Contribuii la studiul farmacognostic al speciei Pleurotus ostreatus

INTRODUCERE

Omul primitiv lua cele necesare din mediul nconjurtor i cuta s vindece toate bolile cu ajutorul plantelor , mineralelor i produselor animale pe care le avea la ndemn . Omul cuta mijluace curative n mod empiric ; de aceea , numeroase plante medicinale folosite de medicina tiinific actual au o istorie foarte veche . Deoarece cauzele bolilor i tratamentul lor erau nenelese de omul primitiv , pe ln tratamentul cu plante el cerea ajutorul zeilor i al duhurilor . Dupa trecerea multori ani de ncercri , e!periene , nu s"au sit de ctre medici i farmaciti metode de vindecare # altele dect medicamente sintetice , chimioterapii , fioterapii pe baz de cureni etc.$ care s nu fie nocive . %cestea aduc ameliorri , dar nu vindecri, atta timp ct nu se elimin cauza care a produs boala . &atura ne ofer avantaje clare . se elimin to!inele care cauzeaz boala i nu mai sunt afectate i alte or ane . 'nc din antichitate , nelepii duceau o via n armonie cu natura .

(itoterapia modern a devenit astzi o tiin interdisciplinar . )a presupune o colaborare ct mai strs ntre medic , farmacist , chimist , fizician , biolo mai potrivit bolnavului. (armaco nozia este cea care restabilete relaia ntre teoriile tiinifice i practicile medicinei tradiionale,ea cunoate plantele i or anele lor ntrebuinate n terapeutic,precum i posibilitaile de prelucrare n vederea e!tra erii principiilor active. , matematician , psiholo , in iner sau tehnolo , avnd un unic scop * sirea i aplicarea remediului cel

+,%& D) -)D%./%-)

+%-/)% /)O-)/'.0 1.Date enerale privind specia +leurotus ostreatus 2.3inonime 4.5ncadrare sistematic 6.Descriere 7.Ori ine i rspndire 8..ompoziie chimic 9.%ciune :.5ntrebuinri

;.+reparate farmaceutice

+%-/)% )<+)-'=)&/%,0 1.Obinere 2. 3tabilirea identitii 2.1.)!amenul macroscopic 2.2.)!amenul microscopic 2.4.%naliza chmic calitativ 4. Determinarea calitii 4.1.Determinri preliminare 4.2.Dozarea principiilor active

6. /estarea aciunii asupra celulei ve etale

.O&.,>?'' @'@,'OA-%(')

+,)>-O/>3 O3/-)%/>3

(i .1.+leurotus ostreatus

PARTEA TEORETIC

!DATE "ENERA#E PRI$IND %PECIA P#EUROTU% O%TREATU%

>na din cele mai cunoscute specii de ciuperci medicinale, cu re im nutritiv saprofit. %re o foarte mare valuare alimentar , utilizat n arta culinar n feluri variate * # sup , cu umpltur , cu sos , salat $ se poate cultiva pe cale industrial folosindu"se ca substrat rume u , coceni de porumb , ciocli . #1$

&!%INONI'E
3e mai numete * " burete ne ru " inua pdurii " pstrav de fa " pstrvul cerului#1$ " burete de fa " oBster #4$

(!)NCADRARE %I%TE'ATIC
3pecia. +leurotus ostreatus Aen. +leurotus (am. +leurotaceae Ordin. % aricales

.lasa @asidiomBcetae #2$

*!DE%CRIREA %PECIEI
.iuperc comestibil, li nicol,prezent n rupuri mari,mbricate,pe

trunchiurile btrne de arbori foioi,ndeosebi pe fa . .resc etajate,aplicate unele peste altele. (i 2 Dintr"o baz comun pot porni mai multe ciuperci cu lun ima piciorului diferit, plria orizontal, n form de ureche sau scoic, diametrul 7"17 cm , cu mar ina rsucit. (aa superioar neted, cenuie, brun"cenuiu, cenuiu"maronie, ne ricioas , se decoloreaz cu vrsta. (aa inferioar cu lamele albicioase sau cenuii, foarte decurent, lar i , anastomazate la baz. +iciorul lateral, scurt de 1"6 cm, ros de 1"4 cm , alb"zbrlit , pros la baz, adeseori lipsete. .arnea alb,moale,elastic,miros plcut, ust dulce. 3porii cilindrici sau ovoizi # :"12 ! 4"6 microni $, hialini , netezi , albi n mas . duntoare, produce putre aiul alb al lemnului. 5n -omnia, primele culturi au fost or anizate ncepnd cu anul 1;94 Calorific celuloza i hemiceluloza din substrat,cu coninut bo at de li nin, cele mai bune rezultate s"au obinut pe fa ,plop,carpen i nuc , e!emplele obinute pe salcie,cire, stejar,arar,cedru sunt necorespunztoare. 5n cultura ntensiv se folosesc : cicluri pe an cu o producie de ;D"1DD E pe metru ptrat,pentru 1DD E lemn lemnos se utilizeaz 2,7 litri miceliu soluie. 5ncepe s se formeze cnd n aer temperatura este cca.17 rade celsius.

(i 2.+leurotus ostreatus

(i .4. +leurotus ostreatus

(i .6. +leurotus ostreatus +!ORI"INE ,I R%P-NDIRE

+leurotus ostreatus este rspndit n toate re iunile mpdurite cu clima temperat i tropical ale lobului.5n ara noastr aceast specie se dezvolt cu

predilecie pe suprafaa trunchiurilor de arbori din pdurile de foioase, producnd aa numitul putre ai alb de lemn.#4$

.!CO'PO/I0IA C1I'IC
"mevinolin #lovastatin$ F n special n corpul fructifer de P. ostreatus, P. saca i P. sapidus ; P. ostreatus produce cantiti ma!ime de lovastatin cnd mediul de cultur conine nitro en or anic "poliholozide* " pleuran #G"1,4"D" lucan$ n majoritatea speciilor din enul Pleurotus sau diferii polimeri alctuii din !iloz, lucoz, manoza i alactoz n diferite raporturi molare n P. pulmonarius ; o polizaharid acid alctuit din lucoz, manoz, alactoz i acizi zaharici n P. ostreatus. G"D" lucani au fost identificai i n P. tuberregium poliholozide n P. florida , P. sajor-caju "lectine* n corpii de fructificaie ai speciilor P. ostreatus i P. cornucopiae; lectinele din P. tuber-regium au specificitate pentru &"acetil lucozamin. " licoproteine de tip ubiHuitin cu aciune de ribonucleaz n P. ostreatus; din P. tuberregium a fost izolat proteina pleuture in, peptida denumit erin in din P. eryngii cu masa molecular de 1D EDa. " aminoacizi eseniali n enul Pleurotus ; n corpul fructifer de P. ostreatus predomin alanina, acidul lutamic i ornitina; alturi de acestia se mai sesc* acid lutamic, valin, lutamin, licin, leucin " lipide, acid oleic i ali acizi rai nesaturai n P. ostreatus; licoinozitolfosfosfin olipide* ceramide i cerebrozide n P. ostreatus; steroli n P. eryngii

" enzime* fenolo!idaze, de e!emplu lacaze n P. eryngii, P. ostreatus, P. florida #i P. pulmonarius; lutamin"sintetaza n P. ostreatus, cisteinproteaza n P. ostreatus, D" lucoz"o!idaz n P. ostreatus , o proteaz fibrinolitic n P. ostreatus, lipo!i enaz n P. ostreatus , o proteaza antiviral #pleurerBn$ i pero!idaze n P. eryngi ; =n" pero!idaz n P. eryngi , ribonucleaze n P. tuber-regium , P. pulmonarius , P. eryngii, P. ostreatus, dou supero!id dismutaze #3ODm i 3ODc$ care conin man an atomic i respectiv, trivalent n P. olearius. 5n P. pulmonarius au mai fost identificate enzimele* benzo"IaJ"piren hidro!ilaz #=aspahB 3. i colab., 1;;;$, =n"pero!idaz, !ilanaz, celulaz, li ninpero!idaz, arilalcoolo!idaz i o enzim implicat n de radarea aflato!inei @1. )nzimele li ninolitice din P. sajor-caju de radeaz i ju lona . .ompuii 1"octen"4"ol, octan"4"ol i actan"4"ona imprim aroma corpului fructifer i miceliului proaspt de P. ostreatus %cid o!alic n P. ostreatus. %cid 7"O"#K"D"!ilopiranozil$"D"eritroascorbic , vitamine din rupul @* @1 sau tiamina, @2 sau riboflavina, @7 sau niacina, @8 sau pirido!ina, @9 sau biotina, acid folic, " minerale* cantiti mari de (e.

