REZUMAT

Infeciile respiratorii virale ale bovinelor reprezint un sindrom polifactorial caracterizat prin inflamaia acut, subacut sau cronic a cilor aerofore i a parenchimului pulmonar. Aceste afeciuni cunosc n prezent o cretere a incidenei n sistemul intensiv, fiind alturi de gastroenteropatii, principalele boli ntlnite la bovine i n special la tineretul taurin. n acelai timp reprezint cauzele cele mai nsemnate ale pierderilor economice nregistrate n creterea taurinelor. Pierderile economice sunt realizate prin mortalitate, sacrificri precoce, scderea sporului de cretere, cheltuieli cu tratamentele, profilaxia i combaterea. La aceste pierderi se adaug i faptul c vindecarea clinic a animalelor nu echivaleaz i cu recuperarea economic, animalele trecute prin boal rmnnd subdezvoltate i predispuse la recidive, constituind, n acelai timp, surse de infecie permanente n adposturi. Monitorizarea i controlul bolilor respiratorii de origine viral, limitarea sau prevenirea rspndirii lor i eforturile de eradicare trebuie s fie prioriti sanitar-veterinare naionale. Cele dou entiti morbide studiate n lucrarea de fa, rinotraheita infecioas bovin i diareea viral - boala mucoaselor, sunt recunoscute ca boli ce produc pierderi importante ale sistemului zootehnic. Rigurozitatea msurilor de control aplicate depinde de ansamblul caracteristicilor epidemiologice ale fiecrei entiti morbide n parte, de aceea acestea trebuiesc privite individual n funcie de modul de transmitere, gradul de contaminare i aciune a agentului patogen responsabil de producerea fiecrei boli n parte. Teza de doctorat cu titlul Cercetri privind virozele respiratorii ale taurinelor este extins pe 240 pagini i este format, n conformitate cu prevederile legale actuale, din dou pri principale: prima parte intitulat Stadiul actual al cunoaterii cuprinde 59 de pagini, 6 tabele i 55 de figuri, iar partea a doua Contribuii personale ocup 133 pagini, 41 de tabele, 92 de figuri. Prima parte este alctuit din ase capitole n care sunt prezentate succint, informaii din literatura de specialitate referitoare la subiectul tezei care au fost folosite ulterior pentru interpretarea i compararea datelor obinute n partea a doua. Primul capitol intitulat Date bibliografice privind istoricul, rspndirea, importana i etiologia rinotraheitei infecioase bovine vulvovaginita pustuloas (IBR-IPV) prezint date referitoare la primele descrieri ale bolii i agentului etiologic, n literatura de specialitate, la rspndirea i importana acestei infecii. Buchner i Trommsdorf descriu n Germania n timpul secolului al 19-lea

Blaschenausschlag (exantemul coital vezicular), o boal a bovinelor probabil cauzat de ctre herpesvirusul bovin tip I (BoHV-1). Etiologia viral a fost descris n 1928 de ctre Reisinger i Reimann, care au artat c aceast boal veneric este transmis de ctre un agent filtrabil. Pn la nceputul anilor 1950 manifestarea infeciei cu BoHV-1 era cunoscut sub numele de vulvovaginita pustuloas infecioas (IPV) la vaci i de balanopostita pustuloas infecioas (IPB) la tauri, fiind atribuit doar afeciunilor de la nivelul aparatului genital. n acest timp aprea o afeciune respiratorie n America de Nord la bovinele. Aceast boal era mult mai sever i se datora infeciei cu virusului BoHV-1, fiind numit rinotraheita infecioas bovin (IBR). Rinotraheita infecioas bovin a diseminat rapid n Europa, aceast datorndu-se importurilor de vaci de lapte din America de Nord cu scopul de a mbunti producia de lapte din Europa. Al doilea capitol intitulat Aspecte privind epidemiologia, patogeneza tabloul clinic i modificrile anatomopatologice n rinotraheita infecioas bovinvulvovaginita pustuloas infecioas (IBR-IPV) este structurat n cinci subcapitole, sintetiznd principalele date din literatura de specialitate cu referire la caracterele epidemiologice, patogenez, imunologie, tabloul clinic i modificri anatomopatologice. Sunt prezentate sursele de infecie, evideniindu se modul de contaminare i mecanismul patogenetic al infeciei cu virusul rinotraheitei infecioase bovine. De asemenea sunt prezentate simptomele i leziunile produse n diferite forme ale bolii. n capitolul al treilea intitulat Diagnosticul, profilaxia i combaterea infeciilor cu virusul rinotraheitei infecioase bovine vulvovaginita pustuloas (IBR-IPV) sunt tratate principalele metode de diagnostic, fcnd referire la diagnosticul etiologic i cel diferenial, precum i msurile pentru limitarea rspndirii infeciei. n capitolul IV intitulat Date bibliografice privind istoricul, rspndirea, importana i etiologia diareei virale bovine-boala mucoaselor (BVD-MD) prezint date referitoare la primele descrieri ale bolii i agentului etiologic n literatura de specialitate, la rspndirea i importana acestei boli. Prima entitate din acest complex a fost descris de Mac Callum i colaboratorii n 1946, sub denumirea de diareea viral de New York, manifestat ca o boal acut, febril, asemntoare pestei bovine din cauza leziunilor mucoasei bucale i a unei enterite grave. Ulterior, s-a stabilit c boala este produs de un virus specific, diferit de cel al pestei bovine. O boal similar a fost descris la vaci i la viei de ctre Pritchard i col. (1956), n statul Indiana sub numele de diareea cu virus de Indiana sau gastroenterita eroziv. n acelai timp, n diferite state din SUA, au fost semnalate mbolnviri cu caracter enzootic afectnd mucoasele digestive i respiratorii, denumite generic Mucosal disease (boala mucoaselor).

