Sunteți pe pagina 1din 8

Membrane biologice Membranele celulare prezente n toate celulele sunt expresia evident a organizrii moleculelor n structuri funcionale.

Chiar dac membranele prezint o diversitate pronunat, ele au n comun trsturi caracteristice: funcionalitatea, compoziia, orientarea constituenilor polari i nepolari, natura interaciilor realizate ntre molecule constituente. n acest sens, membranele reprezint funcional, bariere de separare ntre compartimente apoase care au compoziii diferite, care permit transportul limitat al componenilor sistemelor apoase. Membranele sunt constituite din lipide i proteine structurale i funcionale. !ipidele membranare sunt preponderent polare: fosfogli" ceride, sfingolipide, glicolipide, la care se adaug colesterolul liber. Compoziia n componente lipidice a membranelor determin natura i funcia acestora #$abel %"&'. n genere raportul colesterol(fosfatidiletanolamin este o constant a structurii membranare, iar raportul fosfatidilcolin(sfingomielin este dependent de specie.
$abel %"&. Compoziia n lipide a unor membrane biologice

Lipidul )cidul fosfatidic #*' .osfatidilcolina #*' .osfatidiletanolamina #*' Colesterol #*'

Membrana eritrocitar +,, +/ +& 0,

Membrana neuronal -,, +001

Peretele bacterian E.Coli " " 1, "

$ehnicile moderne de investigaie au artat c moleculele lipidelor se aran2eaz n structuri bistratificate n constituirea membranelor #.ig. %"3,'. )stfel, zonele nepolare lipidice sunt orientate spre interior, interacion4nd prin intermediul forelor hidrofobe, n absena contactului intim cu apa, iar zonele hidrofile ale lipidelor se orienteaz nspre exterior, n contact direct cu lichidele biologice.

.ig. %"3,. 5rientarea lipidelor n dublul strat pentru constituirea membranelor biologice

$eoria dublului strat lipidic, care st la baza structurii tuturor membranelor, este verificat de coeficienii de permeabilitate ai diferitelor substane #.ig. %"31'. 6roteinele care intr n constituia membranelor difer de la o membran la alta, diferind n acelai timp i raportul proteine(lipide care definesc membrana #$abel %"/'.

.ig. %"31. Coeficienii de permeabilitate ai unor ioni i molecule prin dublul strat lipidic $abel %"/. Compoziia chimic a unor membrane biologice

Membrana

Proteine (%)

Lipide (%)

Zaharide (%)

7ritrocit uman Mielin 6erete bacterian 9ram pozitiv

3/ +& %,

38 %/ 0,

& 8 "

6roteinele care intr n structura membranelor pot fi grupate n extrinseci i intrinseci. Proteinele extrinseci #periferice' interacioneaz slab cu suprafaa dublului strat lipidic i sunt uor extractibile #soluii saline'. Proteinele intrinseci #integrate' interacioneaz puternic cu dublul strat lipidic prin intermediul zonelor :"helicale i pot fi eliminate dup denaturare cu detergeni sau guanidin. )lctuirea complex a unei membrane reprezint o structur limit la care fosfolipidele a2ung gradat sub form bistratificat i sub aceast form se asociaz cu proteinele form4nd sisteme stabile lipoproteice. ;e"a lungul timpului s"au elaborat mai multe modele de complexe lipoproteice care s determine constituirea membranelor. 6rintre acestea se numr: " modelul sand<ich de proteine care conin n partea interioar dublul strat lipidic #.ig.%"3%a'= " modelul mixt n care membrana este considerat tot un sand<ich de proteine i puine lipide n exterior i un complex de lipide i proteine n interior= " modelul mixt constituit din uniti repetitive n care lipidele i proteinele formeaz complexe lipoproteice individuale globulare care interacioneaz reciproc #.ig.%"3%b'= " modelul mozaic luid n care membrana celular este considerat ca o soluie de proteine globulare i lipide, orientate bidimensional ntr"un solvent viscos #matrice' constituit din dublul strat fosfolipidic #.ig.%"3%c'.

.ig. %"3%. Modele de membrane: a. model sand<ich= b. model mixt constituit din uniti globulare repetitive= c. model mozaic fluid.

