MediuEcologie-Dezvoltare Durabil
2009
ISBN 978-606-92028-4-5
1
Autor: Lector universitar, cercettor tiinific gradul I, dr. biolog, Dana Malschi
Adresa autorului: Universitatea Babe-Bolyai Facultatea de tiina Mediului, Catedra tiinele Vieii i ale Pmntului, Str. Fntnele, nr.30, 400294, Cluj-Napoca. Domiciliul:Str. Dragalina 12 ap.25, 401086,Turda,jud. Cluj. Tel.:0745 367373, e-mail:danamalschi@yahoo.com
http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
Director editura: CSII, dr. biol. Ioan Valentin Petrescu-Mag Consilier editorial: Lector univ. dr. Ruxandra Mlina Petrescu-Mag Referent tiinific: Conf. univ. dr. biol. Ioan Coroiu Referent tiinific: Prof. univ. dr. ing. Ioan Oroian
Cuvntul autorului Manualul Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie, ofer o baz de cunotine de biologie aplicat, util studenilor n domeniul tiinei i Ingineriei Mediului pentru a nelege i elabora sisteme de management ecologic, tehnologii de depoluare biologic, bioremediere, reabilitare sau reconstrucie ecologic, n scopul conservrii i dezvoltrii durabile a mediului.
n Partea I-a: Elemente de biologie si biochimie sunt abordate teme privind structura i funciile ecosistemelor (Cap. 1. Elemente de biologie i ecologie aplicat pentru dezvoltarea durabil a mediului); precum i, cunotine de baz despre structura i importana biomacromoleculelor (Cap 2. Elemente de biochimie). Partea a II-a: Ecofiziologie ambiental prezint cunotine de fiziologia plantelor i animalelor, structuri funcionale, integrarea ambiental la nivel celular i la nivelul organismelor pluricelulare, aspecte privind ecotoxicitatea. Partea a III-a: Microbiologia mediului i partea a IV-a: Hidrobiologie ambiental cuprind teme importante de biologie aplicat la mediu. Manualul este o sintez tematic de biologie ambiental i ecologie, preluat n scop didactic din literatura de specialitate i necesar studenilor n investigarea factorilor biotici de mediu, n evaluarea impactului antropic, n cercetrile de ecotoxicologie, n desfurarea studiilor interdisciplinare din cadrul Cercului tiinific Studenesc Ecouniversitaria al Facultii de tiina Mediului. Secia acestui cerc tiinific studenesc denumit Biotehnologii de conservare i utilizare a bioresurselor (reconstrucie ecologic, bioremediere, Pasrea miastr depoluare biologic) i propune ca obiective nvarea, I.Viehmann & colab.1963 evaluarea i utilizarea resurselor de biodiversitate pentru Ghearul de la Scrioara, protecia, remedierea i durabilitatea calitii mediului, Ed. Meridiane, Bucureti. avnd ca emblem i simbol al preocuprilor, o delicat stalagmit de ghea, mulumit acordului autorului. Lucrarea apare n memoria primului Decan al Facultii de tiina Mediului a fotografiei, Prof. Univ. dr. I. Viehmann. Universitii Babe-Bolyai, regretatul Profesor Univ. Dr. Iustinian Petrescu, nscriindu-se dezideratului pentru interrelaia MediuEcologie-Dezvoltare Durabil. Manualul este dedicat studenilor i colegilor de la Facultatea de tiina Mediului Cluj precum i fiicei mele Alexandra i fiului meu Alexandru, cu mulumiri pentru sprijinul acordat. Alese mulumiri sunt adresate colegului Conf. Dr. Ioan Coroiu i d-lui Prof. Dr. Ing. Ioan Gheorghe Oroian, pentru referatele tiinifice elaborate publicaiei. Lector Dr. biolog Dana Malschi
Cuprins: Introducere..........................................................................................................5 Partea I-a. Elemente de biologie si biochimie...................................................8 1. Elemente de biologie i ecologie aplicat pentru dezvoltarea durabil a mediului...........................................................9 2. Elemente de biochimie..................................................................................31 Partea a II-a. Ecofiziologie ambiental.........................................................150 Partea a III-a. Microbiologia mediului.........................................................350 Partea a IV-a. Hidrobiologie ambiental......................................................467 Anexe. Plane...................................................................................................581 Bibliografie......................................................................................................634
Introducere Manualul Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie, asigur baza de cunotine de biologie, ecofiziologie i microbiologie, privind structurile i funciile organismelor vii, evoluia interaciunilor dinamice ale organismelor vii n relaie cu factorii de mediu. Manualul are ca obiectiv cunoaterea structurilor funcionale ale diferitelor nivele de organizare ale vieuitoarelor din cele 5 regnuri: Plantae, Animalia, Fungi, Protista (Protozoare, Alge), Bacteria; cunoaterea importanei organismelor vii pentru mediu, a particularitilor de ecofiziologie ambiental ale acestora n ecosistemele naturale i antropizate. Este cunoscut faptul c ecofiziologia reflect variaiile organismului n funcie de factorii de mediu, inclusiv de impactul uman, constituind baza teoretic a productivitii biologice (D.I Roca, 1977). De asemenea, cunoaterea influenelor organismelor vii asupra mediului are deosebit importan aplicativ. Lucrarea este elaborat pentru formarea studenilor la Specializarea Ingineria Mediului a Facultii de tiina Mediului, Universitatea Babe-Bolyai i urmrete familiarizarea cu problemele practice, dobndirea competenelor n domeniul evalurii i limitrii disfunciilor organismelor vii cauzate de factorii ambientali, precum i n studiul impactului organismelor vii asupra mediului. Acestea sunt importante n elaborarea tehnologiilor de protecie i inginerie a mediului, n managementul i controlul polurii industriale, agricole i urbane, n valorificarea i utilizarea durabil a resurselor naturale i antropice pentru bioremediere, depoluare biologic, reabilitare sau reconstrucie ecologic. Dintre temele i conceptele de baz abordate se menioneaz urmtoarele, preciznd i bibliografia (cifra indicat corespunde celei din lista de bibliografie recomandat mai jos): 1. Protecia mediului. Managementul de mediu. Teoria general a sistemelor ca mijloc eficient n
cercetarea mediului biotic. Teoria nivelurilor de integrare i ierarhia sistemelor vii. Bibliogr.: 1, 8, 10.
8. Fotosinteza. Influena factorilor ecologici asupra procesului de fotosintez. Metabolismul plantelor. Metabolismul substanelor de rezerv - lipide, proteine, glucide. Metabolismul secundar. Terpene, fenoli, alcaloizi. Metabolisul respirator. Bibliografie: 2.10. 9. Importana microbiologiei mediului. Microorganismele-clasificare, structuri funcionale, ecofiziologie. Nutriia microorganismelor. Importana microorganismelor din mediul natural i antropic. Metodele cantitative i calitative de cercetare n microbiologie. Bibliografie: 3. 10.
10. Populaia microbian a solului (bacterii, actinomicete, ciuperci, alge, protozoare, virusuri).
Taxonomia, morfologia, fiziologia, ecologia i rolul microbiotei solului. Bibliografie: 9.10.
11. Ecofiziologia microbiotei solului. Natura microorganismelor din sol. Microbiota autohton. Microbiota alohton. Tipuri de microorganisme din sol. Numrul, densitatea i
distribuia microorganismelor din sol. Relaiile ecologice ale microorganismelor din sol. Bibliografie: 9.10. 12. Microbiologia apei. Tipuri de microorganisme din ape. Distribuia microorganismelor n ape. Factorii care condiioneaz microbiota apelor. Importana microorganismelor din ape: n procesul de mineralizare, n autopurificarea apelor, n productivitatea ecosistemelor acvatice, n coroziune, importana igienico-sanitar i n producia piscicol. Bibliografie : 3. 5. 10. 13. Microbiologia aerului. Microbiologia plantelor. Bibliografie : 3. 10. 14. Microbiologie medical. Microbiologia alimentelor. Bibliografie : 3. 10.
Bibliografia recomandat: 1. BERCA M. 2006. Planificarea de mediu si gestionarea resurselor naturale. Ed. Ceres Bucuresti 2. DOBROT Cristina, YAMASHITA M., 1999. Creterea i dezvoltarea plantelor. Casa de ed.Gloria 3. DGAN-BULARDA M., SAMUEL A. D., 2006. Microbiologie general. Ed. Univ. Oradea 4. HAIDUC Iovanca, BOBOS L., 2005. Chimia mediului i poluanii chimici, Ed. Fundaiei pentru Studii Europene, Cluj-Napoca. 5. PRICOPE F., 2000, Hidrobiologie, Univ. Bacu, Fac. De Litere i tiine, Secia Biologie 6. GHERGHEL P., 2000. Fiziologie cu elemente de comportament. Casa crii de tiin. Cluj 7. ROCA I. D., 1977. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti. 8. STUGREN B. , 1994. Ecologie teoretic. Ed. Sarmis, Cluj Napoca. 9. TEFANIC G., SNDOIU D.I., GHEORGHI N., 2006. Biologia solurilor agricole. Ed. Elisavaros, Bucureti. 10. MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, ISBN 978-606-92028-4-5. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
Partea I-a
CUPRINS :
1. Elemente de biologie si ecologie aplicat pentru dezvoltarea durabila a mediului ....................................9 1.1. Protecia mediului. Managementul ecologic. Dezechilibre ecologice.........................................................9 Activiti prin care omul deterioreaz mediul. Efectele deteriorrii mediului. 1.2. Teoria general a sistemelor ca mijloc eficient n cercetarea mediului biotic.........................................11 Teoria nivelurilor de integrare i ierarhia sistemelor vii. 1.3. Semnificaia conceptului i evoluia ecologiei.............................................................................................13 Concepte fundamentale n ecologie. Mediu i biotop. Teoria nivelurilor trofice. Lanuri trofice. 1.4. Diversitatea organismelor vii. Clasificarea organismelor vii ...................................................................16 1.5. Ordinea de timp a ecosistemului. Generaliti...........................................................................................20 Forele integratoare i planurile de structurare ale ecosistemului. Transformrile structurale: modificri aleatorii, transformri ritmice, periodice, neperiodice. Ecogeneza (succesiunea primar). Teoria clasic (clementsian) a ecogenezei. Teoria modern (stohastic) a ecogenezei. Succesiuni secundare (Succesiuni abiogene. Succesiuni biogene. Succesiuni tehnogene). Stabilizarea ecosistemului. Mersul general al ecogenezei i succesiunilor. Conceptul de climax
2. ELEMENTE DE BIOCHIMIE...................................................................................................................31 2.1. Noiuni introductive. Obiectul i caracterul interdisciplina r al biochimiei. .......................................32 2.2. Compoziia chimic general a organismelor vii.........................................................................................33 Bioelemente. Biomolecule. Biomoleculele anorganice. Biomolecule organice. Legturile chimice ale biomoleculelor. Apa ca solvent i mediu de reacie. pH i soluii tampon. 2.3. Structura i configuraia biomoleculelor organice....................................................................................44 2.3.1. Configuraia compuilor organici: formule structurale 2.3.2. Grupri funcionale n biomolecule 2.3.3. Compui ciclici: compui carbociclici (izociclici), aromatici, heterociclici. 2.3.4. Structura general a biomacromoleculelor Izomeria de structur. Izomeria spaial. 2.3.5. Tipuri de reacii biochimice. 2.4. Glucide .................................................................................................................................64 2.4.1. Constituie chimic. Clasificare. Rolul n organismele vii. 2.4.2. Monoglucide. Monoglucidele naturale: Pentoze, Hexoze, Deoxiglucide, Aminoglucide. 2.4.3. Oligoglucide. Diglucide: Maltoza. Celobioza. Lactoza. Zaharoza. 2.4.4. Poliglucide. Proprietile poliglucidelor. Clasificarea poliglucidelor: Poliglucide omogene Hexozani (amidonul, glicogenul, celuloza) Poliglucide neomogene. Mucopoliglucide. 2.5. Lipide.............................................................................................................................................................86 2.5.1. Constituia chimic general i clasificare. Rolul lipidelor n organismele animalelor. 2.5.2. Constituentii de baza ai lipidelor. Acizii grai Alcoolii constitueni ai lipidelor. Lipide simple. Gliceridele. Steride. Steroli.. Ceride. Etolide. Lipide complexe. Glicerofosfolipide. Sfingolipide. 2.6. P rotide ..... .... ..... ..... ..... .... ..... ..... ..... .... ..... ..... ..... .... ..... ..... ..... ..... .... ..... ..... ..... .... ..... ..... ..... .... ..... ..... ..... .... ..... .108 2.6.1. Conside ra ii ge ne rale . Compoziia chimic general i clasificarea protidelor. 2.6.2. Aminoacizi. 2.6.3. Peptide i polipeptide. 2.6.4. Proteide. 2.6.5. Proteine (holoproteide). 2.6.6. Heteroproteide . Metalproteide. Fosfoproteide. Glicoproteide. Cromoproteide porfirinice : Hemoglobina. Mioglobina. Citocromii. Hemenzimele. Cloroplastidele clorofila. Nucleoproteide. Acizi nucleici. Bibliografie .........................................................................................................................................................149
Activitile prin care omul deterioreaz mediul sunt diverse: Poluarea i transformarea ecosistemelor naturale n ecosisteme amenajate; Introducerea de specii noi n ecosisteme i eliminarea unor specii din ecosisteme; Supraexploatarea speciilor, resurselor miniere, solului, pdurilor, punilor; Executarea amenajrilor teritoriale: irigaii, desecri, baraje, lucrri hidrotehnice, exploatri miniere de suprafa etc. Efectele deteriorrii mediului asupra vieuitoarelor cuprind, pe toate nivelele de organizare ale biosferei, modificri importante: n ECOSFER: perturbarea circuitelor biogeochimice globale, afectarea negativ a capacitii de autoreglare, afectarea negativ a structurii i funciilor tuturor organismelor. n COMPLEXUL DE ECOSISTEME: modificri n structura i funciile ecosistemelor terestre i acvatice. n ECOSISTEM: se modific structura i funciile: energetic, de circulaie a materiei, de autoreglare. n BIOCENOZ: Se modific structura i funciile, relaiile trofice, relaiile numerice; crete cantitatea de substane toxice. La nivelul POPULAIEI: variaii nurerice ale efectivului, variaii ale distribuiei spaiale, schimbarea structurii pe vrste i sexe, dispariii de populaii. La nivelul INDIVIDUAL: intoxicaii acute, cancer. Poluarea determin modificri ale factorilor abiotici i biotici datorit introducerii n mediu a diferiilor poluani, deeuri ale activitilor umane. Poluarea se poate clasifica: dup natura sursei: 1- poluare natural, 2.- poluare artificial: chimic, fizic, biologic; dup substratul asupra cruia acioneaz: 1. - poluarea aerului, 2.- solului, 3. apei (Arini, Cristescu, 2006). Avnd n vedere efectele deteriorrii mediului asupra vieii, protecia mediului st la baza supravieuirii i dezvoltrii societii umane, prin msurile care se ntreprind privind: conservarea resurselor naturale, speciilor pe cale de dispariie, solului, pdurilor, utilizarea combaterii biologice a duntorilor etc.; controlul polurii aerului, apei, solului. Impactul ecofiziologic al diferitelor tipuri de poluanti Exemple Efecte Subs- Tipuri Surse tratul de poluat poluani Polen, spori de ciuperci, Aciune iritant a sistemului Aer Chimici Suspensii finuri, praf, aerosoli respirator, alergii, cancer etc. CO2, CO, NO2,NO, NH3, Efectul de ser, smogul Gaze i vapori CH4, CFCs (freon), oxizi de fotochimic, distrugerea stratului S i N n contact cu de ozon, formarea depozitelor particule de ap din nori acide, distrugerea vegetaiei, formeaz H2SO4, HNO3 poluarea apei potabile et. Pb, Hg, Zn, Cu, Cd, Mg, Saturnism (Pb), intoxicaii, Metale Mo cancer, anemii etc. Industrializare, urbanizare, Creterea tensiunii i a valorilor Fizici Zgomote construcii,circulaie rutier glicemiei, disfuncii auditive i i aerian vestibulare etc. Afecteaz materialul genetic al Emisii radioactive Explozii i accidente nucleare, dopozitarea i tuturor organismelor, deversarea deeurilor producnd mutaii i radioactive recombinri genetice Biologici Organisme micro- Virusuri, bacterii, ciuperci, spori, chisturi i macroscopice
10
Ap Chimici
Ploi acide
H2SO4
Fizici
Fizici
Biologici
Accidente petroliere, scurgeri, eversri Apele de rcire de la centrale termo- i atomoelectrice Organisme micro- Ou de parazii, bacterii patogene, virusuri, chisturi i macroscopice Pesticide organice Insecticide, fungicide, erbicide, rodencide i anorganice, Substane pe baz de azot, ngrminte fosfor , potasiu chimice Apele de rcire pe baz de Temperatur azot, fosfor, potasiu Depozite de deeuri Radioactivitate radioactive, experiene nucleare Organisme micro- Chisturi de protozoare, ou de viermi, bacterii, virusuri, i macroscopice ciuperci patogene
Acidifierea apelor, moartea pdurilor i organismelor acvatice, distrugerea recoltelor, eutrifizarea lacurilor Tulburri nervoase, anemii, eutrofizarea apelor, nmulirea bacteriilor Moartea florei i faunei acvatice Modificri n structura speciilor, dispariii de specii Febra tifoid, holera, dizenteria etc. Induc forme de rase rezistente ale duntorilor, noi cicluri biogeochimice, afecteaz negativ toate verigile lanurilor trofice Modificri n structura speciilor Contaminri, mbolnviri
Contaminri, mbolnviri
1.2. Teoria general a sistemelor ca mijloc eficient n cercetarea mediului biotic ntreaga lume vie este ntemeiat pe interaciunile variatelor sale componente, pe conexiuni ntre plante i animale, ntre virusuri i insecte etc., integrndu-se ntr-un sistem ambiental complex. Teoria general a sistemelor ofer un mijloc eficient n cercetarea sistemelor biologice (Botnariuc, 1976, Botnariuc, Vdineanu, 1982). Teoria general a sistemelor postuleaz c universul este organizat n sisteme (von Bertalanffy, 1942, 1960). Principiul interaciunii postuleaz c interaciunea este mecanismul fundamental al Universului (Stugren, 1982, 1994). Nu orice interaciune genereaz sistem, ci numai cnd interaciunea este necontenit i non-ntmpltoare. Componentele ntregului se influeneaz reciproc pe fondul interaciunii. Numai prin interdependen i determinare reciproc componentele dobndesc caracter de pri ale ntregului, deoarece ntregul nu se confund cu suma prilor. Intregul posed o funcie proprie, o calitate proprie generat prin interaciunile componentelor. Funciile ntregului caracterizeaz individualitatea sistemului. Sistemele sunt complexe de elemente, care se afl ntr-o permanent interaciune ntre ele i se prezint ca un ntreg. Planete i molecule, organisme individuale i celule, pduri i lacuri sunt sisteme (Stugren, 1982, 1994). Structura sistemului este o construcie spaio-temporal caracterizat prin trsturi materiale i trsturi funcionale dinamice. Structura sistemului poate fi descris prin caracteristici calitative (care redau prezena sau absena unui element n sistem),
11
caracteristici cantitative (care descriu numrul anumitor elemente sistemice n componentele sistemului, redau participarea lor la edificarea sistemului), caracteristici relaionale (structurale, care prezint imaginea ntregii reele de interaciuni ale componentelor sistemice). Structura sistemului este identic cu totalitatea relaiilor reciproce ntre elementele sistemului i rezult din organizarea i distribuia spaial a elementelor, prin ordinea de succesiune a evenimentelor din sistem, n timp (Stugren, 1982, 1994). Analiza sistemic. Teoria general a sistemelor este teoria care cerceteaz caracterele generale ale sistemelor, forma abstract i modelul matematic al ntregului, scond n eviden numai aspectele logico-matematice (Botnariuc, 1976). Aplicarea ei la cercetarea i explicarea proceselor biologice este denumit analiz sistemic, prin care sisteme realeobiective sunt abstractizate n trsturile lor eseniale i analizate ca modele, pe baza unor variabile fundamentale (exemplu: numrul indivizilor speciilor din sol). Sistemul poate fi studiat att analitic ct i sintetic, pe baza conexiunilor (Stugren, 1994). Teoria nivelurilor de integrare i ierarhia sistemelor vii Integrare nseamn subordonare funcional a subsistemului sau sistemului cu structur mai simpl ntr-un sistem cu structur mai complex. Integrarea rezult din interaciunea prilor fiind consecina nsuirilor lor. Sistemul mare determin comportarea sistemului integrat. Prin integrare rezult o arhitectonic n trepte a lumii materiale pe plan cosmic i planetar, o ierarhie a sistemelor care const n diferenierea a trei niveluri de integrare: 1. nivelul fizico-chimic, 2. nivelul biologic i 3. nivelul social. Lumea material este structurat pe aceste trei niveluri de integrare. Ierarhia sistemelor vii . n cadrul nivelului biologic de integrare exist o ierarhie intern a lumii vii, conceput ca un ir liniar de niveluri de integrare, reflectnd creterea complexitii morfo-fiziologice a sistemelor. La baza acestei ierarhii se afl organismul individual. Nivelurile intraorganismice sunt integrate n nivelul de organisme individuale. Nivelurile supraorganismice, ca uniti vitale , se formeaz prin integrarea organismelor. Astfel se constituie patru forme de baz n organizarea lumii vii: 1. nivelul organismic-individual, 2. nivelul populaional, 3. nivelul biocenotic i 4. nivelul formaional. Fiecare nivel are nsuirile sale proprii, unicitatea sa, un tip special de interaciuni. (Stugren, 1982, 1994). Pe lng niveluri de integrare se disting i trepte de dezvoltare, care sunt rezultatul diferenierii interne a nivelurilor de integrare. (Dup aceast concepie, nivelul molecular al vieii este doar o treapt de dezvoltare molecular n cadrul nivelului organismic.) Pornind de la principiul c nivelurile de integrare ale lumii vii reunesc sisteme de acelai tip i cu aceeai sfer, Odum-1971, propune schema bazat pe complexitatea crescnd a sistemelor: gene-celule-organisme-populaii-biocenoze. Dup Szent-Gyogyi, 1960; Margalef, 1962, citai de Stugren, 1994, nivelul elementar i fundamental sub aspect funcional este nivelul molecular, chiar submolecular. Nici o schem linear nu este capabil s exprime arhitectonica ramificat a lumii vii (Botnariuc, 1976), dar cunoaterea detaliilor structurale i funcionale pe diferitele niveluri de integrare este determinant pentru actiunile de protecie sau inginerie a mediului.
12
La nivelul ecosistemului, forele integratoare sunt corespunztoare celor 5 planuri de structurare ale ecosistemului: structura de biotop a ecosistemului, dat de selecia de biotop asupra fondului de specii; structura spaial geometric, corologia; structura biocenotic (relaia cantitativ ntre mulimea de specii i mulimea de indivizi); structura trofodinamic, funcionarea fluxului de materie i energie n ecosistem; structura biochimic a ecosistemului (interaciunile dintre specii prin exometaboliii lor), (Stugren, 1994). Ordinea de timp a ecosistemului este mersul general al ecogenezei i succesiunilor, cu particularitile specifice privind: ecogeneza (succesiunea primar); succesiunile secundare: abiogene, biogene sau tehnogene; stabilizrii ecosistemului i stadiului de climax. 1.2. Semnificaia conceptului i evoluia ecologiei Ecologia se ocup cu ierarhia sistemelor biologice supraindividuale. Ierarhia spaial a nivelurilor supraorganismice ale vieii este reprezentat de nivelurile: populaiei (comunitatea de indivizi conspecifici), biocenozei (comunitatea de populaii), ecosistemului (sistemul eterogen de biocenoz i biotop, biotopul fiind sectorul restrns al crustei tereste, care adpostete biocenoza) i biosferei (ansamblul lumii vii i al biotopurilor, al condiiilor de existen ale vieii pe Pmnt). Ciocnitoarele negre (Dryocopus martius) i merioarele (Vaccinium myrtillus) dintro pdure de rinoase reprezint populaii distincte. Ambele sunt integrate n biocenoza de pdure. Comunitatea tuturor populaiilor biologice din pdure, mpreun cu ansamblul condiiilor de existen ale plantelor i animalelor (adic solul, atmosfera local, apa lichid i vaporii de ap din pdure etc.) constituie un ecosistem, ecosistemul de pdure (Stugren, 1994). tiinele biologice prezint o arhitectonic n trepte care reflect aproximativ ierarhia sistemelor lumii vii. Morfologia i fiziologia se ocup cu nivelul organismic individual, studiaz biologia organismului individual. Ecologia se ocup cu nivelurile supraorganismice, studiaz biologia comunitilor de organisme. Ecologia este tiina interaciunilor vieii cu mediul pe niveluri supraorganismice sau biologia ecosistemelor. Haeckel, 1866, consider Ecologia ca tiina despre condiiile luptei pentru existen, despre economia naturii, despre gospodrirea naturii, punnd accent nu pe organismul individual ci pe unitile vitale supraorganismice pe care se desfoar procesul transmiterii i prefacerii materiei n lumea vie. Din definiia lui Haeckel rezult c, ecologia construiete o imagine unitar a naturii vii din diverse aspecte ale luptei pentru existen prin integrarea rezultatelor unor discipline speciale. Economia naturii nseamn: producere, transmitere, trasformare, distribuie, depozitare i degradare a materiei organice vii n ecosisteme. Cuvntul grecesc oika sau oikos nseamn cas i gospodrie (Stugren, 1994). Ideea ecologic deriv din gndirea fundamental a lui Darwin, 1859, despre dependena reciproc a organismelor vii prin interaciunile ntre mrimile lor numerice. Gndirea ecologic const n descoperirea i accentuarea relaiilor ntre via i mediu; n considerarea fiecrei uniti vitale ca fiind membru ntr-un nivel superior de integrare. Punctul de vedere ecologic const n evidenierea interaciunilor sistemelor supraorganismice n cadrul arhitectonicii lumii vii. 13
A gndi ecologic nseamn a analiza unitatea vital n contextul nivelului superior de integrare (Stugren, 1982, 1994). Domeniul ecologiei cuprinde urmtoarele 4 niveluri : 1. populaii-sisteme de indivizi din aceeai specie care posed un patrimoniu ereditar comun (genofond) i ocup acelai punct n scoara terestr; 2. biocenoze sau comuniti biotice sau, simplu comuniti-reprezentnd sisteme de populaii care ocup mpreun acelai punct al scoarei terestre i realizeaz mpreun o activitate definit; 3. ecosisteme- sisteme rezultate din integrarea biocenozei cu fragmentul de mediu ocupat, numit biotop, ntr-un tot unitar, fiind astfel sisteme eterogene n ceea ce privete tipul de materie, alctuite din populaii i din componente nevii (substrat solid, ap, aer); 4. biosfera-ansamblul alctuit din materia vie planetar i nveliul superficial vitalizat al planetei (Stugren, 1982, 1994). Ecologia poate fi studiat din mai multe puncte de vedere: general ecologic-sintetic (sinecologia), special ecologic-analitic (autecologia), mezologic, istoric, geologic. 1. Punctul de vedere general ecologic sau sintetic, conduce la interpretarea sintetic a proceselor ecologice ca pri ale unui ntreg, care este ecosistemul i, respectiv, biosfera. Acest punct de vedere este esena sinecologiei-tiina biocenozelor i ecosistemelor, ecologia general sau teoretic. Numim sinecologic studiul pdurii ca ntreg n care specia respectiv este numai un element structural. 2. Punctul de vedere special ecologic sau analitic accentueaz populaia ca obiect al ecologiei; se refer la ecologia anumitor sectoare ale lumii vii, fiind tiina relaiilor cu mediul ale populaiei, individului i speciei-autecologia. Autecologia s-a dezvoltat pe plan botanic ca ecofiziologia plantelor, studiind influena factorilor fizici i chimici ai mediului asupra vieii plantelor. Pe planul zoologiei, autecologia s-a dezvoltat ca fiziologie animal ecologicecofiziologie animal, studiind influenarea manifestrilor vitale ale animalelor de ctre mediu, prin reflectarea legrii speciilor de mediul de existen. 3. Punctul de vedere mezologic prezint studiul particularitilor interaciunilor viamediu n funcie de natura mediului fizic. Mezologia sau ecologia mediului cuprinde ecologia marin, limnologia-ecologia apelor interioare i ecologia terestr. Ecologia general este temelia teoretic pentru intervenia raional a omului n funcionarea biosferei, pentru conducerea proceselor biologice de pe suprafaa Pmntului. Ecologia general este un corp de principii pe baza crora au fost elaborate numeroase discipline aplicative: protecia mediului, ocrotirea monumentelor naturii, arhitectura ladaftului, agroecologia, ecologia forestier, ecologia pescuitului, ecologia omului, ecologia global-tiin interdisciplinar etc. Din interferena ecologiei cu alte tiine naturale s-au format noi discipline (Stugren, 1994). Concepte fundamentale n ecologie. Mediu i biotop MEDIUL. Emil Racovi, 1929, definea mediul ca totalitatea lucrurilor materiale, evenimentelor i energiilor de care depinde viaa unei fiine. n sens larg, denumim mediu ansamblul forelor fizice i biotice, care influeneaz o unitate vital, un sistem viu. Astfel definit, mediul apare ca un sistem infinit, care cuprinde att fenomene fizice obinuite, ca vntul i ploaia, ct i fore majore ale cosmosului, ca radiaiile cosmice. Mediul este un sistem cosmo-biologic, un fenomen cosmo-biologic (Caradja,1925).
14
Nu toate forele active n mediu au aceeai semnificaie pentru fiinele vii. Fiecare specie alege din mediul general, acele elemente care corespund naturii sale genetice. i care, alctuiesc astfel, mediul specific sau mediul eficient (Stugren, 1994). FACTORII ECOLOGICI (FACTORII DE MEDIU). Factorii de mediu au un sens energetic i unul substanial. n mod tradiional, factorii de mediu sunt clasificai n factori abiotici (fizici) i factori biotici. Componentele mediului sunt abiotice sau biotice. Factorii de mediu sunt abiogeni i biogeni, adic sunt dependeni de componentul abiotic sau de cel biotic, dar nu exclusiv, deoarece fiecare factor biogen sufer influena factorilor abiogeni i invers. (Temperatura i lumina, ca factori abiogeni de la suprafaa solului sunt modificate de vegetaia de pe sol.) Astfel, se poate spune c, factorii ecologici sunt factori abiogeni de mediu transformai de ctre fiinele vii. Factorii ecologici se clasific n factori: climatici, orografici, edafici, biotici; sau dup modurile fiziologice de aciune asupra organismelor vii : ca factori stabili sau puternic variabili (Stugren, 1994). Structura etajat a mediului. Mediul este diferit structurat pe diversele niveluri de integrare a vieii. 1. La nivelul organismului. Factorii ecologici constituie o unitate funcional mpreun cu organismul individual. Fragmentul de spaiu fizic n care triete n mod nemijlocit un organism i spectrul sau sistemul de factori ecologici care-l influeneaz constituie habitatul acestui organism (standort n german i site n american). tiina habitatului sau mezologia studiaz influenele sistemului de factori ecologici asupra morfologiei i fiziologiei organismului. 2. Pe nivelul populaiei se deosebesc 9 tipuri de mediu: cosmic, geografic, climatic, orografic, edafic, hidrologic, geochimic, biocenotic, biochimic. 1.Mediul cosmic este format de forele fizice care provin din spaiul cosmic(radiaia solar, radiaiile cosmice, pulberea cosmic, fora de atracie a Lunii). 2.Mediul geografic este reprezentat de forele fizice dependente de alctuirea Pmntului: fora gravitaional, micarea de rotaie a planetei, cmpul magnetic planetar,tectonica planetei, compoziia i structura crustei terestre. 3.Mediul climatic rezult din distribuia geografic (zonarea) valorilor de temperaturii i umiditii pe suprafaa planetei., 4.Mediul orografic este alctuit de formele de relief ale suprafeei crustei terestre i ale substratului submrii. 5.Mediul edafic este reprezentat de compoziia i structura solului (edafon). 6.Mediul hidrologic cuprinde factorul ap sub diversele sale stri fizice. 7.Mediul geochimic este alctuit de compoziia chimic a substratului (atomii elementelor chimice) care reacioneaz cu fiziologia organismului. 8.Mediul biocenotic este totalitatea fiinelor vii care edific biocenoza. 9.Mediul biochimic este totalitatea produilor metabolici eliminai de organisme (exometabolii) care influeneaz alte organisme. 3. Pe nivelul biocenozei mediul apare ca biotop, totalitatea condiiilor externe care fac posibil existena biocenozei. BIOTOPUL este fragmentul i tipul de relief sau de ap care este sediul unei biocenoze (Dahl,1908). BIOTOPUL este locul de via al biocenozei sau ansamblul condiiilor externe care fiineaz o biocenoz (Rankonen,1939). n sens restrns, se numete biotop (monotop sau habitat) i locul de via al unui organism individual, spaiul n care fiineaz un organism individual, vegetal sau animal, mpreun cu factorii de mediu care acioneaz asupra lui (Stugren, 1994).
15
Lanuri trofice i niveluri trofice. Schimbul de substane ntre organism i mediu reprezint baza material pentru creterea biomasei pe Pmnt. Migraia substanelor se desfoar de la un organism la altul, cauzat de hrnirea unui organism pe seama altuia. Astfel se formeaz LANURI TROFICE (Elton,1927), uniti funcionale ale transformrii i transmiterii nutrienilor, ale circulaiei substanelor nutritive. (n lacuri: plantele de ap-macrofite crapul (Cyprinus carpio) tiuca (Esox lucius), realizeaz un lan trofic, circulaia materiei fiind ntr-un sens unic.) n cadrul unui lan trofic, organismele cu poziii taxonomice diferite, dar avnd aceeai poziie n lanurile trofice, folosind acelai tip de hran, surs de hran, constituie NIVELURI TROFICE. Organismele care prezint o comportare similar pe planul fiziologiei nutriiei, sunt grupate n NIVELURI TROFICE comune dup criteriul naturii hranei i a modului de obinere a ei (Stugren, 1994). n biosfer se deosebesc trei niveluri trofice majore: 1. Productori, 2. Consumatori, 3. Distrugtori (descompuntori sau destrueni). 1. Productorii (nivelul organismelor autotrofe) sunt organismele autotrofe, care construiesc materie organic primar din substane minerale prin FOTOSINTEZ (organismele fotoautotrofe, plantele, care asimileaz carbonul necesar vieii din CO2 atmosferic ) sau prin CHEMOSINTEZ (bacteriile chemoautotrofe). 2. Consumatorii (nivelul organismelor heterotrofe) sunt organisme heterotrofe, care nu au capacitatea de a produce materie organic din substane minerale, ci se hrnesc cu materie organic vie din corpul altor organisme vii. Consumatorii (ca biofagi) se clasific n trei componente: Consumatori primari (fitofage, erbivore), organisme care se hrnesc cu esuturi vegetale (plante), cu ciuperci, bacterii, virusuri fitopatogene. (Grupuri diferite taxonomic de animale: cerbul carpatin (Cervus elaphus), oarecele de pdure (Apodemus sylvaticus), plonia cerealelor (Eurygaster maura), din punct de vedere al fiziologiei nutriiei aparin aceluiai nivel trofic de consumatori primari, se hrnesc cu esuturi de plante vii.) Consumatori secundari (zoofage, carnivore) care se hrnesc cu animale fitofage i microorganisme zoopatogene. (Pianjenii, gastropodele marine prdtoare, lupul, tiuca, aparin aceluiai nivel trofic de consumatori secundari, hrnindu-se cu alte animalefitofage.) Consumatori teriari (consumatori de vrf, carnivore de vrf), animale care folosesc drept hran consumatorii secundari (zoofage) i primari (fitofage). (Caalotul (Physeter catodon), tigru (Panthera tigris), paraziii animalelor sunt pe nivelul consumatorilor teriari. Paraziii consumatorilor teriari sunt consumatori cuaternari. Un loc foarte important l ocup n circuitul materiei n natur, consumatorii de substan organic moart: organismele saprofage sau detritivore 3. Distrugtorii (nivelul organismelor descompuntoare) sunt bacterii i micromicete nepatogene care transform materia organic moart n materie anorganic prin fenomenul de descompunere (fermentaie i putrefacie) (Stugren, 1994). Teoria nivelurilor trofice este utilizat pentru analiza biocenozelor, exprimnd simplificat conexiunile multilaterale ale speciilor i ale funciilor ecosistemice. n natur se regsesc destul de rar organisme aparinnd numai unui nivel trofic teoretic. Sunt rare n natur carnivorele absolute sau fitofagele exclusive. Buburuza (Coccinella septempunctata), care este zoofag, prdtoare, consum i polen sau sucuri dulci de struguri. Lanul trofic ns este o unitate vital, un subsistem n ecosistem. ncadrarea speciilor n niveluri trofice este dificil deoarece n natur exist foarte rare cazuri de organisme specializate trofic.(Un exemplu este ciliatul prdtor Woodruffia metabolica, specializat trofic la hrana exclusiv cu Paramecium).
16
Apartenena la un nivel trofic poate fi diferit pe parcursul vieii animalului. (Mormolocii de broasc se hrnesc cu vegetaie acvatic; broatele adulte se hrnesc zoofag (insectivore). Nu sunt perfect delimitate ntre ele nici nivelurile autotrofelor i heterotrofelor. (Algele albastre (Anacystis nidulans)-cianobacterii, n timpul reproducerii masive pe lng fotosintez sunt i consumatoare de aminoacizi din ap. Algele heterotrofe din sol sunt fotositetic active la suprafaa solului.), (Stugren, 1994). 1.4. Diversitatea organismelor vii. Clasificarea organismelor vii Sistemul de clasificare a organismelor n cele 5 regnuri Aprecierea c n lumea vie ar existenta dou categorii de organisme, plantele i animalele (Dragan-Bularda i Samuel, 2006) nu corespunde realitii deoarece, unele organisme nu se ncadreaz n regnul vegetal sau n cel animal. Astfel, cnd lumea microscopic a fost mai bine cunoscut, a devenit evident c unele microorganisme nu pot fi clasate n nici unul dintre cele dou regnuri tradiionale, existnd grupuri ntregi cu caractere intermediare (Euglena, Volvox Chlamydomonas etc.). Bacteriile au fost ncadrate n regnul vegetal, n diviziunea I Protophyta (plante primitive - clasa Schizomycetes-bacterii), pe baza unor considerante fiziologice i morfologice, care le deosebesc de regnul animal (dup Bergey, 1957, citat de Dragan-Bularda i Samuel, 2006): 1. printre bacterii se ntlnesc specii autotrofe, fotoautotrofe ca i plantele fotoautotrofe sau chimioautotrofe, pe cnd animalele sunt organisme heterotrofe; 2. substanele nutritive ptrund n celula bacterian ca i n corpul plantelor sub form solubil (cu excepia bacteriilor care pot folosi celuloza etc., care este n prealabil scindat de enzimele extracelulare). Animalele pot ingera hran sub form solid, pe care o diger, o transform n substane solubile, digestia realizndu-se, la majoritatea animalelor, cu un aparat morfologic difereniat. Bacteriile i plantele nu dispun de un aparat digestiv similar. 3. Bacteriile ca i majoritatea plantelor pierd apa i substanele hidrosolubile prin difuzie din interiorul celulei spre exterior, prin peretele celular (ele nu au un aparat excretor specializat). 4. Bacteriile (cu excepia micoplasmelor) au un perete celular care este rigid datorit mucopeptidului. Peretele celular bacterian, ca i peretele celulozic al celulei vegetale, nconjoar membrana citoplasmatic. n cursul plamolizei, celula bacterian i cea vegetal, i pstreaz forma iniial, datorit rigiditii peretelui celular. Celulele animale nu dispun de un perete rigid. 5. Diviziunea bacteriilor, ca i a celulei vegetale, are loc n direcia perpendicular pe axul longitudinal al celulei. La celulele animale, diviziunea se produce de-a lungul axului longitudinal. 6. Amidonul, principala substan nutritiv de rezerv a plantelor, se ntlnete i la bacterii. Animalele nu sintetizeaz amidon, dar polizaharidul lor de rezerv, glicogenul (absent la plante) se gsete i n multe bacterii. Analiznd evoluia clasificrilor organismelor vii i, mai ales ncadrarea arbitrar i nelogic a bacteriilor n rndul plantelor, avnd n vedere c, ntre procariote i eucariote exist mari deosebiri, Dragan-Bularda i Samuel, 2006 prezint urmtoarele etape: Haekel, 1866, propune gruparea tuturor formelor inferioare de via in regnul denumit Protista, n care au fost ncadrate, n perioada 1894-1904, numai organismele unicelulare sau unicelulare-coloniale. Stanier, 1970, dup criteriul nivelului de organizare biologic, clasific n regnul Protista, organisme unicelulare, cenocitice sau multicelulare, dar nedifereniate (ca de ex. algele marine mari, bazidiomicetele etc), care nu formeaz esuturi, delimitnd:
17
1. protiste inferioare, care au celule procariote (bacterii i alge albastre), 2. protiste superioare, care au celule eucariote (alge i ciuperci microscopice, protozoare). Copeland, 1938, Hutchinson, 1967 i Weisz, 1971, clasifica organismelevii n 4 regnuri: 1. Monera, includ bacteriile i algele albastre-verzi. 2. Protoctista (Protista), incluznd organisme eucariote inferioare unicelulare,unicelularcoloniale, sinciiale sau multicelulare, fr difereniere celular avansat (algele microscopice, exceptnd cele albastre, ciupercile microscopice i protozoarele). 3. Plantae (Metaphyta) (Weisz), plante terestre i acvatice. 4. Animalia (Metazoa) (Weisz), organisme animale multicelulare. Aceast clasificare are o serie de imperfeciuni legate de organismele simple, i anume, faptul c: regnul Protista, este lipsit de unitate, are limite de organizare ale organismelor foarte largi, nu are difereniere clar fa de organismele superioare, este foarte bogat i diferit fa de regnul Monera i reprezint o confederaie de organisme cu diferite niveluri intermediare de organizare, superioare procariotelor, dar inferioare plantelor vasculare i animalelor superioare (Dragan-Bularda i Samuel, 2006). Sistemul celor 5 regnuri, propus de Wittaker (1969) pentru clasificarea organismelor vii, utilizeaz dou criterii de grupare a acestora, in toata diversitatea lor: Criteriul I: prin stabilirea a trei niveluri de organizare: a) procariot, b) eucariot unicelular, c) eucariot multicelular-multinuclear; Criteriul II: considerand existena a trei modaliti principale de nutriie: a) nutriia fotosintetic (secundar absorbtiv), caracteristic plantelor, b) nutriia ingestiv, tipic pentru animale), c) nutriia absorbiv, caracteristic fungilor. Sistemul celor 5 regnuri, elaborat de Wittaker are urmtoarea structur: 1. Regnul MONERA, ce include organisme unicelulare de tip procariot, corespunznd bacteriilor, organisme cu existen unicelular-solitar sau unicelular colonial, cu excepia actinomicetelor, care au organizare de tip micelian. Modul de nutriie este preponderent absorbtiv, iar metabolismul de tip foto-sau chemotrof. Reproducerea se face prin diviziune asexuat, mai rar prin nmugurire i rar cu fenomene de protosexualitate. Sunt nemotile sau motile (prin cili=flageli, alunecare-trre). 2. Regnul PROTISTA, care includ organisme primar unicelulare sau unicelularcoloniale de tip eucariot. Modul de nutriie este diferit (absorbie, ingestie, fotosintez sau combinaii ale acestor tipuri). Reproducerea este de tip diferit incluznd diviziunea asexuat (la nivel haploid) i procese sexuate devrate cu cariogamie i meioz. Sunt nemotile sau motileprin flagel detip superior. 3. Regnul PLANTAE, care include organisme multicelulare cu celule eucariote, ce au perete celular celulozic, prezint frecvent vacuole n citoplasm i pigmeni fotosintetizani n plastide. Modul principal de nutriie este cel fotosintetic, unele linii au dvenit absorbtive. Esenial nemotile, triesc ancorate pe un substrat. Prezint difereniere structural care duce la apariia unor de fotosintez i la formarea de esuturi specializate, fotosintetice, vasculare, de acoperire. Reproducerea este sexuat, cu cicluri de generaii alternative haploide i diploide. 4. Regnul FUNGI, ce include organisme multicelulare, exceptnd subregnul Gymnomycota, cu nuclei de tip eucariot, dispersai ntr-un sinciiu micelial, acoperit cu perete celular, adesea septat, caracterizate prin absena plastidelor i a pigmenilor fotosintetici. Nutriia este de tip absorbtiv. Diferenierea somatic este absent sau limitat. Prezint cicluri reproductivetipice, cu procese sexuate i
18
asexuate. Miceliile, haploid, la cele inferioare i dicariotice la multe forme superioare. 5. Regnul ANIMALIA, ce include organisme multicelulare de tip eucariot, fr perete celular, fr plastide i pigmeni fotosintetizani. Nutriia este de tip ingestiv. La formele superioare, nivelul de organizare i de difereniere tisular depete cu mult celelalte regnuri (Dragan-Bularda i Samuel, 2006). 6. . Lynn Margulis i Karlene Schwartz, 2000, prezint o nou form de mprire a lumii vii n cele 5 regnuri, crend dou supraregnuri:
Supraregnul Prokarya (Prokaryotae): 1. Regnul Bacteria (Monera); Supraregnul Eukarya (Eukaryotae): 2. Regnul Protoctista (Protista) (protozoare, alge); 3. Regnul Plantae; 4. Regnul Animalia; 5. Regnul Fungi
Celule Eucariote
Supraregnul Eukarya
Prezent Regnul Animalia Nevertebrate Vertebrate (5) Primele organisme multicelulare 0.6 Apariia primelor celule Eukariote 2.0 Apariia primelor celule Prokariote 4.0
(Eukaryotae)
19
1.5. Ordinea de timp a ecosistemului Generaliti. Forele integratoare i planurile structurare ale ecosistemului Ecosistemul are o structur unitar, cu toat diversitatea componentelor sale. Plantele, animalele, fungii, protozoarele i algele, bacteriile sunt reunite ntr-un tot unitar cu biotopul sub aciunea unor fore ale realitii fizico-chimice, numite fore integratoare. Configuraia solului, relieful, substratul trofic, interaciunile trofice ale organismelor, efectele biochimicalelor alelopatice sunt fore integratoare. Fiecare for integratoare genereaz un plan de structurare al ecosistemului: 1) structura de biotop, dat de selecia de biotop asupra fondului de specii; 2) structura spaial geometric, n funcie de dispunerea elementelor n spaiul fizic; 3) structura biocenotic, relaia ntre mulimea de specii i mulimea de indivizi; 4) structura trofodinamic, funcionarea fluxului de materie i energie n ecosistem; 5) structura biochimic, interaciunile dintre specii prin exometaboliii lor. Ordinea de timp a ecosistemelor este dat de secvenele unor evenimente aleatorii i ale unor procese legice, dinamice : Regrupri ale elementelor ce pot fi evenimente aleatorii. Fenomene ritmice ce se desfoar dup un anumit model, legiti, i nu sunt reversibile. Succesiunile biocenozelor se desfoar dup o direcie (trend), care nu este aleatorie. Timpul ecologic este orientat n sens unic, caracterizat de creterea entropiei (Wiener, 1961, Stugren, 1994). Structura ecosistemelor este supus unor transformri necontenite: modificri aleatorii: regrupri ale elementelor structurale, fr schimbarea acestora. Exemplu: cnd un nor acoper brusc soarele, ntr-o zi de var, insectele intr n repaus, fluturii i bondarii i nceteaz zborul (Elton, 1927, Stugren, 1994) ; transformri ritmice, periodice: stri repetabile, fenomene ciclice, nu strict reversibile. Exemplu: psrile migratoare prsesc toamna ariile de clocire din nord, spre zonele de iernare i se ntorc primvara, cu variaii numerice i de biomas (Stugren, 1994) ; transformri neperiodice: procese de lung durat, irepetabile, prin care se formeaz, evolueaz i decad structurile ecosistemice: succesiuni ecologice sau ecogenez, n formarea i transformarea ecosistemului, unele pri structurale dispar i sunt nlocuite de altele noi. Acest proces evolueaz prin nlocuiri permanente ale biocenozelor, prin: succesiuni n timp. Exemplu: de-a lungul apelor, pdurile de arin nlocuiesc pdurile de mesteacn (Stugren, 1994). Toate transformrile structurale se ntemeiaz pe mulimea de variaii aleatorii. Mutaii ntmpltoare imprim speciilor nsuiri avantajoase sau nu, n lupta pentru existen. Se schimb astfel i relaiile interspecifice. Fluxul energetic prezint oscilaii permanente, este discontinuu, deoarece purttorii macroscopici ai energiei, indivizii biologici, sunt uniti biotice discontinui n timp. Sunt instabile i anumite circuite feedback din interiorul ecosistemului. Toate canalele de aferentaie invers sunt supuse unor permanemte oscilaii, ceea ce duce la modificri n construcia ecosistemului (Margalef, 1962, Stugren, 1994).
20
ECOGENEZA (SUCCESIUNEA PRIMAR) Esena ecogenezei este geneza de structuri ecologice. Ecosistemele, ca pri ale crustei terestre, aparin de cmpul geofizic, ce determin configuraia i evoluia lor. Transformarea ecosistemelor se ntemeiaz pe: - influene lente (seculare) ale mediului abiotic; - intervenii catastrofale externe ; - interaciunile dintre componentele biotice n cadrul biocenozei. Calamitile naturale (furtuni aductoare de incendii, ploi toreniale, cutremure, erupii vulcanice, valuri de uragan ale mrii tsunami) distrug lumea vie pe anumite arii i deschid calea pentru geneza de noi ecosisteme. nlocuirea de lung durat a ecosistemelor, are loc datorit dinamicii relaiilor interspecifice din biocenoz care conduc la transformri structurale biocenotice necontenite. nlocuirea speciilor ce edific biocenoza n conexiune cu transformrile condiiilor de existen n decursul timpurilor se numete succesiune. Sensul original al conceptului era pur botanic, referitor la dezvoltarea i nlocuirea vegetaiei. Abia mai trziu a dobndit i un sens zoologic, ntru-ct dezvoltarea faunei are loc n conexiune cu dezvollarea vegetaiei, n cadrul unui proces ecologic unitar. Cauzele succesiunii nu rezid ns primordial n dinamica endogen a biocenozei. Succesiunea este iniiat i declanat prin fore exogene. Procesele fundamentale de genez i evoluie, ca i ale decderii structurale a ecosistemelor sunt supuse n primul rnd forelor mediului extern. Cea mai simpl succesiune pe continent este colmatarea unui lac trecnd prin stadiul de vegetaie nmltinat de stuf i culminnd, prin ncorporarea n ecosistemul de pdure. Geneza i evoluia ecosistemelor nu este o simpl succesiune a speciilor ntr-un biotop neschimbat, ci este un proces evolutiv n care viaa i biotopul creeaz prin interaciuni, structuri ecologice noi. Conceptul de ecogenez se refer la geneza de noi sisteme de interrelaii ntre via i mediu, prin care apar i noi pri structurale i, in final, ecosisteme noi. Ca proces ecologic global, ecogeneza cuprinde att succesiunile vegetaiei i ale faunei ct i procesele de formarea solului i de geomorfogenez. A. ECOGENEZA SE SUPRAPUNE CU CONCEPTUL DE SUCCESIUNE PRIMAR: istoria natural a dezvoltrii unei biocenoze de la pionierat (colonizare primar a spaiului abiotic) pn la climax (stabilizare). Succesiunea primar cuprinde o serie de stadii botanice n anumite condiii climatice: o xeroserie este succesiunea vegetaiei de la un spaiu abiotic arid pn la un biotop mezofil, Exemplu: de la un cmp arid pn la pdure. o hidroserie - succesiunea vegetaiei de la un spaiu umed la un biotop arid. Exemplu: de la plaja repetabil inundat de valuri pn la aridizarea total a biotopului. B. Termenul vechi ncetenit de SUCCESIUNE, se suprapune cu conceptul de SUCCESIUNE SECUNDARA, adic procesele de refacere a ecosistemului dup perturbri structurale profunde, dar fr distrugerea total a vieii. Mecanismul ecogenezei - succesiunii primare - este explicat de: teoria clasic - TEORIA LUI CLEMENTS i de teoria modern STOHASTIC.
21
TEORIA CLASIC-CLEMENTSIAN A SUCCESIUNII PRIMARE Dup teoria lui Clements, succesiunea primar = ecogeneza, cuprinde ase stadii: 1)denudarea biotopului; 2)imigrarea; 3)eceza (colonizarea), 4) concurena interspecific; 5) reacia biocenotic; 6) stabilizarea. Teoria este ntemeiat pe deducii logice i predicii ipotetice ale evoluiei biocenozei. nlocuirea stadiilor de vegetaie este o consecin a succesiunii legice naturale, ce a predeterminat evoluia, bazat pe mecanismele dinamicii biocenotice. Fiecare fond vegetal genereaz, prin efectele sale asupra solului, premisele nlocuirii cu un nou fond vegetal (Stugren, 1994). n aceast succesiune compoziiile stadiilor se succed n ordinea n care sunt clasificate plantele n sistemul natural. Se consider c numai plantele inferioare pot aciona ca pionieri pe un sol fr vegetaie: dup algele albastre urmeaz o comunitate de briofite, apoi urmeaz pteridofitele i, la sfrit, gimnosperme i angiosperme. Aceast teorie determinist, a dominat circa o jumtate de secol gndirea ecologic. Dup teoria lui Clements : 1. ntmplarea are un rol major n succesiune numai n faza de pionierat. Sporii, polenul, seminele i microfauna sunt aduse neselectiv de vnt sau de ape. 2. selecia natural, transform repede fenomenele aleatorii de imigrare ntr-un proces evolutiv ordonat. Mediul fizic selecioneaz imigranii pstrnd numai acele forme, care sunt potrivite pentru viaa n noile condiii de existen. 3. n stadiul de colonizare, imigranii admii de selecia natural pun stpnire pe biotop i nceteaz rolul ntmplrii n succesiunea primar. 4. Biocenoza se dezvolt prin interaciunea speciilor, determinat de factori biotici. Modelul teoriei - istoria natural a rempduririi insulei Krakatau dup erupia vulcanic din 1883, nu este ntotdeauna confirmat. Nu ine seama de faptul c evoluia biocenozei se bazeaz pe strategiile de adaptare ale speciilor la condiiile fizice fluctuante de existen i este rezultatul interaciunii multor factori abiogeni i biogeni, printre care i alelopatia. Astfel, pe vulcanii din Ruwenzori, n centrul Africii, fisurile stncilor sunt colonizate mai nti pe lng muchi i de plante vasculare. n terenurilor periglaciare abiotice din Alpi germineaz ca pionieri semine de Hieracium staticifolium, Saxifraga caesia i Pinus mugo. Pe terenuri abiotice de origine vulcanic din Japonia, tendina general de dezvoltare a covorului vegetal fiind de la un stadiu srac n specii, spre un stadiu bogat n specii; Edificarea pdurii pe Krakatau dup catastrofa din 1883 nu poate fi considerat ca model general pentru succesiunile primare. Botanistul Treub a vizitat insula numai in 1887. Anumite animale au aprut naintea plantelor pe insul, sau cel puin o dat cu plantele. Una dintre primele forme aprute n 1888 a fost un arpe uria (Python reticulatus. La un an dup erupie au aprut colembole, coleoptere i diptere, ce au atras, ca hran, psri oceanice. Observaii ulterioare au artat c : n regiuni de vulcani activi fauna poate preceda plantele n faza de pionierat. Pe marginea calotei de ghea din Antarctica, nu lichenii ci colembolele sunt ultima form de via care rezist, vieuind ntre hife de ciuperci (Aspergillus) pe conul vulcanului Mt. Erebus (la circa 2000 m nlime). Primii imigrani pe blocuri de lav de pe Etna i Vezuviu sunt pianjeni zburtori (anemocori), care se hrnesc cu detritus organic i plancton aerian adus de vnturi (Stugren, 1994).
22
TEORIA MODERN (STOHASTIC) A ECOGENEZEI Ecogeneza este privit ca un proces stohastic, ce urmeaz legi probabilistice. Ca model poate fi utilizat istoria natural a genezei biocenozelor pe insula Surtsey, insul aprut din mare n 1963, n urma erupiei vulcanice submarine la sud-vest de Islanda, ca un bloc abiotic de stnci din tefra (de cenu vulcanic). Asimilarea spaiului abiotic a nceput printr-o colonizare microbiologic i a parcurs trei faze: 1) faza preecogenetic, 2) faza de biotopuri de pionierat i 3) faza de ecogenez difuz. Colonizare microbiologic - planctonul aerian a ajuns pe insul cnd aceasta era nc o arie potrivnic vieii. n primul an bacteriile i algele au ntemeiat o oaz de ecogenez, unde au aprut repede i semine de plante vasculare. (Situaie asemntoare observat i pe insula vulcanic Kunair -Kurile) . Imigrarea pe insula Surtsey s-a produs n mai multe unde, deoarece pionierii au fost repede splai de valuri de furtun n mare. Ca pionieri s-au afirmat i artropodele. n 1968, dup 5 ani, cretea i se reproducea prima plant cu flori, Cakile maritima. Mai trziu au aprut i briofite, care au format repede o pern, ce a acoperit solul nud. n 1970 a existat o flor spontan cu 7 specii i o faun asociat de 158 specii, majoritatea diptere. Denudarea vulcanic a biotopului, poate fi nsoit i de geneza unor noi insule. Denudarea biotopului poate apare i pe dune de nisip din interiorul continentului. Aici a fost observat numai o imigrare necontenit ntpltoare i nu o succesiune legic a stadiilor de vegetaie prin altele. Natura stohastic a populrii insulelor rezult i din faptul c, insectele sunt capabile de a depi frontiera ntre mare i uscat prin zbor activ. Pe dune de nisip din interiorul continentului i pe dune de pe rmul mrii, plante pionieri sunt ierburi i tufe. Pe substrat periglaciar n muni nali apar ca pionieri plante superioare (Stugren, 1994). Durata ecogenezei. La latitudini nordice pdurea se formeaz mult mai ncet decit la tropice. Astfel, pe Krakatau pdurea s-a refcut repede; n 1908 exista deja dup 50 de ani de la catastrof o pdure, iar n 1928 pdurea se extindea compact, pn la vrful craterului. n climatul subarctic din Kamciatka pdurea s-a dezvoltat abia dup 250 ani, de la o revrsare pustiitoare de lav n albiile fluviilor iar, pe fluvii de lav, pdurea s-a format numai dup 800 - 1200 ani. n climat subtropical dezvoltarea pdurii s-a desfurat mai repede dect n zona subarctic i mai ncet dect la ecuator. Pe insula Sakurajima (Japonia), pdurea era deja refcut dup 150 ani de la erupia vulcanic. n nordul Europei, pe insule de nisip nou aprute n marea epicontinental foarte puin adnc (Wattenmeer) din faa coastelor Germaniei de Nord-Vest, colonizarea de ctre insecte s-a desfurat n mai multe valuri ntmpltoare. Ecogeneza se desfoar prin jocul ntre imigrare i pieirea speciilor pe insulele i pe malurile unui mare lac din Suedia. Dup retragerea apelor urmeaz deja n prima lun colonizarea n mai multe unde cu nevertebrate. Succesiunea primar a plantelor terestre pe terenurile unde a avut loc colmatarea lacului se desfoar ca un proces stohastic. La tropice asimilarea de noi insule n biosfer se desfoar ca un proces stohastic.. Astfel, pe unele insule mici din arhipelagurile Tonga i Samoa din Pacificul central, se gsesc anumite specii de plante iar pe alte insule vecine ele lipsesc. Popularea insulelor Galapagos cu plante vasculare a fost opera vntului,valurilor, psrilor. n concluzie, cele dou teorii ale succesiunii primare, ale ecogenezei sunt antagoniste i par a fi incompatibile. Totui, contradiciile nu sunt imposibil de depit. Interaciuni necontenite ntre evenimente ntmpltoare conduc la o dezvoltare a biocenozei dup un anumit model, dup un anumit trend (tendin), (Stugren, 1994).
23
SUCCESIUNI SECUNDARE Succesiunile secundare, denumite simplu SUCCESIUNI, apar, spre deosebire de ecogenez, permanent i peste tot n biosfer. Cele mai multe ecosisteme sunt cuprinse tot timpul ntr-un proces de succesiune. DECLANAREA SUCCESIUNILOR este dat de : aciunea unor fore perturbatoare obinuite: n mediul terestru incendiile, n apa marin modificri de salinitate .a. SUCCESIUNILE SUNT EXPRIMATE prin : modificri cantitative ale elementelor structurale, prin modificri ale numrului de specii i de indivizi n cadrul structurii biocenotice. modificri de durat, ce conduc la transformarea ordinii biocenotice i n final la nlocuirea biocenozei pe acelai substrat. De exemplu, n anul 1951, invazia de ape saline oceanice n Marea Baltic, bazin cu ape salmastre (oligohaline), a provocat prefacerea i deplasarea biocenozelor. Stocarea apelor salmastre n orizonturi adnci a fost urmat de anoxie, regresul i dispariia zoobentosului. DUP FORA DECLANATOARE a succesiunii deosebim : succesiuni abiogene, biogene i tehnogene (Stugren, 1994). 3.1. SUCCESIUNI ABIOGENE Forele fizice ale mediului pot cauza formarea de ecosisteme noi, acionnd catastrofal (erupii vulcanice, cutremure, incendii, uragane), sau n mod treptat (transformri climatice), pornind de la rmiele substratului biotic vechi. Erupiile vulcanice sunt urmate de emanaii de gaze toxice, ploi de cenu, revrsri de fluvii de lav, aducnd combinaii minerale n soluri i lacuri, cauznd eutrofizarea lacurilor. Cutremurele sunt cauzele unor alunecri de teren ale masivelor forestiere, care pot declana catastrofe ecologice locale. Incendii naturale apar ca fenomene normale, repetabile n savane estafricane, n pdurile montane de pin din California, n pdurile de eucalipt din Australia, n Delta Dunrii. Incendiile accelereaz circuitul materiei prin volatilizarea combinaiilor minerale. Ploile ce survin spal fosforul de pe solul ars . Pe culturi arse, se reduce diversitatea specific a coleopterelor. Focul favorizeaz acumularea de azot n sol. Fondul de semine din sol sufer reduceri de pe urma incendiilor. Mersul general al succesiunii pirogenetice are ca rezultat reducerea diversitii speciilor, a diversitii i echitii covorului vegetal. n primii 10-13 ani dup un incendiu de pdure crete diversitatea ierburilor i a tufelor, ce scade ns mai trziu din cauza concurenei plantelor lemnoase. O pdure se regenereaz ncet dup foc, deoarece creterea ierburilor mpiedic dezvoltarea plantulelor de specii lemnoase. n succesiuni pirogenetice este implicat i alelopatia. Fauna edafic de nevertebrate din lacunele hipogee ale solului este sursa recolonizrii biotopului cu animale de pdure. Uragane pustiitoare pot declana succesiuni pe arii ntinse de continent sau ocean. Huricanele distrug regiuni recifale n Jamaica, nimicind 98% din coralieri i fauna lor. Taifunurile tropicale din estul Asiei, pustiesc masive forestiere, scindeaz fondul de arboret i creeaz luminiuri; luminiurile sunt npdite de ierburi (Pandanus) ca pionieri.
24
Furtuni de zpad distrug n Suedia, pri ale codrilor de conifere i creeaz goluri. Btaia puternic i necontenit a vnturilor dinspre ocean, n Anzii din Chile, deterioreaz pdurile de fag (Nothofagus). Regenerarea decurge ca un proces stohastic, total aleatoriu. Ruperi de nori produc n Noua Zeeland denudarea unor regiuni ntinse n muni. Calamitile naturale pot duce la formarea de tanatocenoze : n Africa de Sud hergheliile de zebre pier masiv, necate n nmol; n America de Nord pier herghelii de cal slbticit (mustang) din cauza furtunilor de zpad. Tot tanatocenoze sunt i depozitele de turme de ungulate czute n rpe din cauza ploilor toreniale pe insula Eubeea, Grecia (Stugren, 1994).
Modificrile climatice declaneaz succesiuni lente, de lung durat n mri, lacuri mari i pe continente. n jurul anului 1950, n mrile britanice a avut loc amestecul straturilor de ap pe vertical, rezultnd o prefacere profund a regimului hidrologic n litoral de la tipul de ape litorale la ape de tip oceanic. Ca urmare a acestui eveniment, n apele de rm a aprut masiv zooplanctonul pelagial mpreun cu petele planctofag Clupea harengus. n perioada miocenic, Marea Mediteran a avut nivelul de ap puternic sczut prin evaporare n decursul unei lungi perioade climatice aride; astfel fiind dezgolite regiuni intinse ale fundului mrii, ceea ce a ngduit extinderea savanelor din Orientul Apropiat spre vest pn n Spania. Ca urmare a nrutirii postglaciare a climatului dup epoca de maxim cldur de dup glaciaiuni, covorul vegetal din Eurasia a fost nlocuit; locul stepelor aride i reci fiind luat de pduri de foioase umede. Transformrile climatice nu conduc ntotdeauna la nlocuiri de biocenoze, ci uneori numai la nlocuiri ale unor specii, fr alterare structural a ecosistemului. ncepnd cu mijlocul secolului al 19-lea, climatul Europei centrale i nordice a devenit tot mai oceanic. Aceasta a permis imigrarea unor psri iubitoare de umiditate n Fenoscandia, ca de exemplu cufundac (Podiceps nigricollis), ginua-de-balt (Gallinula chloropus), liita (Fulica atra), privighetoarea (Luscinia luscinia) i dispariia unor specii ca de exemplu dumbrveanca (Coracias garrulus) (Stugren, 1994). SUCCESIUNI BIOGENE Sunt cauzate mai ales de concurena interspecific din ecosisteme, pe acelai substrat cu condiii abiotice relativ constante. Exemplu: dezvoltarea unei turbrii de la o mlatin de turb (regim eutrof, cu bru de macrofite), la un tinov oligotrof n care speciile de Sphagnum constituie vegetaia. Se nlocuiesc fondurile de faun, apar iruri de combinaii de specii, ce se succed n funcie de natura biotopului, tipul de vegetaie i natura solului. n biotopuri primare, spectrul de forme biotice animale este foarte bogat, dar se restrnge treptat. Recifii de coralieri sunt subminai ncet de activitile spongierilor, polichetelor, bivalvelor, sipunculidelor, rmiele de pe fundul mrii fiind recolonizarea cu alge, cu fanerogame (Thalassia), cu coralierii (Acropora, Millepora). Desfurarea succesiunii biogene depinde de capacitatea plantelor i animalelor de a invada suprafee deja ocupate, de a izgoni locuitorii autohtoni, i de a asimila biotopul. Colonizarea se desfoar stohastic - deoarece condiiile fluctuante de existen nu favorizeaz structurarea legic, ordonat a biocenozei, nu permit predicii asupra fazelor. Rezultatul depinde de capacitatea competitiv a plantelor adulte i, mai ales, de
25
aceea a seminelor i plantulelor. Smirdarul caucazian (Rhododendron ponticum) introdus n Irlanda, unde s-a slbticit, a cucerit n pduri de stejar arii ntinse, datorit toleranei sale la umbrire, ratei reduse de metabolism i creterii suprafeei foliare. Prin colonizare nu are loc neaprat izgonirea speciilor autohtone, ci reducerea PPN ale lor. Numrul de specii de animale asociate cu succesiunile biogene crete odat cu creterea ariei speciei-gazd. De exemplu, trestia-de-zahr (Saccharum officinale) a fost introdus pe insulele Ryukyu n jurul anului 100, unde ocup azi circa 5000 ha; n Cuba a fost introdus abia n 1540, dar ocup acolo 942.000 ha. n insulele Ryukyu este atacat de numai 21 de specii de insecte duntoare, dar n Cuba de 81 specii. Prin punare selectiv, animalele erbivore pot cauza succesiuni secundare ale plantelor. De exemplu, microcrustaceii algofagi declaneaz prin punarea dinoflagelatelor n lacuri din America de Nord, succesiunea fitoplanctonului de la o comunitate de diatomee-dinoflagelate primvara, la o comunitate de alge verzi-alge albastre toamna. Atunci cnd invazia se manifest prin inundarea total a biotopurilor de imigrani, speciile autohtone sunt fie n ntregime supuse i ngrdite, fie exterminate. Aceasta duce la prefacerea structurii de ansamblu i a funciilor ecosistemului. Exemple: Crabul-lnoschinezesc (Eriocheir sinensis), adus din Asia de Est n 1912, a invadat i colonizat repede aproape toate fluviile din Europa central. Iridomyrmex humilis, furnica sud-american, adus n America de Nord a exterminat specii indigene de furnici. Filoxera (Viteus vitifolii) i gndacul-de-Colorado (Leptinotarsa decemlineata), imigrani din America de Nord, au dobndit poziii de control n vii i respectiv culturile de cartofi. n lacuri i bli din Delta Dunrii, petele erbivor Ctenopharyngodon idella ntrerupe mersul succesiunii prin punarea aproape complet a macrofitelor (Stugren, 1994). SUCCESIUNI TEHNOGENE Aciunile economice ale omului, mai ales industrializarea, provoac n biosfer succesiuni secundare i ecogeneze. Stugren,1994 prezint n Ecologie terestr urmtoarele exemple semnificative ale impactului activitilor antropice. nc n paleoliticul timpuriu, omul a provocat n nordul Europei regresiunea fondurilor de ulm (Ulmus), hrnindu-i caii cu frunze de ulm. Succesiuni pirogenetice au fost adeseori declanate de vntori i agricultori. Prin foc, unelte, arme i capre omul primitiv a distrus numeroase plante i animale i a deschis calea pentru multe succesiuni. Influene de lung durat ale omului asupra naturii transform lent condiiile de existen ale animalelor i declaneaz succesiuni n care unele specii sunt favorizate, iar altele dezavantajate. Astfel, n Suedia au fost extinse n sec. al 19-lea terenurile agriculturale i fneele, ceea ce a favorizat extinderea arealurilor unor specii de vertebrate puntoare ca elanul (Alces alces) i cpriorul (Capreolus capreolus), dar au dezavantajat altele cum sunt ciocrlanul (Galerida eristata), barza alb (Ciconia ciconia) i buhaiul-de-balt-cu- burt-roie (Bombina bombina). Pe terenuri agricole abandonate se pot desfura succesiuni cu serii complete. n funcie de vegetaia regiunii se ajunge la asimilarea terenului n pdure sau n step. Dintre nevertebrate sunt dominante n stadiul de pionierat colembole i larve de diptere, care i gsesc nie potrivite n sistemul lacunar al solului. Fixatorii de azot atmosferic (bacterii i cianobacterii) sunt inhibai aici de exometaboliii ierburilor i tufelor, solul devenind srac n azot, ceea ce duce la eliminarea unor plante dependente n creterea lor de prezena unor concentraii ridicate de azot. Dup defriarea terenului forestier se poate ajunge prin succesiune primar din nou la stadiul de pdure. Noii imigrani forestieri provin din pduri vecine, ce au rmas intacte. Tierea masiv a lemnului din pdure a fost urmat de scderea concentraiei 26
de nutrieni i a biomasei de artropode, de creterea numrului de indivizi la afide i furnici din stratul de tufri i, n final, de reducerea volumului proceselor biogeochimice interne. Pe suprafaa solului i la adncimea de 5 cm numrul de indivizi al microartropodelor se reduce, dar la adncime de 55 cm, numrul acestora este din nou crescut. Tierea pldurii a produs ntr-un pinet din sudul Finlandei o cretere efemer a biomasei faunei din sol, mai ales datorit creterii numerice a lumbricidelor i enchitreidelor. Dup defriare, pe locul pdurilor montane de pin se desfoar paralel cu succesiunea vegetaiei o succesiune secundar a gastropodelor i insectelor epigee; succesiunea apterigotelor, acarienilor i oligochetelor este corelat cu dezvoltarea solului. Anumite specii de arbori, formeaz pe terenurile defriate stadii de arboret premergtor pdurii; acesta este cazul lui Prunus spinosus. Dezvoltarea faunei edafice este strns corelat cu formarea solului. Dezvoltarea solului se desfoar n conexiune cu succesiunea covorului vegetal, pn la atingerea unui echilibru ntre mineralizare i PPN (Producia Primar Net). Numrul de indivizi de colembole crete de la poieni (12.000 exemplare.m-2) pn la pinete (45.000 exemplare.m-2). Fauna edafic influeneaz structurarea solului, formarea de humus i tipul de sol, stimulnd desfurarea succesiunii vegetaiei. Densitatea de activitate a faunei edafice corespunde cu stadiul de succesiune a vegetaiei. n Carpaii din Ucraina s-a observat un anumit fond de stafilinide corespunztor cu fiecare stadiu al succesiunii. n sol succesiunile cuprind att microflora ct i microfauna. Terenul denudat este colonizat mai nti de un val primar de bacterii (mai ales cu specii de Bacillus i de Pseudomonas). Al doilea val de microorganisme este alctuit din forme care se multiplic pe cheltuiala materiei organicc aflat n putrefacie n soluri bogate n humus. Prbuirea biocenozelor este cauzat adeseori i de om. Pe terenuri industriale biocenozele sunt eliminate. O repopulare primar ncepe abia atunci cnd unitatea industrial i nceteaz activitatea. Un exemplu: cariere de caolin abandonate nu sunt imediat invadate de vegetaie, deoarece solul nud este srac n nutrieni i nepotrivit pentru creterea plantelor. n Cornwall (Marea Britanie), tufriul i arbutii au aprut pe un asemenea teren denudat abia dup 25-55 ani. n decursul succesiunii au crescut permanent masa de detritus i coninutul de azot din sol. Factorul tipic a fost aici ciclul local de azot. Cariera de caolin a fost asimilat de pduri dup 120 de ani. Succesiuni tehnogene sunt declanate i de deeuri industriale. Eutrofizarea lacurilor cauzeaz prefaceri profunde n ecosistemele de ap dulce. Exemple: n Finlanda creterea ncrcturii industriale a unui lac a provocat o succesiune secundar n decurs de 50 ani de la un lac oligotrof la unul eutrof. n praie de munte, unde a avut loc eutrofizarea apelor prin scurgeri ale unor ape impurificate, a avut loc succesiunea combinaiilor de diatomee. Refacerea ecosistemelor acvatice dup inundarea lor cu ape impurificate se realizeaz prin imigrri de faun din ape nepoluate i din microorganismele de pe fundul apelor. Agricultura ncearc s dirijeze i s accelereze succesiunile de pe terenurile agrare. Reacia biocenozei fa de ameliorarea solului i tratamentele cu pesticide depinde de proprietile fiziologice ale speciilor i nu este ntotdeauna pozitiv. ncrctura grea a solului cu substane organice duce la scderea diversitii ecologice, la unilateralitate n compoziia faunistic i la creterea numeric excesiv a indivizilor unor specii. Soluri intoxicate cu pesticide se transform repede n terenuri abiotice sau cel puin n biotopuri srace n specii. n dealurile cu vii din Germania depoluarea parcelelor intoxicate ncepe n mai, cnd sunt invadate de 27
specii hemiedafice i continu pn n noiembrie, cnd se atinge un maxim de specii tipic edafice . Dar colembolele reprezentate prin puine specii ating numr ridicat de indivizi tocmai n parcelele total intoxicate. Reorganizri tehnogene ale landaftului cauzeaz succesiuni de lung durat, n special construciile de baraje i de canale. Lacurile de baraj transform un curs de ap curgtoare ntr-un bazin de ap stagnant. De aici rezult prefaceri profunde, nlocuirea biocenozelor reofile cu biocenoze psamofile (ataate de nisipuri). n lacuri de baraj de pe fluvii de cmpie n URSS, succesiunea tehnogen a durat circa 3 ani i a cuprins trei stadii: n primul stadiu s-a produs prbuirea biocenozelor fluviatile. n al doilea stadiu se formeaz biocenoze trectoare n care apar specii de nevertebrate imigrate: chironomide n bentos, radiolari i microcrustacei n plancton. Structura trofodinamic a biocenozei se bazeaz pe exploatarea detritusului organic abundent n lac, ce provine din distrugerea fitomasei scufundate. n cel de-al treilea stadiu se reduce biomasa zoobentosului, iar n zooplancton se constituie conexiunile biocenotice. Cianobacteriile se dezvolt masiv ca fenomen de "nflorirea apei". Numrul de indivizi i biomasa anumitor grupe de animale cresc mereu n decursul succesiunii. n lacurile de baraj din apele de munte ale Serbiei, succesiunea a decurs de asemenea timp de 3 ani, n trei stadii : n primul stadiu au fost distruse total biocenozele fluviatile i nlocuite n bentos prin colonizare srac cu oligochete. n al doilea stadiu s-a format biocenoza caracterizat prin Chironomus plumosus , iar n cel de al treilea stadiu s-a format o biocenoz stabil de oligochete. Fitoplanctonul s-a dezvoltat de asemenea n trei stadii: regresiunea numrului de indivizi n primul stadiu, atingerea maximei diversiti ecologice n cel de-al doilea i stabilizarea biocenotic n cel de-al treilea stadiu. n marile lacuri de baraj din fluviile tropicale succesiunile decurg cu totul altfel dect la latitudinile cu climat temperat, fiindc la tropice, vegetaia terestr inundat este mai repede degradat. De aceea, deja n cursul umplerii bazinului cu ap, n apele lacului ajung mari cantiti de substante minerale. De aici rezult "nfloriri ale apelor" i suprapunere n timp a biocenozelor trectoare i a celor stabile. Din cauza metabolismului rapid al bacteriilor de pe substratul lacului de baraj Kariba de pe Zambezi se acumuleaz doar foarte puin ml. De aceea, dup biocenoza trectoare edificat de chironomide nu urmeaz o bioceenoz de oligochete, ci o biocenoz a larvelor de diptere (Povilla adusta). n canale ce leag ntre ele bazine maritime, succesiunile se desfoar extrem de lent. Astfel, prin canalul Suez, inaugurat n 1869 a avut loc o migraie foarte nceat ntr-un sens unic a faunei din Marea Roie spre M. Mediteran. n 1924, n lacurile amare ultrahaline de pe traseul canalului biocenozele erau deja stabilizate (Stugren, 1994). STABILIZAREA ECOSISTEMULUI
Ecogenezele i succesiunile conduc de obicei la stabilizarea ecosistemului, fenomen exprimat n mersul general al ecogenezei i n conceptul de climax. Mersul general al ecogenezei i succesiunilor Dup teoria clasic numrul de specii, biomasa global, diversitatea ecologic i structurarea biocenotic cresc permanent n decursul succesiunii. Astfe, este procesul dezvoltrii pdurii de la structuri simple la structuri complexe. Diversele subsisteme, componente i compartimente ale pdurii au ns viteze diferite de dezvoltare. Aceasta se observ i n ape continentale i n ape marine. 28
Exemplu: Dup trei ani, ntr-un microecosistem acvatic experimental, starea biologic i chimic au rmas n esen nemodificate; biomasa algelor a manifestat tendina spre starea staionar, iar compartimentul algofag (Daphnia magna) a rmas constant, ns compartimentul descompuniltor a atins o nalt raie a metabolismului. Relaiile succesiunii cu diversitatea. n unele ecosisteme este clar vizibil tendina spre creterea numrului de specii, a echitii si diversitii. n decursul formrii pdurilor tropicale, numrul de specii crete, dar nu cu vitez mult mai mare dect n zona de climat temperat. Colonizarea secundar a recifilor artificiali (diguri n port) din Marea Roie a atins dup 11 ani un stadiu de nalt diversitate ecologic, dar abia dup moartea coralierilor recifali. Comuniti vegetale nou formate prezint o diversitate inferioar, fiind foarte sensibile fa de fluctuaiile factorilor abiogeni. Diversitatea maxim corespunde cu faza de maturitate. Dar diveri factori biogeni pot reduce puternic diversitatea. - n zona munilor nali din Pirinei, animalele erbivore modific diversitatea vegetaiei, favoriznd specii ca tpoica (Nardus stricta); o specie de piu, anume Festuca eskia elimin, tot n pajitiIe din Pirinei, alte plante ierbacee i reduce astfel diversitatea. - n ecosistemele marine, numrul de specii crete n decursul succesiunii, pentru ca apoi s scad, iar n stadiul final s se ajung la oscilaii. Spre deosebire de ecosistemele terestre, unde valorile maxime ale biomasei coincid cu cea mai nalt stabilitate, n ecosistemele marine sunt produse biomase enorme pe fundul mrii n condiii de instabilitate. Producia i biomasa cresc n timpul succesiuni lor n general, dar nu ca o funcie liniar. De exemplu, la tropice mrimea PPN crete repede, dar imediat ce s-a atins stabilizarea ecosistemului, creterea devine mai lent. Dup modelul Whittaker, o pdure atinge abia n condiii de stare stationar nivelul maxim de biomas. Dar n pdurile de foioase din estul SUA, biomasa maxim se atinge deja de la nceputul succesiunii dup tierea pdurii, ca dup aceea biomasa s scad, atingnd n stadiul final nc o culme, dar mai joas. n decursul succesiunii, structura biochimic a ecosistemului devine nchis i stabil. Acumularea toxinelor n biotop poate mpiedica imigrarea de specii noi i determina faze de dezvoltare unilateral . Din perspectiv energetic succesiunea const dintr-un ir de procese ireversibile, care conduc spre o stare staionar. Biocenoza tinde spre starea de consum energetic minim. Productia de entropie devine minim i constant n timp, dar informaia dimpotriv crete (Stugren, 1994). CONCEPTUL DE CLIMAX Conform teoriei clasice a succesiunilor, biocenozele tind spre un stadiu final ce se pstreaz durabil fr transformri esentiale. Acest stadiu se numete comunitatea final sau climax (gr. klimax=punct culminant) atunci cnd are loc corespondena vegetaiei cu macroclima. Asemenea comunitti sunt rare n Europa, mai ales n Europa central, unde nc din epoca marii defriri (evul mediu timpuriu) landaftul a fost modificat i controlat de om. Cteva comuniti de tip climax, n rsritul Europei, sunt : sunt unii codrii de fag din Carpai, Pdurea Bialovieja din Polonia i Bielarus, pdurile de stejar de pe grindurile fluvio-maritime ale Deltei Dunrii. Comuniti de tip climax sunt : tundrele arctice i pdurile de conifere (taiga) euro-siberiene i nord-americane, unele pduri pluviale de la tropice i recifii de coralieri. n pelagial nu se atinge stadiul de climax, din cauza turbulenei valurilor. 29
Petii erbivori mpiedic colmatarea fluviilor, astfel biocenozele fluviatile ating numai un stadiu de preclimax. Climaxul este numit monoclimax sau climax climatic, n comuniti vegetale stabile i echilibrate, bazat pe armonizarea vegetaiei cu macrocIima. Cnd combinaia de specii vegetale corespunde cu clima, climaxul poate s dureze timp de secole sau milenii. Vegetaia trebuie s fie corespunztoare i cu tipul de sol. Conceptul de policlimax, formulat de Du Rietz n 1930 exprim corespondena vegetaiei cu macroclima i cu tipul de sol. O biocenoz stabil este ntemeiat i pe conexiunea constant ntre plante i animale. Teoria configuraiei climaxului ("climax pattern theory") include i fauna n aprecierea climaxului. Conceptul ecologic de climax consider adaptarea reciproc a populaiilor vegetale i animale n cadrul structurii biocenotice a ecosistemului. Climaxul se ntemeiaz pe existenta unor specii cu durat lung de via individual, fiind i rezultatul optimizrii structurii ecosistemului. n practic, climaxuI este edificat de cteva specii vegetale de succes n "lupta pentru existent". O specie poate apare n anumite condiii ca pionier, iar n altele ca edificator de climax. n Alpii Scandinaviei, mesteacnul (Betula), edific o pdure de climax i supravieuiete n condiii meteorologice extreme prin reproducerea vegetativ. Dar n ani cu climat mai blnd, mesteacnul devine plant-pionier i asimileaz rapid, prin mprtiere de semine, teritorii noi. Un alt aspect al teoriei climaxului este convergena direciilor de dezvoltare ale diverselor biocenoze ntr-o arie geomorfologic i climatic unitar. n ecosisteme cu configuraii analoage se desfoar succesiuni asemntoare repetabile (Stugren, 1994).