Termenul de boala mucoaselor a fost introdus de Ramsey i col. (1953), referindu-se la o boal a taurinelor din Iawa, caracterizat prin leziuni ale mucoasei bucale i o diaree grav. Hoag i col. n (1956), descriu boala mucoaselor de Virginia. Iniial, sub termenul de complexul bolii mucoaselor, n sensul larg al termenului, au fost cuprinse; boala mucoaselor de Iawa i Virginia, cele dou diarei virale (New York i Indiana) i rinotraheita infecioas a bovinelor. Cercetri serologice i virusologice ulterioare au stabilit c diareea viral de New York i Indiana, precum i boala mucoaselor de Iawa i Virginia sunt produse de un virus identic, n timp ce rinotraheita infecioas este produs de un virus distinct. n 1960 Gillespie i col., au dovedit identitatea agenilor etiologici, artnd c, de fapt, este vorba doar de dou forme de manifestare, ntructva diferite, ale uneia i aceleiai boli, denumit boala mucoaselor i diareea viral bovin. Din acest motiv, cei mai muli autori, folosesc astzi denumirea general de diareea viral bovin - boala mucoaselor. n Romnia, boala a fost identificat serologic i virusologie de Coman i col. n 1968. Al cincilea capitol intitulat Aspecte privind epidemiologia, patogeneza, tabloul clinic i modificrile anatomopatologice n diareea viral bovin-boala mucoaselor (BVD-MD) este structurat n patru subcapitole, sintetiznd principalele date din literatura de specialitate cu referire la caracterele epidemiologice, patogenez, tabloul clinic i modificri

anatomopatologice. n capitolul VI intitulat Diagnosticul, profilaxia i combaterea infeciilor cu virusul diareei virale bovine-boala mucoaselor (BVD-MD) sunt tratate principalele metode de diagnostic, fcnd referire la diagnosticul etiologic i cel diferenial, precum i msurile pentru limitarea rspndirii infeciei. n capitolul VII sunt prezentate scopul i obiectivele tezei de doctorat. Pe ntreaga perioad de studiu, cercetrile au avut n vedere 5 obiective importante: Investigaii seroepidemiologice privind prevalena rinotraheitei infecioase bovine vulvovaginitei pustuloase (IBR-IPV) i diareei virale bovine - boala mucoaselor (BVDMD) pe teritoriul Romniei n perioada 2006-2008. Cercetri privind prevalena serologic a rinotraheitei infecioase bovine - vulvovaginitei pustuloase (IBR-IPV) i diareei virale bovine - boala mucoaselor (BVD-MD) pe teritoriul unor judee din Moldova (Iai, Vaslui, Suceava i Botoani) n perioada 2006-2009 Cercetri privind detecia virusului rinotraheitei infecioase bovine n zona de est a Romniei. Cercetri privind detecia virusului diareei virale bovine n zona est a Romniei Elaborarea unor recomandri privind strategia de control a rinotraheitei infecioase