9. AC0IUNE TERAPEUTIC
1ipocolesterolemiant2 " majoritatea speciilor din enul Pleurotus #P. ostreatus, P. sapidus, P. sacca$ produc mevinolin i lovastatin care inhib biosinteza colesterolului, cresc LD," colesterolul i scad C,D,"colesterolul, acionnd asupra L=A".o%"reductazei ; - P. ostreatus scade absorbia colesterolului, inhib L=A".o%"reductaza, crete L,D,"colesterolul, activitatea 9K"hidro!ilazei hepatice, e!creia prin materii fecale a sterolilor neutri i a acizilor biliari i scade valorile C,D,"colesterolului;

+ulberea uscat, e!tractul apos i cel etanolic scad colesterolul i triacil licerolii din ser " efectul hipocolesterolemiant al dietei cu P. ostreatus sau al fraciunii poliholozidice a fost demonstrat i la oareci sau hamsteri sirieni cu hipercolesterolemie ereditar sau care au primit n mod repetat alcool " administrarea zilnic de 17"2D mas uscat de P. ostreatus conduce la scderea concentraiilor plasmatice de colesterol la majoritatea pacienilor. 5n cazul oarecilor cu valori plasmatice normale ale colesterolului nu s"a observat aciunea asupra LD,", ,D,"colesterolului, tri liceridelor i colesterolului total. )fectul hipocolesterolemiant a fost demonstrat i pentru P. florida ) er. 1ipoglicemiant2 P. ostreatus scade licemia postprandial la oareci cu diabet insulino"dependent indus prin streptozocin, dar nu modific insulinemia. )fectul hipo licemiant a fost demonstrat i pentru fraciunea poliholozidic solubil n ap din P. citrinopileatus . Antitumoral2 5nc din 1;8; a fost semnalat aciunea antineoplazic a poliholozidelor din P. ostreatus >lterior s"a constatat c* " pulberea uscat obinut din aceast specie reduce incidena tumorilor de colon provocate cu dimetilhidrazin, prin scderea activitii ornitin"decarbo!ilazei din colon. )fectul antitumoral n acest tip de cancer este e!plicat i prin inducerea apoptozei " lectinele"dimeri e!trase din corpurile de fructificaie ale speciei P. ostreatus sunt hema lutinante i au inhibat dezvoltarea celulelor tumorale de tip Sarcoma 180 i Hepatoma H-22 implantate animalelor de e!perien; " pleuranul #un G" lucan$ previne apariia metastazelor ;

" poliholozida de tip K" lucan din miceliul de P. ostreatus are aciune antiproliferativ i pro"apoptotic n cancerul de colon e!perimental HT-2 . " fraciunile poliholozidice din corpii de fructificaie ai speciei P. sajor-caju #(r.$ 3in . #sin. P. pulmonarius$, care conin manoz, alactoz, !iloz i lucoz n raport molar 2*12*62*62; !iloz, manoz i alactoz n raport molar ;*47*78; lucoz i !iloz n raport molar 6D*66 sau 82*48 au efect antitumoral dovedit e!perimental n sarcomul 1:D. -ibonucleaza cu masa molar de 12 EDa, izolat din aceast specie are aciune antiproliferativ pe hepatomul Hep!2 i leucemia "1210 . " aciune antitumoral pe S180 au i poliholozidele din P. citrinopileatus , denumit popular yu#uangmo . )fectul antiproliferativ al poliholozidei bo ate n lucoz i manoz este corelat cu aciunea imunostimulatoare . (raciunea poliholozidic e!tras n mediu alcalin i la cald din P. tuber-regium are efect antiproliferativ pe liniile tumorale e!perimentale H"-$0 i Hep !2. Imunomodulatoare 3 fraciunea poliholozidic #pleuranul$ din P. ostreatus acioneaz in %i%o asupra macrofa elor, efectul imunomodulator fiind mult crescut, n sensul stimulrii activitii fa ocitare a leucocitelor, prin carbo!imetilarea acestui lucan. #1"4$" i #1"8$" lucanii din P. florida stimuleaz activitatea fa ocitar a macrofa elor. Antio4idant2 " pleuranul #G"D" lucan$ din P. ostreatus crete activitatea supero!id dismutazei, lutation pero!idazei, lutation reductazei, lutation"3"transferazei, catalazei eritrocitare i inhib pero!idarea lipidic ; )!tractul obinut din P. citrinopileatus i caracterizat prin prezena er osterolului i acidului nicotinic n cantitate mare este antio!idant pe radicalii liberi de difenilpicrilhidrazil i antihiperlipidemic.

" e!tractul alcoolic din P. pufmonarius inhib pero!idarea lipidic i acioneaz asupra radicalilor hidro!il liberi, dar nu i asupra celor supero!id ; " n cazul speciei P. abalones efectul antio!idant este asociat cu prezena compuilor fenolici ; " proprietile antio!idante i coninutul ridicat n fibre diminu riscul apariiei cancerului de colon.

Antiinflamatoare " e!tractele metanolice obinute din P. florida au efect antiinflamator asemntor diclofenacului, n modelul inducerii inflamaiei acute sau cronice a labei de obolan cu carra een, respectiv formaldehid. )fectul benefic al G" lucanului #pleuranul$ n tratamentul colitei este e!plicat prin modificarea activitii mielopero!idazei dinn se mentul de colon inflamat i scderea infiltrrii neutrofilelor. %cest pleuran are rol imunomodulator n colita ulcerativ indus cu acid acetic administrat intracolonic. Antimicrobian2 P. ostreatus acioneaz pe &acillus subtilis, pe Stap#ylococcus aureus i 'sc#eric#ia coli i antifungic2 pe (spergillus niger. P. ostreatus nu este activ pe )andida albicans. .ompui care inhib dezvoltarea Stap#ylococcus aureus se sesc i n P. griseus, P. multilus #(r.$3acc. i P. passec*erianus +ilat. %ciunea speciei P. ostreatus pe P. aeruginosa, (. niger, &. subtilis i +usarium o,ysporum este e!plicat prin prezena p"anisaldehidei sau prin prezena seleniului care lea chitina coninut n structura pereilor celulari fun ici. Din aceast specie a fost izolat i o peptid antifun ic, cu masa molecular de 9 EDa; aceasta acioneaz pe +. o,ysporum, -ycosp#aerella arac#idicola i P#ysalospora piricola .

-ibonucleaza cu masa molecular de 12 EDa, izolat din P. sajor-caju inhib +. o,ysporum, -. arac#idicola, P. aeruginosa, S. aureus . )fectul antifun ic pe +. o,ysporum i -. arac#idicola a fost dovedit i pentru peptida erBn in din corpul fructifer de P. eryngii .

Anti5iral2 " fraciunea proteic din P. ostreatus a prezentat in %itro efect inhibitor pe L'C, prin inhibarea activitii revers"transcriptazei L'C"1 ; " din corpul fructifer proaspt de P. eryngii s"a izolat o proteaz #pleurerBn$ activ pe L'C"1 revers transcriptaza. G" lucanii din P. tuber-regium nu sunt antivirali, dar derivaii sulfatai ai acestora inhib replicarea viral a virusurilor HS.-1 i -2, syncytal i influen/a (. Anti6ipertensi52 )!tractul apos obinut din P. sajor-caju determin la administrare i.v. scderea tensiunii arteriale la obolanii de e!perien, probabil prin scderea filtrrii lomerulare. )fect antihipertensiv al e!tractului apos obinut la cald i manitolului din P. cornucopiae #/amo i"taEe mushroom$ este e!plicat prin inhibarea %.). Antiaterogen2 )!tractul etanolic din P. ostreatus sau ciuperca uscat au efect antiatero en %dministrarea la iepuri a unei diete bo ate n aceast ciuperc previne formarea plcii

de aterom i reduce incidena unor afeciuni coronariene. %cest efect a fost demonstrat i pentru P. florida. Antiagregant2 plac6etar2 " e!tractul metanolic obinut din P. florida are aciune antia re ant plachetar ; De cre7tere a densit2ii osoase P. eryngii crete aciunea fosfatazei alcaline din osteoblaste i determin in %i%o la obolanii cu osteoporoz indus prin ovariectomie, creterea densitii osoase. Alte aciuni* +rin teste efectuate pe celule de mamifere )H0-11 i pe Salmonella t#yp#imurium s" a demonstrat c e!tractul alcoolic obinut din P. ostreatus are un slab efect muta en n prezena sistemului activator metabolic 3"; .P. cornucopiae mpiedic apariia de mutaii prin tratarea cu radiaii >C a culturilor de S. t#yp#imurium i 'sc#eric#ia coli sau cu benzo"IaJ"piren pe S. t#yp#imurium T( 8 . P. sajor-caju nu are efect protector mpotriva modificrilor produse de L2O2 asupra %D&"ului celular.

8! )NTRE9UIN0RI
.hiar dac astzi n -omnia aceste specii prezint numai interes astronomic,

menionm c pot constitui un adevrat tezaur terapeutic pentru persoanele cu hipercolesterolemie i pot fi un adjuvant preios pentru diabetici, avnd n vedere c valoarea LD,"colesterolulului este sczut la cei tratai cu hipo licemiante. =edicina tradiional chinez menioneaz P. ostreatus ca diet ideal n prevenirea afeciunilor cardiovasculare, datorit coninutul ridicat n fibre, steroli, proteine i

microelemente, precum i aportului caloric redus. +oliholozidele de tip G" lucani din P. tuber-regium pot fi folosii ca supliment nutritiv . Caloarea alimentar deosebit, prin compoziie chimic, miros i superioare se folosesc medii sintetice pe suport de polipropilen$. Efecte secundare %u fost semnalate aler ii datorate inhalrii sporilor speciei P. ostreatus, P. cornucopiae, P. eringii i ai altor specii ale enului Pleurotus, dar i dermatite aler ice de contact. +entru dia nosticarea i terapia acestor aler ii se pot obine preparate standardizate din ciupercile respective. Aspecte to4icologice P. olearius poate produce into!icaii . +roteina denumit pleurotolBsin are proprieti hemolitice. 5n literatura de specialitate este menionat efectul to!ic al speciei P. ostreatus recoltat din @a dad #'raE$ la 1 F 6 zile dup ploaie. 3"a observat producerea de hemora ii intestinale, hepatice, pulmonare i renale la animale, doza to!ic fiind de 4 ME . %ceast specie poate acumula cantitai mari de cesiu radioactiv sau de mercur din mediul de cultur. P. eryngii poate acumula cantiti mari de plumb . ust plcut, a determinat cultivarea acestei ciuperci n toat lumea #pentru obinerea unor randamente