BIBLIOGRAFIE: Arini Ioana, D.Cristescu, 2006. Biologie animal i vegetal. Colecia Metodica activ, Ed. Paralela 45, Piteti. Dgan-Bularda M., Samuel Alina Dora, 2006. Microbiologie general. Ed. Universitii din Oradea. Cristea,V., Simone Denaeyer,2004.De la biodiversitate la OGM-uri? Colectia Universitas, Biologie, Ed. Eikon, Cluj Stugren Bogdan, 1982. Bazele ecologiei generale. Ed.tiinific i enciclopedic, Bucureti. Stugren Bogdan, 1994. Ecologie teoretic. Ed. Sarmis, Cluj Napoca. Shleanu Victor,1973. Eseu de biologie informaional. Ed. tiinific, Bucureti.
30
MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, ISBN 978-606-92028-4-5. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
2. ELEMENTE DE BIOCHIMIE
CUPRINS: 2.1. NOIUNI INTRODUCTIVE. ......................................................................................31 Obiectul i caracterul interdisciplinar al biochimiei 2.2. COMPOZIIA CHIMIC GENERAL A ORGANISMELOR VII........................33 Bioelemente Biomolecule. Biomoleculele anorganice. Biomolecule organice Legturile chimice ale biomoleculelor. Legtura covalent. Legtura coordinativ. Legtura electrovalent (ionic). Fore ioni-dipoli i dipoli-dipoli. Legtura de hidrogen. Fore Van der Waals. Apa ca solvent i mediu de reacie. pH i soluii tampon. Mecanismul de aciune al soluiilor tampon 2.3. STRUCTURA I CONFIGURAIA BIOMOLECULELOR ORGANICE.............44 2.3.1. Configuraa compuilor organici: formule structurale 2.3.2. Grupri funcionale n biomolecule 2.3.3. Compui ciclici: compui carbociclici (izociclici), aromatici, heterociclici. 2.3.4. Structura general a biomacromoleculelor Izomeria de structur. Izomeria spaial. 2.3.5. Tipuri de reacii biochimice. 2.4. GLUCIDE.......................................................................................................................64 2.4.1. Constituie chimic. Clasificare. Rolul n organismele vii. 2.4.2. Monoglucide. Structura i izomeria monoglucidelor. Configuraia monoglucidelor. Monoglucidele naturale: Pentoze, Hexoze, Deoxiglucide, Aminoglucide. 2.4.3. Oligoglucide. Diglucide: Maltoza. Celobioza. Lactoza. Zaharoza sau sucroza. 2.4.4. Poliglucide. Proprietile poliglucidelor. Clasificarea poliglucidelor. Poliglucide omogene Hexozani (amidonul, glicogenul i celuloza). Poliglucide neomogenePoliglucide neomogene fr acizi uronici. Poliglucide neomogene cu acizi uronici din regnul vegetal. Poliglucide neomogene cu acizi uronici din regnul animal: Mucopoliglucide acide.Mucopoliglucide neutre. 2.5. LIPIDELE......................................................................................................................86 2.5.1. Consideraii generale. Constituia chimic i clasificare. Rolul lipidelor n organismele animalelor. 2.5.2. Constituentii de baza ai lipidelor 2.5.2.1. Acizii grai. Rolul acizilor grai nesaturai. Proprietile fizico-chimice ale acizilor grai. 2.5.2.2. Alcoolii constitueni ai lipidelor. Alcooli alifatici: Glicerolul. Alcoolii superiori, din ceride. Alcooli mono- sau polihidroxilici. Alcoolii ciclici: monociclicici - Inozitolul, policiclici - Sterolii. Aminoalcoolii: Colamina. Colina. Serina. Sfingozina. 2.5.3. LIPIDE SIMPLE. Gliceridele Rspndirea gliceridelor. Proprieti fizice i chimice. Importana fiziologic a gliceridelor. Steride. Steroli: Zoosterolii: colesterolul, lanosterolul. Fitosterolii: sitosterolul, stigmasterolul. Micosterolii-ergosterolul. Ceride. Cerurilor naturale vegetale, ceara de albine, lanolina i ceara de balen. Etolide. Cerurile unor conifere 2.5.4. LIPIDE COMPLEXE. Glicerofosfolipide. Glicerofosfolipide fr azot. Acizi fosfatidici. Cardiolipina. Inozitofosfatide. Glicerofosfolipide cu azot (cefaline, lecitine, serinfosfatide, plasmalogeni. Rolul glicerofosfolipidelor. Sfingolipide Sfingolipide care conin fosfor (sfingomieline). Sfingolipide care nu conin fosfor (glicolipide: cerebrozide, gangliozide i sulfatide).
31
2.6. PROTIDE....... .... .... .... .... ... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... .... ....108 2.6.1. Cons ideraii generale. 2.6.2. Compoziia chimic general i clasificarea protidelor. 2.6.3. AMINOACIZI 2.6.4. PEPTIDE I POLIPEPTIDE. Proprietile peptidelor. 2.6.5. PROTEIDE. Rolul proteidelor n organismele animale. Clasificarea proteidelor. 2.6.5.1. PROTEINE (HOLOPROTEIDE). Structura chimic. Structura proteinelor. Proprietile proteinelor. Proprietile fizico-chimice. Solubilitatea. Activitatea optic. Denaturarea.Proprietile chimice. Hidroliza. Reacii de culoare. Reacii de precipitare.Precipitarea reversibil. Precipitarea ireversibil. Coagularea. Proprietile biochimice. Descrierea unor tipuri de proteine. Proteine solubile (albumine, globuline, histone, protamine, prolamine, gluteline) Proteine insolubile (colagenele, keratinele, elastinele,fibroina,miozina, fibrinogenul) 2.6.5.2. HETEROPROTEIDE (PROTEINE CONJUGATE). Metalproteide. Fosfoproteide. Glicoproteide. Cromoproteide. Cromoproteide porfirinice (Hemoglobina. Mioglobina. Citocromii. Hemenzimele. Cloroplastidele clorofila). Nucleoproteide. Acizi nucleici. Baze azotate pirimidinice (uracilul -U, timina -T, citozina -C). Baze azotate purinice (adenina - A, guanina - G) Nucleozide. Nucleotide. Ribonucleotide. Dezoxiribonucleotide Structura macromolecular a acizilor nucleici. Structura i proprietile acizilor deoxiribonucleici. Structura i proprietile acizilor ribonucleici. ARN ribozomal, ARN mesager, ARN de transfer.
2.1. NOIUNI INTRODUCTIVE Disciplina de Biochimie are un caracter teoretic i aplicativ, interdisciplinar. Cursul are ca obiectiv general acumularea bazei de cunotine de biochimie necesare pentru nelegerea i aplicarea metodele de evaluare i de management integrat de mediu, precum i dobndirea cunotinelor asupra metodelor de depoluare biologic a mediului degradat, de bioremediere n sistemele biotehnice i ecologice, n ecosistemele naturale sau antropizate, pentru planificarea i realizarea activitilor de protecia, conservarea i remedierea calitii mediului, utile specialitilor din domeniul proteciei mediului, n contextul asigurrii dezvoltrii durabile a vieii pe Pmnt. Obiectivele cursului: nsuirea cunotinelor teoretice i practice de biochimie, cunotiinte despre clase de compui organici i bioorganici cu impact n poluarea mediului; cunotiinte despre depoluarea biologic prin degradri abiotice sau biotice, prin bioacumulare; aprofundarea cunoaterii proceselor de transformare ale poluanilor n timpul transportului prin mediu; nelegerea proceselor de bioremediere a mediului afectat de factori poluani sau distructivi, n ecosisteme; nsuirea metodelor i tehnicilor de depoluarea biologic i bioremediere environmental; dobndirea competenelor necesare pentru analiza i evaluarea cazurilor de poluare, ale disfuncionalitilor naturale sau antropice ale factorilor de mediu, pentru stabilirea tehnologiilor specifice de depoluare i bioremediere.
32
Definiia i obiectul biochimiei. Biochimia studiaz compoziia chimic a organismelor vii, structura i proprietile substanelor componente, i transformrile acestor biomolecule n interiorul organismelor vii. Biomoleculele sunt studiate de biochimia structural sau descriptiv, strns legat de chimia organic. Transformrile biomoleculelor n organismele vii constitute biochimia dinamic sau metabolismul. ntre organismele vegetale i animale exist numeroase deosebiri, care privesc n primul rnd grupele de substane i unele procese metabolice. Viaa animalelor este dependent de cea a plantelor, astfel nct ntre problemele biochimiei animale i al biochimiei vegetale exist interaciuni complexe. Definitia biochimiei: tiina care studiaz compoziia chimic, structura, proprietile i transformrile substanelor componente ale organismelor vii. Obiectul de studiu al biochimiei: Biochimia studiaz constituie chimic, structural-descriptiv biomolecule proprieti, componente: corelaii funcionale Biochimia Studiaz procesele de sinteza (anabolism) dinamic-metabolismul transformare ale biomoleculelor degradare (catabolism) Caracterul interdisciplinar al biochimiei. Biochimia este o tiin cu caracter interdisciplinar, avnd legturi strnse cu: -chimia organic, care asigur cunoaterea structurii i proprietilor biomoleculelor; -chimia analitic i chimia fizic, care asigur metodele de identificare, separare i caracterizare a biomoleculelor i de interpretare a reaciilor biochimice. Raporturile biochimiei cu disciplinele biologice rezult din natura substratului biologic pe care-l cerceteaz biochimia. Procesele biochimice se desfaoar la nivelul structurilor celulare, deci biochimia se interfereaz cu biologia molecular i cu morfologia privit sub aspectul chimiei elementelor structurale. Fiziologia reprezint nivelul superior de cunoatere a fenomenelor vieii pe baza structurilor funcionale, iar genetica modern, biochimic, a creat bazele codificrii mesajului ereditar, stabilind relaiile dintre acizii nucleici i biosinteza proteic, ca premiz a autoreproducerii organismelor vii. Cunoaterea proceselor biochimice care au loc la nivelul organismelor vii este indispensabil pentru dirijarea sau conservarea realizrii productivitii i sustenabilitii biosferei. Studiile asupra patologiei umane i animale, din fitopatologie, din biologia vegetal i animal pot fi concepute dect n corelaie cu biochimia. 2.2. COMPOZIIA CHIMIC GENERAL A ORGANISMELOR VII Organismele vii au luat natere din substane organice care s-au format din substane anorganice n anumite condiii favorabile unor astfel de transformri. Treptele evoluiei chimice spre materia vie Compoziia chimic Atmosfera primitiv CH4 , CO2 , CO, N2 , NH3 , H2 , H2 S , H2 O. Litosfer Oxizi metalici, fosfai, carbonai, carburi, metale libere, bioxid de siliciu Hidrosfer Ap, sruri alcaline, sruri de amoniu Substane Acid cianhidric, eten, acetilen, etan, radicali organici, intermediare formaldehid Substane biologice Alcooli, uree, acizi organici, aminoacizi, glucide, esteri intermediare fosforici, purine, pirimidine, nucleotide, compui heterociclici Substane biologice Peptide, albumine, acizi nucleici, poliglucide, lipide secundare
33
Pe parcursul procesului de evoluie a vieii pe Terra, au aprut organismele inferioare, apoi cele superioare, coninnd bioelementele - elementele chimice din materia anorganic. n plante, animale, fungi, bacterii se gsesc aceleai clase de substane organice i anorganice. Plantele verzi sunt organisme capabile s sintetizeze substanele organice din substane anorganice simple luate din aer sau din sol. Animalele se hrnesc cu plante i astfel materia organic vegetal se transform n componeni organici specifici organismului animal. Dup moartea lor, plantele i animalele ajung n sol, unde materia organic sufer descompuneri chimice i biochimice, cauzate de ctre microorganisme, constnd n mineralizarea materiei organice, cu obinerea de substane anorganice. n funcie de condiiile fizico-chimice din sol, precum i de natura substanelor organice, procesul de mineralizare se poate petrece rapid sau lent. Substanele anorganice gazoase trec n atmosfer, iar cele solide rmn n sol constituind substane nutritive pentru noile generaii de plante i animale. Compoziia chimic general a organismelor vii Nemetale Bioelemente Plastice Metale Oligoelemente Nemetale Metale Apa Biomolecule Anorganice Sruri minerale Organice Rol plastic i energetic Rol catalitic Rol informaional Bioelemente Din cele cca. 100 elemente chimice ntlnite n litosfer i atmosfer, un numr relativ mic particip la alctuirea materiei vii. Acestea se numesc bioelemente. Dei numrul bioelementelor se ridic la 50, distribuia lor este foarte diferit. Compoziia chimic elementar a organismelor vii Bioelemente Plastice Nemetale: C, O, H, N, S, P, Cl Metale: Na, K, Ca, Mg Oligoelemente Fe, Co, Mn, Cu, Zn, Mo, I, Br, F, B Elementele care se gsese n cantitate mai mare n organismele vii sunt numite i bioelemente plastice sau macrobioelemente, ele reprezentnd 99% din totalul bioelementelor. Ele includ nemetalele: oxigen, carbon, hidrogen, azot, fosfor, sulf, clor i metalele : calciu, magneziu, sodiu i potasiu. Acestea reprezint componenii principali care particip la edificarea structurilor diferitelor substane din organism. Dintre bioelementele plastice: O, C, H, N reprezint 96 % din masa celulelor. Elementele plastice ale materiel vii (%) NEMETALE % METALE % 0xigen O 63,0 Calciu Ca 1,50 Carbon C 20,0 Potasiu K 0,25 Hidrogen H 10,0 Sodiu Na 0,26 Azot N 3,0 Magneziu Mg 0,04 Fosfor P 1,0 Sulf S 0,2 Clor Cl 0,2 TOTAL 99,45
34
Oligoelementele (microelementele) se gsesc n cantiti extrem de mici, sub 0,01 %, sau chiar n urme i sunt inegal rspndite n diferite esuturi. Din categoria microelementelor notm: florul (F). bromul (Br), iodul (I), borul (B), fierul (F) zincul (Zn), cuprul (Cu), cobaltul (Co), molibdenul (Mo), vanadiul (V), manganul (Mn). Ele nu particip efectiv la constituia celulelor, ns dein un rol important, intrnd n constituia chimic a unor biomolecule ca enzime: (Zn, Co, Mn, Cu), hormonii (I), vitamine (Co), hemoglobin (Fe). Lipsa acestora din organismul animal produce anumite dereglri biochimice i tulburri fiziologice. La alctuirea materiei vii particip cu preponderen elemente cu masa atomic mic (H, C, N, O). Dintre acestea atomul de carbon prezint o poziie deosebit. Biomoleculele organice conin n mod obligatoriu atomi de carbon pe care sunt grefai ceilali atomi sau grupri de atomi. Atomul de carbon prezint o serie de proprieti eseniale pentru chimia organismelor vii i anume: - atomii de carbon au capacitatea de a se uni ntre ei prin legturi covalente stabile, rezultnd lanuri (catene) de atomi de dimensiuni i structuri diferite; - atomul de carbon este tetravalent, avnd o configuraie tetraedic, ceea ce confer posibilitatea ca diferite tipuri de molecule organice s formeze reele tridimensionale; - atomii de carbon formeaz uor legturi covalente cu atomii de oxigen, azot, hidrogen i sulf, formndu-se astfel biomolecule cu structuri foarte variate; - spre deosebire de compuii anorganici ai carbonului care sunt n stare oxidat (carbonai, bicarbonai), compuii carbonului din organismele vii se gsesc n stare redus (grad nalt de hidrogenare). Aceti compui sunt bogai n energia necesar proceselor vitale din organismele vii. Biomolecule. Compoziia biochimic a organimelor vii Biomoleculele sunt n majoritatea lor substane organice din grupa glucidelor, protidelor ,lipidelor i anorganice, ca apa i diferite sruri minerale . n cantitate mai mic se gsesc i alte substane organice dar varietatea acestora este mult mai mare n plante dect n animale. n organismele animale predomin protidele i lipidele, pe cnd n plante predomin glucidele. Compoziia biochimic general a organismelor vii Componeni anorganici APA SRURI ANIONI: PO43 - , Cl -, CO32 - , SO42 - , I -. CATIONI:Ca2+, Na+, K+ , Mg2+, Fe2+, Zn2+. Componeni organici GLUCIDE LIPIDE ROL PLASTIC I ENERGETIC PROTIDE VITAMINE ROL DE REGLARE ENZIME HORMONI ROL CATALITIC ENZIME ROL INFORMAIONAL ACIZI NUCLEICI ROL ENERGETIC COMPUI MACROERGICI
35
Biomoleculele anorganice Apa este substana anorganic indispensabil vieii tuturor organismelor vii. Ea reprezint aproximativ 60% din masa corporal a animalelor. Continutul n ap variaz n limite destul de restrnse pentru diferite specii, ns coninutul acesteia n diferite organe i esuturi variaz n limite foarte largi. n ceea ce privete distribuia apei n organismele animale se disting dou compartimente: 1. - compartimentul intracelular cuprinde apa de constituie (legat). Aceasta ia parte la constituia celulelor, la imbibiia sistemelor coloidale i la hidratarea diferiilor ioni sau molecule din interiorul celulei; 2. compartimentul extracelular cuprinde apa liber. Aceasta este prezent n snge i n lichidul lacunar (lichid interstiial i limf). Originea apei n organism poate s fie exogen provenind din alimentaie sau endogen provenind n urma reaciilor de oxidare de la nivelul celulei. Cantitatea de ap din organismul animal este strict reglat, excesul fiind eliminat prin urin, fecale, transpiraie. Distributia cantitativa a principalelor componente anorganice i organice la diferite specii de animale (valori procentuale) Specia Protide Lipide Glucide Ap Sruri minerale Taurine 16,8 17,2 1,7 60,4 3,9 Suine 15,0 23,0 1,2 58,0 2,8 Ovine 16,0 19,0 1,6 60,0 3,4 Cabaline 17,0 16,7 1,8 60,0 4,5 Psri 21,0 18,2 1,6 56,0 3,2 Srurile minerale. Corpul animalelor conine 3-5% substane minerale dintre care 4/5 se gsesc n schelet, iar restul n muchi i n celelalte esuturi. Srurile minerale sunt reprezentate de cloruri, fosfai, azotai, carbonati de sodiu, potasiu, calciu, magneziu. Srurile solubile se gsesc fie dizolvate n lichidele biologice i n mediul apos al celulei, fie combinate cu proteinele din citoplasm. Srurile insolubile sunt prezente n schelet i n dini. Ionii provenii prin disocierea srurilor se pot adsorbi pe suprafaa micelelor coloidale determinnd ncrcarea electrie a acestora sau intervin ntr-o serie de reacii biochimice . Unii ioni intervin n reglarea presiunii osmotice i n permeabilitatea celular. 0 serie de sruri solubile funcioneaz ca sisteme tampon contribuind la meninerea i reglarea echilibrului acido-bazic. Prezena unor ioni este indispensabil pentru activitatea unor enzime sau hormoni. Repartiia procentual a componentelor anorganice i organice n esuturi animale Tesut Protide Lipide Glucide Apa Sruri minerale Muchi 22 5 0,6 71,4 1,0 Ficat 22 3 2,0 71 2,0 Creier 25 14 0,2 74 1,7 Piele 10 7 Urme 67 0,6 Os 19 25 Urme 26 29,8 Snge 18 1 0,1 80 0,8 Srurile insolubile aflate n scheletul osos alturi de osein (scleroproteid) Fosfat tricalcic 85% Florur de calciu 0,3 % Carbonat de calciu 10% Clorura de calciu 0,2 % Fosfat de magneziu 1,5% Alte sruri 3,0 % Biomolecule organice, care intra n alctuirea organismelor animale reprezint 3540% din masa acestora. Principalele categorii de biomolecule sunt protidele, lipidele, glucidele, acizii nucleici, enzimele, vitaminele, hormonii, compuii macroergici etc.
36
Cantitatea acestora variaz n funcie de specie i mai ales n funcie de tesutul analizat Biomoleculele organice ndeplinese n organismele animale diferite roluri i anume: - protidele, lipidele i unele glucide ndeplinesc rol plastic (structural) deoarece particip la alctuirea edificiului celular, a membranelor celulare i formaiunilor subcelulare; - enzimele au rol catalitic, participnd la reglarea reaciilor biochimice necesare activitii organismelor vii, fcnd posibil desfurarea acestora n condiii compatibile cu viaa; - glucidele i lipidele ndeplinesc rol energetic, deoarece fiind supuse unor procese de degradare elibereaz energia necesar funciilor vitale ale celulei; energia eliberat poate fi stocat sub form de energie chimic n anumite molecule (substane macroergice); - acizii nucleici ndeplinesc rol informaional prin stocarea, transmiterea i exprimarea informaiei ereditare; - vitaminele i hormonii ndeplinesc rol de reglare a diferitelor procese biochimice. Biomoleculele n funcie de gradul lor de complexitate se mpart n: - precursori chimici, care au molecule simple, mas molecular mic, iar prin diferite procese biochimice se transform n biomolecule. Acetia sunt: CO2, NH3, H2O, O2; - metabolii intermediari , ce rezult n urma proceselor metabolite, sunt biomolecule cu masa molecular mic (30-150):acid acetic,acid lactic,acid propionic,glicerol,baze azotate; -componente moleculare de baz (aminoacizi, monoglucide, acizi grai, mononucleotide) reprezint biomolecule cu mas molecular mai mare dect a metaboliilor intermediari; -biomacromoleculele sunt molecule gigant (proteine, acizi nucleici; poliglucide, complexe lipidice ), din policondensarea de componente cu structuri simple (M = 103 -109); - complexe supramoleculare (complexe enzimatice, nucleoproteide, ribozomi, etc.), provenind din asocierea macromoleculelor (M = 106 -109). Prin ansamblarea acestor complexe rezult formaiuni intracelulare (nucleu, mitocondrii, lizozomi etc.).
Legturile chimice ale biomoleculelor. Proprietile biomoleculelor depind de natura atomilor care le alctuiesc, de modul cum acetia sunt legai ntre ei precum i de influenele reciproce ale unui atom asupra altuia. Cunoaterea naturii legturilor chimice a fost posibil datorit teoriei electronice moderne i a mecanicii cuantice. Legtura chimic exprim fora care leag atomii sau gruprile de atomi ntr-o molecul. Funcionarea sistemelor biochimice implic existena unor tipuri variate de legturi chimice ntre elementele ce formeaz diferii compui chimici. Elementele chimice nu pot exista n stare liber n natur (cu excepia gazelor rare), ele tind s-i stabileasc o configuraie electronic stabil (dublet sau octet). Legturile chimice care se ntlnesc n biomolecule sunt legturi covalente, coordinative i electrovalente. De asemenea, se pot stabili i interaciuni ntre biomolecule, reprezentate de legturile de hidrogen i forele Van der Waals.
37
Legtura covalent. Legtura covalent este o legtur foarte puternic i este ntlnit n toate biomoleculele. Conform teoriei electronice, o legtur covalent ia natere prin participarea a doi electroni, cte unul de la fiecare din atomii care pot form a o legtur covalent. Se realizeaz astfel o configuraie electronic stabil (dublet sau octet). Perechea de electroni aparine ambilor atomi legai prin covalen. Astfel, doi atomi de clor monovaleni se leag printr-o covalen formnd molecula de clor stabil. :Cl + Cl: : Cl : Cl : Cl Cl sau Cl2 Doi atomi de hidrogen formeaz H2. H + H H:H
H H sau H2
Acestea sunt legturi covalente simple. Dar atomii i pot pune n comun i dou sau trei perechi de electroni, rezultnd legturi covalente duble sau triple.
O: + :O
O: :O
O=O N N
sau sau
O2 N2
N: + :N
N: :N
Prin puncte s-au notat electronii stratului de valen, care corespund cu numrul grupei din sistemului periodic n care se gsete elementul. Legturi covalente se pot forma i ntre atomi diferii:
H Cl
H:O:H
H:C : H
:N:H
H H Dac diferenele de electronegativitate ale atomilor participani la legtura covalent este nesemnificativ, (ca i n cazul moleculei de CH4, i NH 3) legtura este nepolar. Dac aceast diferen exist, legtura va fi polar, ntruct perechea de electroni a legturii va fi atras de atomul mai electronegativ, fiind mai apropiat de acesta. n acest fel, atomul mai electronegativ va primi o sarcin parial negativ (devenind polul negativ al moleculei), n timp ce atomul mai puin electronegativ, va avea o sarcin parial pozitiv (polul pozitiv). Acest tip de legtur se ntlnete n molecula de ap (polul negativ fiind atomul de oxigen, iar cel pozitiv, atomul de hidrogen), acid clorhidric (cu polul negativ la atomul de clor) etc.
Legtura coordinativ. Se formeaz cu ajutorul perechilor de electroni neparticipani ale unui atom (N, O, S ) numit atom central dintr-un compus. Ea este o variant a legturii covalente i se realizeaz prin cedarea acestei perechi de electroni de ctre un atom (donor) unui alt atom care accept cei doi electroni (acceptor ). Ea se noteaz printr-o sgeat ndreptat de la donor la acceptor. Exist molecule n care unul dintre atomi posed o pereche de electroni neparticipani:
38
H HN: H
HOH
pereche de electroni neparticipani Aceasta poate fi implicat n formarea unei noi legturi chimice cu un atom cu deficit de electroni. Unul dintre atomi (donorul) va "dona" perechea de electroni necesari legturii , cellalt atom (acceptorul) va accepta aceast pereche. Legtura nou format se numete coordinativ, se noteaz cu o sgeat orientat de la donor la acceptor. Legtura coordinativ poate fi ntlnit n unii ioni: NH+4(amoniu);H3 O+ (hidroniu), molecule:H3 PO- 4 etc. Ionul de amoniu, NH4, s-a format prin reacia amoniacului cu acizii(HCl). Prin unirea amoniacului cu acidul clorhidric se formeaz clorura de amoniu. Acidul clorhidric cedeaz un proton atomului de azot, formndu-se ion de amoniu.
H | HN | H
+ H
+
OH
HO
| HO P OH
H : N:
H : Cl:
H : N:
: Cl:
De asemenea, legturile coordinative dintre moleculele donoare i acceptoare de electroni stau la baza unei clase de compui numite coordinative sau complexe. Atomul de carbon neavnd electroni neparticipatii nu formeaz legturi coordinative ceea ce explic marea stabilitate a compuilor carbonului. Legtura electrovalent (ionic) se realizeaz prin atractia electrostatic dintre ionii de semn contrar. Un ion este o specie de atomi care a cedat electroni, transformndu-se astfel n ion pozitiv (cation) sau a acceptat electroni , transformndu-se n ion negativ (anion).
39
Prin cedare sau acceptare de electroni, atomii vor avea o configuraie stabil de dublet (mai rar) sau de octet. Na - 1 e
Na +
:Cl
+ 1e
: Cl :
Na + + Cl Ca :
- 2 e
Na + Cl Ca 2
:O
+ 2 e
: O:
Ca 2 + O 2
Ca 2 O 2
Elementele care au tendina de-a ceda electroni sunt metalele, n timp ce nemetalele accept electroni. Numrul de electroni cedai de un metal este egal cu numrul de electroni acceptai de nemetal este egal cu diferena dintre opt i numrul grupei. Legtura ionic este ntlnit n sruri, oxizi metalici, hidroxizi, etc. precum i n structura unor proteine. Fore ioni-dipoli i dipoli-dipoli. Sunt fore de atracie slabe, care se dezvolt ntre ioni i molecule polare sau ntre molecule polare , fore de natur electrostatic. Forele ion-dipoli intervin la dizolvarea substanelor ionice n ap sau ali solveni polari, dizolvarea constnd n formare legturi ntre moleculele substanelor care se dizolv i cele ale solventului. Ionii vor trece n soluie nconjurai de ioni solvatai, (n cazul particular al apei: ioni hidratai). Numrul de molecule de solvent (ap) care se vor gsi n jurul fiecarui ion depinde de mrimea i structura acestuia. Legtura de hidrogen. Legtura de hidrogen este de natur electrostatic i se stablete ntre molecule coninnd atomi de H i molecule care au atomi puternic electronegativi: O, N, F. Legtura de hidrogen se noteaza cu puncte.
H O H H | | | H . O H O H
Ea este prezent ntre molecule de ap, de alcooli, de aminoacizi, moleculele de glucide, contribuind de asemenea la structura proteinelor i a acizilor nucleici. Legtura de H are ca rezultat formarea unor asociaii ntre aceste molecule. Astfel apa, poate fi mai corect reprezentat astfel: (H2O)n; iar alcooli: (R-OH)n etc. Toate substanele n care este prezent legtura de H, prezint anumite "anomalii" ale proprietii fizice (Pf, Pt, conductivitate termic) n comparaie cu substanele cu structur asemntoare, dar n care nu exist legtur de hidrogen. Astfel, O i S, elemente din grupa a VI-a a sistemului periodic, formeaz cele dou combinaii cu hidrogenul: H2O care prezint legturi de H i H2S, unde nu sunt prezente aceste legturi.
40
Pt Pf
H2O H2O
= 0 oC = 100 o C
Pt Pf
H2S H2S
= - 83 o C = - 60,2 o C
Existena legturilor de hidrogen determin o serie de proprieti deosebite ale apei: punctul de fierbere ridicat, cldura de evaporare mare, cldura specific ridicat. Aceste proprieti au anumite consecine pentru organism. Astfel, datorit cldurii specifice ridicate i a celei de evaporare, apa din organism se menine constant. Moleculele asociate prin legturi de H i care au starea de agregare lichid sunt solveni buni pentru compuii organici care conin gruprile funcionale: -OH; -COOH; -C=O, -NH2. Fore Van der Waals. Sunt cele mai slabe legturi intermoleculare. Sub denumirea de fore Van der Waals sunt incluse mai multe tipuri de interactiuni, dintre care cele mai importante forele de dispersie. Acestea sunt forele de atracie ntre molecule nepolare (H2, O2, N2, CH4, etc). Existena acestora are ca rezultat existena Pf i Pt foarte sczute ale acestor molecule. Acest tip de interaciuni se manifest i ntre radicalii nepolari de tip alchil ale resturilor de aminoacizi din componena unor proteine, contribuind la stabilirea structurii acestora.
P t O2 Pt H 2 P t N2 P t CH4
= = = =
Pf Pf Pf Pf
2.4. Apa ca solvent i mediu de reacie. Apa ndeplinete n organism mai multe roluri: - structural, participnd la constituia celulei i la formarea coloizilor celulari; - solvent pentru substane organice i anorganice; - mediu al reaciilor biochimice ce stau la baza vieii; - mediu de vehiculare a diferiilor metabolii n organism; - generator de ioni de H+ i HO- necesari pentru meninerea pH-ului la limite constante i pentru cataliza enzimatic; - participant direct a reaciilor de hidratare, hidroliz i de oxidare; - termoreglator pentru meninerea n limite normale a temperaturii organismului, prin procese de evaporare la nivelul pielii i prin transpiraie. Cantitatea de ap din organism este reglat metabolic prin dou mecanisme, care menin volumul constant al acesteia i anume: setea, care dicteaz o cretere a consumului de lichide i activitatea rinichilor, care conserv apa sau o elimin dup necesiti. pH i soluii tampon Noiunea de pH. Ionul de hidrogen H+ ocup o poziie special n mediile biologice (celule, snge, lichid interstiial), datarit faptului c reaciile biochimice care se petrec n condiii compatibile cu viaa, se desfoar n limite strict determinate ale concentraiei ionilor de hidrogen. Noiunea de pH introdus de ctre Sorensen, reprezint o mrime, prin care se poate caracteriza reacia acid, neutr sau bazic a unei soluii, respectiv a unui mediu biologic. pH-ul reflect deci aciditatea unei soluii, respectiv numrul de ioni de hidrogen existeni n stare liber. pH-ul este definit ca logaritmul zecimal cu semn schimbat al concentraiei ionilor de hidrogen: pH = - log [H+] La noiunea de pH s-a ajuns pornind de la disocierea ionic a apei. n condiii de puritate extrem, apa sufer fenomenul de disociere electrolitic, ntr-o proporie foarte redus, formnd ioni de H+ respectiv hidroniu (H3O+) i ioni de OH-. 41
H2O H+ + OH- sau 2H2O H3O+ + OHFiind un proces reversibil, se poate aplica legea aciunii maselor, constanta de echilibru a reactiei, K, fiind: + -
[ H ].[ OH ]
K = -------------------[ H2O]
Concentraia moleculelor de ap nedisociate este foarte mare n comparaie cu a celor disociate, i este practic constant. De aceea se poate ngloba n constanta de echilibru:
P H2O = [ H + ] . [ O H - ]
Pe baza determinrilor de conductibilitate electric a apei, s-a calculat valoarea PH2O care la temperatura de 22C este de 1.10-14 , deci: Apa pur fiind neutr, concentraiile de H+ i de OH- sunt egale.
PH2O =[ H + ] . [ O H - ] = 1 0 - 1 4
[ H + ] = [ O H - ] = 1 0 - 1 4 = 1 0 - 7 ioni gram / l
Dac n ap se introduce un acid (deci ioni de H + ) concentraia n H+ va crete, soluia va deveni acid iar pentru meninerea valorii constante a pH2O, trebuie s scad concentraia ionilor OH- . Dac n ap se introduce o baz, soluia va deveni cu att mai bazic, cu ct va fi mai mare concentraia n ioni OH -. n mod corespunztor, n soluie va scdea concentraria de ioni H + . Generaliznd, dac cunoatem concentratia ionilor de hidrogen dintr-o soluie cunoatem caracterul ei i anume:
pH-ul exprim aciditatea sau bazicitatea soluiilor. Scara pH-ului este cuprins ntre 0 i 14: O soluie acid are pH< 7, o soluie neutr are pH =7. iar soluia bazic are pH>7. Cu ct valoarea pH-ului este mai mic, cu att soluia este mai acid, iar cu ct pH-ul este mai mare, solutia este mai bazic. Cunoaterea pH-ului diferitelor lichide biologice prezint o importan deosebit pentru biochimie, fiziologie sau patologie, deoarece diferitele reacii b iochim ice din organismele vii se desfoar la un anumit pH (pH optim). De exemplu, pH-u1 sngelui este 7,2 (uor alcalin), pH-ul sucului gastric=1.52.5 (puternic acid), pH-ui salivei = 6.2. Modificarea pH-ului unor lichide biologice poate indica o anumit stare patologic, putnd contribui la precizarea unui diagnostic.
Soluii tampon. Reaciile biochimice din organismul animal se petrec la anumite valori ale pH-ului, care trebuie meninute la valori ct mai constante. Acest lucru este posibil datorit existenei sistemelor tampon. Soluiile tampon sunt amestecuri de electrolii, care au proprietatea de a menine pH-
42
ul constant la adugarea unor cantiti limitate de acizi sau baze, sau prin diluarea moderat. Proprietatea soluiilor tampon de a se opune modificrii pH-ului n aceste condiii se numete putere de tamponare. Exist diferite categorii de amestecuri tampon i anume: a) amestecuri de acizi slabi cu srurile acestor acizi cu baze tari; - exemple: acid acetic + acetat de sodiu - acid carbonic + bicarbonat de sodiu b) amesteeuri de baze slabe cu sruri ale acestor baze cu acizi tari : - hidroxid de amoniu + clorur de amoniu c) amestecuri de sruri primare i secundare ale unor acizi polibazici: - fosfat primar de sodiu + fosfat secundar de sodiu. Mecanismul de aciune al soluiilor tampon Mecanismul de aciune al amestecurilor tampon este urmtorul: Considerm soluia tampon format prin amestecul unui acid slab cu sarea sa cu o baz tare (CH3 COOH + CH3 COONa). Acidul slab este parial disociat, n timp ce baza este practic total disociat.. n soluie se adaug un acid tare, deei ioni de H+. Acetia se vor combina cu anionii srii (CH3COO-), formnd CH3COOH, foarte puin disociat: (CH3 COO- +H+ )+(CH3 COO- +Na+ )+(H+ +Cl - ) 2CH3 COOH+(Na++Cl -) Ionii de H+, care confer unei soluii caracterul acid, vor fi implicai n formarea CH3COOH puin disociat. Deci, soluia tampon, la adausul, unei cantiti moderate de acid tare, nu-i va modifica practic pH-ul. Dac n aceeai soluie se va aduga o baz tare, deci ioni de OH-, acetia vor forma apa, de asemenea extrem de puin disociat. (CH3 COO- +H+ )+(CH3 COO- +Na+ )+(Na+ +OH- )H2 O+2CH3 COO- +Na+ Prin urmare, adausul de baz tare ntr-o soluie tampon, nu va determina creterea semnificativ a pH-ului. Soluiile tampon sunt utilizate la prepararea unor soluii cu pH cunoscut sau pentru meninerea unui mediu de reacie n limite de pH cunoscute. Sistemele tampon ns joac un rol deosebit de important pentru organismele vii. Astfel, n organismul animal pH-ul diferitelor lichide biologice se menine n jurul unor valori constante, datorit unor sisteme tampon. n snge. acestea sunt urmtoarele: -acidul carbonic - bicarbonatul de sodiu; -fosfatul primar de Na - fosfatul secundar de Na; -protein - proteinatul de Na sau K; -hemoglobin - hemoglobinat de Na i K Rezerva alcalin. Principalul sistem tampon din snge l constituie acidul carbonic i bicarbonaii alcalini, care se gsesc n mod normal n raportul 1:20. Prin rezerv alcalin se nelege cantitatea de bicarbonai alcalini din snge. n cazuri patologice, aceasta poate crete (alcaloz) sau scdea (acidoz) datorit acumulrii de metabolii cu caracter alcalin, respectiv acid. n mod normal, rezerva alcalin este de 55-65 volume CO2 pentru brbai i 50-60 volume CO2 pentru femei. Valori crescute ale rezervei alcaline apar n cazuri de asfixie, emfizem, pneumonie, hran bogat n substane cu caractcr alcalin (legume) sau n cazul ingerrii unor medicamcnte cu caracter alcalin. Valori sczute ale rezervei alcaline se nregistreaz n caz de diabet, boli de rinichi, hiperaciditate gastric sau n regim alimentar bogat n carne.
43
2.3. STRUCTURA I CONFIGURAIA BIOMOLECULELOR ORGANICE 2.3.1. CONFIGURAIA STRUCTURALE COMPUILOR ORGANICI: FORMULE
Marea varietate a biomoleculelor apare ca urmare a capacitii atomilor de carbon tetravalenii de a se uni ntre ei, formnd lanuri numite catene sau datorit posibilitii legrii acestora cu ali atomi H, O, S, P, N. Compuii formai numai din C i H se numesc hidrocarburi. Toate celelalte substane organice deriv de la acestea, prin nlocuirea unuia sau mai multor atomi de hidrogen cu atomi sau grupri de atomi ce conin alte elemente (oxigen, azot, sulf). Aceti atomi sau grupri de atomi se numesc grupri funcionale i ele determin, n mare parte, reactivitatea i caracterul chimic al substanelor organice. Configuraia unei molecule reprezint aranjamentul spaial al atomtilor din molecul. Cele patru valene ale atomului de carbon sunt identice i dirijate dup vrfurile unui tetraedru regulat, n centrul cruia se gsete atomul de carbon. Cnd cele patru valene sunt satisfcute cu atomi sau grupri de atomi diferii, cele patru valene ale atomului de C sunt supuse unor fore inegale i n acest caz tetraedrul se deformeaz i devine asimetric. O astfel de deformare apare atunci cnd cele patru valene ale unui atom de carbon sunt satisfcute cu atomi sau grupri de atomi diferite. Acest atom se numete carbon asimetric. Prezena n molecula substanelor organice a unui carbon asimetric, imprim acesteia proprieti deosebite. Pentru reprezentarea configuraiei spaiale a unei molecule se pot ntrebuina modele n care atomii sunt reprezentai prin bile de diferite mrimi i culori, iar legturile dintre atomi prin bare. ntrebuinarea modelelor fiind limitat, s-a cutat o reprezentare n plan, ct mai apropiat de realitate, folosindu-se astfel dou modele : a.prin formule de proiecie (proiecia modelului spaial al moleculei pe planul hrtiei. De exemplu formula acidului lactic. b.prin formule de perspectiv n care scheletul moleculei este, privit dintr-o parte, iar partea mai apropiat a formulei, se deseneaz cu linii groase (exemplu: inozitolul).
Acid lactic
Aceast reprezentare este mult folosit n cazul compuilor naturali. Pentru reprezentarea ct mai simplificat a structurii substanelor organice, se folosesc diferite notari. Astfel, gruparea metil se scrie CH3, iar gruparea metilen CH2, n loc de
Un lan de hidrocarbur se reprezint ca un sistem de legturi n zig-zag, fiecare vrf reprezentnd o grup CH2:
44
n acelai mod, pentru compuii ciclici, forma simplificat este cea mai utilizat. Astfel, un ciclu cu linii simple reprezint un compus saturat, pe cnd un ciclu n care apar linii duble este compus nesaturat. Exemple:
Grupe de atomi de mai mic importan ntr-un anumit context sau care se repet de mai multe ori, se noteaz uzual prin R (radical). 2.3.2. GRUPRI FUNCIONALE N BIOMOLECULE Marea diversitate a compuilor organici se datorete prezenei n molecula acestora a diferite grupri funcionale, care le confer proprieti caracteristice. Gruprile funcionale sunt atomi sau grupe de atomi grefai pe un schelet de hidrocarbur. n exemplele de mai jas, astfel de grupri funcionale sunt: - Cl, - OH, - NH2. hidrocarbura radical clorderivat alcool amin
CH4
metan
- CH3
metil
CH3 Cl
clorur de metil
CH3OH
metanol
CH3NH2
metilamin
C2H6
etan
-C2H5
etil
C2H5 - Cl
clorur de etil
C2H5OH
etanol
C2H5-NH2
etilamin
Proprietile acestor compui sunt imprimate de gruprile funcionale. Astfel compuii care au radicali diferii, dar aceleai grupri funcionale, au proprieti asemntoare (CH3-OH are proprieti asemntoare cu C2H5-OH iar proprietile metil aminei sunt asemntoare cu ale etilaminei, etc). n funcie de numrul de atomi de hidrogen substituii la atomul de carbon, distingem: - grupri funcionale monovalente: - OH gruparea hidroxil (alcooli, fenoli, enoli); - SH gruparea tiol (tioli); - NH2 gruparea amino (amine). - grupri funcionale bivalente:
45
Reaciile chimice ale diferitelor clase de substane sunt reaciile gruprilor funcionale. Principalele caracteristici ale celor mai importante grupri funcionale, necesare pentru nelegerea proprietilor compuilor organici naturali. Gruparea hidroxil OH Este prezent n alcooli, fenoli i enoli. Alcooli. Alcoolii sunt cei mai importani compui cu grupare hidroxil. n alcooli, gruparea - OH se leag de o caten saturat, care poate fi catena unui alcan, cicloalcan, partea saturat din catena unei alchene sau catena lateral a unei hidrocarburi aromatice.
CH3 CH2 OH
(alcool etilic Alcool saturat)
CH2 = CH CH2 OH
(alcool acrilic alcool nesaturat)
C6H5 CH2 OH
(alcool benzilic aromatic)
Dup felul atomilor de carbon de care este legat gruparea hidroxil, alcoolii sunt de trei feluri: R CH2 OH alcool primar
alcool secundar R2 | R1 C OH | R3
alcool tertiar
Dup numrul gruprilor hidroxil din molecul. distingem: Monoalcooli Dialcooli Polialcooli
C2H5 OH
CH2 OH | CH2 OH
etandiol
H2C OH | HC OH | H2C OH
propantriol
Alcoolii sunt substane reactive, care formeaz o scrie de derivai: a) Alcoolii au un caracter slab acid. Ei reacioneaz cu metale, formnd alcoxizi.
R CH2 OH + Na R CH2O-Na+ + H2
Alcoxid de Na 46
b) Prin eliminarea unei molecule de ap ntre dou molecule de alcool se foreaz un eter: - H2O
Fenolii au caracter acid mai pronunat, dect alcoolii. Ei reacioneaz cu hidroxizi alcalini rezultnd fenoxizi.
47
Gruparea OH din fenoli formeaz eteri i esteri, ca i alcoolii. Enoli conin gruparea hidroxil legat de un atom de C aparinnd unei legturi duble. Au formula general R - CH = CH - OH. Exemplu: CH2=CH-OH (alcool vinilic, instabil). Gruparea amino - NH2 Este caracteristic aminelor, dar aceast grupare funcional mai este prezent n aminoacizi, aminoalcooli_ etc. Teoretic aminele deriv de la amoniac (NH3) prin nlocuirea hidrogenului cu radicali de hidrocarbur (R). Amine. n funcie de numrul de atomi de H din amoniac nlocuii cu radicali de hidrocarbur, acestea pot fi:
Aminele au caracter bazic, datorit prezenei n molecul a unei perechi de electroni neparticipani. Ca i amoniacul, vor reaciona cu acizii, respectiv cu ap. NH3 + HCl NH4+ ClR NH2 + HCl R NH3+ClClorur de amoniu clorhidratul aminei Am inele reacioneaz cu apa: R NH2 + HOH R NH3+OHNH3 + HOH NH4+OHHidroxid de alchil amoniu hidroxid de amoniu Aminele primare se pot dehidrogena cu formare de imine: -2H R CH2 NH2 ---------------> R CH = NH amina imina
Iminele sunt instabile i hidrolizeaz formnd aldehide sau cetone i pun n libertate amoniac. Aceast reacie este important pentru metabolismul aminoacizilor. R CH = NH + HOH R CHO + NH3 aldehida
cetona O proprietate important a aminelor este metilarea acestora cu iodur de metil, pn la obinerea unei sri cuaternare. Aminele se condenseaz cu aldehidele, formnd baze Schiff: R1 NH2 + O = C R2 ----------------> R1 N = C R2 | -H2O | H H Aminele se pot acila: R1 NH2 + Cl CO R1 R NH CO R1 + HCl clorur de acil amina acilata 48
Gruparea carbonil Aceast grupare funcional este caracteristic aldehidelor i cetonelor. R1 R1 | | C=O aldehida C=O cetona | | H R2 Aldehide i cetone. Aldehidele i cetonele se pot hidrogena, deci pot s adiioneze hidrogen la dubla legtur C= O . Gruparea carbonil fiind foarte reactiv, aldehidele i cetonele particip ntr-o serie de reacii chimice. Acestea sunt: 1. Reacii de adiie i condensare (comune aldehidelor i cetonelor). a) Reacii de adiie
b) Reacii de condensare cu aminele ( vezi reaciile aminelor) Aldehidele i cetonele pot s se transforme n formele lor enolice prin transferul unor atomi i a unor perechi de eleetroni n molecul. Fenomenul poart numele de tautomerie ceto - enolic. H R2 H | | | R1 C C R1 C = C R2 | | H O OH cetona enol 2. Reacii de oxidare (specifice aldehidelor). Aldehidele se transform uor prin oxidare n acizi organici: O // R C + [O] R COOH \ H Reacia are loc fie n prezena unor ageni oxidani, fie a oxigenului din aer (autooxidare).
49
Gruparea carboxil
- COOH
sau
O // -C \ OH
Este caracteristic acizilor organici. Acizii organici (carboxilici) au formula general: O // R COOH sau R C \ OH Clasificare n funcie de numrul gruprilor carboxil -COOH, acizii organici pot fi: - monocarboxilici: CH3 COOH Acid acetic - di i policarboxilici: COOH COOH | | COOH CH2 Acid oxalic | CH2 | COOH Acid succinic Dup natura radicalului R, acizii organici sunt de trei feluri: - saturai: CH 3 CH2 COOH Acid propionic - nesaturai: CH 2 = CH CO O H A cid a cri li c - aromatici: CO O H
Acid benzoic Proprietile acizilor carboxilici Acizii organici sunt acizi slabi, n soluie apoas disociaz, echilibrul reaciei fiind deci deplasat spre stnga:
Acizii reacioneaz cu metale, oxizii metalelor s hidroxizii, formnd sruri: 2 R - COOH + Zn ( R - CO O ) 2 Zn + H2 sare de zinc 2 R - OOH + CaO (R-COO)2 Ca + H2 O sare de calciu R - COOH + NaOH (R-COO)2Na + H2 O sare de natriu
50
Acizii reacioneaz cu alcoolii formnd esteri (vezi reaciile alcoolilor). Acetia fac parte din clasa derivailor funcionali ai acizilor carboxilici, ntruct esterii reacioneaza cu apa, refcnd acidul: R- COOR1 + HOH RCOOH R1 - OH Acizii reacioneaz de asemcnea cu NH3, formnd sruri de amoniu, prin deshidratarea acestora formndu-se amide; de asemenea derivai funcionali ai acizilor carboxilici. R - COOH + NH3 R - COO NH4 sare de amoniu R - COONH4 R- CO NH2 + H2O amid R CO NH2 + HOH R COOH NH3 Derivai funcionali. Sunt acele combinaii, care se formeaz prin eliminarea unei molecule de ap ntre gruprile funcionale diferite aparinnd unor molecule. Prin hidroliz, derivaii funcionali regenereaz substana iniial. Astfel, eterii sunt derivai funcionali, care rezult prin eliminarea apei din dou grupri OH aparinnd la dou molecule de alcooli, iar esterii sunt derivai funcionali ai acizilor carboxilici rezultai prin reacia dintre gruparea funcional OH dintr-un alcool i gruparea funcional -COOH a unui acid organic. R OH + HO R ----------> R O R -H2O eter R COOH + H OR1 ----------> RCOOR1 -H2O ester Legturile eterice i esterice sunt caracteristice unor substane naturale din clasa glucidelor i a lipidelor. Aceste legturi se desfac n urma hidrolizei: R O R + H2 O 2 ROH eter alcool O O // // R C OR1 + H2O R C OH + R1 - OH ester acid alcool 2.3.3. COMPUI CICLICI Foarte multe substane organice de mare importan biologic conin n molecula lor cicluri. Acestea sunt formate numai din atomi de carbon (carbocicluri sau izocicluri) sau pe lng atomii de carbon, la formarea ciclurilor pot participa i alte elemente, ca: azot, oxigen, sulf (heterocicluri ). Sistemele ciclice pot s fie saturate sau nesaturate . Structurile aromatice de tipul benzenului sunt puin reprezentate n substanele naturale. Compui carbociclici (izociclici). Compuii carbociclici au n molecul cicluri formate numai din atomi de carbon. Carbociclurile cele mai stabile din punct de vedcre energetic, sunt cele cu cinci i cu ase atomi de carbon, n care unghiurile dintre valenele atomilor de carbon sunt de 109o28 (unghiul tetraedric). Aceste cicluri sunt prezente n ciclopentan, respective n ciclohexan. La ciclohexan, pentru respectarea unghiului tetraedric, sunt posibile dou forme izomere scaun i baie.
51
baie". Forma cea mai stabil energetic este forma scaun. Aceste forme sunt interconvertibile. Cele dou valene libere ale atomilor de carbon sunt orientate diferit, i anume una paralel cu o ax imaginar a moleculei (axial) i una perpendicular pe aceasta (ecuatorial). Dintre structurile policiclice, cea mai important este structura steranic, care se gsete n numeroi compui naturali (colesterolul, acizii biliari, vitamina D, hormonii sexuali masculin i feminin, hormoni corticosteroizi etc.). Aceast structur are la baza ciclopentanoperhidrofenantrenul sau steranul, care conine patru cicluri condensate dintre care trei sunt hexacicluri i unul este pentaciclu.
steran Compui aromatici Conin n molecula lor un nucleu aromatic. Reprezentantul compuilor aromatici este benzenul, care are formula C6H6 i urmtoarea formul structural: CH Nucleul aromatic este ntlnit n unii aminoacizi // \ (fenilalanina,tirozina), n hormonii tiroidieni, n unele vitamine. HC CH Cei ase electroni sextet aromatic (reprezentai n figura alturat prin celetrei duble legturi) aparin n egal msur fiecrui atom de C din ciclu, ceea ce confer o comportare HC CH chimic special, denumit caracter aromatic. \\ / CH Compui heterociclici benzen Compuii heterociclici conin n molecul unul sau mai multe heterocicluri. Un heterociclu se formeaz prin participarea la ciclu nu numai a atomilor de carbon ci i a unuia sau mai multor heteroatomi. n substanele organice naturale, heteroatomii prezeni sunt oxigenul, sulful sau azotul. Aceste substane care au n molecul nuclee heterociclice i sunt sintetizate de ctre organismele vii, vegetale sau animale, conin heterocicli formai din cinci sau ase atomi . Dintre clasele de substane naturale, care conin nuclee heterociclice, amintim unele vitamine, aminoacizi, pigmeni, acizi nucleici
52
sau alcaloizi. Heterociclicii prezeni n aceste substane, pot conine n molecul i duble legturi prezentnd proprieti asemntoare benzenului, datorate existenei n ciclu a unui numr de 6 electroni (sextet aromatic). Heterociclii se pot clasifica n dou moduri: a) dup numrul de atomi, n: heterocicluri cu cinci atomi (pentaatomice) i cu ase atomi (hexaatomice); b) dup numrul de heteroatomi din heterociclu, n: heterocicluri monoheteroatomice i poliheteroatomice. Principalii heterocicli care stau la baza unor substane naturale de mare importan biologic sunt : Cicluri monoheteroatomice A) Cicluri monoheteroatomice de 5 atomi pot s conin ca heteroatom oxigenul, azotul sau sulful. Ciclul furanic este format din patru atomi de carbon i un atom de oxigen. Reprezentativ este furanul:
Dintre derivaii furanului amintim furfuralul si oximetilfurfuralul, aldehide ce se formeaz prin deshidratarea glucidelor.
Ciclul pirolic este format din patru atomi de carbon i un atom de azot. Reprezentantul este pirolul:
El are mare importan biologic, ntruct apare n structura hemoglobinei din snge, a clorofilei din plante, a unor enzime, cum sunt citocromii, peroxidazele i catalaza. Ciclul indolic este format prin condensarea unui nucleu benzenic cu unul pirolic (benzopirol). Indolul apare n fecale, ca produs final al metabolismului. Dintre compuii cu structur indolic amintim aminoacidul triptofan , din care provine triptamina i acidul indolilacetic (hormon vegetal).
53
Ciclul tiofenic este format din patru atomi de carbon i unul de sulf. Reprezentantul este tiofenul.
B) Ciclurile monoheteroatomice de 6 atomi pot conine ca heteroatom oxigenul sau azotul. Ciclul piranic este format din cinci atomi de carbon i unul de oxigen. Forma stabil este hidropiranul, care apare n structura unor substane naturale din clasa glucidelor. Ciclul benzopiranic se obine prin condensarea unui nucleu benzenic i un nucleu piranic (formulele i ). Benzopiranul sau cromanul apare n structura vitaminelor E i P, precum i n pigmenii flavonoidici.
-Benzopiran
-Benzopiran Ciclul piridinic conine 5 atomi de carbon i unul de azot. Reprezentantul este piridina, care apare n structura unor substane naturale, cum sunt vitaminele B6 i unele enzime:
Piridina
Cicluri poliheteroatomice Aceste cicluri conin doi sau mai muli heteroatomi n componena lor. Heteroatomii pot s fie numai atomi de azot sau atomi de azot mpreun cu atomi de oxigen sau sulf. Ciclurile pentaatomice se numesc azoli.
54
Diazolii conin doi atomi de azot n poziia 1,2 (pirazol) sau l,3 (imidazol ).
HC CH HC N \ / N H 1,2-diazol (pirazol)
HC N HC CH \ / N H 1,3-diazol (imidazol)
HC CH HC N \ / O 1,2-oxazol
HC N HC CH \ / S 1,3-tiazol
Pirazolul apare n structura unor medicamente, cum sunt antipirina i piramidonul. Imidazolul are o serie de derivai. care apar n organismele vii, cum sunt unii aminoacizi sau ureidele. Tiazolul conine un atom de azot i unul de sulf n poziia 1,3. Ciclul tiazolic apare n vitamina B1, n penicilin i n unele medicamente (sulfatiazolul). Oxazolul conine un atom de azot i unul de oxigen n poziia 1,2. Ciclurile hexaatomice se numesc azine. Diazinele conin doi atomi de azot n heterociclu. Reprezentantul cel mai important este pirimidina.
Ciclul pirimidinic apare n structura multor substane importante din punct de vedere biologic, cum ar fi: bazele pirimidinice i unele vitamine. Bazele pirimidinice sunt componente ale nucleotidelor acizilor nucleici: citozina (C) este prezent in ADN i n ARN ; timina (T) este prezent numai n ADN i uracilul (U) prezent numai n ARN. Pirazina apare n structura acidului folic (vitamin din complexul B). Nucleul purinic este un sistem biciclic format dintr-un heterociclu pirimidinic i unul imidazolic. El intr n alctuirea bazelor purinice adenina (A) i guanina (G), componente ale acizilor nucleici (ADN i ARN) i a unor enzime; ciclul purinic apare i n structura acidului uric (produs de excreie azotat), precum i a unor alcaloizi, cum sunt teobromina, teofilina i cofeina.
Nucleul aloxazinic este format prin condensarca unui ciclu benzenic cu unul pirazinic i unul aloxazinic. Apare n structura vitaminei B2 i n coenzime cu structura flavinic.
55
2.3.4. STRUCTURA GENERAL A BIOMACROMOLECULELOR Macromoleculele sunt ansambluri de atomi legate ntre ele prin legturi covalente, avnd masa molecular peste 104. Biomacromoleculele sunt macromolecule prezente n organismele vii, fiind formate din uniti structurale relativ simple, legate ntre ele prin diferite tipuri de legturi i ntr-o anumit ordine. Unitile structurale poart numele de monomeri. Macromoleculele iau natere din monomeri n dou moduri, i anume: fie prin reacii de polimerizare, fie prin reacii de policondensare. Compuii macromoleculari naturali rezult n cele mai multe cazuri prin reacii de policondensare a monomerilor , reacii care au loc cu eliminare de ap. Astfel, poliglucidele se formeaz din monoglucide, proteinele din aminoacizi, iar acizii nucleici din nucleotide. n natur exist ns i biopolimeri rezultai n urma unui proces de polimerizare, cum este cazul cauciucului natural care se formeaz din izopren. Numrul de monomeri care intr n structura unei macromolecule constituie gradul de polimerizare sau policondensare i se noteaz cu n. Spre exemplu, formula general a unei poliglucide este (C6 H10O5)n, unde C6H10O5 reprezint unitatea structural iar n reprezint gradul de policondensare. Unitile structurale ale unei macromolecule pot s fie identice, cum este cazul poliglucidelor omogene (amidonul, celuloza), n alctuirea crora intr o singur monoglucid (glucoza) sau parial identice, cum este cazul poliglucidelor neomogene n alctuirea crora intr diferite monoglucide. Aceste uniti structurale sau monomeri sunt de regul substane organice cu funciuni mixte, care au posibilitatea s reacioneze ntre ele iar prin policondensare s formeze biomacromolecule. Structura biomacromoleculelor a putut fi stabilit cu mijloace moderne de analiz fizico-chimic i ea este caracterizat prin diferite grade de organizare, i anume: - structura primar se refer la natura chimic a unitilor de baz i la numrul lor, la tipul legturilor ce apar ntre acestea, precum i la ordinea n care se aeaz monomerii n macromolecule; - structura secundar se refer la felul interaciunilor dintre lanurile ce, alctuiesc macromolecula i care pot fi de natur ionic, covalent, legturi de hidrogen sau fore Van der Waals; - structura teriar se refer la orientarea spaial, tridimensional a macromoleculei, care rezult din asocierea lanurilor de macromolecule. IZOMERIA Izomerii sunt substanele care au aceeai compoziie chimic, aceeai mas molecular, sunt formate din acelai fel de atomi, ns difer prin structur. Ca urmare au proprieti fizice i chimice diferite . Fenomenul de izomerie a fost sesizat pentru prima data de ctre Berzelius la combinaiile organice. Substanele organice prezint multe forme de izomerie pe care le putem mpri n dou mari grupe: izomeria de structur sau plan i izomeria spaial sau stereoizomeria. Ambele grupe fac parte din izomeria static, care caracterizeaz un edificiu molecular rigid n care, poziia atomilor n molecul este fix i cmpul de valen invariabi l. lzomeria de structur este rezultatul modului n care sunt legai atomii n molecul, fr a se ine seama de aranjarea lor n spaiu. Din acest motiv ca se mai numete i plan. Izomeria spaial se datorete modului n care atomii sau grupele de atomi sunt dispui n spaiu. Acest fel de izomerie se mai numete i stereoizomerie. Izomeria de structur este de mai multe feluri: de poziie, de caten, de compensaie funcional i tautomeria.
56
a) Izomeria de poziie este cel mai simplu caz de izomerie i se datorete faptului c pe acelai schelet de hidrocarbur, o grupare funcional sau o legtur multipl (dubl sau tripl) poate ocupa diferite poziii. Se cunoscc doi alcooli, izomeri de poziie, ce corespund formulei C3 H7OH: CH3 CH2 CH2 OH CH3 CH CH3 OH Alcool n propilic Alcool izopropilic Compusului cu formula C4 H8 (butena) i corespund doi izomeri de poziie: CH2 = CH CH2 - CH3 1 butena CH3 - CH = CH - CH3 2 butena
Uneori, pentru denumirea izomerilor de poziie, se folosesc literele , , , etc. Astfel, exist doi naftoli (fenoli ):
b) Izomeria de caten se datorete ramificrii catenei atomilor de carbon . Hidrocarburii C5 H12 (pentan) i corespund 3 izomeri, care difer prin proprietile lor fizice:
CH3 -CH2CH2CH2CH3
Pentan normal
CH3 H3 C C CH3
CH3
Tetrametilmetan
Cu ct numrul de atomi de C din molecul crete i izomerii vor fi mai numeroi. De exemplu, hexanul C6H14, va avea 5 izomeri de caten. Acest tip de izomerie apare i la substane care au structur ciclic i aciclic. De exemplu hexena i ciclohexanul, corespunznd formulei C6H12 sunt dou substane cu proprieti fizice i chimice complet diferite. Ele aparin la dou clase diferite de hidrocarburi: cicloalcani, respectiv alchene.
57
Izomeria de caten: H2 C / H2 C H2 C \ \ CH2 CH2 CH3 CH2 CH2 CH2 CH CH2 Hexena
/ C H2 Ciclohexan
c) Izomeria de compensaie funcional apare la substane cu aceeai formul brut, dar care conin grupri funcionale diferite, deci au proprieti complet diferite.
C2H6O
CH3 CH2 OH
Alcool etilic
H3C O CH3
Eter metilic
C3H6O
O // CH3 CH2 C \ H
Aldehida propionic
CH3 CO CH3
Aceton
C4H8O2
d) Tautomeria. Unele substane organice pot reaciona n dou moduri diferite, n funcie de mediul de reacie i de agenii chimici ntrebuinai. S-a constatat c aceste substane exist n dou forme diferite, numite tautomere, care se gsesc n echilibru. Acestea apar, ca urmare a prezenei n molecul a unui atom de hidrogen mobil i a unei legturi duble, capabil s se deplaseze. De exemplu gruparea funcional carbonil poate exista n echilibru cu gruparea funcional -OH existent n enoli.
Compus carbonilic n soluie, orice substan tautomer este un amestec al celor dou forme. Echilibrul se poate deplasa spre dreapta sau spre stnga, n funcie de condiiile de reacie. Tautomeria este ntlnit la multe clase de compui organici. 58
Izomeria spaial (stereoizomeria) Stereoizomeria se refer la substanele, care au aceeai constituie chimic, ns difer prin aranjarea n spaiu a atomilor, respectiv prin configuraie. Izomeria spaial este de dou feluri: izomerie optic i izomerie geometric. a ) Izomeria optic a compuilor organici se datorete asimetriei moleculei , datorit prezenei unuia sau mai multor atomi de C asimetrici. Moleculele acestor substane nu mai sunt superpozabile i se comport ca un obiect fa de imaginea sa din oglind. Cel mai simplu caz de asimetrie se ntlnete la moleculele care conin cel puin un atom de carbon asimetric (atomul de carbon legat de patru elemente sau patru radicali diferii). Prezint izometrie optic substanele ca: acidul lactic, tartric, zahrul, glucoza, uleiul de terebentin, etc. Asimetria molecular este nsoit de activitate optic. Substanele optic active au proprietatea de a roti planul luminii polarizare cnd sunt strbtute de aceasta. Cele care rotesc planul luminii polarizate spre dreapta, se numesc dextrogire i se noteaz cu litera d sau (+), iar cele care rotesc spre stnga, se numesc levogire i se noteaz cu litera l sau (). Cele dou forme izoniere se numesc enantiomeri sau antipozi optici. Un amestec, care conine cantiti echimoleculare ale celor doi antipozi optici, se numete amestec racemic. Acesta este optic inactiv. Enantiomerii (antipozii optici) au acelai punct de topire, aceeai solubilitate, n general aceleai proprieti fizice i aceleai proprieti chimice. Ei se deosebesc n privina activitii optice (dextrogire sau levogire) i prezint o comportare biologic diferit. n cazul n care substana organic dispune de un singur carbon asimetric, sunt posibili doi izomeri optici: unul dextrogir (+) i unul levogir (). Aranjamentul spaial al atomilor n molecul este de aa natur, nct fiecare form izomer este imaginea n oglind a celeilalte. De exemplu, cei doi izomeri optici ai acidului lactic se prezint astfel: CH3 CH3 |+ +| H C OH HO C H | | COOH COOH acid d(+)lactic acid l()lactic Dac molecula dispune de doi atomi de carbon asimetrici, fiecare din aceti atomi are propria sa activitatea optic. n acest caz sunt posibili patru izomeri optici. Numrul maxim al izomerilor optici posibili (N) a unei substane ce conine mai muli atomi de carbon asimetrici, se calculeaz dup formula Van't Hoff - Le Bel: N=2n (n=nr.de carboni asimetrici). Asimetria molecular poate rezulta nu numai datorit prezenei atomilor de carbon asimetrici n molecul ci i felului n care acetia sunt legai n molecula organic i de dispoziia lor n spaiu. Aceste substane avnd asimetrie molecular sunt optic active. Astfel inozitolul, un alcool ciclic mult rspndit n natur, nu are nici un element de simetrie n molecul, fiecare grupare OH fiind orientat n mod diferit fa de planul ciclului. Ambii izomeri optici au fost gsii n plante. Activitatea optic se msoar cu aparate, numite polarimetre. Fiecare substan optic activ, are un unghi de rotaie specific, care se noteaz cu []D20 grade Celsius. Acesta depinde de temperatur i de lungimea de und a luminii monocromatice, care trece prin substana optic activ. Rotaia specific variaz i cu natura dizolvantului. Substana []D20 grade Celsius Glucoz + 52.74 Fructoz - 93.78 Galactoz + 80,70 2aharoz + 66,50 Lactoz +55,30
59
b) Izomeria geometric se datorete existenei n molecula substanei organice a unei duble legturi carbon-carbon sau unui ciclu . Legtura dubl (ciclul) mpiedic rotirea atomilor de C (aa cum era posibil la atomii de C legai printr-o legtur simpl). Izomerii geometrici se noteaz cu cis i trans. Dac substituenii atomilor de C se afl de aceeai parte a planului dublei legturi, respectiv a planului generat de ciclu, izomerul va fi "cis"; iar dac acetia se afl de o parte i de alta a acestui plan, izomerul va fi "trans". Izomeria geometric la compui cu dubl legtur: H H H CH3 \ / \ / C=C / \ H3 C CH3 cis 2 butena H H \ / C=C / \ HOOC COOH acid maleic izomer cis C=C / \ H3 C H trans 2 butena H COOH \ / C=C / \ HOOC H acidul fumaric izomer trans
2.3.5. TIPURI DE REACII BIOCHIMICE Celula vie utilizeaz un numr mult mai redus de tipuri de reacii, n comparaie cu tipurile de reacii chimice, ce se cunosc "in vitro. Reaciile biochimice, care au loc ntre substanele din celul, au aceleai mecanisme de reacie ca i cele din chimia organic, deci cunoaterea lor este indispensabil pentru nelegerea biochimiei. Este surprinztor faptul c o varietate deosebit de structuri chimice ale compuilor naturali, pot fi realizate cu ajutorul unui numr relativ mic de tipuri de reacii ale chimiei organice. O caracteristic esenial a reaciilor chimice din celula vie este specificitatea deosebit de ridicat a acestora. Din multitudinea de reactani posibili din celul este aleas, de obicei, o singur substan i reacia specific este condus pe o cale bine definit.
60
Tipurile de reacii de o importan deosebit pentru organismele vii sunt urmtoarele: a) Oxidarea i reducerea (dehidrogenarea-hidrogenare). Se ntlnesc n urmtoarele reacii: oxidare - compui saturai compui nesaturai reducere oxidare - alcooli reducere oxidare - alcooli secundari reducere oxidare - amine Reducere b) Formarea i desfacerea legturilor C C, C N i C O are loc n: - carboxilri (formare de legturi C C); - formarea de legturi peptidice (legturi C N ); - condensri aldolice (formarea de legturi C C); - formarea de legturi glicozidice (C O) ; - decarboxilri (ruperea legturilor C C). c) Reacii cu transfer de atomi sau grupe de atomi de pe o substan donoare pe una acceptoare. Ele necesit enzime specifice (transferaze). Astfel pot fi transferati urmtorii atomi sau grupri de atomi: hidrogen, grupri metil, grupri acil, grupri fosfat, grupri glicozil. d) Reacii cu pierdere de ap (deshidratarea) sau de amoniac, rezultnd compui cu duble legturi; precum si reacii de adiie de ap la dublele legturi (hidratare). e) Reacii de hidroliz au loc n prezena apei i duc la ruperea moleculei, ireversibil. Reacii de hidroliz. - hidroliza legaturii esterice: imine cetone aldehide
61
f) Reacii de izomerizare. Acestea au loc cu rearanjarea intramolecular a unor atomi din molecul. Aceste reacii sunt urmtoarele: - izomerizarea gruprii carbonil: aldoz cetoz tautomeria ceto-enolic: epimerizarea : racemizarea : ceton glucoz isomer d enol fructoz isomer l
f) Formarea i desfacerea macromoleculelor. Sinteza se realizeaz de regul prin reacii de transfer, iar ruperea macromoleculei are loc printro reacie de hidroliz sau fosforoliz.
62
Exemplificare O // RC \ H aldehida
-2H
Decaboxilare Condensare
substituie
Hidroliza
Izomerie
racemizare
63
4. GLUCIDE
Cuprins:
2.4.1. Constituie chimic. Clasificare. Rolul n organismele vii. 2.4.2. Monoglucide Structura i izomeria monoglucidelor. Configuraia monoglucidelor. Structura ciclic (semiacetalic) a ozelor. Proprieti generale ale glucidelor. Monoglucidele naturale: Pentoze, Hexoze, Deoxiglucide, Aminoglucide. 2.4.3. Oligoglucide. Diglucide: Maltoza. Celobioza. Lactoza. Zaharoza sau sucroza. 2.4.4. Poliglucide. Proprietile poliglucidelor Clasificarea poliglucidelor - Poliglucide omogene Hexozani (amidonul, glicogenul i celuloza) - Poliglucide neomogene. Poliglucide neomogene fr acizi uronici. Poliglucide neomogene cu acizi uronici din regnul vegetal. Poliglucide neomogene cu acizi uronici din regnul animal: Mucopoliglucide acide.Mucopoliglucide neutre.
2.4. GLUCIDE
2.4.1. Constituie chimic. Clasificare. Rolul n organismele vii. Glucidele, numite i zaharide sau carbohidrai, se gsesc n mod natural n plante. Plantele sintetizeaz carbohidraii prin procesul de fotosintez. Animalele nu pot sintetiza carbohidraii, ele fiind dependente de regnul vegetal. Animalele convertesc carbohidraii din hrana vegetal n glicogen (carbohidratul animal), pe care l pstreaz ca rezerv de energie, n organism. Glucidele reprezint o clas de substante naturale de importan biologic deosebit pentru via, deoarece ele alctuiesc, ca biomolecule organice, cea mai mare parte din materia organic a planetei. Alturi de lipide i protide, sunt constituenii de baz ai materiei vii, predominnd n regnul vegetal, unde 50 - 80% din substanele ce alctuiesc celulele i esuturile sunt glucide. Animalele conin 1-5% glucide. Denumirea de glucide sau zaharuri provine de la gustul lor dulce (glikis = dulce, sakkharon = substan dulce, n limba greac). ns, numeroase glucide ca amidonul, celuloza nu au gust dulce, dup cum exist i unele substane dulci care nu sunt glucide: glicocolul (aminoacid), glicerolul (alcool), zaharina (imid). Glucidele au n molecul C, H i O, fiind substane cu funciuni mixte, ce conin grupri carbonilice (de tip aldehid : CH = O sau de tip ceton: >C = O ) i grupri hidroxilice (OH). Glucidele sunt polihidroxi aldehide sau polihidroxi cetone. Denumirea lor provine din formula lor empiric {CH2 O}n sau Cx(H2O)y. Majoritatea glucidelor simple corespund formulei generale (CH2O)n, de aceea au fost numite i hidrai de carbon, nomenclatur nejustificat i abandonat, ntruct hidrogenul i oxigenul nu sunt legai sub form de ap de atomul de carbon. O serie de glucide ns, nu corespund acestei formule brute: deoxiriboza, C5H10O4, ramnoza C6H10O5, iar alte substane, care nu sunt glucide (acid acetic C2H4O2: CH3COOH; acid lactic C3H6O3: CH3CH(OH)COOH .a.), corespund formulei generale a glucidelor. Din punct de vedere biochimic i fiziologic, glucidele au roluri extrem de importante: rol structural, fiind principalele substane de susinere pentru plante, rol energetic, fiind combustibilul principal al tuturor organismelor, rol funcional, avnd rol fundamental n oxidrile biologice i, de asemenea, prin metabolizarea lor ducnd la compui intermediari din care se formeaz: lipide, protide, ceto-acizi, glicerol etc.
64
Rspndire. Glucidele sunt rspndite n special n regnul vegetal, constituind peste 50% din substanta uscat a plantelor. Plantele verzi sunt singurele care biosintetizeaz glucide, prin fotosintez, folosind CO2 , ap i energie luminoas, n prezena clorofilei. n plante cele mai simple glucide, monoglucidele , se formeaz prin procesul de fotosintez din substane anorganice simple (CO2 i H2O) n prezena clorofilei, a radiaiilor solare i a srurilor minerale din sol. Monoglucidele se transform apoi n poliglucide: amidon, celuloz. Glucidele de origine vegetal constituie componentele de baz ale alimentaiei omului i animalelor, organismul animal fiind dependent din acest punct de vedere de organismele vegetale. n organismele animale coninutul de glucide este mult mai redus (1-5%), depinznd de specie: - suine 1,2%; psri i ovine 1,6%, bovine 1,7% i cabaline 1,8%. Glucidele din organismul animal pot s fie monoglucide (glucoza), diglucide (lactoza) i poliglucide de rezerv (glicogenul) sau de structur (mocopoliglucide). Constituie chimic general i clasificare Glucidele simple sunt polihidroxi-aldehide sau polihidroxi-cetone, care conin de 1a 3 la 10 atomi de carbon. Glucidele care conin o grupare aldehidic, se numesc aldoze, iar cele care conin o grupare cetonic, se numesc cetoze. Cele mai simple glucide sunt: H C=O H2C OH HC OH C=O H2C OH H2C OH Aldehida Dihidroxiacetona gliceric (cetoz) (aldoz) Glucidele superioare sunt formate din dou sau mai multe molecule de glucide simple, prin eliminare de molecule de ap. Glucidele se clasific n: monozaharide, dizaharide, oligozaharide i polizaharide. Clasificarea glucidelor Aldoze i Trioze, tetroze, pentoze, hexoze, heptoze, octoze, nonoze, Oze decoze . (monozaharide) Cetoze Holozide (conin Ozide Oligozaharide (conin 2-7 resturi identice sau diferite de oze). (glucide superioare) numai resturi de oze) - dizaharide sau diglucide; - triglucide, tetraglucide ... , heptaglucide. Polizaharide (conin de la 8 - sute, mii de resturi de oze): - Poliglucide omogene sau homopoliglucide (conin resturi omogene de oze), - Heteropoliglucide (conin resturi diferite de oze). Heteroglucide Glicozizi (conin oze i Glicoproteide agliconi) Glicolipide Monozaharidele (ozele) sunt glucide simple cu numr mic de atomi de carbon n molecul i care nu pot fi hidrolizate, fiind substane monomoleculare. Ozidele (glucidele superioare) sunt formate prin unirea mai multor molecule de monoglucide (oze) cu eliminare de ap. Prin reacia de hidroliz holozidele formeaz numai oze iar heteroglucidele se desfac n oze i alte substane neglucidice numite agliconi (alcooli, fenoli, alcaloizi, pigmeni etc.). 65
MONOGLUCUDE (MONOZAHARIDE) Monozaharidele sunt carbohidrai care nu pot fi hidrolizai n zaharide mai simple. Uzual sunt numite zaharuri, cel mai cunoscut fiind glucoza. Ea este sintetizat n frunze n procesul de fotosintez. Clorofila din frunze absoarbe energia luminoas, care este utilizat pentru sinteza glucozei, din CO2 provenit din aer i apa cu sarurile minerale din sol. In timpul acestui proces, planta produce i oxigen pe care-l elibereaz n aer: 6CO2 + 6H2O --fotosinteza C6 H12O6 + 6O2 Glucoza este folosit de plant n mai multe moduri : o parte este transformat n amidon i depozitat; o parte este transformat n celuloz care asigur structura lemnoas; o parte constituie rezerva de energie chimic att pentru plante ct i pentru animalele care consum planta. Energia este eliberat prin procesul invers fotosintezei, adica prin respiraie : C6 H12O6 + 6O2 --respiratie 6CO2 + 6H2O Monozaharidele sau ozele, conin n molecula lor ntre 3 i 10 atomi de carbon i dou tipuri de grupri funcionale: O R // \ R C C=O a) carbonil: aldehida sau cetona \ / R1 H \ b) hidroxil care poate fi alcool primar ( CH2OH ) sau alcool secundar : / Monoglucidele sunt, deci, hidroxi-aldehide i hidroxi-cetone cu catena liniar, rar ramificat. Dup numrul atomilor de carbon din molecul ele pot fi: trioze, tetroze, pentoze, hexoze, heptoze, octoze, nonoze i decoze. Cele mai simple glucide sunt cele dou trioze: aldehida gliceric i dihidroxiacetona: H C = O H C OH H2 C OH Aldehida glicerica H2 C OH C = O H2 C OH Dihidroxi acetona CH OH
n reprezentarea liniar a glucidelor s-a convenit ca atomii de carbon s fie numerotai ncepnd cu atomul de C care reprezint gruparea aldehidic sau de la atomul de carbon cel mai apropiat gruprii cetonice. Monozaharidele care contin gruparea aldehidic, HC = O, se numesc aldoze iar cele care contin gruparea cetonica, > C = O, se numesc cetoze.
66
Monozaharida aldehidic C6 H12O6 are 16 izomeri, dar glucoza i galactoza sunt cele mai importante. Majoritatea zaharurilor exist predominant ca structur ciclic, formata din 5 sau 6 atomi. Astfel glucoza se gsete ca structur ciclic unde atomul C1 este legat de atomul C5 . Glucoza se gsete n stare natural n plante i esuturi animale. Uzual glucoza se mai numete dextroz. Este componentul unor dizaharide (sucroza sau zaharoza, maltoza, lactoza) i monomerul unor polizaharide (celuloza si glicogen).
Structura ciclic a glucozei Glucoza este componenta principal a zaharurilor din snge, ea este responsabil de tensiunea arterial din snge. Glucoza nu necesit digestie, ea se administreaz intravenos pacienilor care nu se pot hrni. In situaia n care glucoza este n exces n organism ea se elimina prin urin. Galactoza este izomer cu glucoza, de care difera prin aranjarea spaial a grupurilor H i OH din jurul atomului de C4. Ea se gsete alturi de glucoz n dizaharide ca lactoza, n oligo- i poli-zaharide ca pectina. Galactoza este sintetizat de glandele mamare pentru a crea lactoza din lapte. Galactoza este mai puin de jumatate de dulce fa de glucoz. Galactosemia este o boala grav a copiilor care nu pot metaboliza galactoza. Ea se manifest prin vomitri, diaree, mrirea ficatului i uneori retardare mintal. Fructoza numit i levuloz, este o cetohexoz i se gsete n mod natural n sucurile de fructe, miere i alturi de glucoz este consituentul dizaharidei sucroz. Fructoza este componentul major al polizaharidelor de tip inulin, care se gasete n diverse plante ca: tuberculii de dalii, rdcinile de cicoare etc. Fructoza este cel mai dulce zaharid, de dou ori mai dulce dect glucoza. Fructoza este la fel de dulce ca mierea de albine, albinele secretnd o enzim care desface sucroza (dizaharida) n glucoza i fructoz (monozaharide). Fructoza este metabolizat direct, dar este convertit repede de ctre ficat n glucoz.
67
Riboza, C5 H10O5 este o aldopentoza prezent n adenozintrifosfat (ATP), cea care transport energia chimic n corp. Riboza i derivatul ei, deoxiriboza (C5H10O4), sunt componente ale acizilor nucleici ADN i ARN care transport informaia genetic. Proprieti generale ale monoglucidelor . Structura i izomeria monoglucidelor. Configuraia monoglucidelor. Structura ciclic a ozelor. IZOMERIA Izomerii au aceeai compoziie molecular (formul molecular), dar au structur molecular diferit i ca urmare au proprieti fizice i chimice diferite. La monoglucide se disting 5 tipuri de izomerie: izomeria datorat gruprii carbonilice, izomeria datorat activitii optice, izomeria stereochimic, izomeria datorat structurii moleculare, izomeria datorita hidroxilului glicozidic (semiacetalic). Izomeria datorat gruprii carbonilice ncepnd cu triozele pot fi aldoze (cu grupare de tip aldehidic CH=O ) sau cetoze ( cu grupare de tip cetonic >C=O). (Ex C3H6O3 aldehida gliceric: aldoz i dihidroxiacetona: cetoz; C6H12O6 glucoza i fructoza). Izomeria datorat activitii optice Toate monoglucidele conin n molecula lor atomi de carbon asimetrici (exceptnd aldehida glicolic i dihidroxiacetona). CH = O CH2OH Un atom de carbon asimetric , numit i atom de carbon chiral, e legat de 4 substitueni diferii i sunt optic activi, adic rotesc planul luminii CH2OH CH = O polarizate spre dreapte (+) sau spre stnga (-) aldehida glicolic cu un numr de grade. Izomerii optici sunt CH2OH dextrogiri d (+) i levogiri l (-). Nr de izomeri optici = 2n Dihidroxi-acetona (n=numrul de atomi de carbon asimetrici sau chirali). Izomeria stereochimic Se datoreaz poziiei grupelor hidroxil secundare de pe caten (ex aldehida D-gliceric i aldehida L-gliceric). S-a convenit ca monoglucidele care au penultimul hidroxil situat la dreapta catenei de atomi de carbon s aparin seriei D, iar cele care au acest hidroxil secundar situat n partea stng, s aparin seriei L. Este important de remarcat c apartenena la seria D sau seria L nu are legtur cu cu izomeria d (+) sau l (-), dei majoritatea ozelor din seria D, sunt optic dextrogire. Ex glucoza aparine seriei D i este optic dextrogir (=+112o), ca urmare se scrie: D(+)glucoz. Fructoza aparine seriei D dar este puternic levogir (=-92o), de aceea se numete levuloz i vom scrie D(-) fructoz. Izomeria datorat structurii moleculare S-a stabilit c monoglucidele cu peste 4 atomi de carbon n molecul pot prezenta fie stucturi liniare aciclice, fie structuri ciclice (semiacetalice), pe baza proprietilor ozelor: 1. prezena unei grupri hidroxil cu reactivitate mult mai mare dect a celorlalte de pe molecul, situat la C1 sau C2, n locul grupei carbonilice i numit hidroxil glicozidic sau semiacetalic; gruparea carbonil este mascat, transformat ntr-o grupare hidroxil foarte reactiv hidroxilul glicozidic sau semiacetalic, printr-o semi-acetalizare intern, ca urmare a interaciunii grupei carbonil cu o grup OH de la C4 sau C5. Se formeaz heterocicluri cu O de 5 sau 6 atomi deoarece ele sunt stabile i lipsite de tensiuni interne. 2. soluiile apoase ale monoglucidelor i schimb n timp rotaia specific.
