Sunteți pe pagina 1din 53

Mecanismele efectoare ale Raspunsului Imun

Diana Dumitrascu

Activarea Raspunsului Imun

Immunologia
Intrarea in organism a unei subtante straine duce la un raspuns specific = RASPUNS IMUN Al carui rol esential este apararea organismului si eliminarea substantei straine

Imunitatea
1.

Exista doua tipuri majore de imunitate: RASPUNS IMUN INNASCUT (NATURAL) RASPUNS IMUN DOBINDIT (CISTIGAT,

2.

EDUCAT)
3.

TOLERANTA IMUNA

Figure 2-1

Figure 10-38

RASPUNS IMUN INNASCUT

Raspunde la TOATE substantele straine (indiferent daca au fost anterior in contact sau nu cu organismul)

Este un raspuns NE-SPECIFIC

RASPUNS IMUN INNASCUT


1. 2. 3.

4.

Prin actiuni multiple, diferite ne-specifice: Sistemul Complement-ului Interferoni Fagocitoza (celule cu capacitate fagocitara) Celule NK (Natural killer cells)

Fagocitoza
Anumite celule au capacitatea: De includere a organismelor straine De Digerare a organismelor straine Fagocite: Monocite, Macrofage, Neutrofile, Eosinofile Prezente in mod normal in zone de contact cu organisme straine Pot fi atrase in alte locuri prin chemotaxie, mediata de Sistemul Complementului si citokine

Fagocitoza

O data cu fagocitarea organismului: Substanta straina este digerata de numeroase enzime si alte mecanisme deucidere ca: 1. Speciile Reactive ale oxigenului 2. Speciile Reactive ale nitrogen 3. Lizozomi

Celulele NK

Capabile sa ucida spontan anumite celule tinta fara a fi sensibilizate anterior sau priming (educate) Nu sunt restrictionate de moleculele MHC Se leaga la celulele tinta prin numeroase molecule de suprafata (CD = cluster of differentiation designation) Secreta granule si substance numite limfotoxine (TNF) care distrug celulele tinta Capabile sa ucida anumite celule tumorale sau infectate viral si virusuri invelite de Abs (IgG) (ADCC)

RASPUNS IMUN DOBINDIT


Inalt SPECIFIC fata de patogen anume Se AMELIOREAZA cu fiecare contact succesiv cu acelasi patogen Are MEMORIA subtantei straine PREVINE imbolnavirea ulterioara

Imunitatea Dobindita

1.
2.

Specificitatea ei se datoreaza capacitatii de recunoastere Memorarea unei structuri foarte mici prezente pe suprafata organismului strain (epitope - pe Ag) Celule capabile sa recunoasca sunt: Celule T (limfocite) Celulele B (limfocite)

Limfocitele sunt responsabile de specificitatea recunoasterii Ag!

Recunoasterea Antigenica

Ab si TCR - reprezinta repertoriul imunologic al individului

Au capacitatea de recunoastere specifica a Ag

APC
Internalizeza Ags care sunt apoi Degradati prin proteoliza enzimatica (in compartimente specializate intracelular) Peptidele Antigenice contin epitopi specifici care se asociaza ulterior cu moleculele MHC Si sunt oferiti la suprafata celulei pentru a fi prezentati limfocitelor T si B

Interactiuni intre celulele B/T


1.

2.

Interactiunea este un proces bilateral: Celulele B prezinta Ag celulelor T si Celulele B primesc semnale de la celulele T pentru diviziune si diferentiere Interactiunea majora este intre TCR si moleculele clasei II MHC

Interactiuni intre celulele B/T


Alte interactiuni importante: LFA-3 si CD2 ICAM-1 si LFA-1 B7 si CD28 produce stabilizarea mRNA pentru IL-2 si alte citokine ( prelungeste transmiterea semnalelor de activare)

SISTEMUL COMPLEMENT
Diana Dumitrascu

Sistemul Complement (C)

Parte a sistemului imun inascut, Numeroase proteine (enzime): C si nr. (activat cu bara C3) Doua cai de activare a C: 1. Calea clasica - leaga imunitatea adaptativa (dobindita) de cea inascuta (necesita Ab (C1q se leaga la complexele imune) 2. Calea alternativa Functie: opsonizare, activarea leucocitelor si liza celulei tinta

