CROMOPROTEINELE

CURSUL 4

CROMOPROTEINELE
DEFINIIE

sunt structuri proteice specializate alctuite dintr-o component proteic i o component prostetic numit hem

CROMOPROTEINELE
STRUCTURA I ROLUL HEMULUI

este format din 4 nuclee pirolice legate ntre ele prin puni metilenice n centrul su se gsete un ion de fier bivalent (Fe2+), meninut prin intermediul a 2 legturi coordinative i 2 legturi covalente cu atomii de azot din inelul porfirinic Fe2+ mai poate forma 2 legturi suplimentare, una deasupra i cealalt sub planul inelului porfirinic

CROMOPROTEINELE
STRUCTURA I ROLUL HEMULUI

rolul hemului este determinat de mediul generat de structura tridimensional a proteinei: n structura citocromilor, rolul hemului este de a transporta electroni n structura catalazei, rolul hemului este de participare n centrul activ al enzimei, conducnd la descompunerea apei oxigenate n structura mioglobinei i hemoglobinei, rolul hemului este de a lega reversibil moleculele de oxigen

CROMOPROTEINELE MIOGLOBINA, HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA
este format dintr-o caten polipeptidic i o component prostetic HEM catena polipeptidic conine 153 de resturi de aminioacizi avnd o aranjare globular compact prezena resturilor de prolin determin prin radicalul su plierea catenei i formarea a 8 segmente peptidice

B
A

F D G E

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA

aminoacizii cu radicali nepolari se vor orienta ctre interiorul moleculei de mioglobin datorit hidrofobicitii lor excepie fac 2 resturi de histidin prin intermediul crora se fixeaz hemul aminoacizii cu radicali polari ncrcai electric se vor orienta ctre exteriorul proteinei, predominnd la suprafa i determinnd solubilitatea n ap a acesteia aminoacizii cu radicali polari nencrcai electric se vor aranja la interior sau exterior, n funcie de posibilitile sterice ale catenei polipeptidice

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA

componenta prostetic, hemul, se gsete ntr-o fisur a proteinei aflat la distan de mediul hidrofil (punga hidrofob), de care se asociaz prin legturi necovalente n centrul hemului se gsete un Fe2+ Fe2+ din hem formeaz: 2 legturi covalente 2 dintre atomii de N 2 legturi coordinative cu ceilali 2 atomi de N 1 legtur coordinativ cu un rest imidazolic al His (His F8) 1 legtur coordinativ cu His E7 (histidina distal) prin intermediul unei molecule de O2

CROMOPROTEINELE
MIOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

este format din 4 catene polipeptidice, 2 de tip (141 aa) i 2 de tip (146 aa), fiecare dintre acestea avnd cte un hem catenele polipeptidice de tip au o aranjare rigid fa de cele , conducnd la formarea celor 2 dimeri

dimerii 11 i 22 i pot modifica poziia reciproc n procesele de oxigenare/deoxigenare

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

cele 4 catene polipeptidice sunt asociate prin legturi necovalente ntr-o structur cuaternar, cu o geometrie aproximativ tetraedric oxigenarea Hb ncepe la nivelul protomerului , ceea ce determin deplasarea Fe2+ din poziia exterioar planului hemului ntr-o poziie coplanar

deplasarea Fe2+ este urmat de deplasarea restului de His F8, ce va conduce la ruperea unor legturi stabilizatoare a structurii tensionate a Hb

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

Starea tensionat a Hb

Starea relaxat a Hb

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI

din punct de vedere funcional, Mb i Hb fixeaz O2 la nivelul hemului Mb fixeaz o singur molecul de O2

Hb are structur tetrameric i fixeaz patru molecule de O2 diferena dintre Mb i Hb se reflect n aspectul hiperbolic al curbei de oxigenare a Mb fa de cel sigmoidian n cazul oxigenrii Hb