:!PREPARATE ;AR'ACEUTICE
'<CODE;EN%E '<CO DE;EN%E este un amestec de ciuperci folosite de mii de ani in C6ina 7i =aponia pentru propriet2ile lor medicinale e4cepionale> confirmate de

cercet2rile stiinifice din ultimele decenii? Cord@ceps ACordyceps sinensisB> 'aitaCe AGrifola FrondosaB> Reis6i AGanoderma LucidumB> <amabus6itaCe AHericium erinaceusB> 1imematsutaCe AAgaricus blazei MurrillB> %6iitaCe ALentinus EdodesB> /6u #ing APolyporus umbellatusB> DaEarataCe ACoriolus versicolorB> 1irataCe APleurotus ostreatusB> C6aga AInonotus obli uusB> AgariCon AFomitopsis officinalisB> 'esima AP!ellinus linteuB> 5itamina C> g6imber! Partea utiliFat2? miceliu> primordiu> sclerotiu> stem> fruct Atoate faFele de cre7tere ale ciupercilorB> "6imbir G r2d2cin2! Componente bioacti5e? betaglucani> 6eteroglucani> proteoglucani> cord@cepin> galactomanani> arabino4ilani> ergosteroli> glicoproteine> 6ericenone> triterpene> nucleotide> germaniu Efecte? " " " " imunostimulator puternic #activeaz celulele imunocompetente$; adaptogen #stimuleaz selectiv funciile or anismului ajutndu"l s se adapteze fizic, psihic, imunitar$; tonific2 energia Hi #ener ia vital care susine ntre ul or anism$; antitumoral e4cepional* protejeaz celulele sntoase, previne metastazele, in6ib2 angiogeneFa #util i in de enerescen macular$, contracareaz efectul prosta landinelor care produc inflamaii i impiedic maturizarea limfocitelor /; " " " " adIu5ant in c6imioterapie hematopoiezei$; 6epatoprotector puternic #re enereaz celula hepatic, deto!ifiant, stimuleaz producia endo en de interferon$; antidiabetic #reduce rezistena la insulin$; anti5iral #e!* virusul )pstein"@arr care provoac mononucleoz i sindrom de oboseal cronic, hepatic @, herpetic, L'C, Luman +apilloma, sindrom Naposi$ i #e!. impiedic anemia prin susinerea

antibacterian #e!* bacteria @orelia care provoac maladia ,Bme$, antifun ic #micoze$; " " " " " " neuroregenerator #stimuleaz factorul de cretere neuronal$; scade ni5elul colesterolului 7i al trigliceridelor> anti6ipertensi5J tonic cardiac> pulmonarJ digesti5> renalJ impiedic2 agregarea plac6etar2J antialergic #inhib producia de histamin$; tonic se4ual! +rezentare* flacon cu .K capsule a KKKmg amestec ciuperci, 8Dm vitamina ., 67m Ahimbir rdcin. =od de administrare* & capsuleLFi sau conform recomandrii consultantului de specialitate. +roductor* &atureOs PaB 3.>.%.

PARTEA PRACTIC

(i .7. +leurotus ostreatus

! O90INERE
Definiie* corpii de fructificaie ai speciei +leurotus ostreatus, pstrav, inua pdurii, familia +leurotaceae. +entru aceast lucrare am folosit produsul ve etal comercializat prin supermarEetul 3el ros.

&! DETER'INAREA IDENTIT0II

3"a realizat prin aplicarea metodelor calitative de analiz #e!amen macroscopic, microscopic i chimic calitativ$.

"#$# E%amen macroscopic

Principiul metodei +rin acest e!amen care reprezint primul stadiu de investi are al produselor ve etale noi sau cunoscute, s"a urmrit observarea caracterelor morfolo ice detectabile cu ochiul liber sau la lup i a celor or anoleptice percepute prin ust sau miros. 5n acest mod este analizat ntrea a varietate de produse ve etale ale cror

caracteristici sunt determinate de natura or anelor din care sunt constituite, poziia ta!onomic a plantelor de la care provin i de forma lor de prezentare* produse ntre i #in toto$, fra mente #concissum$ sau pulverizate #pulveratum$. )!amenul macroscopic se efectueaz n ordinea precizrii urmtoarelor elemente* (spectul prin care se stabilesc* forma produsului #ntre sau fra mentat$ particularitile feelor fractura consistena tipul seciunii transversale i raportul dintre esuturi #la lup$

2imensiunile se apreciaz n* cm pentru majoritatea produselor #folosind ri la$ mm pentru fructele i seminele mici #folosind hrtie milimetric$ mm pentru celule, incluziuni celulare # ranule de amidon, cristale etc. " folosind micrometrul ocular sau obiectiv$. )uloarea se observ la e!terior i la interior. -irosul se percepe pe produsul ca atare, zdrobit ntre de ete #frunze, flori$ sau pulverizat.

!ustul se determin pe produsul ca atare sau pe decoct #nu se n hite, se elimin i se cltete ura cu ap$.

)!amenele macroscopice de produse ntre i sunt de cele mai multe ori suficiente pentru determinarea identitii acestora. .aracterele or anoleptice mai ofer i unele orientri asupra compoziiei chimice a produselor analizate prin culoare, ust, etc. +entru produsele ve etale pulverizate, e!amenul macroscopic d unele informaii care uneori nu sunt suficiente identificrii, n care caz investi area se continu prin e!amenul microscopic. %stfel, culoarea alben, roie, albastr, portocalie a florilor i fructelor

presupune prezena pi menilor flavonoidici sau carotenoidici, culoarea portocalie la scoare i or ane subterane indic prezena derivailor antrachinonici, culoarea brun la frunze, or ane subterane i unele cotiledoane este e!plicat de coninutul n taninuri catehice al acestor produse. Austul amar al produselor se poate datora prezenei substanelor amare, heterozidelor cardiotonice sau a unor alcaloizi; ustul astrin ent poate indica prezena taninurilor; ustul aromat este atribuit prezenei uleiurilor volatile i rezinelor; ustul dulce se identific cu prezena lucidelor. #6$ RE/U#TATE +lria orizontal, n form de ureche sau scoic, diametrul 7"17 cm ,cu mar ina rsucit. (aa superioar neted, cenuie , brun"cenuiu , cenuiu"maronie, ne ricioas, se decoloreaz cu vrsta.

(aa inferioar cu lamele albicioase sau cenuii, foarte decurent, lar i, anastomazate la baz. +iciorul lateral,scurt de 1"6 cm, ros de 1"4 cm, alb"zbrlit, pros la baz, adeseori lipsete. .arnea alb,moale,elastic,miros plcut, ust dulce. 3porii cilindrici sau ovoizi # :"12 ! 4"6 microni $, hialini, netezi, albi n mas .

CONC#U/II

.oincidena acestor rezultate cu datele din literatura de specialitate a condus la concluzia c produsul analizat este Pleurotus 0streatus.

fi .7.Pleurotus 0steartus

"#" E%amen microscopic

%cest e!amen, ce reprezint o faz mai avansat a analizei calitative a produsului ve etal, fra mentate. .aracterele anatomice ale diferitelor or ane ale plantei servesc n unele cazuri i la precizarea poziiei ta!onomice a speciilor productoare. urmrete identificarea esuturilor i elementelor anatomice caracteristice ale seciunilor preparatelor clarificate din pulberi sau produse

Principiul metodei +reparatele microscopice se realizeaz prin metode diferite n funcie de natura, starea produsului #ntre , fra mentat sau pulverizat$ consistena i chiar compoziia sa chimic. )!amenul microscopic al produselor ve etale pulverizate* +rodusul ve etal se pulverizeaz prin zdrobire sau mcinare, urmat de omo enizare prin cernerea pulberii #sita de 4D ochiuriMcm2$. +reparatul microscopic se obine utilizndu"se un reactiv sau o soluie de clarificare a crui ale ere se face fie pentru clarificarea pulberii ve etale, fie pentru obinerea unor reacii caracteristice cormpuilor chimici ai pereilor celulari sau ai coninutului celulelor. +e o lam de microscop se aduc 2"4 picturi din soluia de clorhidrat #-$, n care se presar pulberea ve etal cu un ac spatulat. +reparatul astfel obinut se nclzete uor deasupra une flcri pn se percepe un miros uor neptor. Dup rcire se acoper cu o lamel. Dac este necesar prelun irea nclzirii se mai adau 1"2 picturi din soluia de clorhidrat. +entru punerea n eviden a elementelor li nificate se adau preparatului, inainte de acoperirea cu lamela, 1"2 picturi de floro lucin n acid clorhidric #-$. )!amenul microscopic al unei pulberi ve etale are ca scop precizarea or anului din care este constituit produsul ve etal respectiv, prin identificarea elementelor anatomice comune or anulul i stabilirea celor caracteristice produsulul.I8J conform procedeului clasic i au fost e!aminate la microscopul ,abophot"2 &iEon #ob. <1O, ob. <6D$. #6$

-ezultate

" " "

miceliu cu hife filamentoase, pluricelulare, ramificate. (i .8"9": hife himeniale cu numeroi bazidiospori. (i .; spori mici. (i .1D

(i .8. =iceliu cu hife filamentoase, pluricelulare, ramificate. Ob.1D<

(i .9.Life filamentoase.Ob.6<

(i .:. Life pluricelulare,celule seriate. Ob.6D<

(i .; Life himeniale cu numeroi bazidiospori.

