II.

SERIA GRANULOCITAR Granulocitopoieza: - se desfoar tot n mduva roie hematogen - asigur formarea leucocitelor polimorfonucleare (granulocite) - din celule stem multipotente. - polimorfonucleare: oneutrofile, oeozinofile obazofile. Seria granulocitar sau mieloid - ase forme celulare

o primele trei sectorul mitotic mieloblastul, promielocitul, mielocitul o urmtoarele trei, celule relativ mature, sectorul de maturare metamielocitul, granulocitul nesegmentat granulocitul segmentat

- Citoplasma : oredus obazofil, 1. Mieloblastul oomogen, - este o celul rotund, obogat n ribozomi, - mare ( 15-25 m), ocu puine mitocondrii i - conine un nucleu : aparat Golgi. ocentral, oRER i lizozomii sunt n omare, numr foarte redus, oeucromatic, ogranulaiile sunt absente. ocu 3-5 nucleoli, bine vizibili. oPrin diviziune va da natere promielocitului.

2. Promielocitul : - este o celul ( 15-18 m), - nucleu omare, orotund sau ovalar, ocu o cromatin fin, dar mai condensat o1-3 nucleoli slabi vizibili. - Citoplasma : oputernic bazofil, obogat n organite: mitocondrii, RER aparat Golgi.

granulaiunile primare, azurofile, enzime lizozomiale mieloperoxidaze.

3. Mielocitul - celula n stadiu de cheie, - ultima celul care se mai divide, - prima celul n care apar granulaiile specifice (semn al maturrii). - Este o celul mai mic ( 13-15 m), - Nucleu : oovalar sau rotund, oexcentric, ocu cromatina mai grosolan, obogat n heterocromatin,

Citoplasma : mai abundent, uor bazofil, cu organite bine reprezentate: RER, aparat Golgi, granulaiuni primare i secundare specifice.

- Granulaiunile primare, (ME) - alungite, - puternic electronodense, - dispuse mai rar perinuclear - cele azurofile au semnificaia de lizozomi. -Granulaiunile specifice, - sunt mai mici, - mai slab electronodense - dispuse perinuclear. - Dup afinitile lor tinctoriale sunt de trei tipuri: o neutrofile, o eozinofile o bazofile. n decursul proceselor de maturare numrul granulaiilor specifice crete, n detrimentul celor azurofile, care se menin.

4. Metamielocitul - celula cu dimensiuni apropiate granulocitului segmentat Nucleul : o reniform o cromatina este condensat i fr nucleoli. Citoplasma : o slab bazofil, ocu organite n numr mai redus: RER, mitocondrii, ribozomi granulaiile primare scad numeric o granulaiile specifice devin mai numeroase. o n sngele circulant n proporie redus de 1-3 % (metamielocitul neutrofil, eozinofil, bazofil).

5. Granulocitul nesegmentat (neutrofil, eozinofil sau bazofil), - nucleu : o hipercrom, o n form de banan, (corn sau semilun) - citoplasm : o bogat n granulaii specifice : neutrofile, eozinofile bazofile. - n sngele periferic apar n proporie de 3-5%.

6. Granulocitul segmentat, - celula adult - nucleu mai mult sau mai puin lobat, - falsa impresie de nuclei multiplii - granulaiile secundare (specifice) numeroase, - granulaiile primare (azurofile) sunt foarte reduse.

a. Polimorfonuclearul neutrofil. Neutrofilul Neutrofilul, - celula terminal - 60-70% - Creterea lui numeric, neutrofilie, ose gsete n infecii acute, - iar scderea lor numeric, neutropenie, oiradiaii, ointoxicaii (plumb, arsenic, mercur) odup utilizarea exagerat a unor medicamente (piramidon, aspirin).

MO - are form rotunjit - 10-14 m - Nucleul : ounic, osegmentat, oformat din 3-5 lobi heterocromatici oheterocromatina dispus la periferie, olegai prin puni fine de cromatin. oDispoziia lobilor n neutrofil este asemntoare literelor mari de tipar: U, V, Z, N, S, Y.

o Numrul lobilor este proporional cu vrsta neutrofilului o 1-5% sunt cu nucleu nesegmentat, o Formula lui Arneth Dac predomin celule slab lobate se numete deviere spre stnga, dac predomin neutrofilele cu lobi nucleari muli se numete deviere spre dreapta - 6% din neutrofilele sexului feminin prezint : o b de toboar, o omologul corpuscului sexual Barr

- Citoplasma : oabundent, ouor acidofil, ofoarte bogat n granulaii fine, on coloraia May-Grunwald-Giemsa (M.G.G) au o culoare liliachie. oau un aspect pulverulent i sunt rspndite n toat citoplasma (50-200/celul).