Modelul de membran mozaic fluid elaborat de >inger i ?icolson corecteaz inconsistena termodinamic a modelelor clasice de tip trilaminar #dublu strat lipidic cuprins ntre dou straturi proteice'. Modelele trilaminare sunt termodinamic instabile datorit faptului c zonele nepolare din proteinele membranare sunt expuse apei, fiind necesar energie din exterior pentru stabilizare. >tarea de energie liber minim este atins n membranele n ipoteza mozaic fluid, n mediul apos, c4nd resturile nepolare ale aminoacizilor din proteine i catenele hidrocarbonate lipidice sunt orientate nc4t s evite contactul cu apa, iar cele polare din proteine, lipide i zaharide sunt orientate n contact direct cu apa. ;in aceast cauz membranele biologice sunt structuri asimetrice. Moleculele proteice integrate pot traversa stratul dublu lipidic n aa fel nc4t s aib contact cu mediile biologice de pe ambele pri. Moleculele nepolare i nencrcate electric pot traversa pasiv membranele prin difuzie translaional, cu viteze determinate de viscozitatea lipidelor. $ransportul activ, n opoziie cu transportul pasiv, presupune deplasarea ionilor anorganici sau a substanelor puternic polare mpotriva gradientului de concentraie. ;ac n transportul pasiv sistemul pierde energie liber #exergonic' n transportul activ sistemul c4tig energie liber #endergonic'. 6rocesul endergonic este cuplat cu hidroliza exergonic a )$6. ;ac substana transportat este neionic dar polar, aceasta necesit pentru transport o substan transportoare #carrier' i astfel se realizeaz transportul mediat #facilitat'. 6entru substanele ncrcate electric intervin n procesul de transport dou gradiente: un gradient de potenial #de sarcin electric' i un gradient de mas. n procesele de transport mediate pasiv sau activ, variaia vitezei de transport n raport cu concentraia substanei transportate este descris de o hiperbol echilater, asemntoare cu cinetica Michaelis"Menten din cinetica enzimatic #.ig. %"3&'. ;eci sistemele de transport mediat prin membrane conin un situs de legare a substanei transportate, complementar, asemntor situsului catalitic specific enzimelor #.ig. /"++'.

.ig. %"3&. Curba de corelare n transportul mediat prin membrane

Membranele sunt structuri foarte dinamice care includ difuzia lateral i rotaia moleculelor, micarea segmentelor catenelor i micarea flip"flop dintre cele dou monostraturi ale bistratului lipidic. )ltfel zis, mobilitatea exprim viteza de reorientare a moleculelor, n timp. .luiditatea membranelor este dependent de numeroi factori #$abel %"+-'. >cderea colesterolului membranar, a proteinelor integrale, creterea nesaturrii acizilor grai i descreterea ionilor de calciu, determin creterea fluiditii membranare. Membranele biologice sunt structuri lipoproteice care delimiteaz organitele celulare de citosol i celulele de mediul exterior. )cestea sunt implicate n recepia unor semnale din mediu, n realizarea unor reacii biochimice de suprafa i n transportul selectiv al substanelor. Membranele sunt deci structuri fluide n care stratul dublu lipidic are o grosime cuprins ntre , i +- nm, a cror integritate este asigurat de interaciile de natur slab dintre catenele hidrofobe, manifestate n interiorul lor. )ceast structur este o barier pentru trecerea moleculelor hidrosolubile sau a ionilor.
$abel %"+-. .actori care influeneaz fluiditatea membranar

!actorii .izici Chimici

Parametrii $emperatura 6resiunea 6otenialul membranar ?esaturarea acizilor grai Coninutul n colesterol Coninutul de lipide peroxidate Coninutul de vitamine liposolubile Coninutul de proteine integrate Coninutul de proteine periferice @aloarea pA"ului i fora ionic Coninutul de detergeni 7xistena polimerilor solubili Capacitatea de legare a anticorpilor

;atorit diferitelor tipuri de lipide i proteine care intr n alctuirea membranelor, acestea prezint o structur asimetric, materializat prin funcionalitate diferit pe cele dou fee. )simetria transversal a membranelor induce i o polarizare electric, de regul orientat cu sarcina negativ spre interior. ;iferena de potenial dintre cele dou fee ale membranelor este de aproximativ 1-m@ i 2oac un rol esenial n excitabilitate, transportul de substane i conversia chimic a energiei. 6roteinele i lipidele constituente ale membranelor prezint o circulaie liber continu materializat printr"o micare de translaie n planul membranei, o micare de rotaie n 2urul unei axe perpendiculare pe suprafaa membranar i prin micri de rotaie n 2urul unor axe din planul de separaie al celor dou monostraturi lipidice #flip"flop'. Micrile flip"flop sunt consumatoare de energie i se produc cu o vitez redus, necesit4nd traversarea zonei hidrofobe din membran de ctre zona hidrofil a moleculelor care efectueaz rotaia. )socierile proteice, lipoproteice i lipidice prezente de"a lungul membranelor, confer acestora un aspect de mas mobil, caracterizat de o asimetrie longitudinal. n condiii de temperatur 2oas, membrana prezint grosime maxim a dublului strat i rigiditate maxim datorit lungimii maxime a zonelor hidrofobe din dublul strat, care delimiteaz o suprafa minim nchis. 6rin creterea temperaturii, agitaia termic crete determin4nd creterea mobilitii catenelor hidrofobe constituente ale dublului strat. ;atorit modificrilor conformaionale, catenele hidrocarbonate din dublul strat din poziii opuse se ntreptrund #.ig. %"3/' determin4nd scderea grosimii membranare i a rigiditii acesteia, concomitent cu creterea suprafeei delimitate. ;ac dublul strat lipidic asigur structura fundamental a membranelor, proteinele membranare determin funcionalitatea acestora. Membranele celulare se difereniaz unele fa de altele dependent de funciile pe care celulele le au la nivelul esuturilor. Mitocondria este organitul celular cu rol preponderent energetic i este alctuit din dou membrane, una extern neted i elastic i cealalt intern rugoas, cu suprafa funcional mare. Membranele mitrocondriale sunt constituite preponderent din proteine #1-"1,*' care au rol structural sau enzimatic. 6roteinele structurale interacioneaz prin intermediul forelor hidrofobe cu alte proteine structurale sau proteinenzime constituind complexe insolubile, care la r4ndul lor interacioneaz cu fosfolipidele constituind astfel membranele mitocondriale. Ma2oritatea proteinelor din membranele mitocondriale sunt enzime respiratorii i se constituie n uniti respiratorii, implicate n lanul de transport electronic.