68
Izomeria datorita hidroxilului glicozidic (semiacetalic) Ca urmare a semiacetalizrii interne ce are loc n molecula monoglucidelor, apare n locul fostei grupe carbonilice o nou grup hidroxil - mai reactiv dect celelalte deja existente numit hidroxil glicozidic. n funcie de poziia acestei grupe fa de planul moleculei apar doi izomeri diferii. Dac hidroxilul glicozidic este situat de aceeai parte cu grupa OH de la carbonul C4, (adic este orientat sub planul moleculei n formulele ciclice expuse pentru glucoz de exemplu), avem anomerul . Dac ns acest hidroxil reactiv este orientat n direcie opus fa de OH-ul de la C4 (adic n sus , deasupra planului moleculei), atunci izomerul se numete anomer . Unica diferen existent ntre cei doi izomeri este deci numai aceast poziie relativ a grupei OH-glicozidice fa de planul moleculei (respectiv fa de grupa OH de la carbonul C4). Trecerea reciproc a izomerilor n izomeri se face prin intermediul formei carbonilice i poart numele de ANOMERIE. anomerie izomer <-------------------> izomer n timpul transformrii reciproce dintre cei doi anomeri, se produce i modificarea unghiului de rotaie optic specific a luminii polarizante. Acest fenomen se numete mutarotaie . Exemplu:
69
Proprieti fizice ale monoglucidelor Sunt substane solide, cristaline, inodore; solubile n ap, greu solubile n alcool etilic i insolubile n solveni organici (eter etilic, cloroform, eter de petrol, aceton etc). Soluiile lor apoase sunt incolore, prezint activitate optic i fenomenul de mutarotaie. Majoritatea au gust dulce. Cea mai dulce este fructoza, apoi urmeaz n ordine: glucoza, galactoza, manoza. Pot fi cristalizate din soluiile lor concentrate prin adugarea de solveni n care sunt puin solubile (alcool, butanol, acid acetic) Proprieti chimice ale monoglucidelor Avnd n componen att grupe carbonil ct i grupe hidroxil, proprietile chimice vor fi specifice fiecreia n parte, dar i combinaiei lor. A. Proprieti determinate de prezena grupei c a r b o n i l 1. Reacii de reducere Transform monoglucidele n polialcooli. Au loc n prezena catalizatorilor (Ni, Pt, Pd) sau a unor enzime (hidrogenaze).
CH = O HC CH HO CH HC OH HC OH CH2OH D-Glucoza (aldoz) HC = O / \ OH-CH H2C-OH OH-CH HC-OH CH2OH HC OH HO CH HC OH HC OH CH2OH D-Sorbitol (hexitol) OH CH / OH-CH OH-CH \ HC-OH HC-OH
Aldolizare intramolec.
CH OH Aldohexoz
\
CH
/
OH
2. REACII DE OXIDARE: Ca urmare a grupelor aldehidice libere i a hidroxizilor glicozidici, monoglucidele au un puternic caracter reductor. Oxidarea lor va decurge deci relative uor. n funcie de modul n care este condus oxidarea, se pot obine trei tipuri de produi de reacie: CH = O COOH Oxidarea blnd HC OH HC OH transform aldozele n acizi aldonici. Agenii de oxidare blnd pot fi AgO, HO CH HO CH NaOCl, apa de clor, apa de brom AgO sau apa de iod. HC OH -------------------> HC OH oxidare blnd Cetozele sunt rezistente la agenii HC OH HC OH oxidani slabi, dar n condiii speciale pot forma totui ceto-hidroxi-acizi CH2OH CH2OH cu acelai numr de atomi de carbon. Glucoza (aldoz) Acid gluconic
70
Oxidarea energic - transform aldozele n acizi zaharici, iar cetozele n acizi dicarboxilici mai scuri, catena lor rupndu-se imediat lng gruparea cetonic. - Agenii de oxidare energic sunt: acidul azotic sau sulfuric concentrai. CH = O COOH HC OH HC OH HO CH HO CH HNO3conc. HC OH ---------------------> HC OH oxid. energic HC OH HC OH CH2OH COOH Glucoza (aldoz) Acid glucozaharic CH2 OH HC = O HO CH HNO3conc. HC OH oxid. energic HC OH CH2OH
Fructoza (cetoz)
COOH COOH
Acid oxalic
COOH HC OH HC OH COOH
Acid tartaric
Oxidare protejat decurge n 3 etape: 1. protejarea grupei carbonil (prin eterificare cu un alcool), 2. oxidarea propriu-zis (la cellalt capt al moleculei) i apoi 3. deprotejarea grupei carbonilice (printr-o hidroliz). Se obin acizi uronici cu rol important n organismele animale, unde sunt implicai n reaciile de detoxifiere (contribuind la eliminarea compuilor aromatici) i la transportul unor hormoni.
Oxida re
HCOR HCOH HCOH O HCOH O +H 2O HOCH HOCH HCOH HCOH Deprotejare - ROH HC HC COOH COOH Acid glucuronic Acid glicozidic 71
3. Reacii de condensare: Monoglucidele dau i reacii de condensare la grupa carbonil cu diveri reactani cum ar fi: hidroxilamina, amoniacul, ureea. Cu acidul cianhidric, sau mercaptanii, reaciile decurg ca nite adiii. B. PROPRIETI DETERMINATE DE PREZENA grupelor h i d r o x i l i c e 1. REACII DE ETERIFICARE: Decurg diferit, ca urmare a reactivitii diferite a grupelor OH: La hidroxilul glicozidic (semiacetalic), foarte reactiv, eterificarea decurge uor cu alcooli i fenoli rezultnd O-glicozide (eteri ce conin un rest de glucid i respectiv un aglicon R'). Grupele hidroxil alcoolice (neglicozidice), mai puin reactive dect cele semiacetalice, nu pot reaciona direct cu alcoolii sau fenolii, ci doar cu compui mai reactivi de genul derivailor halogenai sau a dimetil-sulfatului n mediu bazic, cnd rezult eteri.
2. REACII DE ESTERIFICARE: Toate grupele OH ale ozelor se pot esterifica cu acizi organici sau anorganici (H3PO4, HNO3, H2SO4). Ca urmare a rolului lor deosebit n metabolismul glucidic, esterii fosforici sunt poate cei mai importani:
HC1= O HC OH H2C3 O PO3H2 Aldehid 3- fosfogliceric HC1= O HC OH HC OH HC OH H2C5 O PO3H2 Ester ribozo
6
H2 C O PO3H2 O
5 4 3 2 1
72
3. REACII DE FORMARE A DEOXIGLUCIDELOR. Prin eliminarea unui atom de oxigen din molecula ozelor i nlocuirea sa cu unul de hidrogen, rezult deoxiglucide. Cea mai important dintre ele este ce intr n alctuirea acizilor deoxiribonucleici (ADN).
5
1
- [O]
HO CH2
4 3
O
1
4. FORMAREA AMINO-GLUCIDELOR: n urma reaciei cu NH3 sau cu NH2-OH (hidroxil amina), se poate nlocui o grup OH (de obicei de la C2) cu una amino (NH2) rezultnd aminoglucide. n carapacea crustaceelor, aripile insectelor i n unele ciuperci au mai fost identificate galactozamina (numit i condrozamin) i glucozamina (chitozamin). c. PROPRIETI DETERMINATE DE PREZENA ambelor grupe funcionale 1.REACII DE EPIMERIZARE: Experimental s-a constatat c n mediu bazic, la temperatura camerei, se poate produce o izomerizare la care particip grupa carbonil i una din grupele hidroxil de la carbonul imediat vecin, rezultnd formele epimere ale monoglucidelor. Numim epimere acele oze care se deosebesc prin configuraia diferit a doi atomi de carbon vecini din molecul. Un exemplu de hexoze epimere sunt: glucoza, fructoza i manoza. Trecerea lor reciproc una n alta se face prin intermediul unei forme enolice comune. CH = O HC-OH HO-CH HC-OH HC-OH CH2OH Glucoza (aldoza) (C6 H12 O6) CH-OH C-OH HO-CH HC-OH HC-OH CH2OH Forma enolic (C6 H12 O6) CH2 OH HC = O HO-CH HC-OH HC-OH CH2OH Fructoza (cetoz) CH = O HO-CH HO-CH HC-OH HC-OH CH2OH Manoza (aldoz) (C6 H12 O6) 73
2.TRANSFORMRI ALE MONOGLUCIDELOR SUB ACIUNEA ACIZILOR : n prezena soluiilor concentrate de acizi minerali tari (sulfuric, clorhidric), pentozele i hexozele se transform la cald n furfural sau derivai ai si, n urma unei reacii de deshidratare intramolecular complex. Aceti produi intermediari de reacie, conduc n continuaren prezena unor compui aromatici de tipul - sau -naftolului, ori a rezorcinei, la produi colorai, care permit diferenieri ntre unele clase de monoglucide. 3.REACIILE DE CULOARE sub aciunea acizilor sunt: a) reacia general de recunoatere a glucidelor (reacia Molisch-Udranschi) H2SO4 conc alfa Naftol Prob glucid ------------------> Furfurol -----------------> Inel rou-violet (sau derivai) b) Reacia de difereniere a cetozelor de aldoze (reacia Selivanov) Cetozele reacioneaz foarte rapid Prob glucid 1) +HCl 2) +Rezorcin Aldozele reacioneaz foarte lent
c) Reacia de difereniere a pentozelor de hexoze (reacia Bial i Thomas) 1) +H2SO4 Prob glucid --------------------> 2) +-Naftol - Culoare albastr - Pentoz - Culoare brun Hexoz
4.REACII DE CONDENSARE CU FENILHIDRAZINA: Monoglucidele tratate n soluie alcoolic cu fenilhidrazin (H2N NH C6 H5) conduc prin adiie la fenil-hidrazone. Acestea, n exces de reactiv i la cald, dau produi cristalini, foarte frumos colorai n galben, numii osazone. CH=O CH=N-NH-C6H5 CH=N-NH-C6 H5 HC-OH HC-OH HC=N-NH-C6H5 HO-CH H2N-NH-C6H5 HO-CH H2N-NH-C6H5 HO-CH --------------------> --------------------> HC-OH - H2 O HC-OH - H2 O HC-OH HC-OH HC-OH HC-OH CH2OH CH2 OH CH2 OH D-glucoza D-gluco-fenilhidrazina D-gluco-osazona (galben)
74
Lactoza, C12H22O11 este izomer cu sucroza i se gsete n mod natural n laptele mamiferelor. Laptele uman conine 6,7% lactoz, iar laptele de vac conine aprox. 4,5% lactoz. Ea este compus dintr-o molecul de galactoz ciclic (aldohexoza) i una de glucoz ciclic (aldohexoza).
Maltoza, C12 H22O11 este izomer cu lactoza i sucroza, se gsete n mod natural n grunele de cereale. Comercial maltoza se prepar prin hidroliza parial a amidonului, catalizat fie de enzime, fie de acizi diluai. Maltoza este compus din dou molecule de glucoz ciclic legate printr-o punte C1 O C4 (atomul C1 este de la o molecul de glucoz, iar C4 este de la cealalt molecul de glucoz).
Dizaharidele pentru a putea fi folosite de organismul animalelor i cel uman, mai nti trebuie s fie hidrolizate enzimatic n monozaharide : Sucroza + apa --H+ sau sucraza glucoz + fructoz H+ sau lactaza Lactoza + apa - galactoz + glucoz Maltoza + apa --H+ sau maltaza glucoz + glucoz
75
76
Clasificarea poliglucidelor omogene 1 Hexozani Glucani Amidonul, amestec de dou componente poliglucide diferite:
Glicogenul Celuloza
Structura poliglucidelor omogene Amiloza (unitatea diglucidic este maltoza, format din glucoz (-Dglucopiranoz), cu legturi de tip 1-4--glicozidic.) Amilopectina - glucan ramificat (unitile diglucidice : maltoza i izomaltoza formate din -Dglucopiranoz cu legturi de tip 1,4-- i 1,6--glicozidice) (structura similar amilopectina din amidon). (format din resturi de -D-glucoz, legate prin legturi 1,4--glicozidice). (unitatea diglucidic este celobioza) Macromoleculele sunt filiforme, paralele, cu legturi de hidrogen ntre ele.
Manani Galactani Fructani 2 Pentozani. Arabani Xilani 3 Alctuite Monoglucide din derivai esterificate ai ozelor Aminoglucide Chitina Format din -D-glucozamin-N-acetilat, N-acetilate prin legturi 1,4--glicozidice. Hexozani Din aceast grup, cele mai importante sunt poliglucidele n structura crora particip numai glucoza. Aceste poliglucide se numesc glucani. Principalii glucani sunt: amidonul, celuloza i glicogenul . AMIDONUL este cel mai important poliglucid de rezerv al plantelor i constituie principala surs de glucoz pentru alimentaia omului i hrana animalelor. Este un poliglucid omogen, cu structur macromolecular ramificat, format din resturi de glucopiranoz unite prin legturi 1-4 glicozidice. Formula molecular (C6 H10O5) n , gradul de polimerizare (n) fiind de ordinul miilor. Unitatea structural este diglucidul maltoz.
CH2 OH O OH OH OH Maltoza
1 4
CH2 OH O OH OH OH
Amidonul este polimerul glucozei, un poliglucid vegetal, format prin fotosintez la nivelul frunzelor, de unde este transportat la diverse organe i depozitat sub form de granule de mrime, structur i aspect caracteristic pentru diferite specii vegetale. 77
n boabele de cereale se gsete n cantiti mari (75% n orez, 64% n gru, 65-75% n porumb, 56% n secar, 54% n orz, 43% n ovz), n mazre 40%, n tuberculii de cartofi 14-18%, n plante tropicale-manioc. Porumbul, grul, orezul, cartofii i maniocul sunt cele mai importante materii prime naturale pentru extragerea, cu ajutorul apei, a amidonului. Amidonul este o pulbere alb higroscopic, insolubil n ap rece, n alcool i eter, iar cu ap cald formeaz soluii coloidale, care la rece se gelific, formnd cleiul de amidon sau coca. Soluiile diluate de amidon sunt optic active i dau cu iodul o coloraie albastrviolet caracteristic, intens, cunoscut ca reacia de identificare a amidonului. Amidonul prezint caracter slab reductor i o activitate optic puternic dextrogir. Granula de amidon este format din dou componente, repartizate uniform, diferite structural: amiloza i amilopectina. Raportul n care apar n granula de amidon este de 1/3 (cca. 25 % amiloz i 75 % amilopectin). AMIDONUL = AMESTEC DE AMILOZA I AMILOPECTINA. AMILOZA reprezint 20-30% din masa granulei de amidon fiind format din resturi de -glucopiranoz, unite prin legturi 1-4 glicozidice, cu structur liniar, fr ramificaii, lanul glucozidic avnd form spiralat, fiecare spir fiind alctuit din 6 resturi de glucoz. Unitatea diglucidic structural a amilozei este maltoza. AMILOZA se dizolv uor n ap rece, i nu formeaz cu apa fiebinte coca- de amidon. D cu iodul o coloraie albastr nchis ce dispare la cald, dar reapare la rece. Amiloza are un grad de polimerizare de 300-400 uniti maltozice, iar spiralele sale sunt rspndite n granul uniform, printer ramificaiile amilopectinei. Masa molecular a amilozei este de aproximativ 1,5 x 105 6 x 105 AMILOPECTINA este componenta major a granulei de amidon (cca. 70-80%), fiind format din resturi de -D-glucopiranoz, unite ns prin legturi 1-4 dar i 1-6 glicozidice. Spre deosebire de amiloz, amilopectina este un glucan ramificat, are o structur macromolecular pluriramificat, legturile 1-6 glicozidice fiind caracteristice ramificaiilor. Gradul de polimerizare al amilopectinei este mai mare : 5000-6000, dect al amilozei. Unitile diglucidice ale amilopectinei sunt MALTOZA i IZOMALTOZA . Amilopectina nu se dizolv n ap rece, ci doar n ap cald, formnd coca de amidon la rcire. Reacioneaz cu iodul, dnd o culoare albastru violet. Spre dosebire de amiloz, ntre resturile de glucoz amilopectina conine i anioni fosfat (PO4 3-) legai esteric. De aceea, n camp electric, amilopectina va migra spre polul pozitiv.
78
Cele dou componente ale amidonului se deosebesc ca structur i ca proprieti: Amiloza se dizolv n ap fierbinte cu formarea unei soluii coloidale limpezi. Cu iodul d o coloraie albastr nchis, care dispare la cald. Amilopectina sufer fenomenul de inbibiie cu apa, formnd la cald soluii coloidale vscoase, care se transform la rece n gel. n cmpul electric migreaz spre polul pozitiv, particulele fiind ncrcate negativ (cu ioni PO 43- provenii din fosfolipidele ce se gsesc n seminele cerealelor, alturi de amidon). Amilopectina coloreaz soluiile de iod n albastru-violet. Amidonul hidrolizeaz n cataliz acid sau enzimatic, rezultnd produi cu masa molecular din ce n ce mai mic, iar n final se obine glucoza: Amidon amilodextrine eritrodextrine acrodextrine maltodextrine maltoz glucoz. n mediu acid sau sub aciunea enzimelor numite amilaze, amidonul hidrolizeaz, intermediar se formeaz produi de hidroliz parial numii dextrine, apoi rezult maltoz i n final -glucopiranoz. Mersul hidrolizei se poate urmri prin reacia de culoare cu iodul, sau cu ajutorul oxidrii cu reactivul Fehling: hidroliz hidroliz hidroliz Amidon Dextrine Maltoz -glucoz Culoarea n reacia cu iodul Culoarea cu reactivul Fehling Nu mai dau culoare cu iodul culoare Dau culoare roieNu d culoarea roie Slab specific crmizie puternic (ppt. roie-crmizie Cu2O format) ALBASTR ROIE-BRUN
n organismul animal hidroliza amidonului pn la glucoz necesit aciunea unor enzime specifice: amilaza, l,6--glucozidaza i maltaza (1,4--glucozidaza) -Amilaza (salivar i pancreatic) catalizeaz scindarea amidonului prin desfacerea legturilor 1,4--glicozidice din interiorul lanului. Produii rezultai sunt dextrine alctuite din fragmente scurte, ramificate, maltoz i glucoz. 1,6--Glucozidaza este o enzim de ramificare, ce catalizeaz scindarea legturilor 1,6-ale amilopectinei. Maltaza scindeaz hidrolitic moleculele de maltoz rezultate, transformndu-le n molecule de -D-glucoz. Moleculele de glucoz rezultate prin hidroliza enzimatic a amidonului se absorb prin peretele intestinal i ajungnd n circuitul sanguin unde sunt utilizate fie ca surs energetic imediat (suferind un proces de degradare), fie ca rezerv energetic prin transformare n glicogen. Amidonul se obine pe cale industrial din cartofi i cereale, mai ales din porumb, i are utilizri multiple : - ca materie prim pentru obinerea alcoolului etilic i butilic, a acizilor lactic, citric i gluconic, a acetonei i glicerolului, precum i a altor produse rezultate n urma proceselor de fermentaie a glucozei, rezultat prin hidroliza amidonului; - n industria textil ca apret i n cea a hrtiei sub form de clei de amidon; - n alimentaia omului i a animalelor domestice, fiind componentul principal al pinii, finii, pastelor finoase i al altor produse alimentare; - n chimie i biochimie ca reactiv chimic; amidonul se folosete ca indicator n iodometrie; - n industria farmaceutic, este un component al mediilor de cultur a microorganismelor utilizate n industria antibioticelor i a vitaminelor; - n industria lacurilor, vopselelor. 79
GLICOGENUL este o poliglucid omogen de origine animal, format din glucopiranoz. El reprezint poliglucidul de rezerv al animalelor, gsindu-se n toate esuturile, dar mai ales n ficat i n muchi. Adesea se numeste amidon animal. n regnul vegetal, s-a identificat, n cantiti mici, n drojdii, ciuperci, alge, plante superioare. Este o important surs energetic i forma de depozitare a glucidelor, n cantiti mari, n esutul hepatic (2-8%) i n cel muscular (0,5-1%). Glicogenul din muchi conine 0,05% acid fosforic legat esteric la gruprile-OH libere ale resturilor de glucoz. Glicogenul se formeaz n corp prin polimerizarea glucozei i este depozitat n special n ficat i esutul muscular. n stare izolat, glicogenul se prezint sub forma de pulbere alb amorf, care se dizolv n ap mai uor dect amidonul, formnd soluii coloidale opalescente, ce dau cu iodul coloraii rou-violet sau rou-brun, dar care nu se gelific i sunt mai stabile la nclzire dect cele cu amidon. Soluiile de glicogen sunt dextrogire i nu prezint caracter reductor. Din punct de vedere chimic, structura glicogenului este similar cu acea a AMILOPECTINEI din amidon, unitile de glucoz fiind legate prin legturi 1,4- i 1,6- glicozidice . Gradul de ramificare al glicogenului este mult mai mare dect a amilopectinei. Masa molecular atinge valori de 1 x 106 4 x 106. Unitatea structural este tot maltoza alturi de izomaltoz. Hidroliza glicogenului decurge analog cu a amilopectinei. n ficat sau pus n eviden - , - , i - amilaza, care hidrolizeaz toate tipurile de legturi glicozidice din molecul. n esuturile animale, respectiv n ficat, glicogenul este scindat n glucoz n urma a dou procese enzimatice: fosforoliza i hidroliza, catalizate de fosforilaze, respectiv de amilo1,6 glucozilaza. Prin aciunea acestor enzime glicogenul hepatic este transformat n glucoz, care trece n snge i menine glicemia constant. CELULOZA este un poliglucid omogen specific regnului vegetal, fiind cea mai rspndit i mai abundent substan bioorganic din natur. Apare n toate organismele vegetale, contribuind la formarea membranelor celulare i a esuturilor de susinere ale plantelor. n cantitate mare i aproape pur, celuloza se gsete n fibrele de bumbac (99,8%), apare n plante textile (cnep, in), conifere etc., iar lemnul este format n proporie de 50% din celuloz. n esuturile vegetale, lanurile celulozice se unesc formnd fibrele de celuloz. Celuloza este nsoit n plante de anumite substane ncrustante (hemiceluloze, lignine, rini, .a.). La animale apare n cantiti extrem de mici (ex: mantaua melcilor). Celuloza are structur macromolecular, filiform, liniar, format din resturi de D-glucoz, legate prin legturi 1,4--glicozidice. Formula molecular (C6H10O5) n , gradul de polimerizare (n) fiind de ordinul sutelor i miilor (ex. Celuloza din bumbac are n=3000). Celuloza difer de amidon i glicogen prin modul n care moleculele de glucoz sunt legate.
Unitatea diglucidic constitutiv a celulozei este CELOBIOZA. Macromoleculele celulozei sunt filiforme, dispuse paralel, ntre acestea se stabilesc legturi de hidrogen, care confer stabilitate macromoleculei i rezisten mecanic.
80
CH2 OH O OH OH OH
1
CH2 OH O O
4
OH OH OH
celobioz Proprieti ale celulozei. Celuloza pur este o substan solid, microcristalin, de culoare alb, fr gust i miros, insolubil n solveni organici i n ap, ns prezint fenomenul de inbibiie limitat. Unicul dizolvant este hidroxidul tetraaminocupric = reactivul Schweizer [Cu(NH3)4] (OH)2. Se carbonizeaz la nczire i nu are gustul dulce specific zaharidelor. Fibrele de celuloz tratate cu sol diluate de NaOH se uniformizeaz la grosime i capt luciu dup splarea cu ap, fenomen numit mercerizare. Celuloza mercerizat se coloreaz mult mai uor. n soluie de NaOH 5%, ea i mrete mult, volumul, proprietate utilizat la obinerea bumbacului mercerizat. Prin tratarea cu soluii concentrate de NaOH, se obine celuloza sodat, care n reacie cu sulfura de carbon CS2 formeaz xantogenatul de celuloz din care se obine mtasea artificial. Prin fierbere cu acizi minerali tari, celuloza sufer hidroliz treptat, rezultnd nti celobioza i apoi glucopiranoz. Analog are loc i hidroliza enzimatic dar sub aciunea enzimelor celobiaz i respectiv celulaz. Separarea celulozei din masa lemnoas se poate face prin tratarea materiei prime cu sulfit acid de calciu, Ca(HSO3)2 procedeul bisulfitic, sau cu amestec de sulfat i hidroxid de sodiu procedeul sulfat. Celuloza poate fi degradat hidrolitic, prin fierbere cu acizi tari, pn la -Dglucoz. Datorit existenei legturilor glicozidice de tip majoritatea animalelor nu dispun de enzime necesare scindrii celulozei n glucoz. Degradarea enzimatic se realizeaz n prezena enzimei celulaza pn la celobioz i apoi, n prezena enzimei celobiaza, se desface celobioza n glucoz. Celuloz celulaz celobioz celobiaz glucoz
Aceste enzime se gsesc n sucul intestinal al unor animale inferioare (melci, omizi). Animalele ierbivore utilizeaz n hran cantiti mari de celuloz, pe care o pot transforma n glucoz, datorit celulazei eliberate de ctre microorganismele prezente n rumen i intestin, celuloza constituind sursa lor principal de glucide. Omul nu poate utiliza celuloza ca aliment, deoarece nu are enzimele necesare hidrolizei pentru a obine glucoza. Totui, celuloza este important n diet, deoarece fibrele au rol abraziv de curare a pereilor intestinali i de stimulare a digestiei prin excitarea terminaiilor nervoase din pereii intestinali. Celuloza este o materie prim important pentru industria textil i cea a hrtiei. Ea se folosete, de asemenea, i pentru producerea fibrelor de tip rayon, filme fotografice, celuloid i celofan. Celuloza are multe ntrebuinri practice ca atare, sau sub forma unor derivai, cum sunt acetil-celuloza, nitroceluloza, xantogenatul de celuloz i altele. Celuloza i derivaii si se intrebuineaz n industria hrtiei, mtsii artificiale, a lacurilor etc.
81
Digestia / metabolismul carbohidrailor este un proces biochimic complex. El ncepe n gur, cnd enzima amilaz din saliv ncepe procesul de hidroliz enzimatic a amidonului la dextrin, i temporar se poate opri n stomac unde prezena acidului clorhidric dezactiveaza aciunea enzimei. Digestia continu apoi n intestinul subire, unde acidul clorhidric este neutralizat de enzimele din pancreas, iar hidroliza este complet obinndu-se maltoza. Enzima maltaza catalizeaz digestia maltozei n glucoz. Alte enzime specifice existente n intestin transform sucroza i lactoza n monozaharide.
POLIGLUCIDE NEOMOGENE Poliglucidele neomogene sau heteropoliglucidele sunt substane macromoleculare care conin n structura lor resturi de diferite monoglucide sau de derivai ai acestora. Prin hidroliza lor se obin hexoze, pentoze, acizi uronici i derivai (esteri sulfurici ai ozelor, metilpentoze, N-acetilgalactozamin, N-acetilglucozamina). Se mpart n dou grupe, dup absena sau prezena acizilor uronici n constituia lor. Clasificarea poliglucidelor neomogene 1 Fr acizi uronici Arabo-xilani (din plante) Gluco-manani Galacto arabani Galacto-fructani Galacto-manani 2 Hemiceluloze Prin hidroliz formeaz hexoze (manoz, Cu acizi uronici nsoesc celuloza galactoz), pentoze (arabinoz, xiloz) i din plante i lignina acizi uronici (acid glucuronic i acid galacturonic). Materii pectice n componentul principal: fructe (30%, sfecla acidul galacturonic , nsoit de diferite oze: de zahr (25%), galactoza, arabinoza, xiloza, ramnoza, bulbi, n pereii fucoza. celulari 82
Gume Guma arabic Mucilagii Cu acizi uronici din animale Mucopoliglucide acide
dau prin hidroliz galactoz, manoz, glucoz, ramnoz, L-fucoz, xiloz, acizi glucuronic i galacturonic coninut ridicat n pentoze rol n reinerea apei Condroitin sulfaii, din carnea de bovine, cartilagii, tendoane, saliv, plasm, Acidul hialuronic - n esutul conjunctiv. Heparina (ficat, muchi, splin, plmni, snge, rinichi, inim). Mucopoliglucide ale grupelor sanguine, Imunopoliglucide (poliglucide bacteriene),
Mucopoliglucide neutre
Poliglucide neomogene fr acizi uronici Sunt foarte rspndite n regnul vegetal, nsoind celuloza, fiind ca i aceasta substane de structur. Sunt de asemenea ntlnite n seminele unor plante, n bulbi i n unele alge. Prin hidroliz ele pot forma amestecuri de: - pentoze: arabinoz, xiloz; - hexoze: glucoz, manoz, galactoz i fructoz; - pentoze i hexoze; Poliglucide neomogene cu acizi uronici din regnul vegetal Hemicelulozele sunt poliglucide, ce se gsesc n cantiti apreciabile n lemnul diferitelor specii de arbori (17-40% din substana uscat), tiulei de porumb, paie, tre, n cojile unor semine. Ele nsoesc, de regul, celuloza i lignina. Sunt insolubile n ap, dar solubile n soluii alcaline, avnd masa molecular mai mic dect celuloza. Prin hidroliz formeaz hexoze (manoz, galactoz), pentoze (arabinoz, xiloz) i acizi uronici (acid glucuronic i acid galacturonic). Exist hemiceluloze uor hidrolizabile, ele constituie poliglucide de rezerv i hemiceluloze greu hidrolizabile, care sunt de structur i au rol asemntor celulozei . Hemicelulozele sunt o surs important de materie prim pentru industria hrtiei, alcoolului etilic, a furfuralului i a drojdiilor furajere. Materiile pectice sunt compui macromoleculari, care se gsesc n fructe (mere, prune, pere, gutui, citrice, aproximativ 30%, sfecla de zahr (25%), bulbi, precum i n pereii celulari ai plantelor. n structura materiilor pectice componentul principal este acidul galacturonic , nsoit de diferite oze: galactoza, arabinoza, xiloza, ramnoza, fucoza. Proprietatea materiilor pectice de a forma geluri cu zahrul, joac un rol esenial n prepararea gemurilor i marmeladelor din fructe. Pectinele mai sunt utilizate n fabricarea cleiurilor. Gumele i mucilagiile vegetale sunt poliglucide neomogene cu grade de polimerizare diferite, puternic ramificate. Ele au proprietatea de a reine apa, formnd cleiuri, soluii mucilaginoase sau geluri . Ele dau prin hidroliz galactoz, manoz, glucoz, ramnoz, Lfucoz, xiloz, acizi glucuronic i galacturonic. Gumele sunt secretate de anumite plante sau arbori (salcmi, cirei, viini, pruni, migdali) n mod spontan sau dup traumatizare. Ele se deosebesc de rini prin solubilitate n alcool. Se ntlnesc de asemenea i n seminele de in, lucern, trifoi, cnep, secar. Cea mai cunoscut gum vegetal este guma arabic. Mucilagiile sunt rspndite n unele semine (in, lucern, mutar), n unele alge i au rolul de a reine apa, mpiedicnd deshidratarea acestora. Datorit coninutului ridicat n pentoze, ele pot fi identificate cu uurin prin reacii caracteristice acestora.
83
Poliglucide neomogene cu acizi uronici din regnul animal (mucopoliglucide) Mucopoliglucidele sunt poliglucide neomogene, care se gsesc n organismul animal i sunt constituite dintr-o component glucidic (predominant) i o component proteic (n proporie redus) legate ntre ele prin legturi electrovalente. Mucopoliglucidele sunt larg rspndite n esutul conjunctiv, cruia i confer consisten i flexibilitate i au un rol biochimic deosebit: - n cimentarea esuturilor; - ca ageni de lubrefiere a articulaiilor; - controleaz compoziia electroliilor din lichidele extracelulare i intervin n procesul de calcifiere; - protejeaz ovulul fecundat, precum i diferitelor mucoase; - acioneaz ca anticoagulant al sngelui; - constituie o barier contra ptrunderii microbilor n organism. Mucopoliglucidele sunt constituite prin condensarea a dou tipuri de uniti glucidice: aminoglucid (glucozamina sau galactozamina) i acid uronic (glucuronic sau galacturonic). Mucopoliglucidele se mpart n dou categorii: cu caracter acid (care conin acizi uronici) i cu caracter neutru. Mucopoliglucide acide Sunt poliglucide cu caracter acid datorit prezenei n molecul a gruprilor -COOH din acizii uronici, precum i a unor resturi SO3H legate fie esteric prin intermediul unui hidroxil alcoolic al glucidei, fie prin intermediul gruprii NH2 a aminoglucidei. Sunt macromolecule alctuite din uniti diglucidice formate din acid glucuronic i hexozamin, ntre care se stabilesc legturi 1,3 - - glicozidice. Hexozamina se poate prezenta ca derivat N - acetilat sau N - sulfurat. Cele mai importante mucopoliglucide sunt acidul hialuronic, condroitin sulfaii i heparina. Acidul hialuronic a fost izolat pentru prima oar din umoarea vitroas, iar ulterior din lichidul sinovial, cordonul ombilical, cornee, derm. Este component a esutului conjunctiv, unde constituie datorit structurii sale puternic polimerizate o barier contra ptrunderii germenilor patogeni. Se caracterizeaz printr-o vscozitate mare i funcioneaz ca un liant tisular situat n spaiile intercelulare, el ndeplinind n acelai timp un rol de aprare mecanic i chimic pentru organismul animal. Macromolecula de acid hialuronic este format din acid glucuronic i N-acetilglucozamina, legate prin legturi 1,3--glucozidice. Unitatea diglucidic (acid hialobiuronic) se leag 1,4--glicozidic de unitatea urmtoare:
Acidul hialuronic are masa molecular de ordinul 106 i poate fi hidrolizat de ctre hialuronidaz, o enzim prezent n spermatozoizi, n veninuri i bacterii patogene (streptococi, stafilococi). Hialuronidazele din spermatozoizi depolimerizeaz acidul hialuronic ce nconjoar ovulul, facilitnd fecundaia. Hialuronidaza din bacterii depolimerizeaz acidul hialuronic din esutul conjunctiv, permind ptrunderea acestora n organism.
84
Condroitin sulfaii sunt poliglucide rspndite n carnea de bovine, cartilagii, tendoane, saliv, plasm. Structura lor este constituit din acid uronic i N-acetil galactozamina, de care este fixat un rest de acid sulfuric la hidroxilul din C4 sau C6. ntre aceste dou componente glucidice se stabilete o legtur 1,3--glicozidic. Unitatea diglucidic (condrozina) se leag prin legturi 1,4--glicozidice de unitatea urmtoare. Exist diferite tipuri de condroitin sulfai (A, B, C) care difer ntre ei prin poziia pe care o ocup radicalul SO3H sau prin acidul uronic prezent. Masele moleculare sunt de ordinul 105. Condroitin sulfaii sunt substane cu vscozitate mare i ndeplinesc un rol important n procesele de calcifiere a cartilagiilor. Heparina este o mucopoliglucid rspndit n lichide i esuturile mamiferelor (ficat, muchi, splin, plmni, snge, rinichi, inim). Heparina este format din acid glucuronic i glucozamin, n care gruprile NH2 i unele grupri hidroxil sunt substituite cu resturi de acid sulfuric - SO3H, iar legturile glicozidice dintre resturile de monoglucide sunt de tipul 1,4 - Heparina are aciune anticoagulant i antilipemic, deoarece activeaz enzima lipoprotein-lipaz. Ea este preparat n cantiti mari din ficatul i plmnii de bovine, sub form amorf sau cristalin. Mucopoliglucide neutre Mucopoliglucidele grupelor sanguine sunt cele mai importante poliglucide cu caracter neutru. Ele contribuie la specificitatea grupelor sanguine i au fost descoperite n sngele uman. La structura lor particip D-galactoza, L-fucoza, N-acetilglucozamina i Nacetilgalactozamina. Aceste poliglucide au masa molecular de aproximativ 2,6 x 105. Ele se gsesc legate de polipeptide specifice, sub forma de glicoproteide. Substane cu structur similar se gsesc n saliva i n sucul gastric, ceea ce a uurat mult studiul acestora. Imunopoliglucide (poliglucide bacteriene) sunt secretate de ctre fungi, fiind specifice fiecrei specii bacteriene. Numeroase bacterii produc n medii de cultur sau n sngele animalelor poliglucide neomogene , care determin specificitatea imunologic, de aceea sunt denumite i imunopoliglucide. Prin inocularea acestora unui animal, se imprim acestuia imunitate mpotriva infeciilor produse de bateria respectiv. lmunitatea se datorete apariiei n ser a unor anticorpi de natur proteic, api s lupte mpotriva bacteriilor patogene, fie prin coagularea (aglutinarea) proteinelor bacteriene, fie prin dezagregarea (bacterioliza) acestora. Ele sunt constituite din galactoza, glucoz, manoz, ramnoz, precum i cantiti mici de aminoglucide i acizi uronici.
Clasificarea poliglucidelor neomogene cu acizi uronici Conin Mucopoliglucide acide o component glucidic (predominant) i o component proteic (n proporie redus) legate ntre ele prin legturi electrovalente) Componenta glucidic se formeaz prin condensarea a 2 tipuri de uniti glucidice : aminoglucid din animale Condroitin sulfaii, din carnea de bovine, cartilagii, tendoane, saliv, plasm., constituii din acid uronic i N-acetil galactozamina, rol important n calcifierea cartilagiilor. Acidul hialuronic - format din acid glucuronic i Nacetil-glucozamina, legate prin legturi 1,3-glucozidice. Unitatea diglucidic (acid hialobiuronic) se leag 1,4--glicozidic de unitatea urmtoare. n esutul conjunctiv, constituie datorit structurii sale puternic polimerizate o barier contra ptrunderii germenilor patogeni.
85
Mucopoliglucide neutre
Heparina (ficat, muchi, splin, plmni, snge, rinichi, inim). Heparina este format din acid glucuronic i glucozamin, cu resturi de acid sulfuric - SO3H, iar legturile glicozidice dintre resturile de monoglucide sunt de tipul 1,4 - Are aciune anticoagulant i antilipemic, Mucopoliglucide ale grupelor sanguine , conin Dgalactoza, L-fucoza, N-acetilglucozamina i N-acetilgalactozamina, sunt macromolecule. legate de polipeptide specifice, ca glicoproteide. Imunopoliglucide (poliglucide bacteriene), constituite din galactoza, glucoz, manoz, ramnoz, precum i cantiti mici de aminoglucide i acizi uronici.
Bibliografie : LUJERDEAN AUGUSTA, ANDREA VARGA, 2002. Biochimie descriptiva. Ed.Napoca star. Cristina ROU, 2006. Bazele chimei mediului: elemente teoretice si aplicatii practice. Ed. Casa Cartii de Stiinta ROCA E.G., 2004. Biochimie. Ed. USAMV Cluj-Napoca.
2.5. LIPIDE
Cuprins: 2.5.1. Constituia chimic general i clasificare:. Rolul lipidelor n organismele animalelor 2.5.2. CONSTITUENTII DE BAZA AI LIPIDELOR 2.5.2.1. Acizii grai - Acizi saturai: Acid butiric, Acid capronic, Acid caprilic, Acid caprinic, Acid lauric, Acid miristic, Acid palmitic, Acid stearic, Acid arahic, Acid behenic, Acid lignoceric - Acizi nesaturai cu o dubl legtur Acid docenic, Acid dodecenic, Acid palmitoleic, Acid oleic, Acid erucic, Acid nervonic - Acizi nesaturai cu mai multe duble legturi: Acid linoleic, Acid linolenic, Acid arahidonic. - Acizii saturai ramificai: Acid izobutiric, Acid izovalerianic, Acid tuberculostearic(10-metil-stearic). - Hidroxiacizi saturai i nesaturai: Acid cerebronic, Acid ricinoleic, Acid hidroxinervonic Rolul acizilor grai nesaturai Proprietile fizico-chimice ale acizilor grai 2.5.2.2. Alcoolii constitueni ai lipidelor - Alcooli alifatici: Glicerolul. Alcoolii superiori, din ceride: alcoolul cetilic(C16),stearic(C18),cerilic(C26), miricilic(C30). - Alcooli mono- sau polihidroxilici - Alcoolii ciclici: monociclicici - Inozitolul, policiclici - Sterolii. - Aminoalcoolii: Colamina (etanolamina). Colina (derivatul trimetilat al colaminei). Serina hidroxiaminoacid. Sfingozina - amino-diol nesaturat (din sfingolipide). 2.5.3. LIPIDE SIMPLE Gliceridele. Rspndirea gliceridelor. Proprieti fizice i chimice. Importana fiziologic a gliceridelor. Steride. Steroli:Zoosterolii:colesterolul,lanosterolul. Fitosterolii:sitosterolul, stigmasterolul. Micosterolii: ergosterolul Ceride. Cerurilor naturale vegetale, ceara de albine, lanolina i ceara de balen Etolide. Cerurile unor conifere 2.5.4. LIPIDE COMPLEXE Glicerofosfolipide Glicerofosfolipide fr azot. Acizi fosfatidici. Cardiolipina. Inozitofosfatide. Glicerofosfolipide cu azot (cefaline, lecitine, serinfosfatide, plasmalogeni. Rolul glicerofosfolipidelor Sfingolipide Sfingolipide care conin fosfor (sfingomieline) Sfingolipide care nu conin fosfor (glicolipide: cerebrozide, gangliozide i sulfatide).
86
2.5. LIPIDELE
2.5.1. CONSIDERAII GENERALE Lipidele sunt o clas de substane organice naturale, universal rspndite n toate celulele organismelor vii, vegetale i animale. Ele au o nsemntate biologic deosebit, avnd att rol plastic, ct mai ales rol energetic. Lipidele apar n cantiti mai mari n organismele animale i mai mici n cele vegetale. Lipidele animale provin n principal, din hran, dar organismul are capacitatea de ai sintetiza lipidele i pe seama glucidelor sau a protidelor excedentare. Cantitatea de lipide din organism difer n funcie de specia animal. Astfel, la bovine, coninutul n grsime de cca 17%, la cabaline 16,5%, la psri 18%, la ovine 19%, la suine 23% . n regnul vegetal lipidele se ntlnesc n cantiti mai mari n seminele plantelor oleaginoase sub forma aa numitelor uleiuri (de floarea soarelui, in, cnep, soia, msline, ricin, susan, etc). Lipidele se caracterizeaz printr-o heterogenitate deosebit a structurii lor chimice precum i a proprietilor fizico-chimice. Lipidele sunt ns, fr excepie, insolubile n ap, dar solubile n solveni organici (benzen, cloroform, aceton, eter, tetraclorura de carbon), caracteristic prin care se deosebesc net de glucide i protide. n organismele vii lipidele se afl de multe ori asociate cu proteine sub forma unor substane mai mult sau mai puin stabile, numite lipoproteide. 2.5.1.1. Constituia chimic general i clasificare Lipidele sunt esteri ai acizilor grai saturai sau nesaturai cu diferii alcooli (monohidroxilici, polihidroxilici, aciclici sau ciclici). Ele conin n molecula lor radicali de acizi grai, constituii din catene lungi de atomi de carbon, care imprim lipidelor un caracter hidrofob, apolar, deci proprietatea de a fi insolubile n ap. n funcie de localizarea lor intracelular, lipidele se clasific n dou categorii: lipide de constituie (de structur) i lipide de rezerv. Lipidele de constituie se gsesc n citoplasma celulelor i ndeplinesc un rol plastic, deoarece particip la meninerea structurii celulelor. Ele sunt lipide complexe, avnd compoziie constant, care nu depinde de hrana pe care o primete organismul. Lipidele de rezerv sunt localizate n esutul adipos i constituie o surs energetic a organismului. Ele de obicei sunt de origine exogen, provenind n principal din hran sau din transformarea metabolic glucidelor i protidelor. Lipidele de rezerv prezint variaii cantitative mari, n funcie de factorii alimentari i fiziologici. Dup constituia chimic, lipidele se clasific n dou grupe: simple i complexe. Lipidele simple sunt substane ternare formate din C, H i O. Lipidele complexe conin pe lng C, H i O i alte elemente ca P i N sau N i S. CLASIFICAREA LIPIDELOR LIPIDE SIMPLE gliceride, steride, ceride, etolide. LIPIDE glicerofosfolipide fr N acid fosfatidic i COMPLEXE (conin P) inozitofosfatidic cu N cefaline, lecitine, serinfosfatide, plasmalogeni sfingolipide cu P sfingomieline (conin N) fr P glicolipide, cerebrozide, sulfatide, gangliozide
87
ROLUL LIPIDELOR N ORGANISMELE ANIMALELOR Lipidele sunt constitueni ai organismelor animalelor, ndeplinind o serie de funcii: - constituie o surs energetic esenial pentru organisme, deoarece un gram de lipide metabolizat produce 9,3 Kcal. Aceast valoare este superioar fa de cele 4,1 Kcal furnizate de un gram glucide; - intr n constituia componentelor celulare, deci ndeplinesc un rol plastic, intervenind n reglarea permeabilitii transportului prin biomembrane; - ndeplinesc funcia de transport a substanelor glicosolubile (vitamine, hormoni, acizi grai eseniali) prin lichidele biologice. - ndeplinesc rolul de material izolant localizat n esutul subcutanat sau n jurul diferitelor organe, asigurnd protecia mecanic i termic. O importan deosebit au lipidele pentru mamiferele marine, asigurnd elasticitatea dermei, iar pentru psrile de ap asigur impermeabilitatea penajului. - intervin n diferite procese metabolice care au loc cu schimbri eseniale de energie.
2.5.2.CONSTITUENI DE BAZ AI LIPIDELOR n structura chimic a lipidelor intr dou tipuri de componente, care se unesc esteric: - o component acid constituit din acizi grai, - o component alcoolic constituit din diferite tipuri de alcooli. 2.5.2.1. ACIZII GRAI Acizii grai sunt acizi organici, care intr n constituia lipidelor. sunt acizi monocarboxilici cu numr par de atomi de carbon cuprins ntre 4 i 30, cu caten, saturat sau nesaturat liniar, sau, n proporie redus, cu caten ramificat sau ciclic, hidroxiacizi sau cetoacizi. Formula general a acizilor grai saturai este urmtoarea: R (CH2 )n COOH, n=2 30
n scrierea simplificat a formulelor acizilor grai, lanul hidrocarburic este redat printr-o linie n zig-zag, fiecare col corespunznd unei grupe metilenice. CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 COOH H3C 16 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2
1
COOH
88
-8 -1,5
CH3-(CH2)2-COOH CH3-(CH2)4-COOH
n grsimile lapte
din
+16,5 Acid caprilic CH3-(CH2)6-COOH +31 Acid caprinic CH3-(CH2)8-COOH +44 Acid lauric CH3-(CH2)10-COOH +54 Acid miristic CH3-(CH2)12-COOH +63 Acid palmitic CH3-(CH2)14-COOH +70 Acid stearic CH3-(CH2)16-COOH +76 Acid arahic CH3-(CH2)18-COOH +80 Acid behenic CH3-(CH2)20-COOH +84 Acid lignoceric CH3-(CH2)22-COOH nesaturai cu o dubl legtur 9:10 poziia dublei legturi Acid docenic Acid dodecenic 9:10 +1 Acid palmitoleic 9:10 +13 Acid oleic 9:10 +33,5 9:10 Acid erucic +42 Acid nervonic 15:16
n grsimile din lapte n untul de cocos n grsimile animale i n uleiuri vegetale n cerebrozide
Acizi nesaturai cu mai multe duble legturi -6 9:10; 12:13 poziia dublei legturi 18 Acid linoleic -14 18 Acid linolenic 9:10; 12:13; 15:16 -50 20 Acid arahidonic 8:9; 11:12; 14:15 Acizii saturai ramificai 4 Acid izobutiric -47 CH3
n unele uleiuri
Hidroxi - acizi saturai i nesaturai +100 CH3(CH2)21CH-OHCOOH n cerebrozide 24 Acid cerebronic +7,7 18 Acid ricinoleic CH3(CH2)5CH-CH2CH=CH-(CH2)7-COOH n uleiul de OH ricin +65 24 Acid hidroxinervonic CH3(CH2)7CH=CH-(CH2)12-CH-COOH OH n cerebrozide
89
Rspndirea acizilor grai Cei mai rspndii acizi grai sunt acidul palmitic i acidul stearic, nelipsii din toate grsimile vegetale i animale. Acidul palmitic formeaz pn la 50% din totalul acizilor grai din grsimile animale, 25% n grsimile din lapte i 10% n uleiurile vegetale. Acidul stearic se gsete n grsimile mamiferelor, n special n seul rumegtoarelor. Dintre acizii grai nesaturai cel mai rspndit este: Acidul oleic, care se gsete n uleiul fructelor oleaginoase (80%),n graminee, rozacee, compozite (30-60%),n uleiul de in (15-25%) i n grsimi animale (40-60%). Acidul palmitoleic apare n grsimea de om (5%), n grsimea animalelor acvatice (1520%),n lapte i n uleiuri vegetale. Acidul erucic a fost semnalat n uleiul de rapi i mutar. Acidul nervonic n structura cerebrozidelor. Dintre acizii grai cu mai multe duble legturi, Acidul linoleic se gsete n uleiul de msline, n uleiul de in (25-30%) i n cantiti mici n grsimi animale. Acidul linolenic se gsete n uleiul de in (40%), Acidul arahidonic este prezent n proporie de 20% n lipidele complexe de origine animal (creier, ficat i grsimi de rezerv). Proprietile fizico-chimice ale acizilor grai Acizii grai saturai sunt acizii solizi, cu excepia celor inferiori, care sunt lichizi. Punctele de topire cresc cu lungimea lanului. Acizii grai nesaturai sunt lichizi la temperatura ambiant cu excepia acidului erucic i nervonic. Punctele de topire descresc cu gradul de nesaturare. Solubilitatea n ap a acestor acizi scade cu creterea lanului hidrocarburic. Acest lan imprim moleculei un caracter hidrofob. Dac se toarn un acid gras pe suprafaa apei, el va forma un film monomolecular, moleculele fiind orientate perpendicular pe suprafaa apei cu gruparea COOH ndreptat spre ap. Acizii grai nesaturai prezint izomerie geometric, determinat de existena dublelor legturi, cu izomeri cis-trans . Acizii naturali apar ndeosebi n forma cis. H / H3 C (CH2)7 C Acid elaidic (trans) C (CH2)7 COOH / H ACIZII GRAI SATURAI sunt mai puin reactivi. Acizii grai saturai prezint proprietile gruprii COOH i anume: A) FORMEAZ SRURI CU HIDROXIZII: R COOH + NaOH R COONa + H2O Srurile acizilor grai se numesc spunuri. Spunurile solubile (de Na, K) sunt ageni de emulsionare. Spunurile de Ca i Mg sunt insolubile. B) FORMEAZ ESTERI CU ALCOOLII, conform reaciei: O O // // RC + HO R1 RC + H2O \ \ OH O R1 90 H C (CH2)7 CH3 H C (CH2)7 COOH Acid oleic (cis)
ACIZII GRAI NESATURAI sunt foarte reactivi, datorit dublelor legturi. REACII DE ADIIE: a) prin adiie de hidrogen,acizii grai nesaturai se transform n acizi grai saturai:
H2
CH3 (CH2)7 CH = CH (CH2)7 COOH CH3 (CH2)16 COOH Acid oleic Acid stearic b) prin adiie de halogeni (Br, I, Cl) se transform n derivaii dihalogenai ai acizilor grai saturai:
I2
CH3(CH2)7CHCH(CH2)7COOH I I acid diiodstearic c) se autooxideaz fixnd oxigen molecular sub form peroxidic (ROO-) la un atom nvecinat dublei legturi. Peroxizii acioneaz asupra altor molecule oxidndule, iar n urma unor reacii n lan se obin epoxizi, aldehide i cetone. Rolul acizilor grai nesaturai - ACIZII GRAI NESATURAI cu dou sau mai multe duble legturi (linoleic, linolenic i arahidonic) ndeplinesc un rol deosebit de important n nutriia animal, deoarece organismele animale nu i pot sintetiza sau i sintetizeaz n cantiti insuficiente. Din acest motiv acizii linoleic, linolenic i arahidonic sunt denumii i acizi grai eseniali, cunoscui i sub denumirea de vitamin F. Acizii linoleic i linolenic se gsesc numai n regnul vegetal, deci trebuie procurai prin hran, iar acidul arahidonic poate fi sintetizat de ctre organismul animal numai din acizii linoleic i linolenic. - Ei ndeplinesc n organism diferite funciuni: particip la formarea Membranelor celulare, intervin n metabolismul mitocondrial, intr n structura fosfolipidelor, sunt precursori ai prostaglandinelor, intervin n buna funcionare a pielii (previn dermatitele i uscarea acesteia). Carena n acizi grai eseniali se manifest prin lipsa de vitalitate la nou-nscut, ncetarea creterii, diminuarea capacitii de reproducie, precum i apariia de eczeme. 2.5.2.2. ALCOOLII CONSTITUENI AI LIPIDELOR. Alcoolii care intr n constituia lipidelor pot s fie: alcooli alifatici, mono- sau polihidroxilici, ciclici, sau din categoria aminoalcoolilor. H2C OH Alcooli alifatici 1. Glicerolul (propantriol): H C OH cel mai important i mai rspndit alcool alifatic, intr n structura lipidelor simple i a unor H2 C OH Glicerol lipide complexe (glicerofosfolipide). 2. Alcoolii superiori au o simpl grupare hidroxilic n molecul i o caten format dintr-un numr par de atomi de carbon. Ei intr n structura ceridelor (lipide simple). Cei mai importani alcooli superiori sunt: alcoolul cetilic (C16), alc. stearic (C18), alc. cerilic (C26), alc. miricilic (C30). Alcoolii ciclici. n structura unor lipide simple sau complexe sunt prezeni alcooli monociclici de tipul inozitolului sau policiclici de tipul sterolilor. Inozitolul, un hexitol ciclic, apare n structura inozitfosfatidelor (lipide complexe). Sterolii sunt alcooli policiclici, care deriv de la structura ciclic de baz, numit steran. 91 CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH Acid oleic
Sterolii se caracterizeaz prin prezena n poziia 3 a unei grupri hidroxil, iar n poziia 17 a unei catene laterale formate din 8-10 atomi de carbon, ceea ce confer acestora o diversitate structural i funcional.
12 11 1 2 A 3 4 5 6 10 B 7 9 8 C 13 14 17 D 16 15
Ste ran (cicl opentanperhidr ofenan tren) Aminoalcoolii Sunt compui cu funciuni mixte, care conin n molecul grupri hidroxilice i grupri amino. Cei mai importani aminoalcooli sunt: Colamina (etanolamina) i colina (derivatul trimetilat al colaminei), - particip la sinteza lipidelor complexe sub form de derivai fosforilai: fosforil colamina i fosforil colina. CH3 +/ H2 C OH HO CH2 CH2 N CH3 \ H2 C NH2 CH3 Colamina Colina
HO
CH3
Fosforilcolamina Fosforilcolina Serina este un hidroxiaminoacid, care apare n structura unor lipide complexe. HO CH2 CH COOH HO CH2 CH2 NH2 -CO2 NH2 Serina Colamina Prin oxidare se transform n colamin. Sfingozina este un amino-diol nesaturat cu 18 atomi de carbon. Intr n structura lipidelor complexe (sfingolipide). H2 C OH H C NH2 CH3 (CH2)12 CH = CH C OH Sfingozina H
2.5.3.
LIPIDE SIMPLE
Lipidele simple sunt substane ternare, coninnd C, H i O. Ele sunt esteri formai din acizi i alcooli. Sunt cele mai rspndite lipide, fiind componente principale ale lipidelor de rezerv. 92
Gliceridele Gliceridele sau acilglicerolii sunt lipide simple, n constituia crora intr glicerolul i acizi grai. Din punct de vedere chimic sunt esteri ai glicerolului cu diferii acizi grai. Reacia de esterificare este:
H2C OH H C OH H2C OH
Glicerol
Dup numrul grupelor OH esterificate din glicerol, gliceridele sunt de 3 feluri: - monogliceride (monoacilgliceroli); - digliceride (diacilgliceroli); - trigliceride (triacilgliceroli). O // H2 C O C R OHC OH H2 C OH Monoglicerida O // H2 C O C R O // H C O C R H2 C OH Diglicerida O // H2 C O C R O // H C O C R O // H2 C O C R Trigliderida
Dac la esterificare particip un singur acid gras, se formeaz gliceride simple. Trigliceridele conin, doi sau trei acizi grai diferii, de aceea sunt gliceride mixte. Grsimile naturale sunt ntotdeauna amestecuri de trigliceride mixte. Cei mai rspndii acizi grai n structura gliceridelor sunt acidul oleic, acidul palmitic i acidul stearic. Nomenclatura gliceridelor ine seama de felul i numrul acizilor grai, ce esterific glicerolul. Astfel, tristearina conine trei resturi de acid stearic, oleodipalmitina conine un rest de acid oleic i dou resturi de acid palmitic, palmitostearina conine un rest de acid palmitic, unul de acid oleic,unul de acid stearic. H2 C O CO (CH2)7 CH = CH (CH2)7 CH3 HC O CO (CH2)14 CH3 H2 C O CO (CH2)14 CH3 Oleodipalmitina H2 C OCO (CH2)14 CH3 HC OCO (CH2)7 CH = CH (CH2 )7 - CH3 H2 C OCO (CH2)16 CH3 Palmitoleostearina
93
Rspndirea gliceridelor. Gliceridele se gsesc n cantiti mari n organismele animale sub form de gliceride de rezerv, precum i n unele semine i fructe. n cantiti mici apar n structura celulei, ca gliceride de constituie. Gliceridele de rezerv se gsesc libere n celul, constituind o surs energetic important i imediat pentru organism. Surplusul de gliceride se depoziteaz n esutul adipos. Gliceridele de constituie sunt legate de anumite formaiuni sau structuri celulare (membrane, particule subcelulare). Compoziia n trigliceride (%) din esutul adipos al unor specii de animale: Triglicerida Specia Bovine Ovine Suine Oleopalmitostearina 32 27 28 Palmitodioleina 23 52 47 Oleodipalmitina 14 5 12 Stearodioleina 11 7 7 Dipalmitostearina 8 2 3 Palmitodistearina 6 2 2 Compoziia trigliceridelor din esutul adipos variaz n funcie de specie, organ, vrsta i alimentaia animalelor. Gliceridele din lapte conin n structura lor acizi grai cu caten scurt (C4-C12). Aceti acizi grai inferiori provin din transformarea acizilor grai superiori (C18) n glanda mamar. n regnul vegetal, grsimile se acumuleaz n pericarpul unor fructe (msline), cel mai des n cotiledoane (floarea soarelui, in, arahide) i n embrionii cerealelor. Proprieti fizice. Gliceridele sunt substane incolore, insolubile n ap, solubile n solveni organici (aceton, sulfur de carbon, eter, cloroform, benzen). Ele nu au gust i miros, cu excepia tributirinei. Gradul de consisten al gliceridelor este diferit n funcie de natura i proporia acizilor grai constitueni. Astfel, gliceridele pot fi: - uleiuri de origine vegetal, care sunt lichide la temperatura obinuit, deoarece conin cu preponderen acizi grai nesaturai; - grsimi i unturi de origine animal, cu punct de topire 20o i 30o C; - seuri, de origine animal, solide cu punct de topire peste 35oC i conin cu preponderen acizi grai saturai. Gliceridele pot prezenta activitatea optic,cnd conin n molecul un carbon asimetric. Proprieti chimice. Gliceridele, fiind esteri, prezint att proprieti datorite legturii esterice, ct i datorite constituenilor (acizi grai i glicerol). a) Proprieti datorit legturii esterice 1. Hidroliza acid sau enzimatic (lipaze) d natere la glicerol i acizi grai:
94
Hidroliza enzimatic are loc sub influena lipazelor pancreatice n organismele animale, iar n plante i microorganisme, a lipazelor specifice. Procesul decurge n etape, formndu-se urmtorii compui: lipaze lipaze triglicerid diglicerid monoglicerid glicerol acid gras acid gras acid gras 2. Saponificarea este procesul de hidroliz alcalin a gliceridelor n urma creia rezult glicerol i srurile acizilor grai, numite spunuri. Hidroxizii utilizai sunt cei alcalini (NaOH, KOH) i alcalino pmntoi [Ca(OH)2, Ba(OH)2].
O + // 3R C \ OK
Triglicerida Glicerol Spun Spunurile de sodiu sunt solide, iar cele de potasiu sunt moi, ambele fiind uor solubile n ap. Spunurile de calciu sau magneziu sunt insolubile n ap. Spunurile formeaz emulsii cu grsimile i alte substane, proprietate datorit creia sunt ntrebuinate la splat. Pentru caracterizarea uleiurilor i grsimilor se folosete indicele de saponificare, care reprezint numrul de mg de hidroxid de potasiu necesar saponificrii unei cantiti de 1 g grsime sau ulei. Cunoscnd valoarea acestui indice, se poate calcula masa molecular medie (M) a unei gliceride. b) Reacii la nivelul catenei acizilor grai 1. Hidrogenarea. Gliceridele care conin n molecul acizi grai nesaturai, adiioneaz hidrogen la dublele legturi. Reacia se petrece la temperatur ridicat (200oC) i n prezen de catalizatori (nichel, paladiu). Prin hidrogenare uleiurile se transform, astfel, n tristearin Pe acest procedeu se bazeaz obinerea margarinei din uleiuri vegetale (floarea soarelui, soia, bumbac, etc), iar corectarea proprietilor organoleptice se realizeaz prin adugarea unor ingredieni (lapte, sare, arome, vitamine). O O // // H2 C O C (CH2)7 CH = CH (CH2 )7 CH3 H2 C O C (CH2 )16 CH3 O O // +3H2 // HC O C (CH2)7 CH = CH (CH2)7 CH3 ------> HC O C (CH2)16 CH3 O O // // H2 C O C (CH2)7 CH = CH (CH2 )7 CH3 H2 C O C (CH2)16 CH3 Trioleina Tristearina 2. Halogenarea. Gliceridele nesaturate pot adiiona halogeni la dublele legturi etilenice. Pentru fiecare dubl legtur se adiioneaz doi atomi de halogen. Cantitatea de halogeni adiionat este direct proporional cu gradul de nesaturare a gliceridei. De exemplu trioleina adiioneaz 6 atomi de iod i se transform n tristearin hexaiodurat:
95
H2COCO(CH2)7CH = CH(CH2)7CH3 H2COCO(CH2)7CHCH(CH2)7-CH3 +3 I2 I I HCOCO(CH2)7CH = CH(CH2)7CH3 ----------> HCOCO(CH2)7CHCH(CH2)7-CH3 I I H2COCO(CH2)7CH = CH(CH2)7CH3 H2COCO(CH2)7CHCH(CH2)7-CH3
I I Trioleina Tristearina hexaiodurat Indicele de iod (Ii ) este o msur a gradului de nesaturare a unei gliceride i prezint numrul de grame de iod fixate la 100 g de grsime. Valoarea acestui indice ne permite s tragem concluzii asupra structurii acizilor grai din constituia gliceridei. Uleiurile cu un grad mare de nesaturare au indice de iod foarte ridicat. Ele se numesc uleiuri sicative deoarece ntinse ntr-un strat subire se usuc repede, datorit formrii unor produi de oxidare i polimerizare. n tabelul de mai jos sunt redai indicii de saponificare (mg KOH / 1 g grsime) i indicii de iod (g iod fixate la 100 g de grsime) pentru cteva gliceride diferite: Indicii de saponificare Indicii de iod Gliceride IS(mg/g) II (g/100 g) Slnin (suine) 191 202 54 69 Seu (ovine) 190 196 32 50 Unt (vac) 220 240 26 38 Ulei de in 190 196 170 202 Ulei de soia 190 197 115 145 3. Rncezirea. Gliceridele expuse timp ndelungat aciunii unor ageni fizici (lumin, aer, cldur, umezeal) sufer un proces de degradare chimic care modific proprietile organoleptice ale acestora (miros i gust caracteristic, neplcut) fcndu-le neutilizabile n alimentaie. Fenomenul poart numele de rncezire i const ntr-o hidroliz parial n glicerol i acizi grai, urmat de oxidarea acestor compui. Rncezirea hidrolitic const n hidroliza lent a gliceridelor sub aciunea umezelii i a enzimelor (lipazice) produse de bacteriile contaminate. n aceste condiii apar acizii grai liberi i crete indicele de aciditate a grsimii. HOH Glicerid R COOH (acizi grai) + glicerol + monoacil i diacil glicerol Rncezirea oxidativ are loc sub aciunea oxigenului din aer i a luminii. n aceste condiii acizii grai nesaturai liberi sau cei din gliceride sunt oxidai la nivelul dublelor legturi cu formare de peroxizi (autooxidare). Aceti peroxizi sunt instabili i se descompun, dnd natere la o serie de reacii cu formare de hidroacizi, aldehide i cetone cu gust i miros neplcut. Importana fiziologic a gliceridelor. Gliceridele ndeplinesc n organismele animale o serie de funcii importante: - Gliceridele constituie rezerv principal de energie, ntruct prin degradarea lor se elibereaz cea mai mare cantitate de energie/mol de substan. Aceast rezerv se consum n condiiile unei alimentaii srace n glucide i se reface pe seama unui regim alimentar bogat n glucide; - Gliceridele contribuie la izolarea mecanic i termic a diferitelor organe, deci la protecia acestora; - Gliceridele formeaz cu proteinele complexe de tipul chilomicronilor i lipoproteinelor circulante, care servesc la transportul acizilor grai n organism.
96
Steroli i steride Steridele sunt lipide simple, larg rspndite n natur, fiind prezente n cantiti mici n esuturile animale i vegetale. Acizii grai care intr n alctuirea steridelor sunt de obicei acidul palmitic, stearic i oleic. Sterolii naturali au structur steroidic i prezint cteva caracteristici commune: - n poziia 3 conin cte o grupare hidroxilic; - n poziiile 10 i 13 au cte o grupare metil - CH3; - n poziia 5 au dubl legtur (excepie lanosterolului); - n poziia 17 se gsete o caten lateral de lungime variabil (8-10 atomi de C); - unii steroli mai conin duble legturi, fie n ciclul B, fie n catena lateral. Formula unui sterol arat deci, astfel:
18 12
R
17 16
CH3
11 13 19
1 2 3 HO 4
CH3
9
C
14 8
D
15
A
5
10
B
7
Sterol
STERID - H2O O R OC
Diferitele tipuri de steride se deosebesc ntre ele prin: - natura acidului gras; - natura substituenilor din policiclu, inclusive a catenei laterale din C17; - gradul de nesaturate al sterolului. Steridele se clasific dup proveniena lor n: a) zoosteride (din regnul animal); b) fitosteride (din regnul vegetal); c) micosteride (din drojdii i ciuperci).
97
Zoosterolii se gsesc n regnul animal n cantiti mici n toate celulele. n cantitate mai mare apar n glbenuul de ou, calculi biliari, icre, capsule suprarenale i n lanolin. Zoosterolii cei mai importani sunt colesterolul i lanosterolul:
OH
Colesterolul Colesterolul este foarte rspndit n natur, att liber ct i esterificat i a fost izolat pentru prima oar din calculi biliari, unde se gsete n proporie de pn la 90%. Se gsete n toate celulele organismului animal, iar n cantitate mare n glandele suprarenale. n regnul vegetal a fost semnalizat prezena colesterolului n anumite alge. Se prezint sub form de cristale albe strlucitoare, insolubile n ap, solubile n solveni organici. Este optic activ (levogir) ntruct conine 8 C asimetrici. Expus razelor ultraviolete colesterolul se transform n vitamina D3 (antirahitic). Iniial se formeaz 7-dehidrocolesterolul n ficat sub aciunea unei dehidrogenaze, care ajungnd n piele se comport ca o provitamin, transformndu-se n vitamina D3 (antirahitic). Dehidrogenaz Colesterol 7 dehidrocolesterol U.V.
vitamina D3 (ficat) (piele) Cantitatea de colesterol din snge variaz la diferite specii de animale ntre 125-140 mg%, iar 80% din aceast cantitate este esterificat cu acizi grai. Forma de eliminare a colesterolului este coprosterolul care se formeaz prin reducerea (hidrogenarea) acestuia sub aciunea bacteriilor din intestin. El este eliminat prin fecale. n stri patologice colesterolul din bil formeaz calculii biliari, bila nu mai poate trece n intestin ci se vars n snge i apare icterul. Colesterolul are o serie de funciuni biochimice n organismele animale: Colesterolul contribuie la reglarea permeabilitii membranelor fiind un constituent al acestora; Colesterolul este antitoxic i antihemolitic neutraliznd efectul unor toxine sau inhibnd aciunea hemolitic a unor substane ca saponinele (digitonina) i lizolecitinele; Colesterolul contribuie la resorbia acizilor grai formnd cu acetia esteri; Colesterolul funcioneaz ca activator al acizilor biliari i al hormonilor cu structur steroidic precum i al vitaminei D3. Lanosterolul este un zoosterol existent n lanolin, respectiv n grsimi de pe prul animalelor, n special pe lna ovinelor. Fa de colesterol difer prin prezena a 4 grupri metil i a dou duble legturi: C8=C9 i C24=C25. a) Fitosterolii cei mai importani sunt sitosterolul i stigmasterolul. Ei se deosebesc de colesterol prin catena lateral.Organismul animal nu poate valorifica fitosteridele, care se elimin netransformate.
98
b) Micosterolii se gsesc n drojdii i mucegaiuri. Ergosterolul este cel mai important micosterol separat din Secale cornutum (cornul secarei), din drojdia de bere, ciuperci, glbenuul de ou. n cantiti mici nsoete colesterolul n esuturile animale. Ergosterolul este o substan alb, cristalin, insolubil n solveni organici. Sub aciunea luminii i a razelor ultraviolete se transform n vitamina D2 (antirahitic), deci ergosterolul este provitamin D. Acizii biliari Ficatul vertebratelor secret o serie de acizi liposolubili, care se gsesc n bil (secreia intern a ficatului) i care se numesc acizi biliari. Ei sunt nrudii cu sterolii din punct de vedere chimic, coninnd n molecul un nucleu steranic. Au 24 atomi de carbon n molecul, catena lateral este scurtat prin oxidare i posed o grupare carboxil, iar n nucleu conin una, dou sau trei grupe hidroxilice. Aceti hidroxiacizi deriv ipotetic de la acidul colanic: Cei mai importani acizi biliari sunt acidul colic, acidul dezoxicolic, acidul litocolic i acidul chenodezoxicolic: Acizii biliari liberi sunt substane cristaline, greu solubile n ap. Ei se gsesc n bil, conjugai cu glicocolul i taurina. O H C23H36(OH)3 COOH + H2NCH2COOH C23H36(OH)3CNCH2COOH + H2 O Acid colic Glicocol Acid glicocolic
O H C23H36(OH)3 COOH+H2NCH2CH2SO3 HC23H36(OH)3CNCH2CH2SO3 H+ + H2O Acid colic Taurina Acid taurocolic Srurile acizilor biliari sunt substane tensioactive, micornd tensiunea superficial dintre dou lichide nemiscibile i au proprietatea de a emulsiona lipidele, favoriznd astfel digestia lor. Lipidele insolubile n ap formeaz cu acizii biliari particule fine cu interior hidrofob i cu exterior hidrofil. Rolul acizilor biliari pentru organismele animale este multiplu i anume: - acioneaz ca ageni de emulsionare a lipidelor la nivelul intestinului facilitnd hidroliza enzimatic a acestora precum i absorbia; - activeaz secreia de enzime pancreatice, n special a lipazelor; - stimuleaz eliberarea enterokinazei, enzim care transform tripsinogenul n tripsin; - intervin n controlul sintezei colesterolului la nivelul intestinului, deci, indirect influeneaz propria lor sintez; - stimuleaz secreia bilei de ctre ficat. Ceride Ceridele sunt esteri ai unor alcooli superiori monovaleni (C16, C18, C26 i C30) cu acizi grai superiori. Ele sunt constitueni principali ai cerurilor naturale. Acestea sunt amestecuri complexe de ceride, acizi i alcooli liberi, precum i alcani (C16 C37) i steride. Cerurile sunt larg rspndite n regnul vegetal, pe frunze, tulpini i fructe, constituind
99
un strat protector mpotriva pierderilor de ap, a umiditii excesive i atacului microbian. Ele pot s apar i n sucul lptos al unor plante. n regnul animal ceridele sunt secretate de glandele cerifere ale insectelor, glandele uropigene ale psrilor i de glandele sebacee ale mamiferelor. Cerurile ntlnite n regnul animal sunt: ceara de albine, lanolina i ceara de balen. Ceridele sunt substane albe, amorfe, unsuroase la pipit, insolubile n ap, solubile n benzen, eter, cloroform. Ele sunt rezistente la ageni chimici, nu sunt oxidabile i sunt foarte greu hidrolizabile. Etolidele Etolidele sunt lipide cu structur ciclic gsite n cerurile unor conifere. Ele sunt formate din moleculele unor hidroxiacizi, cum ar fi acidul hidroxilauric (C12 sabinic) i acidul hidroxipalmitic (C16 iuniperic). n structura unei etolide intr dou molecule ale aceluiai acid, care particip la reacia de esterificare prin cele 2 grupe funcionale diferite - OH i COOH: O R CH R C O CRCHR O O
R CH R COOH H O + OH HOOCRCHR
-2 H 2O
2.5.4. LIPIDELE COMPLEXE Lipidele complexe sunt o clas de lipide cu larg rspndire n toate celulele animale i vegetale. n constituia lor intr pe lng carbon, hidrogen, oxigen i alte elemente, cum ar fi fosfor, azot sau sulf. Datorit faptului c majoritatea conin fosfor sub forma radicalului acidului ortofosforic (H3PO4) se mai numesc fosfatide sau fosfolipide. Ele prezint o structur complex, coninnd: acizi grai i alcooli, i alte componente: acidul fosforic, aminoalcooli, aminoacizi, inozitol sau glucide. Lipidele complexe fac parte din categoria lipidelor de constituie, ntruct particip la formarea unor structuri celulare, au rol n permeabilitatea membranelor. Compoziia lipidelor complexe nu este dependent de alimentaie, ca a gliceridelor, Organismul animal are capacitatea s i le sintetizeze din metabolii relativ simpli. Rspndire. n organismele animale i vegetale lipidele complexe se gsesc asociate cu substane proteice sub form de lipoproteide. Lipidele complexe se gsesc rspndite n special n: creier (30%), n ficat (10%), inim (7%) i glbenu de ou (20%). n regnul vegetal apar n cantiti mai mari n seminele plantelor oleaginoase (soia 2,5%) i n seminele cerealelor (gru 2%). Clasificare. Lipidele complexe se subdivid n funcie de natura alcoolului participant, n dou categorii: glicerofosfolipide i sfingolipide. 100
La rndul lor, fiecare din acestea conin mai multe subgrupe, clasificate pe baza prezenei sau absenei n molecul a azotului i fosforului: Glicerofosfolipide: fr azot: acizi fosfatici i inozitofosfatide; cu azot: cefaline, lecitine, serinfosfatide i plasmalogeni. Sfingolipide:cu fosfor: sfingomieline; fr azot: ceramide, cerebrozide, gangliozide i sulfatid GLICEROFOSFOLIPIDE Glicerofosfolipidele sunt lipide complexe, care deriv de la glicerol i conin n molecul fosfor. Unele conin n molecul i azot. Ele sunt esteri ai glicerolului cu acizi grai saturai i nesaturai i cu acid fosforic. n cele mai multe glicerofosfolipide, de acidul fosforic se leag esteric un alcool (cu sau fr azot) sau un aminoacid. Structura general a unei fosfolipide este urmtoarea:
O // CH2 O C R1 O // CH O C R2 O CH2 O P O X O-
Dintre acizii grai care intr n alctuirea fosfolipidelor, cei saturai (palmitic sau stearic) esterific hidroxilul de la C1, cei nesaturai (oleic sau arahidonic) esterific hidroxilul / C2. Glicerofosfolipidele sunt prezente n toate celulele organismului animal i au rol structural formnd membranele celulare i intracelulare. Cantiti mari din aceste lipide se gsesc n esutul cerebral, mduv, ficat, eritrocite i glbenuul de ou. Glicerofosfolipide fr azot 1. Acizii fosfatidici. Sunt cele mai simple glicerofosfolipide. Prin hidroliz dau natere la glicerol, acizi grai (saturai i nesaturai) i acid fosforic. Dup poziia acidului fosforic n molecul se disting acizi -fosfatidici i -fosfatidici.
O // H2C O C R1 O // HC O C R2 OH / H2C O P O \ OH
O // H2C O C R1 OH / HC O P O \ OH O // H2C O C \ R2
Acid -fosfatidic
Acid -fosfatidic
101
Acizii fosfatidici apar n organismul animal n cantiti mici (5-10% din totalul fosfolipidelor) fiind intermediari n sinteza gliceridelor i a fosfolipidelor. Acizii -fosfatidici nu se gsesc n organismul viu, ei apar prin izomeria acizilor -fosfatidici n timpul izolrii acestora. Cardiolipina este un acid polifosfatidic izolat din muchiul inimii. Prezena ei a fost semnalat i n alte esuturi, precum i n membrana mitocondrial. n constituia cardiolipinei intr trei molecule de glicerol, dou de acid fosforic i patru de acizi grai:
H2C O CO R1 O R2 OC O CH H2C O P | OH
OH OH
OH
OH OH
Fosfatidilinozitolul Inozitofosfatidele sunt rspndite n organismul animal, n muchiul inimii, n ficat, creier i n alte organe. Se prezint sub form de pulberi albe solubile n cloroform i benzen. Cu apa se mbin, formnd o mas cu aspect gelatinos. Glicerofosfolipide cu azot (cefaline, lecitine i serinfosfatide) Sunt lipide complexe alctuite din glicerol, acizi grai, acid fosforic i un aminoalcool sau serin (aminoacid). Aminoalcoolii sunt colamina i colina, care au caracter bazic. ntre serin i aminoalcoolii colamin i colin exist o strns legtur metabolic; compuii amintii pot s se transforme n organismul animal unii n alii. Astfel, serina prin decarboxilare se transform n colamin, care poate s se transforme apoi n colin prin metilare:
I - + 2HI
102
Colina este o substan de mare nsemntate biologic, ntruct este hormon tisular implicat n transmiterea impulsului nervos la muchi. Glicerofosfatidele se prezint sub form de mase unsuroase de culoare alb-glbuie. Conin n molecul o parte hidrofob i una hidrofil, avnd astfel, proprietile fizico-chimice diferite de a gliceridelor. Au proprietatea de a da emulsii stabile cu apa i prezint proprietile substanelor tensioactive. Datorit prezenei acizilor grai nesaturai, ele sunt uor autooxidabile. Au caracter amfoter (reacioneaz att cu acizii, ct i cu bazele). Glicerofosfatidele cu azot solubilizeaz substanele cu caracter hidrofob. 1. Cefalinele (fosfatidiletanolamine). Sunt rspndite n toate celulele organismului animal, fiind asociate cu lecitinele. n cantiti mari, apar n creier (13%), ficat (6%), rinichi (3%), muchi (1%), glbenu (10%) i embrionul seminelor de leguminoase (2%). Cefalinele prin hidroliz dau natere la glicerol, acizi grai (saturai sau nesaturai), acidul fosforic i colamin:
O // H2C O C R1 O // HC O C R2 O
(+)
CH3
103
n organism lecitinele sunt scindate hidrolitic sub aciunea unor enzime, numite fosfolipaze: - fosfolipaza A din veninul de arpe i de albine, acioneaz la nivelul legturii esterice de la C2 cu eliberarea acidului nesaturat (R2 COOH) i formare de lizolecitine. Lizolecitinele posed o aciune puternic hemolizant, afectnd membranele eritrocitare.
Rolul glicerofosfolipidelor Glicerofosfolipidele conin n molecul dou regiuni distincte: - hidrofob (nepolar) reprezentat prin resturile de acizi grai i - hidrofil (polar) reprezentat de radicalii fosforil, fosforilcolamina, fosforilcolina, etc. Se comport ca ageni tensioactivi i particip la - organizarea structural a biomembranelor, unde sunt asociate cu proteinele, - au un rol esenial n procesele de permeabilitate selectiv a biomembranelor, permind intrarea sau ieirea unor anumii metabolii sau ioni. Contribuie la transportul gliceridelor pe cale sanguin sau limfatic. Particip activ la unele procese metabolice, funcionnd ca donori de grupe fosfat. SFINGOLIPIDE Sfingolipidele sunt lipide complexe, care conin n molecul un aminoalcool cu 18 atomi de carbon, SFINGOZINA. n esutul cerebral a fost izolat i omologul su saturat dihidrosfingozina iar din regnul vegetal fitosfingozina. Sfingolipidele conin obligatoriu N, iar unele i P. Acidul gras care intr n constituia lor este legat amidic (R - NH - CO R1) la nivelul gruprii NH2 a moleculei de sfingozina. Acizii grai participani la structura sfingolipidelor conin 24 atomi de carbon, fiind: - saturai (lignoceric); - nesaturai (nervonic); - hidroxiacizi (cerebronic).
Amidele sfingozinelor cu acizi grai se numesc CERAMIDE i au urmtoarea structur:
H2C OH HC NH CO R1 HC CH OH H3C (H2C)12 CH Ceramida Ceramidele au fost identificate n unele organe (ficat, splina, pulmon), precum i n unele ciuperci. Ele pot fi considerate ca intermediari n sinteza sau hidroliza sfingolipidelor. Sfingolipidele se mpart n dou grupe i anume: - sfingolipide care conin fosfor (sfingomieline) i - sfingolipide care nu_conin fosfor (glicolipide: cerebrozide, gangliozide i sulfatide). Sfingolipidele se gsesc distribuite, n special, n esutul cerebral n amestec cu alte substane i particip la constituia membranelor celulare ale esuturilor animale. n cazuri patologice sfingolipidele se pot acumula n esutul nervos, n splin sau ganglioni.
105
Sfingolipidozele sunt maladii ereditare determinate de deficitul n anumite enzime implicate n catabolismul sfingolpidelor (sfingomelilaza, sulfatidaza, -glucozidaza .a.) avnd ca urmare nmagazinarea diferitelor sfingolipide n esutul cerebral. SFINGOMIELINE. Sfingomielinele sunt cele mai importante sfingolipide i cele mai abundente cantitativ. Ele se gsesc n special n esutul nervos i particip la structura tecilor de mielin din axoni, ndeplinind un rol izolator datorit caracterului lor hidrofob. La structura lor chimic particip aminoalcoolul sfingozina, o molecul de acid gras (lignoceric sau nevronic) o molecul de acid fosforic i una de colin (fosforilcolina). Acidul gras se leag amidic de gruparea NH2 a sfingozinei, iar forsforilcolina se leag esteric la gruparea alcoolic primar. Sfingomielinele se prezint sub forma unei mase cristaline de culoare alb, solubile n cloroform i insolubile n acetone i eter etilic. Sunt optic active. n anumite maladii (sfingomielinoze), sfingomielinele apar n anumite organe (splina, ficat) n cantiti mai mari, datorit lipsei unei enzime, care particip la catabolizarea acestora. O CH3 (+) H2C O P O CH2 CH2 N CH3 \ O(-) CH3 HC NH CO R HC HC OH CH3.(CH2)12.CH Sfingomielina
GLICOLIPIDELE. Glicolipidele sunt sfingolipide care nu conin fosfor n molecul. Prin hidroliza total ele dau natere la sfingozin, acid gras i glucide sau derivai ai acestora. Cerebrozide. Sunt glicolipide ce se gsesc n creier, ficat, rinichi, splin, eritrocite i care difer prin natura glucidei prezente n molecula lor. n molecul intr sfingozina, acid gras i hexoze. Glucidele se leag glicozidic de gruparea hidroxilic primar a sfingozinei, iar acidul gras prin legtura amidic de gruparea NH2 a acesteia. Monoglucidele identificate n structura glicolipidelor animale sunt de cele mai multe ori D-glucoza, D-galactoza, Nacetilglucozamina, N-acetigalactozamina, L-fucoza, acidul neuraminic. Acizii grai identificai n cerebrozide conin 24 atomi de carbon i sunt: acidul lignoceric, nervonic, CH2 OH cerebronic i hidroxinevronic. Constituia unei cerebrozide,6 coninnd ca glucid galactoza este urmtoarea: O 5
1 2 4 3
H2C O
HC NH CO R H3C (C H2)12 CH = CH CH OH
Cerebrozida
106
Dup natura acidului gras component se disting urmtoarele cerebrozide: - kerasina (acid lignoceric); - nervona (acid nervonic); - cerebrona (acid cerebronic); - hidoxinervona (acid hidroxinervonic). Cerebrozidele sunt substane albe, cristaline, uor solubile n cloroform i insolubile n eter etilic i eter de petrol. Sunt substane optic active i neutre din punct de vedere chimic. O cerebrozid coninnd doar glucid (nu i acid gras) se numete psihozin. Sulfatide. Se gsesc n esutul nervos. n molecula lor apar resturi de acid sulfuric, care esterific gruparea OH din poziia 2 sau 3 a hexozei. Acizii grai sunt de obicei acidul cerebronic sau lignoceric.