ME - s-au descris trei tipuri de granulaii: a. granulaii primare azurofile; b. granulaii specifice secundare; c. granulaii teriare. a. Granulaiile primare azurofile - primele care apar n timpul granulocitopoiezei, - numrul lor descrete n timpul maturrii. - 15% - sunt rotunjite - dense la fluxul de electroni. - Au o structur caracteristic de lizozomi primari ce conin: o enzime lizozomiale

b. Granulaiile secundare, specifice, - mult mai numeroase - mai mici - alungite, - mai puin dense la fluxul de electroni. - Sunt lizozomi ce conin: o fosfataz alcalin, o peroxizi, o clorizi, o acid lactic, o acizi grai o au un rol inhibitor asupra microorganismelor. o lizozim i lactoferine, un complex enzimatic ce sustrage fierul necesar nutriiei bacteriilor o fagocitine, cu rol bacteriostatic.

c. Granulaiile teriare (nucleate), - se afl ntr-un numr foarte redus, - au dimensiuni medii i un coninut cristaloid - intervin n procesul de fagocitoz.

Organite comune, - RER, - complex Golgi - ribozomi, - la periferia citoplasmei: onumeroi microtubuli, omicrofilamente (actin, miozin), ovacuole de pinocitoz, oincluziuni de glicogen i lipide

Citofiziologia. - asigur aprarea nespecific a organismului, - capacitatea lor de fagocitoz. - microfage, - fagociteaz particule mici ca: obacterii, ovirusuri, oparticule mici inerte sau fragmente celulare, oastfel c ele constituie prima linie de aprare a organismul - Durata de via de 2-5 zile, - n snge ele persist 10 ore, - prin diapedez ajung n esuturi unde i ndeplinesc funcia.

b. Polimorfonuclearul eozinofil. Eozinofilul - 1-3%, - form rotund - 12-15 m. - Numrul lor crete o eozinofilie n inflamaiile alergice, boli parazitare oc anafilactic. o Hormonii corticoizi produc scderea eozinofilelor (eozinopenie).

MO - nucleu cel mai adesea bilobat, - format din doi lobi unii printr-o punte mai puin fin, - aspectul de desag. - rar pot exista celule cu nucleu parial lobat sau trilobat. - Nucleu : oeucromatina este dispus mai mult central, oheterocromatina la periferie. - Citoplasma : oacidofil, oconine granulaii mari ointens eozinofile rotunde i uniform repartizate n celule, opot masca nucleul. on coloraia MGG granulaiile se coloreaz rou-portocaliu.

EM, granulele specifice, caracteristice, - lizozomi, - de form rotund sau ovoid, - delimitai de membran. - n centru conin un cristaloid lamelar i angular, - dens la fluxul de electroni, denumit internum, - nconjurat de o matrice mai clar, denumit externum, - Cristaloidul conine o protein bazic major, cu efect antiparazitar. - Matricea conine fosfataz acid i alte enzime caracteristice lizozomilor primari

granule dense nespecifice, - azurofile mai mici i puine - conin histaminaz i arilsulfataz. n citoplasm se gsesc : - RER slab dezvoltat, - puine mitocondrii, - ribozomi, - aparat Golgi redus - incluziuni de glicogen

Citofiziologia: - durat de via de 8-12 zile, - este o celul mobil i cu capacitate de fagocitoz, o mai redus dect a neutrofilului. - corionul mucoaselor respiratorii, gastro-intestinale, genitale i n derm. - recunosc i fagociteaz antigenele i mai ales complexele antigen-anticorp. - fagociteaz antigenele legate de IgE - Limiteaz efectele secreiei mastocitare, prin neutralizarea histaminei i printr-un factor inhibitor, inhib degranularea.

c. Polimorfonuclearul bazofil. Bazofilul - 0,5%, - ceva mai numeroi la nou-nscui i la copii. MO - celul rotund - 8-10 m, - cu nucleu parial segmentat, - cu margini neregulate - forma de frunz de trifoi (trefl). - Citoplasma_ o uor bazofil o srac n organite,

o granulaii specifice : bazofile metacromatice, inegale ca mrime inegale ca form inegal rspndite. n coloraia MGG apar violet nchis, Metacromazia este dat de prezena heparinei

ME, granulele delimitate de membrane prezint o structur intern ce variaz cu specia. Granulele mari - similare celor din mastocite, dar nu identice. Granulaiile mici, - enzime proteolitice, - glicozaminoglicani, - histamin, heparin - factori chemotactici pentru neutrofile i eozinofile, - factor de activare ale plachetelor.

n citoplasm, - mitocondrii, - un aparat Golgi redus, - RER mai dezvoltat - prezint receptori pentru Fc al IgE, ocu rol n reacia de hipersensibilitate imediat ca mastocitele oreceptori pentru C3a i C5a ntre bazofile i mastocite - ambele au granulaii metacromatice, - ambele sintetizeaz histamin, heparin i serotonin. - au origine ntr-un precursor comun, - mastocitele populeaz de la nceput esutul conjunctiv, - bazofilele sunt formate n mduva roie hematogen. - au aspecte ultrastructurale diferite.

