructura terciaria, rompe los puentes de sal y
expele al CO2 y al 2,3-DPG.
▸ Esto aumenta la afinidad de la Hb por el oxígeno y es responsable de la
forma sigmoidea de la curva de la curva de la disociación de O2 de la
Hb.
 Hemoglobina

Síntesis

⋆ La célula eritroide inmadura se dedica a la Sx de Hb.

⋆ Se requiere: una provisión adecuada de Fe, porfirina y Hb (ac fólico,
cianocobalamina)
⋆ El Fe es transportado por la transferrina, hasta la membrana de la célula
(6) se unen a un receptor, se invaginan en una vacuola citoplásmica.
⋆ En el citoplasma se libera el Fe (el receptor y la apotransferrina regresan);
El Fe entra a la mitocondria para la Sx de Hb o se almacena como
gránulos de ferritina (sideroblastos).
 Síntesis de Hemoglobina

⋆ La Sx de Globina :
⋆ La parte protéica de la Hb; es un tetrámero de cadenas polipeptídicas
ensambladas en dos grupos; se codifican en dos genes : Cromosoma 16
genes α ; Cromosoma 11 genes no α
⋆ Durante el desarrollo embrionario se manifiestan o suprimen los genes
que codifican para la Sx de cadena de globina:
⋆ Hb fetal (Hb F): 2 cadenas α 2 y 2 cadenas γ 2 es reemplazada al
nacimiento por la ;
⋆ Hb A ("adulto") 2 α 2 (141 A'A), 2 β 2 (146 A'A) = 96% - 97% de la Hb del
adulto
⋆ Hb F = 1%., y la HB A2 ( α2 δ2) = 2.5%
 Genes de Hb

⋆ Cromosoma 16
⋆ Cromosoma 11
⋆ La expresión de los genes Hb
depende de factores
ambientales ( ¿ ? )
▸ Hb sEmbrionarias
▸ Hb Fetal
▸ Hb s del adulto
 Síntesis de Hemoglobina
⋆ La Sx de porfirina-Heme :
⋆ a) en la mitocondria, la glicina y
la succinil-CoA ALA (ac.
aminolevulínico)
⋆ b) en el citoplasma se forma el
porfobilinógeno uro copro
⋆ c) en la micocondria se forma la
protoporfirina; se une al Fe
HEME (FEP libre en ferropenia)
 Catabolismo de la hemoglobina
⋆ a) en el bazo el eritrocito es fagocitado:
▸ El eritrocito se descompone en : lípidos, proteínas, CHO’s y hemoglobina
– Las biomoléculas básicas se catabolizan en sus respectivos ciclos
– La Hb se separa en Heme+Globina
▸ La globina se recicla o se cataboliza como proteína,
– el Fe pasa a la a transferrina.,
– el heme ➡ biliverdina)
 Catabolismo de la Hb 2.2
⋆ b) en el hígado el heme es captado por
el hepatocito,
⋆ 80% hemólisis, 15% de eritropoyesis
inefectiva 5% de otras proteínas que
contienen Hb como el Citocromo c y el
C-p450
▸ y tiene dos reacciones de conjugación
con el ac. Glucorónido= bilirrubinas),
p/formar diglucorónido de bilirrubina
(4gr/día)
▸ Catabolizadas por la UDP glucoronil
transferasa
Membrana Eritrocitaria
Citoesqueleto
 Sistemas Sanguíneos

Se han descrito más de 40 sistemas sanguíneos

⋆ Carbohidratos (ABO, MNS , glicoforinas)

⋆ Proteínas (Rh, Duffy, Kidd, Kell)
 Transporte de Oxígeno

⋆ Hb + O2 = HbO2 (oxigenación no oxidación) HbO4

⋆ 0.01 seg
⋆ DesoxiHemoglobina (estado tenso) al recibir una molécula de oxígeno sse
rompen enlaces de la cadena Hb aumentando la afinidad de Hb por O2
hasta en 500 veces. Esta reacción ocurre 108 veces en la vida de un GR.
 Afinidad de Hb por el Oxígeno

⋆ Afinidad aumentada (desviación de la curva a la izquierda)

▸ Hipotermia
▸ Alcalosis
▸ 2,3 DPG disminuido (hb fetal)

⋆ Afinidad disminuida (desviación de la curva a la derecha)

▸ Temperatura elevada
▸ pH ácido
▸ 2,3 DPG aumentado (ex, altura, andrógenos, GH, HbA cadena beta)
 De regreso

⋆ El C02 viaja de tres formas:

⋆ En la Hb (carbamino hemoglobina)
⋆ Disuelto en el plasma
⋆ DISOCIADO (CO2 + H20 ➔ H2CO3 ➔ HCO3 + H2)
⋆ s
Membrana del eritrocito
 Grupos Sanguíneos

Sistemas de grupos sanguíneos

⋆ Definición , Sistema consta de : Gene, Antígeno y Anticuerpo.