(i .1D.Life i spori.Ob 6D<

(i .11. Life cu celulele dispuse cap la cap

(i .12.?on himenial, bazidi cu bazidiospori

"#&# E%amen c!imic calitativ

)!amenul chimic calitativ are ca scop stabilirea compoziiei chimice a unei plante folosind e!tracia succesiv cu solveni de polariti diferite. 5n primul rnd, produsul ve etal este e!tras cu un solvent nepolar *eter etilic,benzen, cloroform etc, apoi cu un solvent polar * etanol, metanol i n cele din urma cu ap. 5n e!tractul eteric se sesc compui chimici lipofili # uleiuri volatile, substane rase, acizi rai i rezinici, alcaloiBi baze , a liconi flavonici, antrachinonici i cumarinici, steroli, triterpene i carotenoide $, iar n e!tractele alcoolic i apos, comupi chimici hidrofili # polifenoli, alcaloizi sruri, aminoaciBi, licozide polifenolice, sterolice i triterpenice, antociani i fizico"chimice ale fiecrui rup de principii active. lucide $. )!tractele respective sunt analizate separat, folosind metode corespunztoare proprietilor

+rincipiul metodei * )!amenul chimic calitativ a fost efectuat pe produs ve etal +leurotus ostreatus. +entru o e!tracie mai eficient a principiilor active, produsul ve etal a fost mai nti mrunit, aopi e!tracia s"a fcut succesiv folosind solveni cu polariti diferite F eter etilic i ap F obinndu"se o soluie e!tractiv eteric i una apoas. (iecare dintre soluii a fost analizat chimic, urmrind constituenii solubili n mediul respective . 'dentificarea rupelor de principii active s"a fcut folosind reactivi de culoare sau de precipitare specifici pentru compuii respective menionai n literature de specialitate.

%. %naliza soluiei e!tractive eterice /ehnic de lucru *

produs ve etal pulverizat se e!tra e cu eter etilic prin a itare manual, la

temperatura mediului ambiant. %cest e!tract poate conine compui chimici liposolubili * ulei volatil, steroli, triterpene, carotenoide, acizi rezinici, alcaloizi baze, a liconi flavonici, a liconi ai antracenozidelor #emodoli$, cumarine, clorofil. 'dentificarea acestor compui chimici se face dup urmtorul mers de analiza. M Identificarea agliconilor fla5onici (lavonele sunt substane solide, cristalizate, colorate n alben de diferite

intensiti. Leterozidele flavonice sunt solubile n ap, alcool diluat i concentrat, solubile specific n acetat de etil, aceton, insolubile n solveni apolari. % liconii sunt solubili n alcool, acetat de etil, aceton, insolubili n solveni apolari. Leterozidele hidrolizeaz numai n prezena acizilor minerali #nu hidrolizeaz enzimatic$ 5n condiii diferite, n funcie de atomul de 'e tur dintre a licon i partea lucidic* D"heterozidele hidrolizeaz uor, ."heterozidele hidrolizeaz n prezena unor concentraii mari de acid, ntr"un timp mai ndelun at, la presiune ridicat i n prezena unor catalizatori. Datorit ruprii cetonice de la . flavonele se pot reduce cu hidro en nscnd n mediu hidroalcoolic cnd se formeaz antocianidoli #reacia 3hibata$. .uloarea acestora poate fi roie #flavonoli$ sau portocalie #flavone$. +rezena ruprilor o!idril fenolice permite transformarea, n mediu alcalin, a flavonelor n feno!izi de culoare alben mai intens dect flavona iniial. Aruprile o!idril alcoolice din vecintatea ruprii ceto permit formarea de chelai cu metale bi" i trivalente, colorai n alben mai intens dect flavona iniial.

a$ -eacia 3hibata #cianidolului$

+rincipiul metodei* -educerea ruprii cetonice a flavonelor cu hidro en nativ #rezultat n reacia dintre ma neziu i acid clorhidric concentrat$. 3e formeaz clorura de o!oniu colorat n rou
OH OH HO O Mg HCl OH OH O OH O HO O
+

OH OH

OH

Huercetol # alben$

clorur de cianidol roie

3eacti%i necesari4 acid clorhidric concentrat ma neziu metalic Te#nica de lucru4 1 ml soluie se introduce ntr"o eprubet cu cteva fra mente de ma neziu metalic #span$. ,a adu area de 6"8 picturi de acid clorhidric concentrat apare o coloraie roie sau portocalie. b$ -eacia cu hidro!idul de sodiu #&aOL$ Principiul metodei4 Dizolvarea flavonozidelor n alcalii cu obinerea de fenolai #flavo!izi$ intens colorai n alben.
OH OH HO O OH OH O OH O NaOH HO O OH ONa ONa

Huercetol alben

feno!id

3eacti%i necesari4 soluie hidro!id de sodiu 7Q

Te#nica de lucru4 ,a 1 ml soluie de analizat se adau 1 ml soluie hidro!id de sodiu 7Q. 5n cazul unei reactii pozitive coloraia alben a soluiei de analizat se intensific fa de cea a martorului n care nu s"a adu at soluie de &aOL 7Q.

c$ -eacia cu clorura de aluminiu #%l.l4$ Principiul metodei4 .helatarea cu sruri ale metalelor bi" i trivalente.
OH HO O HO O OH OH OH

(lavonele cu rupri libere la .4 sau .7 formeaz mpreun cu ruparea

ceto de 'a .6 chelai n poziia orto#'$ sau para#''$. %ceti compui se pot obine i atunci cnd pe nucleu e!ist dou rupri "OL vicinale, iar mediul de reacie O O
Me OH O este alcalin, pentru c n aceste condiii ruparea "OL O 6 se transform n O din glucoza Me rupare cetonic prin tautomerie "poziie para #'''$. .helaii obinui sunt de O

culoare alben intens i au o f'uorescenMe alben"verzuie sau albastr n >C.

O HO O O glucoza O O glucoza

3eacti%i necesari4 soluie de acetat de sodiu 1DQ soluie clorur de aluminiu 2,7Q

Te#nica de lucru4 ,a 1 ml soluie de analizat se adau D,7 ml acetat de sodiu #-$ i 1 ml clorur de aluminiu 2,7Q. .oloraia alben a soluiei de analizat se intensif

R Identificarea emodolilor

-eacia @ontra er Principiul metodei4 3e bazeaz pe proprietatea a liconilor forme o!idate #antrachinone$ de a trece din emodoli n feno!izi #emodinai$ de culoare roie"viinie, n prezena soluiilor alcaline. 3ensibilitatea reaciei este de1D"7. %ceasta poate fi efectuat direct pe produsul ve etal, pe microsublimat sau n soluie apolar de a liconi. % liconii cu funcie carbo!ilic formeaz feno!izi chiar n prezena carbonatului acid de sodiu.

3eacti%i necesari4 soluie L.' 1DQ soluie &aOL 1DQ

Te#nica de lucru4 3oluia e!tractiv apoas se hidrolizeaz cu L.' 1D Q i se e!tra e apoi cu eter. 3e iau 4"6 ml soluie eteric ntr"o eprubet i se adau D,7"1 ml soluie &aOL 1DQ. 5n cazul unei reacii pozitive stratul inferior apos se coloreaz n rou iar cel superior, apolar, se decoloreaz.

R Identificarea sterolilor sau a triterpenelor -eacia ,iebermann " @urchard* Principiul metodei4

(ormarea unei coloraii violet sau verde #datorit formrii unui dimer$ n prezena L23O6 concentrat i a anhidridei acetice. 3eacti%i necesari4 L23O6 concentrat anhidrida acetic

Te#nica de lucru4 Din soluiile hidrolizate, e!trase cu eter, se iau 4"6 ml, se evapor la sicitate, pe baia de ap, iar reziduul se dizolv cu 1"2 ml soluie anhidrid acetic; D,7"1 ml servesc ca martor i restul se toarn cu rij peste un volum e al de L 23O6 concentrat. %pariia unei coloraii violet indic o reacie pozitiv. R Identificarea alcaloiFilor %lcaloizii sunt substane or anice cu caracter bazic ce conin n molecul un atom de & heterociclic i au activitate farmacodinamic specific i to!icitate ridicat. Dei prezint structuri chimice foarte variate, toi alcaloizii se comport aproape identic fa de anumii reactivi denumii reactivi enerali ai alcaloizilor din care fac parte dou cate orii* reactivi enerali de precipitare i reactivi enerali de culoare. -eaciile de precipitare se efectueaz pe srurile alcaloizilor #deci n mediu acid apos$, iar cele de culoare pe rezidiile bazelor alcaloidice. S-eacii de precipitare Principiul metodei4 /oi alcaloizii, cu mici e!cepii, dau cu reactivii de precipitare precipitate albe, albene, portocalii, brune i mai rar alte culori.

3eacti%i necesari4 acid clorhidric 2Q reactiv =aBer #soluie apoas de tetraiodomercuriat de potasiu cu adaos de clorhidrat$ reactiv @ertrand #soluie apoas de acid silicotun stic$

Te#nica de lucru4 1D ml e!tract eteric se evapor ntr"o capsul de porelan pe baia de nisip. -eziduul se dizolv n 1,7 ml acid clorhidric 2Q prin amestecare cu o mic ba het de sticl la cald #pe baia de ap$. 3oluia decantat se mparte n trei eprubete, n volume e ale. ,a una din probe #eprubete$ se adau 2"4 picturi de reactiv =aBer #-$, la a doua prob se adau 2"4 picturi de reactiv @ertrand #-$ i ultima eprubet servete ca prob martor. Dac probele tratate cu reactivi dau opalescene sau precipitate evidente #de culoare alb" lbuie$, alcaloizii sunt prezeni. #7$

9! %naliza solutiei e!tractive apoase M Identificarea compu7ilor reduc2tori Principiul metodei4 3e bazeaz pe proprietatea lor de a reduce soluia de reactiv (ehlin la o!id cupros.