.ig. %"3/. Modificri produse n structura i comportarea fizico"mecanic a membranelor, prin nclzirea acestora

Membrana eritrocitar are funcii mecanice i de transport, lipidele reprezent4nd componenta preponderent, alturi de unele glicoproteine. Ma2oritatea lipidelor membranare sunt glicerofosfolipide, care au capacitatea de a genera dublul strat lipidic datorit caracterului amfifil. )proximativ 0,* din lipidele membranare eritrocitare l reprezint colesterolul, care se intercaleaz paralel sau perpendicular pe planul membranei. n genere, proteinele membranare eritrocitare au caracter hidrofob i sunt intercalate n dublul strat lipidic, zonele hidrofile extinz4ndu"se la suprafaa celulelor. "pectrina, reprezent4nd aproximativ 0,* din totalul proteinelor membranei eritrocitare, este constituit din dou catene polipeptidice similare, care sunt constituite la r4ndul lor din multipli ai unui numr de +-1 resturi de aminoacizi. >pectrina strbate membrana eritrocitar, fr a o strpunge i are rolul de a constitui sistemul contractil membranar care este rspunztor de proprietile contractile ale eritrocitelor. 6entru realizarea traversrii substanelor prin membrane, acestea sunt prevzute cu canale, care prezint similitudine arhitectural. )cestea sunt segmente helicoidale, organizate n conuri n 2urul canalului central, care converg ntr"un punct denumit poarta canalului. 6rin rotaia segmentelor, diametrul porului crete n dreptul porii i n acest mod se realizeaz deschiderea porului. >electivitatea ionic este determinat de sarcin resturilor aminoacizilor prezeni n vestibulul intern i extern al porului #.ig. %",-'.

.ig. %",-. >tuctura schematic a unui por membranar

Conform acestor concepii, canalele ionice sunt constituente membranare celulare care permit schimbul transmembranar al ionilor conform gradientului lor electrochimic. Canalele ionice pot fi considerate elemente fundamentale n semnalizarea celular, fiind implicate n transmisia influxului nervos, contracia muscular, eliberarea i rspunsul hormonal, transportul epitelial i traducerea semnalelor mecanice. ;up stimulul care controleaz deschiderea sau nchiderea canalului, se disting canale dependente de potenial, de fixare a unui ligand sau de tensiune membranar. #lico orina $ este o glicoprotein amfifil integral constituit din 8 segmente distincte: un segment constituit din resturi de aminoacizi cu caracter hidrofob imersat n dublul strat lipidic= un segment constituit din resturi de aminoacizi cu caracter hidrofil, care include i captul C"terminal al proteinei, dincolo de partea interioar a membranei= un segment constituit din resturi de amino" acizi cu caracter hidrofil, care include i captul aminoterminal, care se extinde n afara membranei n mediul apos. )cest ultim segment are legate covalent +1 lanuri oligozaharidice #.ig. %",+'.

7xistena lanurilor oligozaharidice pe captul aminoterminal al glicoforinei, alturi de alte oligozaharide prezente pe alte glicoproteine sau glicolipide membranare, determin apariia antigenelor de grup sanguin i respectiv a receptorilor i marBerilor de recunoatere celular. !anurile oligozaharidice de pe suprafaa exterioar membranar constituie un strat pufos care cptuete celulele, denumit glicocalix. 6entru eritrocitele umane sunt cunoscui aproape +-determinani de grup sanguin, care reprezint +, sisteme de grup sanguin, genetic distincte. ;intre acestea doar dou sisteme de grup sanguin prezint importan chimic ma2or: sistemul )C5 #!andsteiner' i sistemul Dh. 7videnierea analitic a grupelor sanguine se realizeaz cu a2utorul anticorpilor specifici sau a lectinelor specifice, extrase din plante.