CH2 OH
5 4 3
O
1
Se pare c cerebrozidele din creier se gsesc sub forma de sulfatide. Ele apar n substana alb a creierului, n sinapse, microzomi, mitocondrii i n unele membrane specializate. Gangliozide. Sunt glicolipide n constituia crora intr sfingozina, acid gras (stearic), o oligoglucid sau acid neuraminic. Ele difer deci prin natura i mrimea oligoglucidei constituente, care poate conine glucoza, galactoza, glucozamina, galactozamina, acid neuraminic sau acid sialic. Gangliozidele sunt rspndite n substana cenuie a creierului, ganglionii nervoi, splin i eritrocite. Intr n constituia membranelor celulare n special a celor nervoase, fiind situate la suprafaa extern a acestora. Ele se prezint sub forma unei mase albe, cristaline, uor solubile n cloroform i piridin, insolubile n eter i acetone.
Bibliografie : LUJERDEAN AUGUSTA, ANDREA VARGA, 2002. Biochimie descriptiva. Ed.Napoca star. Cristina ROU, 2006. Bazele chimei mediului: elemente teoretice si aplicatii practice.Ed.Casa Cartii de Stiinta ROCA E.G., 2004. Biochimie. Ed. USAMV Cluj-Napoca.
107
2.6.
Cuprins: 2.6.1. 2.6.2. 2.6.3.
PROTID E
CONSIDERAII GENERALE. Compoziia chimic general i clasificarea protidelor. AMINOACIZI PEPTIDE I POLIPEPTIDE Caracterizare general. Proprietile peptidelor. Peptide i polipeptide naturale 2.6.4. PROTEIDE. Rolul proteidelor n organismele animale. Clasificarea proteidelor. 2.6.5. PROTEINE (HOLOPROTEIDE). Structura chimic. Structura proteinelor. 2.6.5.1. Structura primar a proteinelor 2.6.5.2. Structura secundar a proteinelor. Legturile de hidrogen, Legturile covalente i electrovalente, Forele Wan der Waals.Modelul -helix. Modelul de foaie pliat. Modelul de tip colagen. 2.6.5.3. Structura teriar a proteinelor. 2.6.5.4. Structura cuaternar a proteinelor. Proprietile fizico-chimice. Solubilitatea. Activitatea optic. Denaturarea. Proprietile chimice. Hidroliza. Reacii de culoare. Reacii de precipitare.Precipitarea reversibil. Precipitarea ireversibil. Coagularea. Proprietile biochimice. Descrierea unor tipuri de proteine. Proteine solubile (albumine, globuline, histone, protamine, prolamine, gluteline) Proteine insolubile (colagenele, keratinele, elastinele,fibroina,miozina, fibrinogenul) 2.6.6. HETEROPROTEIDE (PROTEINE CONJUGATE) Metalproteide. Fosfoproteide. Glicoproteide Cromoproteide Cromoproteide porfirinice. Hemoglobina. Mioglobina. Citocromii. Hemenzimele. Cloroplastidele clorofila. Nucleoproteide . Acizi nucleici . Baze azotate pirimidinice (uracilul -U, timina -T, citozina -C). Baze azotate purinice (adenina - A, guanina - G) Nucleozide. Nucleotide. Ribonucleotide. Dezoxiribonucleotide. Structura macromolecular a acizilor nucleici. Structura i proprietile acizilor deoxiribonucleici. Structura primar a ADN. Structura secundar i teriar a ADN. Proprietile fizice i chimice ale ADN.(Denaturarea. Renaturarea. Hibridarea. Hidroliza ADN-ului.) Structura i proprietile acizilor ribonucleici. ARN ribozomal, ARN mesager, ARN de transfer.
108
2.6. PROTIDE
2.6.1. CONSIDERAII GENERALE Protidele sunt componentele primordiale ale materiei vii, fiind constituenii principali ai citoplasmei i nucleului celulelor. Termenul de protid provine de la cuvntul grecesc protos ce nseamn: cel dinti, primul, adic substan de prim importan. Protidele sunt substane naturale de mare importan pentru toate organismele, inferioare i superioare, universal rspndite n organismele animale i vegetale. n regnul animal ele sunt substanele predominante, alctuind 65-70% din substana uscat a animalelor. n regnul vegetal ele se gsesc ntr-un procent mai sczut (2-35%), deoarece substanele predominante ale plantelor sunt glucidele. Protidele, alturi de glucide i lipide au rol esenial n alimentaia omului i animalelor. Compoziia chimic general i clasificarea protidelor Protidele sunt substane cuaternare formate din C, H, O i N. Azotul este un element constitutiv esenial, aprnd sub form aminic NH2. Numeroase protide cu un rol fiziologic important mai conin - S i P, sau i - metale ca Fe, Mg, Cu, Mn, Co, Zn etc. Compoziia procentual elementar a protidelor este urmtoarea: C = 50 55 %, N = 15 17 % O = 20 23 % S = 0 4% H= 6 8% Clasificarea protidelor. Dup complexitatea lor, protidele se mpart n 2 clase mari: protide simple (monoprotide) aminoacizi, care nu dau reacie de hidroliza; poliprotide, care prin hidroliz, dau moleculele din care s-a format poliprotida. Clasificarea protidelor Protide simple Aminoacizi (monoprotide): - oligopeptide (conin pn la 10 aminoacizi) Poliprotide: Poliprotide inferioare (peptide) - polipeptide (cu 10 100 aminoacizi) Poliprotide superioare - holoproteide (proteine) (proteide) - substane constituite numai din aminoacizi macromoleculare, rezultate - heteroproteide (proteine conjugate), din condensarea unui numr cu structur complex coninnd: mare de aminoacizi. - o parte proteic i - o parte neproteic, numit grupare prostetic ( glucid, lipid, acizi nucleici etc.)
2.6.2. AMINOACIZI
Aminoacizii reprezint cele mai simple protide. Ei constituie unitile structurale de baz ale poliprotidelor. Din punct de vedere chimic, aminoacizii sunt substane organice cu funciuni mixte, care conin n molecul o grupare amino NH2, cu caracter bazic i cel puin o grupare carboxil COOH, cu caracter acid. Formula general a unui aminoacid este: R CH COOH NH2 109
Dup poziia pe care o ocup gruparea NH2 fa de gruparea COOH se disting , , , etc aminoacizi: R CH NH2 COOH R CH NH2 CH2 COOH R CH NH2 CH2 CH2 COOH aminoacid
- aminoacid
aminoacid
Aminoacizii naturali, cu mici excepii, sunt aminoacizi. Se gsesc liberi, sub form de derivai sau mai ales sub form de polipeptide. Aminoacizii naturali care particip la structura protidelor sunt n numr de 20-24 i prezint caracteristici comune: - sunt aminoacizi (gruprile funcionale NH2 i COOH grefate pe acelai atom de C; - aminoacizii prezint atomi de carbon asimetrici - sunt optic activi (excepie glicocol); - datorit existenei n molecul a celor dou grupri funcionale, au capacitatea de a reaciona ntre ei prin eliminare de ap i s formeze lanuri polipeptidice. Aminoacizii liberi apar numai n cantiti mici n organismele vegetale i animale. S-au identificat n celule, n lichidele extracelulare i n plasma sanguin, precum i n germenii seminelor de leguminoase i n fructe. 2.6.2.1. Proprietati fizico chimice ale aminoacizilor Aminoacizii sunt substane incolore, cristalizate, majoritatea cu gust dulce. Ei sunt substane uor solubile n ap (cu excepia cisteinei, tirozinei i lizinei) i greu solubile n solveni organici . Aminoacizii disociaz, rezultnd amfioni, deci ei au un caracter amfoter (reacionnd att cu acizii, ct i cu bazele). NH2 R CH \ COOH Molecul nedisociat R CH \ COO Amfion NH3+
n soluie apoas echilibrul dintre moleculele nedisociate i amfioni este deplasat aproape complet spre amfion. n funcie de pH - ul soluiei , aminoacizii pot exista sub trei forme: amfioni (pH neutru); cationi (pH acid) anioni (pH bazic). Aminoacizii manifest proprieti electroforetice, deoarece datorit existenei ionilor n soluiile de aminoacizi, acetia migreaz n cmp electric. n mediu acid aminoacizii migreaz spre catod,
110
n mediu bazic spre anod i nu migreaza la pH neutru. NH3+ NH3+ R CH \ COOAmfion NH2 R CH \ COOAnion
R CH \ COOH Cation
+H
+HO
- H2O
Punctul izoelectric sau izoionic reprezint pH-ul pentru care sarcina electric a moleculelor de aminoacizi dizolvat n ap, este nul. La pH neutru n soluie exist: molecule nedisociate, amfioni, i un numr egal de cationi i anioni, iar aminoacidul nu mai m igreaz n cmp electric (se noteaz cu pHi ). Aminoacizii prezint pHi diferite: -aminoacizii cu caracter acid au pHi n domeniul acid (pHi = 3 - 3,2), -aminoacizii cu caracter bazic au pHi n domeniul alcalin (pHi = 7,5 -11). Aminoacizii monoamino- monocarboxilici au pHi=6, deoarece gruparea -COOH este mai puternic ionizat dect gruparea NH2. Aminoacizii au n molecula unul sau mai muli atomi de carbon asimetrici, cu excepia glicocolului. n consecina, ei prezint activitate optic dextrogir sau levogir. n raport cu orientarea gruprii NH2 fa de carbonul , aminoacizii prezint dou configuraii spaiale L sau D. Configuraia steric este independent de activitatea lor optic, att L-aminoacizii ct i D-aminoacizii putnd fi dextrogiri (+) sau levogiri (-). n scrierea curent a formulelor aminoacizilor gruparea NH2 este scris la dreapta, fr a ine seama de configuraia acesteia. Aminoacizii naturali prezeni n structura protidelor, aparin seriei L (aminoacizi aparinnd seriei D au fost identificai n peptide din antibiotice, n celulele bacteriene i n proteine din esuturi tumorale). Aminoacizii sintetici conin amestecuri racemice din forme L i D. Din acest amestec, organismul animal utilizeaz doar aminoacizii aparinnd seriei L. 2.6.2.2 Proprieti chimice Aminoacizii sunt substane deosebit de reactive, datorit prezenei n molecula lor a gruprilor carboxil COOH i amino NH2. Aminoacizii prezint urmtoarele tipuri de reacii: - reacii la gruparea COOH; - reacii la gruparea NH2; - reacii la ambele grupri funcionale; - reacii la catena lateral. Reacii datorate gruprii funcionale carboxil a) Reacii de disociere Aminoacizii disociaz n soluii apoase, rezultnd anionul aminoacidului respectiv: O // RC + \ OH O // RC \ O(-) Anion
H2O
H3O+
111
b) Reacii cu bazele Aminoacizii reacioneaz cu bazele formnd sruri: +NaOH R HC COOH ------------> R HC COONa + H2O NH2 NH2 Reacii de esterificare R c) HC CO OH + R1OH ------------> R HC COOR1 + H2O Aminoacizii reacioneaz cu alcoolii, obinndu-se esteri de aminoacizi: NH2 NH2 Aminoacid Alcool Ester de aminoacid d) Reacii de formare a clorurilor acide Sub aciunea pentaclorurii de fosfor, PCl5, aminoacizii sunt transformai n cloruri de acizi, care sunt foarte reactive, fiind utilizate pentru sinteza peptidelor. CO Cl ------------> R HC + HCl + POCl3 NH2 Clorura de aminoacid
e) Reacii de decarboxilare Prin decarboxilare aminoacizii se transform n amine: Ba(OH)2 R HC COOH ------------> R CH2 NH2 - CO2 NH2 Aminoacid Amina n organismele animale reaciile de decarboxilare ale aminoacizilor sunt catalizate de enzime (decarboxilaze), iar aminele care rezult n urma acestor reacii se numesc amine biogene, ndeplinind roluri importante n organism (hormoni tisulari), iar altele apar n carnea alterat.
Reacii datorate gruprii funcionale amino a) Reacia cu acizi Gruparea NH2 din molecula de aminoacid accept protoni + la perechea de electroni + neparticipani ai azotului: R HC COOH + H R CH NH3 + H2O NH2 COOH
112
R HC COOH + HCl -------------> astfel, cu acizii vor forma sruri: -HCl NH2 b) Reacia de acilare
Cu clorurile de acizi gruparea amino se acileaz, formndu-se amide substituite la azot. Astfel, glicocolul reacioneaz cu clorura de benzoil dnd natere la acid hipuric: H2C NH2 + Cl CO C6H5 -------------> H2C NH CO - C6H5 -HCl COOH COOH Glicocol Clorur de benzoil Acid hipuric c) Reacia de deaminare Aminoacizii se deamineaz n prezena acidului azotos cu formare de azot molecular i a hidroxiacizilor corespunztori: R CH NH2 COOH Aminoacid R + CH OH + COOH Hidroxiacid
HONO
N2
H2O
Acid azotos
Aceast reacie st la baza metodei Van Slyke de determinare cantitativ a aminoacizilor prin msurarea volumului de azot degajat n timpul reaciei, care este proporional cu concentraia aminoacidului. d) Reacia de condensare cu compui carboxilici (aldehide i cetone) Cu aldehidele aminoacizii se condenseaz, rezultnd baze Schiff: R CH NH2 COOH Aminoacid H / + O=C --------------> \ -H2O H Formaldehid R H / CH N = C \ COOH H Baza Schiff
Pe aceast reacie se bazeaz dozarea volumetric a aminoacizilor (metoda Sorensen) e) Reacia de alchilare Aminoacizii se alchileaz cu iodura de alchil n mediu bazic. Prin metilarea glicocolului se obine derivatul trimetilat al acestuia, numit betain, utilizat ca donor de grupe. CH3 / H2C NH2 + 3 NaOH CH2 N CH3 + 3 ICH3 -----------------> \ + 3 NaI + H2O (-) COOH COO CH3
(+)
113
f) Reacia cu dioxidul de carbon Aminoacizii reacioneaz cu dioxidul de carbon, formnd derivai cu grupare carbamino: R R +HO CH NH2 + CO2 --------------> CH NH COO COOH COOH Aminoacid
+ H2O
Grupare carbamino
Aceast reacie este deosebit de important, ntruct pe ea se bazeaz fixarea CO2 din esuturi la gruprile NH2 ale hemoglobinei i transportul acestuia la plmni.
Reacii datorate ambelor grupri funcionale a) Reacii cu formare de legturi peptidice Aminoacizi reacioneaz ntre ei cu eliminare de ap ntre o grupare COOH a unui aminoacid i o grupare NH2 a unui alt aminoacid. Rezult dipeptide, tripeptide, etc (n funcie de numrul de molecule participante la reacie). Resturile de aminoacizi sunt legate prin legturi peptidice -CO-NHHOOC CH COOH + H2N CH - COOH ------> HOOC CH CO NH CH COOH -H2O R1 R2 R1 R2
Dipeptida
b) Reacii de condensare sub aciunea temperaturii Aminoacizii se pot condensa, formnd compui ciclici. Dac se condenseaz glicocolul se obine 2,5 dicetopiperazina: H H N H CH2 \ COOH + H
\ CO CH2
H Glicocol glicocol
H 2,5 dicetopiperazina
c) Reacii cu srurile metalelor grele Aminoacizii reacioneaz cu srurile metalelor grele (Cu, Ni, Cd, Pb), formnd compleci interni, colorai numii chelai, greu solubili n ap. Astfel, srurile de cupru sunt substane frumos cristalizate de culoare albastr. Compuii colorai ai aminoacizilor cu srurile metalelor grele se folosesc la dozarea cromatografic a aminoacizilor.
114
Reacii datorate catenelor laterale n funcie de natura catenelor laterale R, aminoacizii pot da o serie de reacii specifice: Gruparea hidroxil a serinei i treoninei poate forma esteri cu H3PO4. Serina se fosforileaz cu formarea fosforilserinei. Fosforilserina apare n structura proteinelor din lapte (cazeine). H2C OH CH NH2 + H3PO4 -----------> -H2O COOH Serina H2C O PO3H2 CH NH2 COOH Fosforilserina
Gruparea tiol - SH din cistein se poate oxida i prin cuplare cu alt molecul de cistein formeaz cistina, care are o legtur disulfidic (SS). CH2 SH HS CH2 H2C S S CH2 -2H CH NH2 + HC NH2 HC NH2 HC NH2 +2H COOH COOH COOH COOH Cisteina Cistina Aminoacizii care conin n catena lateral nuclee aromatice dau reacii caracteristice acestor nuclee (nitrare, halogenare, diazotare, etc.)
Principalii aminoacizi naturali. Dei numrul aminoacizilor existeni n natur este foarte mare, relativ puini dintre ei (20-22) au valoare fiziologic deosebit, deoarece particip la formarea poliprotidelor. n funcie de particularitile structurale ale catenei laterale R, aminoacizii se clasific dup cum urmeaz: - aminoacizi aciclici: - neutri (monoaminomonocarboxilici) - acizi (monoaminodicarboxilici) - bazici (diaminomonocarboxilici) - aminoacizi ciclici: - aromatici - heterociclici Structura principalilor aminoacizi constitueni ai proteinelor 1. Aminoacizii aciclici a) Aminoacizi cu caracter neutru. Acetia sunt aminoacizi simpli care conin n molecul o singur grupare carboxil i o singur grupare amino. Catenele laterale a acestora sunt nepolare, hidrofobe. Alturi de denumirea acestora se indic forma prescurtat, format din primele trei litere.
CH3 H2NCH COOH H3C CH3 \ / CH H2N-CH COOH Valina (Val) CH3 \ / CH CH2 H2NCH COOH Leucina (Leu) H3C C2H5 \ / CH H2N CH COOH Izoleucina (Ile) H3C
H2CNH2 COOH
Glicocol (Gli)
Alanina (Ala)
115
Hidroxiaminoacizi. Prezena gruprii hidroxilice n molecul confer polaritate mrit iar, ca urmare, aceti aminoacizi sunt uor solubili n ap. CH3 CH2 OH CH OH H2N CH H2N CH COOH COOH Serina Treonina (Ser) (Tre) Tioaminoacizi sau aminoacizii cu sulf, conin n molecul elementul sulf fie sub form tiolic SH, fie sub form disulfidic SS sau tioeteric S CH3. H2C SH H2N CH COOH Cisteina (Cis) H2C S S CH2 H2N CH H2N CH COOH COOH Cistina (Cis)2 CH2 S CH3 CH2 H2N CH COOH Metionina (Met)
b) Aminoacizii cu caracter acid. Conin n molecul dou grupri carboxil i o grupare amino, ceea ce le confer un caracter acid pronunat.
COOH COOH CH2 CH2 CH2 H N CH H N CH 2 Amidele acestor aminoacizi, respectiv 2 asparagina i glutamina sunt considerate ca aminoacizi i intr n structura proteinelor. COOH COOH Acid aspartic (Asp) Acid glutamic (Glu) CO NH2 CH2 CH2 H2N CH COOH Glutamina (Gln)
116
d)
Aminoacizii cu caracter bazic. NH NH CH 2 NHCNH 22 CH 2 NHCNH (CH 2)2 2)2 (CH HH CH 2N 2N CH COOH COOH Arginina Arginina (Arg) (Arg)
CH NH2 2 2 CH 2 NH (CH 2)2 3)3 (CH HH CH 2N 2N CH COOH COOH Lizina Lizina (Liz) (Liz)
CH NH2 2 2 CH 2 NH HC OH HC OH (CH 2)2 2)2 (CH HH CH 2N 2N CH COOH COOH Hidroxilizina Hidroxilizina (Liz-OH) (Liz-OH)
2. Aminoacizii ciclici Conin n molecul fie nuclee aromatice, fie nuclee heterociclice cu azot. a) Aminoacizii aromatici. Se caracterizeaz prin existena n molecul a unui nucleu benzenic sau fenolic. Din aceast categorie fac parte fenilalanina i tirozina: Aceti aminoacizi particip la structura proteinelor fiind precursori metabolici ai hormonilor tiroidieni(tiroxin) i medulosuprarenali (adrenalina).
COOH H2N CH CH2 COOH H2N CH CH2
NH // NH C \ NH2
OH
b) Aminoacizi Fenil heterociclici. alanina Se caracterizeaz Tirozina prin faptul c, au n molecul un heterociclu cu azot. (Phe) (Tir) N C CH2 CH COOH || || | C C NH2 \ / N | H Histidina (His)
117
Aceti aminoacizi, pe lng faptul c particip la structura proteinelor, prin decarboxilare se pot transforma n amide biogene (histamine i triptamine) care au rolul de hormoni tisulari. n aceast categorie de aminoacizi sunt inclui i imidoacizii: prolina i 4 hidroxi prolina.
COOH N
OH N
COOH
Prolina (Pro)
n aceti aminoacizi gruparea amino particip la formarea ciclului pirolidinic. Ei sunt predominani n proteinele esutului conjunctiv (colagenele din piele, oase, cartilagii, tendoane, oase i solzii de pete).
Aminoacizii neconstitueni ai proteinelor Organismul animal conine o serie de aminoacizi, care nu intr n structura proteinelor, ns sunt constitueni ai unor biomolecule de o importan fiziologic deosebit sau sunt intermediari metabolici a unor procese biochimice eseniale. Dintre acetia amintim: -alanina, ornitina, citrulina, acidul -aminobutiric i dihidroxi fenilalanina. CH2 NH2
CH2 NH2
CH2
CH2
O // CH2 NH C
COOH Alanina
CH2
CH2
\ NH2
H2N CH
CH2
COOH Ornitinna
H2N CH
COOH Citrulina
alanina apare n structura unor dipeptide naturale (carnozina i anserina) precum i n constituia acidului pantotenic (vitamin din complexul B). 118
Ornitina i citrulina sunt aminoacizi cu caracter bazic, intermediari ai ciclului ureogenetic, proces n care se formeaz principalul produs de excreie azotat: ureea. CH2 NH2
OH
CH2
HO
CH2
CH2
H2N CH
COOH Dihidroxifenilalanina (DOPA) Acidul aminobutiric apare n creier, n urma decarboxilrii acidului glutamic i funcioneaz ca blocant al sinapselor. Dihidroxifenilalanina este un intermediar metabolic n sinteza hormonilor medulosuprarenali (adrenalina) i a pigmenilor din piele i pr (melanici). 6.2.4. Rolul i importana aminoacizilor pentru organismele animale Aminoacizii sunt substane de o importan fundamental pentru organismele animale, ntruct ei particip la biosinteza macromoleculelor proteice proprii acestora. Dup provenien i rolul lor, aminoacizii se mpart n dou grupe: - aminoacizi neeseniali, care pot fi sintetizai de ctre organismul animal din intermediari metabolici simpli; - aminoacizi eseniali, care nu pot fi sintetizai de ctre organismul animal, ns sunt absolut indispensabili pentru cretere i dezvoltare. Acetia sunt procurai din hran de origine vegetal. Principalii aminoacizi eseniali i neeseniali: Eseniali Neeseniali Valin Glicocol Leucin Alanin Izoleucin Serin Treonin Cistein Metionin Acid aspartic Lizin Acid glutamic Fenilalanin Arginin Triptofan Tirozin Histidin Hidroxiprolin
119
R1
R2
R1 Dipeptida
R2
R1 CH / \ H2N C O
H O R3 N C CH / \ / \ / \ CH N COOH R2 H
Tripeptida
Tripeptidele rezultate sunt izomere. Numrul de izomeri posibili ai unei peptide crete cu numrul aminoacizilor participani la reacia de sintez. Astfel din doi aminoacizi: glicocol i alanin se pot forma dou dipeptide izomere: glicil alanin i alanil glicina. CH3 CH3 H2NCH2COOH + H2NCH H2NCH2CONHCH COOH COOH Glicocol Alanina Glicil-alanina CH3 H2N CH COOH Alanina CH3 H2N CH CONHCH2 COOH Alanil-glicina
Glicocol
Acestea au o structur diferit, deci i proprieti diferite. Din 4 aminoacizi pot rezulta 24 tetrapeptide izomere, din 6 aminoacizi se obin 720 hexapeptide izomere, etc. n orice peptid aminoacizii terminali posed fie o grupare NH2 liber (aminoacid Nterminal), fie o grupare COOH liber (aminoacid C terminal). n mod convenional la reprezentarea grafic a unui lan polipeptidic, primul aminoacid este purttorul gruprii NH2 libere, iar ultimul aminoacid este purttorul gruprii COOH liber (aminoacid Cterminal).
120
Nomenclatura chimic a peptidelor const n indicarea succesiv a denumirii fiecrui aminoacid cu adugarea sufixului il, cu excepia ultimului aminoacid (C terminal) care are o denumire neschimbat. Eexemplu o tetrapeptid cu structura : H2N Ala Glu His Lis COOH Se va denumi: alanil glutamil histidil lizin. Clasificarea peptidelor se poate face n diferite moduri i anume: a) n funcie de numrul aminoacizilor participani: - oligopeptide (coninnd ntre 2-9 resturi de aminoacizi); - polipeptide (coninnd ntre 10 - 100 resturi de aminoacizi) b) n funcie de felul aminoacizilor: - homopeptide (formate din acelai aminoacid) - heteropeptide (formate din aminoacizi diferii). c) n funcie de modul de aranjare a aminoacizilor n caten: - peptide liniare, - peptide ramificate, - peptide semiciclice, - peptide ciclice. Proprietile peptidelor Peptidele i polipeptidele cu mas molecular mic sunt substane incolore, cristaline, uor solubile n ap, primele formeaz soluii reale, iar ultimele dispersii coloidale. Spre deosebire de proteine, ele nu coaguleaz prin nclzire, ns pot precipita la adugare de sruri. Prezint caracter amfoter, la fel ca i aminoacizii. Fiind poliprotide, peptidele hidrolizeaz n mediu acid sau enzimatic, rezultnd aminoacizi constitueni. De exemplu: +2 H2O Alanil glicil tirozin -----------------Alanin + glicocol + tirozin Peptidele i polipeptidele prezint reaciile de culoare ale aminoacizilor i o parte din reaciile de culoare ale proteinelor. Una din cele mai importante este reacia care are loc n prezena srurilor cuprice n mediul alcalin (reacia biuretului), cnd se obine o coloraie violet. Aceast reacie, care evideniaz legturile peptidice, este utilizat pentru identificarea i dozarea peptidelor i proteidelor. Peptide i polipeptide naturale Peptidele naturale sunt sintetizate de ctre plante, animale i microorganisme i ele ndeplinesc n organismele vii i celule cele mai variate roluri: - componente structurale ale esuturilor; - hormoni; - factori de eliberare ai hormonilor; - antibiotice; - toxine; - inhibitori de enzime; Prezint importan biochimic urmtoarele peptide: carnozina, anserina, glutationul. Carnozina i anserina sunt dipeptide izolate din muchii animalelor. Carnozina este format din histidin i alanin i se gsete n muchii animalelor. Anserina este un analog structural al carnozinei, fiind constituit din Nmetilhistidin i alanin, ea se gsete n muchii psrilor. Aceste dipeptide cu aciune hipotensiv, stimuleaz secreia glandelor i au un rol activ n transportul acidului fosforic. Carnozinfosfatul este donor de grupri fosfat n contracia muscular. Glutationul este una dintre cele mai importante peptide prezent n regnul vegetal i animal. n cantiti mai mari se afl n ficat (170 mg %) i n splin (100 mg %). Din punct de vedere chimic este o tripeptid format din resturi de glicocol, cistein i acid glutamic. 121
CH2 SH CO NH CH CO NH CH2 COOH CH2 Glutation CH2 (-gutamil-cisteil-glicocol) CH NH2 COOH Glutationul este uor dehidrogenat i transformat n diglutation: - 2H 2G CH < --------------- > G S S G + 2H Glutation Diglutation redus (glutation oxidat) Datorit acestei proprieti, glutationul joac un rol important n procesele metabolice de oxido-reducere. De asemenea este activator a numeroase enzime i hormoni i este o substan antitoxic. n unele procese biochimice, glutationul redus acioneaz ca o coenzim, fiind donator de hidrogen n reaciile de oxido-reducere: enzim A + 2G SH AH2 + G S S G Glutationul acioneaz ca antioxidant, intervenind n protejarea anumitor substane contra oxidrii (acid ascorbic, adrenalin, hemoglobin). n regnul animal se gsesc o serie de oligo- i polipeptide cu rol de hormon: ocitocina, vasopresina, angiotensina I, bradikinina, hormonii pancreatici (insulina i glucagonul) i hormonii hipofizari.
122
Coninutul proteinelor n organismul animal difer de la specie la specie. De asemenea repartizarea substanelor proteice n diferite organe este diferit. Astfel, pielea are coninutul cel mai ridicat (26%)m urmat de muchi (23%) i ficat (22%). Se remarc din acest punct de vedere coninutul relativ sczut n protide a creierului, de numai 12%. Poliprotidele superioare sau proteidele prezint o serie de caracteristici comune: - sunt biomacromolecule formate prin policondensarea aminoacizilor, care constituie unitile structurale ale acestora; - legturile ce se stabilesc ntre resturile aminoacizilor participani la sinteza acestora, sunt legturi peptidice (-CO-NH-); - ordinea, respectiv secvena aminoacizilor n macromolecula proteic determin proprietile acesteia; - posed un nalt grad de organizare structural; - sunt ntr-un proces continuu de rennoire, ca urmare se datoresc organizrii spaiale a macromoleculelor proteice i care se reflect n funciile biologice a acestora; - specificitatea remarcabil este o consecin a particularitilor structurale i conformaionale, care se concretizeaz prin funcii biochimice variate. 2.6.4.1. Rolul proteidelor n organismele animale Proteinele ndeplinesc n celulele vii diferite roluri: - plastic (structural), reprezentnd constituenii principali ai citoplasmei i infrastructurilor celulare a biomembranelor, a fluidelor din organismul animal; - catalitic, ntruct n calitate de enzime accelereaz viteza reaciilor biochimice; - hormonal, deoarece o serie de polipeptide i proteine sunt hormoni cu rol de reglare a proceselor metabolice; - energetic,furniznd energia necesar unor procese vitale n cazuri limit pentru organism (inaniie, subalimentaie,procese patologice); - imunologic,prin imunoglobuline (anticorpi) cu rol n aprarea organismelor contra agresiunilor externe, precum i prin fibrinogen i trombin, care intervin n procesul de coagulare a sngelui; - de protecie i susinere prin intermediul scleropreoteinelor (colagenul din tendoane, elastina vaselor sanguine, keratina din unghii, copite, pr); - cotractil, wprin substane ce particip la procesul de contracie muscular (actin, miozin, actomiozin) - de transport a unor gaze (O2 i CO2) pe cale sanguin (hemoglobina, mioglobina) a electronilor (citocromii) sau a lipidelor (lipoproteine circulante) - fizico-chimic, prin intervenia lor n procesele de transport a apei, a ionilor biomembranelor anorganici, a substanelor organice, n meninerea echilibrului acidobazic(sisteme tampon) precum i n procesele de permeabilitate la nivelul celulare; - informaional prin acidul deoxiribonucleic din cromozomi. 2.6.4.2. Clasificarea proteidelor Proteidele se clasific dup constituia lor chimic n dou mari familii: holoproteide (proteine); heteroproteide (proteine conjugate). Holoproteidele sau proteinele sunt substane constituite numai din aminoacizi . Ele pot include cantiti mici din alte substane (glucide, lipide, pigmeni, etc.) dar acestea nu intr n structura lor chimic. Supuse hidrolizei, proteinele dau natere la un amestec de aminoacizi. Dup forma moleculelor sunt: - proteine globulare, care au o form sferic sau cilindric, n care catenele polipeptidice sunt strnse sub forma unui ghem i apar n special n lichidele biologice din organism fiind solubile; - proteine fibrilare, care au o structur filiform alctuite din catene liniare i ndeplinesc n organism rol de susinere i rezisten mecanic, fiind insolubile.
123
n natur exist ns o serie de proteine cu structur intermediar. Heteroproteidele sunt proteide la structura crora particip, pe lng aminoacizi i alte componente de natur neproteic care poart denumirea de grupri prostetice. Prin hidroliza heteroproteidelor se obin deci, n afar de aminoacizi i una sau mai multe substane neproteice. Dup funcia biologic pe care o ndeplinesc, proteidele regnului animal, se pot clasifica la rndul lor n cteva clase importante: - proteine structurale: colagenul, elastina, fibrina, keratina,etc. - proteine de rezerv: cazeina, ovalbumina, lactalbumina, feritina. - proteine de transport: hemoglobina, mioglobina, albuminele serice, lipoproteinele. - proteine contractile: actina, miozina. - proteine cu aciune hormonal:hormoni hipofizari. - proteine cu aciune catalitic: enzime. - proteine de protecie: trombina, fibrinogenul, imuno-globulinele.
H3N
H O R3 H N C CH N COO\ / \ / \ / \ / \ / C CH N C CH O R2 H O Rn
n aceast caten, radicalii R1,R2. Rn caracteristici aminoacizilor constitueni sunt: - resturi hidrocarburice nepolare, hidrofobe (- CH3 CH(CH2)3 provenite de la alanin, valin, etc). - resturi ce conin grupri polare (- OH , - SH provenite de la serin cistein). - resturi ionogene, hidrofile (- NH2 , -COOH provenite de la aminoacizii cu caracter bazic sau acid). Fiecare protein specific se caracterizeaz prin numrul aminoacizilor constitueni, felul acestora, precum i ordinea (secvena) lor n lanul polipeptidic. Pentru stabilirea frecvenei aminoacizilor n lanul polipeptidic se utilizeaz hidroliza enzimatic, la care particip urmtoarele enzime: tripsina, chimotripsina, pepsina i papaina. Acestea scindeaz legturile peptidice ale proteinei, rezultnd aminoacizii componeni. Structura complex a proteinelor se datoreaz faptului c ele sunt substane macromoleculare i prezint o configuraie spaial, tridimensional. Configuraia macromoleculelor proteice. Proteinele se caracterizeaz prin organizare spaial specific, respectiv prin configuraie. Aceasta se refer la modul n care atomii sau gruprile de atomi, prezente n molecul sunt orientate n spaiu, precum i la legturile ce se stabilesc ntre lanurile polipeptidice. Factorii amintii contribuie direct la formarea edificiului spaial al macromoleculei proteice. Aceasta determin proprietile biologice ale proteinelor.
124
Structura proteinelor. Structura de ansamblu a unei macromolecule proteice este rezultatul interaciunii a diferite nivele de organizare structural i anume: structura primar; structura secundar; structura teriar; structura cuaternar. 2.6.5.1. Structura primar a proteinelor. Structura primar se refer la natura aminoacizilor, numrul acestora, precum i la ordinea n care ei se aeaz n lanul polipeptidic. Resturile de +aminoacizi se leag ntre ele prin legturi peptidice CO NH , care se stabilesc ntre gruprile COOH, respectiv NH2 ale diferiilor aminoacizi. Catena polipeptidic proiectat n plan are forma unui zigzag, iar radicalii R ale aminoacizilor constitueni sunt dispui alternativ deasupra i dedesubtul planurilor formate de aceasta: R1 H O R3 H O CH N C CH N C---/ \ / \ / \ / \ / \ / ---HN C CH N C CH O R2 H O R4 Pentru stabilirea structurii primare a proteinelor se utilizeaz: metode fizico-chimice; metode chimice; metode biochimice. ntre metodele utilizate cu mult succes n stabilirea structurii primare a proteinelor s-au remarcat: cromatografia, electroforeza, hidroliza enzimatic, hidroliza chimic, etc. Metodele analitice utilizate pentru elucidarea structurii primare sunt deosebit de complexe i laborioase. Din acest motiv, abia n 1955 Sanger reuete s stabileasc structura insulinei (hormon polipeptidic format din 51 aminoacizi i M = 6000), iar civa ani mai trziu Moore i Stein stabilesc structura primar a ribonucleazei (enzim format din 124 aminoacizi i M = 13000). 2.6.5.2. Structura secundar a proteinelor . Studiul cu radiaii X a proteinelor cristalizate a artat c macromoleculele proteice au conformaii tridimensionale. Lanurile polipeptidice ale proteinelor sunt legate ntre ele prin diferite tipuri de legturi, care pot fi mai puternice sau mai slabe. Acestea sunt: legturi de hidrogen; legturi covalente; legturi electrovalente; fore van der Waals. Legturile de hidrogen sunt legturi slabe, care se stabilesc ntre atomii de oxigen ai gruprii >C=O din legtura peptidic (acceptoare de hidrogen) i atomii de hidrogen din gruparea NH din aceast legtur (donoare de hidrogen) aflate n lanuri polipeptidice nvecinate sau n acelai lan. O R H O R H C CH N C CH N---/ \ / \ / \ / \ / \ / -HC N C CH N C R H O R H O Punte de hidrogen <----------------------R O H R O H ---CH C N CH C N \ / \ / \ / \ / \ / \ N CH C N CH C---- H R O H R O
125
Legturile covalente se stabilesc ntre lanurile polipeptidice ale macromoleculelor proteice din loc n loc, ntre resturile cistein, cu formare de puni disulfidice. Astfel de legturi apar n numr mai mare la proteinele fibrilare (scleroproteine). / \ O=C H H NH \ / \ / C C / \ / \ HN CH2 S S H2C C=O \ / Punte disulfidic Legturile electrovalente (ionice) apar ntre lanurile polipeptidice ale proteinelor datorit prezenei aminoacizilor cu caracter acid sau bazic. Acetia conin grupri ionogene ( -COOH respectiv NH2). Legturile electrovalente sunt legturi puternice. / \ O=C H H NH \ / \ / C H2N(+) C / \ \\ / \ HN (CH2)2COO(-) C NH(-CH2)3 C=O \ / / H2N Legura de tip ionic Forele van der Waals sunt cele mai slabe dintre legturile ce se stabilesc ntre catenele polipeptidice. Acestea apar ntre radicalii cu caracter nepolar. Structura secundar se prezint n trei modele: - modelul helix; - modelul n foaie pliat; - modelul de tip colagen. a) Modelul -helix reprezint cel mai simplu aranjament spaial rezultat prin spiralarea spre dreapta a catenei polipeptidice n jurul unui cilindru imaginar. Se presupune c: - aminoacizii constitueni prezint configuraie L; - distanele interatomice i unghiurile de valen prezint aceleai valori, indiferent de mrimea catenei polipeptidice; - legtura peptidic este coplanar, aceast conformaie fiind cea mai favorabil din punct de vedere energetic; - n macromolecula proteic se formeaz un numr maxim de legturi de hidrogen. Modelul helix este caracterizat prin pasul elicei (distana msurat ntre dou poziii identice succesive pe helix), care are valoarea 5,4A. Pe fiecare spir a helixului revin cte 3,6 resturi de aminoacizi. Astfel n spiralele nvecinate se gsesc fa n fa gruprile >CO i NH ale legturii peptidice, ntre care se stabilesc puni de hidrogen.
126
Structura helix apare att n proteinele fibrilare ( keratina din pr i ln), ct i n cele globulare, n care predomin aminoacizii cu catene laterale R, voluminoase. Acetia sunt orientai spre exteriorul spiralei. Proteinele native nu sunt ins alctuite din conformaii helix regulate, n structura lor apar i regiuni neelicoidale. Existena lor este determinat de natura radicalilor R a unor aminoacizi, ntre care se exercit atracii sau respingeri. Procentul de structur helix a proteinelor globulare variaz de la o protein la alta: 0-10% n cazein, actin, -globulin, ntre 10-20% n ribonucleaz, ntre 20-30% n pepsin i histone, 30-45% n ovalbumin i fibrinogen, 60-80% n mioglobina i hemoglobin. b) Modelul de foaie pliat reprezint aranjamentul spaial al macromoleculelor proteice, rezultat n urma interaciunii prin legturi de hidrogen dintre diferitele catene polipeptidice. Acest tip de structur apare la proteinele fibrilare din firul de pr (-keratina) i din firul produs de viermele de mtase (fibroina). Lanurile polipeptidice ale proteinelor pot fi dispuse paralel sau antiparalel, adic cu gruprile R din diferitele catene polipeptidice orientate n acelai sens (-keratina) sau n sensuri diferite. n acest fel, alternana gruprilor NH i CO apare invers n cele dou lanuri. Aranjamentul spaial sub forma unei foi pliate confer moleculei o mare stabilitate. Proteinele cu structur -helix pot trece n anumite condiii n proteine cu structuri de foaie pliant. Astfel, -keratina, proteina din pr supus aciunii apei calde sau alcaliilor diluate i a traciunii, se poate transforma n -keratin. La trecerea din structur -helix n structur de foaie pliant legturile de hidrogen intracaternare din -helix se desfac, iar catenele polipeptidice se grupeaz paralel, cu formare de legturi de hidrogen intercatenare, caracteristice structurii n foaie pliat. Reacia este reversibil, iar ncetarea traciunii firului duce la refacerea formei iniiale ( keratin). -keratina -----> -keratin. (-helix) <----- (foaie pliant) b) Modelul tip colagen. Proteinele fibrilare din colagen reprezint circa 30% din totalul proteinelor organismului animal. Ele sunt prezente n esuturile conjunctive. Colagenul se prezint sub forma unor fibre liniare foarte extensibile. Colagenul conine n proporie ridicat glicocol, prolin i hidroxiprolin. Aceti aminoacizi fac imposibil structura -helix sau foaie pliat, ntruct aceti aminoacizi nu pot participa la formarea legturilor de hidrogen. Colagenul este alctuit dintr-un suprahelix format din trei catene polipeptidice spiralate spre stnga i nfurate spre dreapta n jurul axei comune. n figura urmtoare este prezentat un fragment din catena polipeptidic a colagenului: ----- HN CH2 CO N CO N CO NH CH CO R OH Glicocol Prolina Hidroxiprolina Aminoacid R -----
2.6.5.3. Structura teriar a proteinelor. Structura teriar a proteinelor reprezint un grad avansat de organizare spaial a acesora. Ea este rezultatul interaciunilor dintre resturile R ale aminoacizilor din catenele polipeptidice, care pot stabili diferite tipuri de legturi intramoleculare, cum sunt: legturi de hidrogen nepeptidice ce se stabilesc ntre gruparea OH a tirozinei i un rest carboxilic aparinnd aminoacizilor cu caracter acid (aspartic i glutamic) sau ntre restul imidazolic al histidinei i gruparea OH a serinei; legturi ionice ntre resturile COOH ale aminoacizilor dicarboxilici i resturile 127
NH2 ale aminoacizilor bazici, ele fiind situate spre exteriorul moleculei i intr n interaciune cu solventul; legturi covalente formate din puni disulfidice ( - S S - ) ntre resturile de cistein; fore van der Waals ntre radicalii hidrofobi ai alaninei, valinei, leucinei. Acest tip de atracie are ca rezultat excluderea moleculelor de solvent polar n regiunea respectiv i sunt situate spre interiorul moleculei; interaciunea dipol dipol, ce se stabilete ntre gruprile - OH din serin. Tipul de structur teriar este caracteristic proteinelor globulare: hemoglobin, mioglobin, ribonucleaz, tripsinogen etc. Legturile i interaciunie caracteristice structurii teriare sunt destul de labile i pot fi uor desfcute prin aciunea diferiilor factori fizici i chimici (pH, temperatur, presiune, reactivi chimici). 2.6.5.4. Structura cuaternar a proteinelor. Acest tip de structur reprezint nivelul cel mai nalt de organizare a proteinelor i se datorete interaciunilor dintre catenele polipeptidice independente, care sunt caracterizate prin structuri primare, secundare i teriare bine definite. Ea apare n cazul proteinelor globulare cu mase moleculare mari. Acestea exist sub forma unor agregate moleculare i se numesc proteine oligomere. Ele sunt alctuite din dou sau mai multe catene polipeptidice (protomeri). n funcie de numrul acestora pot fi dimeri, trimeri,tetrameri etc. Agregarea protomerilor se datorete unor interaciuni de natur electrostatic (legturi ionice i legturi de hidrogen) care sunt localizate la suprafaa fiecrei catene. Hemoglobina din snge prezint o structur decforma unui tetramer alctuit din patru catene polipeptidice, identice dou cte dou. Aceste catene alctuiesc un agregat molecular n care sunt prezente i patru grupri neproteice, numite hem i care sunt implicate n transportul oxigenului. Structura cuaternar poate fi dezorganizat uor prin diluarea soluiilor, modificarea pH-ului, sau n prezena unor sruri, obinndu-se protomerii constitueni. Prin ndeprtarea agentului care a produs disocierea, se constat reasamblarea rapid a catenelor cu formarea suprastructurilor moleculare. Masa molecular a proteinelor variat n limite foarte largi, de la zeci de mii la zeci de milioane. Metodele utilizate pentru determinarea masei moleculare se bazeaz pe: msurarea presiunii osmotice (Srensen); msurarea vitezei de sedimentare (Svedberg); msurarea vitezei de difuzie; msurarea difraciei luminii; analiza rntgenografic; gel filtrare. Greutatea molecular a unor proteine Proteina Masa molecular Nr de subuniti 11600 1 Citocromul C 13500 1 Ribonucleaz 27500 1 Gliadina 24000 1 Tripsina 35000 2 Lactoglobulina 64500 4 Hemoglobina 150000 4 Lactat dehidrogenaza 483000 6 Ureaza 620000 3 Miozina
128
Se constat c proteinele cu masa molecular mare i foarte mare, sunt formate din mai multe subuniti, iar catenele polipeptidice conin 300 600 resturi de aminoacizi, pe cnd cele cu masa molecular mic sunt formate dintr-un singur lan polipeptidic, ce conine 110 120 aminoacizi. S-a constatat c mase moleculare foarte mari se ntlnesc adesea la enzime, datorit agregrii lanurilor polipeptidice. PROPRIETILE PROTEINELOR Proprieti fizico-chimice 1. Solubilitatea proteinelor. Depinde de existena gruprilor polare hidrofile de la suprafaa macromoleculelor (-COOH, -NH2, -OH, -SH) care stabilesc legturi cu moleculele solvenilor polari (apa, glicerolul). Majoritatea proteinelor sunt solubile n ap, formnd soluii coloidale, precum i n soluii saline. Proteinele greu solubile sufer n contact cu apa un fenomen de gonflare, care se datoreaz hidratri gruprilor polare prezente. Macromoleculele proteice se comport n soluie apoas ca macroamfioni datorit prezenei gruprilor ionizabile COOH i NH2 la suprafaa acestora. n funcie de pH-ul soluiei, proteinele se comport la fel ca aminoacizii, ca anioni (n mediu bazic) sau cationi (n mediu acid). Exist o valoare a pH-ului la care numrul sarcinilor pozitive a moleculei este egal cu numrul sarcinilor negative, deci sarcina electric devine nul. Acest pH poart denumirea de punct izoelectric al proteinei, notat cu pHi . Punctul izoelectric - pHi variaz n limite n limite foarte largi (1-12,5) n funcie de numrul gruprilor acide sau bazice care predomin pe suprafaa macromoleculei. La pHi solubilitatea proteinelor este minim, datorit atraciei sarcinilor electrice de semn contrar, ce favorizeaz agregarea moleculelor. n tabelul de mai jos sunt prezentate valorile pHi a unor proteine. Datorit caracterului amfoter proteinele se comport ca sisteme tampon, care menin la valori constante pH-ul mediului biologic n care se gsesc. Valorile pHi a unor proteine Proteina / pHi Proteina / pHi Pepsina 1,2 Miozina 5,4 Cazeina 4,6 Fibrinogen 5,5 Ovalbumina 4,6 Gliadina 6,5 Serumalbumina 4,7 Hemoglobina 6,9 Ureaza 5,1 Globina 8,1 Insulina 5,4 Citocrom C 10,5 Datorit gruprilor ionizabile i a apariiei n soluie proteic a macroanionilor sau macrocationilor, proteinele au proprietatea de a migra n cmp electric. Fenomenul se numete electroforez. Dac macromolecula va fi ncrcat negativ, va migra spre anod (amforez), dac predomin sarcinile pozitive, se va deplasa spre catod (cataforez). Viteza de migrare n cmp electric a diferitelor proteine este diferit, ceea ce permite separarea prin electroforez a amestecurilor de proteine.
129
2. Activitate optic. Proteinele prezint activitate optic levogir, datorit prezenei n molecul a aminoacizilor din seria L. n lumina ultraviolet ( = 280 nm), proteinele prezint un maxim de absorbie, datorat aminoacizilor aromatici. Pe aceast proprietate se bazeaz dozarea proteinelor prin metod spectrofotometric. 3. Denaturarea. Proteinele native pot s sufere transformri sub aciunea unor ageni fizicochimici care duc la dezorganizarea structurii spaiale, fr a fi afectat structura primar i masa molecular a acestora. Fenomenul se numete denaturare i este rezultatul desfacerii legturilor ce caracterizeaz structura secundar i teriar. Aceste transformri sunt, de obicei, ireversibile i au drept consecin modificarea proprietilor fizice ale proteinelor (scderea solubilitii, creterea activitii optice, modificarea vscozitii i a presiunii osmotice, creterea valorii pHi, pierderea tendinei de cristalizare) precum i pierderea activitii biologice. Agenii care provoac denaturarea sunt de natur fizic sau chimic (acizi, baze, srurile metalelor grele, solveni organici, detergenti). Dac aciunea agentului denaturant este limitat i moleculele proteice sunt numai parial denaturate, procesul poate fi reversibil, iar prin ndeprtarea cauzei denaturrii, moleculele proteice se pot renatura dobndind structura i proprietile biologice iniiale. Proprieti chimice Proteinele au, n general, o reactivitate chimic ridicat, datorit grupurilor funcionale libere ale aminoacizilor constitueni, precum i a nucleelor aromatice sau a resturilor hidrocarburice. Legturile peptidice imprim i ele proprieti chimice specifice. 1. Hidroliza. Proteinele, n funcie de natura lor, hidrolizeaza mai uor sau mai greu n prezena acizilor, bazelor sau a enzimelor specifice. Hidroliza const n desfacerea legturilor peptidice n prezena apei, rezultnd aminoacizi. Hidroliza parial se desfoar n condiii blnde, cu acizi diluai sau cu enzime proteolitice i se pot obine polipeptide i peptide cu mas molecular tot mai mic. Acest tip de hidroliz este utilizat pentru stabilirea structurii primare a proteinelor. 2. Reacii de culoare. Aceste reacii se datoresc aminoacizilor constitueni care reacioneaz specific cu anumii reactivi, dnd reacii de culoare: reacia ninhidrinei (caracteristic gruprii NH2 din aminoacizi), reacia xantoproteic i Millon (datorit nucleelor aromatice) i reacia biuretului (datorit legturilor peptidice CONH). Reacia biuretului este utilizat curent pentru dozarea colorimetric a proteinelor, deoarece intensitatea culorii este direct proporional cu concentraia acestora n soluie. 3. Reacii de precipitare. Proteinele existente n soluii pot fi precipitate sub aciunea unor reactivi. n funcie de natura reactivilor, precipitrile pot fi reversibile sau ireversibile. Precipitarea reversibil se realizeaz sub aciunea srurilor [Na2SO4, (NH4)SO4] sau a unor alcooli.
130
Acetia produc deshidratarea parial a macromoleculelor care se aglomereaz i precipit, fr modificarea structurii. Proteinele precipitate prin salifiere se pot redizolva dup ndeprtarea agenilor chimici ce au produs precipitarea. Precipitarea ireversibil are loc sub aciunea unor reactivi chimici, care produc modificri profunde ale structurii proteinelor, respectiv denaturarea lor. Reactivii ce produc precipitri ireversibile, sunt: - acizii anorganici (HCl, HNO3), - acizii organici (acid tricloracetic, acid picric i acid sulfosalicilic) i - srurile metalelor grele (Cu2+, Pb2+, Hg2+, Ag+). Coagularea este precipitarea ireversibil a proteinelor sub aciunea cldurii. Temperatura de coagulare depinde de natura i concentraia srurilor prezente n soluie. n absena srurilor unele proteine nu precipit nici la fierbere. Proprieti biochimice Proteinele prezint proprieti biochimice specifice de: - hormoni; - enzime; - contracie; - transport; - imunologie. Descrierea unor tipuri de proteine Holoproteidele (proteinele) sunt formate numai din aminoacizi. Dup rolul fiziologic proteinele se grupeaz n dou clase, i anume: - priteine vii (netransformate) solubile i active din punct de vedere biologic, care prezint toate proprietile fizico-chimice descrise anterior; - proteine transformate (scleroproteine) insolubile, care au suferit un proces de transformare n organismele vii, n urma cruia i-au pierdut activitatea biologic i nu mai prezint proprietile caracteristice proteinelor vii, ele fiind insolubile. Proteinele solubile au structur globular, sunt prezente n toate organismele vii, vegetale i animale. pot s aib caracter neutru, acid sau bazic, n funcie de raportul diferitelor tipuri de aminoacizi din molecul. Proteinele globulare se clasific n ase grupe, pe baza provenienei i a proprietilor fizice i chimice. n majoritatea cazurilor proteinele, aparinnd diferitelor grupe, apar mpreun, iar separarea i caracterizarea lor este deosebit de dificil. Proteinele globulare se clasific n ase grupe universal rspndite ALBUMINE GLOBULINE regnul animal HISTONE PROTAMINE regnul vegetal PROLAMINE GLUTELINE
131
ALBUMINELE Sunt proteine globulare cu caracter neutru sau slab acid. n constituia lor intr aminoacizii cu caracter neutru. Nu conin glicocol. Sunt solubile n ap i soluii diluate de electrolii. Precipitarea lor necesit soluii concentrate de sruri [(NH4)2SO4 70-100%)]. Albuminele coaguleaz prin nclzire la 60-70oC. Datorit faptului c au masa molecular relativ mic, ele manifest n cmpul electric o mobilitate deosebit i pot ptrunde prin membrane subiri. n regnul animal, albuminele sunt rspndite n citoplasm i n lichidele biologice ale organismelor . Cele mai importante albumine animale sunt: reprezentnd 52-62% din proteinele plasmei sanguine SERALBUMINELE din lapte, LACTOALBUMINA din albuul de ou, OVALBUMINA din esutul muscular. MIOALBUMINA Albuminele animale ndeplinesc roluri multiple : 1- regleaz presiunea osmatic a sngelui; 2- constituie o rezerv de proteine pentru organism; 3- contribuie la tamponarea pH-ului sanguin; 4- ndeplinesc funcia de transport a anionilor acizilor grai.
n regnul vegetal albuminele apar ndeosebi n semine. Albuminele vegetale poart denumiri specifice, dup originea lor: legumelina (n seminele de leguminoase), faseolina (n fasole), leucozina (n gru), ricina (n ricin), etc. Unele plante conin albumine toxice: crotina din Croton tiglium, falina din Amanita phaloides, etc.
GLOBULINELE Au caracter slab acid, datorit coninutului ridicat n acid aspartic i glutamic. Sunt greu solubile n ap, ns Sunt solubile n soluii diluate de sruri neutre (NaCl, NazSO4) i de baze. Au tendina de precipitare la diluarea soluiei cu ap, la salifiere (NH4)2SO4 50%. Globulinele au mase moleculare mai mari dect albuminele (de ordinul 105 106) dar cu toate acestea, soluiile lor coaguleaz mai greu sau deloc la fierbere. n regnul animal, globulinele sunt cele mai rspndite proteine globulare din organism.
132
Cele mai importante GLOBULINE animale sunt: din plasma sanguin SERUMGLOBULINA I FIBRINOGENUL
din lapte, LACTOGLOBULINA din ou OVOGLOBULINA din muchi. MIOZINA n regnul vegetal globulinele apar mai ales n semine, alturi de albumine. Dup originea lor, globulinele vegetale poart denumiri specifice: glicina din soia, edestina din cnep sau legumina din mazare. GLOBULINELE vegetale poart denumiri specifice: GLICINA EDESTINA LEGUMINA din soia, din cnep din mazare.
HISTONELE Sunt holoproteide cu caracter slab bazic, datorit prezenei n molecul a aminoacizilor cu caracter bazic (arginina i lizina). Sunt solubile n soluii acide. Coaguleaz prin nclzire. Pot fi hidrolizate n prezena pepsinei. Histonele apar: n leucocite sub form liber n sperma petilor n nucleul celulelor glanduare sub form asociat cu acizi nucleici, (pancreas, timus), ca nucleoproteide (nucleohistone) celule spermatice, eritrocite nucleate etc. PROTAMINELE Sunt holoproteide cu caracter bazic accentuat datorit unui coninut de aminoacizi cu caracter bazic (arginina, lizina, histidina). n molecula lor lipsesc aminoacizii cu sulf, tirozina i triptofanul. Protaminele au masa molecular mic (2.103 - 3.103), uor solubile n ap, nu coaguleaz la nclzire i sunt greu hidrolizabile. Ele apar n regnul animal, n special n sperma petilor, cuplate cu acizi nucleici sub form de nucleoproteide. Protaminele izolate din diferitele celule spermatice ale petilor poart denumiri diferite: SALMINA (somon), CLUPEINA (scrumbie), CIPRININA (crap), etc. PROLAMINELE I GLUTELINELE Sunt holoproteide caracteristice regnului vegetal. Sunt proteine insolubile n ap, dar solubile n soluii diluate de acizi sau baze.
133
PROLAMINELE sunt solubile i n alcool etilic 70%, proprietate prin care se deosebesc de toate celelalte proteine. PROLAMINELE i GLUTELINELE se gsese, n cantiti mai mari, n seminele de cereale. n seminele de gru se gsete: prolamina - GLIADIN glutelina - GLUTENINA . Aceste proteine, nsoite de cantiti mici de albumine i globuline, alctuiesc glutenul , care confer finei de gru calitile de panificaie. Seminele de porumb conin prolamina ZEIN Valoarea alimentar a acestor proteine este diferit n funcie de coninutul lor n aminoacizi eseniali. Astfel, PROLAMINELE sunt bogate n acid glutamic, glutamin i prolin, ns sunt srace n triptofan i lizin. GLUTELINELE sunt bogate att n acid glutamic, ct i n lizin. Triptofanul i lizina sunt aminoacizi eseniali, indispensabili, care nu pot fi sintetizai de organismul animal. O alimentaie a omului i a animalelor, bazat exclusiv pe porumb (srac n triptofan i lizin), duce n scurt timp la tulburri de metabolism, care sunt agravate i din cauza coninutului insuficient al boabelor de porumb n unele vitamine, n special n vitamina PP. PROTEINE INSOLUBILE ( SCLEROPROTEINE ) Scleroproteinele sunt holoproteide de natur fibrilar, caracteristice organismului animal. Se caracterizeaz prin rezistena fa de ageni fizici sau chimici. Sunt insolubile n ap, n soluii de sruri, de acizi sau baze. Nu sunt hidrolizabile. Datorit acestor proprieti, scleroproteinele exercit n organismul animal un rol de susinere, de protecie i de rezistena mecanic. Sunt constituentele principale a esuturilor conjunctive i a epidermei . Scleroproteinele au un coninut relativ sczut n azot (cca. 12 %) i ridicat n oxigen. Aminoacizii care predomin sunt: cisteina, prolina i hidroxiprolina. Din categoria scleroproteinelor fac parte: COLAGENELE, KERATINELE, ELASTINELE, FIBROINA, MIOZINA, FIBRINOGENUL. COLAGENELE Sunt proteinele principale din - esuturile conjunctive, tendoane, cartilagii, piele, oase i solzi de pete, - reprezint cca. 50% din totalul proteinelor organismului animal . Sunt substane insolubile n ap. Rezistente la aciunea enzimelor proteolitice.
134
Prin fierbere cu ap, colagenele sufer o hidroliza parial care are loc cu modificri structurale, datorit desfacerii legturilor intercatenare, transformndu-se ntr-o mas elasic, numit gelatin. GELATINA este solubil n ap cald, dnd soluii vscoase , care prin rcire formeaz geluri. Este hidrolizat de ctre enzimele proteolitice. Sub aciunea taninurilor colagenele se transform n produse rezistente, neputrescibile, datorit supercontraciei ireversibile a fibrelor. Acest proces joac un rol fundamental n tbcirea pieilor. KERATINELE sunt proteinele principale din epidem, pr, pene i din formaiunile cornoase (unghii, copite, coarne). ndeplinesc un rol protector sunt insolubile i rezistente fa de agenii chimici. Au coninutul ridicat n aminoacizi cu sulf (3-5% S), cu un numr mare de puni disulfidice S S inter i intracatenare, care le confer rezisten mecanic i elasticitate deosebit. (Firul de pr tratat cu ap cald i supus traciunii sufer o alungire pn la 100%.) Keratinele nu sunt hidrolizate de enzimele proteolitice. ELASTINELE FIBROINA Este proteina principal din mtasea natural produs de viermele de mtase (Bombix mori ) unde este asociat cu o alt protein sericina. n glandele viermelui de mtase, proteinele se gsesc sub forma unei mase vscoase, care la trecerea prin orificiul ngust al glandei, ia aspectul de fir care este i rsucit de catre labuele viermelui. Fibroina este o protein fibrilar tipic, structura fiind asemntoare cu a - keratinei (structur n planuri pliate), ns catenele polipeptidice sunt orientate antiparalel. Particip la formarea fibrelor elastice din artere i tendoane. Se aseamn cu colagenele, ns nu se pot transforma n gelatine i se caracterizeaz printr-un procent ridicat de glicocol i leucin i printr-un procent redus al prolinei i hidroxiprolinei.
MIOZINA este principala protein a esutului muscular (35%), are proprieti contractile i are proprieti enzimatice (fa de acidul adenozintrifosforic - ATP). Miozina este nsoit de actin (17%) cu care formeaz un complex numit actomiozin. Acestea constitute substana de baz a fibrilelor musculare i suportul biochimic al contraciei musculare. Miozina prezint elasticitate deosebit, molecula ei fiind alcatuit din trei catene polipeptidice. FIBRINOGENUL este o protein fibrilar solubil de tipul - keratinei prezent n plasma sanguin,
135
avnd rol esenial n procesul de coagulare a sngelui. n procesul de coagulare a sngelui, fibrinogenul se transform n FIBRIN care este insolubil. Transformarea fibrinogenului n fibrin are loc n prezena unor enzime (trombina, fibrinaza) i a ionilor de Ca2+.
2.6.6.
HETEROPROTEIDE
( PROTEINE CONJUGATE )
Heteroproteidele sunt substane n a cror structur intr o holoproteid (proteina) i o substan neproteic, numit grupare prostetic. Proteinele au capacitatea de a se lega de gruprile prostetice, prin valene principale (covalene i electrovalene), prin valene secundare. Heteroproteidele se mai numesc i proteine conjugate. n cele mai multe cazuri, componena proteic poate fi separat de gruparea prostetic relativ uor, fr modificri eseniale a prii proteice. Clasificarea heteroproteidelor se face dup natura gruprii prostetice : METALPROTEIDE; FOSFOPROTEIDE; GLICOPROTEIDE; CROMOPROTEIDE; NUCLEOPROTEIDE; LIPOPROTEIDE.
CATEGORII DE HETEROPROTEIDE I FUNCIILE LOR BIOLOGICE METALPROTEIDELE Sunt heteroproteide n care gruparea prostetic este un cation metalic. Cele mai importante sunt cu fier, cupru, mangan, zinc, calciu, magneziu . n structura lor, cationii metalici sunt fixai de anumii radicali polari ai aminoacizilor din n protein prin legturi coordinative (tip donor-acceptor). Metalproteidele joac un rol deosebit n transportul i depozitarea unor metale. METALPROTEINE DE TRANSPORT: SIDEROFILINA (Fe) i CERULOPLASMINA (Cu) din snge, OVOTRANSFERINA (Fe) din albuul de ou i LACTOTRANSFERINA (Fe) din lapte. METALPROTEIDELE CU ROL DE DEPOZITARE A METALELOR sunt: FERITINA i HEMOSIDERINA (Fe) din ficat i organe hematopoetice, precum i HEMATOCUPERINA (Cu). Unele ENZIME I HORMONI conin n structura lor un metal sau necesit, obligatoriu, un metal pentru activarea lor. FEREDOXINA, enzim din cloroplaste conine n molecule fier, avnd rol esenial n procesele de oxido-reducere. INSULINA (hormon ) conine cantiti nsemnate de zinc. 136
FOSFOPROTEIDELE Sunt heteroproteide specifice regnului animal, Gruparea prostetic este format din acid fosforic , leagat de partea proteic (o albumin sau o globulin), printr-o legatur de tip esteric. Legatura esteric se formeaz n urma ~~~NH reaciei acidului fosforic cu gruparea hidroxilic a serinei sau a treoninei . Un fragment din CO structura unei fosfoproteide poate fi redat astfel: Au caracter acid dat de radicalul fosforic. HC NH CO~~~ Formeaz sruri de calciu sau de potasiu. Fosfoproteidele hidrolizeaz uor prin nclzire H2C O PO3H2 cu alcalii diluate, elibernd gruparea fosfat. Principalele tipuri de fosfoproteide sunt: CAZEINELE, OVOVITELINELE, FOSFOVITELINELE. CAZEINELE sunt fosfoproteidele din lapte, unde apar sub forma de cazeinat de calciu. Reprezint 80% din totalul proteinrlor existente n laptele de vac (4%). Cazeina este format din trei fraciuni (, i cazeina) ce se deosebesc prin raporturile cantitative ntre aminoacizii constitueni i prin cantitatea de P. Cazeinele nu coaguleaz prin fierbere, ns Precipit sub aciunea acizilor i a unor enzime din stomac, rezultnd paracazeinatul de calciu. Acest produs reprezint n acelai timp i principalul component din brnz, unde se formeaz prin fermentaia lactic a laptelui. Coagularea laptelui n stomac este un proces biochimic foarte important, ntruct permite valorificarea integral a proteinelor din lapte. Cazeinele sunt proteine complete - conin toat seria de aminoacizi eseniali. OVOVITELINELE I FOSFOVITELINELE sunt fosfoproteidele din galbenuul de ou, unde se gsesc asociate cu lecitinele. au un coninut bogat n fosfor (2-10%) i n serina (pn la 34%). Au rolul de a furniza embrionului aminoacizii i fosforul necesar dezvoltrii. GLICOPROTEIDE Sunt caracteristice regnului animal. Au un coninut n glucide sub 4%, componenta major a acestora este proteina. Au gruparea prostetic constituit din glucide sau derivai ai lor: - hexoze (glucoza, manoza, galactoza), - pentoze (xiloza), - N-acetilhexozamine (N-acetilhexozamina, N-acetilgalactozamina), - acizi uronici (glucuronic i galacturonic), - acid neuraminic i acid sialic. - Glicoproteidele, n funcie de componena glucidic, pot avea caracter acid (conin acizi uronici ) sau neutru (conin glucide ). Glicoproteidele sunt solubile n ap formnd, soluii vscoase. Se gsesc n secreia mucoaselor, n plasm, n saliv, n umoarea sticloas i cordonul ombilical, unde apar de obicei sub forma unor amestecuri complexe cu mucopoliglucidele numite i mucoide sau mucine. Mucinele - sunt glicoproteide secretate de celule ale cavitii bucale, ale tubului digestiv, ale cilor respiratorii i genitale. ndeplinesc un rol protector pentru mucoase.
137
Mucoidele - sunt glicoproteide din urin, albu de ou sau lapte , - nu precipit prin acidulare cu acid acetic. GLICOPROTEIDELE SANGUINE - se gsesc n ser i apar n cantiti mari n cazuri patologice. - Prin hidroliz acestea elibereaz fucoz, galactoz, glucozamin i galactozamin. SIALPROTEIDE - au caracter acid, conin acid sialic i se gsesc tot n serul sanguin. GLICOPROTEIDELE DIN ERITROCITE - sunt asociate cu sfingolipide i - determin specificitatea de grup sanguin. CROMOPROTEIDE Sunt heteroproteide n care gruparea prostetica este un pigment. Ele sunt universal rspndite. n funcie de structura componentei prostetice, cromoproteidele se clasific n dou grupe mari: cromoproteide porfirinice care conin o structur porfirinic i cromaproteide neporfirinice. Dupa rolul pe care ele l ndeplinesc n organism pot fi : cu funcie respiratorie i fr funcie respiratorie CROMOPROTEIDE PORFIRINICE Aceste cromoproteide au la baza nucleul porfirinic alctuit din 4 nuclee pirolice legate prin puni metinici - CH =. Substituirea atomilor de hidrogen din porfin cu diferii radicali d natere PORFIRINELOR. Dintre acestea PROTOPORFIRINA este cea mai rspndit i cunoscut. Ea rezult prin grefarea pe nucleul porfinei a unor radicali alchil saturai i nesaturai i anume: - 4 radicali metil CH3 n poziiile 1, 3, 5 i 8. - 2 radicali vinil CH = CH2 n poziiile 2 i 4. - 2 radicali de acid propionic CH2 CH2 COOH n poziiile 6 i 7. Dintre cromoproteidele porfirinice, cele mai rspndite i studiate sunt HEMOGLOBINA din sngele vertebratelor i CLOROPLASTINA din cloroplastele plantelor verzi. A) HEMOGLOBINA - Este o cromoproteid de culoare roie, - component a hematiilor din sngele vertebratelor. - Ea este alctuit dintr-o component prostetic numit HEM i o component proteic cu proprieti bazice, numite GLOBIN, alctuit din patru catene polipeptidice. n molecula de hemoglobin hemul se gsete n proporie de 4%, iar globina 96%. HEMUL este alctuit din protoporfirin, n centrul creia se afl un atom de fier bivalent i hexacoordinat. Are culoarea roie. Molecula hemului prezint unele caracteristici structurale: - este o porfirina care conine Fe2+; - sistemul ciclic al porfirinei conine nou duble legturi conjugate, ceea ce i confer culoare caracteristic de pigment rou;
138
pe nucleul porfirinic exist patru grupri metil, dou grupri vinil i dou resturi de acid propionic; - atomul de fier stabilete legturi covalente cu doi atomi de N ai ciclurilor pirolice, iar cu ceilali doi, legturi coordinative; - ciclurile pirolice mpreun cu atomul de Fe sunt coplanare; - atomul de Fe2+ stabilete, pe lng cele patru legturi coplanare, nc dou legturi coordinative, una orientat deasupra planului cu globina, iar alta orientat dedesubtul planului cu o molecul de ap, oxigen sau oxid de carbon. Structura hemului poate fi reprezentat astfel:
Hemul GLOBINA constituie componenta proteic a hemoglobinei, fiind alctuit din 4 catene polipeptidice identice dou cte dou, de tip -helix. Structura de ansamblu a globinei este globulara, care are i poriuni nespiralate, ce-i confer flexibilitate. n interiorul fiecrei catene polipeptidice se creaz cte o cavitate, unde se fixeaz cte o molecul de hem. PROPRIETILE HEMOGLOBINELOR. Hemoglobinele sunt substane cristalizabile, iar formele cristaline difer de la o specie la alta, proprietate utilizat n laboratoarele criminalistice pentru diferenierea sngelui de om de celelalte tipuri de snge. Hemoglobinele prezint solubilitate diferit . Prezint deplasare diferit n cmp electric, prin electroforez ele pot fi separate. Cea mai important proprietate a hemoglobinei este aceea de a se combina reversibil cu oxigenul din atmosfera, formnd oxihemoglobin. Hb + O2 HbO2 Pe aceast reacie se bazeaz funcia esential a hemoglobinei , ceea de a transporta oxigenul molecular de la plmni la esuturi . Sensul deplasrii echilibrului reaciei depinde de presiunea parial a oxigenului: n alveolele pulmonare, unde presiunea este mare, echilibrul este deplasat spre dreapta, iar la nivelul vaselor capilare, unde presiunea
139
este mic, echilibrul este deplasat spre stnga. Oxigenul eliberat este utilizat n procesele biochimice de oxidare celular. Hemoglobina ndeplinete importantul rol de transportor de oxigen. Fixarea reversibil a oxigenului are loc prin intermediul atomului de fier , de care oxigenul se leag coordinativ, reacie condiionat de existena globinei. Hemoglobina are proprietatea de a reaciona reversibil i cu dioxidul de carbon, formnd carbhemoglobina, compusul care transport CO2 de la esuturi la plmni, unde este expirat. Legarea CO 2 se realizeaz prin intermediul unei grupri aminoterminale a globinei cu formarea unei combinaii carbamino , conform reaciei: Hb NH2 + CO2 Hemoglobina Hb NH COO- + H+ Carbhemoglobina
Hemoglobina, prin intermediul hemului, fixeaz ireversibil oxidul de carbon, formnd carboxihemoglobina Hb CO. Sub aceast form hemoglobina nu mai poate ndeplini rolul de transportor de oxigen - ceea ce explic intoxicaiile grave produse de CO i moartea prin asfixie (lipsa de oxigen la esuturi). Afinitatea hemoglobinei pentru oxidul de carbon este de 210 ori mai mare dect afinitatea pentru oxigen . Sub aciunea unor ageni oxidani, fierul bivalent din hemoglobin este transformat n fier trivalent cu formarea methemoglobinei. Aceasta este inapt de a se combina reversibil cu oxigenul. n eritrocite se formeaz permanent methemoglobina, ns n organism exista enzime reductoare (methemoglobin reductaze) care o transform din nou n hemoglobin. Sub aciunea unor ageni denaturani hemoglobina, datorit structurii proteice sufer o denaturare a globinei - cu formarea hemocromogenilor. B) MIOGLOBINA este o cromoproteid porfirinic de culoare roie, existent n muchi avnd o structur similar cu hemoglobina. n structura mioglobinei partea proteic, respectiv globina, este alcatuit dintr-un singur lan polipeptidic, care conine 153 de aminoacizi, avnd masa molecular de aproximativ 17000. Aceast globin fixeaz o singur molecul de hem. Mioglobina are o afinitate fa de oxigen de aproximativ ase ori mai mare dect hemoglobina i constituie rezerva de oxigen a esutului muscular. Cantiti maride mioglobin au fost puse n eviden n muchii striati, muchii inimii, precum i n muchii pectorali ai psrilor zburtoare. C) PIGMENII BILIARI. Viaa eritrocitelor este relativ scurt (cca. 4 luni). Hemoglobina din eritrocitele moarte sufer transformri profunde, iar inelul porfirinic al hemulni este desfcut cu pierderea concomitent a fierului i a globinei. Ca urmare se formeaz un pigment tatrapirolic de culoare verde, numit biliverdin, care este redus uor la pigmentul rou, bilirubina. Aceti pigmeni apar n cantiti mari n bila hepatic i vezicular. D) CITOCROMII. Sunt cromoproteide porfirinice a cror grupare prostetic este identic sau foarte apropiat cu cea a hemului din globin. Ei reprezint enzime cu larg rspndire, care particip la reacii de oxidoreducere prin transfer de electroni. Funcia citocromilor se bazeaz pe proprietatea fierului de a se oxida sau reduce reversibil: -eFe2+ <------------> Fe3+ +e140
E) HEMENZIMELE. Sunt enzime din clasa oxidoreductazelor (catalaze, perxidaze), care conin n structura lor o component prostetic de tipul hemului i care particip la procese de oxidoreducere din organism. F) CLOROPLASTINELE sunt cromoproteide porfirinice a cror component prostetic este CLOROFILA, iar componenta proteic este reprezentat de plastin. Ele sunt rspndite n celulele vegetale, crora le d culoarea verde. La plantele superioare clorofila este localizat n cloroplaste, iar la cele inferioare n cromatofori. CLOROFILA este un pigment verde cu structur porfirinic, care conine magneziu. n aproape toate plantele ea reprezint un amestec format din dou clorofile foarte apropiate ca structur: clorofilele a i b, care difer doar prin radicalii existeni la nucleele pirolice din ciclul porfirinic. Clorofila este pigmentul fotosintetizant capabil s transforme energia luminoas n energie chimic.
NUCLEOPROTEIDELE.
Sunt heteroproteidele cele mai importante pentru organismele vii, alctuite din: o component proteic cu caracter bazic i o grupare prostetic, de acizi nucleici. Componenta proteic are masa molecular relativ mic i face parte din clasa protaminelor sau histonelor n care predomin aminoacizi cu caracter bazic, cum sunt arginina, lizina i histidina. Acizii nucleici sunt substane macromoleculare cu structur complex, cu caracter acid , care n funcie de natura lor chimic pot fi de dou feluri: acizi ribonucleici (ARN) i acizi deoxiribonucleici (ADN). Legtura dintre acizii nucleici i componenta proteic este n unele cazuri mai puternic, alteori mai slab. Nucleoproteidele pot hidroliza n prezena acizilor, bazelor sau a enzimelor specifice. Nucleoproteidele apar n cantiti importante n celule cu nuclee mari, cum sunt cele din ficat, pancreas, timus, spermatozoizi, drojdie de bere, etc, i sunt localizate n infrastructurile celulare, care particip nemijlocit la diviziunea celular i la procesul de biosintez a proteinelor. Nucleoproteidele se clasific dupa natura acizilor nucleici si anume n ribonucleoproteide i deoxiribonucleoproteide. Ribonucleoproteidele sunt localizate n citoplasma celular, n ribozomi i ntr-o proporie mai mic n nucleu. Deoxiribonucleoproteidele sunt componentele cromozomilor i genelor din nucleul tuturor celulelor, fiind prezente de asemenea n mitocondrii. ACIZII NUCLEICI Sunt substane macromoleculare de o importan fiziologic deosebit. Se gsesc rspndii ca nucleoproteide n esuturile animale i vegetale, de unde pot fi extrai cu soluii apoase de fenol sau NaCl. Masa molecular a acizilor nucleici variaz foarte mult, cuprins ntre 104 109. Acizii nucleici sunt substane greu solubile n ap, dar solubile n alcalii diluate, cu care formeaz soluii coloidale. Ei sunt insolubili n alcool etilic i solveni organici, care, de cele mai multe ori produc precipitarea prin denaturare a acestora. Macromoleculele de acizi nucleici supuse unei hidrolize menajate n mediu acid, bazic sau enzimatic, se desfac n molecule din ce n ce mai simple, dup cum reiese din urmtoarea schem:
141
Acizi nucleici (ARN sau ADN) Oligonucleotide (ribo- sau deoxiribo- ) Mononucleotide / \ Nucleozide Acid fosforic / \ Baze azotate Pentoza (Riboz sau Deoxiriboz) / \ Pirimidine Purine - Citozin - Adenin - Uracil - Guanin - Timin Clasificarea acizilor nucleici se bazeaz pe natura componentei glucidice: acizii ribonucleici (ARN) conin riboz, iar acizii deoxiribonucleici (ADN) conin 2deoxiriboz. Unitile monomere ale acizilor nucleici se numesc nucleotide. Fiecare nucleotid este constituit dintr-o baz azotat (purin sau pirimidin), o pentoz (riboz sau deoxitiboz) i acid ortofosforic. Acizii nucleici sunt deci polinucleotide, iar nucleotidele componente sunt legate ntre ele prin legturi fosfodiesterice. BAZE AZOTATE PIRIMIDINICE I PURINICE Bazele azotate, care intr n constituia acizilor nucleici deriv de la dou heterocicluri cu azot: pirimidina i purina, prin substituirea hidrogenului la nivelul atomilor de carbon cu grupri hidroxil (-OH), amino (-NH2) sau metil (-CH3). Bazele pirimidinice prezente n structura acizilor nucleici sunt: uracilul (U), timina (T) i citozina (C). Aceste baze azotate pot exista n dou forme tautomere: cetonic i enolic, numite i forme lactamic lactinic. ntre cele dou forme se stabilete un echilibru, n funcie de pH-ul mediului. La pH fiziologic predomin forma lactamic. Citozina este prezent n ambele tipuri de acizi nucleici, pe cnd uracilul este prezent numai n ARN, iar timina n ADN. Bazele azotate pirimidinice pot stabili legturi covalente de tip N-glicozidic ntre atomul de N din poziia 1 i hidroxilul semiacetalic (C1) al ribozei sau deoxiribozei. 4 N 5 6 1N 5 N7 8 N 9
2 1 N
4 N 3 Purina
Pirimidina
142
Bazele purinice care particip la structura acizilor nucleici, sunt adenina i guanina. Adenina se gsete n ambele tipuri de acizi nucleici i ntr-o serie de compui deosebit de importani pentru organismele vii, cum sunt adenozintrifosfatul (ATP) cu rol de stocare a energiei chimice i n unele enzime. Guanina a fost izolat prima dat din depozitele de guano (escremente de psri). Apare n ambele tipuri de acizi nucleici. Sub form de guanozintrifosfat (GTP) funcioneaz ca donor de energie chimic n diferite procese metabolice. Bazele purinice pot stabili legturi N-glicozidice ntre atomul de N din poziia 9 i hidroxilul semiacetalic al pentozei. Unii derivai naturali ai purinelor se gsesc n stare liber n plante tropicale i au o puternic aciune farmacologic. Dintre acestea amintim de cafein din boabele de cafea, de teofilin din frunzele de ceai i teobromin din boabele de cacao. OH N O N H Uracil (2,4-deoxipiridina) N O N H Timina (5-metil-2,5-oxipirimidina) OH CH3 N O NH2 CH CH
N H Citozina 2-oxi-4-aminopirimidina
O HN O CH CH N HO
OH CH CH N Forma lactimic OH
N N H2N NH
N NH Adenina (6-Aminopurina)
N Guanina (2-amino-6-hidroxi-purina)
143
Nucleozide. Nucelozidele sunt compui formai dintr-o baz pirimidinic sau purinic i riboz sau deoxiriboz. Pentoza este prezent sub form -D-furanozic i este legat de baza azotat printr-o legtur -1-glicozidic Ele pot fi ribonucleozide (conin riboz) sau deoxiribonucleozide (conin 2-deoxiriboz). Principalele nucleozide pirimidinice sunt uridina, timidina i citidina, iar cele purinice sunt adenozina i guanozina. NH2 N NH2 N N
O N N O 5CH2OH Citidina
Nucleotide Nucleotidele sunt esteri fosforici ai nucleozidelor. Ele sunt constituite deci dintr-o baz azotat pirimidinic sau purinic, din pentoz i acid ortofosforic. Dup natura restului de pentoz care-l conin, mononucleotidele se mpart n ribonucleotide i dezoxiribonucleotide, iar dup numrul resturilor de acid ortofosforic n nucleotide mono i trifosforilate. Cele trei componente ale nucleotidelor sunt unite ntre ele prin dou tipuri de legturi, i anume: o legtur N glicozidic i o legtur esteric. n ribonucleotide, acidul fosforic esterific riboza la nivelul grupelor hidroxil din poziia 2, 3 sau 5, iar n dezoxiribonucleotide la gruprile OH din poziiile 3 i 5 ale deoxiribozei. Nucleotidele libere din celul posed radicalul acidului fosforic n poziia 5 (nucleozid 5 fosfai) i ndeplinesc un rol important n diferite procese metabolice. Nucleotidele pirimidinice sunt uridin-monofosfatul (UMP) sau acid uridilic, timidinmonofosfatul (TMP) sau acid timidilic i citidin-monofosfatul (CMP) sau acid citidili. Deoxiribonucleotidele senoteaz prescurtat dUMP; dTMP i dCMP. Nucleotidele au un caracter acid, datorit radicalului fosforic, care poate disocia. OH OH N O N O OH 5CH2OP O \ OH uridin-monofosfat (UMP) N O N O OH 5CH2OP O \ OH Deoxitimidin-monofosfat ( dTMP ) 144 CH3
CH2 OH Deoxiadenozina
n celule s-a identificat o nucleotid ciclic i anume adenozin-3,5monofosfatul ciclic (AMP ciclic), n care acidul fosforic se esterific cu ambele grupri OH din poziiile 3 i 5 ale pentozei cu stabilirea unei legturi fosfodiesterice interne. Aceast nucleotid ciclic funcioneaz ca un mesager secund, ce poart mesajul primit de la hormon (prim mesager). Nucleozid-difosfaii i trifosfaii sunt nucleotide polifosforilate, care conin dou sau trei resturi de acid fosforic n molecul. Ele sunt compui naturali deosebit de importani n metabolism, participnd la procesele de stocare i utilizare a energiei. Din acest motiv se numesc compui macroergici. Cele mai importante nucleotide polifosforilate sunt adenozindifosfatul (ADP) i adenozin-trifosfatul (ATP). Resturile de acid fosforic sunt legate prin legturi macroergice,notate prin semnul ~, care se desfac prin hidroliz, elibernd aproape 8 kcal/mol pentru fiecare legtur. NH2 N N O N N O CH2OP \ OH AMP ADP Adenozin trifosfat ATP O O~P \ OH O~P \ OH O O~
ATP-ul are i funcie de coenzim de transfer a una sau dou grupri fosfat pe o substan acceptoare: acceptor de acceptor de ATP --------------------> ADP + H3PO4 -------------------> AMP + H3PO4 H3PO4 H3PO4 n esuturi exist i alte nucleotide polifosforilate: guanozin-trifosfatul (GTP) i inozin-trifosfatul (ITP), care intervin n procese de energetic celular. Nucleozidtrifosfaii sunt folosii de celul pentru sinteza de acizi nucleici, precum i n activarea unor compui. Astfel, CTP particip la biosinteza lipidelor complexe, iar UTP la biosinteza oligo- i poliglucidelor. Structura macromolecular a acizilor nucleici Acizii nucleici sunt polimeri macromoleculari n urma condensrii nucleotidelor unitaile lor structurale. Polinucleotidele rezult din mononucleotide, ntre care se stabilesc legturi covalente 3 5 fosfodiesterice. Aceste legturi se formeaz ntre gruparea OH din poziia 3 a deoxiribozei (n ADN) sau ribozei (n ARN) unui nucleotid i gruparea OH din C5 al deoxiribozei sau ribozei unui nucleotid nvecinat, prin intermediul unui rest fosfat. Structura polinucleotidelor poate fi redat ntr-o form simplificat,n care bazele azotate sunt codificate prin literele A, G, C. T sau U i situate n poziia C1 a pentozei, radicalul acidului fosforic prin P, iar riboza sau deoxiriboza printr-o linie pe care sunt marcate poziiile 3 i 5 ale gruprilor OH ce particip la stabilirea legturilor 3 - 5 fosfodiesterice.