3eacti%i necesari4 soluie (ehlin ' #soluie apoas de sulfat de cupru$ soluie (ehlin '' #soluie apoas de tartrat de sodiu i potasiu n hidro!id de sodiu$

Te#nica de lucru4 +este 4 ml soluie se adau un amestec constituit din pri e ale de soluie (ehlin ' i '' i se nclzesc pe baia de ap. %pariia unui precipitat rou"brun care se depune n timp indic prezena compuilor reductori.

M Identificarea oFelor 7i poli6oloFidelor Ozele simple se identific datorit caracterului reductor prin reacia cu reactivii (ehlin sau /ollens i prin cuplarea cu o"toluidina sau fenilhidrazinele. +oliholozidele se identific prin reacia de culoare cu hemato!ilina sau prin precipitare n alcool.

a$ -eacia =olish )ste comun pentru ozele simple i pentru poliholozide. Principiul metodei4 .ondensarea furfuralului cu timol, n cazul poliholozidelor n urma depolimerizrii cu L23O6 concentrat.

3eacti%i necesari4 L23O6 concentrat timol Te#nica de lucru4 1D ml soluie e!tractiv apoas se concentreaz la sec ntr"o capsul de porelan. +este reziduu se aduc 1" 2 picturi L23O6 concentrat i dup 4"7 minute se aduce o pictur de timol. 5n cazul unel reacii pozitive apare o coloraie roie.

b$ +recipitarea n alcool i colorarea cu hemato!ilin Principiul metodei4 3e bazeaz pe precipitarea poliholozidelor n alcool i colorarea precipitatului cu hemato!ilin*

HO

OH

HO

OH HO OH O HO OH O

hemato!ilina 3eacti%i necesari4 metanol hemato!ilin

hemateina

Te#nica de lucru4 1D"17 ml soluie e!tractiv apoas se concentreaz la 2 ml ntr"o capsul de porelan. Dup rcire, soluia concentrat se toan n fir subire peste 2D ml metanol. 5n cazul prezenei poliholozidelor se va obine un precipitat care, n prezena hemato!ilinei se va colora n violet datorit hemateinei. R Identificarea compu7ilor poli6idro4ifenolici AODP3 uriB -eacia %rnoT Principiul metodei4 .onst n proprietatea fenolilor de a forma cu acidul azotos nitrozoderivai care se izomerizeaz spontan n izonitrozoderivai sau o!ime care, datorit caracterului lor slab acid, se dizolv n soluii alcaline dnd coloraii roii.
OH HO + HONO - H2O COOH COOH COOH HO OH N O HO O N OH

acid cafeic

nitrozoderivat

o!ima acidului cafeic" roie

3eacti%i necesari4 soluie L.' D,1 & reactiv %rnoT soluie &aOL D,1 &

Te#nica de lucru4 ,a D,7 ml soluie de analizat se adau 1 ml L.' D,1 &, 1 ml reactiv %moT i 1 ml soluie &aOL D,1 &. 5n cazul unei reacii pozitive se obine o coloraie roie. MIdentificarea fla5onelor 'dentificarea flavonelor n soluie e!tractiv apoas se face pe baza reaciilor menionate mai sus # r.3chibata. r. cu &aOL i r.%l.l4$, acestea fiind reacii de identificare commune pentru flavonozide i a liconi flavonici.

MIdentificarea antocianoFidelor Principiul metodei %ntocianozidele hidrolizeaz n mediu acid la nclzire cu eliberarea antocianidolilor care cristalizeaz sub form de sruri de flaviliu, solubil n ap, alcool, insolubil n solveni or anici nepolari.

+rin alcalinizare, se formeaz nti o pseudobaz care prin eliminare de ap trece ntr"o form chinonic violet, apoi n e!ces de alcalii se obine sarea chinonei respective colorat n albastru F verde. %ntocianii care posed 2 sau 4 rupri OL nvecinate formeaz compui

chelatici cu ionii metalelor trivalente # %l4U , (e4U $ de culoare albastr. Te#nica de lucru +este 1 ml soluie apoas se adau 1 ml &aOL rezultnd coloraii diferite n funcie de pL * coloraie roie la pL mai mic de 9, violet la pLV 9": , feno!id albastru la pLV :, i coloraie alben #calchon$ la pLV12.

R Identificarea proantocianilor %ntocianii sunt substane solide, cristalizate, colorate, solubile n alcool concentrat sau diluat i n solveni or anici apolari; la pLV9, insolubili n ap. 5n apa acidulat #pL W 4$ formeaz sruri de o!oniu solubite, colorate n rou .u bazele formeaz feno!izi solubili de diferite nuane, de la violet la albastru. 3e presupune c la pL V 9, antocianii sunt derivai de 2"fenil"G cromen"4"ol, labil, care se stabi'izeaz prin aromatizare n mediu acid, cnd trec n sruri de o!oniu.

O OH

OH

2 fenil"G"cromen

cation o!oniu

Leterozidele hidrolizeaz prin nclzire cu acizi diluai cu eliberarea antocianidolilor. +rin alcalinizare, dac se adau soluii alcaline treptat i modificarea pL"ului este lent se obine mai nti o pseudobaz incolor #instabil la pL V 9$ apoi forma chinonic violetX #stabil la pL foarte slab bazic$, feno!id de culoare albastr #stabil 'a pL V :"1D$; la pL V 12 se obin calchone colorate n alben. 5n sucul vacuolar #pL Y4$; ar putea avea loc adiia nucleofil a apei care ar destabiliza structura o!onic. 3e presupune ns c plantele pot preveni astfel de reacie prin acilare, co"pi mentare intermolecular cu flavonoidele, chelatare cu metalele i autoasocierea.
O O O glucoza O O glucoza O glucoza O O glucoza O O

(eno!id #albastru$ pL V:

(eno!id #albastru$ pL V:

Principiul metodei4 3e bazeaz pe proprietatea acestora de a se transforma n antociani prin reflu!are n mediu acid, conform reaciei*
R1 OH HO O H OH OH R2 HCl H2 O OH OH OH RO Cl O
+

R1 OH R2

OH

3eacti%i necesari4 soluie de acid clorhidric 1D Q

Te#nica de lucru4 1D ml soluie e!tractiv apoas nehidrolizat se concentreaz la reziduu. %cesta se reia cu 1D ml L.' i se divide n dou poriuni e ale care se aduc n dou eprubete. >na dintre ele se menine ntr"o baie de ap n fierbere timp de 4D de minute pentru transformarea proantocianidolulul n antocian, cealalt servete drept martor. Dup rcire ambele soluii sunt a itate cu 4 ml butanol #pentru e!tracia antocianilor$. Dac soluia butanolic obinut prin nclzire prezint o intensitate mai mare a culorii dect proba martor, n soluia de analizat e!ist proantociani.

R Identificarea saponoFidelor 3aponozidele triterpenice precipit cu acetatul neutru de plumb. 3olubilitatea n ap a saponozidelor cu rupri carbo!ilice poate fi mrit prin alcalinizarea soluiei #cu hidro enocarbonai, carbonai, fosfai$. 3e formeaz sruri mai solubile. 3aponozidele triterpenice hidrolizeaz enzimatic, treptat, mai uor dect cele sterolice, cu formare de heterozide secundare sau prosapo enoli i oze. ,a nceput se scindeaz he!ozele, apoi pentozele i n final acizii uronici. Lidroliza acid, dei total,

este nespecific n mediu de reacie re sindu"se a liconii, ozele i eventual acizii uronici sau acizii or anici care particip la structura saponozidei respective. a$ +roba de spumefiere* se e!ecut asupra soluiei e!tractive apoase care se a it timp de 17 sec ntr"o eprubet cu diametrul de 18 mm. 3e formeaz o coloan de spum care persist cel puin 17 mm. b$ -eacia cu acetatul de plumb* saponozidele triterpenice reacionez cu acetatul de plumb 7Q cnd se formeaz un precipitat alb. c$ -eacia cu hidro!id de bariu* saponozidele formeaz cu hidro!idul de bariu un precipitat alb.

R Identificarea taninurilor /aninurile sunt substane solide, amorfe. .ombinaiile cu mas molecular mic pot cristaliza, fiind incolore. /aninurile se dizolv n ap la cald, mai reu la rece, formnd soluii coloidale #solubilitatea variaz cu radul de condensare$ n alcool, aceton, acetat de etil; sunt insolubile n eter, cloroform, benzen, eter de petrol, sulfur de carbon i n ali solveni or anici apolari. %u ust astrin ent, fiind lipsite de miros; au activitate optic i sunt hi roscopice. 3unt absorbite de pulberea de piele, crbune, vat, o!id de aluminiu, caolin. %cizii i srurile minerale precipit taninurile din soluiile coloidale. (iind fenoli cu caracter reductor #reduc reactivii /ollens, (ehlin i N=nO 6, L2O2, '2$ dau coloraii caracteristice cu srurile de (e #'''$* verde"ne ricios n cazul taninurilor catehice i albastru"ne ricios cnd sunt prezente taninurile alice. .aracterul acid se datoreaz ruprilor ".OOL i "OL fenolice libere.

.u

proteinele

#substane

amidice$

taninurile

formeaz

combinaii

macromoleculare tridimensionale, impermeabile i impenetrabile #se stabilesc puni de hidro en cu ruprile polare ale proteinelor$.