III. SERIA MEGACARIOCITO-TROMBOCITAR - se desfoar n mduva roie hematogen, - originea n celula stem pluripotent, - se difereniaz celula stem angajat - apoi se vor forma megacariocitele - n urma fragmentrii, vor rezulta trombocitele. Seria megacariocito-trombocitar cuprinde patru tipuri celulare, 2 n sectorul moitotic 2 n sectorul de maturare.

1. Megacarioblastul nucleu : - rotund, voluminos - parial segmentat, - cromatin relativ grosolan, - 1-3 nucleoli. - Nucleul se replic de mai multe ori i devine poliploid, - celula nu se divide ci se transform progresiv n megacariocit bazofil. Citoplasma : o intens bazofil, o conine numeroi ribozomi, o restul organitelor fiind n numr redus, o granulaiunile lipsesc. o Prezint antigeni de suprafa i acetilcolinesteraz.

2. Megacariocitul bazofil (promegacariocitul), - celul mai voluminoas Nucleu : o foarte mare, o lobat o bogat n heterocromatin, o nucleoli greu vizibili sau abseni. Citoplasma : o intens bazofil o conine numeroi ribozomi i poliribozomi, o organite bine dezvoltate cu rol n activitatea de sintez. o apar cteva granule azurofile.

3. Megacariocitul granulos, - celul difereniat, matur, de talie mare Nucleu : o puternic segmentat o polilobat sau inelar, o cromatin condensat, fr nucleoli. Citoplasma : o bogat reprezentat, o acidofil o organite implicate n sinteza proteic o Granulaiuniile azurofile cresc numeric, o se dispun n insule de 10-15 granule, o nconjurate de membrane i microvacuole oNumrul de ribozomi i poliribozomi descresc pe msura maturrii, o microfilamentele i microtubulii se dispun la periferie.

4. Megacariocitul trombocitogen, - este celula activ, - din care iau natere trombocitele. - Este o celul gigant ( 100-150 m), - cu numeroase pseudopode. Nucleul : o multilobat, ocu cromatin condensat, fr nucleoli. Citoplasma : o eozinofil, o bogat reprezentat, o conine numeroase granule azurofile dispuse n insule, - Pseudopodele conin n axul lor proplachetele

- se insinueaz printre celulele endoteliale - strbat peretele capilarelor sinusoide din mduva hematogen. - n lumenul capilarelor, o pseudopodele se fragmenteaz - Uneori megacariocitul ptrunde ntreg n capilare, ajunge la plmn, unde elibereaz plachetele. O parte din trombocite : - vor constitui elemente circulante, - ns cea mai mare parte sunt depozitate n splin i plmni

TROMBOCITELE SAU PLACHETELE SANGUINE - sunt fragmente citoplasmatice olipsite de nucleu, oincorect denumite trombocite. oform rotund sau discoidal, o mediu de 2-5 m o cnd sunt active ele se retract i emit prelungiri lungi. oau tendina de a se agrega, fr s adere de endoteliul normal, de cel alterat, ader imediat. Dimensiunile - pot varia de la diametru mediu o diametre mai mici, sub 3 m (microtrombocite) o peste 5 m (macrotrombocite).

Numrul trombocitelor - La adult este 200.000-400.000 pe m3, - variaii n raport cu simpaticotonia diurn, o maxim dup amiaz o minim noaptea n vagotonia nocturn. - Cnd numrul lor scade sub 100.000 m3 se numete trombocitopenie, - creterea lor numeric trombocitoz Durata de via - 8-12 zile n sngele periferic. - Se distrug n cursul hemostazei - sunt distruse n organele n care sunt depozitate cu precdere.

MO, n frotiul colorat MGG, - citoplasm, alctuit din dou zone: - periferic, oomogen i clar, oslab bazofil numit hialomer, - central, ogranular, oputernic colorat violaceu, numit granulomer

ME - glicocalix, oce permite absorbia de fibrinogenul i factorul VIII, cu rol n interaciunea dintre plachete cu alte suprafee strine sau peretele vascular (agregare).