145
Structura i proprietile acizilor deoxiribonucleici ADN-ul este o substan macromolecular, structura sa implic diferite nivele de organizare molecular. Structura primar indic natura, secvena i proporia nucleotidelor purinice care alctuiesc macromolecula de ADN. Mononucleotidele principale dAMP, dGMP, dCMP i dTMP sunt dispuse ntr-o anumita ordine (secven specific) i stabilesc legturi internucleotidice de tip fosfodiesteric. Macromoleculele de ADN difer ntre ele prin numrul, raportul i secvena unitilor nucleotidice. Din acest motiv fiecare specie este caracterizat prin ADN-ul su specific. ADN-ul funcioneaz ca biomolecul informaional, iar informaia genetic stocat n aceste macromolecule este codificat n secvena bazelor azotate din nucleotide. Structura secundar i teriar a ADN. n 1953 Watson i Crick, bazndu-se pe date experimentale privind proprietile fizico-chimice ale ADN, precum i pe rolul pe care acesta il indeplinete n transmiterea caracterelor ereditare, au elaborat modelul tridimensional al structurii ADN. Astfel molecula ADN este reprezentat printr-un dublu helix rsucit spre dreapta, format din dou catene polinucleotidice stabilizate prin legaturi de hidrogen ntre perechile de baze complementare A T i G - C. Cele dou catene polinucleotidice, care formeaz fibre de ADN, au resturile fosfat orientate spre exterior, iar bazele azotate spre interior. Aceast orientare este determinat de legturile de hidrogen, care se stabilesc ntre bazele azotate complementare, care se gsesc fa n fa. Stabilirea legturilor de hidrogen urmeaz o anumit regularitate i anume, o baz pirimidinic se leag de una purinic sau invers. Astfel, timina se gasete legat ntotdeuna de adenin prin dou legturi de hidrogen, iar citozina de guanin prin trei astfel de legturi. 5 3 Fosfat Pentoz Adenin............. Timin Pentoz Fosfat Fosfat Pentoz Timin .............. Adenin Pentoz Fosfat Fosfat Pentoz Guanin .............Citozin Pentoz Fosfat Fosfat Pentoz Timin ...............Adenin Pentoz Fosfat Fosfat Pentoz Citozin ..............Guanin Pentoz Fosfat 3 5 Cele dou catene polinucleotidice ale unei molecule de ADN sunt complementare, datorit legaturilor dintre bazele azotate. Cele dou catene nu sunt orientate n aceeai direcie referitor la legturile lor internucleotidice, ci n direcii opuse, adic antiparalele . Aceasta nseamn c dac ntr-o caten legturile internucleotidice sunt legturi 5 3 fosfodiesterice, atunci n catena complementar nucleotidele vor fi legate prin legturi 3 5 fosfodiesterice. Astfel, macromolecula de ADN este constituit din dou catene polinucleotidice rsucite ntr-o spiral dubl (dublu-helix) orientat spre 146
dreapta, catenele polinucleotidice sunt nfurate n jurul unei axe teoretice i orientate antiparalel. Pasul spiralei are valoarea de 34 i cuprinde o nirare de 10 perechi nucleotide, iar diametrul spiralei este de 20 . Structura de dublu helix confirmata experimental este n concordan cu numeroase proprieti fizice i chimice ale ADN i explic rolul pe care acest acid nucleic l ndeplinete la transmiterea informaiei genetice. Proprieti fizice i chimice ale ADN Moleculele native de ADN animal, vegetal i bacterian au mase moleculare s i dimensiuni mari. Ele nu pot fi obinute n stare intact, din cauza instabilitii lor. Simpla agitare determin depolimerizarea materialului cu formare de fragmente cu mase moleculare de ordinul milioanelor. ADN-ul bacterian are M=10 8 109, o lungime de 50 m i conine 1,95.105 perechi de nucleotide; ADN-ul din celulele eucariote are M=10 12 numrul de mononucleotide fiind de aproximativ 3.109 perechi. Denaturarea moleculelor de ADN poate s fie produs de diferii factori. Astfel, dac soluiile de acid nucleic sunt nclzite, supuse unor variaii mari de pH sau tratate cu alcooli, cetone, sruri ale metalelor grele etc., structura dublu-helicoidal regulat a ADN este disociat i trece ntr-o form dezordonat. Renaturarea ADN-ului se realizeaz prin rcire lent a soluiei de ADN, cnd cele dou catene polinucleotidice, disociate prin denaturare termic, se recombin i reconstituie aproape complet structura bicatenar helicoidal a moleculei ADN. Dac soluia de ADN nclzit este supus unei rciri rapide, catenele polinucleotidice separate nu se mai pot recombina, iar macromolecula de ADN este denaturat ireversibil. Hibridarea este procesul ce se poate petrece ntr-o soluie care conine catene polinucleotidice provenite din molecule de ADN diferite, dar de la specii nrudite (pentru ca lanurile polinucleotidice s prezinte un grad de analogie suficient de mare); care se pot recombina, formnd hibrizi de ADN. O catena polinucleotidic de ADN se poate combina i cu o caten polinucleotidica de ARN, obinndu-se o macromolecul hibrid ADN - ARN cu structura dublu helicoidal, cu condiia ca secvena bazelor azotate din cele dou catene s fie complementar, iar uracilul s ocupe locul timinei din ADN. Obinerea unor astfel de hibrizi prezint un mare interes pentru studierea mecanismului de replicare a ADN i de transcripie a informaiei genetice. Hidroliza ADN-ului. Macromolecula de ADN poate fi scindat hidrolitic sub aciunea acizilor sau a unor enzime specifice (endo- i exonucleaze) cu obinerea unor oligodeoxiribonucleotide, iar n final a deoximononucleotidelor componente: dTMP, dCMP dAMP i dGMP. Structura i proprietile acizilor ribonucleici Acizii ribonucleici - ARN - sunt substane macromoleculare, alctuite din uniti structurale numite ribonucleotide. Acestea sunt: AMP, GMP, UMP i CMP. Catena polinucleotidic a acestor acizi este format prin cuplarea acestora. Structura primar a ARN este similar cu a ADN, diferenele structurale aprnd la nivelul pentozei (riboza nlocuiete deoxiriboza) i a unei baze pirimidinice (timina este nlocuit cu uracilul). Cele patru ribonucleotide: AMP, GMP, UMP i CMP sunt dispuse ntr-o anumit secvena, iar legturile dintre acestea sunt 3' - 5'- fosfodiesterice. Acizii ribonucleici sunt monocatenari cu mase moleculare mai mici n comparaie cu acizii deoxiribonucleici. n celule apar trei tipuri majore de ARN: ARN ribozomal (ARNr), ARN de transfer sau solubil (ARNr) i ARN mesager (ARNm). Aceste tipuri de ARN joac un rol esenial n biosinteza proteinelor . Ele se deosebesc prin masa molecular, compoziia n baze azotate, numrul de nucleotide, precum i prin raporturile cantitative ntre baze. n comparaie cu ADN, cantitatea de ARN
147
din celula este de 5 - 10 ori mai mare . Diferitele tipuri de ARN se sintetizeaze n nucleul celular i apoi trec n citoplasm, unde ndeplinesc funcii biochimice diferite. ARN ribozomal reprezint 75-85% din totalul ARN din celul. Macromolecula de ARN, conine 100-3000 de nucleotide, structura acestora fiind monocatenar, parial spiralat. Masa molecular este cuprins ntre 3.104 i 1.106 .ARN ribozomal intr n structura ribozomilor, unde sunt combinai cu proteine specifice sub form de ribonucleoproteide (ribozomii sunt agregate multimoleculare, ce conin cca. 65% ARN i 35% proteine). Ei reprezint sediul biosintezei proteinelor. ARN mesager reprezint 3-5% din totalul ARN. Are o structur monocatenar liniar. Secvena nucleotidelor n macromolecula ARNm este similar cu una din catenele ADN pe care se sintetizeaz. Numrul de mononucleotide din molecula variaz ntre 75 i 3000. Masa molecular a ARNm este de ordinul 104 106. ARN mesager are rolul de a copia i a transmite informaia genetic de la molecula ADN la nivelul ribozomilor i de a servi ca model pentru biosinteza proteinelor specifice. Aceasta nseamn c secvena de nucleotide a ARNm detzermin nmod specific secvena de aminoacizi dintr-o molecul de protein. Din punct de vedere metabolic ARN mesager este foarte instabil n comparaie cu celelalte tipuri de ARN. El este degradat i resintetizat n mod continuu. ARN de transfer apare n celul n proporie de 10-20% din totalul ARN, avnd rolul de a lega specific diferii aminoacizi din citoplasm i de a-i transporta la nivelul ribozomilor, unde se realizeaz sinteza de proteine. Ei sunt substane macromoleculare, avnd masele moleculare de ordinul 3.104, fiind formate dintr-un numr relativ sczut de ribonucleotide (75-90) n comparaie cu celelalte tipuri de ARN. Acizii ribonucleici de transfer, avnd molecul relativ mic, au fost izolai i li s-a determinat strcutura primar la un numr apreciabil dintre ei (20 din 60). Ei au structur monocatenar de tip ordonat. Indiferent de specia molecular de ARNt, acesta prezint la captul 3 a catenei polinucleotidice trei baze CGA, unde se leag covalent aminoacidul specific. Complexul aminoacil ARNt reprezint deci forma activ de transfer a aminoacidului la ribozomi, unde acesta este cuplat enzimatic la lanul polipeptidic n curs de sintez, pe baza unui mecanism de adaptare la informaia programat de secvena nucleotidelor din ARNm ataat la aceti ribozomi (Lujerdean, Varga, 2002, Roca, 2004).
148
Bibliografia:
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
ARINI Ioana, CRISTESCU D., 2006. Biologie animal i vegetal. Ed.Paralela 45, Bucureti. BERCA M. 2006. Planificarea de mediu si gestionarea resurselor naturale. Ed. Ceres Bucuresti BARNEA M., PAPADOPOL C., 1975. Poluarea i protecia mediului. Ed. tiinific i enciclopedic. BOTNARIUC N., 1976. Concepia i metoda sistemic n biologia general. Ed. Acad.R.S.R., BOTNARIUC N., VDINEANU V., 1982. Ecologie. Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti, BURCU A., BURCU Al., 2006. Educaia ecologic. Dezvoltarea durabil i calitatea vieii. Ed. Mega. CIPLEA L.I., CIPLEA Al., 1975. Poluarea mediului ambiant. Ed. Tehnica. Bucuresti. CRISTEA, V., 2006. Conservarea si protectia biodiversitii, n contextul dezvoltrii durabile i al integrarii Romniei n U.E. Environment & Progress-6/2006, Cluj-Napoca: 89-98 9. CRISTEA, V., DENAEYER Simone, 2004. De la biodiversitate la OGM-uri ? Colectia Universitas, seria Biologie, Ed. Eikon, Cluj-Napoca) 10. DORDEA Manuela, COMAN N., 2005. Ecologie uman. Casa Crii de tiin, Cluj-Napoca. 11. DRGAN-BULARDA M., SAMUEL A. D., 2006. Microbiologie general. Ed. Univ. Oradea 12. ELIADE G., GHINEA L., TEFANIC G., 1975. Microbiologia solului. Ed. Ceres Bucuresti. 13. FABIAN ANA, ONACA RODICA, 1999. Ecologie aplicat. Casa de editur SARMIS, Cluj 14. FELSZEGHY E., ABRAHAM A., 1972. Biochimie. Ed. didactica si pedagogica, Bucureti. 15. FIIU A. 2004. Ecologie i protecia mediului. Academicpres ,Cluj-Napoca. 16. GHIDRA V., SESTRA R., BOTU M., BOTU I., 2004. Biodiversitate i bioconservare. Ed. AcademicPres,Cluj-Napoca: 56-100. 17. HAIDUC IOVANCA, BOBOS L., 2005. Chimia mediului i poluanii chimici, Ed. Fundaiei pentru Studii Europene, Cluj-Napoca. 18. LUJERDEAN Augusta, VARGA Andrea, 2002. Biochimie descriptiva. Ed.Napocastar. 19. MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/ 20. OZUNU AL., TEODOSIU Carmen, 2002. Prevenirea polurii mediului. Ed. Univ. Transilvania Brasov. 21. PETRESCU I., 1986. Biochimie. Ed. Univ. Babe-Bolyai, Facult. Biologie, Geografie si Geologie. 22. ROCA E.G. , 2004. Biochimie. Ed. USAMV Cluj-Napoca. 23. ROU Cristina, 2006. Bazele chimei mediului: elemente teoretice si aplicatii practice.Ed.Casa Cartii de Stiinta 24. ROCA I. D., 1977. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti. 25. RU C., CRSTEA S.,1983. Prevenirea i combaterea polurii solului. Ed. CERES, 26. SHLEANU V., 1973. Eseu de biologie informaional. Ed. tiinific, Bucureti 27. STUGREN B., 1982. Bazele ecologiei generale. Ed. tiinific i enciclopedic, Bucureti. 28. STUGREN B., 1994. Ecologie teoretic. Ed. Sarmis, Cluj Napoca. 29. TEFANIC G., SANDOIU D.I., GHEORGHITA N., 2006. Biologia solurilor agricole. Ed. Elisavaros, Bucureti 30. VDINEANU V., 1998. Devoltare durabil. Ed. Univ. Bucureti. 31. VIEHMANN I., RACOVI Gh., ERBAN M., 1963. Ghearul de la Scrioara. Ed. Meridiane, Bucureti. Ordonanta de urgen a Guvernului 195/ 22.12.2005 privind protectia mediului. Monitorul Oficial al Romniei nr.1196/30.12,2005 Ordinul 876/2004 al Ministerului Mediului i Gospodririi Apelor pentru autorizarea activitatilor cu impact semnificativ asupra mediului. Monitorul Oficial al Romniei. Partea I. Nr. 31/11.01.2005.
149
MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, ISBN 978-606-92028-4-5. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
Partea a II-a
Ecofiziologie ambiental
Cuprins..............................................................................................................................................................150 1. Introducere n ecofiziologia ambiental.....................................................................................................152 1.1. Evoluia cunotinelor n domeniul fiziologiei. 2. Organizarea funcional a celulei vegetale.................................................................................................155 2.1. Fiziologia celulei vegetale. Funciile subunitilor structurale din celul.
Citoplasma. Hialoplasma. Organitele citoplasmatice. Reticulul endoplasmatic (r.e.), ergastoplasma, mitocondrii, plastide. Cloroplastele .Cromoplastele.Leucoplastele. Ribozomii.Dictiozomii.Lizozomii. Membranele plasmatice. Plasmalema, plasmodesme, tonoplast. Nucleul. Vacuolele. Membrana celulozica (peretele celular).
3. Organizarea funcional a celulei animale................................................................................................174 3.1. Fiziologia celulei animale. Structuri funcionale de baz:
Sistemul de membrane (membrana periplasmatic, endomembranele; Matricea omogen; Granulele refringente.
4. Integrarea sistemului celular animal..........................................................................................................178 4.1. Sistemul energetic al celulei animale. Mecanismele furnizoare de energie. Mitocondriile
Integrarea mecanismelor energetice celulare. Structurile celulare implicate n fenomenele de oxidare.
4.2. Sistemul sintezei proteinelor. 4.3. Sistemul motor nemuscular. 4.4. Integrarea sistemului celular animal. 5. Integrarea sistemului celular vegetal...........................................................................................................188 5.1. Sistemul energetic al celulei vegetale. Metabolismul glucidelor.
Anabolismul glucidelor- fotosinteza. 1. Fotofosforilarea, 2. Fotoliza apei, 3. Fixarea CO 2 (esterul ribulozol ,5-difosfor i c,Ciclul Calvin, acidul 3-fosfogliceric). Formarea glucidelor, lipidelor, proteinelor. Catabolismul glucidelor (esterul glucozo-6-fosforic=ester Robinson). 1. Degradarea anaerob (ciclul glicolizei) i aerob (ciclul Krebs). 2. Calea pentozo-fosfailor: riboza, deoxiriboza. 3. Calea acizilor uronici: acizi uronici, pentoze, acid ascorbic. 4. Degradri fermentative (alcoolic, lactic, butiric, acetic, succinic i citric)
6. Sistemele funcionale ale integrrii i nutriiei organismului vegetal (completri optionale)...........196 Integrarea sistemului celular vegetal, schimburile celulare, permeabilitatea celular la plante. 6.1. Nutriia minerala a plantelor
Compoziia chimic a plantelor Compozitia elementar i sumar a plantelor Legtura dintre compoziia chimic a scoarei terestre i a plantelor
150
7.3. Transpiraia.
Factorii care influenteaz transpiraia: Factori externi (Umiditatea relativ a aerului. Lumina. Temperatura). Factori interni: Suprafaa frunzei. Densitatea stomatelor. Permeabilitatea membranelor celulare. Perii de pe frunze. Rolul transpiraiei. Variaia diurn a transpiraiei. Variaia sezonier a transpiraiei. Gutaia. Ascensiunea apei n plant. Efectele excesului i ale deficitului de ap. Factorii de care depinde absorbia apei. Factorii care influeneaz pierderea de ap.
8. Nutriia mineral a plantelor......................................................................................................................215 8.1. Rolul elementelor minerale n nutriia plantelor. Azotul. Potasiul. Fosforul 8.2. Factorii de mediu ai absorbiei elementelor minerale.
Factori externi: 1-Umiditatea solului. 2-Temperatura. 3-Lumina. Factori interni: 1-Suprafaa sistemului radicular. 2-Arhitectura sistemului radiculear. 3-Micorizele.
8.3. Solurile toxice. Efectele metalelor grele: plumbul, cadmiul, cuprul, zincul, aluminiul, nichelul. 8.4. Srturile. Efectele srurilor asupra plantelor. 9. Fotosinteza.....................................................................................................................................................218 9.1. Rolul fotosintezei. Radiaia solar. Pigmenii asimilatori. Efectele procesului de fotosintez. 9.2. Desfurarea fotosintezei. Reacia biochimic a fotosintezei: Ciclul C3 , Ciclul C4 , Ciclul CAM. 9.3. Factorii de mediu care influeneaz fotosinteza.
Factori externi: Lumina: intensitatea luminii,compoziia spectral a luminii. Temperatura. Concentraia O2 Concentraia CO2. Elementele mineral. Factori interni: Starea de hidratare a esuturilor. Cantitatea de clorofil.
.
10. Metabolismul, creterea i dezvoltarea plantelor......................................................................................222 10.1. Metabolismul substanelor de rezerv: Metabolismul lipidelor, proteinelor, glucidelor. 10.2. Metabolismul secundar. Terpene, fenoli, alcaloizi. Alelopatia. 10.3. Metabolismul respirator (respiraia). 10.4. Influena factorilor de mediu asupra creterii i dezvoltarii plantelor. 10.5. Creterea i dezvoltarea plantelor. 10.6.Hormonii de cretere: auxinele, citochininele, giberelinele, acidul abscisic (ABA), etilena. 10.7.Fiziologia stresului. 11. Sistemele funcionale ale integrrii i nutriiei organismului animal (completri optionale).........227 Integrarea sistemului celular animal. Schimburile celulare, permeabilitatea celular la animale. 11.1. Schimburile celulare 11.2. Celula, sistem deschis 11.3. Mediul intracelular i mediul extracelular 11.4. Permeabilitatea celulara
4.1. Factorii ce influeneaz permeabilitatea celular. 4.2. Mecanismele permeabilitii celulare. 4.3. Reglarea permeabilitii. Factorii chimici, fizic, biologici.
12.
13.
11.5. Pinocitoza. Permeabilitatea epiteliilor Integrarea organismului animal pluricelular. Mecanisme trofice, hormonale, nervoase....................230 12.1. Constana mediului intern sau homeostazia, starea staionar, echilibrul dinamic. 12.2. Mecanismele integratoare: sistemul trofo-integrator, stimulo-integrator, psiho-integrator. 12.3. Sistemul trofo-integrator. Mezenchimul i sistemul reticulo-histiocitar; sngele i limfa. 12.4. Sistemul stimulo-integrator. Sistemul endocrin. Sistemul nervos. Sistemul neuro-endocrin; Funcia trofic integratoare....................................................................................................................235 13.1. Efectul factorilor de mediu asupra funciei trofice. Alimentaia. Nutrienii. Rolul nutrienilo 13.2. Metabolismul energetic. Metabolismul bazal. Factorii care influeneaz cheltuielile energetice. 13.3. Regimul nutritiv al animalelor.
Funcia digestiv n seria animal. Digestia. Absorbia nutrienilor. Funcia respiratorie. Producerea i stocarea energiei. Lantul respirator. Glicoliza.
14.
Impactul polurii i degradrii factorilor de mediu asupra organismelor vii..................................273 14.1. Elemente de ecotoxicologie. Poluarea solului. Surse de poluare atmosferic. Poluarea apelor. 14.2. Efectele unor poluani i prevenirea lor. 14.3. Indicatori biologici de poluare. Biomonitoringul......................................................................325 Bibliografia...349
151
Bibliografia recomandat:
1. APOSTU S., 2006 Organisme modificate genetic (OGM) Folosite n alimentaia i sntatea omului i animalelor. Ed.RISOPRINT ClujNapoca 2. DORDEA Manuela, COMAN N., 2005. Ecologie uman. Casa Crii de tiin, Cluj-Napoca 3. DOBROT Cristina, YAMASHITA M., 1999. Creterea i dezvoltarea plantelor. Casa de ed.Gloria 4. GHIDRA V. 2004. Ecotoxicologia si monitorizarea principalilor poluanti. Ed. Studia.Cluj-Napoca. 5. GHIDRA V., ZAHARIA C. 2002. Ecotoxicologie. Ed. Studia, Cluj-Napoca 6. GHERGHEL P., 2000. Fiziologie cu elemente de comportament.Casa crii de tiin. Cluj 7. ROCA I. D., 1977. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti. 8. ROIORU Corina, SEVCENCU C., GHERGHEL P., 1995. Lucrri practice de fiziologie animal pentru uzul studenilor. Univ. Babe-Bolyai, Cluj-Napoca. 9. ZAMFIR, GH., 1979. Efectele unor poluani i prevenirea lor. Ed. Acad. RSR. Bucureti. 10. MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, partea a II-a - Ecofiziologie ambientala. Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
ECOFIZIOLOGIE AMBIENTAL 1. Introducere n ecofiziologia ambiental In cadrul tiinelor biologice, disciplina Ecofiziologie ambiental are ca obiectiv cunoaterea aspectelor de Fiziologie animal i vegetal, a importanei lor n ecosistemele naturale i antropizate, avnd n vedere c fiziologia reflect variaiile organismului n funcie de factorii de mediu, inclusiv de impactul uman, constituind baza teoretic a productivitii biologice (Roca I.D., 1977). Ecofiziologia ambiental prezint cunotinele de baz privind funciile organismelor vii, plante i animale, n legtur cu factorii de mediu; precizeaz mecanismele de interaciune biunivoc ntre mediul vegetal-animal i societatea uman, referindu-se la influenele mediului vegetal i animal asupra societii, asupra sntii umane i, la impactul interveniilor umane asupra mediului vegetal sau animal. Scopul disciplinei de Ecofiziologie ambiental este familiarizarea studenilor cu problemele practice ale evalurii i limitrii disfunciilor organismelor vii cauzate de factorii de mediu, probleme importante n domeniul protejrii mediului, gospodririi apelor, combaterii noxelor industriale i urbane, valorificrii resurselor naturale, pentru susinerea procesului de dezvoltare durabil a societii. Din cuprins, menionm tematica prezentat dup literatura de specialitate: 1. Sistemele funcionale ale integrrii i nutriiei organismului animal. Integrarea sistemului celular animal. Schimburile celulare, permeabilitatea celular. Integrarea organismului animal pluricelular. Mecanismele de integrare : trofice, hormonale, nervoase de integrare (dup Roca, 1977; Raicu i colab., 1972; Strungaru, Pop Mircea, Helco, 1983; Gherghel, 2000). Ecotoxicologie animal. Impactul polurii i degradrii factorilor de mediu asupra organismului animal (dup Gherghel, 2000; Roioru i colab., 1995; Ciplea, 1978; Dordea i Coman, 2005; Ghidra, 2004; Zamfir, 1979). Bioindicatori de poluare (dup Oros, 2002; Oros i Draghici, 2002; Zamfir, 1979).
152
2. Mecanisme funcionale ale integrrii i ecofiziologia plantelor. Influena factorilor de mediu asupra creterii i dezvoltarii plantelor. Absorbia, conducerea i eliminarea apei. Implicaiile ecofiziologice ale apei. Rolul elementelor minerale n nutriie. Fotosinteza. Metabolismul plantelor. Metabolismul substanelor de rezerv - lipide, proteine, glucide. Metabolismul secundar. Terpene, fenoli, alcaloizi. Metabolisul respirator. Respiraia. Ecofiziologia plantelor i protecia mediului. Atmosfera, hidrosfera, pedosfera i factorii naturali de stress. Adaptri ale plantelor la temperatur. Alelopatia. Adaptri ale plantelor la aciuni complexe ale mediului (dup Boldor i colab., 1981, 1983, Dobrot Cristina, Masamich, 1999, Peterfi, Slgeanu, 1972, Trifu, Brbat, 1997). Rezistena plantelor la poluanii din atmosfer, sol, ap. Bioindicatorii (Oros V., 2002; Oros V., Camelia Draghici, 2002; Ozunu, Carmen Teodosiu, 2002; Zamfir, 1979). Ecofiziologia este o ramur a tiinelor biologice care se ocup cu studiul vieii organismelor vii n relaie cu factorii de mediu. Noiunea de fiziologie i are originea n limba greac i vine de la cuvintele physis - natur i logos - tiin. Termenul de fiziologie s-ar traduce deci cu tiin despre natur". Fiziologia urmrete desfurarea succesiv a proceselor vitale care se petrec n organismul viu, respectiv dinamica activitii fiziologice i relaiile cu mediul nconjurtor. n interpretarea fenomenelor fiziologice caracteristice diferitelor specii, fiziologia se bazeaz pe teoria evoluionist, elaborat de Ch. Darwin n capodopera sa Originea speciilor", 1859. Procesele vitale sunt studiate n strns legtur cu variaia factorilor biotici i abiotici din mediul ambiant n care triesc organismele vii n cursul dezvoltrii lor ontogenetice. La baza lucrrilor de fiziologie stau conexiunea fenomenelor, caracterul obiectiv i concret al fenomenelor etc. (Milic i colab. 1982). 1.1. Evoluia cunotinelor n domeniul fiziologiei
Ca disciplin independent fiziologia plantelor a aprut n secolul al XVIII-l ea. Du p Mi li c i col ab., 1982 ., pri ntre pio ni eri i acest ei discipline se numr Jo seph Priest1ey (1733-1804) care a artat c aerul este tot att de necesar pent ru viaa plantelor ca i pentru viaa animalelor, dar plantele au n plus proprietatea de a purifica" aerul viciat de animale. Jean Senebier (1742-1809) public, n anul 1800, cinci volume di n lucrarea Physiologie vegetale", n care trateaz problema nutriiei minerale a plantelor. Th eo do re de S au ssu re (1 76 7 -1 84 5 ) public, n anul 18 04 , l u crarea "Recherches chimiques sur la vegetation", n vremea cnd despre nutriia plantelor domnea cea mai mare confuzie. El aduce dovada c plantele verzi iau carbonul din CO2 existent n aer i st abilete c planta obine azotul di n soluiile existente n sol i nu din atmosfer, aa cum se credea. De la Sau ssure a rmas ideea c n nu t ri i a pl ant el or i nt ervi n t rei medii : apa, atmosfera i solul. Jo achim Dutrochet (1776-1847), u n ant i vi t al i st co n vins, a susinut unitatea lumii materiale considernd c la baza acesteia stau legile fizico-chimice. El s-a impus printr-o mare descoperire a secolului - osmoza - i prin aplicarea acesteia la studiul diferitelor manifestri vitale (1826). Wilhelm Pfeffer (1845-1920) a construit un osmometru perfecionat (cu membran de ferocianur de cupru), cu care a realizat msurtori preci se asupra presiunii osmotice. Pe baza studiilor lui Dutrochet i Pfeffer, Hugo de Vries realizeaz, lucrri referitoare la plasmoliz, folosind celula vegetal drept osmometru biologic. n anul 1810, Justus von Liebig fo rmul eaz t eori a nut ri i ei minerale a plantelor. Prin aceasta el marcheaz nceputul unei importante perioade n istoria chimiei agricole i biologice, dnd un viguros impuls teoriei nutriiei minerale a plantelor. J.B.D. Bou ssingault (1802-1887), savant francez, chimist i agronom, introduce, n anul 1837, metoda experienelor de cmp pentru cercetarea nutriiei pl antelor. n 1830, fiziologul german Julius Sachs (1832-1897) pune la punct tehnica culturii plantelor n soluii nutritive, alctuite din sruri minerale n proporii cunoscute. n 1865, Sachs public un tratat de fiziologie vegetal, care cuprinde o serie de experiene proprii, a cror metodologie a devenit clasic i se folosete cu succes n fiziologia plantelor. Cultura plantelor n soluii nutritive (hidropanica) a pus n eviden antagonismul ionilor, necesitatea folosirii unor soluii nutritive echilibrate ionic, limitele pH la care cresc plantele din diferite specii, importana elementelor .a.
153
n Rusia, K. A. Timireazev (1543-1920) studi az procesul de fotosintez i scoate n eviden rolul clorofilei n fixarea energiei solare, precurn i rolul cosmic al plantei pentru viaa de pe pmnt. Prin lucrrile sale, devenite clasice, Timireazev a combtut coala german n frunte cu Drapper, demonstrnd c nu lumina ga1ben-portocalie ci lumina roie este mai eficace n fotosintez. Alfred Mitscherlich (1874-1956) ntreprinde o serie de experiene, devenite clasice, folosind vase de vegetaie, unde controleaz cu strictee factorii de vegetaie, mai ales apa i ngrmintele minerale. n anul 1890, bacteriologul rus Serghei Vinogradski (1856-1953) desco per i i zol eaz bact eriil e ni trifi cato are (nitritbacterii i nitratbacterii) i pune bazele microbiologiei solului. Tot el descoper, n 1895, prima bacterie liber fixatoare de azot (Clostridium ), iar cu un an mai trziu (1896) Voronin constat c nodozitile de pe rdcinile leguminoaselor sunt pline de bacterii. n 1886-1887, Helriege i Wilfarth demonstreaz experimental c leguminoasele sunt capabile s foloseasc azot liber din aerul atmosferic prin intermediul microorganismelor din nodoziti. Descoperirea hormonilor vegetali a deschis noi ci de cercetare n fiziologia vegetal i totodat a luat natere o nou ramur - hormonologia. Substanele stimulatoare de cretere au fost puse n eviden de ctre J. Boysen-Jensen (1 910), A. P aal (1914 ), H. Sodi ng (1923-1924), F.W. Went, N. Holodni (1928). n anul 1933 aceste substane au fost izolate din plante i numite auxine de ctre chimistul F. Kogl. Cunotinele acumulate dup descoperirea auxinelor au contribuit la noi descoperiri de substane bioactive, cum sunt: giberelinele, chinetinele, retardanii i inhibitorii. n anul 1920, W.W. Garner i A.H. All ard ajung la concluzia c procesele de nflorire i fructifitcare depind de durata perioadei de lumin i de ntuneric care alterneaz n fiecare zi. Ei au numit acest fenomen fotoperiodism". Rezistena plantelor la ger este o problem de mare importan pentru agricultur, pe o mare ntindere a globului terestru. Vtmrile plantelor din cauza temperaturilar sczute i capacitatea de refacere biologic dup ngheurile repetate din cursul iernii au preocupat pe fiziologi nc de la nceputul secolului XX ( Sachs, Mu l l er -Thurgau, Molisch .a.). Importante contribuii la elucidarea problemelor rezistenei la ger au adus, ceva mai trziu, N.A. Maksimov, I.I. Tu mano v n Ru si a i J. Levitt n S.U.A. Rezistena plantelor la secet este o problema de aceeai importan pentru angricultur ca i rezistena la ger. Rezultate de seam n cunoaterea acestei probleme au adus A.F.W. Schimper, B.A. Keller, .a. lmportante contribuii au adus, n ultimul timp, la cunoaterea fotosintezei M. Calvin, D. Arnon, A. Benson, iar n domeniul biochimiei respiraiei A.N. Bach, O. Warburg, etc. Meri t e deo sebi t e r evi n l u i H. Lu ndeg ardh , J. Su t cl i ffe, H . J enny, W.J. Osterhouth, D.A. Sabinin .a. pentru contribuii aduse la cunoaterea mecanismului de absorbie fiziologic a elementelor minerale de ctre plante (dup Milic i colab. 1982). F IZIOLOGIA P LANTELOR N ROMNIA. Dup nfiin area uni versit ilor din Iai (1860), Bucureti (1864) i Cluj (1872), programele de nvmnt cuprindeau i noiuni despre fiziologia plantelor. Primii profesori de botanic i fiziologie au lost Dimitrie Brndza (1846-1895), Atanasie Ftu (1815-1886) i Dimitrie Grecescu (1841-1910). La 12 martie 1907 a luat fiin catedra independent de anatomi e i fiziologie vegetal la Universitatea din Bucureti. n scurt timp, pe lng aceast catedr, se dezvolt unul dintre cele mai bine dotate laboratoare de fiziologie vegetal din sud-estul Europei, condus de ilustrul profesor Emanoil Teodorescu, ntemeietorul colii romneti de fiziologie veget al . Emanoil Teodorescu urmeaz l i ceu l l a Botoani i u ni v ersi t at ea l a Iai , dup care pleac la P aris, unde i susine do ctoratul su b co nducerea profesorului Gaston Bonnier, la Sorbona. El a efectu at i mportant e cercet ri ti i n ifi ce i a format o serie de elevi i colaboratori care au dus mai depart e opera sa. Ion C. Constantineanu, fratele lui Em. Teo dorescu i pri mul su asi st ent, a t erminat Uni versitat ea l a Iai i doctoratul la Halle, n Germa ni a. n anul 1912 devi ne titularul cat edrei de fiziologia plantelor la Universit at ea di n Iai. La Uni versit atea di n Cluj, prima catedr de fiziologie vegetal ia fiin n anii 1922, avn d ca t i t u l ar pe pro fesorul Io n Grin escu. P ri nt re u rmai i cti to ri lo r fi zio lo gi ei ro mnet i t rebu i e ami nti t acad. Emil Pop, profesor de fiziologia plantelor la Universi t at ea di n Cluj, dascl de rar valo are, care a lsat o import ant oper de cercetare t i i ni fi c, precu m i un valoros manu al de fiziologi e. De la al egerea sa ca academi cian i p n l a sfri tul vi eii a condus secia de fi zi o lo gi e veget al di n cadrul Academiei R.S. Romnia. Acad. Nico1ae Sl geanu, care a fost profesor de fiziologia plantelor la Uni versitat ea di n Bucureti, s-a ngrijit de editarea operel er lui E.C.Teodorescu, a reali zat o important oper personal de cercet are tiinifi c, fii nd nt emeietorul colii romneti de fotosintez (Milic i colab. 1982).
154
2. Organizarea funcional a celulei vegetale 2.1. Fiziologia celulei vegetale. Citofiziologia. Fiziologia celular sau citofiziologia se ocup cu studiul fenomenelor vieii care se petrec n interiorul celulei. Ea constituie capitolul fundamental al fiziologiei, deoarece toate manifestrile vitale au loc n materia vie celular. De aceea, cunoaterea vieii celulare ne poate oferi cheia tuturor manifestritor fiziologice de care sunt capabile organismele (Emil Pop, 1960, dup Milic i colab., 1982). Importana fiziologiei celulare reiese i din descoperirile savantului de origine romn George Emil Palade , care a stabilit unele particu lariti structurale i funcionale ale organitelor citoplasmatice i a descoperit o serie de boli provocate de anumite dereglri celulare, punnd bazele fiziologice ale patologiei celulare. Celula posed toate nsuirile unui organism viu, capabil s duc o via independent. Acest lucru este dovedit nu numai prin existena organismelor monocelulare, ci i prin posibilitatea de a recolta celule din organismele pluricelulare care cultivate pe medii artificiale cresc, se nmulesc i dau natere la plante ntregi. n laboratoare speciale de fiziologie vegetal s-au obinut culturi de celule pornindu-se de 1a o singur celul sau de la un fragment minuscul de esut. Celula este un sistem termodinamic deschis ; ea face schimb permanent de substane cu mediul n care triete, transform substanele asimilate i energia n procesul de metabolism. Forma i mrimca celulelor vegetale este foarte diferit; forma sferic se ntlnete la bacterii (coci), forma poliedric-izodiametric, apropiat de cea sferic, este caracteristic parenchimului meristematic din vrfurile de cretere ale rdcinilor i tulpinilor, celulele din esuturile liberiene sunt fusiforme, cele din vasele conductoare (traheie, traheide) ale plantelor sunt tubulare. Dimensiunea minim a celulelor vegetale este de aproximativ 10 microni, iar dimensiunea medie 100 microni . Se cunosc i celule de 50 cm lungime (fibre liberiene ), iar vasele secretoare de latex, la unele Euforbiacee ating lungim i de mai muli metri . Morfologia extern a diferitelor tipuri de celule este rezultatul influenei condiiilor de via de care beneficiaz celulele respective n cadrul esutului n care se gsesc. Forma i mrimea celulelor corespund funciei fiziologice pe care acestea trebuie s o ndeplineasc n esutul respectiv. Primul nvat care a vzut celulele la microscop a fost fizicianul englez Robert Hooke (1635-1703), n anul 1667, dup confecionarea primului microscop de ctre fraii olandezi Hans i Sacharias Janssen (1590). Tot Hooke i-a dat numele de celul (de la lat. cella-camera, cellula -cmru). Un important eveniment n istoria celulei s-a petrecut n secolul al XIX-lea. n anul 1838, botanistul german M. Schleiden, iar n 1839 zoologul german T. Schwann au elaborat teoria celular", care a jucat un important rol n iniierea a num eroase studii de citologie, cu rezultate remarcabile n cunoaterea unor detalii de structur a celulei. n Di alecti ca naturii , Fr. Engels apreciaz favorabil teoria celular i o consider a treia mare descoperire a secolului al XIX-lea, primele dou fiind teoria conservrii i transformrii energiei i teoria evolutionist a lui Ch. Darvin. Examinat la microscopul obinuit, celula vegetal apare alctuit din protoplasma vie, membran pectocelulozic i vacuol. Tot la microscopul optic obinuit n celul se distinge nucleul, vacuola i o parte din organitele citoplasmatice (cloroplaste) (Milic i colab. 1982).
155
2.2. Funciile subunitilor structurale din celul. Cunoaterea detaliilor de structur i funcionalitate n celula vie a devenit posibil n urma introducerii n cercetare a unor tehnici moderne de laborator: microscopia fluorescent, microscopia cu contrast de faz, microscopia polarizant i electronic, ultrasecionarea, spectroscopia, autoradiografia .a. O nou cale de cercetare n citofiziologie a fost dechis prin metoda ultracentrifugrii omogenatelor celulare, conceput de Albert Calude (1941) i perfecionat ulterior de George Emil Palade. Metoda ultracentrifugrii succesive, la turaii din ce n ce mai mari, permite extragerea din celul i separarea organitelor celulare dup greutate i volum i studierea lor sub aspect morfologic, al organizrii interne i al compoziiei chimice. Pe baza rezultatelor o btinute s-au stabilit funciile fiziologice ale subunitilor celulare, respectiv rolul lor n viaa celulei. S-a trecut astfel de la fiziologia celular la fiziologia subcelular sau a organitelor celulare (Milic i colab. 1982). CITOPLASMA Observat la microscopul optic, citoplasma apare ca o mas transparen, n care se disting unele componente celulare. Citoplasma este masa fundamental a protoplasmei vii, n care sunt incluse organitele celulare. Ea este component esenial a celule lor vii, atunci cnd se afl n stare fluid i n nentrerupt micare; coagularea citoplasmei determ in ncetar ea m an if est r ilo r vit a le i im p lic it m oartea ce lu le i. D ife r ite deta lii n structura citoplasm ei au fost cunoscute abia dup primele cercetri cu microscopul electronic. Citoplasma este considerat component principal a celulei, car act eriz at printr - o pe rf ect unit ate i in tegrit ate de organi zare i funcionare. Substanele organice care predomin n masa de citoplasm i constituie elem ente de constituie ale acesteia sunt: proteinele hidrofile, fosfolipide, acizi nucleici .a. Citoplasma reprezint un sistem coloidal polifazic complex, n care proteinele hidrofile , tipic coloidale, realizeaz un mediu heterogen i labil, care i schimb cu uurin reacia i sarcina electric i i modific starea fizic. Proteinele existente n citoplasm determ in funcii m etabolice i enzim atice caracteristice, ce imprim specificitate i diversitate organism elor vii. Proteinele de constituie i proteinele enzimatice difer de la specie la specie, de la individ la individ, de la un organ la altul. Citoplasm a este a lctu it din hial oplas m, organi te cit opl as tice i membrane plasmatice. HIALOPLASMA Hialoplasma este o mas transparent, omogen i aparent lipsita de structur, num it i matri ce citoplasmati c. A. FreyvWyssling i K. Muhlethaler neleg prin m atrice citoplasm atic masa ornogen care rmne n celul dup nlturarea tuturor organitelor celulare. Hialoplasma se prezint ca un sistem coloidal vscos, rigid sau elastic, nemiscibil cu apa. Ultrastructura hialoplasmei se compune din filamente fine care alcluiesc o reea m acromolecular filam entoas, ce constituie scheletul sau stroma. Filamentele respective sunt formate din lanuri polipeptidice de proteine , respectiv proteine fibrilare care se pot lega ntre ele n diferite moduri (puni de hidrogen, fore van der Waals).
156
Hialoplasma este alctuit din ap, substane organice, sruri minerale i ioni liberi de K+ , Ca++, Mg++, Fe++, Mn++, Cu++, Zn++, NH4+, C1-, PO3- , SO42-, etc. Raportul dintre aceste substane electrolite i neelectrolite imprim hialoplasmei o anumit stare fizic i prezint un rol important n desfurarea proceselor fiziologice din celul. Atunci cnd predomin proteinele globulare, hialoplasma este fluid, iar cnd predomin cele filamentoase este vscoas. Dintre compuii organici mai importani n hialoplasm se gsesc: nucleoproteide, lipide complexe, glucide solubile, am inoacizi, ARN m , ARN t , ARNr, enzime, substane bioactive (biocatalizatori, hormoni, vitamine), compui metabolici primari i secundari. Datorit multiplelor componente organo-minerale, hialoplasma este sediul celor mai numeroase i mai rapide modificri structurale i funcionale de natur fizicochimic i metabolic i totodat spaiul n care se desfoar transformarea energiei chimice poteniale n energie liber, mecanic i calori, care asigur micarea intracelular i reaciile de sintez ce au loc n celul. ORGANITELE CITOPLASMATICE Organitele citoplasmatice sunt componente de forme i mrimi variate, cu funcii diferite n ansamblul activitii fiziologice a celulei. Reticulul endoplasmatic. La microscopul electronic masa de citoplasm a celulelor mature apare strbtut n toate sensurile de o reea dens de canalicule tubulare, simple sau ramificate, care leag ntre ele vezicule pline cu lichid (vacuole) i diferite cisterne (dictiozomi), precum i alte formaiuni intracelulare. Aceast reea de canalicule face legtura ntre membrana nucleilor a dou celule vecine i a tuturor celulelor din esuturi, organe i chiar din organismul ntreg. Descoperirea reticulului endoplasmatic reprezint o etap important n dezvoltarea cunotinelor referitoare la structura submicroscopic a citoplasmei i la funcionalitatea ei. n celulele meristematice, R.E. este slab dezvoltat. n celulele secretoare, reticulul endoplasmatic este mai dezvoltat i ocup mare parte din citoplasm, avnd o important funcie fiziologic n activitatea celulelor. Reeaua de canalicule, care strbate citoplasma celulei, favorizeaz schimbul m etabolic de substane ntre celule i ntre componentele celulare. Prin reeaua de canalicule a reticulului endoplasmatic circul ap, electrolii, compui organici etc., reticulul endoplasmatic avnd funcia de aparat circulator intracelular. A. Frey Wyssling consider c reticulul endoplasmatic se formeaz din membrana nucleului i se gsete n strans legtur topografic i funcional cu toate organitele celulei. Membranele reticulului endoplasmatic sunt de tip plasmatic, cu structur molecular globular i au rol deosebit de important n metabolismul celulei. Acestea perm it ptrunderea moleculelor, a ionilor, a ATP etc. n interiorul canalicu lelor i ieirea produilor metabolici afar din citoplasma. Membranele reticulului endoplasmatic sunt suportul unui mare numr de enzime celulare. Reticulul endoplasmatic neted (agranular) este format, din tubuli ram ificai, cu diametrul de 500-1000 i este bine dezvoltat n celulele cu funcie de sintez . Faptul c celulele cu funcie principal n sinteza lipidelor i a sterolilor prezint un reticul endoplasmatic neted bine dezvoltat a sugerat ideea c la nivelul acestuia sunt localizate enzime implicate n sinteza lipidelor i a sterolilor . Exist i dovezi despre localizarea pe reticulul endoplasmatic neted a enzimelor care particip la sinteza glicogenului. Funcia fiziologic a reticulului endoplasmatic neted este deci aceea de sintez a sterolilor, lipidelor i a glicogenului.
157
Reticulul endoplasmatic rugos (granular) este format tot din tubuli ramificai, ca i cel neted, dar se deosebete de acesta prin prezena ribozomilor ataati pe faa extern a tubulilor, din care cauz prezint aspect rugos caracteristic. Prezena ribozomilor confer reticulul endoplasmatic rugos particulariti morfologice i funcii fiziologice n viaa celulei. Unele componente ale reticulului endoplasmatic rugos au fost observate mai nainte de ctre histologi i au fost nutnite ergastoplasm (plasm lucrativ), ceea ce sugereaz participarea acestora la activitatea de sintez a celulei. Reticulul endoplasmatic rugos este mai dezvoltalt n citoplasma celulelor care sintetizeaz proteine. Folosirea unor aminoacizi marcai cu izotopi radioactivi n studiul sintezei proteinelor i urmrirea metabolizrii lor n organitele celulare, a demonstrat ncorporarea am inoacizilor n lanuri polipeptidice la nivelul ribozomilor. Cercetnd mai profund modul cum particip reticulul endoplasmatic rugos la sinteza proteinelor intracelulare, G. E. Pa1ade arat c la nivelul ribozomilor de pe reticulului endoplasmatic rugos se sintetizeaz proteine de export" (Milic i colab. 1982). Mitocondrii si plastide. Sunt organite citoplasmatice care prezint multe asemnri morfologice, funcionale i poate chiar filogenetice. Ambele organite prezint structur intern membranoas, mult dezvoltat, care deriv din ptura intern a membranei nconjurtoare. Ambele particip la transformri energetice intense n celul. Mitocondriile sunt prezente n celulele tuturor eucariotelor. Plastidele sunt prezente numai n celulele plantelor. n celulele procariote nu se gsesc nici mitocondrii nici plastide. Mitocondriile sunt organite citoplasmatice aglomerate, de obicei, n jurul nucleului sau n acele zone ale citoplasmei unde se desfoar o activitate metabolic intens, cu consum mare de energie. Mitocondriile au forma unor gruncioare sferice sau uor alungite, cu diametrul de 0.5-1 micron i lungimea de 1-5 microni. Vzute la microscopul electronic, mitocondriile prezint o organizare intern specific i o membran extern dubl, cu grosimea de 220-240 . Foia extern a membranei este neted, iar cea intern prezint pliuri ce se prelungesc spre interior i formeaz nite perei despritori care compartimenteaz coninutul mitocondriei, n sens perpendicular pe axa mare a acesteia. Pereii despritori, num ii criste m itocondriale, mresc considerabil suprafaa intern a mitocondriei, fenomen ce nlesnete adsorbia unui mare num r de molecule enzimatice. La protozoare , mitocondriile prezint o serie de tuburi n locul cristelor mitocondriale. Mai recent (1978) s-a constatat transformarea unor criste mitocondriale n saculii. n celulele vegetale predomin saculii. Pe suprafaa cristelor mitocondriale sau pe tubuli la microscopul electronic se observ numeroase formaiuni granulare numite oxizomi, n care se gsese citocromii. Mrimea suprafeei interne a mitocondriilor este proporional cu activitatea fiziologic a celulei i cu condiiile externe de temperatur i lumin. Numrul cristelor, al saculilor sau al tubulilor n mitocondrii, la diferite tipuri de celule, dau indicaii asupra activitii respiratorii a mitocondriei, iar aceasta, la rndul su, asupra activitii fiziologice a celulei n care se gsete. Numrul m itocondriilor i numrul cristelor sau al tubulilor din m itocondrii poate s fie mai mare n celulele cu activitate fiziologic intens. Dup J. Bonner i J. E. Varner, 1965 (Milic i colab.,1982) o mitocondrie triete cel mult 8 zi le. n interiorul mitocondriei se gsete plasma mitocondrial sau condrioplasma , alctuit dintr-o mas de substan omogen, numit matrice sau matrix, n care se desfoar procese fiziologice de important major pentru viaa celulei. Principalii componeni ai mitocondriilor sunt proteinele (35-40%), lipoizii (25-38%) i acizii nucleici (1,6% ARN i urme de ADN).
158
Att n interior ct i pe suprafaa exterioar a mitocondriilor se gsesc diferite enzime, care au rol deosebit de important n ciclul lui Krebs i n reaciile de fosforilare. Se apreciaz c 50% din enzimele unei celule sunt localizate n mitoconctrii. Dintre acestea mai importante sunt succindehidraza, ATP-aza, fosfataza acid i fosfataza alcalin, catalaza, ribonucleaza .a. n mitocondrii se gsesc i o serie de factori de oxido-reducere (glutation, vitamina C, flavoproteine, citocromii b i c, precum i acizi grai, ATP, aminoacizi etc.). Rolul fiziologic al mitocondriilor este de importan fundamental pentru viaa celulei; anumite substane organice complexe trec din citoplasm n interiorul mitocondriilor, unde se de degradeaz sub influena enzimelor respiratorii. Un lan de reacii oxido-reductoare transform glucidele, acidul piruvic, acizii grai, aminoacizii, n combinaii chimice mai simple . n hialoplasm are loc prima faz a procesului de respiraie , respectiv glicoliza, care se ncheie cu formarea acidului piruvic, n ciclul Krebs, cu formarea unor metabolii secundari, degajarea de CO 2 , eliminare de ap, precum i cu elim inarea unei importante cantiti de energie, folosit ulterior n diferite reacii de sintez consumatoare de energie. Energia care se elibereaz n respiraie se acumuleaz n grupuri macroergice fosfatice (ATP ) cu ajutorul enzimelor de fosforilare. Prin intermediul reaciilor de fosforilare oxidativ care se petrec n mitocondrii se asigur regenerarea necontenit a stocului de ATP ca urmare a fosforilrii ADP-ului. ATP-ul devine astfel acumulatorul energetic al celulei. La eliberarea energiei n procesul de hidroliz, ATP-ul trece n ADP + H 3PO4 , elibernd simultan 7.600 calorii pentru fiecare molecul de ATP. Toate acestea determin pe specialiti s considere mitocondriile drept centrii respiratori ai celulei", rezervoarele energetice ale celulei vii, uzine energetice" etc., care realizeaz producerea, transformarca i stocarca energiei necesare tuturor fenomenelor vitale. Pe suprafaa exterioar a mitocondriilor se gsesc o serie de alte enzime, care descompun substanele din jur, asigurnd astfel legtura ntre procesele biochimice care au loc n interiorul mitocondriilor i cele din exterior, din hialoplasm. n mitocondrii se petrec i procese de sintez a substanelor proteice necesare construciei cristelor mitocondriale. La acest proces un rol important au ribozomii liberi din interiorul mitocondriilor. Plastidele sunt organite celulare prezente numai n celulele vegetale. Ele iau natere la lumin, prin transformarea proplastidelor. La plantele superioare, proplastide se gsesc att n celula-mam, ct i n celulele meristematice, ceea ce atest modul lor de formare. Plastidele se formeaz ntr-o anumit succcsiune, i anume: proplastide leucoplastecloroplastecromoplas te ( Wyssling, Kreutzer-1958). nc n anul 1883, A. Schim per considera c leocoplastele constituie tipul de plastide din care provin celelalte tipuri (verzi i galbene) (Milic i colab., 1982). O plastid este alctuit din : a) strom sau corpul plastidei , plin cu substan fluid, granular, numita matrice sau matrix, compartimentat de nite formaiuni lamelare, membranoase, numite tilacoide (de la cuvntul grec thylacoides = n form de sac); b) formaiuni lenticelare sau discoidale , care formeaz nite pachete compacte numite grane sau granum (de la la latinescul granum = gruncior); c) membran dubl, identic cu aceea a mitocondriilor, avnd o foi extern neted i una intern cutat, care d natere la criste, prelungite cu tilacoide n lungul axei mari. n funcie de compusii chimici pe care-i conin sau i elaboreaz, plastidele sunt de trei feluri: cloroplaste, cromoplaste i leucoplaste, dintre care cloroplastele sunt colorate, iar leocoplastele incolore (A. Schimper, 1885, dup Milic i colab. 1982).
159
Cloroplastele sunt cele mai mari organite celulare care se gsesc n toate celulele organelor verzi ale plantelor. Sunt prezente numai n celulele vegetale. La plantele superioare se gsesc numeroase cloroplaste, de form sferic, sau lenticelar, cu diametrul mare de 5 , diametrul mic de 2 i grosimea de 0,5 . ntr-o celul se afl n medie 20 -100 cloroplaste, fiind mai numeroase (200) n celulele esutului palisadic din frunza de porumb. S-a calculat c la 1m 2 suprafa foliar de ricin se gsesc aproximativ 400.000 cloroplaste. La algele verzi monocelulare, celula conine 1-2 cloroplaste mari, de forme diferite, numite cromatofor (de la grec. chroma - culoare i phoros - purttor). Structura subm icroscopic a c lorop lastelor nu s-a putut stabili la microscopul obisnuit, unde apare ca un gruncior verde de form ovoidal, uor turtit. Cu ajutorul unor microscoape optice mai perfecionate s-a observat c la plantele superioare cloroplastele nu prezint constituie omogen; la periferie prezint o membran incolor, mai dens, iar n interior se distinge o mas hialin, lipsit de structur, numit strom, matrice sau matrix . Faptul c membrana extern i stroma cloroplastului sunt incolore prezint semnificaie fiziologic deosebit, deoarece permite trecerea luminii pn la moleculele de clorofil, nlesnind astfel procesul de fotosintez. Ultrastructura cloroplastului a fost stabilit cu ajutorul microspopului electronic. A. Frey-Wyss1ing (1949) i R. Buvat (1962) au observat c toate cloroplastele sunt delimitate la exterior de o membran dubl, asemntoare membranelor plasmatice i membranei mitocondriale. Dubla membran, care delim iteaza c loroplastu l, prezint la exterior o foi neted de 75 grosime, care separ cloroplastul de hialoplasm , iar spre interior o foi tot de 75 avnd o serie de pliur i num ite ti lacoide , orientate paralel pe axa mare a cloroplastului. ntre cele dou straturi ale m em branei cloroplastului exist un spaiu transparent, plin cu lichid incolor. ntre tilacoidele stromei, la fieca re c loroplast se gsesc numeroase pachete cilindrice cu lamele discoidale numite grane . O gran este alctuit dintr-un teanc de saculi granari (2-100), de form discoidal. Fiecare sacul granal este nconjurat de o m embran tristratif icat, asem ntoare cu aceea a membranelor biologice. Form aiunile lam elare m em branoase care delim iteaz saculii granelor se numesc tilacoidele granelor. Membranele tilacoidelor granei prezint pe suprafaa extern numeroase formaiuni granulare eliptice, n form de ciuperc, cu dimensiunea 100/200 , numite cuantosomi. Fiecare cuantosom conine aproximativ 16 molecule de clorofil a, 70 molecule clorofil b, 48 molecule pigmeni carotenoizi, 2 atom i de Mg, 12 atom i de Fe i 6 atomi de cupru, care nu fac parte din pigmenii asimilatori i constituie cele mai mici formaiuni fotosintetizante. Fiecare gran este nconjurat de o membran transparent de natur lipoproteic. n granele cloroplastelor se p etrec toate reaciile fotochimice din faza de lumin a fotosintezei. Pigmenii asimilatori se gsesc localizai n ntregime n grane, iar amidonul rezultat prun polimerizare din produsul primar al fo tosintezei glucoza se depune numai n stroma cloroplastului . Dup particularitile lo r de structur, pigmenii asimilatori din plantele superioare terestre se impart n: grupa pigmenilor clorofilieni i grupa pigmenilor carotenoizi; pigmenii clorofilieni joac rol deosebit de important n fotosintez, iar pigmentii carotenoizi nsoesc pigmenii clorofilieni n celulele asimilatoare la toate plantele. Pigmenii clorofilieni cuprind:clorofila a, prezent n celulele fotosintetizante ale tuturor plante lor; clorofila b , care se gsete la plantele superioare i la algele verzi; clorofila c, prezent n diatomee i alge brune; clorofila d, semnalal la unele alge roii, clorofila e, caracteristic algelor galben-aurii.
160
Molecula de clorofil este form at dintr-un cap" hidrofil (nucleul tetrapirolic) i o coad" hidrofob sau lipofil (fitolul). n centrul celor patru nuclei pirolici se gsete un atom de Mg. n funcie de aceast arhitectonic, molecula de clorofil se orienteaz pe lamelele graneler cu nucleul tetrapirolic spre proteine i cu radicalul fitolic spre fosfolipide, de care se leag prin legluri de tip Van der Waals. La clorofilele a i b, gruparea fitolic este legat de cel de al IV -lea nucleu pirolic. Structura moleculelor de clorofil i nsuirile lor difer dup natura gruprilor care se ataeaz nucleului tetrapirolic. Clorofila b difer de clorofila a prin faptul c nucleul pirolic II posed o grupare aldehidic (- HC=O) n locul gruprii metilice (- C - CH 3 ). Dei celelalte clorofile difer puin de clorofila a, aceste deosebiri sunt suficienle pentru a da nsuiri specifice fiecreia (dup Milic i colab. 1982). n compo ziia chimic a cloroplastelor intr: 4 -8 % clorofil i numeroase alte substane organice i m inerale. Dintre acestea, cele m ai importante su nt: proteinele insolubile (39 -54%), lipidele (25-37%) pigmenii caroteoizi (2-3%), ARN plastidial (1-2%), existent n strom, urme de ARN pe grane, glucide solubile, grunciori de amidon, ADP, ATP, NADP, fer odoxin, nucleotide, coenzime acceptoare de H, citocromi, vitamine, numeroas e enzime (esteraze, fos fataze, carbohidraze) care particip la fotosintez n procesul de captare i transformare a energiei luminoase. Funcia principal a cloroplastelor o constituie fotosinteza , proces la care particip cteva enzinte specifice care lipsesc din mitocondrii sau alte organite celulare, dar sunt prezente n cloroplaste. n prezena clorofilei i n condiii de lum in cloroplastele absorb energia lum inoas venit de la soare i o transform prin sisteme catalitice n energie chim ic potenial de tipul glucidelor. Un rol n fotosintez joac i carotenoizii care transmit clorofilei o parte din energia lum inoas pe care o absorb i n plus, protejeaz clorofila de fotooxidare. Este important de menionat faptul ca n cursul fotosintezei pigmenii clorofilieni nu se consum ci intervin numai printr-o aciune catalitic. Cromoplastele sunt plastide fr roI activ n asim ilaie. Au aceeai organizare ca i cloroplastele. Sunt colorale in galb en, portocaliu sau rou, datorit prezenei unor pigmeni din grupa carotenoizilor. Cei mai frecveni carotenoizi sunt alfa-carotenul i betacarotenul (C40 H56 ) de culoare portocalie, existeni n rdcinile de morcov, licopenul, un izomer al carotenului de culoare roie existent n fructele de tomate i ardei, precum i diferite forme de carotenoizi oxida i, de culoare galben, cum sunt: criptoxantina, xantofila, luteina, crizantemoxantina, violoxantina etc. Din combinarea acestor pigmeni carotenoizi, n stare redus sau oxidat, rezult culorile din petalele f lorilor (crizanteme, lalea. crin, viorele, etc), din fructe (mce, ardei, tomate, pepene, portocal etc), din frunze (varz roie, lobod), i din rdcini i bulbi (sfecl roie, ceap roie). Cromoplastele prezint un coninut relativ ridicat de lipoide (50%), proteine (20%), precum i acid ribonucleic .a. Rolul carotenoizilor n petalele florilor i n fructe ar fi acela de atrage psrile i insectele, iar prin interm ediul acestora ar participa indirect la rspndirea speciilor. n frunzele verzi carotenoizii sunt mascai de culoarea verde a clorofilei i de aceea nu se pot vedea dect toamna, cnd se reduce cantitatea de clorofil.
161
Leucoplastele sunt plastide incolore, prezente n celulele esuturilur embrionare din vrful rdcinilor i al tulpinilor, n petalele albe ale florilor, n albumenul seminelor, n bulbi, rizomi, tuberculi. n funcie de substanele de rezerv care se acumuleaz n strom, leucoplastele poart denumiri diferite: amiloplaste (cu grunciori de amidon) prezente n tuberculi i rizomi, proteoplaste (cu proteine), oleoplaste (cu lipide) existente n celulele endospermului seminelor de ricin, floarea-soarelui etc. La ntuneric, leucoplastele acumuleaz anumite substane ergastice , care la lumin pot fi folosite la construcia granelor i n felul acesta leucoplastele se transform n cloroplaste sau cromoplaste (dup Milic i colab. 1982). Ribozomii. Sunt particule u ltrastructura 1e , c itoplasm atic e, de natur ribo -nucleo proteic , cu d im ensiuni cuprinse ntre 80 i 300 prezente n toate tipurile de celule. Au fost descoperii de ctre G. E. Pa1ade (1953) n omogenate de celule hepatice i n ultraseciuni celulare i din aceast cauz se num esc granulele lui Palade. La plante, ribozomii au fost pui n eviden de catre E. Robinson i R. Brown (1953) n celulele rdcinii de bob. n celulele vegetale, ribozomii se gsesc: ataai peretelui exterior al canaliculelor reticulului endoplasmatic rugos ataai i pe suprafaa extern a membranei nucleare. n stare liber n interiorul cloroplastelor i al mitocondriilor. sub form liber n hialoplasm (n celulele meristematice, ribozomii sunt liberi n citoplasm, reticulul endoplasmatic la aceste celule fiind puin dezvoltat). n privina compoziiei chimice, ribozomii sunt de natur nucleoproteic, fiind alctuii din molecule de ARM asociate cu molecule de proteine bazice, n pri egale, la care se adaug ioni de Ca++ i Mg++ legai de ARN ribozomal. Proteinele ribozomale sunt de tipul histonelor (conin arginin, lizin, acid asparagic, acid glutamic i cantiti mai mici de metionin, serin i alanin. n interiorul ribozomului predomin ARN, iar proteinele se gsesc ntr-un strat monomolecular la suprafat. n ribozomi mai exist ribonucleaz n stare legat, precum i esteraze, fosfataze etc., enzime implicate n fotosintez i n proteosintez. Funcia principal a ribozomilor este sinteza proteinelor, fenomen care se desfoar mai intens la nivelul reticulului endoplasmatic rugos. Asamblarea aminoacizilor n lanuri polipeptidice se realizeaz la nivelul ribozomilor, de unde trec n lumenul reticulului endoplasmatic rugos, prin care circul i migreaz n hialoplasm. Ribozomii izolai sunt inactivi n procesul de proteosintez.Procesul de sintez a proteinelor este declanat prin aciunea acizilor nucleici, cu ajutorul ATP-ului care determin unirea aminoacizilor n lanuri polipeptidice. Aminoacizii sunt transportai din diferite pri ale citoplasmei de ctre moleculele de ARN-transportor. Ordinea de aranjare a aminoacizilor n molecula proteic este determinat de ARN-mesager, care vine din nucleu n citoplasm aducnd informaii genetice specifice transmise de ADN-nuclear. ARN-mesager este fixat pe ribozomi dup un anumit cod" i joac rol de tipar, pe care se asambleaz aminoacizii ntr-o anumit ordine. Activitatea ribozomilor este controlat direct de nucleu, prin intermediul acizilor nucleici (ADN i ARN). Dup asamblarea aminoacizilor n lanuri polipeptidice, ARN-transportor este pus n libertate, i asigur reluarea procesului de proteosintez cu ali aminoacizi venii din hialoplasm (dup Milic i colab. 1982). Dictiozomii. Sunt organite citoplasmatice care constituie elemente de structur ale apratului Golgi, observa t n anul 1898 de Camilo Golgi n celulele animale i de A. Guillermond n 1935 n celulele vegetale. Denumirea de dictiozom vine de la grecescul dictyon reea. Dictiozomii se disting uor n celulele tinere ale meristemului apical, n celulele n curs de difereniere i n celulele puternic vacuolizate din parenchimul medular. 162
Unitatea morfologic i de structur a aparatului Golgi este deci dictiozomul o formaiune lam elar , a lctuit din 2 -10 saculi sau cisterne cu aspect de discuri suprapuse, aproximativ circulare concrescute la centru. La periferie, discurile lamelare ale dictiozomului sunt libere, uor umflate i putin curbate. Un dictiozom seamn cu un teanc de farfurii concrescute la centru, cu marginile libere i uor ngroate. Un sacul sau cistern care intr n alctuirea unui dictiozom este o formaiune lam elar turtit, membranoas, aproximativ circular, cu suprafeele exerioare netede, mrginit de o membran dubl, de aproximativ 75-80 . Dubla membran care nconjoar cisternele dictiozomului este o membran elementar, alctuit din dou foie, fiecare avnd la interior straturi de molecule bipolare de lecitin, aezate cu polii hidrofobi fa n fa, iar spre exterior cte un strat de proteine hidratate. n interiorul dictiozomilor se gsesc proteine, fosfolipide, policglucide, pectine, rinii i foarte puine enzime (fosfataze). Importante studii cu privire 1a ontogenia aparatului Golgi a efectuat elveianul A. FreyWyslling, care consider c formarea dictiozomului ncepe cu apariia unor membrane duble concentrice, ce se deschid ncet i iau forma unor cisterne cu membran dubl. Lucrnd cu celule vegetale, cercettorii au observat c dictiozomul prezint dou fee sau capete, una formatoare sau imatur, unde se formeaz cisterne noi i alta matur, care conine cisterne ajunse la maturitate, din care se despind mereu vezicule secretorii, care migreaz n citoplasm i i vars coninutul n membrana pectocelulozic a celulei. Veziculele desprinse din saculele dictiozomului conin material de constituie al membranei celulare (pectine i hemiceluloz) i n timpul diviziunii celulare, se aliniaz i conflueaz, pentru a da natere membranei primare, pectocelulozice care separ dou cellule fiice. D ictiozo m ii joac rol important i n activitatea secretoare a celulei, fiind considerai rezervoare ale produilor nefo lositori rezu lta i din a ct iv itatea catabolic (deeuri m etabolice - uleiuri volatile, mucilagii, flavonoide) (dup Milic i colab. 1982). Lizozomii . Sunt formaiuni citoplasmatice veziculare, de form aproximativ sferic, avnd dimensiuni ceva mai mici dect m itocondriile i m ai m ari dect ribozom ii. La exterior sunt delim itai de o membran lipoproteic simpl . Acest membran nvelete o strom dens, n care se gsesc aproximativ 12 tipuri de enzime hidrolizante, ca : fos fataze, esteraze, nucleaze, proteaze, ADN-aze, sulfalaze, etc. Aceste mici sfere pline cu enzim e au fost num ite lizozomi de ctre Cristian de Duve (1959) care le-a descoperit i pentru care a fost distins cu prem iul Nobel n 1974. Denum irea de lizozom i vine de la grecescul lysis = topire i soma = corp. Funcia fundam ental a lizozom ilor este descompunerea substanelor de rezerv cu molecul mare (poliglucide, proteide, lipide, lipoide) din celul. Acest lucru se realizeaz prin dezorganizarea m embranei lizozom ilor i trecerea enzimelor hidrolizante n hialoplasm, unde produc descompunerea substanelor complexe i trecerea lor n substane cu molecula mai simpl, care pot fi utilizate n nutriia intracelular. n felul acesta, n procesul germinrii seminelor, embrionul crete pe seama substanelor de rezerv din celulele endospermului sau a cotiledoanelor, hidrolizate de ctre enzim ele din lizozomi. n mod obinuit, lizozom ii se adun n jurul m itocondriilor din celul, iar produii de hidroliz rezultai sunt folosii de ctre mitocondrii n procesul de respiraie. Degradarea hidrolitic a substanelor complexe din celul duce uneori la lezarea integritii celulei. Acest lucru se petrece n condiii de inaniie sau la moartea celulei, cnd membrana lizozom ilor se dezagreg uor, iar enzimele lizozomului trec cu uurin n hialoplasm unde provoac necrozarea materiei vii i autoliza total a hialoplasmei (Milic i colab. 1982).
163
MEMBRANELE PLASMATICE Citoplasm a celulelor vegela le este delim itat la periferie de ctre o m em bram celular numit plasmalem , iar spre vacuole de o alt membran, mai puin permeabil, numit tonoplast. ntruct ambele membrane fac corp comun cu citoplasma celulei i nu pot fi detaate, aa cum se poate detaa membrana pectocelulozic, poart denumirea de membrane plasmatice. Plasmalema. Este o pelicul extrem de subire, nedetaabil, difereniat din citoplasm la periferia acesteia, aderent la peretele pectocelulozic al celulei. Aceast pelicul, mai dens dect restul citoplasmei, posed nsuiri de membran relativ semipermeabil-selectiv. Ea reprezint o barier care permite ptrunderea unor substane n celul i oprete ptrunderea altora, permind n acelai timp ieirea afar din celul a diferitelor substane sau a unor produi de catabolism. Prin aceste nsuiri ale sale plasmalema particip la activitatea vital a celulei pe care o influeneaz. Plasmalema poate fi pus n eviden n mod indirect prin fenomenul de plasmolizdeplasmoliz. Existena plasmalemei a pus diferite probleme n legtur cu modul cum se formeaz, precum i n legtur cu structura pe care o are sau funcia pe care o ndeplinete n viaa celulei. Pornind de la coninutul protoplasmei n elemente lipofile i hidrofile, pe baza cunotinelor de chimie fizical, N. A. Maksimov a explicat formarea acestei pelicule prin aglomerarea lipidelor la suprafaa citoplasmei, n mod asemntor cu ridicarea grsimii la suprafaa apei ntr-un pahar. Aa se explic faptul c periferia citoplasmei este mai bogat n lipoide i prezint un strat mai dens dect mezoplasma. n acelai timp, prezena lipidelor la periferia citoplasmei, micoreaz tensiunea superficial a acesteia. Structura submicroscopic a plasmalemei a fost mult timp discutat de specialiti, care au imaginat diferite modele ipotetice ale acesteia. Pe haza unor studii fcute la microscopul electronic, J. Robertson, 1959 a elaborat conceptul privitor la unitatea de organizare a tuturor biomembranelor. La microscopul electronic, plasmalema apare ca o memhran dubl, format din dou foie dense i omogene, de 75-90 n care se afla ap i anumii constituieni necunoscui. Fiecare din cele dou foie este constituit din dou straturi de molecule proteice, dispuse paralel, care la microscopul electronic apar ntunecate (dense, netransparente). ntre acestea se afl dou straturi de molecule fosfolipidice , care la microscop apar mai transparente (mai luminoase). Moleculele de fosfolipide sunt bipolare i se aliniaz paralel ntre ele i perpendicular pe suprafaa membranei; gruprile hidrofile sunt asociate cu straturile proteice , iar gruprile hidrofobe sunt aezate fa n fat spre interior. Compoziia chimic a plasmalemei este alctuit din circa 2/3 lipide (steride, lecitine), circa 1/3 proteine i cantiti infime de poliglucide i enzime, care faciliteaz transportul activ al substanelor prin membrane i regleaz ordinea de desfurarea reaciilor biochimice din plasmalem. Lipidele confer membranelor o permeabilitate redus pentru ioni i o permeabilitate mare pentru substanele solubile n grsimi. Modul de aranjare a moleculelor proteice n lamelele externe imprim plasmalemei o anumit rezisten mecanic i elasticitate. Elasticitatea este dovedit de prezena firelor de citoplasm (plasmodesme) ntinse ntre coninutul contractat al unei celule plasmolizate i membrana pectocelulozic (firele lui Hecht). Plasmalema prezint din loc n loc pori fini, corespunztor terminaiilor reticulului endoplasmatic. Cercetrile au stabilit c plasmalema joac un rol important n reglarea schimburilor osmotice dintre celul i mediul extracelular. Plasmodesmele sunt fire de citoplasm i plasmalem care leag coninutul viu al celulelor nvecinate, fcnd din ntregul organism pluricelular o singur unitate plasmatic i funcional. 164
R. Buvat a observat c n plasmodesme exist nite canalicule care fac legtura cu reticulul endoplasmatic i asigur conducerea excitaiilor i circulaia soluiilor ncrcate cu sruri, ioni liberi, gaze dizolvate etc. Dup moartea celulei, plasmalema i pierde semipermeabilitatea, ceea ce nseamn c baza sa molecular este ntreinut prin consum de energie de tip ATP (dup Milic i colab. 1982). Tonoplastul. Este o pelicul membranoas ca i plasmalema, care delimiteaz citoplasma spre vacuole. Are ns o structur submicroscopic mai consistent dect plasmalema, fiind alctuit dintr-un numr dublu de straturi fosfolipoproteice, ceea ce i confer un caracter mai pronunat de semipermeabilitate i un schimb selectiv de substane mai strict dect plasmalema. Existena tonoplastului a fost pus n eviden prin experiene cu izotopi radioactivi care demonstreaz acumularea temporar a unor substane n citoplasm nainte de a trece n sucul vacuolar. Elasticitatea tonoplastului atest faptul c n structura sa chimic se gsesc proteine, iar dezintegrarea sa n solvenii lipidelor dovedete prezena lipoizilor. Tonoplastul are deci aceeai compoziie chimic ca i plasmalema. Ambele membrane plasmatice sunt alctuite din substane identice cu cele existente n masa de citoplasm i de aceea se pot reface uor n caz de rnire. Ct privete gradul de permeabilitate, s-a constatat o oarecare diferen ntre cele dou membrane. Plasmalema este mai uor traversat de moleculele de zaharoz, pe cnd tonoplastul este mai puin permeabil. Diferena de permeabilitate favorizeaz migrarea glucidelor elaborate n fotosintez, n afara celulelor, evitndu-se acumularea lor excesiv n vacuole (Milic colab. 1982). NUCLEUL Este un corpuscul mai dens dect citoplasma, de form sferic sau oval, discoidal, bastona etc. Denumirea de nucleu vine de la latinescul nucleus = smbure. Nucleul este alctuit dintr-un sistem coloidal complex, cu vscozitate variabil, ce trece de la starea de sol la cea de gel, cu indice de refracie mare, ceea ce asigur observarea sa la orice microscop. Marimea nucleului este n general, sub 0,5 m diametru. La exterior, nucleul este delimitat de o membran nuclear dubl, similar membranelor mitocondriilor sau plastidelor. Membrana nuclear este format din dou foie lipoproteice. n anumite puncte cele dou foie se unesc formnd pori. n interiorul nucleului se gsete plasma nuclear (carioplasma) care este o mas fluid, coloidal, asemntoare citoplasmei, dar, cu un coninut mai bogat n nucleoproteide. n carioplasm se gsesc unul sau mai muli nucleoli, filamente de cromatin, ioni minerali (Ca++, K+), picturi de lipide, enzime cu aciune sintetic i hidrolitic (arginaz,peptidaz,esteraz,lipaz,fosfataz alcalin,ribonucleaz etc.). Nucleolii din interiorul nucleului sunt foarte refringeni i au un coninut ridicat de acizi ribonucleici (ARN), care dau acestora o mare activitate i labilitate n sinteza proteinelor. Cromatina este o substan de tipul nucleoproteidelor, alctuit din proteine bazice (histone) combinate cu acizi nucleici (ADN, ARN). Cnd celula intr n diviziune, cromatina se concentreaz i se transform n cromozomi, cu un numr caracteristic fiecrei specii, reprezentat prin simbolul 2N (diploid). n timpul diviziunii celulare informaia genetic din ADN este preluat de ARN-nuclear , caracterizat printr-o mare mobilitate si activitate met abolic . Sub ac iunea unor enz im e speciale, ARN iese din nucleu, prin porii membranei nucleare, i circul n citoplasm sub form de ARN-mesager (ARN-m). Aici se fixeaz pe pereii ribozomilor, unde duce tiparul sau mesajul genetic transm is de ADN din nucleu. Pe acest tipar are loc cuplarea am inoacizilor n lan polipeptidic, corespunztor succesiunii nucleotidelor din ARN-mesager.
165
n toate manestrile vitale ale celulei nucleul are rol fiziologic primordial, fiind cea mai important formaiune subcelular, n strns interrelaie cu citoplasma. El particip nu numai la transmiterea caracterelor ereditare, ci i la alte procese, cum ar fi: reglarea formrii moleculelor enzimatice; dirijarea proceselor de sintez a proteinelor; formarea membranei celulozice; asigurarea valorii tampon a protoplasmei mpotriva modificrii pH; participarea sa la procesele de difereniere celular, regenerare i cicatrizare a rnilor etc. (Milic i colab. 1982). VACUOLELE Vacuolele sunt constitueni ai celulelor pline cu suc vacuolar. Vacuolele provin din dilatarea reticulului endoplasmatic. Forma i numrul vacuolelor difer, funcie de vrsta celulei; n celulele tinere din esuturile meristematice, vacuolele sunt foarte mici i au forme globulare. Aceste microvacuole pot fi vzute la microscop dup tratarea celulei cu colorani vitali (albastru de metilen, rou neutru). Pe msur ce se maturizeaz celula, vacuolele mici se umplu cu ap i se mresc, conflueaz unele cu altele, numrul lor scade, iar n final rmne o singur vacuol mare, care ocup partea central a celulei, n timp ce protoplasma vie este mpins la exterior spre membrana celulozic . Acest proces se petrece n sens invers n timpul maturrii semintelor, cnd se pleac de la o vacuol mare cu suc vacuolar fluid i se ajunge la multe vacuole mici cu suc dens, care se gelific treptat i devin grunciori de aleuron. Acestea reprezint rezervele protidice din celulele n stare de via latent, care sunt consumate de embrion n timpul germinaiei seminei. Vacuola este delimitat la exterior de tonoplast, care permite trecerea apei i a substanelor cu molecul mic i oprete substanele organice cu molecula mare (flavone, antociani, taninuri, alcaloizi). Vacuola reprezint rezervorul de ap al celulei. n vacuol se gsesc diferite sruri minerale i molecule organice. Substanele minerale sunt dizolvate ca molecule sau disociate n ioni, iar substanele organice de o mare diversitate, se pot afla att dizolvate, ct i sub form coloidal. Printre acestea amintim: acizi organici (malic, citric, tartric, oxalic), glucide (glucoza, fructoza, zaharoza, inulina, gume, mucilagii), uleiuri eterice, alcaloizi, glicosizi, taninuri etc . Toate aceste substane dau sucului vacuolar un pH acid, care difer de acela al citoplasmei, n general neutru sau uor alcalin. Rolul fiziologic al vacuolelor const n participarea sucului vacuolar la funciile eseniale din viaa celulei: hidratarea celulei pe principii osmotice, aprovizionarea cu elemente minerale, retinerea substanelor toxice, etc. (Milic i colab. 1982). MEMBRANA CELULOZICA (peretele celular) Este un constituent propriu numai celulelor vegetale. Membrana celulozic este un produs metabolic al protoplasmei i alctuiete uu schelet pericelular relativ rigid, care mpiedic exteriorizarea micrilor plasmatice. Membrana celulozic se formeaz dup ultima faz a diviziunii nucleului, atunci cnd apare placa ecuatorial. ntre cele dou celule-fiice se formeaz mai nti lamela median a membranei, alctuit din vezicule provenite de la dictiozomi. Peste lamela median se depun straturi succesive de celuloz, care vor alctui membrana primar, iar mai trziu, prin depunerea altor straturi de celuloz, peste membrana primar, se formeaz membrana secundar. La fibrele lemnoase de conifere se formeaz i o membran teriar, foarte rezistent, lipsit de celuloz, dar care conine pectin i xilan. Lamela median poate fi dizolvat pe cale natural sub aciunea unor enzime, iar pe cale artificial prin fierbere n ap, acizi sau alcalii. Membranele celulare pectocelulozice se pot pune n eviden cu aju torul unor colorani alcalini, ca: albastru de metilen, albastru de toluidin, safranin, peronin, tionin, violet de crezil etc. n straturile de microfibrile celulozice care formeaz membrana secundar apar i substane de ncrustaie, ca: hemiceluloze, pectine, lignine, 166
proteine, suberine, elemente minerale (Ca, P, Mg). Totalitatea acestor substane formeaz materialul cunoscut sub denumirea de lemn sau fibre textile. Investigaiile moderne de microscopie polarizant, microscopie electronic au permis cunoaterea structurii submicroscopice a foielor din membrana celular. Unitile de baz care intr n alctuirea acesteia sunt constituite din macromolecule de celuloz, grupate n micele, microfibrile, macrofibrile i fibre. Calitatea fibrelor vegetale legat de elasticitate, extensibilitate, rezisten la rupere etc. depinde de numrul straturilor celulozice i de modul de aranjare a fibrelor n aceste straturi. n membranele primare microfibrilele sunt dispuse ncruciat, formnd o estur lax. n membranele secundare, microfibrilele sunt orientate paralel, formnd diferite tipuri de structuri, cum ar fi: structura fibrilar (la fibrele de in, cnep, urzic), structura inelar (n trahei i traheide inelate), structur spiralat (n fibrele lemnoase i n traheidele coniferelor). n spaiile intermicelare ptrund numai molecule de ap i substane dizolvate n ap. n spaiile interfibrilare ptrund att substane hidrofile (pectin, lignin, hemiceluloz), ct i substane hidrofobe (cutin, suberin, ceruri ). Funcie de raportul dintre aceste substane apar deosebiri eseniale n structura submicroscopic i proprietile funcionale ale diferitelor tipuri de membrane. Membrana celular crete concomitent cu creterea celulei, att n suprafa ct i n grosime, modificndu-se treptat elasticitatea i plasticitatea. Creterea n suprafa a membranei celulare se face prin intercalarea de noi microfibrile de celuloz printre cele vechi. Acest mod se ntlnete numai la membranele primare, n etapa creterii embrionare. n acest proces, un rol important l au unii fitohormoni din grupa auxinelor, mai concentrai n zonele de cretere, unde mresc plasticitatea membranelor celulozice. Creterea n grosime a membranelor primare i secundare se face prin apoziie interioar, adic prin depunere centripet n straturile de celuloz a unor noi micele, microfibrile i macrofibrile secretate de protoplasm. La ngroarea membranei prin apoziie rmn unele poriuni nengroate (pori), prin care trec plasmodesmele de la o celul la alta. Cnd membrana s-a ngroat pn la limita de elasticitate, nceteaz att creterea membranei ct i a celulei. Analiza chimic a membranelor celulare arat 34-46% celuloz, 33-42% hemiceluloze, 8-20% lignin, apoi polizaharide necelulozice, substane pectice (acid pectic, pectin, pectoz), proteine, gliceride i ceruri (suberin, cutin) i unele elemente minerale. Membranele celulare prezint i unele modificri secundare, ca: cerificare, cutinizare, lignificare, suberificare, mineralizare, gelificare, lichefiere etc. Membrana celular ndeplinete o serie de funcii importante n viaa celulei, i anume: funcie de aprare a protoplasmei; rol de susinere mecanic a celulelor i esuturilor; permite trecerea plasmodesmelor de la o celul la alta etc. (Milic i colab. 1982).