Principiul metodei4 3e bazeaz pe proprietatea taninurilor de a determina coloraii albastre #taninuri alice$ sau verzi #taninuri catehice$ n prezena srurilor de (eU4. +entru decelarea e!act a tipului de tanin e!istent se precipit taninurile catehice sub form de flobafene #precipitat rou$ cu reactiv 3tBassnB. Dup separarea precipitatului, n filtrat se e!ecut reacia cu (eU4 n scopul identificrii taninurilor alice. O coloraie albastru" ne ricioas indic o reacie pozitiv.

R HOOC N

O H R R N R

H N

H O R OR H

OH

HN H

3eacti%i necesari reactiv 3tBassnB #amestec L.' * .L2O V 1* 2$ soluie (e.'4 1Q sau alaun feric 1Q soluie acetat de sodiu 1DQ Te#nica de lucru4

+este 2 ml soluie apoas se adau D,7 ml soluie (e.l4 1Q. 3e formeaz o coloraie verde"brun datorit prezenei taninurilor catehice. 3eparat se nclzete la fierbere pe baia de ap, timp de 4D minute o prob de 6 ml soluie apoas i o cantitate echivalent de reactiv 3tBassnB. 3e formeaz un precipitat rou care se filtreaz prin hrtie de filtru. (iltratul se neutralizeaz cu soluie de acetat de sodiu1D Q i se adau 2" 6 picturi so'uie (e.'4 1Q. .olorarea n albastru a soluiei indic prezena taninurilor alice.

R Identificarea alcaloiFilor %lcaloizii sunt substane or anice cu caracter bazic ce conin n molecul un atom de & heterociclic i au activitate farmacodinamic specific i to!icitate ridicat. Dei prezint structuri chimice foarte variate, toi alcaloizii se comport aproape identic fa de anumii reactivi denumii reactivi enerali ai alcaloizilor din care fac parte dou cate orii* reactivi enerali de precipitare i reactivi enerali de culoare. -eaciile de precipitare se efectueaz pe srurile alcaloizilor #deci n mediu acid apos$, iar cele de culoare pe rezidiile bazelor alcaloidice.

S-eacii de precipitare Principiul metodei4 /oi alcaloizii, cu mici e!cepii, dau cu reactivii de precipitare precipitate albe, albene, portocalii, brune i mai rar alte culori.

3eacti%i necesari4 acid clorhidric 2Q reactiv =aBer #soluie apoas de tetraiodomercuriat de potasiu cu adaos de clorhidrat$ reactiv @ertrand #soluie apoas de acid silicotun stic$

Te#nica de lucru4 1D ml e!tract eteric se evapor ntr"o capsul de porelan pe baia de nisip. -eziduul se dizolv n 1,7 ml acid clorhidric 2Q prin amestecare cu o mic ba het de sticl la cald #pe baia de ap$. 3oluia decantat se mparte n trei eprubete, n volume e ale. ,a una din probe #eprubete$ se adau 2"4 picturi de reactiv =aBer #-$, la a doua prob se adau 2"4 picturi de reactiv @ertrand #-$ i ultima eprubet servete ca prob martor. Dac probele tratate cu reactivi dau opalescene sau precipitate evidente #de culoare alb" lbuie$, alcaloizii sunt prezeni. #7$

ReFultate 7i discuii ReFultatele e4amenului c6imic calitati5 sint preFente Nn tabelele G (! se

poate obser5a c2 Nn produsul 5egetal studiat A ciuperca Pleurotus B am identificat? )n soluie eteric2 G agliconi sterolici 7i terpenici Alcoolic2 3 compu7i aFotai

Apoas2 3 triterpene 3 poliuranide 3 oFe > poliFa6aride 3 compu7i aFotai 3 compu7i reduc2tori

/abelul 1.Date e!perimentale obinute la e!amenul chimic calitativ pe soluii e!tractive eterice

/abelul 2.Date e!perimentale obinute la e!amenul chimic calitativ pe soluie e!tractiv alcoolic Compus c2utat Reacia de identificare folosit2 =aBer 1. %lcaloizi baz @ertrand 4. .arotenoide .arr"+rice U &aOL 1DQ n mediu alcoolic @orntra er alben lbui albastru" violet alben" portocaliu alben alben alben " inel* portocaliu "strat superior* verde"nchis
UU

Nr! crt

Culoare

Intensitate

ReFultate

alben

" " "

.ompui abseni

.ompui abseni .ompui abseni .ompui abseni

6.

.umarine

"

7.

)modoli

"

8.

(lavone #a liconi$

3hibata &aOL %l.l4

"

.ompui abseni

;.

3teroli i triterpene

,iebermann" @urchard

.ompui prezeni

/abelul 4.Date e!perimentale obinute la e!amenul chimic calitativ pe soluie e!tractiv apoas Nr ! crt ! 1. Nr! Compus %oluie Reacia de Culoare %oluie Reacia de crt c2utat e4tracti52 identificare Compus e4tracti5 identificare Culoare Intensitate folosit2 c2utat 2 folosit2 1. .ompui apoas violet azotai ninhidrin r.=aBer " %lcaloizi alcoolic alben sare r.@ertrand " 2. +oliuronide apoas U precipitat hemato!ilin; violet sol. alcoolic U &aOL 4. Oze i apoas L rou"brun 23O6 U alcoolic 1DQ n albastru" %ntociani " poliholozide timol sol. mediu violet hirolizat alcoolic alcoolic 6. .ompui apoas precipitat reductori rou (ehlin crmiziu 3hibata alcoolic (lavonozi alben " hidrolizat apoas 7. ,iebermann" brun de 3aponozide &aOL @urchard hidrolizat %l.l4 apoas spumefiere " %+(. alcoolic 9. /aninuri #OD+"uri$ .ompui reductori %rnoT apoas apoas (ehlin alben (e.l4 -. precipitat 3tBasnnB U rou (e.l 4 crmizi u violet " brun"rocat " UU Intensitate ReFultate UU .ompui abseni UU .ompui prezeni .ompui prezeni .ompui prezeni .ompui prezeni .ompui abseni ReFultate

2.

UU .ompui abseni UU

3.

.ompui U abseni " .ompui " abseni " .ompui prezeni

6.

.ompui abseni

7.

alcoolic

8.

.ompui reductori

alcoolic hirolizat

ninhidrin

UU

.ompui prezeni

4. Determinarea calitii +entru stabilirea calitii unui produs ve etal sunt necesare determinri preliminare #verificarea umiditii, determinarea reziduului prin calcinare i a substanelor solubile$ i dozarea principiilor active.

4.1. Determinri preliminare Determinarea umidit2ii +entru asi urarea conservrii produselor ve etate, acestea trebuie s aib un rad de umiditate care s se ncadreze n anumite limite. .antitatea de ap din produsele ve etale este influenat de radul de uscare, de mediul ambiant i de compoziia chimic a acestora.

Principiul metodei +rocedeele de determinare a coninutului de ap din produsele ve etale sunt diferite #uscare la etuv, uscare la vid, uscare la e!icator, antrenare cu vapori de solveni or anici$. Dintre aceste posibiliti s"a ales uscarea la etuv folosind produs ve etal uscat. +entru uscare produsul ve etal trebuie meninut la temperatura ambiant timp de cteva zile.

Te#nica de lucru4 5ntr"o fiol de cntrire adus la reutate constant prin nclzire la etuv, la aceeai temperatur la care urmeaz s se fac i uscarea, i rcit n e!icator, se introduc 4"7 prob de analizat; diametrul fiolei se ale e astfel nct cantitatea de material luat n lucru s nu depeasc un strat mai ros de 7 mm. (iola cu produs ve etal mrunit #sita 'C$ se menine patru ore la etuv la 1DD"1D7 Z., se rcete n e!icator i se cntrete. 3e continu uscarea cte 8D de minute, rcirea n e!icator i cntrirea pn la reutate constant.

3e/ultate 5i discu6ii +rin aplicarea acestei metode am stabilit pentru produsul studiat o valoare a umiditii cuprins ntre :D F :1,9 Q

'eterminarea substan(elor solubile 3ubstanele solubile reprezint cantitatea de constituieni chimici dintr"un produs ve etal, care se dizolv ntr"un anumit solvent #alcool, ap, eter$. %m determinat substanele solubile n ap, n eter i n alcool datorit particularitilor observate n cadrul e!amenului chimic calitativ. Principiul metodei +entru determinare am folosit metoda prevzut n (armacopeea -omn ediia a <"a.

Te#nica de lucru D,7"1,D produs ve etal pulverizat #C'$ se cntrete la balana analitic i se din solvent i se a it ener ic de

aduc ntr"un flacon cu dop rodat; se adau 1D"2D ndeprtnd primele poriuni de filtrat. 1D,D

cteva ori. 3e las la macerat 24 ore, se a it din nou timp de 1 or i se filtreaz,

filtrat se evapor la sicitate pe baia de ap, ntr"o fiol de cntrire n

prealabit cntrit. (iola de cntrire cu reziduu se usuc n etuv, la 1D7 D., timp de 4 ore, se rcete n e!icator i se cntrete. -eziduu reprezint substane solubile i se raporteaz la 1DD produs ve etal.#9$

3e/ultate 5i discu6ii -ezultatele obinute prin aplicarea acestei metode sunt urmtoarele* > substane solubile n ap* 24,4 F 24,: Q Q Q

> substane solubile n alcool* 19,2 F 19,8 > substane solubile n eter* )onclu/ii 12,8 F 12,:

Din rezultatele obinute prin aceast metod se observ c n produsul ve etal +leurotus predomin substanele solubile n ap urmate de cele solubile n alcool i apoi cele solubile n eter.