Hialomerul, - conine citoscheletul o microtubuli, o microfilamente o diferite proteine cu rol n procesul de coagulare sang Granulomerul (cromatomer, cromomerul) - numeroase granule - microvezicule delimitate de membran. MO s-au pus n eviden pn n prezent trei tipuri de granule:

a. granule alfa, - de form variabil - granulaii azurofile, - conin factorul 4 plachetar ce neutralizeaz heparina, - factorul de cretere a permeabilitii vasculare - factorul chemotactic pentru neutrofile i fibrinogen plachetar. b. granule delta dense - ce conin serotonin, calciu, ADP, ATP, epinefrin. c.granulele lambda, - lizozomi bogai n hidrolaze acide

Citofiziologia. - iniiaz i particip la realizarea hemostazei i coagularea sngelui. - Dup distrugerea endoteliului vascular, sau n staze venoase, varice etc, plachetele au capacitate de aderare i aglutinare. - Intervin n procesele inflamatorii, prin concentrarea lor la locul invaziei microbiene, unde elibereaz factorii ce cresc permeabilitatea peretelui vascular: serotonina, factorii chemotactici pentru granulocite. - Endociteaz bacterii fr s le distrug, precum i particule mici de crbune. - stimularea creterii fibrelor musculare netede vasculare, a fibroblastelor din piele i a secreiei de colagen de ctre fibroblaste.

CITODIABAZA - reprezint totalitatea mecanismelor prin care elementele medulare prsesc esutul mieloid i ptrund n sngele circulant. - n condiii normale, au capacitatea de a ptrunde n snge numai elementele figurate mature, - din cauza dereglrii mecanismelor citodiabazei, pot trece n snge i elemente tinere, imature. Mecanismul prin care celulele celor trei serii mieloide ptrund n snge este diferit. - trecerea hematiilor n capilare se realizeaz printr-un proces de dizolvare enzimatic temporar a pereilor capilari, cu refacerea lor ulterioar. - Granulocitele strbat pereii capilarelor prin diapedez, cu ajutorul pseudopodelor. - Megacariocitele emit i ele pseudopode.

ESUTUL LIMFATIC SAU LIMFOID - derivat al celui mieloid, - alctuit din populaii celulare heterogene, - structuralizate n organe limfoide i formaiuni limfoepiteliale. -n concepia actual, este organizat prin dou compartimente : o compartimentul limfoid central o compartimentul limfoid periferic. a) Compartimentul central, o mduva hematogen o timusul. - Ele se dezvolt precoce, nc din viaa embrionar, - la adult involueaz, dar nu complet. - Sunt organe limfoide primare care extirpate precoce, induc o depleie limfocitar, urmat de o deficen imunologic grav.

b) Compartimentul periferic, este reprezentat de organele limfoide secundare: o ganglionul limfatic, o splin, o formaiuni limfoide asociate mucoaselor. - Apar n viaa intrauterin tardiv sau chiar dup natere, dar persist ntreaga via. - Extirparea lor nu are urmri semnificative. - La stimularea antigenic reacioneaz prin formare de foliculi limfatici secundari, cu centrii germinativi. - Sunt organe bogate n capilare sinusoide, cu rol de filtrare a limfei sau sngelui. Din punct de vedere morfofuncional este organizat n dou tipuri de esut limfatic: - esut limfatic dens - esut limfatic lax.

esutul limfatic lax sau lacunar, - alctuit din capilare sinusoide, - tapetate de celule endoteliale - nconjurate de macrofage i de un numr variat de celule limfatice. - organizat pentru funcia de filtrare - este prezent n : o ganglionul limfatic o n splin o corionul mucoaselor

esutul limfatic dens : - este reprezentat prin nodulii limfoizi : oprimari osecundari oinfiltraiile limfoide difuze. Foliculii limfatici a. Foliculul primar (n repaus) l gsim mai ales n : - ganglionul limfatic, - splin, - corionul mucoaselor - amigdale.

MO - arii sferice de culoare omogen, - albastru nchis b. Foliculul secundar (activ, reactiv), - rezult din restructurarea foliculului primar, - n viaa postnatal dup contactul realizat cu un antigen. - o zon central mai palid, moderat bazofil, o numit centru clar sau germinativ - dintr-o zon periferic intens bazofil ocoroan limfocitar Centrii clari sau germinativi sunt formai : - limfocite activate (imunoblaste), - macrofage, - celule dendritice foliculare

Coroana limfocitar este alctuit din limfocite B mici, componentele mature ale limfopoiezei. Infiltraiile limfoide. - un esut limfoid dens organizat difuz, - mase limfoide slab delimitate, - formeaz n : oganglion zona paracortical i cordoanele medulare, osplin tecile limfoide periarteriale. o n formaiunile limfoide asociate mucoaselor din tubul digestiv, ci respiratorii, ci genitale i excretorii, infiltraiile limfoide dense sunt dispuse printre foliculii limfoizi. Ele conin preponderent limfocite T, imunoblaste, celule interdigitate i macrofage.