bovine - vulvovaginitei pustuloase (IBR-IPV) i diareei virale bovine-boala mucoaselor (BVD-MD). n capitolul VIII sunt prezentate rezultatele cercetrilor privind prezena i prevalena rinotraheitei infecioase bovine - vulvovaginitei pustuloase (IBR-IPV) prin examene serologice. Pentru aceste testri au fost utilizate diferite truse ELISA pentru detecia anticorpilor specifici anti - BoHV-1. n primul subcapitol sunt prezentate rezultatele testelor serologice efectuate n Romnia n perioada 2006-2008. Astfel din 12601 probe testate n perioada luat n studiu au reacionat seropozitiv un numr de 959 probe, ceea ce reprezint o prevalen de 7,61%. n anul 2006 au fost testate serologic 6523 de probe de ser din care 147 (2.25%) au fost pozitive i 6376 (97,75%) au fost negative pentru IBR-IPV. n anul 2007 au fost testate serologic 5196 de probe de ser din care 739 (14.22 %) au fost pozitive i 4457 (85,78%) au fost negative, iar n 2008 din 882 de probe de ser testate 73 (8.27 %) au fost seropozitive i 809 (91.73%) au fost seronegative pentru IBR-IPV. n al doilea subcapitol sunt prezentate rezultatele testelor serologice efectuate n patru judee (Iai, Vaslui, Botoani, Suceava) din Moldova, efectuate n perioada 2006-2009. n aceast perioad din 1800 de probe testate, respectiv 200 n anul 2006, 400 n anul 2007, 535 n anul 2008 i 665 n anul 2009, un numr de 747 de probe au fost identificate seropozitive pentru rinotraheita infecioas bovin - vulvovaginita pustuloas. n anul 2006 din 200 de probe testate au fost identificate 77 seruri pozitive (38.5%) i 123 (61,5%) probe negative. n anul 2007 seroprevalena a fost de 37,5% (150/400), 250 seruri (62,5%) fiind negative. n anul 2008 din cele 535 de seruri testate un numr de 242 au rspuns pozitiv respectiv 45.23%, restul de 293 (54,77%) fiind negative. n anul 2009 seopozitivitatea a fost de 41.8% respectiv un numr de 278 se seruri au rspuns pozitiv i 387 (58.2%) probe au rspuns negativ. Din ferme, pe perioada 2006-2009, n cele patru judee luate n studiu s-au identificat 577 probe seropozitive ceea ce reprezint 44.28% din totalul de 1303 probe analizate. n sistem gospodresc rezultatele testrii serologice pentru depistarea anticorpilor anti -virusului rinotraheitei infecioase bovine sunt: 170 probe pozitive (34,20%) i 327 (65,79%) probe negative din totalul de 497 de seruri testate. n capitolul IX sunt prezentate rezultatele cercetrilor privind detecia virusului rinotraheitei infecioase bovine -vulvovaginitei pustuloase (IBR-IPV). Cercetrile efectuate au urmrit punerea n eviden utiliznd reacia de imunofluorescen direct i tehni ci de biologie molecular ( PCR) a BoHV-1 la animale provenite din diferite sisteme de cretere. Investigaiile virusologie utiliznd tehnica de imunofluorescen direct privind prezena BoHV-1 n focare de boal din trei judee: Iai, Vaslui, Suceava au efectuate n perioada 2008-