167
Structura celulei vegetale examinat la microscopul optic: a membrana celulozic; b plasmalema, c hialoplasma; d nucleul;
Reprezentarea schematic a celulei vegetale (dup Milic i colab., 1982): MC-perete celular celulozic; Pe-plasmalema; V-vacuola; Ttonoplast; N-nucleul; M-mitocondrie; P-plastid; Rer-reticul endoplasmatic rugos; Ren-reticul endoplasmatic neted; pl-
168
Reeaua reticulului endoplasmatic n celula vegetal: 1- membrana celular; 2- plasmalema; 3 - canale de reticui; 4 - cisterne de reticul;
Structura membranelor duble ale reticulului endoplasmatic (dup A. Nougarede, 1969, Milic i colab. 1982)
169
Structura membranei mitocondriale cu dou foie fosfolipoproteice (dup A. Nougarede, 1969, Milic i colab., 1982)
Tipuri de condriozomi n funcie de structura cristelor interioare : a-tubuli; b-lamele; c-saculi (dup E.Libbert, 1974, Milic i colab. 1982)
Seciune transversal prin mitocondrie (A) i aezarea oxizomilor pe criste (B,C) (dup E. Racker, 1968, Milic i colab. 1982)
170
Schema structurii interne a cloroplastelor: 1-strom, 2-grane, 3-tilacoide. Orientarea tilacoidelor paralel cu axa mare a cloroplastului.
171
Structura chimic a moleculei de clorofil i modul de plasare pe lamelele granei: pstrat proteic, chl-clorofila, L strat lipidic, c-carotina (dup Milic i colab., 1982).
172
Aportul ribozomilor din ergastoplasm n sinteza proteinelor (dup Milic i colab., 1982).
Tipuri de dictiozomi cu sacule suprapuse i vezicule periferice: A-cu saculi i vezicule; B-cu tubuli fr vezicule (dup E. Libbert, 1974, Milic i
Ontogenia aparatului Golgi: a-membrane duble concentrice; b-deschiderea inelului bilamelar; c- formarea veziculelor golgiene prin nmugurire (dup Milic i
Interaciunea ontogenetic dintre membranele celulare: a-plasmalema; bpinocitoz; c-hialoplasm; d-vacuol; edictiozomi; g-sferozomi; h-promitocondrii; i-reticul endoplasmatic; jribozomi (ergastoplasm) (dup Milic i colab.,1982)
Procesul de formare a vacuolelor de la celula tnr (a) (cu nucleu central i lipsit de vacuol), la celula adult (d) (cu nucleu periferic i vacuol central mare) (dup Milic i colab.,1982).
173
3. Organizarea funcional a celulei animale 3.1. Fiziologia celulei animale Structura heterogen a celulei a fost descris de morfologi, la nivelul microscopiei optice i apoi la microscopul electronic, de la formularea teoriei celulare de catre Schwann (1839) pn n zilele noastre, cnd complexitatea structurilor funcionale ale celulei este susinut de datele oferite de biochimie, biofizic i fiziologie. Descoperirea ciclurilor biochimice indic aceast complexitate a reaciilor biochimice - enzimatice i existena unei organizaii spaiale a sistemelor de enzime n citoplasm, n care acelai substrat poate s urmeze ci diferite n cursul reaciilor metabolice care se impun. Astfel, celula nu este un sac ce conine o soluie omogen de enzime ci are stucturi cu funcii vitale. Faptul c o celul poate s efectueze un travaliu, implic n mod necesar o organizare a citoplasmei, lucru dovedit i de ultracentrifugarea fracional (Roca, 1977). Dovezi despre organizarea spaial a mecanismelor funcionale celulare sunt oferite de analizele structurii macromoleculare a sistemelor enzimatice, cum sunt cele energetice din membranele mitocondriale sau ale sintezei acizilor grai, a rolului acizilor nucleici n sinteza proteic, a procesului elementar al contraciei musculare .a. Structurile macromoleculare celulare sunt organizri dinamice influenate de muli factori care pot afecta i modifica reaciile chimice din structura organizat, ca de exemplu, mecanismele de control metabolic feed-back, efectele alosterice, conexiunile spaiale. Existena ritmurilor circadiene (nictemerale) n activitatea sistemelor vii, dovedete c organizarea spaial este dinamic i c aceste sisteme vii au i o organizare temporal. Se impune precizarea c, n tratarea problemei sistemelor funcionale ale celulelor animale, se utilizeaz noiunea de structur n sensul de: intregul edificiu molecular cruia i se datorete o funciune (Roca, 1977). 3.2. Structuri funcionale de baz Structura celular evideniat n cmpul microscopului electronic este pregnant i dinamic, reprezentat de : 1. sistemul de membrane, ce cuprinde: membrana periplasmatic i endomembranele; 2. matricea omogen (hialoplasma), compartimentat de ctre membrane, care apare ca un fond structural n care este inclus a treia faz structural: 3. granulele refringente (ribozomii, centrozomul celular etc.). 174
3.2.1. Sistemul celular de membrane Membrama periplasmatic este parte a sistemului structural celular n unitatea cruia se integreaz din punct de vedere morfologic i funcional . Membrama periplasmatic este acea parte a sistemului de membrane celulare care limiteaz i regleaz schimburile cu mediul extracelular, asigurnd o anumit compoziie a mediului intracelular i un gradient electrochimic caracteristic. Membrana nuclear asigur i limiteaz schimburile citoplasmei cu sucul nuclear iar membrana mitocondrial asigur i limiteaz schimburile matricei intramitocondriale cu citoplasma fundamental. Membrana celular i endomembranele nu sunt complet asemntoare, dar prezint o serie de caracteristici comune ntregului sistem celular de membrane: a) - au acelai tip structural, biochimic, biofizic, morfologic i funcional; b) - au permeabilitate selectiv, dinamic, ciclic; c) - au o polarizaie electric, ce se poate modifica n strns dependen de variaiile permeabilitii; d) - au sisteme enzimatice proprii, care le confer funciuni metabolice specifice. Funciile metabolice ale sistemului de membrane celulare (dup Roca, 1977).
Membranele considerate Membrana periplasmaticReticul endoplasmatic: -membrane alfa, cu granule -membrane beta, netede Microviloziti Membrane mitocondriale Funcia metabolic realizat Glicoliza Sinteze de proteine Sinteze de acizi grai, fosfolipide Hidrolize terminale : -proteine, -polizaharide Ciclul citric furnizor de H2 Oxidare de acizi grai. Sintez de acizi grai Fosforilare oxidativ Condensare de substane sintetizate n alte sisteme de membrane (proteine), sintez de mucopolizaharide
1. 2.
3. 4. 5.
Sistemele Golgi
a) Unitatea structural (sub aspect biochimic, biofizic, morphologic, funcional). Unitatea sistemului de membrane se refer la: aspectul lor n imaginea electronomicroscopic, natura chimic a constituenilor de baz, raporturile spaiale i temporale dintre diferitele categorii de endomembrane ntre ele, raporturile dintre endomembrane i membrana periplasmatic. Unitii de organizare morfologic-arhitectonic i chimic i corespunde unitatea funcional ce caracterizeaz ntregul sistem. n aceast integrare funcional unitar un rol important revine reticului endoplasmatic (de exemplu: rolul reticului sarcoplasmatic i al tuburilor transversale n asigurarea cuplrii excitaiei cu contracia n fibrele musculare striate). b) Permeabilitatea selectiv, ciclic. Una din funciile principale ale membranelor celulare este asigurarea schimbului permanent i adecvat de substane dintre mediile pe care le separ. Membranele celulare manifest o permeabilitate selectiv, dinamic. Procesele de difuziune pasiv i cele ale transferului activ sunt asigurate de existena sistemului de enzime proprii pe care le conine fiecare categorie de membrane (mitocondriale, ergastoplastice, ale sistemului Golgi etc.)
175
Permeabilitatea pentru ioni a membranelor este dinamic i reversibil asigurnd funcii specifice. Astfel este explicat capacitatea membranelor excitabile membrana celulei nervoase, membrana celulei electrice, membrana celulei musculare de a-i modifica rapid (n milionimi de secunde) i reversibil permeabilitatea pentru ioni . Capacitatea membranelor de a-i modifica permeabilitatea pentru ioni este datorat labilitii structurii membranei, existenei unor cicluri de permeabilitate i controlului acestor cicluri. c) Polarizaia electric. Permeabilitatea selectiv a sistemului de membrane celulare asigur i menine un gradient chimic : la nivelul membranei periplasmatice, ntre mediul intracelular i mediul extracelular la nivelul endomembranelor, ntre citoplasma fundamental (hiatoplasma) i matricea omogen a diferitelor organite celulare. Astfel, mediul intracelular este de 1,3 ori mai concentrat dect mediul extracelular; matricea omogen mitocondrial conine mai mult calciu dect hialoplasma, iar sucul nuclear conine mai mult sodium dect hialoplasma. Orice modificare de permeabilitate are drept consecin i modificarea gradienilor chimici (Roca, 1977). Existena i dinamica gradienilor chimici determin : polarizarea de repaus a membranelor ntregului sistem celular deci existena gradienilor electrici de repaus i variaia lor specific strilor de activitate (variaiile negative sau potenialele de aciune). Pentru viaa tuturor celulelor polarizarea membranelor, apariia i evoluia potenialelor de aciune au o importan major, ele asigurnd transmiterea excitaiilor n ntregul sistem celular i rspunsul unitar, integrat, al acestuia. De exemplu: n fibra muscular striat, reticulul sarcoplasmatic are rolul important n realizarea cuplului excitaie contracie (Roca, 1977). d) Sintemele enzimatice din membranele celulare. Studiile de microscopie electronic, combinate cu tehnicile de citochimie, au evideniat prezena acetilcolinesterazei (AchE) att n structura membranei periplasmatice, ct i n structura celorlalte sisteme de endomembrane. Activitatea adenozintrifosfatazelor (ATP- azelor) este intens n membranele celulare ale epiteliului intestinal, n corpuscul renal i la nivelul anselor, acolo unde au loc procesele intense de absorbie i excreie, aceste enzime fiind rspunztoare de transferul ionilor Na+ si K+ . Tot n membrana periplasmatic a celulelor epiteliului renal au mai fost descrise arilesteraza, NADH2-citocrom-C-reductaza, fosfomonoesterazele acid i alcalin, fosfodiesteraza, ribonucleaza, glucozo-6-fosfataza, NAD-pirofosfataza, 5mononucleotidaza etc. (Roca, 1977). n structura membranei periplasmatice sunt prezente sisteme enzimatice numite permeaze, capabile s asigure transferul de substane, ceea ce pune problema existenei porilor, n primul rnd ca enzime-pori i nu ca discontinuiti morfologice, n structura membranelor.
176
Dispunerea enzimelor n membranele celulare nu este uniform, ceea ce face s nu existe o echipotenialitate morfologic i funcional a diferitelor regiuni ale membranelor. Fiecare categorie de membrane poate fi privit ca un mosaic heterogen de uniti funcionale , ce asigur o permeabilitate diferenial a regiunilor celulare. Astfel, s-a constatat c rezistena electric specific a membranei celulelor epiteliale este mare n regiunea apical, deci au o permeabilitate apical restrns, ceea ce atest prezena unei bariere de difuziune puternice n aceast zon celular; n regiunile intercelulare rezistena specific este mic, iar permeabilitatea este larg. Experienele cu fluorescein confirm existena acestor diferene zonale de permeabilitate membranal: trecerea substanei colorate de la o celul la alta se face mult mai rapid, dect din celul n mediul nconjurtor. Caracteristicile structurale distincte ale membranei diferitelor tipuri funcionale de celule sunt grefate pe modelul comun tuturor celulelor. Un exemplu cunoscut este prezena microvilozitilor la nivelul membranei apicale a celulelor epiteliului intestinal sau a celui ce cptuete tuburile urinifere .a. Dispunerea sistemelor enzimatice ale respiraiei celulare aerobe n mitocondrii prezint aceeai heterogenitate spaial. Astfel, subsistemul enzimatic al ciclului Krebs este localizat n membrana mitocondrial extern, catenele de oxidare i fosforilare sunt n membranele mitocondriale interne. Membranele (cu enzimele adiacente) repezinta 60-90% din totalul substanei celulare. Membrana periplasmatic i endomembranele reprezint faza structural celular care ndeplinete dou funcii bine stabilite o transportul selectiv de substane i o transferul de energie i dispune de proprietatea o de a nmagazina informaie i o de a participa la coordonarea activitii celulare, reprezentnd astfel baza molecular a integrrii celulare (Roca, 1977). 3.2.2. Matricea omogen fundamental hialoplasma Matricea omogen fundamental hialoplasma, mpreun cu aceea a diferitelor organite celulare, constituie o pia de metabolii (Roca, 1977) ce asigur : - activitatea specific a sistemului de membrane, datorit prezenei unor complexe de enzime (cum este, de exemplu, acela al glicolizei) i datorit crora au loc i nenumrate acte metabolice de catabolism i de anabolism. - asigur existena diferiilor gradieni chimici i a polaritii membranelor, cu toate consecinele lor funcionale de repaus sau de activitate, datorit compoziiei chimice proprii a diferitelor organite celulare. 3.2.3. Granulele refringente Ribozomii, centrozomul celular etc., au funcii importante n sintezele celulare, n nmulirea celulelor etc.
177
n cursul utilizrii, n sistemele funcionale celulare, aceast energie potenial se transform pn la sfrit n cldur i se pierde pentru sistemul celular, fiindc acesta nu are posibilitatea s converteasc energia caloric n alte forme de energie. Dei degradarea i pierderea energiei poteniale se face n mod continuu de ctre celul, nivelul energiei sale libere rmne ridicat i aproape neschimbat, datorit unui flux continuu de intrare de energie din mediul extracelular, sub forma unor molecule bogate n energie. Pe seama acestora celula sintetizeaz complexe macromoleculare cu un nivel energetic ridicat i o entropie cobort, sisteme caracteristice materiei vii. Din cauza fluxului continuu de materie i energie, celula vie se gsete ntr-un echilibru numai aparent, care a fost caracterizat ca o stare staionar ntr-un echilibru dinamic cu mediul extracelular. Integrarea mecanismelor energetice celulare Realizate pe baza unor procese biochimice specifice, cele trei mecanisme energetice celulare formeaz un sistem energetic unitar. Cele trei ci metabolice sunt: respiraia anaerob - fermentaiile, calea oxidativ direct - ciclul pentozelor i respiraia aerob. Baza biochimic a sistemului energetic este constituit de secvene de enzime ce funcioneaz ca sisteme oxido-reductoare, prin transfer de electroni. Sursa de electroni este reprezentat de ctre hidrogenul metaboliilor: glucide, lipide, protide. n funcie de disponibilitatea de oxigen molecular-respirator i de produsul final, unul din mecanisme poate fi predominant la un moment dat. Cele trei ci metabolice interacioneaz strns n dependent de momentul celular considerat: - glicoliza furnizeaz acetil-CoA ciclului Krebs, ori -cetoglutarat, pe baza crora funcioneaz sistemul respirator aerob; - creterea raportului ATP/ADP prin intensificarea fosforilrilor oxidative, activeaz calea oxidativ direct care, inhib calea glicolitic la nivelul fosfofructokinazei i creeaz condiii de intensificare a sintezei de acizi grai i trigliceride pe seama glucozei, deci de depunere n rezerv foarte concentrat a surplusului de energie ingerat (Roca, 1977). Structurile celulare implicate n fenomenele de oxidare S-ar putea crede, la prima vedere, c respiraia celular, aa cum a fost definit i analizat, nu este legat dect de compoziia chimic a celulei, de dinamica sistemelor enzimatice i de substratele metabolizate . In realitate lucrurile sunt mult mai complexe. Respiraia celular este legat de ativitatea la nivelul membranei periplasmatice, a mitocondriilor, nucleului, citoplasmei fundamentale, sistemului de sintez a proteinelor enzime. Una din condiiile de baz a realizrii acestor procese este integritatea structural a sistemului celular. La aceast concluzie s-a ajuns dup ce numeroi autori au studiat respiraia celulelor i esuturilor dezintegrate mecanic prin omogenizare, comparativ cu aceleai esuturi sau celule intacte, chiar scoase din organism. Astfel, n esutul muscular omogenizat complet, nu mai are loc dispariia acidului lactic, rezultat prin contracie, aa cum se petrece n acelai esut intact; la eritrocitele de pasre, dup sfrmare (omogenare), consumul de oxigen este suprimat complet, pe cnd n condiii normale respiraia lor este destul de intens. Condiiile defavorabile cum ar fi congelarea urmat de decongeIare, sau aciunea anumitor substane nocive, nu suprim complet consumul de oxigen de ctre acestea, atta vreme ct ele mai pstreaz elemente ale organizrii lor structurale (Roca, 1977).
179
Membrana periplasmatic rolul n respiraia celular. Membrana periplasmatic intervine n procesele de respiraie celular nu numai ca un filtru selectiv, care las s treac sau oprete anumite substane, ci i ca limit de separaie ntre dou medii distincte, mediul intra- i extracelular. Warburg a artat c oxidrile n oule de ursin fecundate se mresc dac n mediul exterior crete concentraia ionilor OH, deci dac alcalinitatea crete. Cum ionii OH nu traverseaz membrana celular, autorul presupune c ei ar exercita o influen asupra membranei i, prin aceasta, asupra proceselor oxidative care s-ar desfura la periferia celulei, la nivelul membranei periplasmatice, acolo unde influenele mediului exterior se fac mai simite (Roca, 1977). Mitocondriile rolul n respiraia celular. 1. Central energetic a celulei, mitocondriile sunt capabile s oxideze acidul piruvic i toate substratele ciclului Krebs i, complementar, acizii grai i acidul glutamic. Electronii cu energie ridicat eliberai din substrat sunt transferai n lungul catenei de oxidare la acceptorul final care este oxigenul, datorit prezenei numai n mitocondrii a enzimei finale, a citocromoxidazei. 2. Cuplarea catenei de oxidare cu cea de fosforilare este de asemenea proprie mitocondriilor, ceea ce face ca acestea s furnizeze cea mai mare cantitate de ATP - mai mult de 90% n majoritatea esuturilor. 3. Datorit echipamentului enzimatic, deci i a posibilitii de a oxida fragmentul acetil-CoA cu un randament ridicat, mitocondriile reprezint sistemul funcional infracelular capabil s dein monopolul oxidrii acizilor grai i, s realizeze o anumit etap din sinteza unora dintre ei. ntre numrul, forma, mrimea mitocondriilor, suprafaa total a membranelor interne ale acestora i activitatea respiratoare a celulelor este o legtur direct. Pentru o celul hepatic de obolan care are diametrul de 30 , suprafaa extern este de 3000 2. Ea conine cam 1000 mitocondrii cilindrice, fiecare avnd lungimea de 3,5 i grosimea de 1 suprafaa lor total este de 13000 2 (132 x 1000) i crestele acestor mitocondrii au o suprafa de 16 2 per mitocondrie, deci 16000 2 pentru ansamblul mitocondrial al celulei. n total membranele mitocondriale ale celulei au o suprafa de 29 000 2, iar celula, n totalitatea ei, are doar o suprafa de 3000 2. Raportul: suprafa celular/suprafa mitocondrial este cu mult mai mic pentru celulele renale, unde numrul crestelor din fiecare mitocondrie este mult mai mare i numrul mitocondriilor dintr-o celul de asemenea este mai mare (Roca, 1977). Factorii reglrii activitii mitocondriale. a) Permeabilitatea membranelor mitocondriale. Membrana extern a mitocondriilor este permeabil pentru ap, electrolii i zaharoz ; membranele interne sunt impermeabile fa de H+, OH- , Na+, K+, Mg2+, zaharuri. Membrana mitocondrial este selectiv-permeabil fa de substanele oxidabile: pentru citrat este foarte puin permeabil; n schimb, este mai permeabil pentru malat, fumarat, glutamat, -cetoglutarat. Permeabilitatea fat de termenii ciclului Krebs pare s fie legat i determinat de o serie de transportori specifici, la fel ca i pentru ADP i ATP ; acetia devin astfel regulatorii funcionrii mitocondriale i probabil ai eliberrii ATP-ului n citoplasm. Permeabilitatea selectiv a membranelor trebuie privit ca un mecanism de pstrare a capacitii de funcionare a sistemului: orice pierdere a unuia dintre intermediarii ciclului Krebs duce la scderea randamentului energetic mitocondrial. 180
b) Localizarea sistemelor enzimatice i funcionarea lor. Sistemul enzimatic al ciclului Krebs ca i enzimele implicate n oxidarea acizilor grai, a -hidroxibutiratului i a aminoacizilor sunt localizate n membrana extern mitocondrial; aceste sisteme enzimatice pot aciona asupra unor substraturi intramitocondriale, dar ele pot aciona i asupra unor substraturi extramitocondriale, din citoplasm. Sistemul enzimatic al transferului de electroni ca i acela al catenei de fosforilare, sunt localizate n particulele elementare ce tapiseaz membranele interne mitocondriale i ele pot aciona numai asupra unor substraturi interne. Sistemele enzimatice din membrana extern scot din substratul oxidat perechi de electroni cu un nivel energetic ridicat, sub forma perechilor de atomi de hidrogen i i transfer sistemului enzimatic intern care, purtndu-i pn la acceptorul final care este oxigenul, i descarc de energia lor pe care o transfer n legturi macroergice-fosfat sau pe seama creia poate realiza un transfer de ioni. Heterogenitatea structural a mitocondriilor se integreaz unitar n heterogenitatea structural a ntregului sistem celular. c) Starea lanului respirator. Starea funcional a sistemului este dependent de dou rapoarte : cnd raportul ATP/ADP se mrete, respiraia se ncetinete; cnd raportul substrat/produs final se mrete, respiraia se intensific. Cele dou rapoarte interacioneaz strns. n cazul n care respiraia se ncetinete ca urmare a creterii nivelului ATP, nseamn c lanul de transfer de electroni este puternic cuplat cu catena de fosforilare; starea funcional a sistemului este bun. n acest caz raportul: ~ P format/atomi de oxigen consumai sau raportuI: P/O, este de 3 (sau de 2 pentru succinat); cnd 2H+ ajung la capatul lanului respirator i se unesc cu o jumtate molecul de oxigen, formnd o molecul de ap, un atom de oxigen este consumat pentru trei (sau dou) etape fosforilante. Msurarea raportului P/O permite s se aprecieze starea sistemului respirator mitocondrial i prin aceasta nivelul randamentului energetic al mitocondriilor. Agenii "decuplani" de tipul 2,4, DNP, tiroxina, calciul, urmele de metale grele (10 M), capabili s blocheze transferul energiei electronilor n legturile P-macroergice, determin i o umflare a mitocondriilor ca i o schimbare a permeabilitii acestora. In mitocondrii un raport ridicat ATP / ADP, un nivel cobort al oxigenului i o concentraie crescut de Ca 2+ i K+ determin: - blocarea sistemului enzimatic al ciclului Krebs i prin aceasta, - arderea acizilor grai, pornind de la acetil-CoA i de la piruvat sau lactat; - producerea de citrat, n cazul n care exist o surs de oxaloacetat care, apoi. este scos din mitocondrie n citoplasma fundamental ca substrat pentru lipogenez sau gluconeogenez - prin aceasta mitocondriile particip la transformarea aminoacizilor i a glucozei n acizi grai; - intensific transformarea piruvatului n malat ce difuzeaz n citoplasm unde, - n condiiile unui raport NADH / NAD ridicat stimuleaz lipogeneza, iar - n condiiile unui raport NADH/NAD sczut stimuleaz gluconeogeneza (Roca, 1977).
6
181
Nucleul rolul n respiraia celular. Participarea direct a nudeului la oxidrile celulare a fost i este nc mult discutat. n experienele cu enucleri celulare s-a pus n eviden faptul c fenomenul fundamental, caracteristic acestei stri, este reducerea intrrii fosfatului radioactiv n celul. Aceast constatare, alturi de altele, conduce la ideea c nucleul particip indirect el fiind sediul sintezei coenzimelor indispensabile oxidrilor fosforilante (dup Roca, 1977).. Citoplasma fundamental rolul n respiraia celular. Participarea acesteia la sistemul energetic celular comparativ cu aceea a mitocondriilor reiese evident din tabelul comparativ alturat. Astfel numrul i capacitatea funcional relativ a mitocondriilor raportat la citoplasm sunt una din cauzele specializrii celulare att pentru funcii ct i pentru structuri i metaboliii pe care-i utilizeaz celulele i condiiile fragilitii lor. Sistemul de sintez a proteinelor enzime rolul n respiraia celular. Acesta asigur un niveI al enzimelor respiratoare corespunztor intensitii arderilor. Comparaie ntre funciile motocondriilor i citoplasmei (dup Roca, 1977). Funcia realizat Mitocondrii Citoplasm Producia de cldur ++ Producia de ATP ++ Gradient osmotic ++ Catabolism de : - acizi grai ++ 0 - glucoz 0 ++ - aminoacizi + ++ Sintez de : - lipide Anumite etape ++ - glucoz 0 ++ - aminoacizi + + - baze nucleice 0 ++
3.3. SISTEMUL SINTEZEI PROTEINELOR Structurile infracelulare implicate in sinteza proteinelor Procesul sintezei proteinelor, implic participarea direct sau indirect a tuturor structurilor sistemului celular. Nucleul, cu aparatul cromozomic i nucleolic, asigur sinteza acizilor ribonucleici care, la rndul lor, sunt purttorii mesajului genetic i prin aceasta, organizatorii noilor molecule proteice n afara nucleului, n masa de citoplasm. Citoplasma fundamental asigur aportul de aminoacizi necesari, n urma schimbului cu mediul extracelular, sau prin hidroliza macromoleculelor proteice existente n mediul intracelular; n acelai timp ea asigur vehicularea acizilor nucleici i a GTP (guanozintrifosfatul) de la locul de producere a lor la punctul de sintez. Sistemul ergastoplasmatic, datorit prezenei ribozomilor n structura sa, reprezint sediul celular al sintezei proteice, locul de asamblare al aminoacizilor n lanuri polipeptidice. Sinteza proteinelor se face la suprafaa membranelor ergastoplasmatice, n zona de contact dintre acestea i ribozomi. La cobaii care au fost inui n inaniie s-a observat c stimularea secreiei celulelor acinilor pancreatici, prin hrnire cu alimente bogate n proteine, este asociat, dup 1-3 ore, cu modificri ale ergastoplasmei: o lrgire a
182
veziculelor i cisternelor, precum i prezena n acestea a unor granule de secreie, granule prezimogenice, cu diametrul de 0,2-0,3 , care dispreau n canaliculele ergastoplasmatice. Rezultate asemntoare au fost observate prin studii de ncorporare a L-14C-leucinei, DL-3Hleucinei att n celule acinoase pancreatice, ct i n celule ale glandei mamare n lactaie sau ale glandelor parotide, ca i n celulele camerei albuminogene din oviductul de gin. Unele din proteinele sintetizate trec n sistemele Golgi - sunt proteinele de export; altele rmn n sistemele ergastoplasmatice i vor fi utilizate de ctre celula nsi. Mitocondriile furnizeaz, prin substanele macroergice de tipul ATP i GTP, energia necesar att sintezei acizilor nucleici n interiorul nucleului celular, ct i energia necesar activrii aminoacizilor n citoplasm, indiferent c este vorba de sinteza proteinelor de export sau a celor din economia intern a celulelor. Membrana periplasmatic, prin permeabilitatea ei selectiv, asigur ptrunderea n mediul intracelular a unor substane necesare sintezei, cum ar fi aminoacizii eseniali, vitaminele i glucoza, meninnd n acelai timp n mediul intracelular macromoleculele proteice sintetizate. Sistemele de membrane i de vezicule Golgi condenseaz particulele mici n granule mari - granule de zimogen, n cazul celulelor acinilor exocrini pancreatici . Diferitele structuri infracelulare ce particip la sinteza proteinelor interfereaz unele cu altele dnd sistemul unitar al sintezei: - reticulul endoplasmatic asigur transferul aminoacizilor, din surse externe sau interne, la ribozomii reticulului sarcoplasmatic unde are loc formarea lanurilor polipeptidice i a granulelor proteice prezimogenice; - pe baza energiei mitocondriale, acestea sunt transferate sistemelor Golgi unde sunt "maturate", transformate n granule de secreie intracisternale condensate apoi n veziculele sistemului i transformate n granule de zimogen. Interrelaiile dintre aceste structuri sunt aa de strnse i de necesare nct lipsa uneia deregleaz ntregul sistem i prin aceasta frneaz desfurarea n condiii normale a procesului de proteinogenez (Roca, 1977).
Arhitectonica macromolecular a membranei celulare. 1.Strat proteic extern; 2. strat lipidic extern; 3. strat lipid ic intern; 4. Strat proteic intern; 5. por n membran; 6. lan proteic filamentos; 7. macromolecul globular de proteine; 8. macromolecul de mucopolizaharide (dup Raicu i colab.,1972).
Stereograma celulei animale. 1. Membrana; 2. reticul endoplasmatic; 3. mitocondrie; 4.aparatul Golgi; 5. membrana nuclear; 6. centriol; 7. lizozom (dup Raicu i colab.,1972).
Stereograma nucleului. 1. Membrana nuclear; 2. pori; 3. nucleol; 4. cromatide; 5. carioplasm (dup Raicu i colab.,1972).
184
Stereograma formrii lizozomilor. 1. Plasmalema; Mitocondrie din glanda mediointestinal Ergastoplasma dintr-o celul pancreatic Aparatul lui Golgi-stereograma. 1. Membrana de rac 2. fagozom; 3. lizozom primar; 4.250); vacuol digestiv; eisaculilor; (x2. 23 Spaiul 100) -dintre stereograma saculi; de salamandrA (x 16 stereograma 5. Vacuol autofag; 6. corp rezidual 3. (dup coninutul saculilor Raicu i colab.,1972). B (dup Raicu i colab.,1972). (dup Raicu i colab.,1972). (dup Raicu i colab.,1972).
185
3.4. SISTEMUL MOTOR NEMUSCULAR In lumea animal - la nivelul celular - exist mecanisme structurale i funcionale capabile s realizeze, n mod direct, convertirea energiei chimice a metaboliilor n lucru mecanic. Sistemele biologice, furnizoare de lucru mecanic, sunt reprezentate n primul rnd de celule musculare striate i netede. n afara acestora, aproape toate celulele au n structura lor elemente capabile s manifeste o activitate contractil integrat n activitatea specific a ntregului sistem celular. Aa sunt: centrozomul, fusul sau aparatul mitotic acromatic, care asigur micarea cromozomilor nspre cei doi poli ai celulei n curs de diviziune; "elementele contractile" din mitocondrii care asigur ciclurile de micare ale acestora; trihocitii din membrana parameciului; cilii i flagelii, structuri celulare difereniate, cu proprieti contractile bine exprimate; elementele contractile din citoplasma amibei sau a leucocitelor. Dei toate prezint variaii multiple de form i mod de funcionare, se pare c folosesc acelai mecanism molecular de baz: un sistem proteic contractil, actomiozina, capabil s hidrolizeze molecula macroergic de ATP i ADP plus fosfor, cu eliberare de energie; o parte din aceast energie eliberat este utilizat de sistemul contractil i transformat n lucru mecanic. Molecula de ATP se reface apoi pe seama ADP i a fosforului anorganic, cu energia rezultat din utilizarea metaboliilor, n reaciile de glicoliz i mai ales n catena de oxidare i fosforilare. Am putea considera c exist dou sisteme contractile celulare: un sistem muscular, care are ca unitate elementar contractil miofibrila i un sistem nemuscular, cuprinznd aici toate celelalte elemente celulare capabile de micare, care au ca unitate elementar microtuburile. Dup Roca, 1977), s-ar prea c ambele uniti elementare au unele pri comune. Microtuburile sunt formate din filamente, care nu sunt altceva dect iruri de uniti globulare cu un diametru de 35 ; ele ar fi chiar molecule de protein cu greutatea molecular de 65000 i care, dup unele proprieti chimice, s-ar asemna cu actina miofibrilelor. De asemenea, microtuburile manifest o net activitate ATP-azic, analoag aceleia a miozinei din miofibrile. Este necesar s mai precizm c producerea micrii ntr-un sistem biologic nu necesit n mod obligatoriu prezena unui set dublu de filamente ntr-o aranjare ordonat, cum este cazul demonstrat la muchiul striat. Physarum polycephalum are o micare caracteristic a protoplasmei; din acest sistem s-au extras att o protein asemntoare miozinei, ct i una asemntoare actinei. La acest organism deci interaciunea actin-miozin ar putea fi rspunztoare de micare, n absena unor filamente formate din cele dou proteine care s se ntreptrund (Roca, 1977). 4.4. INTEGRAREA SISTEMULUI CELULAR Celula vie este un sistem funcional care se regleaz n mod automat, la regimul de lucru cel mai avantajos, n condiiile mereu schimbtoare ale mediului extracelular. Mecanismul complex al autoreglrii metabolice celulare (dup Roca, 1977), poate avea trei verigi principale: 1. legat de existenta unor sisteme macromoleculare bine determinate n ceea ce privete structura lor chimic i dispoziia lor spaial - o anumit topobiochimie celular reflectat n heterogenitatea structural spaial a sistemului, din imaginea electronomicroscopic. 2. legat de reglarea vitezei proceselor ce se petrec n celul. Substanele de sintez sau produii de descompunere, realizate de sistemele de enzime, pot la rndul lor s acioneze asupra acestora; de aceea, dac viteza reaciei a depit limitele normale, adic dac s-a produs o substan chimic "n exces", cantitatea excedentar influeneaz asupra sistemului catalizator, i frneaz activitatea i stabilizeaz procesul. 3. este un instrument de reglare realizat de mobilitatea intracelular a elementelor structurale; canalele submicroscopice, membranele intracelulare i formaiunile care au o
186
micare permanent mpart sau "distileaz" (filtreaz) cu viteza corespunztoare i n direcie corespunztoare, substanele care particip la procesele metabolice. Cele trei verigi interfereaz ntre ele: manifestarea "n exces" a unor reacii influeneaz asupra organizrii structurale, ceea ce poate avea consecine asupra proceselor metabolice. Acest lucru este dovedit i de legtura strns dintre mobilitatea structurilor celulare i activitatea vital. Dispariia mobilitii intracelulare este un indiciu caracteristic al morii celulelor (Roca, 1977). Topobiochimia celular n imaginea optic i n imaginea electronomicroscopic, apare o heterogenitate structural spaial a sistemului celular, cu particulariti specifice fiecrei categorii de celule: fibre musculare, neuroni, celule secretoare endocrine sau exocrine etc. Heterogenitatea se poate constata i la nivelul organitelor celulare. Compartimentarea structurii organitelor celulare, ca i a ntregului sistem celular, are la baz o heterogenitate a dispoziiei macromoleculelor de structur i a sistemelor de catalizatori corespunztori funciilor acestora. Fiecrui organit celular i este propriu un anumit sistem de intercondiionare: moleculele de structur - activitatea enzimatic. Activitatea unui astfel de sistem depinde pe de o parte de posibilitatea realizrii unei concentraii optime a substratului pe suprafaa sistemului enzimatic, sau a unei concentraii optime a enzimelor pe suprafaa i chiar n interiorul substratului. Pe de alt parte depinde i de interaciunea cu celelalte sisteme intracelulare. Se tie c mitocondriile conin ntregul sistem enzimatic necesar oxidrii acidului citric, reducerii citocromului C i oxidrii NADH; totui, cnd se pot izola fr o lezare a membranei mitocondriale, aceste activiti enzimatice nu se pot manifesta; lezarea uoar a membranei, fcnd posibil penetraia substraturilor, aduce dup sine manifestarea activitii sistemelor enzimatice amintite mai sus. Sistemul metabolic glicolitic ar fi localizat n membrana plasmatic, pentru globulele roii. Sistemul de sintez proteic este localizat n membranele reticulului endoplasmatic cu ribozomi. Ultrastructura membranelor celulare i intracelulare apare deci ca terenul de ntlnire al morfologiei, biochimiei i fiziologiei (Roca, 1977). Controlul genetic al sintezei enzimelor Dac inem seama de faptul c enzimele sunt macromolecule proteice, este uor de neles c sinteza lor se face dup schema general a sintezei proteinelor. Specificitatea structural i a activitii lor enzimatice va fi determinat de ctre ADN-ul nuclear prin intermediul ARNm, care servete drept matrice pentru sinteza enzimei considerate. Astfel sinteza enzimelor apare ca un proces specific celular, asigurat i controlat prin informaia ereditar a nucleului lor (Roca, 1977). Prin analogie cu schema general a sintezei proteice, putem reprezenta etapele fundamentale la nivelul crora se face reglarea sintezei enzimelor, n conformitate cu codul genetic, astfel: Transcriere Traducere ADN --------------- ARNm ---------------- Protein-enzim
Bibliografie : ROCA I. DUMITRU, 1977. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti. ROIORU CORINA, SEVCENCU C., GHERGHEL PANTE, 1995. Lucrri practice de fiziologie animal pentru uzul studenilor. Univ. Babe-Bolyai, Cluj-Napoca. STRUNGARU GR., POP MIRCEA, HELCO V., 1983. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic. Bucureti. COTESCU I.,1971.Fiziologie celular normal i patologic. Ed. medical, Bucureti. RAICU P., IONESCU-VARO M., GANCEVICI G., MOISESCU G., 1972. Celula. Ed. Acad. RSR. Bucureti
187
5. Integrarea sistemului celular vegetal 5.1. Sistemul energetic al celulei vegetale. Metabolismul glucidelor
n metabolism se includ cele dou laturi eseniale: anabolismul i catabolismul. Anabolismul reprezint procesul de sintez a unor substane n organismele animale i vegetale. Catabolismul reprezint degradarea substanelor anterior sintetizate sau a celor ingerate prin hran. n funcie de modul de nutriie, organismele se clasific n: autotrofe i heterotrofe - Organismele autotrofe o i sintetizeaz substanele organice din o compui anorganici:CO2,H2O,sruriminerale o consumnd energie luminoas sau chimic. Acest proces se realizeaz prin fotosintez, n organismele verzi superioare sau inferioare, care conin clorofil (ex.plante verzi, bacterii fotosintetizante sau chemosintetizante). - Organismele heterotrofe o nu i pot sintetiza direct substanele organice o plecnd de la compuii anorganici, o ci doar din compui organici mai simpli. Ex.: toate animalele, organismele saprofite sau parazite, cum sunt ciupercile, drojdiile, bacteriile. ANABOLISMUL GLUCIDELOR: FOTOSINTEZA Fotosinteza este cel mai important proces biochimic de pe pmnt, ce const n formarea substanelor organice din substanele anorganice (CO2, H2O, sruri minerale) de ctre plantele verzi care conin clorofil, cu ajutorul energiei luminoase. Prin fotosinteza se pune n libertate oxigenul necesar proceselor de respiraie, diverselor reacii de ardere, energia luminoas se transform n energie chimic, nmagazinat n legturile chimice ale produilor rezultai prin fotosintez (glucide). Fotosinteza are loc n cloroplaste i n zona citoplasmei care le nconjoar. n cloroplaste exist alturi de o clorofila a i o pigmeni secundari (clorofile b, c, carotenoide, chinone ) i o sisteme enzimatice care participa la fotosintez. Acesti componenti au rolul de a ceda clorofilei a energia solar pe care o absorb ei nii intr-o form direct utilizabil i ne-duntoare. In vitro s-a dovedit c singur, clorofila a lipsit de pigmentii auxiliari, nu este capabil s realizeze fotosinteza. Reacia simplificat a fotosintezei este: lumina 6CO2 + 6H2 O -----------------> C6 H12O6 + 6O2 clorofila glucide Raportul dintre moleculele de CO2 care intr in reacie i moleculele de O2 care ies din reacie este de 1 la 1. Din punct de vedere redox, fotosinteza este procesul in urma cruia H2O este oxidat (pierde H2 sau e), iar CO2 este redus (accept H2 sau e) pentru a conduce la produii amintii. Oxigenul eliberat in fotosintez provine din ap (nu din CO2 cum se credea).
188
Fotosinteza se realizeaz prin 3 procese: 1. Fotofosforilarea care conduce la formarea de ATP i NADPH+H+ 2. Fotoliza apei - care conduce la H2 i O2 3. Fixarea si transformarea CO2 in glucide = CICLUL CALVIN. Prim ele 2 procese necesit lumin si constituie de aceea faza la lumina a fotosintezei . Utima etap are loc i la ntuneric i se numeste "reactia la intuneric a fotosintezei . 1. Fotofosforilarea - este procesul de formare de ATP din ADP i fosfat anorganic n cloroplaste , n prezena luminii i co -factorilor (citocromi b6, citocromi f,ferredoxina, chinone) Lumina, cloroplaste n ADP + n H3PO4 --------------------------------> n ATP Citocrom f, feredoxina, chinone NADPH + H+ se formeaz din NADP + i hidrogen provenit din fotoliza apei PPNR NADP + + 2H <-------------------> NADPH+ H+ (PPNR este enzima piridin nucleotid reductaza fotosintetic ). Dearece acest proces este cuplat cu fotoliza apei, reacia total se poate scrie astfel: Lumin, PPNR + 2NADP + 2H2 O < --------------- > 2 NADPH+ H+ + O2 Cloroplaste + NADPH + H rezultat, va servi la reducerea CO 2 in faza a 3-a a procesului de fotosinteza. Fotofosforilarea se produce prin 2 mecanisme: ciclic sau aciclic. F otofos forilarea ciclic: Clorofila a - excitat de lum ina absorbit, va elimina un e - cu energie mare. Acesta va fi captat de sistemele transportoare (chinone, vitamina K 3 , ferredoxina), apoi prin intermediul citocromilor b 6 i f (din cloroplaste), electronul se intoarce la clorofil , cu o energie mai m ic. In etapele de rentoarcere a electronului se formeaz ATP-ul din ADP
Fotofosforilarea ciclic eChinone
Sist.tra nsp ortoa re Vit.K3 Ferredoxina Plastochinona
ADP + P
cloroplaste
ATP Cit. b6
Clorofila a
Cit. f. ATP
ADP + P
189
b) F otofosforilarea neciclic este cuplat cu fotoliza apei, producndu-se numai in prezena enzimei PPNR (piridin nucleotid reductaza fotosintetic) . Ea duce la formarea ATP, NADP H+H+ , O2. Lumin, PPNR ADP+NADP +H3PO4 +H2 O <-------------------->ATP + NADPH+H+ + 1/2O2
+
Clorofila
In cloroplaste
2H+
Clorofila a
Cit. b6 Cit. f.
Plastochinona
2H2O
2HO
O2 +H2O
F otoliza apei - procesul de descompunere a apei n hidrogen i oxigen , cu ajutorul luminii i a clorofilei. Are loc cu consum mare de energie, furnizat de ctre lumina solar prin intermediul clorofilei. Pentru a putea efectua fotoliza, clorofila es te activat n prealabil prin abs orbie de fotoni , trecnd n clorofil activ (chl*). 2. Lumina chl Lumina, chl* cloroplaste chl* (activa) H + + HO 1e
F o to liza a pe i
chl+
H2O
Acest proces fundamental este cuplat cu cel de fotofosforilare neciclica, reactia avand loc doar in prezenta enzimei PPNR. El constituie principala surs de oxigen in natura. Lumina, PPNR + ADP + NADP + H3PO4 + H2O <----------------------> ATP + NADPH+H+ + 1/2O2 Cloroplaste
190
3. Fixarea i transformarea CO2 n glucide (ciclul Calvin) H2C OP Prin experiente cu izotopi radioactivi (pe alge), Calvin i Raker au dovedit c esterul ribulozo-l,5 C=O difosforic este substana care fixeaza CO2 n procesul de fotosintez . Pe baza experimentelor lui Calvin s-a HCOH aratat ca fixarea CO2 i formarea de glucide are loc printr-o succesiune de reacii n urma crora se obin compui (oze) HCOH cu 6 sau mai muli atomi de carbon. Ulterior printr-un H2COP alt ciclu, esterul ribulozo-l,5-difosforic se reface. Pentru formarea unei molecule de glucoz acest esterul ribulo zociclu trebuie parcurs de 2 ori, pentru c aldozele formate l,5-d ifosfo ric servesc att la sinteza glucozei - prin ciclul Calvin, ct i la refacerea esterului ribulozo -1,5 -difosforic (printr-un alt . ciclu de reacii). In concluzie, prin fotosintez: se formeaz substante organice din substante anorganice se consum CO 2 i se form eaz oxig enul necesar respiraiei se transform energia luminoas n energie chimica se realizeaz o continu circulatie a unor elem ente in natur (dup Arini, Cristescu, 2006). ANABOLISMUL Pe baza experienelor cu izotopi s-a dovedit c aciul 3-fosfogliceric este primul produs organic important al fotosintezei. Ulterior, el conduce la formarea prin fotosintez a glucidelor, a lipidelor i proteinelor . Aldehida-3-P
CO2 + H2O + H3PO4
-CO2 reducere
Acid-3fosfogliceric
CH3COOH +HSCoA AcetilCoA Acid acetic (Gliceride) Acizi Aldehida- reducere Lipide Glicero 3-P -P gliceric
+NH 3; +NADPH+H+
oxidare
CH3 - C COOH O
Aminare reductiv
191
izomerizare (izomeraz)
+CO2
carboxilaz
H2C OP HOOCCOH C=O +HOH HCOH carboxidismutaz H2COP Acid-2-carboxi-3ceto-ribulozo1,5-difosforic CH2OH C=O CH2OP
Fosfodihidroxiaceton
Acid-3fosfogliceric
C3 + C3 = C6
HC=O H2COP HCOH C=O I izomeraz HOCH izomerizare HOCH P Ester HCOH HCOH glucozoFosfogluco 1-fosforic mutaz HCOH HCOH TransCH2OP H2COP glucozidare Ester glucozoEster fructozo6-fosf oric 1,6-difosforic
AMIDON (poliglucid)
ZAHAROZA (diglucid)
192
CATABOLISMUL GLUCIDELOR Catabolismul glucidelor este un proces puternic exoterm i reprezint o surs principal de energie pentru plante i animale. Componenta cheie a intregului metabolism glucidic este esterul glucozo-6-fosforic (ester Robinson). Glucidele pot urma 3 ci principale de degradare: 1. Degradarea total- pn la CO2 i H2O, care se poate realiza anaerob (ciclul glicolizei) sau aerob (ciclul Krebs). 2. Calea pentozo-fosfailor - care conduce la pentoze importante biologic: riboza, deoxiriboza 3. Calea acizilor uronici (urmat de puine glucide,) conduce la acizi uronici, pentoze, (sau acid ascorbic=vitamina C numai la plante).
ATP H3PO4
Ester glucozo-1-fosforic
GLICOLIZ (anaerob)
Ciclul acizilor uronici (aerob) Ciclul pentozofosfailor (aerob) Ciclul respirator (Krebs) (aerob) Pentoze (riboza, deoxiriboza)
Cile de degradare a glucidelor. Degradarea aerob sau ciclul Krebs este o cale economic de degradare a glucidelor deoarece genereaz cea mai mare cantitate de energie (686 kcal/mol). De aceea, cnd oxigenul este prezent, organismul prefer calea aerob. Pe lng aceste tipuri de degradri, glucidele sufer i diverse fermentaii aerobe sau anaerobe, cele mai frecvente fiind fermentaiile alcoolice, lactice, acetice, butirice, citrice i succinice. 1). Glicoliza se mai numeste i catabolismul anaerob al glucidelor. Este procesul de degradare al glucozei in organism, fr participarea oxigenului i conduce la acid piruvic. Acest proces este esential pentru organisme pentru c le asigur energia necesara ndeplinirii functiilor fiziologice in lipsa oxigenului. Acidul piruvic rezultat din glicoliz poate suferi o reactie de decarboxilare care conduce la alcool etilic si care poate intoxica celulele (de ex. in fructele rscoapte). 193
2). Ciclul Krebs se mai numeste i ciclul respirator de degradare aerob a glucidelor, (ciclul acizilor tricarboxilici sau ciclul acidului citric ). Reprezint procesul de degradare al glucidelor cu ajutorul oxigenului, prin respiraie i conduce n final la formarea CO2 a H2O i a unei mari cantiti de energie. Respiraie C6 H12 O6 + 6O2 < ------------------> 6CO2 + 6H2 O + 686 kcal/mol
Fotosintez
S-a constatat c CO2 rezult prin reacii de decarboxilare ale substratului respirator. Ciclul Krebs se petrece in spaiul interior al mitocondriilor, fiind un proces fundamental pentru organismele vii. El cuprinde 10 etape. Concluzii: Ciclul Krebs este o cale oxidativ principal de degradare a substantelor organice n: CO2, H2O i energie. Este o cale comun de degradare pentru glucide, lipide si proteine, n acest fel stabilindu-se relaii metabolice importante ntre aceste categorii de substane organice. Energia eliberat din ciclul Krebs este furnizat organismului treptat, alturi de substanele utile n biosintez (dup Arini, Cristescu, 2006). Degradri fermentative ale glucidelor Degradri fermentative sunt procese de descompunere ale substantelor organice, sub actiunea unor microorganisme. Au o mare importan deoarece contribuie la circuitul elementelor in natur i stau la baza obtinerii a numeroase produse n industria alimentar i usoar. Unele procese fermentative se pot produce spontan in natur (de ex. in sol si duc la fertilizarea acestuia), iar altele sunt dirijate de om (ex. la prepararea buturilor alcoolice, a unor produse de panificatie, sau in industria laptelui etc). Dup natura principalelor substane finale obtinute prin aceste procese, avem urmtoarele tipuri de fermentaii: alcoolic, lactic, butiric, acetic, succinic i citric. Fermentatiile pot fi anerobe sau aerobe, cele mai importante fiind cele lactice si alcoolice. Fermentatia alcoolic este procesul de formare a alcoolului etilic din glucide, sub influena drojdiilor de tipul "Saccharomyces cerevisiae". Drojdiile sunt ciuperci unicelulare, ovale, care se inmultesc prin nmugurire, echipate cu complexe enzimatice foarte bogate capabile s produca reactii de hidroliz, izomerizare, decarboxilare, dehidrogenare, etc. Produii finali de fermentatie alcoolic sunt: alcoolul etilic, CO2 i energie (22kca1/mol). Mecanismul fermentatiei alcoolice este identic cu cel al glicolizei anaerobe pn in etapa formrii acidului piruvic. Acesta sufer apoi prin fermentatie o decarboxilare, in final conducand la alcoolul etilic.
Glicoliza COOH C=O fermentaie alcoolica H Alcooldehidrogenaza NADPH+H+ NADP+ C=O + CO2
Glucide
CH 3 Acetaldehida
194
Fermentatia alcoolic are anumite aplicatii practice, cum sunt urmtoarele: obinerea spirtului din cereale, cartofi, celuloz; fabricarea berii, a vinului i a altor produse alcoolice; prepararea pinii. etc. Cand concentratia de alcool care rezult este mai mare de 14% fermentatia produs de Saccharomyces cerevisiae inceteaz - deoarece la concentratii mai mari de alcool drojdiile nu se mai pot inmuli. Fermentatia lactic - este procesul de transformare a substanelor organice n acid lactic, sub aciunea bacteriilor si ciupercilor cu activitate enzimatic. Substratul inial poate fi diferit: l. Din pentoze C5 H10O5 Arabinoza sau xiloza ----------> acid lactic i acid acetic Ferment.lact CH3-CH-COOH OH acid lactic + CH3- COOH Acid acetic
2. Din hexoze
3. Din diglucide-->4 moli de acid lactic (cu hidroliz prealabila la monoglucide) C6 H12O6 Glucoza C12H22O11 Lactoza Hidroliza + HOH C6 H12O6 Galactoza Ferme nt. 4 CH3-CH-COOH OH Acid lactic
Prin fermentaie lactic se obine acid lactic sub form de amestec racemic (izomeri +,-) spre deosebire de glicoliz - unde se obtine numai acidul (+) lactic. Mecanismul fermentaiei lactice: este analog cu cel al glicolizei pn n momentul obinerii acidului piruvic. Acesta sufer o reducere sub aciunea NADPH+H+ rezultnd acidul lactic. Glucide glicoliz a
CH3 - C - COOH O
fermenta ie lactic
acid piruvic
Fermentaia lactic se oprete dac acidul lactic format depete concentraia 3%. Aplicaiile practice ale fermentatiei lactice sunt: in industria laptelui (la obtinerea iaurtului, kefirului, smntnii); la obtinerea murturilor, in industria pielriei: industria panificaiei (la obinerea pinii are loc mai nti o fermertaie alcoolic i apoi cea lactic, ce da gustul usor acru al pinii) (dup Arini, Cristescu, 2006).
195
6. Sistemele funcionale ale integrrii i nutriiei organismului vegetal Integrarea sistemului celular, schimburile celulare, permeabilitatea celular la plante.
Cuprins: 1. Nutriia minerala a plantelor 1.1. Compoziia chimic a plantelor 1.2. Compozitia elementar i sumar a plantelor 1.3. Legtura dintre compoziia chimic a scoarei terestre i a plantelor 2. Absorbia substanelor minerale 2.1. Absorbia prin rdcini 2.2. Absorbia prin frunze 2.3. Mecanismul absorbiei ionilor: absorbie pasiv, fizic, osmotic. absorbie activ, fiziologic, neosmotic sau adenoid. 2.4. Mecanismul absorbiei pasive a ionilor: difuziunea, curenii masivi de soluie, schimbul de ioni, echilibrul Donnan, adsorbia i formarea combinaiior chimice n plante. 3. Transportul activ al substanelor 3.1. Mecanismul transportului activ
6.1. NUTRIIA MINERALA A PLANTELOR Nutriia este una dintre funciile fiziologice de baz ale plantelor, constnd din aprovizionarea plantelor cu substanele necesare n procesul de asimilaie. Asimilaia cuprinde ansamblul transformrilor la care sunt supuse aceste substane pentru sintetizarea materiei organice. Nutriia plantelor se caracterizeaz printr-un schimb permanent de substane cu mediul. Substanele din mediul extern sunt ncorporate de plantele superioare prin sistemul radicular i prin frunze, iar de plantele inferioare prin toat suprafaa talului lor . Substanele nutritive absorbite din mediu pot fi minerale i organice. Plantele verzi absorb exclusive substane anorganice, din care sunt capabile s sintetizeze substane organice. Din aceast cauz plantele verzi se numesc i autotrofe. Restul plantelor, care sunt lipsite de pigmeni asimilatori, sunt heterotrofe. Ele sunt incapabile s sintetizeze substane organice din cele minerale i utilizeaz substane organice existente n mediul lor de via. Rolul nutriiei const n asigurarea unor substane constitutive (cum sunt cele ale protoplasmei) i n formarea de substane energetice, capabile s produc energia necesar pentru procesele vieii (hidrai de carbon, proteine, grsimi etc) (Trifu, Brbat, 1997) 1.1. Compoziia chimic a plantelor Compoziia chimic a plantelor este determinat de fertilitatea solului i de un numr mare de ali factori, care se afl ntr-o strns interdependen. Din aceast cauz la aceeai specie, compoziia chimic i cantitatea de materie vegetal difer de la un loc la altul sau chiar n acelai loc de la un an la altul. 196
Pentru a putea cunoate transformrile chimice ce se petrec n organismul vegetal, transformri care determin formarea, dezvoltarea i degradarea organismului, este necesar s cunoatem natura i proporia diferitelor substane care alctuiesc acest organism. Fiecare substan care intr n alctuirea organismului vegetal are o anumit constituie chimic, caracterizat n primul rand de natura i proporia diferitelor elemente chimice care o compun i, n al doilea rand, de modul de aranjare sau de legtur a atomilor n molecul. Compozitia elementar i sumar a plantelor Cunoscnd natura i proporia diferitelor substane care alctuiesc plantele, ne putem da seama de legtura ce s-a creat de-a lungul timpului ntre organismele vegetale i mediul nconjurtor; de asemenea, ne putem forma o imagine destul de clar asupra cerinelor care trebuie satisfcute n pivina unor elemente nutritive pentru ca plantele s creasc i s se dezvolte normal. Dintre elementele cunoscute n natur s-au identificat n corpul plantelor aproximativ 60. Cercetrile referitoare la compoziia elementar a plantelor au pus n eviden c n alctuirea acestora particip n primul rnd urmtoarele 12 elemente: C, H, O, N, S, P, Cl, Ca, Mg, K, Na i Fe. Dup cantitatea n care se gsesc n plante, elementele chimice se pot mpri convenional n 3 grupe: macroelemente, care se gsesc n cantitate de n.10-1-n.10-20; microelemente, de la n.10-3-n.10-50 i ultramicroelemente, de la n.10-6-n.10-120. Att macroelementele, ct i microelementele au aceeai valoare fiziologic. Lipsa sau insuficiena lor n mediul nutritive produce perturbaii care stnjenesc creterea i dezvoltarea, putnd provoca chiar i moartea plantei.
Coninutul n elemente minerale la plante (dup Epstein, 1972, Trifu, Brbat, 1997 )
Elementul Molibden Cupru Zinc Mangan Fier Bor Clor Sulf Fosfor Magneziu Calciu Potasiu Azot Oxigen Carbon Hidrogen Simbolul chimic Mo Cu Zn Mn Fe B Cl S P Mg Ca K N O C H Greutatea atomic 95,95 63,54 65,38 54,94 55,85 10,82 35,46 32,07 30,98 24,32 40,08 39,10 14,01 16,00 12,01 1,01 Concentraia din substana uscat Moli/g ppm 0,001 0,1 0,10 6 0,30 20 1,0 50 2,0 100 2,0 20 3,0 100 % 30 0,1 60 0,2 80 0,2 125 0,5 250 1,0 1000 1,5 30.000 45,0 40.000 45,0 60.000 6,0 Numrul de atomi 1 10 300 1000 2000 2000 3000 30.000 60.000 80.000 125.000 250.000 1.000.000 30.000.000 40.000.000 60.000.000 relativ
197
n prezent se consider c : din grupa macroelementelor fac parte:C, O, H, N, P, K, Ca, S, Mg, Na, Cl; in grupa microelementelor intr: Fe, Mn, B, Sr, Cu, Zn, Ba, Ti, Li, J, Br, Al, Ni, Mo, Co, Si, As, Pb, Va, Rb etc.; Din grupa ultramicroelementelor fac parte:Cs,Se,Cd,Hg,Ag,Au,Ra etc. Din analizele efectuate la un numr mare de specii de plante a reieit c n privina coninutului n elemente exist variaii destul de mari. Concentraia elementelor se poate modifica sub influena unor factori interni i externi. De exemplu, n diferite condiii de cultur concentraia fosforului n plante poate s oscileze de la 0,04% la 2,5% adic ntr-un raport de 1:62. Concentraia borului poate s oscileze ntre urmtoarele valori:10-2 la 10-30 %, Concentraia manganului de la 10-2 la 10-40 % etc. n esuturile diferitelor organe ale plantelor coninutul n cenu (reziduul mineral rezultat dup calcinarea substanelor vegetale) este variabil cu specia, condiiile de mediu, vrsta etc. Plantele lemnoase au un coninut mai ridicat dect cele ierbacee. Rdcinile plantelor sunt n general mai srace n substane minerale dect prile aeriene. De exemplu, plantele ierbacee conin o n rdcini aproximativ 5% din substana uscat, o iar frunzele 15%. o Seminele plantelor au de regul puine substane minerale, datorit substanelor de rezerv. Seminele de cereale conin 1,15-3%; tuberculii de cartof 2-6%. Analiza chimic a cenuii arat c ea conine peste 60 de elemente, dintre care numeroi anioni i cationi. Anionii cei mai importani din cenu sunt:HPO42-, SO42-, Cl-, SiO42-. Cationii cei mai importani sunt: K+, Ca2+, Mg2+, Fe2+, Mn2+, Cu2+, Zn2+, Na+, Al3+ i B3+. n celulele vii ale plantelor raportul dintre anioni i cationi rmne aproape constant, indiferent de condiiile externe sau de ngrmintele aplicate. Componentele minerale ale cenuii au fie caracter bazic (K2O, Na2O, CaO,MgO, Fe2O3), fie caracter acid (CO3, SO3, P2O5, SiO2, Cl). Elementele bazice n esutul vegetal se gsesc fie sub form de o sruri ale acizilor minerali (cloruri, fosfai, sulfai, etc), o fie sub form de sruri ce hidrolizeaz bazic ale acizilor organici (citrai, malai, oxalai, tartrai etc). o Aceste sruri, prin incinerare, se transform n carbonai. o Datorit prezenei carbonailor i fosfailor ce hidrolizeaz bazic, cenua are un caracter alcalin, titrabil, care este cu att mai pronunat cu ct este mai bogat n carbonai. o La rndul su cantitatea de carbonai n cenu depinde de componentele acide pe care le conine esutul vegetal, cu ct acestea sunt n proporie mai mare, cu att cantitatea de carbonai n cenu este mai mic.
198
Compoziia chimic mediu sumar a celor mai importante familii de produse vegetale agricole (Ionescu, 1970, Trifu, Brbat, 1997) Natura produsului vegetal Compoziia medie % Ap Materie Substane Substane uscat organice minerale volatile (cenu) Seminele oleaginoaselor 7,8 92,2 87,2 5,0 Seminele leguminoaselor 12,8 87,2 84,5 2,7 Seminele cerealelor 13,3 86,7 84,8 1,9 Paie 14,5 85,5 80,6 4,9 Fn 16,0 84,0 77,8 6,2 Nutreuri verzi 81,3 18,7 17,5 1,2 Rdcini, tuberculi, bulbi 82,3 17,7 16,8 0,9 Fructe zemoase cu smburi 84,1 15,9 15,43 0,47 Indiferent de specie, o serie de elemente se gsesc n toate speciile vegetale, fiind totodat i dominante. Aceste elemente, care iau parte n cea mai mare msur la constituirea esuturilor vegetale se mai numesc i eseniale sau plastice, ele sunt n numr de 12, i anume: Elemente plastice eseniale: Carbon............................45,0% Oxigen ...........................42,0% Hidrogen ..........................6,5% Azot ..............................0,2-5,0% Fosfor............................0,2-1,7% Potasiu...........................0,2-5,0% Elemente plastice secundare Sulf.....................................0,3-1,9% Magneziu ...........................0,1-0,9% Calciu..................................0,1-7,6% Fier....................................0,01-0,5% Clor..................................0,001-0,7% Sodiu..................................0,01-1,2% Acestea reprezint n medie 99,95% din totalul organismelor vegetale verzi. Carbonul, oxigenul i hidrogenul sunt gsii de plante n mediul nconjurtor n cantiti ndestultoare i nu se folosesc ca ngrminte. O remarc special poate fi fcut pentru carbon, care se utilizeaz uneori n sere (CO2), pentru mbogirea atmosferei n vederea intensificrii fotosintezei. Azotul, fosforul i potasiul sunt utilizai cel mai frecvent ca ngrminte, numinduse din aceast cauz i elemente fertilizante de baz sau elemente plastice primare. Elementele: sulf, magneziu, calciu, fier, clor i sodiu de regul sunt gsite de ctre plante n cantiti suficiente n mediul nconjurtor i nu sunt utilizate aa de frecvent ca ngrminte. Ele se numesc din aceast cauz elemente fertilizante secundare sau elemente plastice secundare. Celelalte elemente ale organismului vegetal viu microelementele coninutul crora reprezint doar 0,05% din totalul substanelor minerale, cuprind unele 199
microelemente cu rol esenial i anume: Mangan ................ 17-14.000 ppm Bor ........................13 400 ppm Zinc..........................6 230 ppm Cupru........................4 630 ppm Molibden .............0,03 130 ppm Silicium ...............0,01 1000 ppm esuturile plantelor mai conin i alte microelemente utile fr a fi socotite absolut necesare, ca : aluminiu, bariu, beriliu, bismut, cobalt, fluor, iod, nichel, cadmiu, stroniu, rubidiniu, staniu, vanadiu, zirconiu i altele. Concentraia microelementelor i a ultramicroelementelor din esuturile plantelor variaz n dependen de o specie, o vrsta, o condiiile pedoclimatice, o temperatura, o pH etc. Macroelementele i microelementele formeaz mpreun elementele biogene. n organismul vegetal viu elementele plastice se gsesc sub form de diferite combinaii, ca: apa; cateva sruri minerale, i anume: cloruri, sulfai, azotai i fosfai de calciu, sodiu i magneziu; substane organice plastice, cum sunt glucidele, lipidele i proteinele; substane organice active: enzimele, vitaminele, hormonii, pigmenii i altele; produsele intermediare i finale de metabolism: alcaloizii, glicosizii, taninurile, antibioticele etc. (Trifu, Brbat, 1997). Apa. Toate organismele vii au nevoie de ap. Aceasta ndeplinete diferite funciuni, pentru c viaa nu este posibil n absena apei. Dac supunem la aciunea cldurii moderate (105oC) un esut vegetal, constatm c el pierde o parte din greutatea sa din cauza evaporrii apei ce o conine, ceea ce a rmas dup nclzire formeaz substana uscat. n organismul plantelor apa se gasete fie sub form liber, fie sub form legat (de constituie), adic ncorporat n elementele constitutive celulare, n esuturi, fie ca apa absorbit, care asigura starea coloidal a materiei vii protoplasmatice. Apa este un reglator al temperaturii esuturilor vegetale vii. Ea le apr mpotriva frigului, a scderii de temperatur a medilui extern, apr plantele i fa de cldurile xcesive ale aerului. Transpiraia plantei prin frunze, ca i pierderea de ap prin vaporizare necesit o cantitate mare de cldur, motiv pentru care se realizeaz prin aceasta o reglare termic. Coninutul n ap al plantelor variaz n dependen de specie, vrst i anume, pe msur ce plantele mbtrnesc, coninutul lor n ap scade. Coninutul n ap la plante, precum i dinamica sa variaz n funcie de esut, organ, specie i condiiile pedoclimatice.
200
Aa de exemplu, frunzele plantelor ierbacee conin 90-94% ap, fructele zemoase conin 85-95%, iar seminele de graminee 13-15%, seminele oleaginoaselor 7-9%, iar organele de rezerv (tuberculii) 70-80%, lemnul i prile lignificate 30-35%. Apa ndeplinete i rol chimic n procesele de hidratare, hidroliz, oxido-reducere i sintez. De asemenea, apa permite meninerea unei presiuni osmotice aproape constante, creaz un mediu favorabil activitii enzimelor, asigur condiii pentru transportul substanelor nutritive din sol i a celor sintetizate de plante n diferite esuturi.
Din aceasta cauz apa constituie un factor important de legtur ntre organism i mediu.(Trifu, Brbat, 1997).
1.2. Legtura dintre compoziia chimic a scoarei terestre i a plantelor Substratul cel mai important de aprovizionare a plantelor cu elemente nutritive l constituie solul. Nu este ntmpltor faptul c ntre compoziia chimic a solului i cea a plantelor exist o foarte mare apropiere. Compoziia chimic a plantelor este rezultatul unui lung proces de evoluie, n care elementele minerale au avut o nsemntate foarte mare. Imposibilitatea creterii plantelor din cauza lipsei unui element este o dovad convingtoare c n filogenez acest element a devenit o condiie necesar activitii normale a organismului vegetal. De aici rezult c elementele ce se gsesc n plante sunt rezultatul atragerii n circuitul biologic a acestora, cu un rol bine conturat. Elementele dominante ale scoarei terestre n litosfer sunt urmtoarele 15: oxigen, siliciu, aluminiu, fier, calciu, sodiu, potasiu, magneziu, mangan, sulf, hidrogen, titan, carbon, clor i fosfor, reprezentnd 99,42% din totalul elementelor din plantele verzi. Elementele chimice care intr n alctuirea materiei vii la plante nu se acumuleaz la ntmplare. Astfel, diferite specii de plante cultivate pe acelai sol absorb i acumuleaz cantiti diferite de elemente nutritive, ceea ce arat c plantele au posibilitatea s le absoarb n mod selectiv pe acele elemente care corespund cel mai bine cu cerinele fiecruia. Aceast unitate dintre organismele vegetale i mediul n care s-au format constituie un principiu de baz n reglarea condiiilor de nutriie prin aplicarea de ngrminte. n organismul plantei fiecare element al nutriiei i manifest eficiena deplin numai n prezena tuturor celorlalte elemente cu care particip n reaciile metabolismului.
201
6.2. ABSORBIA SUBSTANELOR MINERALE Substanele minerale sunt absorbite de ctre plantele superioare predominant prin sistemul radicular, organul specializat n ndeplinirea acestei funcii i ntr-o oarecare msura prin frunze.La plantele acvatice, submerse, absorbia se realizeaz prin toat suprafaa lor, care vine n contact cu apa, aceasta avnd un rol asemntor cu cel al unei soluii nutritive, iar plantele inferioare prin toat suprafaa talului. 2.1. Absorbia srurilor minerale prin rdcini Cercetrile efectuate de Trubetkova (1972) cu porumb cultivat pe soluii nutritive de diferite concentraii au dus la constatarea c dup tierea prilor aeriene ale plantelor lichidul de lcrimare colectat are o concentraie mai mare dect cea a soluiei nutritive. Factorul de concentraie (raportul dintre concentraia lichidului de lcrimare i concentraia soluiei nutritive) este mai mare n cazul cnd presiunea osmotic a soluiei externe este i ea mai mare. Studiind n paralel cu variabilitatea acestui factor de concentratie i viteza curentului de ap prin sistemul radicular, a ajuns la concluzia c aceste dou procese se desfoara independent. Cele mai multe studii privind absorbia srurilor minerale s-au efectuat pe rdcini izolate (mai ales de orz i gru) i pe segmente din tuberculii de cartof i pe rdcinile tuberizate de morcov. Cercetrile ntreprinse de ctre Steward i colab (1942, 1959), Potapov (1956), Sutcliffe (1962) i alii au artat c absorbia srurilor minerale se caracterizeaz prin acumularea acestora n sucul celular, ntr-o concetraie care depete cu mult concentraia din mediu extern i c n procesul de acumulare a srurilor minerale plantele manifest o selectivitate, adic unii ioni sunt preferai fa de alii (de exemplu, ionii de K+ sunt preferai fa de cei de Na+) (Trifu, Brbat, 1997). n legtur cu stabilirea zonei active de absorbie a rdcinilor date importante aduc cercetrile lui Kolosov (1935), Kramer (1956), Clarkson i Hansom (1980) i alii. Concluziile care s-au desprins din aceste cercetri arat c absorbia intens are loc la nivelul poriunii rdcinii care se afl n cretere. n zonele de cretere ale rdcinii celulele nu sunt nc suberificate i sunt uor penetrabile att pentru curentul de ap, ct i pentru ioni. 2.2. Absorbia prin frunze Plantele acvatice absorb o mare parte a srurilor minerale prin frunzele lor. Plantele terestre pot i ele s absoarb sruri minerale, din soluii diluate, pe aceast cale. Aceste cunostine au pus bazele unei tehnici agricole i horticole, care const n administrarea extraradicular, prin stropiri, a unor ngrminte. O parte a substanelor minerale absorbite prin frunze este asimilat n esuturile acestora, iar o alt parte (mai mic) este vehiculat spre rdcini, unde este inclus n diferite procese ale metabolismului. S-a observat c frunzele tinere absorb srurile minerale mai intens dect cele btrne. Cationii K+, Ca2+ i Mg2+ sunt absorbii de frunze mai uor dect anionii PO3-4 i SO2-4. Se consider c ionii ptrund n frunze prin cuticula celulelor epidermice, pe cale activ i prin schimb de ioni i c prin osteolele stomatelor ptrund n msur mai mic (Epstein, 1972; Clarkson, 1974). Folosirea pe scar tot mai larg a insecticidelor, erbicidelor i fungicidelor a sugerat administrarea combinat a acestora cu ngraamintele, pe cale extraradicular. Absorbia prin frunze a srurilor minerale depinde de forma, suprafaa i modul de
202
aezare a frunzelor. S-a constatat c frunzele monocotiledonatelor absorb mai greu srurile minerale dect frunzele plantelor dicotiledonate. ngrmintele minerale (macroelementele) administrate pe cale extraradicular pot fi absorbite cu uurin de plante pn la concentraia de 1,5 la mie. Macroelementele se recomand a fi aplicate n concentraii mai mici (0,001-0,0005%). Rezultatele bune n cazul administrrii ngrmintelor pe cale extraradicular au fost obinute la gru, porumb, orz, sfecl de zahr, tomate, vi-de-vie etc, realizndu-se sporuri de producie (Trifu, Brbat, 1997) 2.3. Mecanismul absorbiei ionilor: absorbie pasiv, fizic, osmotic. absorbie activ, fiziologic, neosmotic sau adenoid. Schimbul de substane minerale ntre mediul extern i protoplast are loc pe dou planuri experimental depistabile, fiecare cu mecanisme, randamente i repercursiuni metabolice particulare. 1. Primul plan este pur fizic. El este condiionat de permeabilitatea plasmei celulare, a membranelor plasmatice i este dominat de legile fizice ale osmozei. Ptrunderea sau ieirea substanelor este decis de gradienii de concentraie, n echilibrarea crora protoplastul se comport pasiv. 2. Al doilea plan este fiziologic. La numeroase teste s-a constatat c substanele nutritive se pot acumula n celule i mpotriva legii osmotice a concentraiei. n aceste procese materia vie cheltuiete energia rezultat din respiraie i particip deci n mod activ, prin metabolismul su, la aprovizionarea sa cu substane nutrive provenite din mediul extern. Aceast variant de absorbie este denumit absorbie activ, fiziologic, neosmotic sau adenoid. Unii cercettori consider c absorbia fizic are importan secundar, iar cea activ importan de prim ordin. n realitate, cele dou modaliti care asigur absorbia interfereaz simultan (Trifu, Brbat, 1997) 2.4. Mecanismul absorbiei pasive a ionilor n absorbia pasiv a ionilor particip o serie de procese fizice: a. difuziunea, b. curenii masivi de soluie, c. schimbul de ioni, d. echilibrul Donnan, e. adsorbia i f. formarea combinaiior chimice n plante. a) Difuziunea. Dup legea lui Fick, relaia dintre difuziune i diferii factori care au influen asupra acestui proces se exprim prin formula: Dm = DA(dc/dx)dt n care: dm este cantitatea de substan care difuzeaz (exprimat n g), dt reprezint timpul (exprimat n secunde), dc/dx este gradientul de concentraie (scderea concentraiei pe unitatea distanei, exprimat n g/cm3), A este aria seciunii transversale prin care se face difuziunea (ex.in cm2), D este coeficientul de difuziune (considerat un spaiu raportat la timp i exprimat n cm2/secund). Coeficientul de difuziune depinde de natura solventului i a substanei dizolvate. Asupra coeficientului de difuziune-D, temperatura i gradientul de concentraie au influen n msur foarte redus. Semnul pus in faa lui D este convenional i arat c difuziunea are loc de la o concentraie mai mare spre o concentraie mai mic, adic n sensul gradientului de concentraie. 203
Coeficientul de temperatur al difuziunii (Q10) este pentru soluiile apoase de aproximativ 1,2. Legea lui Fick este valabil n msur egal att pentru particulele solventului, ct i pentru particulele dizolvate. Srurile n soluie apoas sunt caracterizate printr-un singur coeficient de difuziune, chiar dac se disociaz n doi sau mai muli ioni. n condiii de experimentare cu teste biologice, la care difuziunea substanelor are loc prin membrane lipidice cu permeabilitate redus, legea lui Fick este valabil cu aproximaie. n acest caz, particulele care difuzeaz au nevoie de energie cinetic pentru a nvinge barierele de potenial electric n trecerea lor din soluie n membran, la trecerea particulei prin membran i la ptrunderea ei din membran n soluia intern. Conform concepiei actuale, particula oscileaz n permanen n jurul poziiei mediene i poate s treac ntr-o poziie nou numai dup ce acumuleaz energie de activitate din ciocnirile sale cu particulele vecine. n acest caz, difuziunea are un coeficient de temperatur mai ridicat (Q10=2-3) i astfel mai multe particule pot s-i procure energia pentru difuziune. Difuziunea poate fi nlesnit de prezena n membrana celular a unor substane cu care particula poate reaciona reversibil, formnd compleci solubili. Acest mod de difuziune poart denumirea de difuziune facilitat (nlesnit). Difuziunea facilitat se aseamn, ntr-o oarecare msur, cu transportul activ, deoarece i ea se caracterizeaz prin efectul de saturaie, concuren ntre particule i specificitate. Deosebirea dintre difuziunea facilitat i transportul activ const n faptul c circulaia ionilor n procesul de difuziune facilitat are loc ntotdeauna n sensul gradientului de concentraie (de la o concentraie mai mare spre o concentraie mai mic), iar energia rezultat din procesele metabolice nu este utilizat. Datorit micrii lor ntmpltoare, numarul de moleculele individuale ale unei substane dizolvate este mai mare ntr-o regiune dect n alta adiacent, moleculele se vor mica n ambele sensuri, dar exist o tendin evident a substanei de a difuza din regiunea cu concentraia mai mare spre regiunea cu concentraie mai sczut. b) Curenii masivi de soluie (fluxul de soluie). ntr-o soluie n care concentraia unei substane difer de la o regiune la alta, va exista micare net (flux) a particulelor solvitului din regiunile cu concentraia mai mare spre regiunie cu concentraie mai mic, deoarece numrul de molecule pe secund care prsesc regiunile cu concentraie mai ridicat este mai mare dect acela al moleculelor care intr n aceast regiune. Un exemplu de cureni care se realizeaz astfel, este electroosmoza. c) Schimbul de ioni. Absorbia care se realizeaz la nivelul membranelor plasmatice depinde de natura ionilor i moleculelor, precum i de proprietile membranei. Dac se separ cu o membran permeabil pentru ambii ioni, apa distilat de soluia disociat a unor sruri (M+A-) difuziunea are loc pn ce concentraia ionilor pe ambele pri ale membranei va fi aceeai (fig.A), iar dac membrana este impermeabil pentru aceti ioni, difuziunea nu are loc (fig.B). n cazul cnd dou soluii conin sruri diferite (M+1A-1 i M+2A-2 ) i sunt desprite printr-o membran care este selectiv permeabil, o cation permeabil (anion impermeabil) ca in fig.C, sau o cation impermeabil (anion permeabil) ca in fig.D, o n primul caz cationii i n al doilea anionii traverseaz membrana prin schimb cu ali ioni de sarcin asemntoare. o Echilibrul apare dup ce M+1 / M+2 pentru primul caz i A-1 / A-2 pentru al doilea caz vor deveni egale pe ambele laturi ale membranei.
204
o n caz de echilibru schimbul de ioni nu se ntrerupe. n astfel de situaii vor trece cantitile relativ egale de cationi, respectiv anioni n fiecare sens, raportul meninndu-se ns constant. o n schimbul de ioni are loc un schimb egal de sarcini. De exemplu, doi ioni monovaleni se schimb cu un ion bivalent sau trei ioni monovaleni cu un ion trivalent s.a.m.d.