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI
ntr-o soluie de Mb deoxigenat, respectiv Hb deoxigenat, se introduce O2 la presiuni ce cresc treptat, de la 0 la 100 mmHg se obine o curb hiperbol pentru Mb se obine o curb sigmoid pentru Hb presiunile de semisaturare (P50) sunt net diferite: 1 mmHg pentru Mb i 26 mmHg pentru Hb

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI

Hb deoxigenat este n stare tensionat: structural, aceast stare se caracterizeaz printr-un numr de interaciuni intercatenare (Asp--Arg+) i intracatenare (Asp--His+) Fe2+ din fiecare subunitate este situat n afara planului protoporfirinei IX (la o distan de 0.6 A), ca urmare a legrii lui de histidina proximal acceptarea O2 de ctre Hb deoxi se face prin creterea presiunii O2 la nivelul protomerilor Hb deoxi are afinitate foarte redus pentru O2

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI

Hb oxigenat este n stare relaxat: oxigenarea protomerului este urmat de deplasarea Fe2+ din poziia exterioar planului porfirinic ntr-o poziie coplanar Fe2+ ajunge n poziia optim formrii unei legturi coordinative cu O2, prin intermediul cruia se va lega de His distal cum legtura Fe2+ cu His proximal nu se rupe n urma legrii O2, prin intermediul acestui aminoacid, se vor produce modificri n structura teriar i cuaternar a Hb, ceea ce constituie tranziia ntre starea T n starea R a hemoglobinei

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I HEMOGLOBINEI

oxigenarea protomerilor va fi urmat de a celor , fapt datorat eliberrii restului de valin din punga de oxigenare Hb oxi are afinitate mare pentru O2 afinitatea mare pentru O2 a strii relaxate a Hb este exprimat prin fixare rapid a acestuia la celelalte subuniti n apropierea presiunii de 100 mmHg, capacitatea de de fixare a O2 diminu ca urmare a saturrii

CROMOPROTEINELE
CURBA DE OXIGENARE A MIOGLOBINEI I

HEMOGLOBINEI
n plmni, presiunea parial a O2 nu variaz ntre 0 i 100 mmHg (pO2 plmni = 100 mmHg) din aceste condiii deriv necesitatea desfurrii n plamn doar a ultimei poriuni a curbei de oxigenare a Hb, explicnd uurina de oxigenare a Hb disocierea O2 de Hb se face dup aceeai curb dar parcurs n sens invers presiunea parial a O2 n esuturi este de 30 mmHg, ceea ce favorizeaz deoxigenarea Hb oxi pn cnd mai este oxigenat n proporie de 5060% Hb va prelua n plmni restul de 40-50% O2, ceea ce favorizeaz suplimentar oxigenarea

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

Christian Bohr a constatat c Hb oxi cedeaz mai uor O2 dac pH-ul este mai sczut dect cel fiziologic ecuaia chimic de oxigenare a Hb: Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+ prin oxigenarea Hb deoxi, se rup legturile ionice intracatenare (Asp-- His+) i sunt eliberate resturile de His+ unele dintre resturile His+ vor putea elibera protonii asociai lor (His146 de la captul C-terminal al protomerilor sunt implicai n efectul Bohr)

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

la nivelul capilarelor alveolelor pulmonare reacia chimic este deplasat spre dreapta Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+ H+ eliberai prin deprotonarea resturilor de His+ vor fi tamponai cu HCO3- ,component al tamponului sanguin, formnd H2CO3 H2CO3 sub aciunea anhidrazei carbonice va fi descompus n ap i CO2, acesta din urm se elimin prin expiraie

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

la nivelul capilarelor esutului muscular

reacia chimic este deplasat spre stnga

Hb(O2)nHx + O2 Hb(O2)n+1 +xH+

n urma metabolismului celular se obin compui cu caracter acid, care vor determina scderea pH-ului local, favorizndu-se deoxigenarea Hb oxi