LIMFOPOIEZA - Funcia citogenetic a esutului limfoid dens este limfopoieza. - Originea limfocitelor ocelulele stem, insulelor sanguine Wolff-Pander, mduva roie hematogen. o O parte din celulele stem, se vor diferenia n mduva roie hematogen, n limfocite B o Alte celule stem progenitoare migreaz n timus, unde se vor diferenia n limfocite T Limfopoieza : - n organele limfoide centrale este : o antigen-independent o pluriclonal

- o parte migreaz din timus n regiunile specifice timusdependente o organele limfoide periferice: ganglion limfatic, splin, amigdale, Limfocitele B vor migra n organele limfoide periferice, bursodependente. - Are loc al doilea proces de limfopoiez, o antigen-dependent o monoclonal, ca rspuns la un stimul antigenic recunoscut. Indiferent de locul limfopoiezei, acest proces cuprinde 3 tipuri celulare: - limfoblastul, - prolimfocitul - limfocitul.

Limfoblastul - celul mare, - 12-14 m, - citoplasm : o abundent, o bazofil, o bogat n ribozomi, o mai puin lizozomi o fr granulaii. - Nucleul : o mare, o eucrom, o 1-2 nucleoli proemineni.

Prolimfocitul, - rezult din diviziunea limfoblastului, - mic, - 8-12 m, - citoplasm : o bazofil omai redus, oce conine ribozomi ogranulaiuni azurofile. - Nucleul : ocromatin mai condensat onucleol vizibil.

Limfocitul mic : - celul tisular i/sau circulant, - reprezint 90% populaia de elemente limfatice, - principala component celular, imuno-competent a esutului limfoid MO - celul mic, - de 6-8 m, - citoplasm : o foarte redus, o bazofil, o aezat perinuclear, osub form de inel sau semilun, ocu cteva granulaiuni azurofile.

- Nucleul : o mare, o rotund, o cromatina dens, o condensat puternic, o formnd practic un bloc compact, o fr nucleol vizibil, (nucleu tahicrom). - raportul nucleo-citoplasmatic este foarte mare (0,8-0,9), fapt caracteristic limfocitului mic ME. - nucleu : o cu heterocromatin compact o nucleol mascat.

- Citoplasma : oeste srac n organite, oaparat Golgi mic, oRE format din rare cisterne, adesea neted, mai rar granular, octeva mitocondrii olizozomii prezeni sub form de granulaii azurofile ocorpi multiveziculari, onumeroi microtubuli i microfilamente. - Membrana celular, o este acoperit cu un strat redus de glicocalix, o prezint microvili ovezicule de micropinocitoz

- Aspectul MO i ME pare s indice o celul mai puin activ, n repaus sau, o celul adormit. Limfocitul mic - nu este o celul adult terminal - este capabil de a se reactiva o transformare blastic, - dup un proces de recirculaie oindus de un stimul antigenic.

Circuit : - limfocitele au un ciclu biologic o Se formeaz n organele limfoide, o ajung n circulaie i apoi n esuturi. o vin n contact cu un antigen, pe care l recunosc graie receptorilor de suprafa. on urma stimulrii antigenice limfocitele mici sufer un proces de : recirculaie transformare blastic, o transformndu-se n limfocite imuno-competente.

- devine celul activ, o capabil de diviziune i de citodifereniere. o imunoblaste, o sunt celule mari o 12-15 m, o nucleu : mare, rotund, eucrom, cu unul sau mai muli nucleoli. o Citoplasma bazofil este lipsit de substraturi PAS-pozitive organitele mai ales cele de sintez (RER, aparat Golgi, mitocondrii) sunt mai slab reprezentate. este activ n sinteza receptorilor de suprafa

Citofiziologia. Limfocitele sunt celule centrale ale sistemului imun. - asemntoare morfologic, - formeaz o populaie heterogen, - cu caracteristici imunologice diferite, - ce nu pot fi difereniate cu certitudine nici la MO sau ME, - numai prin utilizarea unor markeri citochimici (anticorpi monoclonali). Sub acest aspect se cunosc trei tipuri de limfocite: a.limfocite B burso-dependente (timus independente); b.limfocite T timus-dependente c.limfocite O sau nule