Caile de activare a C

Activare prin complexe Ag/Ab (CIC) (imunitate dobindita) = Calea Clasica Activare prin microorganisme = Calea Alternativa Ambele genereaza C3 convertaza care transforma C3 in C3b (= partea cea mai mare a C3) C3b activeaza secventele litice ale complementului C5-C9

Calea Clasica de activare a C


Ag-Ab (IgG1,2,3 sau IgM) C1 C1 Activat C4 + C2 C4b2a C3 C3b C4b2a3b C5

C5b
C4b2a = Classical pathway 3 convertase C4b2a3b = Classical pathway 5 convertase

C5-9

Calea Clasica de activare a C


Ag-Ab C1qr2s2 C1qr2s2 C2 C4 C4b C4a
(C3 convertaza caii clasice)

C3
C3a

C4b2 C2b

C4b2a C3b C4b2a3b


(C5 Convertaza caii clasice)

Ag-Ab (IgM,IgG)
C1 C4 + C2 C1 (active) C4b2a
(C3 convertaza caii clasice)

C4b2a3b
(C5 convertaza caii clasice)

C3

C3b

C5

C5b

Calea Clasica de activare

Calea Alternativa de activare a C


Suprafata Microbilor, polizaharide C3 C3b Factor B, Factor D C3bBb C3bBb3b

C5
C3bBb = C3 convertaza caii alternative C3bBb3b = C5 convertaza caii alternative

C5b
C5-9

Actiunea litica a C
Calea Clasica C5 C5b C6, C7, C8, C9

C5-9 Complexul de Atac al Membranei

Calea Alternativa

S-Protein (vitronectina) C5a

C7
C6

CD59

C9

C8

C5
C3 Convertase

Poli-C9 C6 C5b C7 C8

C5b
C6 C5b C6 C5b

Membrana Plasmatica

C7

C7 C8

C5b C5 C8
C9 C9 C9 C9 C6,7 C9 C9C9 C9

Complex
De Atac al Membranei
(microscopie electronica)
A. eritrocite cu MAC B. Leziuni induse in celula tinta de limfocutele T citotoxice (pori cu diametru 160 , induse de polimerizarea perforinei, similara celei produse de C9)
dupa Podack ER

Deficite si Anomalii ale Complementului

C1q, C1r, C1s - deficit al activarii caii clasice SLE, Infectii Piogenice C4 deficit al activarii caii clasice - SLE, glomerulonefrita C2 - deficit al activarii caii clasice - SLE, vasculita, glomerulonefrite, infectii piogenice C3 deficit al activarii cailor clasice/alternative - infectii piogenice, glomerulonefrite, boala complexelor imune

Deficite si anomalii ale Complementului Properdina, factorul D - deficit al activarii caii alternative infectii cu Neisseria C5, C6, C7, C8 - deficit al formarii MAC Infectii diseminate cu Neisseria C9 deficit formarea MAC - nu se cunoaste C1 inhibitor (C1 INH) dereglarea activarii caii clasice, consumarea C3 - Edem Angioneurotic Ereditar, SLE, boli limfoproliferative ale celulelor B

CITOKINE

Citokine (1)

Polipeptide/proteine secretate de celulele activate dupa stimulare Actioneaza local si induc diferite tipuri de stimulari/inhibari pe diferite celule intr-o modalitate autocrina (activeaza aceasi celula) sau paracrina (activeaza celulele vecine) sau endocrina (secretate in circulatia sanguina/limfatica) Rol in reglarea/activarea raspuns imun (= biology response modifiers = BRM)

Citokine (2)
Sunt clasificate in mai multe grupe:

interleukine (IL),

factori de stimulare a coloniilor- (CSF) = factori de crestere (GF), chemokine (atractanti celulari la locul raspunsului imun)

Citokine (3)

Mediatori ai Imunitatii Naturale IFN () - antiviral, antiproliferativ,


creste MHC class I, activeaza NK
TNF () - activare (inflamatie, coagulare), febra, reactanti de faza acuta (proteina A amiloidului seric), catabolismul (casexia), costimulator IL-1 - costimulator, activare (inflamatie, coagulare), febra, reactanti de faza acuta (proteina A amiloidului seric), catabolism (casexia)

Interferonii

1. 2.