CROMOPROTEINELE
EFECTUL

BOHR

la nivelul capilarelor esutului muscular 80% din CO2 rezultat la nivelul muscular reacioneaz cu H2O, sub aciunea anhidrazei carbonice, formnd H2CO3 ionul bicarbonat rezultat prin descompunerea H2CO3 la acest nivel, va intra n rezerva alcalin a sngelui 15% din CO2 rezultat la nivel muscular este transportat la plmn sub form de carbaminhemoglobin

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

2,3 BPG este un ester bifosforic esenial n exercitarea funciei de transport a O2 de ctre Hb
se formeaz printr-o deviere a 1,3 BPG din calea glicolitic desfurat n eritrocit 25% din cantitatea de glucoz angajat n glicoliz va intra n aceast bucl, nsoindu-se cu "risip" energetic

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC
ADP + Pi NAD+ NADH + H+

glucoza

1,3 BPG

3 PG

pyr

lactat

untul Rappapor-Luebering

H20 PO
-

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

2,3 BPG se intercaleaz n zona central a Hb tensionate ca urmare a atraciilor electrostatice ntre gruprile sale ncrcate negativ i gruprile amino protonate ale lanurilor i
n acest mod, starea Hb tensionate este consolidat suplimentar, crescnd dificultatea oxigenrii sale (curba de oxigenare a Hb se deplaseaz la dreapta)

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC

dup fixarea primei molecule de O2 la nivelul subunitii , modificrile conformaionale aprute fac imposibile rmnerea 2,3 BPG-ului n zona central a Hb, care se micoreaz

2,3 BPG reduce afinitatea Hb pentru O2, astfel favorizeaz deoxigenarea Hb oxi n lipsa 2,3 BPG, curba de oxigenare a Hb este nu numai deplasat spre stnga dar i pierde n mare msur aspectul sigmoidian, tinznd spre cel hiperbolic (aspectul curbei de oxigenare al Mb)

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT EFECTOR ALOSTERIC
La nivelul esuturilor periferice, are loc deoxigenarea Hb nsoit de intercalarea 2,3 BPG n zona central.

O2

O2
La nivel pulmonar, are loc oxigenarea Hb nsoit de scoaterea 2,3 BPG din zona central a acesteia.

CROMOPROTEINELE
2,3 BIFOSFOGLICERAT IMPORTAN BIOLOGIC

creterea concentraiei de 2,3 BPG apare ca urmare a prezenei hipoxiei cronice (exp.: emfizem pulmonar obstructiv sau la altitudini nalte), precum i n contextul anemiilor cronice, cnd numrul redus de hematii nu poate asigura necesarul de oxigen al organismului
asigur transferul oxigenului din circulaia matern ctre eritrocitele ftului

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

Hb F este un tetramer format din 2 catene polipeptidice , identice cu cele din Hb A, i 2 catene polipeptidice (22) Hb F prezint afinitate pentru oxigen mult mai mare comparativ cu Hb A, aspect explicat prin faptul c Hb F leag slab 2,3 BPG

lanurile polipeptidice din Hb F nu conin aminoacizi cu radical ncrcat electric pozitiv responsabili de ataarea Hb F

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

afinitatea crescut pentru oxigen a Hb F faciliteaz transferul oxigenului din circulaia matern, transplacentar, ctre eritrocitele ftului

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINA FETAL

n primele sptmni de la concepie, sacul vitelin sintetizeaz o hemoglobin embrionar (Hb Gower 1), alctuit din 2 catene polipeptidice zeta () i 2 catene polipeptidice epsilon () (22)

dup alte cteva sptmni, ncepe s se sintetizeze Hb F, pentru ca n ultimele luni ale vieii embrionare aceasta s reprezinte aprox. 60% din hemoglobina eritrocitar total
n jurul lunii a opta de sarcin, mduva hematopoietic ncepe sinteza Hb A, care ulterior va nlocui progresiv Hb F

HEMOGLOBINELE NORMALE ALE ADULTULUI

Tip de hemoglobin

Catene polipeptidic

Procent din hemoglobina total

Hb A Hb F

22 22

90% <2%

lanurile din aceste tipuri de hemoglobine sunt identice

Hb A2
Hb A1c

22
22 glucoz

2-5%
3-9%

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Oxihemoglobina Carbaminhemoglobina

HbO2, Hb(O2)2, Hb(O2)3 i Hb(O2)4

ecuaia chimic: Hb(O2)n+O2Hb(O2)n+1 n= 0, 1, 2, 3.