▸ a) Genotipo
▸ b) Fenotipo
⋆ ••Antígenos en la superficie del eritrocito
▸ a) CHO's
▸ b) Proteínas (Rh, tiene como antígenos principales: C , D, E c- , e-,
– el Rh negativo verdadero es (c-de-)

⋆ ••Anticuerpos en el plasma
▸ a) IgM contra los antígenos ABH, "fríos", no pasan la barrera placentaria
▸ b) IgG contra los antígenos Rh (requieren sensibilización), pasan la
barrera, causan
– trastornos como la isonmunización materno-fetal.
 Sistema
Antígeno Gene(s) Anticuerpo
 Sistemas Sanguíneos

⋆ Antígenos en la superficie del eritrocito

▸ a) Carbohidratos como : ABO
▸ b) Proteínas como :Rh, tiene como antígenos principales:
C , D, E c-, e- .
– el Rh negativo verdadero es c- d e-

Membrana y membrana abo

 Sistema ABO

Cromosoma 9

⋆ El primer sistema descubierto fué el sistema ABO

⋆ Consiste en azúcares colocados en la superficie del eritrocito
⋆ En el cromosoma 9 estan los genes que codifican para las enzimas que
aplican estos azúcares (transferasas
⋆ Estos azúcares son capaces de estimular el desarrollo de anticuerpos
(funcionan como antígenos)
 Sistema ABO

⋆ Alelos del locus ABO están en el cromosoma 9, codifican para glucoronil

transferasas que producen los Ag;s A y B
⋆ El Gene O no codifica para alguna enzima funcional, presentan abundante
antígeno H (locus H).
⋆ Antígeno A : acetil galactosamina
⋆ Antígeno B : d-galactosa
⋆ Antígeno O : l-fucosa
 Sistemas sanguíneos

ANTICUERPOS EN EL PLASMA

⋆ a) IgM contra los antígenos ABH, "fríos",

- no pasan la barrera placentaria
– No “requieren de sensibilización”
⋆ b) IgG contra los antígenos Rh (requieren sensibilización),
- pasan la barrera placentaria,
- causan trastornos como la isonmunización materno-fetal.
– Requieren de sensibilización
Carta de donación
Tipificación ABO
 Sistema Rh

Historia

⋆ 1939 Levine & Stetson lo encontraron en una mujer cuyos hijos

desarrollaban enfermedad hemolítica del R.N.
⋆ 1940 Wiener & Peters observaron el mismo anticuerpo en personas con
historia de transfusión de sangre ABO compatible
⋆ Poco después se descubrió el antígeno. La transmisión del antígeno Rh
sigue un patrón autosómico dominante.
 Sistema Rh

Significado clínico

⋆ El Ag “D” es el de más importancia clínica después del ABO.

⋆ A diferencia del Sistema ABO, quien carezca del antígeno “D” no presenta
el anticuerpo correspondiente (?)
 Sistema Rh

Importancia clínica

⋆ La formación de Ab’s anti-D resultan de una exposición previa a eritrocitos

que presentan el Ag D (85% de la población).
▸ A través de transfusión, embarazo (abortos)
⋆ Otros antígenos importantes : C, E, c- y e-
▸ Actualmente se reconocen 46 antígenos del sistema Rh
▸ C, D, E, c- y e- constituyen el 99 de los casos relacionados al sistema
Rh
 Sistema Rh

Consideraciones genéticas y bioquímicas

⋆ Dos genes para el sistema Rh localizados en el cromosoma I vecinos al

gen HLA :
▸ 1.- RHD
▸ 2.- RHCE
 Sistema Rh

Gene RHCE

⋆ - Determina la presencia de los antígenos

C,c,E,e
⋆ Sus alelos son RHCe, RHCE, RhcE y
Rhce
⋆ Los genes RHC y RHCE codifican para
proteínas de 471 A’a que atraviesan 12
veces la membrana eritrocitaria
 Sistema Rh

⋆ C (Serina) y c (Prolina) en 103

⋆ E (Prolina) y e (Alanina) en 226
⋆ D presenta 32-35 Aa’s que pueden ser percibidos como extraños por los
D negativos.
Weak Rh
 Rh null

⋆ Mutación del gen RHAG

▸ El paciente tiene RHD y RHCE con ag’s D y CE normales
▸ Más no expresa D ni CE pues no se forma el complejo RHAG RH
necesario para expresar.
▸ Se comportan como Rh negativo
▸ Pueden producir anticuerpos anti Rh como anti e o anti C
 Rh D - -

⋆ Duplicación de RHD con pérdida la secuencia de RHCE

– Las células que carecen de antígenos Rh presentan
anormalidades en la membrana
–
– Estomatocitos
⋆FIN