Secretati cind celulele gazdei sunt infectate viral Sunt doua tipuri: Type I (IFN si IFN) Produs de numeroase celule Type II (IFN) Produs de celulele T Functii multiple imunomodulatorii IFNs actioneaza prin preventia replicarii intra-celulare a virusurilor

Figure 2-49

Citokine (4)

IL-6

- costimulator, crestere, reactanti de faza acuta (fibrinogen), catabolism Chemokines (IL-8, RANTES etc) - chemotaxia leucocitelor - activarea leucocitelor

Citokine (5)
Mediatori ai activarii limfocitelor, ai cresterii si diferentierii

IL-2 - crestere, productia de citokine, activare, sinteza Ab IL-4 - Isotipul Ig prin switch la IgE, inhiba activarea, crestere

Citokine (6)
Mediatori ai inflamatiei mediate imun

IFN- - activare, creste MHC clasa I si II IL-10 - Inhibare a fagocitelor mononuclear, inhibare a celulelor B IL-5 - activare a Eo, crestere si activare a celulelor B

IL-12 - activare a celulelor NK si T (crestere si diferentiere)

Citokine (7)
Mediatori ai cresterii leucocitelor imature si a diferentierii IL-3 - cresterea si diferentierea tuturor liniilor celulare GM-CSF (granulocyte-macrophage) - crestere si diferentiere a tuturor liniilor celulare IL-7 - crestere si activare a celulelor B

Molecule de Adeziune (1)


Sunt mediatori ai migrarii si leaga celulele efectoare de celulele tinta. Exista mai multe familii (apropiate structural): 1. Familia superIg: Cell adhesion molecules (CAMs); si mucosal adhesion molecules (MACAMs). Sunt expresate, sau inductibile pe endoteliul vascular 2. Selectine - pe leucocite si endoteliu si care se leaga prin carbohidrati: E-, P-, L-selectin 3. Integrine - expresate pe leucocite si alte celule. Alcatuite din doua lanturi:

Molecule de Adeziune (2)

Moleculele de adeziune endoteliala sunt induse de citokine Expresarea moleculelor pe leucocite este determinata de populatia celulelor implicate si de starea de diferentiere a celulelor. Prezenta (expresarea) este o dovada a activarii/raspunsului inflamator al celulelor

Molecule de Adeziune (3)

Liganzii Integrinelor (prezenti pe leucocite): - LFA (leukocyte functional antigen) = un grup de trei molecule care mediaza adeziunea intercelulara intre leucocite si alte celule intr-un mod ne-specific de Ag: LFA-1 (leucocite) ICAM-1, ICAM-2 (pe celule endoteliale);

Molecule de Adeziune (4)

CAM (prezenti pe leucocite) din familia superIg: - ICAM (intercellular adhesion molecules ICAM-1, ICAM-2, ICAM-3 and vascular CAM = VCAM-1). VCAM-1 se leaga de VLA-4 = integrin pe leucocite - MACAM-1 (mucosal adhesion CAM-1) se leaga de L-selectin

Selectine

P-selectine prezente pe trombocite, endoteliu se leaga de trombocite, neutrofile E-selectine prezente pe endoteliu se leaga de leucocite L-selectine prezente pe leucocite se leaga la endoteliu

Figure 8-7

Chemokine

Sunt molecule chemotactice important atit in directionarea migrarii celulare si in triggering-ul leucocitelor la suprafata endoteliala pentru initierea migrarii lor. Cel putin 50 de molecule ce leaga heparina clasificate in CC si CXC-chemokine in functie de structura chimica IL-8 (pentru granulocite), LT-B4 (pentru mastocite, bazofile, macrofage), RANTES (pentru eozinofile)

Invesatigatii Immunologice

Investigatii Imunologice

Pentru Ab, C: 1. Imunoelectroforeza 2. Teste Radioimunologice (RIA) 3. Teste Enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) 4. Teste de Chemoluminescenta 4. Immunoblot, Western blot

Investigatii Immunologice

Pentru Ag: determinare directa (microscopie, cultura, imunofluorescenta etc) PCR sau RT-PCR (ADN, ARN) RIA ELISA Chemoluminscenta assays Immunoblot (Ag pe banzi de nitroceluloza)

Fluorescenta, RIA, Chemoluminescenta Ab Ag

Metoda Directa

Metoda Sandwich Metoda Indirecta

Investigatii Imunologice

Pentru limfocite: 1. flow-cytometrie (FACS = Fluorescence Activated Cell Sorter) 2. teste functionale (secretia citokine; proliferare = lymphoblast transformation test; killing etc)

Investigatii Imunologice

In vivo
1. Teste cutanate (idr, prick) 2. Teste de provocare