15% din cantitatea total de CO2 din snge reacioneaz cu gruprile amino ale resturilor de valin - aminoacidul Nterminal al celor 4 protomeri ai Hb A

R-NH2+CO2R-NHCOOH

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Carboxihemoglobina

Methemoglobina dac Fe2+ este oxidat la Fe3+, hemul se numete hemin iar met-Hb rezultat nu se mai poate oxigena ageni oxidani: fericianurile, peroxizii, chinonele n eritrocitul normal metHb reprezint cca 1 % din cantitatea total de Hb

afinitatea Hb pentru CO este de 200 de ori mai mare dect pentru O2 intoxicaia cu CO poate fi tratat prin creterea pO2 n aerul inspirat, astfel ndeprtndu-se CO de pe Hb A

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Methemoglobina

nivelul redus al met-Hb este meninut datorit prezenei n eritrocit unei enzimei: methemoglobin reductaza, care catalizeaz reducerea Fe3+ + e Fe2+ i astfel conversia met-Hb n Hb

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Ageni oxidani

met-Hb reductaza redus

met-Hb reductaza oxidat

NADP+

NADPH H+

Calea pentozofosfailor

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Glicohemoglobina

gruprile -NH2 ale resturilor de valin de la capetele N-terminale din componena protomerilor b din Hb A reacioneaz neenzimatic cu glucoza liber din snge formnd baze Schiff nivelul Hb A1c depinde de nivelul glucozei i durata meninerii la valori ridicate a concentraiei acesteia

CROMOPROTEINELE
DERIVAII HEMOGLOBINEI
Glicohemoglobina

un indicator al hiperglicemiilor cronice este reprezentat de proteinele glicozilate: hemoglobina, albumina, fructozamina hemoglobina este preferat altor proteine pentru c t1/2 este lung, aproximativ durata de via a hematiilor 120 zile albumina are t1/2 de 20 zile

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
definiie sunt afeciuni genetice determinate de sinteza unor tipuri de hemoglobin care nu mai prezint funcie biologic (hemoglobine patologice), precum i de sinteza unor cantiti insuficiente de Hb datorat deficienei sintezei globinei clasificare: o hemoglobinopatii prin deficit calitativ o hemoglobinopatii prin deficit cantitativ

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
hemoglobinopatia

S denumit i anemie falciform, siclemie sau drepanocitoz

afeciune ereditar determinat de o mutaie punctiform la nivelul genei responsabile de sinteza lanurilor ale Hb (mutaie pe suprafaa moleculei Hb) este o afeciune cu transmitere autozomal recesiv, devenind manifest clinic la persoanele care au motenit 2 gene mutante (cte o gen de la fiecare genitor)

Mutaie punctiform n secvena ADN Mutaie cu sens greit

.GAG

.GTG

-GAG-

Secvena ARN

-GUG-

aa1-aa2-aa3-aa4aa5-Glu-aa7.aan

aa1-aa2-aa3-aa4aa5-Val- aa7.aan

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform, siclemie sau drepanocitoz rezultatul mutaiei este sinteza unei hemoglobine anormale, n care un rest de Val (aminoacid cu radical nepolar) nlocuiete restului de Glu6 (aminoacid cu radical polar ncrcat electric negativ) Hb S conine 2 lanuri i 2 lanuri s (22s) Hb S determin apariia fenomenului de siclizare