4.2. Dozarea principiilor active

3"a considerat necesar s se determine coninutul n poliholozide.

Determinarea cantitati5O a poli6oloFidelor Metoda gravimetric) Principiul metodei4 .onst n precipitarea poliholozidelor n mediu alcoolic.

Prepararea solu6iei de anali/at4 1,DDD ml. produs ve etal s"a e!tras de dou ori cu cte 2D ml ap distilat, la

fierbere, dup care s"a filtrat prin vat. 3oluia e!tractiv obinut s"a concentrat la 2D

Te#nica de lucru4 3oluia e!tractiv apoas care s"a supus concentrrii dup rcire s"a tunat n fir subire ntr"un pahar @erzelius peste o cantitate de zece ori mai mare de metanol concentrat. +recipitatul obinut s"a lsat n repaus timp de 26 ore dup care s"a filtrat cantitativ printr"o hrtie de filtru anterior inut n e!sicator i apoi cntrit. Lrtia de filtru cu precipitatul s"a meninut timp de 6: ore n e!icator dup care s"a cntrit.

)alculul 3e face diferena ntre cele dou mase cntrite #hrtia de filtru i hrtia de filtru cu precipitatul$ i se raporteaz la 1DD produs ve etal #substan uscat$.

.Q V

mb"ma " umiditate

! 1DD

.Q " concentraia n taninuri catehice e!primat n rame mb " masa hrtiei de filtru cu precipitat ma " masa hrtiei de filtru " cantitatea de produs ve etal cntrit 3e/ultate 5i discu6ii +rin raportarea cantitii de precipitat obinut la 1DD #substan uscat$ s"a determinat un coninut de 7,9 F 7,; produsul +leurotus produs ve etal Q poliholozide n

*!TE%TAREA AC0IUNII A%UPRA CE#U#EI $E"ETA#E

-aterial 5i metod7 /estarea aciunii soluiei e!tractive apoase obinute din +leurotus, asupra alun irii radiculare i asupra filmului mitotic al celulei ve etale, s"a realizat prin metoda profesorului dr "r Constantinescu #metoda fitobiolo ic " testul *riticum$. Principiul metodei4

.onst n determinarea diluiei ma!ime active a substanei studiate care, n funcie de durata de aciune, influeneaz alun irea radicular i filmul cariochinetic. +entru testare s"a ntrebuinat o sin ur soluie e!tractiv.

Preg8tirea solu6iei de anali/at 3"a preparat o soluie apoas 7Q prin reflu!area cu ap a produsului Pleurotus 0steartus. +entru a observa influena concentraiei asupra alun irii radiculare i mitozei, din soluia de analizat au fost obinute mai multe diluii, folosind volume diferite din soluia de testat i completnd la 17 ml cu ap distilat #tabelul nr. 9$.

Tabelul nr! *! )oncentra6ia solu6iilor de anali/at Nr! crt! ! &! (! *! +! .! $olum sol! de analiFat AmlB 17 1D 9,7 7 2,7 1 $olum de ap2 AmlB D 7 9,7 1D 12,7 16 Concentraie gP Ap!5!LmlB 7 4,44 2,7 1,88 1,44 D,44

%oluia de analiFat +1 +2 +4 +6 +7 +8

$olum total AmlB 17 17 17 17 17 17

=aterialul biolo ic pe care s"au efectuat cercetrile a fost constituit din rdcini embrionare de ru #/riticum vul are =ill, soiul Dropia, Aramineae, provenit de 'a '..+/ (undulea$.

!erminarea semin6elor .ariopsele de ru, selecionate pentru a fi ct mai omo ene, se mbib cu ap distilat, timp de 26 ore, la temperatura din laborator #1:" 27 o.$, dup care se pun la erminat n cutii +etri, cu diametrul de 17"2D cm, pe substrat de hrtie de filtru umectat cu ap. .nd lun imea rdcinilor principale atin e 1 cm, se introduc cte 7" 8 cariopse erminate ntr"o cutie +etri, cu diametrul de 1D cm, care conine 7 ml soluie de testat i se pstreaz la temperatura camerei.

'%aluarea cre5terii :n lungime a r7d7cinilor 3e folosete tehnica msurtorilor lineare, apreciind alun irea rdcinii principale din momentul iniial al tratamentulul, respectiv din prima zi, la intervale de 26 ore, pe parcursul a 7 zile, considernd aceast perioad drept faza cea mai activ de cretere. -ezultatele se e!prim comparativ cu un martor =, unde s"a utilizat apa distlatX n locul soluiei de cercetat. 3e fac observaii asupra modificrilor morfolo ice* aspectul i numrul radicelelor, aspectul i lun imea epicotilulul.

0b6inerea preparatelor microscopice )!amenul microscopic urmrete modificrile filmului mitotic induse n vrfurile radiculare de /riticum vul are. 3tudiul se face comparativ cu un martor #ap distilat$ meninut n aceleai condiii cu probele. -dcinile embrionare de ru au fost secionate la apro!imativ 7 mm distan de vrf i colorate cu orcein acetic diluat, conform procedeulul ,a .our. Orceina este un colorant natural e!tras din lichenii din enurile -acella i ,ecanora. +rocedeul se bazeaz pe afinitatea pentru cromatin a orceinei n mediu acid #pL" ul acid este necesar pentru hidroliza materialului aromatic din meristeme, care apoi se coloreaz n rou " violet$.

Prepararea solu6iei mam7 de orcein7 acetic7 3e nclzesc 1DD ml acid acetic lacial p.a. la temperatura de fierbere i se adau 2,2 orcein p.a., apoi se las 2" 4 minute pe foc. 3e rcete i se filtreaz. 3e pstreaz la loc ntunecos, n flacoane bine nchise.

Prepararea solu6iei standard de orcein7 acetic7 1; 3e amestec 67 pri soluie mam de orcein acetic cu 77 pri ap bidistilat. +rin adu area unei pri de soluie L.' 1& la 1D pri soluie standard n momentul ntrebuinrii, se obine soluia diluat de orcein acetic utilizat la colorare.

)olorarea meristemelor radiculare 3e folosesc creuzete mici de porelan, cu diametrul de 4 cm, n care se pipeteaz cte 1,7 ml din soluia diluat de orcein acetic. 3e secioneaz vrfurile radiculare de 7 mm i se introduc n aceast soluie. .reuzetele se nclzesc 1"2 minute pe sit de

azbest la bec de az pn la de ajarea primilor vapori de acid acetic 3e acoper i se las n repaus 1D minute " 2 ore Crfurile radiculare astfel colorate se pun pe o lam de microscop, ntr"o pictur de soluie diluat de orcein, se acoper cu o lamel i se preseaz pn la strivirea materialului de cercetat. +reparatele se studiaz folosind un microscop ,abophot 2 &iEon, cu obiectivele 6D! i lOO! #n imersie de ulei de cedru$.

-ezultate i discuii -ezultatele obinute prin msurarea lun imilor rdcinilor principale, timp de 7 zile consecutiv, sunt nre istrate n tabelele nr <%lun irea rdcinilor embrionare de /riticum vul are, e!primat n cm, n funcie de timpul de aciune e!primat n zile i de concentraia soluiei de testat este e!primat n raficul din figura nr =odificrile macroscopice ale rdcinilor embrionare i ale epicotilului, n funcie de tipul i concentraia soluiei testate, dup 12D de ore, sunt nre istrate n tabelul nr. 11

Tabelul nr! +! Alungirea radicular) la martor +i dup) men(inerea ,n solu(iile de testat -dup) ". ore/

Nr! Diluia crt! ! &! (! *! +! .! Q! = +1 +2 +4 +6 +7 +8 1.; 1,D 1.6 1.4 1.4 1.2 2

#ungimea rad2cinii principale AcmB 2.7 1,D 1.7 1.4 1.2 1.2 2 4.4 1,D 1.1 1.2 1.2 1.6 1.: 1.: 1,D 1.4 1.4 1.4 1.4 2.4 2 1,D 1.4 1.2 1.7 1.9 2.2 2.7 1,D 1.1 1.6 1.6 1.1 1.; 2.2 1,D 1.2 1.1 1.2 1.7 1.7 1.; 1,D 1.1 1.7 1.4 1.6 1.:

'edia lungimilor 2.2827 1,DDDD 1.27DD 1.2:97 1.4DDD 1.47DD 1.;497

Tabelul nr!.! Alungirea radicular) la martor +i dup) men(inerea ,n solu(iile de testat -dup) .0 ore/ Nr! crt! ! &! (! *! +! .! Q! 'edia lungimilor 6 1 1.2 1.7 1.4 1.; 6 4.9497 1.1127 1.2827 1.47DD 1.6827 1.:97D 4.4127

Diluia = +1 +2 +4 +6 +7 +8 4.7 1.1 1.4 1.4 1.9 1.6 4.9

#ungimea rad2cinii principale AcmB 4.: 1 1.2 1.6 1.2 1.; 4.9 4.7 1.4 1.4 1.4 1.9 1.6 4.; 6.2 1.1 1.4 1.4 1.4 2.1 4.6 6.7 1.1 1.6 1.2 1.; 2.1 2.2 2.; 1.1 1.2 1.6 1.6 2.2 2.2 4.7 1.2 1.2 1.6 1.2 2 4.6

Tabelul nr!Q! Alungirea radicular) la martor +i dup) men(inere

,n solu(iile de testat -dup) 1" ore/

Nr! crt! ! &! (! *! +! .! Q!