.ig. %",+. !ocalizarea glicoforinei ) fa de dublul strat lipidic din membrana eritrocitar uman

"istemul $%& se distinge prin prezena a trei marBeri de grup sanguin, antigenele ), C, A, care sunt componeni ai glicocalixului eritrocitar #.ig. %",0'. >chematizarea determinanilor antigenici eritrocitari este prezentat n tabelul %"++. Componena antigenelor ), C, A difer doar prin natura resturilor monozaharidice din capetele nereductoare. ;eterminantul antigenic A este precursorul determinanilor antigenici oligozaharidici de tip ) i C i este caracteristic indivizilor de tip sanguin 5. >chema determinrii grupelor sanguine cu a2utorul lectinelor este prezentat n figura %",8. Endivizii de tip sanguin ) posed o enzim care adaug specific un rest de ?"acetilgalactozamin captului nereductor oligozaharidic de tip A. Endivizii de tip sanguin C posed o alt enzim care adaug specific un rest de galactoz captului nereductor oligozaharidic de tip A. ;iferena funcional a celor dou enzime const probabil n substituirea unui rest de aminoacid cu altul, n structura primar polipeptidic a acestora. Endivizii cu eritrocite de tip ) posed anticorpi anti determinant antigenic C, n plasma sanguin, iar cei care au celule de tip C posed n plasma sanguin anticorpi anti ).
$abel %"++. Componena determinanilor antigenici eritrocitari

'eterminantul A )

"tructura determinantului antigenic " 9lu?)c"9al"F"#+"3'"!".ucoza":"#+"0' " 9lu?)c"9al"F"#+"3'"!".ucoza":"#+"0' 9al?)c":"#+"8'

" 9lu?)c"9al"F"#+"3'"!".ucoza":"#+"0' 9al":"#+"8'

.ig. %",0. >tructurile determinanilor antigenici: A #a'= ) #b'= C #c'

Endivizii care au eritrocite care posed ambii determinani antigenici ) i C #tip )C' nu posed n plasma sanguin anticorpi anti ) i respectiv anti C. Endivizii de tip 5, care la nivelul eritrocitelor nu posed nici antigenul ) nici antigenul C, posed n plasma sanguin at4t anticorpi anti ) c4t i anticorpi anti C.

.ig.%",8. >chema de determinare a grupelor sanguine cu a2utorul lectinelor

)mestecarea unor cantiti egale de s4nge de grupe diferite produce ntotdeauna aglutinarea, chiar dac donatorul universal #tip 5' poate fi transfuzat n cantiti care s nu depeasc ,--ml oricrui individ, iar acceptorul universal #tip )C' poate primi p4n la aceeai cantitate de s4nge de la oricare donator. 6rin depirea acestor limite i prin transfuzia s4ngelui de tip ) individului de tip C sau invers, se determin aglutinri masive la nivelul s4ngelui primitorului, care adesea conduc la bloca2e fatale ale vaselor de s4nge. ;in aceast cauz, n transfuziile masive, pentru prevenirea aglutinrii, se administreaz exclusiv s4nge de izogrup. >tructura antigenelor care determin sistemul )C5 se transmite ereditar. >pre deosebire de anticorpii anti ) i anti C din sistemul )C5, n sistemul (h nu exist anticorpi naturali, ei apar dup imunizarea mamei Dh#"' cu hematiile Dh#G' sau dup transfuzii multiple cu s4nge provenit din donatori Dh#G' acceptorilor Dh#"'. )ntigenul de tip Dh este un aglutinogen nt4lnit cu o frecven de &,* n populaia alb, nt4lnit de asemenea i n maimuele Dhesus de la care provine i denumirea. 6ersoanele care nu posed acest antigen la nivelul eritrocitelor reprezint aproximativ +,* i din aceast cauz sunt categorisite ca Dh#"'. 6rin imunizarea indivizilor Dh#"' cu eritrocite Dh# G' apar la nivel circulator anticorpi capabili s recunoasc i s hemolizeze eritrocitele Dh#G'. n timpul sarcinii unei mame Dh#"' cu ft Dh# G' #de regul la a doua sarcin cu ft Dh# G' se biosin" tetizeaz anticorpi anti eritrocit Dh#G' care strbat placenta determin4nd hemoliza eritrocitelor Dh# G' fetale, dezvolt4ndu"se astfel eritroblastoza fetal. n aceast afeciune transportul oxigenului se rea" lizeaz defectuos n organismul fetal, fiind afectat dezvoltarea sistemului nervos i este favorizat apariia unor edeme ale ftului i placentei. Encompatibilitatea Dh feto"matern este astfel o boal foarte grav, care poate determina moartea noului nscut n primele zile de via.