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform, siclemie sau drepanocitoz nlocuirea unui aminoacid polar cu unul nepolar determin rearanjarea spaial a lanului , care are ca rezultat apariia unei protuberane pe suprafaa lanului

aceast protuberan ptrunde ntr-o concavitate complementar situat pe lanul a altei molecule de Hb, astfel deoxi-Hb S sufer un proces de polimerizare

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

Imagine prelucrat folosid imagini preluate de pe site-ul

Wikipedia (Free encyclopedia)

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia S denumit i anemie falciform, siclemie sau drepanocitoz polimerizarea deoxi-Hb S determin apariia unei reele de polimeri fibroi, care rigidizeaz i distorsioneaz eritrocitele eritrocitele iau un aspect falciform caracteristic (celule n form de secer) eritrocitele nu se mai pot deplasa cu uurin prin vasele mici i rmn blocate n lumenul capilar determinnd obstrucia vaselor sanguine mici

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

hemoglobinopatia Hammersmith

afeciune ereditar determinat de o mutaie punctiform la nivelul genei responsabile de sinteza lanurilor ale Hb (mutaie n interiorul moleculei de Hb)
rezultatul mutaiei este sinteza unei hemoglobine anormale, n care un restul de Phe42 a lanului este nlocuit cu un rest de Ser

produii degradrii lanurile globinei mutante sunt insolubili, i vor polimeriza formnd corpusculii Heinz

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
o

hemoglobinopatia Boston

hemoglobinopatia Saskatoon

rezultatul mutaiei genice este nlocuirea restului de His58 a lanului cu un rest de Tyr cele 2 nlocuirile determin meninerea fierului n stare de oxidat (Fe3+), astfel Hb i pierde capacitatea de transport al oxigenului

rezultatul mutaiei genice este nlocuirea restului de His63 a lanului cu un rest de Tyr heterozigoii sunt asimptomatici, cu excepia prezenei cianozei starea de homozigot este incompatibil cu viaa

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

Talasemiile clasificare
talasemiile talasemiile apar prin mutaii de apar prin mutaii tip deleie care produc punctiforme care afecteaz scderea sintezei ARNm funcional, astfel lanurilor sinteza lanurilor este redus sau absent sinteza lanurilor i este pstrat sinteza lanurilor este pstrat n limite normale

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

talasemiile sunt afeciuni determinate de sinteza redus sau absent a lanurilor globinice genomul uman conine 4 copii ale genei globinice; deleia lor determin diferite grade de deficite cantitative ale sintezei lanurilor cte o pereche de gene se gsete pe fiecare cromozom 16

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
1. forma heterozigot 2. forma homozigot dubl sau heterozigot dubl 3. hemoglobinopatia H

este afectat numai una dintre gene stare de purttor silenios nu prezint manifestare clinic talasemia minor stare de purttor care transmite boala
sunt afectate 3 gene Hb H este format din 4 lanuri (4) Hb Bart (4) forme uoare i moderate de anemie hemolitic

4. forma homozigot

toate cele 4 gene sunt nefuncionale anemie sever incompatibil cu viaa

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE

talasemiile sunt afeciuni determinate de sinteza redus sau absent a lanurilor globinice genomul uman conine numai 2 copii ale genei globinice cte o gen pe fiecare cromozom 11 lanurile se sintetizeaz n limite normale dar aceste nu pot forma tetrameri stabili, precipitnduse i determinnd moartea prematur celular

CROMOPROTEINELE
HEMOGLOBINOPATIILE
este deficitar o singur gen se sintetizeaz n cantiti reduse lanuri manifestrile clinice apar stric dup natere de obicei nu necesit tratament de specialitate ambele gene sunt deficitare nou-nscui , aparent sntoi la natere, pot dezvolta anemie sever n primii 2 ani de via necesit transfuzii regulate transplantul de MO poate fi o an pentru aceti pacieni

talasemia minor

talasemia major (anemia Cooley)