Diluia = +1 +2 +4 +6 +7 +8 6.7 1.1 1.6 1.4 2.4 2.2 6

#ungimea rad2cinii principale AcmB 6 1 1.2 1.7 2.7 4 2.2 6.7 1.4 1.2 1.4 1.; 2.9 6 7 1.1 1.4 1.4 1.4 4 8.4 6.7 1.2 1.6 1.4 1.; 4.9 2.2 4 1.2 1.2 1.6 1.6 2.4 8.7 7 1.1 1.2 1.6 1.2 2.; 2.4 8.9 1.2 1.2 1.7 1.4 2 6

'edia lungimilor 6.87DD 1.17DD 1.4DDD 1.497D 1.927D 2.;497 4.4127

Tabelul nr!8! Alungirea radicular) la martor +i dup) men(i ,n solu(iile de testat -dup) 23 ore/

Tabelul nr!:! Alungirea radicular) la martor +i dup) men(inere Nr! Diluia #ungimea rad2cinii principale AcmB Diluia #ungimea rad2cinii principale AcmB crt! ! ' *!+ +!( + .!: + Q!+ K ! = 6 7.2 6.9 8.9 *!+ 6.7 6.9 8.: :.8 &! &! (! (! *! *! +! +! .! .! Q! Q! P +1 P & +2 P ( +4 P * +6 P + +7 P . +8 ! 1.1 !* 1.6 !+ 1.6 &!* 2.6 &!+ 2.2 *!( 6 ! 1 !( 1.4 !+ 1.7 &!+ 2.7 *!Q 6.2 &!+ 2.2 !( 1.4 !* 1.4 !( 1.4 (!* 4.6 (!Q 4.9 *!( 6.4 !& 1.1 !* 1.6 !* 1.4 !( 1.4 (!& 4.2 8!& 9.8 !& 1.2 !* 1.6 !* 1.6 & 1.; (!Q 4.9 (!: 4.; !( 1.4 !* 1.6 !+ 1.6 !* 1.6 (!& 4.2 .!+ 8.7 ! 1.1 !( 1.2 !* 1.6 !( 1.2 (!+ 4.7 (!Q 2.4 !& 1.2 !& 1.2 !+ 1.7 !* 1.4 &!+ 2.7 * 6 'edia lungimilor .!K8Q+ 7.87DD ! 8Q+ 1.1827 !(+KK 1.427D !*(Q+ 1.6DDD !:.&+ 1.;27D (!(Q+K 4.297D *!.Q+K 6.47DD

,n solu(iile de testat -dup) $"4 ore/

Tabelul nr! K! Alungirea radicular5 la martor +i dup) men(inerea ,n solu(iile de testat

Nr! crt! ! &! (! *! +! .! Q!

Proba = +1 +2 +4 +6 +7 +8

'edia lungimilor r2d2cinii principale AcmB dup2 &* 6 2.2827 1,DDDD 1.27DD 1.2:97 1.4DDD 1.47DD 1.;497 *8 6 4.4997 1.1127 1.2827 1.47DD 1.6827 1.:97D 4.4127 Q& 6 6.87DD 1.17DD 1.4DDD 1.497D 1.927D 2.;497 4.4127 :. 6 7.87DD 1.1827 1.427D 1.6DDD 1.;27D 4.297D 6.47DD &K 6 8.D:97 1.1:97 1.47DD 1.6497 1.;827 4.497D 6.897D

;igura nr! (! Aspectul plantulelor de *riticum dup) $"4 ore Tabelul nr! &r.crt. 1 ! 6bserva(ii macroscopice asupra plantulelor de gr7u men(inute $"4 de ore in solu(iile testate +roba ' concentraia Q pvM1DDml " Observaii macroscopice rdcini albe cu cretere normal fr tumefieri la baz sau la vrf trei rdcini secundare epicotil verde de 11"11,7 cm

+1

creterea rdcinii principale inhibat total rdcina principal i rdcinile secundare sunt brunificate 2"4 rdcini secundare puin dezvoltate

 soluia este opalescent epicotilul este verde i are 8.7 com 4 +2 4,44 creterea rdcinii principale inhibat total rdcina principal i rdcinile secundare sunt brunificate 2"4 rdcini secundare puin dezvoltate soluia este opalescent epicotilul este verde i are 8.7 com creterea rdcinii principale inhibat total rdcina principal i rdcinile secundare sunt brunificate 2"4 rdcini secundare puin dezvoltate soluia este opalescent epicotilul este verde i are 8.7 com

+4

2,7

+6

1,88

+7

1,44

+8

D,44

creterea rdcinii principale este inhibat parial 4 rdcini secundare dezvoltate i contorsionate rdcina principal i cele secundare sunt puin brunificate epicotilul este verde i are : cm soluia este mai puin opalescent dect +1" +4 creterea rdcinii principale a fost puin inhibat # la [ din lun imea rdciniiprincipale a martorului $ 6 rdcini secundare foarte contorsionate, de culoare alb rdcina principal este alb epicotil verde de ; cm soluia este opalescent creterea rdcinii primare este inhibat

puin # lun imea rdcinii principale atin e 2M4 din lun imea rdcinii principale a martorului $ 6 rdcini secundare albe, ca i rdcina principal epicotil verde de 12 cm Din tabelele, raficele i foto rafiile prezentate reiese c inhibarea creterii n lun ime a rdcinii principale, de ctre soluia de analizat obinut din +leurotus, este direct proporional cu concentraia. %stfel, la concentraii cuprinse n intervalul 7 i 2,7 are loc inhibarea total a alun irii radiculare, iar la concentraii mici de D,44 se obin valori apropiate de cele ale martorului. -ezultatele studiului influenei e!tractelor testate asupra alun irii radiculare, precum i modificrile macroscopice evideniate de /estul /riticum, au impus necesitatea efecturii cercetrilor la nivel celular, prin e!aminare microscopic, conform tehnnicii menionate. +entru a putea interpreta modificrile filmului mitotic induse de soluiile testate, s"au observat mai nti fazele mitozei normale # la martor $* interfaz, profaz, metafaz, anafaz, telofaz.

5n interfaz) nucleul celulelor meristematice este bine conturat, are aspect ranular, reticulat, se observ nucleolli; cromozomii nu sunt individualizai #cromatina este dispus sub form de reea$. 5n profaz) carioteca i nucleii nu se mai observ #se dezor anizeaz$, se individualizeaz cromozomii #prin spiralizare i scurtarea filamentelor de cromatin$, dar dispoziia lor este nere ulat. 5n anafaz) cromozomii onocromatidici mi reaz spre cel doi poli, ajun nd la jumtatea distanei dintre ecuator i poli #aspect diaster$.

5n telofaz) se formeaz nucleii fii #cromozomii monocromatidici ajuni la poli se despiralizeaz, refac reeaua de filamente de cromatin, carioteca i nucleolii se reor anizeaz$. ,a sfritul acestei faze se observ apariiamembranei despritoare a celor dou celule fiice. =odificrile filmului mitotic induse de soluia de analizat sunt redate n tabelul nr. 12.

Tabelul nr! &! -odific7rile carioc#inetice produse de e,tractele ob6inute din Pleurotus

Nr! crt ! !

Proba

Obser5aii microscopice (recvente mitoze normale n toate fazele

&!

+1

'nhibare de cineze &uclei i nucleoli hipertrofiai 'nhibare de cineze &uclei i nucleoli hipertrofiai

(!

+2

*!

+6

%par diviziuni 3e observ interfaze i profaze %par toate fazele diviziuni

+!

+8

.omparnd rezultatele e!amenului macroscopic cu cele ale e!amenului microscopic, putem afirma c efectul de inhibare aproape total a alun irii radiculare, observat la primele dou concentraii, se datoreaz aciunii asupra diviziunii celulare.

Discuii +rin e!aminarea macroscopic a probelor timp de 12D de ore s"a observat c, n funcie de concentraie, are loc inhibarea total sau parial a creterii rdcinii principale. +rin e!aminarea microscopic a probelor dup 26 de ore s"au observat o serie de modificri constnd n * )fect mitoinhibitor i uor efect citoto!ic evideniat prin nuclei cu nucleoli hipertrofiai. )fectul mitoinhibitor apare la primele trei concentraii n funcie de concentraie, dupa cum reiese din rafic.

CONC#O/II

! ,ucrarea cuprinde o parte teoretic, n care am reuit sistematizarea datelor site n literatura de specialitate cu privirea la specia Pleurotus &. +artea e!perimental ncepe cu e!amenul macroscopic urmat de e!amenul microscopic, ce a permis stabilirea urmtoarelor elemente anatomice ale speciei Pleurotus ostreatus4 " hife articulate, ramificate " spori mici, rotunzi " hife pluricelulare, septate (! +rin efectuarea e!amenuluifitochimic am reuit identificarea n acest produs a urmtorilor compui * a eni sterolici i triptanici, compui azotai, saponozide, poliuronide, oze, polizaharide i compui reductori. *! 'n cadrul analizei cantitative efectuate au fost dozate substantele solubile in eter, alcool, apa si polizaharidele +! +rin testarea aciunii e!tractului apos asupra divizunii celulei ve etale am demonstrat c acest efect const n citoto!icitate uoar sau mitoinhibiie, n funcie de concentraia soluiei, i anume * efect mitoinhibitor la concentraii cuprinse ntre 7 F 2,7 Q 5n urma cercetrilor efectuate putem spune c specia Pleurotus ostreatus comercializat n -omnia are o compoziie asemntoare celei din alte zone eo rafice #despre care e!ist date n literatura de specialitate$. ostreatus.