H2O Soluie salin Soluie salin Soluie salin Soluie salin Soluie salin
M1+ A1 -
M2 + A2 -
M1
M2 +
X+
A1 -
A2 -
C A
H2O
Soluie salin Soluie salin Soluie salin Soluie salin Soluie salin
M1
M2
M1
M2 +
Y
-
A2 A1 A2 -
Schimbul de ioni prin membran (dup Sutcliffe citat de Trifu i Brbat, 1997) d) Echilibrul Donnan. Sistemul schimbului de ioni se complic i mai mult n cazul cnd membrana despritoare este permeabil pentru ionii soluiei dintr-o parte a sistemului, iar soluia din partea opus conine i ioni pentru care membrana este impermeabil. ntr-un astfel de sistem se formeaz un echilibru, numit echilibru Donnan sau echilibru de membran, n care concentraia ionilor ntr-o parte a membranei va fi mai mare, fiind compensat de ionul care nu difuzeaz. Fig. E reprezint cazul cnd concentraia iniial a anionilor (A-1 i A-2) este egal, n schimb concentraia cationilor din partea dreapt a sistemului (M+2) este mai sczut dect aceea din partea opus, fiind compensat de cationul imobil (X+). n cazul c sistemul conine anioni imobili (Y-), ca n fig. F, echilibrul sistemului dup difuziune va fi: [A-1] > [A-2] i [M+1] < [M+2]. n cazul c sistemul conine ioni bivaleni, trivaleni etc, ei se rspndesc conform 205
regulii descrise, ns trebuie s avem n vedere numrul de sarcini electrice pe care le posed fiecare ion. n acest caz echilibrul sistemului va fi: [ [ M1+] : [M2+] ]1/x = [ [A2 y -] : [A1 y -] ]1/y unde x este valena cationului mobil, iar y valena anionului mobil. De aici rezult c ionii bivaleni, trivaleni i polivaleni se acumuleaz n sistemul Donnan n msur mai mare dect ionii monovaleni. n celula vie echilibrul Donnan se realizeaz datorit prezenei ionilor coloidali imobili, care nu pot difuza i care atrag ionii mobili cu sarcin contrar. Astfel, numrul ionilor va fi diferit pe cele dou pri ale sistemului, iar diferena de concentraie va crea un potenial electric care are rol important n transferul prin adsorbie a srurilor minerale prin membranele plasmatice. La un pH > 4 ncrctura general a membranelor i a protoplastului celulelor vegetale este negativ. Din aceast cauz celulele vegetale se comport ca i sistemele Donnan, care conine anioni nedifuzabili. e) Adsorbia. Procesul de nutriie a celulelor n parte sau a sistemlui radicular n ntregime ncepe prin acumularea substanelor nutritive lng suprafaa fiziologic activ i se realizeaz prin dou mecanisme: prin deplasarea activ a organului de adsorbie n substrat i prin procese fizico-chimice de adsorbie, care determin direcia difuziunii. Acumularea substanelor dizolvate la interfee poart denumirea de adsorbie. Esena fizico-chimic a procesului de adsorbie const n legarea pe suprafaa de separare a mediilor a unor substane, reinute n cazul ionilor prin fore de atracie electrostatic. Anionii i cationii pot fi adsorbii din soluii apoase pe suprafaa organitelor celulare, pe celuloz i proteine. Adsorbia poate fi mecanic i polar. Ambele tipuri de adsorbie se realizeaz sub aciunea forelor electrice de pe suprafaa adsorbant, ns difer natura legturilor. Adsorbia mecanic se realizeaz prin valene slabe, reziduale i secundare. De aceea substanele adsorbite pe aceast cale sunt detaabile de pe suprafaa adsorbantului prin splare cu ap. Adsorbia polar depinde de formarea de sruri. Acestea se pot forma ntre un cation i o grupare carboxilic a unei molecule organice: K+ + R-COO- R COOK sau ntre un anion i o grupare bazic a unei molecule : Cl- + R NH+3 R NH3 Cl. n cazul adsorbiei polare are loc i un schimb de ioni: K+ + R - COOHR COOK + H+ f) Formarea combinaiilor chimice. n regnul vegetal exist o varietate destul de mare de combinaii complexe. n funcie de condiiile de formare i de natura liganzilor, un ion metalic dat poate forma combinaii complexe de diferite tipuri, procesul asemnndu-se ntr-o msur destul de mare cu fenomenul de adsorbie polar. Acest mod de adsorbie poart i denumirea de chemosorbie (chimiosorbie). n acest proces au un rol important chelaii, care sunt cationii bi- i trivaleni. n acest mecanism de chelatare cationul formeaz complexe nedisociabile cu molecula organic, prin legaturi coordinate. Un exemplu de complex de chelatare l reprezint acidul etilen-diaminotetraacetic EDTA. n celula vegetal chelaii se formeaz cu molecule de acid citric, piridoxal, acizi nucleici i proteine. COOH HOOC Legturi chimice labile se realizeaz i cu enzimele din celule. | | Cationii i anionii sunt prini n complexe mai labile CH2 CH2 cu enzime i cu metabolii intermediari. Combinaiile | | chimice formate n plante pot interveni n absorbia N CH2 CH2 N srurilor prin crearea i meninerea unui gradient de | | concentraie, de-a lungul cruia ionii se pot deplasa prin ++ CH2 Ca CH2 difuziune. Acest mecanism de adsorbie se aseamn ntr-o | | msur oarecare cu procesul de difuziune facilitat. COO OOC Exist i deosebiri, n sensul c formarea compuilor compleci necesit prezena energiei rezultate n procesele metabolice. Structura moleculei de etilendiamintetraacetat (EDTA) 206
Microelementele pot forma chelai (combinaii complexe) de trinicie diferit. Au fost preparai numeroi chelai sintetici, la care se cunoate trinicia cu care sunt legate metalele de partea organic. Aceste substane au importan mare n agricultur, deoarece n cazul lipsei sau insuficienei unui microelement n sol, chelaii sintetici pot satisface necesitile plantelor. Frecvent sunt utilizai chelaii care conin fier (Fe-EDTA), mai ales pe solurile bogate n calciu. n practica agricol mai sunt utilizai urmtorii chelai: Zn-EDTA, Mn-EDTa, Mo-EDTA, Na2-EDTA, FeH-EDTA etc. Participarea microelementelor la formarea chelailor (dup I.V. Peive 1961, citat de Trifu i Brbat, 1997) Cuchelai foarte trainici (tari) Ni Co, Zn Cd Fe Mn...chelai puin trainici (slabi) 6.3. TRANSPORTUL ACTIV AL SUBSTANELOR Pentru a explica transportul activ al substanelor, majoritatea modelelor se bazeaz pe supoziia c transportatorii substratului cunt componeni specifici ai membranei, proteine sau lipoproteide. Transportorul se leag de molecula substratului ntr-un compartiement oarecare al celulei, iar apoi prin difuziune sau prin schimbri de conformaie transport molecula substratului prin membran. n sistemele de transport pasiv, aciunea transportorului este reversibil i deci transportul moleculelor dizolvate se poate efectua n ambele sensuri (spre interior i spre exterior) n dependen de concentraia relativ a substratului n cele dou compartimente ale celulei. n modelele sistemuluii de transport activ se consider c pentru realizarea transportului dirijat mpotriva gradientului de concentraie, molecula transportorului sau substratul su necesit o activare prealabil. Aceast activare este necesar, deoarece n cazul ntreruperii sursei de energie unele sisteme de transport activ pot funciona ca sisteme pasive. Se presupune c aceste sisteme conin doi sau mai muli componeni. Funcia primului component const n legarea i transportul reversibil al substratului n orice direcie, al doilea component fiind necesar pentru unirea moleculei transportorului de sursa de energie, de exemplu de ATP, astfel c procesul activ se petrece numai ntr-o singur direcie. S
A 4 1 Soluie extern
S 2 S
Soluie intern
S B 4 Soluie extern S 1 2 S
3 S
Soluie intern Transportul activ al ionilor cu participarea transportorilor (dup Libbert citat de Trifu i Brbat,1997)
207
A.Transportul cu ajutorul transportorilor micromolecularisolubili n grsimi-i a proteinelor plasmatice(reprezentate prin cercuri)cuprinde etapele: 1- legarea substratului (S) cu transportorul, proces catalizat de proteinele din membran, 2- transportul complexului liposolubil format de transportor i substrat prin membran ,pe calea difuziei, 3- eliberarea substratului, 4- rentorcerea transportorului pe calea difuziei. B. Transportul cu ajutorul proteinelor transportoare cuprinde etapele: 1- legarea substratului cu proteina transportoare, 2- transferul substratului de ctre proteina transportor, 3- eliberarea substratului, 4- rentorcerea proteinei transportor la poziia conformaional iniial. Mecanismul transportului activ M1 M2 Atunci cnd mecanismul de migrare a ionilor prin membrana plasmatic depinde direct de energia, X X1 care este eliminat n procesul de metabolism, spunem c ionii sunt absorbii activ. Majoritatea ipotezelor care au fost formulate pentru explicarea I IX IX I absorbiei active presupune legarea reversibil a ionilor cu componenii membranei, care acioneaz ca nite transportori. Transportul activ se realizeaz cu ajutorul unor substane numite transportori de ioni Reprezentarea schematic a sau purttori. n concepia modern a transportorilor, transportului activ de ioni (dup ionul (I) situat la suprafaa extern a membranei plasmatice (M1) intr n reacie cu transportorul (X), Sutcliffe, Trifu i Brbat). formnd complexul transportor-ion (IX). Aceast reacie poate cuprinde: adsorbia, adsorbia de schimb sau diferite tipuri de reacii chimice. Transportorul sau complexul pe care l formeaz (transportor-ion, IX) nu poate iei n mediu. Acest complex este foarte mobil n membran, micndu-se de la suprafaa extern (M1) i pn la cea intern (M2) a acesteia. Ajungnd la suprafaa intern a citomembranei, complexul transportor-ion se descompune, elibernd ionul n interiorul celulei i se formeaz precursorul transportului (X1). Acest precursor nu poate prsi membrana i nici s lege un alt ion. Precursorul transportorului va fi vehiculat napoi pe partea extern a membranei, unde se transform din nou n transportor (X), care la nivelul (M1) poate forma un nou complex, cu un alt ion i transportul se repet. Astfel un numr limitat de transportori pot vehicula un numr nelimitat de ioni. Transportul activ eficient presupune prezena unei membrane plasmatice greu permeabile, deoarece altfel ionii transportai prin acest mecanism ar difuza contra gradientului de concentraie creat i ar mpiedica procesul de acumulare. Metabolismul poate fi implicat n acest transport prin sinteza moleculelor de transportori, formarea complexului transportor-ion, migrarea acestui complex prin membran, descompunerea complexului pe faa intern a citomembranei i migrarea transportorului liber napoi pe suprafaa extern a citomembranei. Pentru a explica mecanismul micrii complexului s-a presupus c transportorul i ionul formeaz un complex liposolubil, care poate difuza printr-o membran lipoproteic de-a lungul gradientului de concentraie. Se presupune c transportorul poate s se roteasc ntr-un sens n membrn i astfel transport ionul legat de pe o parte pe cealalt a citomembranei. Transportorul poate fi i o substan, care alunec de-a lungul porilor umplui cu ap ai membranelor. Astfel de substane pot fi fosfatide, constituieni ai membranelor plasmatice.
208
n toate cazurile cnd analizm modul de transport al substanelor prin membrane este necesar s avem n vedere proprietile fizico-chimice i structura acestora. Grosimea membranei la celulele din sistemul radicular este de 60-100 . Aceste dimensiuni sunt foarte mari n comparaie cu dimensiunea moleculelor de proteine globulare (25-30 ) sau a moleculei de glucoz (5-6 ) (Trifu i Brbat, 1997). n concepia modern se consider c transportorii pot s efectueze transportul moleculelor de substrat la distane destul de mari. Pentru a explica acest mecanism dispunem de cteva argumente destul de convingtoare: 1. Proteina-transportoare, mpreun cu molecula substratului pot s treac de pe latura extern a membranei plasmatice pe cea intern, ca urmare a difuziei fizice. 2. n caz c rolul de transportor este ndeplinit de o molecul mare (diametrul creia este aproximativ egal cu grosimea membranei), este suficient ca aceast molecul s se roteasc n membran. 3. Transportorii de natur proteic pot suferi modificri de conformaie de o amplitudine destul de mare, care permit transportul substratului prin membran . 4. Moleculele transportorilor sunt dispuse n centrul petelor foarte subiri ale membranei . 5. Transportorii pot s-i modifice conformaia n aa fel nct s se deschid porul central prin care s ptrund substratul n interior. 6. n prezent se consider c n transportul ionilor particip dou sisteme de adsorbie: sistemul I i sistemul II. Transportorii sistemului I sunt localizai n plasmalen. n privina localizrii sistemului II, Epstein (1969) susine c ambele sisteme sunt localizate n plasmalen (teoria localizrii paralele a sitemelor de adsorbie). Laties (1969) menioneaz c sistemul II este localizat n tonoplast. Date experimentale, atest c n acele cazuri cnd mediul nutritiv conine sruri n concentraie mic, adsorbia lor este controlat de sistemul I i deci plasmalema ndeplinete rolul principal de barier a permeabilitii, adsorbia fiind dependent de metabolismul celulei, efectundu-de cu consum de energie. Dac mediul nutritiv conine sruri n concentraie mare, n adsorbia i vehicularea ionilor particip ambele sisteme. n privina mecanismului de acionare a sistemului II, majoritatea cercettorilor consider c aceasta poate funciona i n lipsa energiei furnizat de procesele metabolice din celule (Trifu, Brbat, 1997). Transportul anionilor n limita concentraiilor n care funcioneaz sistemul I este ntotdeauna cuplat cu metabolismul celular, rolul de transportor fiind ndeplinit de pompele de ioni. Se consider c funcia de transportor poate fi ndeplinit de molecule de antibioticeionofori apropiate din punct de vedere chimic (monactina, valinomicina etc.), capabile s transporte ionii n sensul determinat de gradientul potenialului electrochimic. Ionii de mrime diferit pot ptrunde n celulele plantelor i datorit unor defecte ivite n structura membranelor celulare, formarea unor orificii de diferite mrimi. Formarea orificiilor depinde de sinteza i viteza de rennoire a unor structuri dinamice, de exemplu a plasmalemei, procese dependente de intensitatea metabolismului celular (Trifu, Brbat, 1997) PINOCITOZA Concomitent cu particulele solide n celulele vii ptrund din exterior i picturi de lichide, fenomen, observat pentru prima dat de ctre Lewis (1931), la culturile de esuturi i care a primit denumirea de pinocitoz (Trifu, Brbat, 1997). Din cercetrile de microscopie clasic i electronic s-a constatat c la un moment dat plasmalema celulei se invaginez spre citoplasm, formnd o cup, care ia un aspect tubular, n interiorul creia se gsete lichidul mediului extern. Din captul acestor cratere tubulare se separ mici poriuni, sub form de vezicule, care trec n citoplasm.
209
Chapman-Andergen (1955), efectund experiene pe diferite tipuri de celule, a observat ptrunderea soluiilor de proteine n interiorul celulei prin pinocitoz. O dat cu soluia de proteine celulele de amoeb nglobeaz n ele i alte substane. De exemplu, 14Cglucoza ptrunde cu mult uurin n interiorul celulei. Pinocitoza, la fel i fagocitoza, sunt procese active, deoarece pentru nfptuirea lor celulele consuma energie. S-a constatat c n urma adausului de ATP n culturile de celule se stimuleaz endocitatea (pinocitoza, fagocitoza), inhibitorii proceselor metabolice avnd o aciune inhibant asupra endocitozei. Aceast modalitate de transport este lipsit de specificitate, ntruct celulele nglobeaz n ele substanele adsorbite pe suprafaa lor, indiferent de natura acestora. Pinocitatea nu exclude transportul activ, ci mai degrab concur la realizarea acestuia. Datorit pinocitozei, celulele i mresc suprafaa intern a membranelor, ceea ce mrete efectivitatea transportului pasiv i realizarea transportului activ. Cercetri recente, efectuate cu izotopi radioactivi, demonstreaz c prin plasmalem pot ptrunde n interiorul celulei, prin intermediul procesului de pinocitoza, molecule sau ioni care au un diametru de 0,3-0,4 mm. Romanenko i colab (1988) pun n eviden influena favorabil a dimetilsulfoxidului, n concentraie de 5 mg/l, asupra adsorbiei macromoleculelor prin procesul de pinocitoza observat n zona perilor adsorbani ai plantelor de gru (Trifu i Brbat, 1997). PORII DIN MEMBRANELE CELULARE n prezent putem afirma cu certitudine c mecanismul molecular care particip n transportul ionilor este localizat n interiorul membranelor celulare. Membrana celulei const din cteva straturi alternative de lipide i proteine. n stratul de lipide moleculele lungi i subiri sunt aezate foarte strns unele lng altele, cu axele lor lungi dispuse paralel i orientate perpendicular fa de membran. Stratul de lipide este bimolecular, terminaiile nepolare ale moleculelor de lipide sunt opuse. Structura membranei, dup Frey-Wyssling i colab. (1964), De Robertis (1973) const dintr-un strat bimolecular de proteine. Straturile de proteine sunt legate de lipide de extremitaile lor polare. Lipidele sunt hidrofobe i apa sau substanele solubile n ap nu pot s ptrund ntr-o regiune n care stratul de lipide este compact. Cu ajutorul izotopilor radioactivi s-a demonstrat c ptrunderea ionilor n celul nu este nsoit ntotdeauna de fenomene osmotice. n legatur cu aceast observaie a aprut presupunerea existenei n membran a unor pori ncrcai electric, datorit cruia poate avea loc schimbul de ioni (Chang i Wilson, 1987). Ionii difuzeaz destul de rapid prin aceti pori. Membrana este de aproximativ 100 de ori mai permeabil fa de K+ dect fa de Na+. Aceast diferen reprezint un argument pe baza cruia s-a calculat diametrul porilor, evaluat la circa 3 Angstromi, cifr intermediar ntre diametrele hidratate ale ionului de K+ (2,2 ) i de Na+ (3,4 ). Un por este considerat un spaiu ntre patru subuniti vecine de proteine, care formeaz un canal hidrofil ce strbate membrana. Canalele ionice pentru Na+ i K+ sunt reprezentate att n stare polarizat (stare de repaus), ct i n stare depolarizat(prin dezvoltarea potenialului de aciune). Se presupune c n membrana polarizat (n repaus), canalele pentru Na+ i K+ sunt nchise, iar selectivitatea porilor pentru ionii de Na+ este o urmare a prezenei gruprilor carboxilice (C-) care pzesc intrarea n canal (sarcini de fixare), selectivitatea porilor pentru K+ fiind asigurat de sarcinile negative ale grupelor fosfatice (P). n ultimii ani ipoteza transportului de ioni prin porii membranei a fost pe deplin confirmat de numeroase cercetri n care s-au utilizat molecule neelectrizate, insolubile n faza lipidic (glicerin, uree, etc). (Trifu i Brbat, 1997). 210
Tipurile de sol: 1-nisipul, 2-solul obinuit i 3-argila, difer ca i compoziie chimic i ca mrime a particulelor. Granulele cele mai mari se gsesc la nisip i cele mai mici la argil. Nisipul permite trecerea rapid a apei, n timp ce argila reine apa. Pentru cultura plantelor este ideal amestecul celor trei forme. Schimburile de ap ntre celul i mediu 1-n mediu hipotonic, apa intr n celula care se umfl. 2-n mediu isotonic, care are aceeai concentraie ca i celula, celula ramne la fel. 3-n mediu hipertonic, apa iese din celul, deoarece mediul are o concentraie mai mare dect celula. Pus ntr-un mediu hipertonic celula pierde ap i se instaleaz starea de plasmoliz. Din aceast stare celula ii poate reveni, instalndu-se starea de deplasmoliz sau, dac pierderea de ap este excesiv, celula moare, plasmoliza final este ireversibil. FACTORII CARE INFLUENEAZ ABSORBIA APEI 1. Umiditatea solului. Umiditatea optim a solului este 75-80% din capacitatea total pentru ap a solului. La valori mai mici, apa este greu accesibil iar la valori mai mari, bltete, nlocuiete aerul din sol i declaneaz procese de fermentaie. 2. Presiunea osmotic a soluiei solului este dat de srurile dizolvate. Valorile normale sunt de 0,5-1%. In situaia valorii de peste 1% se deosebesc: la 1-1,5%-solul srturat; ntre 1,5-2,5soluri foarte srturate, numite solonceaguri. Plantele care triesc pe aceste soluri srturate au adaptri specifice pentru a putea absorbi apa. 3. Temperatura solului Absorbia apei ncepe la 1-2oC ajunge maxim la 20-25oC, dup care scade treptat pn la 45oC. Peste 45oC absorbia apei este stopat pentru c apar modificri ale metabolismului celular. Legat de temperatur a fost remarcat fenomenul de secet fiziologic, care apare in situaia cnd n sol exist ap suficient dar planta nu o poate absorbi datorit temperaturii sczute (8 oC). 4. Oxigenul din sol este absolut necesar datorit participrii lui n reaciile de oxidare. nlocuirea aerului din sol cu apa declaneaz fermentaii, care sunt de 2 feluri, la plante: 1fermentaii alcoolice- produc alcool etilic; 2 fermentaii lactice produc acid lactic. 5. pH-ul solului influeneaz absorbia n funcie de specie. De ex. Cartoful triete bine la un pH acid - 5, grul la un pH 6, trifoiul la un pH-7 (neutru), lucerna la pH 8 (bazic). Turba crete aciditatea solului. TRANSPIRAIA Transpiraia este pierderea apei din plant sub form de vapori. La plantele inferioare, pierderea apei se face pe toat suprafaa corpului. La plantele superioare, transpiraia are trei etape: 1-evaporarea apei n spaiile intercelulare din mezofil; 2-difuziunea vaporilor de ap nspre epiderma frunzei; 3-eliminarea vaporilor de ap n mediul nconjurtor. Din punct de vedere al transpiraiei, plantele se clasific n trei tipuri ecologice: 1-higrofite care triesc in medii umede i elimin 10 g de ap / dm2 de frunz / or. 2-mezofite care elimin 1 g de ap / dm2 de frunz / or. 3-xerofite care sunt plante de uscciune i elimin 0,1 g de ap / dm2 de frunz / or.
212
1. Transpiraia prin stomate. Cea mai mare parte a apei transpirate se pierde prin stomate, care sunt pori la suprafaa frunzelor. Stomatele sunt compuse din dou celule care pot avea form de boabe de fasole, hilul acestora delimitnd ostiola (deschiderea stomatelor). La cereale celulele stomatelor sunt n form de halter. Mecanismul de nchideredeschidere al stomatelor depinde de factorii de mediu: - lumina-determin deschiderea stomatelor, - CO2 n exces determin deschiderea stomatelor, - hormonul ABA-acidul abscisic, sintetizat n perioade de secet, determin nchiderea. 2. Transpiraia prin cuticul se realizeaz pe toat suprafaa frunzei, n cantitate foarte redus, depinznd de grosimea cuticulei i de cantitatea de cear pe care o conine. 3. Transpiraia prin lenticele are loc la nivelul ramurilor i a tulpinilor i este forma de baz a transpiraiei cnd lipsesc frumzele: toamna trziu, iarna i primvara. FACTORII CARE INFLUENEAZ TRANSPIRAIA Factori externi 1-Umiditatea relativ a aerului. -Cnd aerul este foarte uscat, stomatele se inchid i transpiraia este blocat. -La o uscciune moderat, este favorizat transpiraia, respectiv evaporarea apei. -La umiditate mare transpiraia este inhibat, pentru c vaporii de ap nu pot s difuzeze. 2-Lumina. -Lumina stimuleaz transpiraia prin deschiderea stomatelor. -Excepie prezint cactuii, care triesc n zone aride i calde, cu ap puin la dispoziie i care trebuie sa fie economisit. Ziua, cactuii au stomatele nchise, ca s nu piard ap iar noaptea, cnd nu este att de cald, au stomatele deschise. 3-Temperatura. -Transpiraia ncepe de la 2-3oC, crete pn n jur de 30oC, dup care ncepe s scad, pn la 45oC. Factori interni. 1-Suprafaa frunzei. Cu ct suprafaa frunzei este mai mare, transpiraia este mai mare. 2-Densitatea stomatelor. Cu ct este mai mare, cu att i transpiraia este mai mare. 3-Permeabilitatea membranelor celulare. Dac sunt permeabile, apa trece mai uor. 4-Perii de pe frunze care pot fi vii sau mori, reduc transpiraia pentru c menin ntre ei o ptur de aer saturat cu vapori de ap. Rolul transpiraiei 1-Stimuleaz absorbia apei datorit apelului foliar (presiunea de vapori este mai sczut la nivelul frunzei dect la nivelul rdcinii i, ca urmare, apa urc in plant.) 2-Stimuleaz fotosinteza. Plantele cu transpiraie intens au i un schimb intens de O2 i CO2 , respectiv au i fotosinteza mai intens. 3-Asigur reglarea termic, prin mpiedicarea supranclzirii frunzelor n timpul verii. Variaia diurn a transpiraiei. Dimineaa transpiraia este sczut, la ora 12 este moderat, este maxim n jurul orei 15, iar seara este sczut. Variaia sezonier a transpiraiei. Primvara i toamna transpiraia este redus, iarna este foarte redus, iar vara este maxim. Gutaia este pierderea apei sub form de picturi de ap lichid, n care sunt dizolvate sruri minerale, deosebindu-se de transpiraie unde apa este sub form de vapori. Se produce n condiii n care nu poate avea loc transpiraia: - la ntuneric, la rcoare, ntr-o atmosfer saturat cu vapori de ap.
213
ASCENSIUNEA APEI N PLANT. Depinde de : 1-Presiunea radicular, prin care rdcina mpinge apa s urce. 2-Transpiraia la nivelul frunzei, care produce un deficit hidric care trage apa. 3-Coeziunea moleculelor de ap, datorat forei legturilor existente ntre moleculele. 4-Coloana de ap se sprijin pe pereii vaselor conductoare, ce ajut s nu cad apa. Bilanul apei n plant depinde de absorbie, de apa reinut de ctre plant i de transpiraie. Cnd transpiraia este mai intens dect absorbia, bilanul este negativ i planta ncepe s se ofileasc. Diferitele forme de ofilire sunt: 1-ofilire incipient cnd frunzele i pierd turgescena; apare n orele dup-amiezii; 2-ofilire temporar cnd deficitul de ap se ntinde pe o perioad mai mare de 12 ore; 3-ofilire permanent apare n perioade de secet i poate conduce la moartea plantei. Efectele excesului de ap Acumularea apei determin condiii de hipoxie (oxigen puin) sau anoxie (lips total de oxigen), ambele condiii inducnd fenomene de fermentaie. Simptomele excesului de ap: - pentru frunze pierderea turgescenei, reducerea creterii frunzelor, mbtrnire prematur (senescen), cderea frunzelor (abscizia); - pentru tulpin se reduce lungimea tulpinilor i crete diametrul; - pentru rdcin se inhib creterea, apar rdcini adventive i rdcini cu gravitropism negativ (care ies din sol). Efectele deficitului de ap. Deficitul de ap se datoreaz lipsei apei, secetei fiziologice la temperatur sczut sau la srturarea solului). Fa de condiiile de stress, plantele i dezvolt diferite adaptri. - Adaptri la deficit de ap: - sistemul radicular se dezvolt n profunzimea solului, - se reduce suprafaa frunzelor, - frunzele se ruleaz, - stomatele se nchid, - pe suprafaa frunzelor apare o cuticul groas sau peri foliari, - reducerea ciclului de dezvoltare al plantelor la perioada umed. FACTORII DE CARE DEPINDE ABSORBIA APEI: - distribuia spaial a rdcinilor, - rata de formare a rdcinilor, - gradul de suberificare a rdcinilor (suberina este o substan care impregneaz pereii celulelor i i face impermeabili), - gradul de contact ntre rdcini i particulele de sol, - raportul rdcin tulpin, - rata de transport a sevei brute (apa i srurile minerale), - rata de transport a sevei elaborate (apa i substanele organice). FACTORII CARE INFLUENEAZ PIERDEREA DE AP: numrul i mrimea frunzelor, mrimea i densitatea stomatelor, orientarea frunzelor (frunzele care stau perpendicular pe direcia luminii pierd cantitate mai mare de ap, cele paralele pe direcia luminii pierd cantitate mai mic), grosimea cuticulei pe frunze (cuticula groas determin o transpiraie mic), arhitectura coronamentului - cele dou extreme de coronament sunt: coronamentul columnar, la plop i coronamentul deschis la care transpiraia este foarte intens.
214
215
Simptomele de caren de potasiu: - decolorarea vrfului i marginilor frunzelor, - apar pete necrotice de la baza plantei spre vrf, - frunzele se ncreesc, - tulpinile suntsubiri i se curbeaz. FOSFORUL Apare n plante sub form de fosfai. Rolul fosforului: - intr n structura moleculelor ATP, care este molecula energetic esenial din organism; cnd ATP se descompune, elibereaz energie ce este folosit pentru absorbia elementelor minerale i pentru metabolism. Simptomele de deficien: - creterea este ncetinit, - tulpini scurte, - frunze de culoare verde nchis cu pete pe suprafa, - uneori apar coloraii roii pe frunzele de la vrful tulpinii. Aceste trei elemente minerale eseniale, de regul se gsesc n sol n cantiti insuficiente, care limiteaz creterea i productivitatea plantelor. De aceea, n practicile agricole se aplic pe sol ngrminte complexe. Tendina modern n agricultura durabil (agricultura n care se obin producii mari concomitent cu protecia mediului nconjurtor) este de a utiliya cantiti ct mai mici de ngrminte i de pesticide sau ierbicide, pentru a proteja solul. Toate substanele care se aplic pe suprafaa solului i modific compoziia i n timp deterioreaz solul. Fertilizarea plantelor de apartament se face diferit n funcie de anotimp. Iarna se fertilizeaz o dat la 6 sptmni, iar de primvara p-n toamna se aplic fertilizatori o dat la 2 sptmni. n funcie de tipul de plante n ngrmnt trebuie s predomine azotul pentru plantele ornamentale prin frunze, iar pentru plantele cu flori, trebuie s predomine potasiul. FACTORII DE MEDIU AI ABSORBIEI ELEMENTELOR MINERALE FACTORI EXTERNI: 1-Umiditatea solului - umiditatea optim este de 75-80%; n solul mai umed de 80% apa bltete. n solul mai uscat, elementele minerale sunt mai greu de extras din sol. 2-Temperatura absorbia elementelor minerale ncepe la 5-6oC, crete proporional cu temperaturap-n la 35oC dup care intr n declin. 3-Lumina influeneaz indirect absorbia prin deschiderea stomatelor, creterea transpiraiei, noirea fluxului de lichid. FACTORI INTERNI 1-Suprafaa sistemului radicular un system radicular extins absoarbe o cantitate mare de nutrieni. 2-Arhitectura sistemului radiculear rdcinile profunde n sol exploreaz o cantitate mai mare de sol dect cele superficiale. 3-Micorizele sunt asociaii simbiotice ntre rdcin i ciuperci. Ciupercile solubilizeaz anumite elemente din sol i ajut absorbia. SOLURILE TOXICE Solurile toxice sunt acele soluri contaminate cu metale grele sau care conin cantiti mari de sruri minerale. Metalele grele apar n sol ca urmare a exploatrilor miniere cnd sterilul de min se depoziteaz n exterior. Principalele metale grele din sol sunt plumbul, cadmiul, cuprul, zincul, aluminiul, nichelul. Aceste metale sunt absorbite de ctre plante alturi de elementele minerale necesare i provoac simptome de toxicitate care constau n: 1-cretere redus, 2-frunze nglbenite, 3-unele plante nu nfloresc, 4- sistemul radicular foarte profundpentru c se ncearc gsirea unor zone necontaminate.
216
pH-ul solului este un factor esenial de care depinde absorbia metalelor. Unele metale pot exista n cantiti foarte ridicate n sol fr s fie absorbite(de ex., aluminiul este insolubil pn cnd pH-ul coboar la 5,5 dup care se solubilizeaz i este absorbit de ctre plante). EFECTELE METALELOR GRELE 1 disturb diviziunea celular, 2 inhib procesul de fotosintez. 3 la concentraii mici stimuleaz respiraia dup care o inhib, 4 - inhib creterea plantelor Unele plante sunt tolerante fa de metale, adic suport cantiti destul de mari i triesc normal. Plantele sensibile dispar. Plantele obligate s triasc pe soluri contaminate au dezvoltat o serie de strategii pentru evitarea toxicitii. De exemplu, la nivel cellular metalele grele se depun n vacuol pentru a evita acumularea n citoplasm care este sensibil. Acest process se numete compartimentare. De asemenea, metalele pot fi reinute la nivelul peretelui cellular. Exist unele plante capabile sa acumuleze cantitati de metale mai mari decat n sol. Acestea se numesc hiperacumulatoare sau hiperacumulatori. n ecologie exist practici de depoluare a solurilor cu ajutorul plantelor: fitoremediere const n capacitatea plantelor de a absorbi metalele din sol i astfel de a scdea nivelul de contaminare; fitoextracia se folosete pentru recuperarea metalelor rare de exemplu a aurului din nisipurile aurifere. Pe acestea se cultiva plante hiperacumulatori, iar la sfritul perioadei de vegetaie plantele se recolteaz, se incinereaz i se recupereaz metalul preios. SRTURILE Solurile srturate sunt cele cu un coninut ridicat de sruri care pot fi: clorura de sodiu, sulfat de sodiu, sulfat de magneziu i ale saruri. n mod normal un sol are un coninut de sruri de pana la 0,5%, ntre 0,5 i 1,5% se situeaz solurile srturate, peste 1,5% solurile se numesc solonceacuri. Formarea solurilor saraturate. Numeroase terenuri agricole se saratureaza datorita irigatiilor. Apa contine in mod natural cantitati mici de saruri care se acumuleaza si care determina deteriorarea solului. Plantele traiesc cu mare greutate pe saraturi pentru ca nu pot absorbi apa din acestea si ca atare apar simptome de ofilire. Exista putine specii tolerante la saraturi. Strategii de adaptare a plantelor la saraturi. Unele plante au glande saline sau pori salini. Glandele imping sarea in afara frunzei depunand-o sub forma de cristale pe suprafata frunzei. Perii salini se incarca cu saruri dupa care se rup si cad. EFECTELE SRURILOR ASUPRA PLANTELOR: Plantele au o crestere incetinita, Frunzele sunt albicioase si putine, Tulpinile sunt subtiri, Florile sunt mici si decolorate.
217
9. FOTOSINTEZA Fotosinteza este procesul prin care plantele verzi sintetizeaz substane organice, din ap i CO2, n prezena luminii. Plantele verzi sunt organisme fotoautotrofe, datorit faptului c, n acest process, utilizeaz lumina. Radiaia solar este reprezentat de radiaii electromagnetice care pornesc de la soare, se propag prin spaiu i ajung la nivelul Globului terestru, unde sufer o serie de transformri. La nivelul stratului de ozon, radiaia solar se reflect n mare msur i se ntoarce n spaiu. O parte strbate stratul de ozon i ajunge n atmosfer, unde, o parte se reflect pe suprafaa norilor i o parte ptrunde pn la nivelul pturii de vegetaie. Plantele folosesc pentru fotosintez radiaia electromagnetic din spectrul vizibil. La trecerea printr-o prism, lumina din spectrul vizibil se descompune n elementele monocromatice / rou orange, galben, verde albastru, indigo violet. n celulele vegetale exist un organit specializat numit cloroplast, un organit mare, de form oval, nvelit cu o membran dubl, avnd n interior un sistem de lamele dispuse ca i monedele ntr-un fiic. n aceste lamele (tilacoide) se gsesc pigmeni de natura clorofilelor i carotenilor, capabili s recepteze radiaia solar. Radiaia electromagnetic solar are lungimi de und diferite. Domeniul vizibil este situat ntre 320 nm i 760 nm. ntre 280 nm i 320 nm este cuprins radiaia ultraviolet, peste 760 nm este radiaia infraroie IR. Radiaiile cu lungime de und scurt au energie mare. Razele x Roengen au lungimea de und < 320 nm. Razele au lungimea de und < dect razele x. x UV 320 spectru vizibil 760 IR MICROUNDE lumin 6CO2 + 6H2 O C6 H12 O6 + O2 + Energie clorofil glucoz SURSE DE ENERGIE PENTRU ECOSISTEME Energia electromagnetic a radiaiilor solare este principalul izvor de energie pentru desfurarea vieii pe Pmnt i energia chimic a diferitelor substane. Soarele bombardeaz Pmntul cu radiaii n dou forme importante pentru biosfer : a) sub form de radiaii calorice care nclzesc Pmntul, antrenez ciclul apei i curenii atmosferici i oceanici i b) sub form de radiaii utilizabile n procesul de fotosinez prin care se produc substane organice i se regenereaz oxigenul din atmosfer. Soarele emite sub form de radiaie o cantitate uria de energie din care Pmntul interfereaz o fraciune foarte mic. Se apreciaz c la nivelul atmosferei nalte, radiaia solar incident, RSI, este de 1,9 calorii / cm 2 / minut ( 1,02 x 10 7 cal / m 2 / an), reprezentnd constanta solar. Energia electromagnetic a radiaiilor solare incidente pe Pmnt are urmtoarea componen spectral: 10% ultraviolete (lungimea de und 0,1-0,4 ), 45% radiaii din spectrul vizibil (lungimea de und 0,4-0,7 ), 45% radiaii din spectrul infrarou (lungimea de und 0,7-10,0 ). Spectrul solar (dup Demeyer i colab.,1981) este constituit din 8% radiaii ultraviolete, 41% radiaii vizibile i 51% radiaii infraroii. Din totalul energiei incidente, circa 42% este absorbit n atmosfer, apoi radiat n spaiu sub form de cldur i 48% ajunge la suprafaa Pmntului, din care 20% este absorbit de ap, sol sau vegetaie iar 80% este reflectat n spaiu. La nivelul biosferei, la suprafaa solului, se nregistreaz un flux mediu de radiaie solar de circa 0,5 cal /cm 2 / minut. n ara noastr fluxul mediu de energie
218
solar este de 1-1,4 kcal / m 2 / an. Partea cea mai mare din energa solar ajuns la suprafa este cheltuit n formarea climatului general al planetei i numai o mic parte, 0,5% din radiaia solar incident, este utilizat de ecosisteme n producerea de substan organic, de biomas. Aceas realitate se datoreaz mai multor cauze : - lumina este absorbit de vegetaie intermitent n cele 24 de ore de rotire ale planetei n jurul axei sale; - lumina este absorbit de vegetaie n funcie de zonele climatice ale globului, ntre zonele calde i cele reci se intercaleaz ntreruperi sezoniere ; - vegetaia absoarbe pentru fotosintez cu precdere lumina roie (cu o eficien maxim de 33,3%, ntre benzile 0,66-0,69 ) i lumina albastr (cu o eficien maxim de 21,1% n jurul benzilor de de 0,42-0,45 ), aceste lungimi de und constituind radiaia fotosintetic activ RFA. Deci n fotosintez au rol esenial radiaiile albastre (lungimea de und 0,4-0,5 ) i cele roii (lungimea de und 0,6-0,7 ) din spectrul vizibil. Cantitatea de energie solar pe o suprafa determinat variaz mult n funcie de latitudine (care determin unghiul de inciden al razelor solare, cu ct acesta este mai mic cu att crete energia reflectat), expoziia terenului (care modific unghiul de inciden), natura substratului (ap, sol liber, vegetaie, stnc), ali factori (nebulozitate, suspensii, vapori de ap). Din cauza gazelor, vaporilor de ap, particulelor solide suspendate i a altor impuriti care toate la un loc absorb o bun parte din radiaia solar, la suprafaa Pmntului ajunge o cantitate redus de energie solar, rspndit neuniform pe latitudini, anotimpuri, luni, zie, expoziii etc. Rolul fotosintezei 1. Contribuie la meninerea constant a cantitii de CO2 n atmosfer, de 0,03%. Dac nu ar exista vegetaia care s consume CO2, acesta ar deveni din tot mai abundent datorit activitilor industriale, datorit arderii combustibililor fosili. 2. Contribuie la meninerea constant a cantitii de O2 n aer, de 20,9%. In fotosintez, plantele elimin oxigenul, care este utilizat de vieuitoare n respiraie. 3. Fotosinteza asigur sursa de hran pentru toate celelalte vieuitoare. Fotosinteza are un rol cosmic datorit utilizrii radiaiilor solare i transformrii acestora n energie chimic. Pigmenii asimilatori. Clorofilele sunt pigmeni de culoare verde care au capacitatea de a recepta lumina i de a iniia un lan de reacii chimice care se ncheie cu sinteza unei molecule organice. Exist mai multe feluri de clorofil. Cea mai important este clorofila A. Carotenii sunt pigmeni de culoare galben portocalie care absorb lumina albastr. Ei dau culoarea petalelor florilor sau a rdcinii de morcov. Se gsesc alturi de clorofil n toate frunzele i au rolul de a proteja molecula de clorofil de lumina prea puternic. Proprietile pigmenilor clorofilieni. 1. Dicromismul este proprietatea de a avea culoarea verde n lumin transmis i culoarea brun rocat n lumin reflectat; 2. Polaritatea molecula de clorofil are un capt hidrofil, care atrage apa i un capt hidrofob, care respinge apa; 3. Spectrul de absorbie moleculele de pigmeni absorb lumina cu o anumit lungime de und. De ex., clorofila absoarbe lumina roie la 660 nm. 4. Emisia de fluorescen dup ce molecula de clorofil a fost lovit de o radiaie electromagnetic, ea se excit. Starea de excitare const n saltul unui electron de pe un orbital apropiat pe unul mai ndeprtat. Starea de excitare este instabil i electronul revine n poziia iniial sau este cedat altei molecule. Dezexcitarea este nsoit de emisia unei radiaii de ctre molecula de
219
clorofil, numit fluorescent. Aceast radiaie se deosebete de radiaia care a lovit molecula avnd o energie mai mic i o lungime de und mai mare. 5. Fotooxidarea atunci cnd lumina ese prea puternic clorofila se oxideaz i se inactiveaz. Desfurarea fotosintezei. CO2 din aer ptrunde prin stomate n spaiul intercelular din frunz, se dizolv la nivelul pereilor celulari i se absoarbe, intrnd n celul, difuzeaz pn n cloroplast unde este fixat. Se formeaz molecula organic i oxigenul degajat face calea invers. Efectele procesului de fotosintez 1. Absorbia luminii de ctre clorofil. 2. Excitarea moleculelor de clorofil. 3. Faza de lumin n care se sintetizeaz 2 molecule i anume : ATP, care ofer energie i NADPH, care ofer hidrogenul pentru reacii chimice. 4. Reacia biochimic n care se folosesc cele dou molecule ATP i NADPH pentru fixarea CO2 . n aceast etap se sintetizeaz molecule organice. REACIA BIOCHIMIC A FOTOSINTEZEI. CICLUL C3. CICLUL C4. CICLUL CAM. CICLUL C 3. n reacie biochimic este fixat CO2 gazos din aer n structura unor molecule organice, n lan de Carbon. n celule exist un fixator care are 5 atomi de C; CO2 intr ca al 6-lea atom de C al lanului: CO2 + C-C-C-C-C C-C-C-C-C-C Molecula de 6 atomi de C este instabil i se rupe n 2 molecule cu 3 atomi de C. Toate plantele care au fotosintez au ciclul C3 sau ciclul Calvin. Molecule cu 3 atomi de C servesc la sinteza glucozei i a amidonului, la sinteza aminoacizilor i a acizilor grai, existnd la toate plantele. CICLUL C4 sau Calea C4 unele plante care triesc n medii deosebite, foarte calde sau uscate, sau srturate, au o adaptare special pentru concentrarea CO2, care se acumuleaz sub forma unei molecule cu 4 atomi de carbon, numite malat ( acid malic). Aceast substan se acumuleaz n frunz i cnd este nevoie de CO2, malatul se descompune i CO2 intr n ciclul C3, ciclul Calvin. Plantele de tip C4 au o eficien foarte mare de utilizare a apei. n habitatele aride, ciclul C4 este folosit ca un mecanism de reducere a pierderilor de ap prin transpiraie. De ex., plantele de tip C3 transpir 600 g ap n timpul producerii a 1 g substan organic. Plantele de tip C4 pot crete n zone tropicale i subtropicale unde intensitatea luminii este foarte mare i temperaturile sunt ridicate. n general plantele C4 au productivitatea mai mare dect cele C3. Ex., plante C4 sunt porumbul, sorgul, trestia de zahr. CICLUL CAM metabolismul acizilor crasulacei, la plantele suculente. Termenul se bazeaz pe faptul c multe plante suculente stocheaz mari cantiti de acizi grai, n special malat, n frunze i tulpini. Frunzele crnoase, acumuleaz malat, n sucul vacuolar, n timpul nopii. Plantele de tip CAM fixeaz CO2 noaptea, prin aceleai reacii ca i ciclul C4; n timpul nopii temperaturile sunt mai sczute i stomatele sunt deschise; n timpul zilei, cnd este foarte cald, stomatele se nchid, astfel se reduce transpiraia dar se reduce i CO2 din frunze. Atunci planta folosete CO2 fixat noaptea. Aceste plante triesc de obicei n deert. n grupul lor intr plantele suculente i cactuii, care, la fel ca i plantele de tipul C4, economisesc apa. Ciclul C3 exist la toate plantele. FACTORII DE MEDIU CARE INFLUENEAZ FOTOSINTEZA FACTORI EXTERNI. LUMINA. Fotosinteza nu se poate desfura n lipsa luminii. Lumina influeneaz fotosinteza prin dou caracteristici, prin intensitate i prin compoziia ei spectral.
220
INTENSITATEA LUMINII. Unele plante, numite heliofile, sunt adaptate la intensiti mari de lumin, trind n spaii libere, deschise. Plantele scatofile (ombrofile), sunt cele crora nu le place lumina puternic, trind n pduri, sub copaci. Intensitatea luminii poate ajunge ntr-o zi de var, senin, pn la 100 000 luci. Cnd este norat, intensitatea luminii este de aproximativ 20 000 luci.. n general, lumina puternic distruge clorofila plantelor, pentru c determin formarea unor forme reactive de O2 (ROS), care distrug membranele celulare i membranele organitelor, conducnd la moartea plantelor. Simptomele expunerii la lumin puternic constau n decolorarea frunzelor, datorit distrugerii clorofilei. n celulele plantelor se sintetizeaz anumite molecule care contracareaz aciunea ROS. Vitamina C (acidul ascorbic) neutralizeaz aceste specii reactive de O2 ROS. Pentru protecia clorofilelor acioneaz i un alt factor reprezentat de caroteni, pigmeni portocalii-galbeni, care protejeaz clorofilele, absorbind lumina albastr, care are energie mare. COMPOZIIA SPECTRAL A LUMINII Lumina din spectrul vizibil este un amestec de radiaii cu diferite lungimi de und. Compoziia spectral este diferit n cursul aceleiai zile. Astfel, dimineaa i nainte de asfinit predominradiaiile UV; la prnz predomin radiaiile roii i infraroii, care au puternic efect termic. Fa de aceste radiaii, plantele s-au adaptat printr-un ritm intern al metabolismului. Astfel, fotosinteza are valori mai mici dimineaa, se intensific dup prnz i intr n declin dup-amiaza. Compoziia spectral determin i structura vegetaiei. De ex,. La parterul unei pduri, vor tri numai specii scatofile (umbrofile) pentru c arborii rein o mare parte din radiaia solar n aa fel nct la nivelul plantelor de la baza tulpinii arborilor ajung numai radiaii din domeniul rou ndeprtat. Alt ex., de structurare datorit compoziiei spectrale este cel al dispunerii arganismelor vegetale n ap. Radiaia solr penetreaz apa n funcie de lungimea de und (respectiv de energie), adic radiaiile cu energie mic se opresc la suprafa (rad roii), rad cu energie mare penetrez apa pn la 500 m (rad albastre). Algele din ape se stratific n funcie de lumina care ajunge n ap. La suprafa vor fi algele verzi, la adncime vor fi algele brune, urmate de algele roii. TEMPERATURA. Fotosinteza ncepe pe la 2-3oC, crete pn la 30oC dup care intr n declin. La peste 40 oC proteinele care se gsesc n citoplasma celulelor ncep s se denatureze i ca urmare fluiditatea citoplasmei scade. La peste 50 oC celulele plantelor de zon temperat, pot muri. Extremele de temperatur sunt 2, -3oC la plantele din zonele reci i +65oC la algele din ape ermale. Plantele care triesc n zonele reci au un optim mai sczut, 15oC. CONCENTRAIA O2. Dac concentraia O2 n aer este mare, fotosinteza scade. CONCENTRAIA CO2 . Dac mrim concentraia de CO2 pn la 2% fotosinteza se intensific. Peste 2% (ntre 2-5 %), CO2 devine toxic. ELEMENTELE MINERALE Fotosinteza este influenat de elementele N2, P, K i Mg, ce intr n structura clorofilei. Dac exist carene nutritive i fotosinteza intr n declin. FACTORI INTERNI. Starea de hidratare a esuturilor. Pentru desfurarea fotosintezei trebuie s existe ap n esuturi. Cantitatea de clorofil. Cantitatea de clorofil este proporional cu intensitatea fotosintezei numai la intensiti sczute de lumin.
221
10. METABOLISMUL, CRETEREA I DEZVOLTAREA PLANTELOR Metabolismul este totalitatea reaciilor biochimice care se desfoar ntr-un organism. Exist dou tipuri de reacii. Unele sunt de sintez (de producere de substane organice) i se numesc reacii anabolice, iar altele sunt reacii de descompunere a substanelor organice i se numesc reacii catabolice. Anabolismul i catabolismul sunt cele dou ramuri ale metabolismului. 10.1. METABOLISMUL SUBSTANELOR DE REZERV. 10.1.1. Metabolismul lipidelor lipidele se depun n anumite organe ale plantei, n semine sau n fructe, sub forma unor picturi numite oleozoni. Ex., de plante cu depuneri de lipide: in, cnep, floarea soarelui, nucile (semine), avocado (n fruct). Cnd este nevoie, lipidele se descompun i se transform n zaharoz, form sub care ele pot fi transportate prin plant. 10.1.2. Metabolismul proteinelor - Proteinele se depun n semine sau frunze. Nu au rol energetic. Servesc ca rezerv de aminoacizi. Se depun sub forma unor granule numite granule de aleuron. Cnd este nevoie, se descompun n aminoacizi i sunt utilizate. Ex., fasole,mazre, soia, linte, bob. 10.1.3. Metabolismul glucidelor de rezerv n plante, glucidul cel mai rspndit este amidonul, care se depune n semine, fructe, tulpini subterane (tuberculi de cartof). Amidonul se descompune n glucoz dup care se formeaz zaharoz i este transportat prin plant. Toate seminele de cereale conin amidon. Dintre fructele care conin amidon fac parte bananele. 10.2. METABOLISMUL SECUNDAR - Plantele, spre deosebire de animale, produc substane speciale foarte diverse d p d v chimic. Exist trei grupuri de metabolii secundari: terpene, fenoli, alcaloizi. n general, metaboliii secundari au roluri ecologice. Astfel, unii dau culoare florilor (antocianii) i atrag insectele; alii sunt ageni antipatogeni, adic folosesc n lupta plantei mpotriva atacurilor de virusuri, bacterii, ciuperci; alii sunt substane antierbivore, molecule excitante pentru sistemul digestiv al erbivorelor; alii determin distribuia plantelor pe o anumit suprafa, datorit fenomenului de alelopatie. Alelopatia, de ex. interaciunea dintre plante i microorganisme, nucul sau alte plante produc substane pe care le elibereaz n sol i nu las s se dezvolte alte plante . Aceste substane se folosesc n industria farmaceutic, de ex. cofeina, morfina, cocaina, intr in doze mici n compoziia unor medicamente, n doz mare sunt toxice. pot da dependen (opiul din mac, canabis). 10.3.METABOLISMUL RESPIRATOR Metabolismul respirator (respiraia) const n degradarea substanelor organice cu producere de CO2. Evidenierea extern a respiraiei este schimbul de gaze, adic consumul de O2 i producerea de CO2. Respiraia este procesul invers al fotosintezei. Fotosinteza Se produc substane organice Are loc n celule cu clorofil Se produce O2 Se consum CO2 Se produce ATP Respiraia Se descompun substane organice Are loc n toate celulele Se consum O2 Se produce CO2 Se produce ATP 222
CRETEREA I DEZVOLTAREA PLANTELOR CRETEREA este proceul prin care planta i mrete ireversibil dimensiunile. Creterea se poate realiza prin dou procese : 1. Diviziunea celular, prin care se mrete numrul de celule; 2. Expansiunea celular, prin care se mrete volumul celulelor. Meristemele sunt grupuri de celule care se divid frecvent pe toat durata de viaa a plantei, fiind localizate n vrful tulpinii i n vrful rdcinii. Clasificarea meristemelor: 1. Meristeme primare din care se formeaz rdcona principal i tulpina, mpreun cu mugurii i cu frunzele. 2. Meristeme secundare din care se formeaz rdcinile laterale i ramurile de pe tulpin. De asemenea, exist meristeme secundare laterale care determin creterea n grosime a organelor. Unele meristeme funcioneaz mii de ani, n cazul arborilor seculari. Creterea la plante se realizeaz prin intermediul modulelor de cre tere, care se numesc i fitomere. Un fitomer la tulpin este format din un nod, un internod, un mugure, o frunz. Fitomerul pentru rdcin este format dintr-un fragment din rdcina principal i o rdcin lateral. Creterea se realizeaz prin suprapunerea unitilor de cretere. DEZVOLTAREA este procesul care nsumeaz toate transformrile de structur i de funcie pe care le sufer plantele. DIFERENIEREA este procesul prin care se formeay celule cu structur i funcie diferit fa de cea a celulelor parentale. DEDIFERENIEREA este procesul prin care o celul difereniat, pus n anumite condiii, revine la starea n care poate s se divid. TOTIPOTENIALITATEA celulei vegetale const n faptul c fiecare celul conine n nucleu ntreaga informaie genetic care s i permit s regenereye ntreaga plant. n lumea vegetal exist aproximativ 40 de tipuri diferite de celule, comparativ cu lumea animal care cuprinde mai mult de 100 de tipuri de celule. CICLUL DE DEZVOLTARE Etapa 1 Germinaia. La plante, ciclul de dezvoltare ncepe cu smna. Majoritatea seminelor au nevoie de o perioad de repaos nainte de a germina. Cnd condiiile sunt prielnice (ap i temperatur adecvat) smna germineaz. Etapa 2 Emergena plantulei are loc atunci cnd plantula format din embrion iese din sol. Etapa 3 Faza juvenil este faza n care plantula tnr are rdcin, tulpin, frunze i muguri. Etapa 4 este faza de maturitate, cnd planta produce flori. Etapa 5 este faza reproductiv, cnd n floare se formeaz fructul i smna. Cu smna din fruct se reia ciclul.
223
HORMONII DE CRETERE. AUXINELE, CITOCHININELE, GIBERELINELE, ACIDUL ABSCISIC (ABA), ETILENA Caracterizare general. Hormonii de cretere sunt produi n anumite zone ale plantei de unde sunt transportai la distan. Hormonii sunt molecule mici care conin informaie, determinnd la plante reacii specifice. Hormonii de cretere formeaz cu receptorii din membrana celulelor, unde ajung, complexe hormoni-receptori, care declaneaz reacii n lan, ce duc la un rspuns din partea plantei. Eficiena aciunii hormonilor depinde de numrul moleculelor receptoare, de concentraia hormonilor i de eficiena cu care semnalul declaneaz reacia de rspuns. 1. AUXINELE. Aciunea auxinelor a fost decoperit de Charles Darwin n sec XIX, observnd c plantele tinere se orienteaz nspre sursa de lumin, dac sunt iluminate lateral. Dac se taie vrful tulpinii, plantulele nu se mai orienteaz nspre lumin. Mai trziu, prin 1940, a fost izolat substana responsabil de aceast reacie i a fost identificat, fiind acidul indolilacetic (AIA). Ulterior, din plante au fost izolate i alte molecule asemntoare, din grupul auxinelor. Auxinele sunt sintetizate n vrful tulpinilor i au un traseu descendent pn n rdcini. Efectele fiziologice ale auxinelor: 1stimuleaz creterea rdcinilor (n concentraii mici) i a tulpinilor(n conc.mai mari), 2 influeneaz dezvoltarea fructelor, 3 induce fenomenul de dominan apical, adic tulpina crete prin vrful ei i nu se produc ramuri laterale, numai dac se taie vrful tulpinii, n care caz, ramurile laterale apar, de obicei, de la ultimul nod. 4 - stimuleaz nrdcinarea butailor. 2. CITOCHININELE sunt un grup de hormoni produi nu numai de plante ci i de microorganisme i de celulele animale. La plante, citochininele sunt hormoni stimulatori, sintetizai n vrful rdcinii i circul ascendent. Rolul fiziologic: 1 stimuleaz diviziunea celular, 2 stimuleaz formarea clorofilei, 3 au rol antisenescent, 4 stimuleaz deschiderea mugurilor dorminzi, 5 ntrzie cderea frunzelor. 3. GIBERELINELE sunt hormoni stimulatori, produi de plante i ciuperci, care se gsesc mai ales n organele tinere, (reprez acidul giberelic). Rolul fiziologic: 1 stimuleaz elongaia tulpinilor, 2 stimuleaz germinaia seminelor, 3 determin sexul florilor la plantele dioice, 4 induce procese de dezvoltare i de difereniere celulare. 4. ACIDUL ABSCISIC (ABA) este numit i hormonul stresului. Apare frecvent n condiii de deficit hidric. Circul n plant n toate direciile.
224
Rolul fiziologic: 1 determin nchiderea stomatelor n timpul secetei; 2 induce senescen (mbtrnire); 3 menine mugurii n stare dormind; 4 determin cderea frunzelor; 5 inhib germinaia seminelor. 5. ETILENA este un hormon gazos produs n metabolismul plantelor. Apare , de ex., n perioada de maturare a fructelor sau n inundaii. Rolul fiziologic: 1 - determin coacerea fructelor. Exist n depozitele mari de fructe, instalaii cu etilen pentru coacerea fructelor la termen fix. Fructul de kiwi face excepie, el nu produce etilen i, pentru coacerea n depozite, trebuie pus alturi de mere i banane, 2 - determin alungirea tulpinilor n condiii de inundaii pentru ca acestea s ajung la suprafaa apei, 3 - determin cderea frunzelor FIZIOLOGIA STRESULUI n timpul vieii, plantele experimenteaz condiii extreme de via. De ex., temperaturi prea sczute sau prea nalte, lips sau exces de ap, lumin prea puternic sau insuficient, soluri toxice sau poluani atmosferici. TEMPERATURA. Cldura determin deshidratarea esuturilor plantelor, urmat de ofilire. Pe perioade scurte, plantele tolereaz cldura, dar, dac perioada de timp crete, planta poate s moar, pentru c se oprete fotosinteza i respiraia, iar apa este pierdut prin evaporare simpl. Temperaturile sczute ( dar peste 0oC) determin modificri fiziologice i anume, absorbia apei i a srurilor este sczit, fotosinteza, respectiv i transpiraia sunt afectate, deoarece ele ncep n jurul valorii de 5oC. Exist ns dou procese stimulate de ctre frig: 1- Anumite semine au nevoie de frig ca s germineze, de ex., grul de toamn. Procesul se numete iarovizare. 2- Anumite plante nfloresc numai dac seminele lor au fost expuse 60 de zile la frig. Procesul se numete vernalizare. NGHEUL afecteaz esuturile vegetale prin formarea cristalelor de ghea, care distrug celulele. Exist plante mai rezistente la nghe care conin ap mai puin i n interiorul celulelor exist soluii foarte concentrate de substane organice. APA. Seceta prelungit determin ofilirea plantelor, procesele fiziologice intr n declin. Excesul de ap apare n cazul inundaiilor sau a ploilor puternice, cnd apa bltete. Oxigenul este dislocuit din sol i la nivelul rdcinilor apar procese de fermentaie n care se produc alcool etilic sau acid lactic. LUMINA. Lumina prea puternic distruge clorofila. Pigmenii carotenoizi au rolul de a proteja clorofila. Fotoinhibiia este procesul de distrugere temporar reversibil a aparatului fotosintetizator de ctre lumina prea puternic. Fotooxidarea este distrugerea ireversibil a aparatului fotosintetizator. Lumina insuficient determin etiolarea plantelor, adic creterea exagerat a tulpinilor i prezena frunzelor mici galbene.
225
POLUAREA ATMOSFERIC. Apare ca urmare a activitilor industriale, a arderii combustibililor fosili i ca urmare a traficului. n aer se degaj gaze cum ar fi: CO, SO2, oxizii de azot, cloruri, fluoruri, ozonul (O3, care este extrem de toxic i rezult din reaciile chimice ale gazelor atmosferice). Aceste gaze se combin cu apa din nori i se rentorc pe sol sub forma ploilor acide, care modific pH-ul solului, mpiedic absorbia elementelor minerale, modific fotosinteza i respiraia. Dac concentraia poluanilor este mare, atunci ploaia acid poate determina gurirea frunzelor sau cderea lor. Courile fabricilor se construiesc foarte nalte tocmai pentru a mprtia gazele emanate, distana pn la care ajung aceste gaze depinznd de direcia i viteza vntului. Uneori poluanii gazoi se rspndesc pn la sute de km, aa nct o surs de poluare nu are efecte locale ci poate avea efecte extinse pe suprafee mari.
Bibliografie selectiva: ARINI Ioana, CRISTESCU D., 2006. Biologie animal i vegetal. Ed.Paralela 45, Bucureti TRIFU M., BRBAT I., 1997. Fiziologia plantelor. Capitole alese. Ed. Viitorul romnesc. BOLDOR O., TRIFU M., RAIANU O., 1981. Fiziologia plantelor. Ed. Didactic i pedagogic Bucureti. BOLDOR O., RAIANU O., TRIFU M.,1983. Fiziologia plantelor, lucrri practice. Ed. Did. i pedagogic. DOBROT Cristina, YAMASHITA Masamichi, 1999. Creterea i dezvoltarea plantelor. Casa de ed.Gloria PETERFI, t., SLGEANU, N., 1972. Fiziologia plantelor. Ed. didactica si pedagogica, Bucureti
11. Sistemele funcionale ale integrrii i nutriiei organismului animal. Integrarea sistemului celular animal. Schimburile celulare, permeabilitatea celular.
Cuprins: 1.2. Schimburile celulare 1.2.1. Celula, sistem deschis 1.2.2. Mediul intra- i extracelular 1.2.2.1. Mediul extracelular. Caracteristici fizico-chimice: 1.2.2.2. Mediul intracelular 1.2.3. Permeabilitatea celulara
1.2. SCHIMBURILE CELULARE 1.2.1. CELULA, SISTEM DESCHIS Celula este traversat de un curent de materie i de energie, aflndu-se ntr-un schimb permanent cu mediul care o nconjoar. n celul, nenumrate enzime acioneaz constant pentru a desface constituenii chimicorganici, dar alte enzime se opun n mod constant acestei eroziuni chimice, reconstituind structurile celulare, din elementele nutritive aduse din exterior i de la resturile acestei eroziuni. Pe baza deci a unei activiti nencetate, celula i menine integritatea structurilor sale i a unitii funcionale (Roca, 1977). Dup ce o celul moare, unitatea sa structural i funcional se prbuete. Dei schimbul de materie i energie cu exteriorul este permanent: celula se gsete ntr-un echilibru dinamic cu mediul ei exterior - un echilibru metabolic i energetic, datorit metabolismului, prin care celula reuete s-i menin un nivel ridicat, aproape constant, al energiei libere interne, o stare staionar. Starea de echilibru a sistemului celular, trebuie neleas n sensul c diferenele de potenial i concentraiile ionice sunt invariabile n timp, adic fluxul net al fiecrui ion este zero. Pentru a realiza acest echilibru staionar celula cheltuiete, permanent energie.
226
1.2.2. MEDIUL INTRA- I EXTRACELULAR 1.2.2.1. Mediul extracelular Organismele unicelulare -protozoare - triesc ntr-un mediu apos, a crui compoziie i concentraie molecular poate fi cuprins ntre aceea a apei dulci i aceea puternic srat (cu un coninut ridicat de sruri) a mrilor i oceanelor. La organismele pluricelulare -metazoare- toate celulele triesc n mediu lichid apos care este plasma interstiial, sau "mediul interior" al organismului i care constituie mediul exterior celular - lichidul extracelular. La animalele superioare, compoziia cantitativ i calitativ a plasmei interstiiale este foarte constant; la animalele inferioare se pot produce ns modificri ale compoziiei mediului extracelular, dependente ntr-o mare msur de variaiile din mediul nconjurtor. Mediul extracelular, att ca mediu de via nconjurtor, ct i ca mediu interior al organismelor pluricelulare, prezint cteva caracteristici fizico-chimice importante pentru viaa celulelor: 1. Este un mediu apos: stabilizator termic, solvent-inert i inofensiv chimic, pentru reaciile chimice celulare (hidrolizele i oxidrile), proprieti speciale: transparen, tensiune superficial ridicat; 2. Este un mediu oxigenat; 3. Are o anumit presiune atmosferic; 4. Are o concentraie osmotic i un echilibru ionic; 5. Are un pH ce oscileaz nensemnat n jurul neutralitii; 6. Prezint un anumit regim termic. 1. Mediul extracelular este un mediu apos, apa conferindu-i proprietile sale de: stabilizator termic, solvent- inert i inofensiv chimic, implicat n reaciile chimice celulare (hidrolizele i oxidrile, proprieti speciale: transparen, tensiune superficial ridicat. Apa-stabilizator termic, proprietate derivat din cldura specific mai mare dect a altor lichide; cldura latent de vaporizare, una dintre cele mai ridicate - 539 calorii pentru apa la 100C; cldura de difuziune cobort; capacitate caloric ridicat i conductibilitate termic mare. Apa solvent: apa este cel mai bun solvent cunoscut n ea se solv mai multe substane dect n oricare alt solvent. Apa este un solvent polar cu o constant dielectric ridicat (constanta dielectric a apei este de 78,5, a alcoolului etilic este de 24,3 i a benzenului de 2,2). Ionizarea i reacia ionic, fenomene ce nsoesc solvarea substanelor n ap, au mare importan pentru via. Apa ca solvent este inert i inofensiv din punct de vedere chimic: cele mai multe substane solvate n ea nu-i schimb aciunea specific, rmnnd astfel nealterate pn la utilizarea lor. Apa este necesar celor dou reacii chimice fundamentale din celul: hidrolizele i oxidrile. Apa are proprieti speciale: este transparent pentru lumin, ceea ce asigur reaciile fotochimice ale unor celule specializate sau a unor organisme unicelularei; apa are o tensiune superficial ridicat, de care depind multe fenomene de suprafa. 2. Mediul extracelular este un mediu oxigenat, gradul de oxigenare al mediului exterior, apos, al organismului unicelular depinde de coeficientul de solubilitate al O2 (funcie la rndul lui de temperatur i de salinitatea mediului, precum i de presiunea barometric). La animalele pluricelulare gradul de oxigenare al mediului interior este destul de constant. 3. Mediul extracelular are o anumit presiune atmosferic dependent de presiunea mediului apos nconjurtor, care poate varia de la 1 la 1000 atmosfere (pentru fiecare 10 m adncime n ap, presiunea crete cu 1 atmosfer). 227
Numeroase animale nevertebrate (molute, gasteropode, viermi, echinoderme, crustacee) s-au adaptat la viaa la presiuni ce merg pn la 600 atmosfere, iar unii peti i batracieni, pn la 300-400 atmosfere. Tolerana de adaptare a celulelor animale fa de presiune a putut fi cercetat pe ou de animale marine, cum ar fi cele de Arbacia punctulata, supuse la presiuni de pn la 400 atmosfere. 4. Mediul extracelular are o concentraie osmotic i un echilibru ionic dependente de coninutul n electrolii, care variaz de la acela al apei marine i pn la acela al apei dulci. 5.Mediul extracelular are un pH ce oscileaz nensemnat n jurul neutralitii (pH=6.8 - 8,6 pentru animalele din ruri; 7,8-8,6 pentru animalele marine). Rezistena unor celule animale fa de variaiile de pH este destul de mare la animalele inferioare (pentru amoeb este de 4,2-8,2,) i foarte restrns la cele superioare (la om este de 7,0-7,8). 6. Mediul extracelular prezint un anumit regim termic fa de care celulele animale manifest o capacitate de adaptare variabil. In general, zona biocinetic este cuprins ntre +10 i +45C; sunt ns animale care tolereaz temperaturi mai ridicate de +45i altele temperaturi mai coborte de+10C. Variaiile termice ale mediului extracelular influeneaz reaciile metabolice celulare, n conformitate cu legea lui Van't Hoff (Roca, 1977). 1.2.2.2. Mediul intracelular O celul vie (-mediul intracelular-) nu este niciodat n echilibru fizico-chimic cu mediul su exterior (-lichidul extracelular-); Viaa celular necesit ca schimburi continue s-i fie asigurate cu mediul extracelular, din care-i ia elementele sale nutritive i n care elimin resturile metabolice acumulate n mediul su intracelular. Cnd schimburile acestea nceteaz, cnd survine echilibrul fizico-chimic ntre cele dou medii, pentru celul nseamn moartea. Dei mediul intracelular difer n ceea ce privete compoziia sa fizico-chimic de la un esut la altul, totui diferenele caracteristice dintre acesta i mediul extracelular sunt aceleai: Compoziia ionic a mediului intracelular i extracelular
Mediul intracelular
Cationi
Anioni
K + ..155 Na + ..12 Mg 2+ 15 Ca 2+ ...2 Total....184 Cl .8 HCO3 8 *Prot ..60 PO4 3 ...90 Altii ..18 184
Anioni
Cl 110 HCO3 27 Prot .15 PO4 3 ..2 154 * Prot- = rest de protein
Lichidul extracelular are o concentraie cu mult mai ridicat n Na+ i Cl, n timp ce lichidul intracelular este cu mult mai bogat n K+ i PO4 3 i, de asemenea, i n diveri anioni organici (A-). Diferenelor de concentraii ionice le corespund i diferene de potenial electric ntre interiorul membranei (electronegativ) i mediul extracelular (electropozitiv) (Roca, 1977).
228
1.2.3. PERMEABILITATEA CELULARA Generaliti. De o parte i de alta a membranei periplasmatice exist, diferene foarte marcante de concentraii ionice i de potenial electric. Membrana poate s intervin n meninerea acestor diferene. Membrana funcioneaz astfel nct elementele nutritive (sruri minerale, ap, oxigen, aminoacizi, acizi grai i biocatalizatori) s intre n celul i produii de catabolism (bioxid de carbon, sruri minerale, amoniac - sruri de amoniu, uree, acid uric etc.) s ias, uor, iar substanele idiogene, cu adevrat indispensabile funcionrii sistemului celular, s nu o traverseze dect foarte greu, ntr-un sens sau n altul. Cercetrile ntreprinse cu ajutorul izotopilor radioactivi, sau folosind substane toxice metabolice, au artat c: permeabilitatea membranei periplasmatice, ca i a endomembranelor, este strns legat de activitatea metabolic a ntregii celule; permeabilitatea este selectiv, adic este diferit pentru diversele substane; este dinamic, adic variaz de la un moment la altul, pentru aceeai substan, n funcie de schimbrile care survin n mediul extracelular sau n metabolismul celular. Permeabilitatea celular msoar tocmai uurina cu care unele substane strbat zona periplasmatic superficial i sistemul de endomembrane. Permeabilitatea celulelor este o nsuire fundamental, determinat de compoziia i structura materiei vii, de specificul reaciilor biochimice care se petrec n ea i de compoziia i concentraia mediului extern. Permeabilitatea este determinant pentru felul i intensitatea reaciilor metabolice i pentru structura materiei vii i pentru nsi compoziia mediului. ntre permeabilitatea celulelor i factorii ei determinani exist relaii dialectice. Ea se schimb dup diverse condiii fiziologice sau experimentale. Dinamica fiziologic a permeabilitii celulare este extrem de complicat. Se cunosc bine manifestrile sale, se pot vedea pe viu modificrile sale n cursul activitilor celulare, s-au elucidat unii dintre factorii ce-o influeneaz, dar, ansamblul mecanismului su reprezint nc aspecte neelucidate complet. S-au identificat cteva dintre verigile care sunt susceptibile de a fi utilizate n cursul acestor manifestri complexe. Majoritatea concepiilor curente asupra problemelor permeabilitii se bazeaz pe acceptarea teoriei de membran care presupune c principala rezisten la ptrunderea n celul a substanelor din mediul extracelular, sau la ieirea din mediul intracelular la exterior, este localizat la suprafaa membranei periplasmatice, de condensaie lipoproteic. Descoperirea sistemelor de membrane intracelulare, la nivelul organitelor celulare, existena reticulului endoplasmatic i ergastoplasmei, continuitatea de la suprafaa celular pn la nivelul nucleului a acestui sistem de membrane i natura biochimic asemntoare, face ca problemele permeabilitii celulare s devin mai complicate; ele au fcut s creasc interesul pentru studiul proprietilor membranelor i a permeabilitii lor. Teoriei de membran a permeabilitii i se opune de ctre unii fiziologi teoria sorbiei, teoria biostructurii .a.
229
Importana teoretic i practic. Cunoaterea fenomenului de permeabilitate celular ne permite nu numai nelegerea just a morfologiei i fiziologiei celulelor, ci i nelegerea unor probleme de baz ale biologiei, cum ar fi: -influena modificatoare a mediului exterior asupra animalelor; -adaptarea organismelor acvatice la mediul lor de trai; -explicarea unor fenomene funcionale (fenomenele bioelectrice, excitaia i conducerea ei, transmisia la sinapse, -mecanismul celular al proceselor de secreie i excreie la nivelul tractului gastrointestinal i al rinichilor etc.). Cunoaterea fenomenului are importan pentru activitatea practic imediat: - modul de aciune al medicamentelor, hormonilor i al altor substane biologic active la nivelul substratului celular; - exist multe dovezi care atest c modul de aciune al ctorva ageni biologici activi este acela de a modifica permeabilitatea unuia sau a ctorva tipuri de celule fa de ioni sau fa de substane nutritive; - modul de aciune al unor insecticide depinde strns de nivelul permeabilitii celulare.
12 . Integrarea organismului animal pluricelular. Mecanisme de integrare: funcii trofice, hormonale, nervoase de integrare.
2.1. MECANISMELE INTEGRRII Organismul animal pluricelular, de la formele sale cele mai inferioare de organizare spongieri, celenterate pn la cele mai evoluate - mamiferele - funcioneaz ca un sistem unitar n continu auto rennoire, n stare staionar i n unitate permanent cu mediul lui de via cu care realizeaz un schimb nentrerupt de materie i energie. Expresia unitii interne este constana "mediului intern" (Bernard, 1859) sau "homeostazia" (Cannon, 1929), incluznd aici att ntreaga organizare ct i funcionarea organismului. Aceasta nu exprim ns nici fixitate, nici echilibru mecanic, ci, dimpotriv, o continu variaie, ceea ce i confer caracterul de "stare staionar". Expresia unitii organismului cu mediul este capacitatea acestuia de adaptare permanent, echilibrul dinamic. Att unitatea intern ct i cea cu mediul nconjurtor, care nu reprezint dect dou aspecte ale aceluiai atribut fundamental i condiie a existenei fiecrui sistem viu, integralitatea, sunt asigurate de un mecanism funcional integrator complex . Studierea i cunoaterea sistemelor integratoare, principiile de funcionare, randamentul i limitele eficienei lor, constituie una din sarcinile fiziologiei animale (Roca, 1977). Componentele principale ale acestui mecanism pot fi grupate n trei categorii fundamentale de sisteme: TROFO-INTEGRATOR, STIMULO-INTEGRATOR, PSIHO-INTEGRATOR.
230
Componentele mecanismului de integrare la organismele pluricelulare SISTEM SISTEM SISTEM TROFOSTIMULO-INTEGRATOR PSIHO-INTEGRATOR INTEGRATOR Primate Cortex S.N. concentrat Mamifere Cerebralizare Cortex Vertebrate Neurosecreie Artropode Molute Mezenchim S.N. Procordate S.R.H. concentrat Anelide Hormoni Snge S.N. concentrat Mezenchim Sistem nervos difuz
Neurosecreie
Echinoderme Viermi
2.1.1. SISTEMELE TROFO-INTEGRATOARE Mezenchimul i componentele sistemului reticulo-histiocitar, pe de o parte, sngele i limfa pe de alt parte, realizeaz ansamblul ce unific fenomenele trofico-nutritive. 2.1.2. SISTEMELE STIMULO-INTEGRATOARE Aparatul nervos i endocrin prin mesagerii lor bioelectrici (influxurile nervoase) i chimici (hormonii) extind dialogul la toate sectoarele corpului i cu mediul nconjurtor. Ele constituie trunchiul mecanismului integrator la toate grupele de animale. SISTEMUL NERVOS, datorit organizrii i funcionrii sale, dispune de o reea de informaie rapid cu ajutorul creia percepe orice modificare a factorilor fizici, chimici, metabolici din mediul intern, ca i din cel extern; n acelai timp, dispune de mecanisme efectoare rapide i precise, cu ajutorul crora poate s reajusteze ntr-un timp scurt i cu maximum de eficien funcionarea interioar i comportamentul animalului n mediul su de via. La animalele inferioare - spongieri, celenterate, viermi - dialogul acesta, stabilit prin sistemul nervos, apare sub forma unui mecanism elementar: excitaie-reacie. Pe msura dezvoltrii sistemului nervos, att relaiile interne ct i mai ales acelea ale organismului cu mediul de via, se diversific, devin mai complexe; mecanismul linear, excitaie-reacie, devine un complex de legturi ntre informaiile senzoriale, controlul, prelucrarea lor, ca i alegerea rspunsurilor posibile cele mai potrivite. Activitatea reflex elementar se dezvolt, se perfecioneaz, devenind treptat o activitate comportamental complex - activitate nervoas superioar (Roca, 1977). Componentele funcionale ale sistemului nervos integrator. Diferiii centri nervoi realizeaz anumite acte reflexe, dar activitatea lor nu. se desfoar izolat a unuia fa de ceilali ori invers. n realitate ei fac parte din adevrate sisteme funcionale unitare.
231
Sistemul motor somatic, cu cele dou componente ale sale: sistemul extrapiramidal i sistemul piramidal, asigur, n special integrarea organismului n mediu (integrarea extern). Sistemul motor vegetativ asigur integrarea intern a organismului. Acestea nu funcioneaz izolat, independent, unul fa de cellalt. Dimpotriv, att structural ct i funcional interrelaiile lor sunt aa de strnse, de complexe, nct pot fi considerate ca i componente ale unui mecanism funcional mai larg - sistemul motor. Activitatea acestuia este puternic interconectat cu aceea a sistemului senzitiv - sistemul analizatorilor: centrii motori (centri ai actelor reflexe) prelucreaz i valorific o parte, mai mare sau mai mic, din informaia senzorial pe care o asigur diferiii analizatori. Interconectarea acestora, integrarea unitar a ntregului sistem nervos este asigurat, la mamifere i ntr-o msur mai mic la psri - prin funcionarea cortexului cerebral, la nivelul cruia exist att proiecia superioar a sistemului senzitiv, ct i a celui motor (somatic i vegetativ). La celelalte grupe de vertebrate, la care cortexul cerebral este slab dezvoltat sau practic lipsete, integrarea senzitivo-motoare este realizat de sistemul talamus - corpii striai. La nevertebrate, integrarea senzitivo-motoare cea mai complex i mai adecvat este realizat la nivelul ganglionilor cerebroizi , pe aceleai baze fiziologice ca i la vertebrate. In rezumat, putem reprezenta : Componentele funcionale ale sistemului nervos integrator ( la mamifere) Sistemul senzitiv Analizatorii Sistemul motor Sistemul motor somatic extrapiramidal piramidal Cortexul cerebral Sistemul motor vegetativ Activitatea nervoas superioar
SISTEMUL ENDOCRIN. Funcia integratoare a sistemului nervos este ntregit de aceea a sistemului endocrin. Ca i influxurile nervoase, hormonii sunt mesageri purttori de informaie. Numai c aceasta nu se propag sub forma unei unde bioelectrice de-a lungul nervilor i centrilor, ci este transportat ca o anumit substan chimic n snge sau limf. Aceti mesageri chimici - hormonii - au ntotdeauna : - o individualitate chimic i funcional, purttoare a unei informaii, - o origine precis i specific, - o anumit aciune, constant, - intervin mai lent, dar aciunea lor poate s fie mai profund i de lung durat, n aa fel nct aciunii lor fiziologice i se poate aduga i una morfologic. Sistemul endocrin acioneaz n strns interaciune cu sistemul nervos, alctuind sistemul stimulo-integrator, neuro-endocrin; n cadrul acestuia, sarcinile aparatului endocrin sunt mai mult interne i n permanen supuse unui control regulator nervos , a crui activitate ns o poate influena puternic. (Roca, 1977). 2.1.3. SISTEMUL PSIHO-INTEGRATOR Realizat odat cu procesul de corticalizare, clar exprimat la mamiferele superioare i perfecionat odat cu frontalizarea atins de om, el nu mai unific doar pure stimulri, ci integreaz mai ales psihismul indivizilor, graie gndirii, limbajului. 2.1.4. FUNCIONAREA MECANISMELOR INTEGRATOARE Sistemele integratoare din corpul animal funcioneaz dup principiile cibernetice ale mecanismelor automate de comand i control. Toate sunt sisteme nchise de tipul acelora n care ieirea (efeciunea) este determinat att de intrare ct i de ieire printr-o bucl de retroaciune. Acest mecanism permite s se compare efectul produs cu mrimea de intrare, pe baza unui transport recurent de informaie de la efectorii implicai, deci pe baza unei conexiuni inverse sau feedback negativ.
232
Anohin, n 1957, aprecia c principiul conexiunii inverse, cunoscut n fiziologie din secolul trecut i denumit la nceputul secolului "aferentaie invers" este principiul cibernetic fundamental, comun mecanismelor automate de comand i control dar i mecanismelor de reglare din organismele vii (citat de Roca, 1977). Cum marea majoritate a mecanismelor de reglare tind s readuc la valoarea fiziologic parametrii funcionali (variabilele controlate), conexiunea invers cel mai frecvent ntlnit este de tip negativ. Sunt ns i situaii cnd intervine n reglare un mecanism de feedback pozitiv - o retroaciune pozitiv. Mecanismul asigur intensificarea aciunii care l-a declanat. In majoritatea cazurilor, retroaciunea pozitiv (feed-back-ul pozitiv) amplific i menine variaia factorului variabil, determinnd stri nefiziologice de suprasolicitare a organismului. Exemplu : Mecanismul de retroaciune pozitiv asigur evoluia normal a metamorfozei mormolocilor de broasc: GLANDA TIROID a mormolocului tiroxina (hormonul tiroidian) pe care o secret n cantitate mic i care declaneaz prima etap a metamorfozei dar , acioneaz i asupra HIPOTALAMUSULUI, stimulnd dezvoltarea eminenei mediane. In aceste condiii, un mesager chimic al hipotalamusului (TRF) acioneaz asupra HIPOFIZEI ANTERIOARE provocnd secreia tirotropinei (TSH),trecut n snge, acest hormon hipofizar ajunge la TIROID unde stimuleaz i mrete producia de tiroxin, ceea ce asigur REALIZAREA RAPID A FAZELOR URMTOARE ALE METAMORFOZEI. Componentele sistemelor de reglare: 1.Parametrul reglat reprezint sursa de mesaje informaionale captate de un sistem sensibil specific - receptorul. Acesta traduce mesajul informaional senzitiv ntr-un mesaj propriu sistemului viu - influxul nervos, n care informaia despre mrimea variaiei este codificat sub forma frecvenei acestuia. 2. O cale de intrare - nervii afereni - asigur transportul influxurilor nervoase la centri nervoi ai sistemului regulator implicat, care elaboreaz un mesaj efector-corector influxuri nervoase eferente (sau hormoni) . 3. O cale de ieire - influxurile nervoase eferente (sau hormonii) transmit mesajul efector la sistemul motor efector. Prin funcionarea lui, acesta modific valoarea parametrului reglat n aa fel nct anuleaz variaia acestuia care a declanat intrarea n aciune a mecanismului regulator. Dup un astfel de mecanism se regleaz, de exemplu, presiunea arterial, tensiunea CO2-ului n snge etc. Eficienta (randamentul) unui astfel de sistem de reglare este msurat prin amplitudinea aciunii corective a efectorului ca rspuns la o schimbare de o unitate a parametrului reglat. Cu ct eficiena este mai mare, cu att parametrul (variabila controlat) este meninut mai aproape de nivelul standard. n organismul animal, exist un numr mare de mecanisme regulatoare i activitatea fiecruia n parte se afl sub un control dominant centri din segmentele superioare ale axului nervos central - care acioneaz att asupra centrilor de comand ct i asupra receptorilor (formaiunea reticulat a trunchiului cerebral poate elabora influene inhibitoare ori facilitatoare asupra centrilor, dar poate modifica i sensibilitatea receptorilor auditivi sau a celor gustativi; adrenalina, eliberat n cursul unor emoii sau a unui exerciiu fizic intens, are o aciune modificatoare asupra baroreceptorilor zonelor reflexogene, schimbnd astfel nivelul variabilei controlate, adic a presiunii arteriale centrale, pe lng efectele sale specifice asupra efectorilor: creterea forei de contracie a miocardului i mrirea tonusului arteriolelor; hormonii corticalei suprarenale acioneaz asupra sistemului efector, modificnd reactivitatea vaselor.
233
La mamifere i la om, controlul dominant mbrac forma cea mai complex i cea mai precis; el este realizat de cortexul cerebral i de nucleii subcorticali mpreun cu care formeaz sistemul integrator cortico-hipotalamic. Datorit aciunii acestuia, toate sistemele de reglare sunt legate ntre ele n aa fel nct formeaz un mecanism complex, unitar. Exemplu: Mecanismul complex de integrare - principalele verigi care sunt solicitate cu ocazia unei activiti musculare voluntare: ridicarea unei greuti. Prima etap funcional const ntr-o reprezentare mintal a micrii de executat, n care individul trebuie s in seama de importana obiectului, de greutatea sa, de amplitudinea deplasrii de realizat etc. Urmeaz faza declanrii ordinelor motoare care comand executarea. Micarea trebuie s fie perfect coordonat, ceea ce comport o activitate sincron sau succesiv a diferitelor grupe musculare, activitate comandat de ctre centrii nervoi specializai. Cu ajutorul unei activiti musculare generale, mai este necesar ca individul, s mobilizeze regiunile de inserie imobil a muchilor activi solicitai n cursul micrii i s ia o atitudine general care s-i permit s execute corect micarea. In cursul activitii, echilibrul individului poate s fie deranjat, de unde intervenia, n tot timpul, a unei reglri i coordonri a activitilor musculare. Dac aceste micri antreneaz un travaliu muscular nsemnat, vor rezulta, n acelai timp, repercusiuni asupra totalitii funciilor: - Suplimentarea cheltuielilor energetice ale activitii musculare va fi asigurat printr-o irigaie sanguin a acestora, intensificat proporional (vasodilataie la nivelul teritoriilor musculare solicitate). - Vasodilataiei locale i se suprapune o - mrire a debitului circulator general, prin creterea travaliului cardiac. - Creterea debitului circulator est necesar pentru eliminarea surplusului de CO2 aprovizionarea cu cantiti sporite de O2. - Sunt mobilizate rezervele de glicogen i meninerea constant a glicemiei. - Intensificarea reaciilor energetice musculare mrete termogeneza i tendina de cretere a temperaturii corpului, ceea ce pune n joc mecanismele de termoreglare (Roca, 1977).