2010. n cadrul acestui studiu au fost examinate un numr de 41 de animale din care 5 avortoni, efectundu-se 99 preparate din esuturile int pentru herpesvirusul bovin tipul 1: pulmon, limfonoduri pulmonare, mucoas traheal, ficat (avorton), jetaj nazal. Din totalul animalelor testate au fost identificate 7 pozitive din care 2 avortoni. n cadrul investigaiilor de biologie molecular privind prezena herpesvirusului bovin tip 1 au fost realizate dou protocoale de lucru. n anul 2008 s-a utilizat setul de primeri ExtF i ExtR pentru a se amplifica o secven de 468 nucleotide a glicoproteinei B, obinndu-se din totalul de 20 animale testate, 2 rspunsuri pozitive (10%). n anul 2009 s-au utilizat dou seturi de primeri: pentru gB i gC, identificndu-se un animal pozitiv din 12 testate. Proba a fost identificat ca fiind pozitiv doar pentru gC demonstrndu-se astfel variabilitatea genetic a tulpinilor slbatice de BoHV-1 circulante n populaiile de taurine . n capitolul X sunt prezentate rezultatele cercetrilor privind prezena i prevalena diareei virale bovine - boala mucoaselor (BVD-MD). Pentru examenele serologice efectuate au fost utilizate diferite truse ELISA pentru detecia anticorpi specifici anti-BVDV. n primul subcapitol sunt prezentate rezultatele testelor serologice efectuate n Romnia n perioada 2006-2008. n urma investigaiilor privind prevalena anticorpilor anti-BVDV n Romnia, din 5823 probe testate au reacionat pozitiv un numr de 226 seruri, ceea ce reprezint o prevalen de 3.88%. n anul 2006 au fost testate serologic un numr de 2998 de probe din care 80 (2.66 %) au fost pozitive i 2918 (97,34%) au fost negative. n anul 2007 din 2637 probe testate serologic au fost identificate 127 (4.81%) seropozitive i 2510 (95.19%) seronegative,iar n anul 2008 seroprevalena diareei virale bovine - boala mucoaselor a fost de 10.1 % (19/188). n al doilea subcapitol sunt prezentate rezultatele testrilor serologice efectuate n patru judee (Iai, Vaslui, Botoani, Suceava) din Moldova, efectuate n perioada 2006-2009. n urma investigaiilor serologice a 978 probe, respectiv 117 n anul 2006, 302 n anul 2007, 425 n anul 2008, i 134 n anul 2009, un numr de 391 au fost identificate seropozitive pentru diareea viral bovin - boala mucoaselor. n anul 2006 din 117 probe testate au fost identificate 63 seruri pozitive (53.85%) i 54 (46.15%) seruri negative. n anul 2007 din totalul de 302 de probe testate serologic un numr de 121 probe au rspuns pozitiv ceea ce reprezint 40.07% i restul de 181 (59.93%) fiind negative. n anul 2008 din 425 de seruri testate, 129 fost identificate seropozitive (30.35%), iar 296 (69.65%) au fost seronegative. n anul 2009 seropozitivitatea a fost de 58.21% (78/134). Din analiza datelor obinute n urma testrii serologice n perioada 2006-2009, n cele patru judee luate n studiu, a animalelor provenite din ferme se observ o seropozitivitate de 44.99% (314/698). n sistem gospodresc rezultatele testrii serologice pentru depistarea anticorpilor anti-BVDV sunt: 77 probe pozitive (27.5 %) i 203 negative (72.5%) din totalul de 280 de seruri testate.

n capitolul XI sunt prezentate rezultatele cercetrilor privind detecia virusului diareei virale bovine-boala mucoaselor (BVD-MD). Cercetrile efectuare au urmrit punerea n eviden prin imunofluorescena direct i prin tehnici de biologie molecular (RT-PCR) a virusului diareei virale bovine-boala mucoaselor (BVD-MD) la animale provenite din diferite sisteme de cretere. n primul subcapitol sunt prezentate rezultatele investigaiilor virusologice utiliznd reacia de imunofluorescen direct privind prezena virusului diareei virale bovine-boala mucoaselor. Din 27 de animale testate au fost identificate pozitive 15 (71,43%), toate bovinele provenind din sistemul extensiv de cretere. De la animalele sacrificate au fost colectate urmtoarele probe: esut pulmonar, trahee, limfonoduri traheo-bronhici, limfonoduri mezenterici, timusul i poriuni de intestin subire. Vrsta animalelor testate a fost cuprins ntre 10 i 16 luni. n urma testrii probelor provenite din ferme (6 animale) nu a fost identificat nici un rspuns pozitiv. n al doilea subcapitol sunt prezentate rezultatele investigaiilor de biologie molecular privind detecia virusului diareei virale bovine-boala mucoaselor n trei judee din Moldova, att n ferme ct i n gospodriile populaiei. Probele prelevate de la bovine sacrificate de necesitate n abator au fost reprezentate de: limfonoduri mezenterici i poriuni de intestin subire. Animalele au provenit din zone n care s-au nregistrat cazuri de boal i au fost depistate pozitiv prin reacia de imunofluorescen direct. Din cele 19 animale luate n studiu, cu vrste cuprinse ntre 11 i 17 luni, au fost prelevate 38 de eantioane de esuturi, identificndu-se 3 (15.79%) animale pozitive, ce proveneau din gospodriile populaiei. Se observ c din 13 probe pozitive la imunofluorescena direct s-au confirmat doar un procent de 23.07% (3 probe). Acest fapt este confirmat i de literatura de specialitate care arat ca tehnica de amplificare genic este mai specific dect imunofluorescena direct, n teren recomandndu-se aplicarea de metode de biologie molecular pentru detecia animalelor infectate persistent. n capitolul XII, avnd n vedere prezena i circulaia celor dou viroze respiratorii la taurine, sunt prezentate recomandrii pentru o limitare a infeciilor cu BoHV-1 i BVDV n cadrul efectivelor de bovine, n concordan cu reglementrile europene. n capitolul XIII sunt prezentate succint 21 concluzii finale.