234
235
C) Dup valoarea alimentar energetic pentru organism, alimentele se caracterizeaz prin: a. valoarea energetic (sau densitatea energetic) i b. densitatea de nutrieni. a. Valoarea energetic a alimentelor se exprim n Kcal. 1 Kcal, este cantitatea de cldur necesar pentru a crete cu 1oC temperatura unui litru de ap. 1 Kcal = 1000 cal. Valoarea energetic a alimentelor se determin cu aparatul numit bomb calorimetric. Bomba calorimetric cuprinde: un vas cu perei termoizolai, cu o cantitate cunoscut de ap, capac cu termometru, o incint de sticl in care se aprinde alimentul la care i se determin valoarea energetic. Funcionarea: 1 - se cntrete alimentul, 2 - se introduce alimentul sub incinta de sticl, 3 - se toarn un volum cunoscut de ap , 4 - se nchide capacul, 5 - se noteaz temperatura apei, 6 - se aprinde alimentul, 8 - se nregistreaz creterea temperaturii apei. De exemplu, dac se toarn 1 l ap i temperatura apei crete cu 50oC, valoarea energetic a alimentului este de 50 Kcal. Valoarea energetic a diferiilor nutrieni: 1 g glucide 4 Kcal 1 g proteine 5,4 Kcal 1 g lipide 9 Kcal n cazul comparrii valorii energetice la compui organici cu acelai numr de C: Exemplu: 1 g de glucoz: C 6 H12O 6 + 6 O2 6 CO2 + 6 H2O + Energie 4 Kcal 1 g de acid caproic (acid gras): CH3 (CH 2) 4 COOH C 6H12O 6 + 8 O2 6 CO2 + 6 H2O + Energie 9 Kcal Raportul ntre numrul atomilor de hidrogen i oxigen pentru glucoz este: 12/6 = 2, pentru acid caproic este 12/2 = 6. Dac doi nutrieni au acelai numr de atomi de carbon atunci va furniza mai mult energie acela la care raportul hidrogen/oxigen este mai mare. Un nutrient energetic furnizeaz cu att mai mult energie cu ct este mai bogat n hidrogen i mai srac n oxigen. Lipidele sunt mai bogate n hidrogen dect glucidele sau dect proteinele i furnizeaz mai mult energie. 1 g glucide 4 Kcal 1 g proteine 5,4 Kcal 1 g lipide 9 Kcal Prin arderea glucidelor i lipidelor, n organism, rezult aceeai cantitate de energie ca prin arderea n bomba calorimetric. n organism, produii de degradare ai glucidelor i lipidelor sunt aceiai ca i n bomba calorimetric : CO2 + H2O. n organism, produii de degradare ai proteinelor nu sunt aceiai ca i n bomba calorimetric . Prin arderea unui g de proteine: n bomba calorimetric H2O + CO2 + NO 5,4 Kcal n organism H2O + CO2 + uree 4,0 Kcal. 236
Prin arderea unui g de proteine n organism, rezult numai 4 Kcal deoarece ureea conine hidrogen. UREEA: O=C(NH2)2 b. Densitatea n nutrieni se raporteaz la 100 Kcal; este cu att mai mare cu ct sunt mai numeroi nutrieni/100 Kcal; cele mai valoroase alimente sunt cele care conin numrul cel mai mare de nutrieni raportat la 100 Kcal. RAIA ALIMENTAR O raie alimentar este adecvat atunci cnd satisface nevoile energetice i nevoile de nutrieni ale organismului. Aprecierea cheltuielilor energetice ale organismului Valoarea energetic a alimentelor (VEA), care compun raia alimentar, trebuie s corespund cerinelor energetice ale organismului (CEO): VEA = CEO Cerinele energetice sunt diferite n funcie de activitatea efectuat, astfel c, pentru calcularea lor se parcurg trei etape de stabilire a parametrilor: 1-Se calculeaz cerinele energetice ale organismului pentru ntreinerea funciilor vitale; 2-La valoarea obinut se adaug cheltuielile energetice necesare diferitelor activiti; 3-La valoarea obinut se adaug efectul termic al alimentelor sau aciunea dinamic specific a alimentelor. Etapa 1. Cerinele energetice ale organismului pentru ntreinerea funciilor vitale. Organismele cheltuiesc energie numai pentru ntreinerea funciilor vitale doar n starea de somn sau n starea de veghe fr nici o activitate. Acest parametru se determin dup somnul de noapte, la 12 ore dup ultima ingestie de hran. Valoarea energetic a alimentelor necesar numai pentru ntreinerea funciilor vitale se calculeaz dup greutatea corporal, n funcie de sex, fiind stabilit c: pentru femei, 1 Kg greutate corporal / 1 h necesit 0,9 Kcal; pentru brbai, 1 Kg greutate corporal / 1 h necesit 1,0 Kcal; Exemplu: - Presupunnd c, att femeia ct i brbatul au 60 Kg, cheltuielile energetice necesare pentru ntreinerea funciilor vitale, care se calculeaz pentru o zi (24 ore) sunt: pentru femeie: ( 60 x 0,9 Kcal ) x 24 h =1296 Kcal / zi pentru brbat: ( 60 x 1,0 Kcal ) x 24 h =1440 Kcal / zi . Etapa 2. Cheltuielile energetice necesare diferitelor activiti. Valorile obinute pentru primul parametru se nmulesc cu coeficienii cunoscui:
237
I. Activiti - pentru activiti foarte uoare(jocul pe calculator): - pentru activiti uoare (munca intelectual): - pentru activiti grele (cosit, spat)
II. Coeficieni 1,3 pentru ambele sexe; 1,5 pentru femei; 1,6 pentru brbai;
1,9 pentru femei; 2,1 pentru brbai; Exemplu: 1296 x 1,9 = 2462 Kcal pentru femei; 1440 x 2,1 = 3024 Kcal pentru brbai
Etapa 3. Efectul termic al hranei Efectul termic al hranei reprezint cheltuielile energetice ale organismului pentru digestia alimentelor, pentru absorbia nutrienilor, pentru transportul lor n snge i pentru transformrile pe care le sufer n celule. Aa cum pentru efectuarea unei activiti organismul cheltuiete energie, tot aa cheltuiete energie pentru digestie i restul funciilor vitale. Efectul termic al alimentelor reprezint aproximativ 10% din cheltuielile energetice necesare desfurrii diferitelor activiti (10% din valoarea obinut la etapa 2). Exemplu: pentru brbai, efectul termic al alimentelor:10% din 3024 Kcal = 302 Kcal. Un brbat care efectueaz o activitate grea (cosete), are nevoie de 3326 Kcal/zi. 3024 Kcal + 302 Kcal = 3326 Kcal / zi Cerinele energetice ale organismului unui brbat sunt mai mari dect ale unei femei cu aceeai greutate deoarece, pe de o parte, masa muscular este mai mare la brbat iar, pe de alt parte, n corpul femeii esutul adipos , mic consumator de energie, are o pondere mai mare. Cerinele energetice depind de: sex, constituie (dou persoane de acelai sex, aceeai greutate dar nlime diferit, au cerine energetice diferite; persoana mai nalt le are mai mari pentru c are suprafaa corporal mai mare i pierderea de cldur mai mare), temperatura mediului extern ( cheltuielile energetice sunt mai mari n sezoanele reci dect vara; iarna, diferena de cldur dintre corp i mediu este mai mare i pierderea de cldur mai mult dect vara); n caz de hipertiroidism, cerinele energetice ale organismului se pot dubla, chiar n inactivitate. Greutatea corporal n funcie de valoarea energetic a alimentelor i cerinele energetice ale organismului A. Pentru aduli: VEA = CEO GE constant (greutatea corporal) B. In cazul excesului: VEA > CEO GE crete (greutatea corporal) C. In cazul insuficienei: VEA < CEO GE scade (greutatea corporal) IN CAZUL EXCESULUI ALIMENTAR n lipide, glucide sau proteine, se depete necesarul de cheltuieli energetice ale organismului i se produc reacii fiziologice complexe.
238
1. Excesul de lipide. Cnd valoarea energetic a alimentelor depete cheltuielile energetice ale organismului datorit unui exces de lipide n alimente, lipidele complexe (trigliceridele) sunt descompuse n intestinul subire la glicerol i acizi grai, care sunt absorbii pe cale limfatic (acizii grai) i n snge (glicerolul), ajung n esutul gras i se sintetizeaz din nou lipide. (Degradarea trigliceridelor este hidrolitic.) III. GLICEROL ACID CAPROIC IV. TRIGLICERID (acid gras) CH2OH HOOC CH2OOC(CH2)4 CH3 | (CH2 )4CH3 | CHOH CHO OC(CH2)4 CH3 | | CH2O H CH2O OC (CH2)4CH3 1 molecul +3 H2 O + 3 molecule 3. Excesul de glucide se transform, n ficat, n acizi grai din care, n esutul gras, se sintetizeaz lipide. 4. Excesul de proteine solicit ficatul, unde aminoacizii din proteine, prin dezaminare, sunt transformai n acizi grai i uree. Acizii grai rezultai n ficat, particip la sinteza lipidelor n esutul gras . Excesul de proteine n alimente determin n organism, producerea n exces de uree, ca rezultat al degradrii proteinelor, iar eliminarea-excreia de uree, necesit un surplus de ap. De aceea, ingestia de proteine provoac setea. Dar, prin acest exces, organismul este traversat de un curent de ap i o dat cu eliminarea urinii se pierd i elemente foarte utile pentru organism, cum este Calciul. Un exces de proteine un timp ndelungat, favorizeaz osteoporoza, fragilitatea oaselor, adeseori fractura de col femural. IN CAZUL INSUFICIENEI ALIMENTARE: VEA < CEO GE scade Cnd valoarea energetic a alimentelor este sub nivelul necesarului cheltuielilor energetice ale organismului, greutatea corporal scade, deoarece, n aceste condiii organismul apeleaz la resursele proprii, pentru ai completa nevoile energetice. 1. Glicogenul, depozitat n ficat i muchi, poate susine organismul cca. 8 ore. Rezervele de glicogen din muchi se utilizeaz doar pentru activitile musculare. Rezervele de glicogen din ficat se utilizeaz, sub form de glucoz de ntregul organism. Majoritatea celulelor prefer glucoza ca surs de energie, iar celulele nervoase utilizeaz numai glucoz. 2. Lipidele. Prin degradarea lipidelor se formeaz glicerolul i acizii grai. Acizii grai sunt o surs energetic consistent. Din glicerol organismul sintetizeaz glucoz, dar glicerolul este o surs insuficient de sintez a glucozei. 3. Proteinele utilizate ca surs energetic n condiii de subalimentaie sunt proteine din structura organismului. n paralel cu degradarea lipidelor, organismul degradeaz i proteinele, la aminoacizi. Din aminoacizi glucoformatori se sintetizeaz glucoz. n aceast situaie a insuficienei alimentare, scade esutul adipos, masa muscular i masa osoas. Dar, exist un punct critic n care, dac utilizarea proteinelor ca surs energetic se continu, survine moartea. n aceast situaie, crete sensibilitatea la boli infecioase, deoarece organismul se apr mpotriva agenilor infecioi cu anticorpi care sunt de natur proteic. Lupta mpotriva supragreutii cuprinde: activiti care ard multe grsimi ( alergat, mers pe jos, gimnastic etc.), reducerea valorii energetice a alimentelor, reducerea volumului alimentelor.
239
ROLUL NUTRIENILOR ROLUL GLUCIDELOR 1. AMIDONUL este sursa energetic cea mai important pentru omenire. Amidonul este o macromolecul, un polimer din molecule de glucoz. Este sursa de energie preferat de toate celulele organismului. Este obinut din gru, orez, cartofi. 2. GLICOGENUL este o macromolecul, un polimer din molecule de GLUCOZ, este amidonul animal. Este prezent n puine alimente, n ficat i muchi. 3. LACTOZA este zahrul din lapte, format din cte o molecul de GLUCOZ i de GALACTOZ. Galactoza nu se gsete liber n natur. 4. ZAHRUL este format din cte o molecul de GLUCOZ i de FRUCTOZ. 5. GLUCOZA i FRUCTOZA se gsesc n fructe, n mierea de albine. Descompunerea glucidelor. n intestin, amidonul, glicogenul, lactoza, zahrul sunt degradate la monozaharide. Monozaharidele sunt absorbite n snge i ajung, pe calea venei porte, la ficat, unde fructoza i galactoza sunt transformate n glucoz. Glucoza este forma sub care circul glucidele n snge. Importana glucidelor. Glucidele sunt surs de energie; intr n structura hormonilor glucoproteici i au rol reglator; intr n compoziia heparinei, produs permanent de snge, avnd rol anticoagulant; excesul de glucide favorizeaz flora bacterien din gur, cariile dentare. ROLUL FIBRELOR ALIMENTARE Fibrele alimentare sunt reprezentate de: fibre de natur glucidic: celuloz, hemiceluloz, mucilagii, pectine i de lignin. Dup solubilitatea n ap, celuloza i lignina sunt insolubile, hemicelulozele, mucilagiile, pectinele sunt solubile. a) Rolul fibrelor alimentare insolubile (celuloza i lignina) este multiplu: - absorb apa, se umfl, mresc volumul alimentelor; - grbesc golirea stomacului; - accelereaz tranzitul intestinal; - importante n situaii de supragreutate, constipaii. Se gsesc n gru fiert, pine semi-neagr, tre. Acestea sunt bogate n vitamine, mai ales din grupul B i n minerale, coninute n cuticula i embrionul din bobul de gru. n procesul de obinere a finii albe din cereale (rafinare), se elimin cuticula i embrionul bobului de gru, fina alb pierznd din vitamine i minerale. 240
b) Rolul fibrelor solubile, care se gsesc n fructe : -fixeaz reversibil glucoza, ntrzie absorbia ei i suprasolicitarea pancreasului de a produc insulin(care duce la diabet); -formeaz o past cu apa, ncetinesc golirea stomacului i a tranzitului intestinal; -fixeaz ireversibil srurile biliare din intestin, acestea n mod obinuit sunt reabsorbite n snge, dar dac sunt fixate de fibrele solubile, se elimin din organism. Colesterolul este precursorul srurilor biliare. ROLUL LIPIDELOR (TRIGLICERIDE, FOSFOLIPIDE, COLESTEROL, ACIZI GRAI) 1. TRIGLICERIDELE Trigliceridele sunt lipide neutre, sunt insolubile n ap. Sunt esteri ai GLICEROLULUI cu ACIZI GRAI cu caten lung, cu numr par de atomi de C. Acidul palmitic are C16 n molecul. Acidul stearic are C18 n molecul. Exemple: C4 CH3 CH2 CH2 COOH acid butilic (in grsimile din lapte); C6 CH3 CH2 CH2 CH2CH2COOH acidul caproic C16 CH3 ( CH2) 14 COOH acidul palmitic. Trigliceridul TRIPALMITIN: GLICEROL i ACID PALMITIC GLICEROL ACID PALMITIC CH2OOC(CH2)14CH3 | CH O OC (CH2)14CH3 | CH2O OC (CH2)14CH3 Trigliceridele pot fi - n stare solid, coninnd acizi grai saturai (untur, unt); - n stare lichid, coninnd acizi grai nesaturai (uleiuri). Rolul trigliceridelor n organism este acela de surs concentrat de energie. Valoarea energetic a lipidelor este mai mare fa de ceilali nutrieni: 1 g glucide 4 Kcal 1 g proteine 4 Kcal 1 g lipide 9 Kcal 2. FOSFOLIPIDELE prezint un oarecare grad de solubilitate n ap. Rolul fosfolipidelor n organism : sunt substane plastice, de construcie. Intr n structura membranelor celulare, care au un strat dublu fosfolipidic i macromolecule proteice. Pe lng fosfolipide, n membranele celulare intr i colesterolul. Astfel n membrana celular n dublul strat fosfolipidic: ( ) sunt intercalate din loc n loc, macromolecule proteice: ( ), care au rol de protein canal, ce poate fi traversat de ap i Na+, Cl-, K+.
241
--------------------------------------------------------------------------------------------------H2O, Na+, Cl-, K+ -----------------------------------Membrana celular: ----------------------------------- H2 O, Na+, Cl-, K+ ---------------------------------------------------------------------------------------------------- 3. ROLUL COLESTEROLULUI Colesterolul n exces se face vinovat de ATEROSCLEROZ (cnd se depune n pereii vaselor de snge i i ntrete). Ca urmare: a) INIMA face un efort mai mare, pentru a pune sngele n circulaie, b) TENSIUNEA ARTERIAL CRETE, c) CAPILARELE, pereii vaselor de snge subiri se pot rupe i se pot produce d) ACCIDENTE VASCULARE CEREBRALE sau la nivelul MIOCARDULUI. Efectul ruperii vaselor de snge la creier este moartea unor neuroni, iar la inim, este moartea unor fibre musculare miocardice. Colesterolul, n cantiti moderate, este extrem de important pentru organism deoarece: INTR N STRUCTURA MEMBRANELOR CELULARE alturi de fosfolipide; Este PRECURSOR AL VITAMINEI D, sub aciunea radiaiilor ultraviolete UV: UV COLESTEROL VITAMINA D Efectele carenei (deficienei) de vitamin D sau AVITAMINOZA D sunt: CALCIUL nu se poate absorbi la nivelul intestinului; la copii apare RAHITISMUL (oasele se curbeaz sub greutate corpului); la aduli apare OSTEOMALACIA. Este PRECURSOR AL ACIZILOR BILIARI.
Acizii biliari i srurile biliare sunt detergenii cu ajutorul crora sunt emulsionate grsimile n intestin. Lipaza, care degradeaz lipidele (la glicerol i acizi grai), nu poate face acest lucru dect dac lipidele sunt emulsionate. Emulsionarea grsimilor se face mai uor atunci cnd sunt ingerate n alimente calde.). Sursele de colesterol sunt laptele integral, untul, smntna, ficatul, creierul.
242
4. ROLUL ACIZILOR GRAI Gustul i aroma alimentelor este dat de grsimi. Gustul bun al crnii se datoreaz unui aminoacid: acid glutamic. Gustul Vegetei este dat de acidul glutamic sau de glutamatul de Na . Acidul glutamic este un neurotransmitor, alturi de acetilcolin, noradrenalin (fiind mediatori chimici). n stri de stress, neuronii care produc acid glutamic, l produc n exces, n cantiti att de mari nct omoar neuronii cu care fac sinaps. ). Acidul glutamic n exces are efect NEUROTOXIC. Grsimile confer i saietatea alimentelor, pentru c staioneaz mai mult n stomac. (Senzaia de foame apare cnd stomacul este gol, cnd concentraia de glucoz n snge tinde s scad. Concentraia de glucoz obinuit este de 100mg/100 ml snge. ROLUL PROTEINELOR Proteinele reprezint cea mai mare proporie din compoziia celulelor. Sunt macromolecule formate din aminoacizi legai prin legturi peptidice (prin nlturarea unei molecule de ap ntre gruparea carbonat a unui aminoacid i gruparea NH2 a aminoacidului alturat). Exemplu: NH2 CH2 COOH GLICOCOL (GLICERIN) NH2 CH2 COOH HNH CH2 COOH NH2 CH2 CO - NH CH2 COOH legtur peptidic Numrul aminoacizilor care intr n compoziia proteinelor este de aproximativ 20, dar ntr-o singur celul animal pot s fie 1000 de proteine diferite. Din punct de vedere alimentar, aminoacizii sunt de dou feluri: aminoacizi eseniali (pe care organismul uman nu i poate sintetiza, i care trebuie s fie coninui n hran), aminoacizi neeseniali (pe care organismul uman i poate sintetiza). AMINOACIZI ESENIALI AMINOACIZI NEESENIALI ARGININA ALANINA FENILALANINA GLICINA HISTIDINA ACIDUL ASPARTIC LIZINA ACIDUL GLUTAMIC LEUCINA CISTEINA IZOLEUCINA TIROZINA METIONINA SERINA TREONINA TIRONINA VALINA 243
PROTEINELE ALIMENTARE se clasific dup coninutul n aminoacizi eseniali n: PROTEINE COMPLETE, cu valoare biologic ridicat, care conin toi aminoacizii eseniali n cantitate adecvat. Acestea sunt de origine animal: lapte, carne, organe, ou; PROTEINE INCOMPLETE, cu valoare biologic sczut, sunt proteine de origine vegetal: mazre, fasole, gru. Proteinele din gru au deficit de lizin dar au n cantitate mare, metionin. Proteinele vegetale care, prin amestec, i completeaz deficitul n aminoacizi eseniali se numesc proteine complementare i sunt la fel de valoroase ca proteinele complete. Astfel, vegetarismul este posibil sub aspectul aprovizionrii organismului cu aminoacizi eseniali. De asemenea, dac la ciorbe se adaug o anumit cantitate de carne, se asigur coninutul de aminoacizi eseniali. ECHILIBRUL PROTEIC - BILANUL AZOTAT n studiul echilibrului energetic se disting cele trei situaii: VEA = CEO GC constant; VEA > CEO GC crete; VEA < CEO GC scade . In cazul echilibrului proteic : Este cunoscut c : La 6,25 g proteine corespunde 1 g azot Un adult are nevoie zilnic de aproximativ 100 150 g proteine Dac 6,25 g proteine --------- 1 g N 150 g proteine--------- 25 g N 1. ECHILIBRUL AZOTAT 25 g N ingerat = 25 g N ureic La adult : Cantitatea de N din proteinele ingerate (CNPI) fa de cantitatea de N rezultat n urma degradrii proteinelor i eliminat ca uree, prin urin, transpiraie (CNPD), sunt egale. 2. BILANUL AZOTAT POZITIV: CNPI>CNPD x g N ingerat>y g N ureic Este specific la TINERI N CRETERE, N CONVALESCEN, la FEMEI NSRCINATE. Cantitatea de N din proteinele ingerate este mai mare dect cantitatea de N din proteinele degradate, aflat n uree. 3. BILANUL AZOTAT NEGATIV: CNPI<CNPD x g N ingerat<y g N ureic Este specific persoanelor n vrst, persoanelor nfometate. Metabolismul presupune Sinteze = anabolism A; si Degradare = catabolism C La tineri A > C; La maturi A = C (echilibru ntre procesele anabolice i catabolice) La vrstnici A < C (predomin catabolismul) La organismele n cretere este nevoie de proteine pentru formarea de noi celule, pentru cretere, repararea celulelor vechi, nlocuirea proteinelor degradate. La organismele adulte permanent se degradeaz proteine, se descompun n aminoacizi i trebuie nlocuite. O protein degradat poate fi o protein canal; o protein enzim, indispensabil, care trebuie nlocuit.
Cantitatea de proteine care o ingerm zilnic trebuie s fie de 100-150 g, dar cantitatea de proteine care se sintetizeaz n organism este de 400 g. Diferena de 300-250 g se sintetizeaz (n plus) pe baza aminoacizilor rezultai din proteinele degradate. 244
Durata de via a proteinelor difer n funcie de esut. Este cu att mai mic cu ct esutul este mai activ metabolic. La esuturi active durata de via a proteinelor este de 10 zile. Astfel sunt albuminele, globulinele, fibrinogenul din snge, proteinele din esutul hepatic, esutul muscular. La esuturi de structur durata de via a proteinelor este de mai muli ani. Acestea sunt esuturi slab active metabolic ca: esutul conjunctiv, cartilaginos, osos. (Ex. O proteina cu viaa lung este colagenul.) Lipsa unui singur aminoacid. mpiedic sinteza proteinelor, conform codului genetic, i duce la manifestarea bolilor. VALOAREA A NUTRIENILOR ENERGETICI DIN RAIA ALIMENTAR
n raia alimentar diferiii nutrieni trebuie s reprezinte: 1. glucidele 55% 2. proteine 15% 3. lipidele 30% (10% saturate/grasimi solide, 20% nesaturate-grasimi lichide) Uleiurile conin 2 acizi grai eseniali pe care organismul nu-i poate sintetiza: acidul linoleic i acidul linolenic cu C18. Exemple: Acid saturat C18 = acid stearic CH3 (CH2)16 COOH Acid nesaturat C18 = acid oleic CH3 - (CH2 ) 14 - CH = CH - COOH acid linoleic 2 legturi duble, acid linolenic 3 legturi duble ROLUL APEI N ORGANISM Apa este un nutrient alturi de nutrienii energetici (glucide, lipide, proteine), de minerale sruri minerale i vitamine. Apa reprezint, relativ constant, 60% din organism. Reglarea apei din corp se realizeaz prin intermediul senzaiei de sete. Reducerea coninutului de ap din corp prin transpiraie, respiraie, urin, provoac senzaia de sete. Nu exist receptori sensibili la scderea coninutului de ap din corp. n apa din corp sunt dizolvate sruri minerale. Ca urmare a pierderii apei din corp, crete concentraia de sruri n lichidele extra- i intracelulare, deci crete presiunea osmotic pentru care organismul are receptori osmoreceptori. Excitarea osmoreceptorilor determin senzaia de sete. Astfel de osmoreceptori se afl n hipotalamus , n centrul setei -structur nervoas situat la baza creierului. Deficientul de ap se regleaz prin apariia senzaiei de sete, care se realizeaz prin excitarea osmoreceptorilor din hipotalamus. La unii vrstnici, centrul setei se poate distruge (neurodegenerescen) i nu mai percep senzaia de sete i sufer de deshidratare grav. Rolul apei n organism: 1) solvent pentru multe substane (glucoz, sruri minerale) pe care le i vehiculeaz n corp 2) mediu n care se desfoar reaciile metabolice (chimice) 3) este reactant n unele reacii chimice (degradarea grsimilor). 245
Digestia, degradarea grsimilor TRISTEARINA CH2-O-CO-(CH2)16-COOH | | CH2-O-CO-(CH2)16-COOH GLICEROL + ACID STEARIC CH2-OH | | CH2-OH 4) Apa vehiculeaz cldura n corp de la organele termogenetice (productoare de cldur) (ficat, muchi) la organele termolitice (pierd cldura) (piele, aparat respirator) Proveniena apei din organism: din surse externe (ap, sucuri, fructe, iaurt) i din surse metabolice. Apa metabolic: 100 g lipide furnizeaz 107 g ap metabolic 100 g glucide furnizeaz 56 g ap metabolic 100 g proteine furnizeaz 40 g ap metabolic
ROLUL MINERALELOR N ORGANISM Pentru ntreinerea vieii sunt necesare 26 elemente chimice, din totalul de 109 elemente chimice cunoscute, aspecte demonstrate de experienele efectuate pe gini, obolani etc. Oxigenul, Carbonul, Hidrogenul i Azotul, fiind componeni ai substanelor organice din structura corpului i a apei, reprezint 96% din totalul elementelor chimice. 7 Macroelemente macrominerale: Ca, P, Na, Cl, K, Mg, S reprezint 4% din elementele chimice, fiind necesare n hrana zilnic n cantitate de peste 100 mg. 15 Microelemente microminerale: Fe, J, F, Se, Zn, Cu, Co, Cr, sunt necesare n cantiti foarte mici, de cteva mg sau g (1 mg = 1000 g). ROLUL MACROELEMENTELOR Ca, P, Na, Cl, K, Mg, S CALCIUL reprezint 2% din greutatea corpului; este prezent n cantitatea cea mai mare. Din totalul Calciului din organism: 99% este n structura oaselor i dinilor, iar 1% intr n lichidul intracelular i n lichidele extracelulare (lichide intercelulare, plasma sanguin, lichidul cerebrospinal) ale corpului. Ca i P formeaz n oase srurile fosfocalcice. n structura oaselor i dinilor mai intr i Na, Mg, F. Ca i P fixate n oase i dini, le confer trie, dar sunt nlocuite pe parcursul unui an, printr-un proces fiziologic continuu, difereniat n funcie de vrst: la copii, sunt nlocuite n procent de 100 %, iar la aduli, sunt nlocuite n procent de 20 % ntrun an. Lipsa calciului n alimente este foarte periculoas, ducnd la apariia rahitismului, la copii, sau a osteomalaciei - decalcifierea oaselor, la aduli. Mecanismul de autoreglare a concentraiei de calciu n snge. Meninerea concentraiei de calciu n snge, prin mecanismul de autoreglare, se face la valori de : 10 mg 0,2 mg / 100 ml plasm. 246
a) Deficitul de Ca din snge, la aduli, duce la secreia de PARATHORMON, care stimuleaz eliberarea Ca din oase i, prin intermediul VITAMINEI D, stimuleaz absorbia Ca spre snge, la nivelul intestinului. PARATHORMONUL=hormonul hipercalcemic, stimuleaz concentraia Ca din snge, prin 3 ci: 1-prin stimularea eliberrii calciului din oase; 2-prin intermediul VITAMINEI D, care stimuleaz absorbia calciului din intestin n snge; 3-stimulnd reabsorbia Ca din urina primar la nivelul rinichiului. Surse de Calciu sunt: 500 ml lapte / zi pentru adult i 750 ml lapte / zi pentru copii; varza, conopida, castraveii, mazrea, fasolea. Surse de Fosfor: sunt n laptele de vac i alte alimente, care ns pot conine fosfor n exces, foarte duntor, provenind din ngrminte chimice, ape carbogazoase, colorani, conservani, aditivi pentru gust, din alimente. Singurul aliment srac n fosfor este laptele de mam. MECANISMELE DE REGLARE A CONCENTRAIEI DE Ca i P din snge sunt puternic influenate de PRODUSUL FOSFOCALCIC= produsul concentraiilor Ca i P din snge. Ca ~ 10 mg %, P 3,3 mg %, PRODUSUL FOSFOCALCIC = 33 mg %. Acesta poate s creasc pn la 40% prin creterea coninutului de P, fr s afecteze organismul. Cnd ns aceast valoare este depit, organismul pierde Ca prin urin i concentraia de Ca din snge scade. Cnd concentraia de Ca din snge scade sub 9,2 mg % apar efecte fiziologice negative: manifestrile lipsei de calciu fiind contraciile musculare spontane. ROLUL CALCIULUI N LICHIDELE CORPULUI: - coaguleaz sngele (lipsa Ca determin hemoragii); - n coagularea laptelui; - n mecanismul transmisiei nervoase la nivelul sinapselor; - necesar n cuplarea excitaiei cu contracia la fibrele musculare. METABOLISMUL CALCIULUI - ECHILIBRUL CALCIULUI La aduli : Ca ingerat = Ca eliminat (prin urin); La copii: Ca ingerat > Ca eliminat (oasele se ntresc); La vrstnici: Ca ingerat < Ca eliminat (demineralizarea oaselor, osteoporoz). Prevenirea osteoporozei: prin alimente bogate n Ca , eforturi fizice, vitamina D. La femeile ntre 45-55 de ani, una din dou sufer de osteoporoz, iar la brbaii ntre 55 65 de ani, unul din opt, sufer de osteoporoz. SODIUL este un macromineral necesar zilnic n cantitate de 2 g, luat ca NaCl, din 3 g de sare. Excesul de sare din alimentaie este una din cauzele hipertensiunii arteriale (HTA). La romni i n Europa se consum aproximativ 6 g de NaCl /zi. CLORUL. Cantitatea de Clor necesar zilnic este de 1 g. POTASIUL este necesar zilnic n cantitate de 2g, alimentele avnd coninut adecvat de K. MAGNEZIUL intr n compoziia oaselor; este activator a foarte multe enzime catalitice n reaciile biochimice. (Toate enzimele au natur proteic; toate reaciile metabolice sunt catalizate de enzime.) Surse de magneziu sunt: mazrea, fasolea, carnea, tegumentul boabelor de gru (din care, prin mcinare se nltur 80 % din Mg coninut).
247
CAUZELE DEFICITULUI DE ELEMENTE CHIMICE N ORGANISM sunt: carena din alimente; - imposibilitatea absorbiei la nivelul intestinului; - pierderi excesive din organism -prin urin (n diabet zaharat, insipid); - dac se consum proteine n exces: pierderi - prin transpiraie. ROLUL ELEMENTELOR N GENERAREA PRESIUNII OSMOTICE
Na+ i Cl se gsesc n concentraie mai mare n lichidele extracelulare. (n lichidul intracelular predomin K+). Sngele cuprinde : - 55 % plasm sanguin; - 45 % elemente figurate(globule roii, globule albe, trombocite). Presiunea osmotic a lichidelor corpului are rol n asigurarea echilibrului hidroelectrolitic. n organism funcioneaz mecanisme care asigur meninerea n concentraie constant a mineralelor (Na, Cl, K) i a apei, datorit hormonului ALDOSTERON, produs de cortexul suprarenal. Dac hormonul este deficitar, organismul pierde prin urin, la nivelul rinichiului, n primul rnd Na, apoi Cl i ap, ceea ce duce la scderea volumului sngelui, viaa fiind ns incompatibil cu scderea volumului sngelui sub 7 % din greutatea corporal, adic sub aproximativ 5 l. n generarea presiunii osmotice mai au rol Ca2+, Mg2+, HCO3 etc. Cantitatea de Ca necesar zilnic n alimente este de 1200 mg. HCO3are rol preponderent n transportul CO2 de la esuturi la plmni. ROLUL FIERULUI: 1 intr n compoziia hem - ului din globulele roii hematiile, conferind culoarea roie a acestora. Hem-ul este parte a hemoglobinei, n care globina este o protein. 2 intr n compoziia mioglobinei, n celulele-fibrele musculare. Hemoglobina transport O2 de la plmni la esuturi. Mioglobina are afinitate mai mare fa de O2 dect hemoglobina, preia O2 de la la hemoglobina din snge, i l pune la dispoziia fibrelor musculare, mari consumatoare de O2 3 intr n compoziia citocromilor =enzime pt eliberarea energiei n organism. 4 intr n compoziia catalazei enzim care catalizeaz degradarea apei oxigenate H2 O2 la ap metabolic i O2 . Peroxidul de hidrogen H2O2 se produce permanent, este foarte toxic dar este degradat de catalaz: H2O2 2H2O + O2 Gena sintezei de catalaz, ca orice gen responsabil pentru sinteza de proteine, inclusiv enzime, poate suferi alterri mutaii genetice, cum sunt cele produse la vrstnici, afectnd sinteza normal a catalazei. Ca urmare apa oxigenat nu mai este descompus i are efect toxic, formndu-se: H2O2 2 OH , substan foarte toxic deoarece atac acizii nucleici, proteinele, lipidele, producnd disfuncii celulare, ducnd la mbtrnire sau la mbolnvirea organismului. Fierul se gsete n organism n cantitate de 5 g din care: - 3,2 g n snge, - 1,8 g n ficat, mduva roie a oaselor. n ficat se stocheaz Fe i vitaminele liposolubile A, D, E, K, substane extrem de importante pentru organism.
248
Prezena fierului n organism se exprim i procentual, fiind repartizat: 73,4 % 70 % n snge 3,2 % n mioglobin 0,1 % n citocromi 0,1 % n catalaz 26,6 % Stocat n ficat i mduva roie a oaselor Sursele de fier pentru organism sunt: de origine animal: ficat i carne ( fiind prezent n compoziia celulelor musculare, n mioglobin, citocromi, catalaz); de origine vegetal: boabe de gru, mazre, fasole, NUCI (nucile fiind surse importante i pentru alte elemente minerale, vitamine, proteine, lipide, glucide); Necesarul zilnic de fier este difereniat, fiind de: - 10 mg Fe / zi la dup 45 55 de ani - 15 mg Fe / zi la fertile - 30 mg Fe / zi la gravide. Fe de origine animal din compoziia hemoglobinei i mioglobinei Fe hem. Fe din compoziia catalazei, citocromilor Fe nonhem. n carne:-Fe hem=40%-din care 23% se absoarbe la nivelul intestinului,caFe2+. -Fe nonhem = 60 % - din care 3 % se absoarbe la nivelul intestinului. Proporia de Fe nonhem poate fi crescut de la 3 % la 8 % de Vitamina C . Fe de origine vegetal este Fe nonhem. Fe nonhem din alimente este Fe 3+ i necesit convertirea n Fe 2+ prin reacia cu HCl din sucul gastric, rezultnd compui feroi cu Fe 2+ Lipsa Fe din organism este cauzat de lipsa lui din alimente sau de faptul c nu este absorbit la nivelul intestinului. Carena de fier se manifest prin paliditate, oboseal care se instaleaz foarte repede. COBALTUL intr n compoziia VITAMINEI B 12 (cobalamin), prezent numai n alimentele de origine animal, carne, lapte. Vegetarienii au nevoie de suplimente de vitamin B 12. n organism nu se gsete sub form ionic. CUPRUL de obicei nu lipete din alimente, dect n unele zone cu sol srac n Cu. Simptomele carenei de Cu sunt paliditatea i oboseala repid, deoarece Cu are rol n sinteza HEM ului. ZINCUL intr n compoziia a o serie de enzime ca: PEPTIDAZELE (care degradeaz peptidele la aminoacizi); - ANHIDRAZA CARBONIC (care degradeaz H2 CO3 CO2 +H2O) CROMUL este necesar pentru ca INSULINA s-i exercite efectul maxim de introducere a glucozei n celule. IODUL este necesar zilnic n cantitate foarte mic de cca. 150 g, fiind preluat din sarea de buctrie (NaJ). n unele zone muntoase, ndeprtate de mare, lipsete iodul, zonele fiind numite zone guogene, cum sunt cele din Munii Apuseni, Munii Gutiului. Iodul intr n compoziia hormonilor tiroidieni T 3 = triiodotironina, T 4 = tiroxina (tetraiodotironina). Precursorul hormonilor tiroidieni este aminoacidul TIROZINA. 249
Rolul T 3 i T 4 este : 1 n stimularea sintezei proteinelor, n cretere, n nlocuirea proteinelor uzate; 2 n stimularea dezvoltrii sistemului nervos; 3 n stimularea arderilor(oxidrilor), are rol n eliberarea energiei n organism. Dac hormonii tiroidieni lipsesc, la copii are loc ntrzierea mintal i creterea. n situaia de HIPERTIROIDISM arderile sunt intense, temperatura corpului mai ridicat. n situaia de HIPOTIROIDISM arderile sunt lente. Creterea n volum a glandei tiroide duce la apariia guei. Gua endemic este cauzat de deficitul de iod. Tiroida are doi lobi formai din foliculi tiroidieni. n absena iodului, hormonii tiroidieni nu se pot sintetiza. Ca efect, producia de HRTSH i TSH crete. TSH ul stimuleaz creterea n volum a celulelor foliculilor tiroidieni i a numrului lor, formndu-se gua. H.T. Hipotalamus H.R.T.S.H. Hormon eliberator de hormon tirostimulator ce stimuleaz sinteza i eliberarea de hormoni din H.A. H.A. Hipofiza anterioar T.S.H. Hormon tirostimulator TIROIDA T3 T4 T.S.H. - Hormonul tirostimulator este transportat pe calea sngelui la tiroid i stimuleaz sinteza i eliberarea T 3, T 4, n snge. Cnd concentraia lor din snge ajunge la un anumit nivel, se inhib sinteza i eliberarea de HRTSH din HT- Hipotalamus i de TSH din HA- Hipofiza anterioar.. SELENIUL intr n compoziia GLUTATION PEROXIDAZEI, enzim care degradeaz apa oxigenat i derivaii ei , care au efect oxidant, distrugnd acizi nucleici, proteine, lipide. Seleniul are efect antioxidant, ncetinete mbtrnirea. Deficitul de seleniu duce la : necroz hepatic(moartea celulelor hepatice); distrofie muscular (distrugerea structurii musculare). Cantitatea de seleniu necesar zilnic este de 70 g. n cantitate mare de 1 mg / zi, timp de 2 ani, are efect toxic. Tot efect antioxidant are i VITAMINA E , care fixeaz apa oxigenat i radicalii derivai din ea i i neutralizeaz. VITAMINELE. Vitaminele sunt necesare n cantiti de cteva mg sau g / zi. Rolul vitaminelor este cunoscut de la nceputul secolului XX. Numele vitamin este impropriu deoarece nu toate vitaminele conin amine. Cu excepia vitaminei A, celelalte vitamine se distrug repede n alimente, chiar n congelator i cu att mai mult la fierbere, la temperaturi de 70 80 oC prin pregtirea mncrii. Vitaminele se clasific n 2 categorii : -1- VITAMINE LIPOSOLUBILE : A, D, E, K. Pentru absorbia lor sunt necesare srurile biliare, ca i pentru absorbia grsimilor, de unde rezult c insuficiena hepatic atrage incapacitatea absorbiei vitaminelor liposolubile. Organismul localizeaz vitaminele liposolubile n ficat, rinichi. Organismul rezista la lipsa lor din hran timp de o lun, chiar mai mult.
250
-2- VITABINE HIDROSOLUBILE : B 12, B 1, B 2, B 6, PP, C, acid folic, acidul pantotenic, biotina B 12 =cobalamina (singura greu solubil i n ap, absorbia dureaz 1 h) B 1 = tiamina B 2 = riboflavina B 6 = piridoxina sau piridoxal PP = nicotinamina sau acidul nicotinic Vitamina C = acidul ascorbic acidul folic , acidul pantotenic, biotina Vitaminele B 1, B 2, PP sunt coenzime ale unor enzime care au rol n eliberarea energiei n organism. (Enzimele sunt alctuite: unele numai dintr-o parte proteic, altele din parte proteic i o coenzim neproteic.) VITABINELE HIDROSOLUBILE Vitamina B 1 = tiamina. Vitamina B 1 este coenzim a decarboxilazei acidului piruvic. n lipsa vit. B 1, acidul piruvic nu poate fi degradat, se acumuleaz n celule, este toxic, producnd instalarea oboselii, lipsa de energie. Acidul piruvic, n prezena enzimei se degradeaz la CO2+H2O i furnizeaz 38 mol. de ATP. (Glucoza elibereaz 2 mol. de ATP): 2 mol ATP 38 mol ATP GLUCOZA acid piruvic CO2 + H2 O (produs intermediar) Lipsa vitaminei B1 cauzeaz o boal foarte grav: Beri Beri, frecvent n trecut la popoarele care consum orez decorticat. Simptomele sunt: senzaia de oboseal, dureri de cap i pe traiectul nervilor, paralizii. Susele de Vitamina B 1 sunt: coaja boabelor de gru, produsele de origine animal, vit.B1 fiind coenzima implicat n degradarea glucozei = sursa preferat de energie a celulelor. Vitamina B 2 = riboflavina. Din ea deriv cteva coenzime: FMN = FLAVINMONONUCLEOTID FAD=FLAVINADENINDINUCLEOTID=coenzim a enzimei din ciclul citric. Simptomele lipsei de vit. B 2 sunt: - oboseal;- leziuni la colurile gurii i nasului; - n cornee apar vase de snge supranumerare; - limba crete n dimensiune (glosit). Surse de vit. B 2: laptele pstrat n vase nchise. Radiaiile UV distrug vit. B2. Vitamina PP = nicotinamina sau acidul nicotinic. Intr n compoziia NAD = NICOTINAMIDADENINDINUCLEOTID, coenzim a unor enzime din ciclul citric (= ciclul lui Krebs sau ciclul tricarboxilic). Simptomele lipsei de vit.PP sunt: dermatoze, diaree, demen, chiar deces. Surse de vit.PP: produse animale. Vitamina B 6 = piridoxina sau piridoxal are: -rol n metabolism, ca i coenzim a unor enzime implicate n sinteza de aminoacizi neeseniali, ca TRANSAMINAZE I DECARBOXILAZE; -rol n metabolismul triptofanului. -n prezena vit. B 6, din TRIPTOFAN se sintetizeaz SEROTONINA= substan cu aciune vasomotoare, care determin VASODILATAIA i VASOCONSTRICIA vaselor sanguine. Acidul folic are rol n sinteza proteinelor i acizilor nucleici, n creterea i repararea esuturilor. Este necesar n sinteza HEM ului. n carena de acid folic, vit C, vit. B 12 apar anemii. + Vitamina C + Vitamina B 12 ACIDUL FOLIC INACTIV ACID FOLIC ACTIV sinteza HEM - ului
251
Acidul pantotenic i biotina sunt vitamine larg rspndite, carenele sunt rare. Vitamina C = ACIDUL ASCORBIC, are rol n: -sinteza COLAGENULUI (protein din structura dermei, esutului conjunctiv, inclusiv osos, n spaiile dintre celule ); -absorbia FIERULUI; - inhibarea reaciei dintre NITRII i AMINE, din colon, cu efect cancerigen: + Vitamina C NITRII + AMINE ( HISTAMINE ) // NITROZAMINE ( cancerigene, din COLON ) Simptomele n carene de Vitamina C, sunt: - producerea de hemoragii din cauz c pereii capilarelor devin fragili; -leziuni la gingii, cderea dinilor, scderea rezistenei pielii, boala: SCORBUT. VITAMINELE LIPOSOLUBILE VITAMINA A - ANTIXEROFTALMIC (xero = uscare) are rol n: -sinteza pigmenilor vizuali (rodopsina, iodopsina). Carena duce la pierderea temporal a vederii la lumin puternic sau slab. -Sinteza proteinelor, n creterea i refacerea esuturilor. n caren, cele mai afectate esuturi sunt cele n care nmulirea celulelor este intens: ESUTURILE EPITELIALE: epiderma (esut multistratificat), epieliul intestinal, epiteliul cilor respiratorii, endoteliul vascular, corneea transparent. Celulele din aceste esuturi acumuleaz KERATINA (protein dur) i se ntresc. La ochi poate provoca orbire (corneea transparent devine opac- xeroftalmie). Surse de vitamina A sunt n: ficat, rinichi. Provitamina A are sursa n morcovi, legume i fructe colorate glbui, unde pigmenii carotenoizi sunt precursori de vit. A . n morcovi se gsete cel mai important precursor de vit. A : carotenul. Prin fierberea alimentelor bogate n pigmeni carotenoizi se favorizeaz eliberarea acestora din celule. VITAMINA D - ANTIRAHITIC este implicat n absorbia calciului. Acioneaz asemenea hormonilor ca hormon D = vitamina D activ. Se sintetizeaz n 3 etape: n piele; n ficat; n rinichi. Dac exist afeciuni ale acestor organe, sinteza de vit. D este afectat. Sursele de vit.D sunt: uleiul de pete (n exces este toxic). VITAMINA K -ANTIHEMORAGIC . Se gsete n frunzele unor legume: spanac, varz; are rol n: sinteza unor factori ai coagulrii (PROTROMBINA, sintetizat de flora microbian din intestin ); n sinteza florei intestinale;nu strbate bariera placentar, copii nou nscui, n prima sptmn, nu au flor bacterian i dac au hemoragii, trebuie s li se administreze vit. K. CARACTERISTICILE UNEI BUNE DIETE Trebuie s corespund din punct de vedere energetic VEA=CEO (ex. 2500 kcal=2500 kcal, cosa6000 kcal) Trebuie s conin toi nutrienii necesari organismului (cca 50) din care: Vitamine : 15; Minerale : 26; Lipide Proteine : 20 aminoacizi (10 aminoacizi eseniali); Glucide (glucoz, fructoz, lactoz, etc). Valoarea energetic a alimentelor (VEA) trebuie s fie satisfcut astfel: 55% glucide (amidon); 30% lipide 20% lipide nesaturate, 10% lipide saturate; 15% proteine.
252
Raia alimentar trebuie s fie format din alimente diverse pentru a satisface necesarul de nutrieni. Unele alimente pot conine substane toxice (prin contaminare), de care ns, organismul se poate dezintoxica dac nu le consum zilnic. Alimentele se pot grupa n 5 mari categorii: 1. Cereale i derivate din cereale. Grul conine: - amidon, nutrientul cel mai important din punct de vedere energetic; - Vitamine: grupul B, vit. E liposolubil; - Minerale: 80% din Mg se pierde prin mcinare; - fibre alimentare 2. Laptele i derivatele lui aliment complex: Ca (500 ml/zi), Vitaminele B2 , A, B12 3. Carnea i alternativele ei (mazre, fasole, soia, linte) Legume sunt surse incomplete de proteine ce se completeaz cu cele din gru: Proteinele din gru sunt srace n LIZIN i bogate n METIONIN, iar proteinele din leguminoase (din mazre, fasole etc.) sunt bogate n LIZIN i srace n METIONIN. Porumbul este srac n LIZIN i n TRIPTOFAN. Carnea este un aliment complex, coninnd: - proteine complete = proteine cu valoare energetic ridicat , toi aminoacizii eseniali n cantiti adecvate, - Fe (culoarea roie a muchilor, chiar fr snge, este dat de Fe din compoziia mioglobinei din fibrele musculare), - Mg, Zn, - Vitaminele B1, B2, PP, B12 (B12 se gsete numai n alimentele animale, de aceea vegetarienii trebuie s ia suplimente de vit.B12). n organism se acumuleaz rezerve de B12 n ficat i acestea ajung civa ani.Carena - avitaminoza B12 duce la anemie grav. Anemia este cauzat de un complex de factori: lipsa Fe din alimentaie, lipsa vitaminei C, lipsa HCL din sucul gastric, lipsa B6, a acidului folic, simptomele anemiei fiind: oboseala, paliditatea. 4. Legumele i fructele surse importante de vitamine i sruri minerale; 5. Grsimile i alcoolul trebuie consumate cu moderaie. ntr-un regim alimentar corect sunt recomandate 3 mese zilnice pentru aduli i 5 mese pentru copii (cu 2 gustri substaniale i nu bogate n glucide, care determin cariile). O singur mas zilnic, chiar dac este adecvat din punct de vedere al nutrienilor sau energetic, este ne recomandat pentru c suprancarc mecanismele de digestie, absorbie, metabolism i excreie. Atenie deosebit trebuie acordat tinerilor n cretere i femeilor nsrcinate sau care alpteaz pentru asigurarea necesarului de Ca, Fe, proteine de calitate i vitamine. Felul cum evolueaz sarcina se poate aprecia dup evoluia n greutate a mamei. nainte de natere, femeia are cu 11 kg mai mult fa de normal (3,5 kg reprezint ftul). La sfritul primului trimestru de sarcin, femeia are in plus 1,4 kg, apoi, n fiecare sptmn cte + 0,4 kg (38 sptmni). Femeile subnutrite pot face edeme se umfl minile i picioarele) Copii sub 2,5 kg sunt sub greutate.
253
METABOLISMUL
Cuprins: Metabolismul energetic. Metabolismul bazal. Factorii care influeneaz cheltuielile energetice
METABOLISMUL ENERGETIC DETERMINAREA INTENSITATII METABOLISMULUI ENERGETIC Organismele vii sunt traversate de un flux permanent de materie i energie. Energia provine din substanele alimentare, pe dou ci: 1. n urma reaciilor hidrolitice, n procent de 1% (ex. : cele care se refer la degradarea glicogenului, amidonului, lipidelor, proteinelor) i 2. n urma reaciilor de oxidoreducere, din lanul respirator, n procent de 99%. Energia rezultat este depozitat temporar n substanele fosfat-macroergice: ATP-ul i CP =creatin fosfatul. Energia CP este utilizat prin transferarea ei la ATP. Organismul apeleaz la rezervele de energie depozitate n ATP pentru contracia muscular, reabsorbia la nivelul tubilor uriniferi, (aceste dou procese fiind cele mai mari consumatoare de energie ale organismului), absorbia intestinal, sinteza substanelor (proteine etc,) Fluxul de energie care nsoete fluxul de substane din organism se numete metabolism energetic. Consecutiv desfurrii diferitelor activiti rezult energie caloric, astfel c, producia de cldur reprezint un indicator preios al intensitii metabolismului intermediar, al intensitii arderilor. Metabolismul energetic - ME este energia care se elibereaz n organism n urma degradrii substanelor energetice (glucide, lipide, proteine, ATP). 1. METODA CALORIMETRIA DIRECTA Msurarea produciei de cldur presupune : determinarea energiei calorice. Intensitatea ME (IME) se exprim n Kcal i se raporteaz la 24h. Se utilizeaz aparatul numit calorimetru, compus din : - camer cu perei dublii, izolat termic de mediul exterior, - ntre perei circul ap printr-un sistem de conducte, - C = contor, la ieirea apei din conducte, pentru determinarea cantitii de ap ce circul prin sistem, - T1 termometru la intrarea apei n conducte, - T2 termometru la ieirea apei din conducte, - D = dispozitiv din interiorul calorimetrului, cu H2SO4 . H2SO4 capteaz vaporii de apa rezultai prin respiraie si transpiraie. Cantitatea de ap rezultat din transpiraie i respiraie se determin prin diferena dintre greutatea acidului sulfuric nainte i consecutiv testrii.
254
Temperatura subiectului se determin cu un termometru. IME se calculeaz dup formula : (T2 T1) x (V H2O + G H20) x 0,568 DT n care : G H2O = greutatea apei rezultat prin transpiraie-respiraie n timpul determinrii V H2O = volumul de ap care a circulat prin sistem n timpul determinrii, 0,568 Kcal = constant reprezentnd cldura necesar pentru evaporarea a 1g H2O, DT = diferena de temperatur corporal nregistrat n timpul testrii subiectului. Camerele calorimetrice pot avea dimensiuni diferite, pentru determinarea IME n diferite activiti. Energia cheltuit de organism este de dou categorii: 1)energia utilizat pentru ntreinerea funciilor vitale n condiii de repaos i corespunde metabolismului energetic bazal; 2) energia utilizat pentru desfurarea diferitelor activiti: munca intelectual, munca fizic (uoar, moderat sau grea), care necesit cheltuieli de energie diferite. METtotal = MEBbazal + MEcorespunzator dif. activitati 2.METODA CALORIMETRIC INDIRECT Se realizeaz prin: 1. Determinarea valorii energetice a alimentelor (a bilantului alimentar), 2. Determinarea schimbului de gaze. DETERMINAREA VALORII ENERGETICE A ALIMENTELOR (A BILANTULUI ALIMENTAR) Dac omul desfoar acelai gen de activiti ntr-un interval lung de timp, pstrndu-i greutatea corporal constant, intensitatea metabolismului energetic se poate aprecia dup valoarea energetic a cantitii de alimente consumate zilnic. Se are n vedere, n acest calcul, faptul c fiecare aliment are o anumit valoare caloric. Prin arderea n organism ca i n bomba calorimetric a unui g de glucide rezult 4,1 kcal, ap i dioxid de carbon; iar a unui g de lipide 9,1 kcal i dioxid de carbon. Prin arderea unui g de proteine n bomba calorimetric rezult 5,4 kcal, iar n organism 4,1 kcal n organism rezultnd i uree pe lng ap i dioxid de carbon. Se are n vedere, de asemenea, faptul c principiile alimentare nu sunt absorbite complet la nivelul tubului digestiv, o parte se pierde prin fecale, astfel c la calcularea valorii calorice se consider c valorile reale sunt: 4 kcal pentru glucide, 9 kcal pentru lipide, 4 kcal pentru proteine. Valoarea energetic a alimentelor poate fi o msur a intensitii metabolismului energetic cnd este egal cu cheltuielile energetice ale organismului i dac greutatea corporal se menine constant cnd zilnic se desfoar acelai gen de activitate. a) VEA = CEO b) VEA >CEO VEA nu este o msur a intensitii metabolismului energetic. Suplimentul se depune n organism glicogen lipide c) VEA < CEO nu este o msur a CEO. Numrul de calorii este asigurat din rezervele organismului. 255
Ex: Raia alimentar de 2500 Kcal se asigur de un consum necesar zilnic de: - lapte de vac (67 kcal/100 ml) 500 ml = 335 Kcal - pinea alb 200 g = 564 Kcal - ou (171 Kcal/100g ) 2 ou = 120 g = 205 Kcal - carne (pasre slab) 100 g = 128 Kcal - cartofi (89 Kcal/100g) 200 g = 178 Kcal - morcovi 200 g = 90 Kcal - ptrunjel rdcini 100 g = 53 Kcal frunze 25 g = 12 Kcal - paste finoase 100 g = 366 Kcal - unt 50 g = 403 Kcal - gris 100 g = 354 Kcal Total: 2690 Kcal > 2500 Kcal In aceast situaie, VEA>CEO, 2700 kcal depete cu 200 Kcal CEO care este de 2500 kcal, surplusul depunndu-se sub form de glicogen + grsimi. n cazul VEA < CEO, organismul apeleaz la glicogenul, lipidele i apoi la proteinele din rezervele sale. METABOLISMUL BAZAL ( MB ) Metabolismul bazal este metabolismul energetic ce corespunde situaiei n care organismul consum cea mai mic cantitate de energie i, deci, produce cea mai diminuat cantitate de cldur pentru ntreinerea funcionrii organismului la nivelul cel mai redus de activitate - n timpul somnului sau n anumite condiii standard stabilite: - repaus fizic - cu 24 ore nainte de determinare nu se face efort fizic, iar cu o jumtate de or nainte se st n poziie orizontal, cu musculatura relaxat; -repaus psihic, fr preocupare psihic, ntr-un spaiu linitit, linite, culoarea pereilor verde sau albastru; -repaus digestiv cu 24 ore nainte nu se consum proteine, iar ultima mas se ia cu cca. 12 ore nainte de determinare; -confort termic , adic 20 oC mbrcat, 30 oC dezbrcat. Valoarea MB se determin dup procedeul descris la ME i se exprim la greutatea corporal sau la suprafaa corporal. Valoarea MB este de aprox. 1 kcal/kg corp/or, deci la 75 kg este de 75 x 24 h = 1700 kcal Valorile MB variaz n funcie de greutatea, de nlimea - suprafaa corpului; de vrst:la copii este mai crescut dect la vrstnici; de sex-la femei sunt mai sczute la femei 34kcal/m2suprafa corporal/h,la brbai: 40 kcal/m2 suprafa corporal/h; de climat este mai crescut spre nord; de ritmul nictimeral - la animalele diurne este mai crescut ziua, iar la animalele nocturne este mai crescut noaptea; de diet - este mai sczut la vegetarieni. Valoarea MB este un indicator al strii de sntate. Crete foarte mult n hipertiroidism, cnd oxidrile celulare se decupleaz de fosforilarea oxidativ. ALCTUIREA RAIEI ALIMENTARE La alctuirea raiilor alimentare se au n vedere vrsta, sexul, greutatea corporal, condiiile geografice i felul activitilor prestate de subiect. Compoziia chimic i puterea caloric a alimentelor se iau din tabele. Activitile au fost grupate n 4 categorii, n raport cu energia consumat zilnic:
256
Categ. I.
Felul muncii Persoane care desfoar munc intelectual: profesori, medici, ingineri, cercettori, funcionari etc. Persoane care lucreaz n producia mecanizat: strungari, frezori, textiliti etc. Persoane care fac munc fizic lucrnd pe maini: tractoriti, excavatoriti etc. Persoane care fac munc fizic grea: hamali, cosai, la spatul pmntului etc.
La alctuirea raiilor alimentar e se are n vedere c : 1) puterea caloric a raiei alimentare s corespund consumului zilnic de energie. Valoarea energetic a alimentelor trebuie s fie repartizat proporional astfel: 55% glucide (amidon), 30% lipide (20% nesaturate, 10% saturate); 15% proteine. 2) propori a de pr oteine , lipide, glucide variaz n funcie de felul muncii pres tate: Coninutul n hr an (g / 24 h) al Categ. Proteinelor Lipidelor Glucidelor Total g (P) (L) (G) I. II. III. IV. 109 122 141 163 106 116 134 153 433 491 558 631 548 729 833 947
3) Organismul are nevo ie de proteine cu valoare bio logic complet (proteine care conin toi aminoaciz ii, cum este cazeina i lactoa lbumuna din lapte, avalbumina i ovovite lina din ou, albumina i mioz ina din carne). Proteine le d in cerea le, le guminoase (mazre, fesole ) nu conin toi aminoaciz ii esenia li i, de aceea , sunt considerate proteine cu va loare bio logic incomplet; 4) prin amestecarea prote inelor cu va loare b iologic complet cu ce le cu va loare bio logic incomplet se ridic va loarea b iologic a proteine lor cu va loare biologic incomplet cu mult peste media aritmet ic a componentelor. Astfe l, amestecul de 100 g carne i 200 g f in a lb are o va loare b iologic mai mare dect 300 g ca rne; 5) cu ct regimul a limentar este mai variat, cu att asigur mai b ine necesarul de substane hrnitoare; 6) un consum exagerat de grsim i, de proteine sau de glucide duce la perturbri metabolic e. Excesul de lipide cauzeaz acumularea de corpi cetonic i n organ ism, cel de proteine acumularea de amoniac i uree , iar ce l de gluc ide ncarc exagerat tubul digestiv i poate duce la diabet zaharat . Bibliografie selectiva: GHERGHEL PANTE, 2000. Fiziologie cu elemente de comportament.Casa crii de tiin. Cluj ROIORU CORINA, SEVCENCU CRISTIAN, PANTE GHERGHEL, 1995. Lucrri practice de fiziologie animal pentru uzul studenilor. Univ. Babe-Bolyai, Cluj-Napoca. STRUNGARU GR. POP MIRCEA, HELCO V., 1983. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic. Bucureti.
257
MODEL DE ALC TU IRE A RA IE I ALI MEN TARE P rodusul alime ntar Coninutul n prote ine , lipide , gluc ide (g) Cantitate a(g) 200 200 200 100 200 100 50 300 100 50 50 1550 de numire a Pine Mac aroane Carne vit B rnz Ou Zah r Dulc e a me re Cartofi Morc ovi Ptrunje l Ule i alime nte P 13,78 18,70 38,00 15,36 24,00 0,17 4,2 1,04 0,72 Total: 115,97 109,18 442,46 L 1,30 1,68 18,90 17,10 22,80 47,40 G 95,45 142,46 2,94 0,98 98,80 32,96 57,00 7,40 4,55 -
P ute rea c aloric kc al 459,8 675,4 331,6 234,1 314,4 405,5 108,8 250,8 34,6 21,6 44,0 3278,4
258
De numire a produs ului alime ntar ( 100 g ) Unt Ule i ve ge tal Ou Glbe nu de ou Mie re de albine Zah r Cacao Cioc olat Bomboane c u lapte Marme lad Halva Dulc e a de me re Dulc e a de fragi Dulc e a de zme ur Varz proaspt Varz fe rme ntat Conopid Ce ap ve rde Ce ap Re ve nt Salat Spanac Mc ri Castrave i Roii Past de tomate 30% Suc de tomate Dovlec i Fasole psti Gulii Cartofi Morc ovi Pstrnac Ptrunje l Ridic hi Sfec l Caise Portocale Struguri Vi ine Pe re Cpuni Lmi Zme ur Manda rine P rune Coac ze roii Coac ze ne gre P rune usc ate Me re Me re usc ate Suc de caise Suc de portoc ale
P rote ine g 12,00 15,36 0,34 20,06 5,10 2,64 14,03 0,34 0,34 0,34 1,44 0,80 1,76 1,04 2,00 0,40 1,28 2,96 2,40 0,80 0,80 4,08 0,85 0,80 2,16 0,64 1,40 1,04 1,12 1,44 0,96 1,20 0,51 0,77 0,60 0,85 0,34 0,85 0,51 0,85 0,77 0,60 0,85 0,85 3,40 0,43 2,38 0,43 0,60
Gluc ide g 0,49 77,24 77,24 98,90 38,19 51,30 74,77 73,25 43,42 65,93 73,49 69,64 4,51 1,79 4,42 3,74 8,93 2,55 3,06 2,89 3,06 2,04 3,23 17,68 3,06 6,55 5,44 10,71 19,00 7,40 9,27 9,10 4,17 8,84 10,98 8,19 14,58 12,87 11,16 8,82 9,27 9,18 9,00 12,60 10,08 12,06 62,10 10,08 63,36 14,35 13,78
Coninutul n kc al 874,7 881,7 157,2 321,2 318,1 405,5 413,6 548,6 396,1 300,3 508,9 217,7 298,6 286,9 24,4 10,6 25,3 19,0 44,8 12,1 17,8 24,0 22,4 11,6 16,5 89,2 16,0 30,1 31,5 46,2 83,6 34,6 42,6 43,2 21,0 41,2 47,1 36,7 62,2 56,3 47,2 39,6 40,1 41,1 40,1 54,1 44,8 52,9 268,6 43,1 269,5 60,8 59,0
259
Absorbia nutrienilor Funcia respiratorie. Producerea energi ei n organism. Lantul respirator. Glicoliza. Stocarea energiei n organism
Funcia digestiv i particularitile ei n seria animal Viaa pe Pmnt depinde de energia solar; cu ajutorul ei plantele sintetizeaz substanele organice din substanele minerale (fotosinteza): CO2 + H2O glucide. Pe Pmnt, prima verig a lanurilor trofice sunt plantele verzi, iar n zonele acvatice sunt bacteriile. Pe fundul oceanelor, n zonele vulcanice, au fost identificate comuniti foarte mari de animale, au fost descoperite foarte multe specii noi, total necunoscute. Deasupra acestor zone apa are o temperatura de aproximativ 350o, nu fierbe pentru c presiunea acolo este foarte mare. Unde temperatura apei este compatibil cu viaa (sub 40oC) este o populaie foarte mare de bacterii care oxideaz H2S i obin energia care servete la sinteza ATP. Aceste bacterii posed pe lng echipamentul enzimatic necesar sintezei ATP i echipamentul necesar sintezei enzimatice din CO2 i H2O. Existena acestor comuniti de animale depinde totui de energia solar pentru c bacteriile utilizeaz O2 (provenit din fotosintez) la oxidarea H2S. De asemenea, sunt importante ca surs de hran pentru unele animale care la rndul lor sunt mncate de alte animale, din lanul trofic. Animalele unicelulare se hrnesc cu bacterii i alge microscopice tot unicelulare. De exemplu, amiba preia hrana prin endocitoz, emite pseudopode n jurul hranei, care este cuprins ntr-o vezicul (vacuol) digestiv, ce se desprinde din membrana plasmatic, spre interiorul celulei. Cu particule mici de hran se hrnesc nu numai unicelularele ci i animalele mai mari la care hrana de baz este format de zooplancton i fitoplancton. Zooplanctonul este reprezentat de crustacee sub 5 mm. Balena are n cavitatea bucal un sistem de fanoane pentru filtrarea apei. Ea introduce n cavitatea bucal apa i apoi nchiznd gura, apa este expulzat i, cu ajutorul sistemului de filtrare, reine fito- i zooplanctonul. Cele mai multe animale pluricelulare (metazoare), consum particule mai mari de hran pe care le prelucreaz mecanic, le mrunesc i apoi, degradeaz macromoleculele nutrienilor pn la compui simpli, cu ajutorul enzimelor. Adaptri pentru ingerarea hranei la animalele pluricelulare Unele animale din grupe foarte diverse, rod hrana, o mestec, o sfie, etc. Mrunirea hranei este fcut de unele animale n cavitatea bucal iar de altele cu ajutorul unui stomac foarte puternic. De exemplu, unele psri au un stomac care funcioneaz ca o moar care macin i mrunete; pe lng stomac au i un stomac glandular care secret enzime pentru degradarea chimic a macromoleculelor. Animalele care au sursa de hran lichid, prezint adaptri complexe. Albinele consum nectar, dar i roua de man de afide.
260
Afidele (pduchi de plante) sug seva elaborat a plantelor, avnd aparatul bucal transforma ntr-o tromp foarte ascuit, pe care o introduc n frunze, n vasele liberiene, ce conin seva elaborat. Seva elaborat conine ap n care sunt dizolvate substanele sintetizate de frunze: substane dulci, glucide n cantitate foarte mare i proteine n cantitate foarte mic; ele trec prin tubul digestiv al afidelor i se exudeaz- elimin, depunndu-se pe frunze. Exudatele afidelor conin mult ap care, sub aciunea cldurii, se evapor i astfel crete coninutul n glucide a lichidului care rmne pe frunz, i care este recoltat de albine. Acestea prepar din el mierea de man, bogat n sruri minerale extrem de utile organismului, dar care nu este o hran suficient de bun pentru iernatul albinelor. Afidele se dezvolt ciclic, aprnd populaii mari i producie de miere de mam, tot la 5-7 ani. Pianjenii distrug insectele, care constituie prada lor, chiar dac au un schelet exterior chitinos (exoschelet). Peste insecta prins n plas, pianjenul i vars sucurile digestive care degradeaz proteinele i lipidele corpului insectei, apoi, extrage acest suc. In intestinul omului gsim adesea parazii (tenii, ascarizi), care nu au tract digestiv ci preiau substanele nutritive (glucoz, aminoacizi, acizi grai, vitamine, sruri minerale) prin peretele corpului lor, dar avnd metabolism anaerob, nu valorific integral aceste substane energetice absorbite. Unele animale se hrnesc cu snge (lipitori, nari, cpue, pduchi). Lipitoarea dispune de o substan anticoagulant n saliv care i permite s sug o cantitate mare de snge. Puii mamiferelor se hrnesc cu lapte (conine proteine, glucide, lipide, vitamine, sruri minerale), fiind un aliment complex. Laptele de mam conine 1 % proteine, laptele de mgar conine 1 % lipide, laptele de iepure conine 15% proteine, laptele de foc conine 50% lipide. Cea mai mare cantitate de glucide o conine laptele de cal, care poate s acumuleze pn la 7% glucide i nu mai mult, deoarece laptele este un produs de secreie, care nu poate avea o concentraie mai mare de glucide dect a sngelui. Laptele diferitelor specii nu este la fel de hrnitor. Cel mai hrnitor este laptele de foc, puiul avnd 20 kg la natere i este nrcat dup 4 zile, cnd ajunge la 40 kg. Sunt cteva specii de psri: porumbei, pinguin imperial care secret la nivelul guii, respectiv a esofagului, un lichid asemntor cu laptele, secreie stimulat de acelai hormon: prolactina. Avantajul hrnirii cu acest lichid este c puii pot fi hrnii chiar dac psrile adulte nu ar gsi o hran specific pentru ei. Digestia Digestia este un proces de degradare mecanic, pn la particule foarte mici, urmat de o degradare chimic enzimatic hidrolitic a macromoleculelor pn la monomeri simpli, cu ajutorul enzimelor. Dac macromoleculele pot fi insolubile n ap, monomerii lor sunt solubili, form n care se poate realiza absorbia intestinal. n lumea animal, digestia prezint dou forme. 1. Digestia intracelular, la animale unicelulare; 2. Digestia extracelular - n tubul digestiv, la animalele pluricelulare. La unele metazoare (ex. la hidr), coexist ambele forme de digestie. Rolul enzimelor i al vitaminelor n digestie. Digestia ncepe sub aciunea enzimelor n tractul digestiv i se desvrete n celulele din peretele tractului digestiv. Degradarea chimic se face cu ajutorul enzimelor. Enzimele sunt substane de natur proteic, unele coninnd i o component neproteic, aceasta putnd fi o vitamin, absolut necesar pentru activarea enzimei. De aceea unele vitamine sunt foarte importante. Toate reaciile chimice-metabolice din organism sunt catalizate de enzime. n lipsa unor vitamine componente ale enzimelor, anumite reacii nu se pot produce. Lipsa vitaminelor determin boli metabolice.
261
Fiecare enzim are un pH i o temperatur optim la care activitatea ei este maxim, respectiv, viteza reaciei pe care o catalizeaz este maxim iar produsul reaciei rezult n cantitatea cea mai mare. Valorile de pH i de temperatur sub nivelul celor optime, reduc activitatea enzimei. Majoritatea enzimelor sunt inactive la temperaturi peste 45oC. Exist cteva excepii: unele enzime care degradeaz proteinele din fructele de papaya sau ananas, i care rezist la temperaturi de 70-80 oC, motiv pentru care se utilizeaz la frgezirea crnii, dar i ele sunt distruse la temperatura de 100 oC. Toate enzimele digestive sunt hidrolitice. Exemplu: GLICOCOLUL legtur peptidic 2NH2 CH2 COOH H2O H2N CH2 CO NH CH2 COOH + H2O Exemplu: Lipaza TRIPALMITINA + 3 H2O 1 mol GLICEROL + 3 mol ACID PALMITIC Lipaza TRIPALMITINA + 3 H2O CH2OOC(CH2)14CH3 | CH OOC(CH2)14CH3 | CH2OOC(CH2)14CH3
GLICEROL ACID PALMITIC CH2O H + HOOC (CH2 )14CH3 | 3 molecule CHOH | CH2O H 1 molecul
DIGESTIA PROTEINELOR Proteinele sunt macromolecule formate din aminoacizi, cuprinznd n structura lor de la 100 la cteva mii de aminoacizi. n compoziia proteinelor naturale intr 20 de aminoacizi, dar din acetia rezult un numr extrem de mare de proteine vegetale i animale. Ex. : ntr-o singur celul animal pot fi 1000 de proteine diferite. Degradarea proteinelor se face cu ajutorul a dou categorii de enzime: endopeptidaze; exopeptidaze. ENDOPEPTIDAZELE catalizeaz hidroliza legturilor peptidice din interiorul lanurilor (catenelor) peptidice. 1. PEPSINA. Sub form de proenzim este produs de glandele gastrice. n cavitatea gastric, sub aciunea HCl din sucul gastric, la pH=6, se transform n pepsin. (pH-ul din sucul gastric este extrem de acid 2; iar n intestin la pH8, pepsina este inactivat). Pepsina hidrolizeaz legturile peptidice numai dintre anumii aminoacizi, din interiorul macromoleculelor proteice i astfel, dintr-o macromolecul proteic rezult doar cteva fragmente de lanuri peptidice. 2. TRIPSINA: este produs n pancreas sub form de tripsinogen. Ajunge n duoden, unde sub aciunea unei enzime (enterochinaz) d natere la tripsin. Pancreasul conine inhibitori ai enzimelor pe care le produce. n condiii patologice, enzimele pancreatice pot fi activate chiar n interiorul lui i distrug pancreasul pancreatit acut. EXOPEPTIDAZELE hidrolizeaz legturile peptidelor de la capetele lanurilor peptidice. Unele sunt sintetizate de pancreas . Altele sunt sintetizate de glandele digestive de la nivelul intestinului subire.
262
Macromoleculele proteice sunt degradate in mai multe faze: 1. intervine pepsina rezult mai multe lanuri peptidice, mai scurte. 2. intervine tripsina hidrolizeaz legturile peptidice din interiorul lanurilor scurte rezultate anterior, rezult lanuri i mai scurte. 3. exopeptidele hidrolizeaz legturile peptidice de la capete, rezult lanuri de doi aminoacizi-dipeptide, 4. dipeptidazele hidrolizeaz dipeptidele n cei 2 aminoacizi, fiind produse de glandele din structura intestinului subire - ENTEROCITE. Produii finali de digestie ai proteinelor, care se absorb sub aceste forme, sunt: - aminoacizii, dipeptidele, tripeptidele. n ENTEROCITE, di- i tripeptidele sunt degradate la aminoacizi. Dipeptidele 2 aminoacizi; Tripeptidele 3 aminoacizi. Epiteliul intestinal este format dintr-un singur strat de celule numite enterocite, care au form columnar, la polul apical (dinspre lumen) sunt prevzute cu microviloziti. DIGESTIA GRASIMILOR Enzima care degradeaz grsimile este produs n cantitatea cea mai mare de pancreas: lipaza pancreatic. Sucul intestinal conine o lipaz mult mai slab. Digestia grsimilor implic emulsionarea lor (n particule fine): cu un detergent propriu organismului: srurile biliare, produse de ficat i prin micri mecanice ale intestinului subire, micri de pendulare: contracii alternative ale musculaturii longitudinale din structura anselor intestinale. Produii de degradare a lipidelor sunt: glicerol; -acizi grai; - monogliceride, care se solubilizeaz n ap cu ajutorul srurilor biliare i astfel pot fi absorbii. Ex.: o particul a grsimilor este ceara = ester al unui acid gras cu caten lung. Ceara albinelor este mncat de larva unui fluture. sau de o pasre din Africa de Sud. Ceara este sintetizat n cantitate mare de crustaceele copepode marine, ce constituie hrana pentru balene i unii peti. Degradarea cerii se face cu ajutorul enzimelor produse de bacteriile din tractul digestiv bacterii simbionte ale animalelor. DIGESTIA GLUCIDELOR AMIDONUL este degradat cu ajutorul AMILAZEI produs de glandele salivare i pancreas, rezultnd: MALTOZ. MALTOTRIOZ, DEXTRINE. Amidonul + amilaza Maltoz (format din 2 molecule de glucoz); Maltotrioz (3 molecule de glucoz) Dextrine (4-9 molecule de glucoz) Cu ajutorul MALTAZEI, se face n continuare degradarea pn la GLUCOZ. Amidonul este substan de rezerv, la plante; la om este principala resurs energetic. LACTOZA este degradat sub aciunea LACTAZEI la GLUCOZ I GALACTOZ. Ex. Persoanele crora le lipsete lactaza, au intoleran la lapte. Aa sunt unele persoane, chiar din natere, i 50% din oamenii maturi. Pentru c intestinul nu produce lactaz, lactoza ajunge n intestinul gros unde, enzimele bacteriene o descompun la CO2 i acid acetic lactic care irit mucoasa intestinului gros, iniiaz contracii puternice, expulzare, diaree.
263
DIGESTIA CELULOZEI Celuloza este cel mai important compus structural al plantelor. Pentru animalele vertebrate, rol asemntor de compus structural l au colagenul i srurile fosfocalcice. Celuloza este insolubil n ap, este foarte rezistent la aciunea unor reactivi puternici. Reprezint sursa energetic pentru animalele erbivore, inclusiv pentru cele mai importante animale domestice. CELULOZA + CELULAZ GLUCOZ Celulaza este enzima produs de microorganismele care triesc n simbioz cu animalele erbivore. Erbivorele rumegtoare au un stomac compartimentat n: ierbar (100kg), ciur, foios, cheag (care produce sucuri digestive ce conin enzime). Cnd ierbarul este plin, iarba este regurgitat, remestecat i renghiit, realiznd degradarea mecanic. Microorganismele din ierbar care produc celulaza, sunt reprezentate de bacterii i ciliate. Rezult glucoza care prin fermentaie CH4, CO2 (nlturate prin eructaie) i acizi: acetic, propionic, butilic. Acizii sunt absorbii i furnizeaz cca 70% din cerinele energetice zilnice. Ex.: ierbarul unei vite stule are cca. 100 kg i conine iarb, secreie salivar i aproximativ 2 kg de ciliate. Acizii rezultai la fermentaie sunt neutralizai de saliv care conine NaHCO3 La o vac de 500 kg apa reprezint 2/3, adic 332 l ap = 60% din greutate; saliva produs ntr-o zi reprezint 1/3 = 166 l; cele 2 kg de ciliate conin cca 150 g proteine, care sunt degradate de sucurile digestive la aminoacizi. Bacteriile din stomacul vitelor pot sintetiza aminoacizi eseniali, pe care apoi sucurile gastrice i degradeaz i reprezint sursa de aminoacizi eseniali pentru vite. Bacteriile pot sintetiza i vitaminele din grupul B care reprezint o surs de vitamine att pentru vite ct i pentru oameni. DIGESTIA GLUCIDELOR presupune intervenia enzimelor: Degradarea amidonului - AMILAZA, MALTAZA. Degradarea lactozei - LACTAZA. Degradarea celulozei - CELULAZ NECESARUL DE AP N DIGESTIE Digestia are loc n mediul lichid apos. Cantitatea necesar de lichid care ajunge zilnic n tractul digestiv, este de aproximativ 2 l ap pe zi. n structura corpului, apa este prezent n: saliv-1,5 l; suc gastric-2 l; suc pancreatic-1,5 l; suc intestinal-1,5 l ; suc biliar-0,5 l; total 9 l ap, din care: 8,5 l sunt absorbii la nivelul intestinului subire, 0,5 l sunt absorbii de intestinul gros (0,4 l reabsorbii i 0,1 l eliminai cu materialul nedigerat fecale). Cu excepia sucului biliar toate celelalte sucuri conin enzime hidrolitice care catalizeaz degradarea macromoleculelor cu participarea apei. Fiecare suc digestiv are un pH caracteristic: saliva pH = 7 (puin sub 7), sucul gastric pH = 2 (puternic acid), sucul biliar, pancreatic i intestinal pH =7- 8 (alcalin). Digestia n cavitatea bucal se petrece n mediu neutru, n stomac n mediu puternic acid, n intestin n mediu alcalin. Cel mai important compus al sucului gastric este HCl care ndeplinete urmtoarele roluri: - are aciune bactericid (alimentele conin bacterii uneori chiar patogene), - asupra absorbiei fierului; fierul este ingerat ca i compui ferici (Fe3+) i este absorbit ca fier bivalent. n lipsa HCl apare o anemie foarte grav. - stimuleaz secreia de suc pancreatic prin intermediul unor hormoni; n lipsa acidului clorhidric digestia este compromis deoarece se secret foarte puin suc pancreatic, care are rol extrem de important n digestia lipidelor, glucidelor, proteinelor deoarece conine: cea mai puternic lipaza, amilaza i enzime proteolitice importante.
264
Intestinul subire, intestinul gros i stomacul au un epiteliu unistratificat prin care se face absorbia nutrienilor. Organul cel mai specializat la absorbia nutrienilor este intestinul subire = enteron. Suprafaa intestinului subire lui este de 100 m2, lungimea 2,75 m. Suprafaa e mrit de vilozitile intestinale (pliuri marginale apicale ale enterocitelor) i de valvule = pliuri mai mari ale mucoasei intestinale. ABSORBIA SODIULUI Concentraia de Na n lumenul intestinal este mai mare dect n interiorul enterocitelor. Na se deplaseau din lumenul intestinal, spre enterocite i difuzeaz pe proteinele transportatoare, din membrana de la polul apical al enterocitelor. Proteina transportatoare de Na are 2 locusuri: pentru fixarea sodiului i pentru fixarea glucozei i galactozei. Alte proteine transportatoare de Na au locusuri pentru unii aminoacizi, di-i tripeptide. Glucoza, galactoza, aminoacizii, di- i tripeptidele difuzeaz din lumenul intestinal ptrunznd n enterocite pe proteinele transportatoare de Na. Cnd concentraia ionilor de Na tinde s creasc peste un anumit nivel este activat o enzim pomp: ATPaz dependent de ionii de sodiu i potasiu. Ea asigur expulzarea excesului de ioni de Na din celule i introduce ionii de K n raport de 3/2. 3 Na+ Na+ Na+ Na+ + + mediu extracelular Na K Proteina transportatoare mediu intracelular K+ Na+ 2 K+ K K
+ +
Ionii de sodiu sunt mai concentrai n mediu extracelular, lichidul intestinal, plasma sanguin. Ionii de potasiu sunt mai concentrai n mediul intracelular. Regula dup care se fac schimburile de ioni pozitivi: difuzeaz dintr-un mediu mai concentrat, ntr-un mediu mai diluat: a. fie urmat de un ion de semn contrar, b. fie c din mediul diluat difuzeaz un ion cu sarcin electric identic.
Schimburile de ioni pozitivi dintr-un mediu mai concentrat ntr-un mediu mai diluat.
Na+
++ Na Na
Cl
K+ K+
Cl-
Ionul de sodiu atrage dup el i ionul de clor; drept urmare n spaiul dintre enterocite crete presiunea osmotic, ceea ce determin difuziunea apei din lumenul intestinal n spaiul dintre enterocite, crete volumul de lichid dintre enterocite, sodiul nu se mai poate ntoarce n lumen i sodiul este forat s se deplaseze printre enterocite spre capilarele sanguine. 265
ABSORBIA LIPIDELOR I A VITAMINELOR LIPOSOLUBILE depinde de prezena srurilor biliare din sucul biliar care asigur dizolvarea lipidelor. ABSORBIA FIERULUI. Fierul este preluat din lumenul intestinal de o protein transportatoare numit transferin care formeaz un complex cu fierul. Complexul se fixeaz pe nite proteine receptoare din membrana de la polul apical al enterocitelor. complexul format: Fe+transferina+proteine receptoare ptrunde n enterocite. Cnd organismul are nevoie mai mare de fier, sintetizeaz cantiti mai mari de transferin i proteine receptoare. Fierul este un exemplu de nutrient a crui cantitate absorbit n organism este reglat la nivelul enterocitelor. MODUL DE REGLARE A NECESARULUI DE GLUCOZ Cantitatea de glucoz necesar organismului nu este reglat la nivelul intestinului, asemenea fierului. Glucoza se absoarbe pe o protein transportatoare de Na. n organism poate sa ajung o cantitate mai mare de fier. Excesul de glucoz din organism se transform ns n grsimi. NECESARUL DE VITAMINA B12 este reglat la nivelul intestinului n mod asemntor cu fierul, dar nu se poate absorbi n absena unui factor intrinsec produs de celule secretoare. n lipsa acestuia apare o anemie foarte grav. ABSORBIA CALCIULUI este condiionat de vitamina D sau hormonul D. Calciul este absorbit din lumenul intestinal cu ajutorul unor proteine transportatoare. Difuziunea cu ajutorul acestor proteine este mai rapid dect fr ele i se numete difuziune facilitat. REGLAREA NECESARULUI IN NUTRIENI A CELULELOR Nutrienii sunt transportai de snge n tot organismul, traverseaz pereii capilarelor i ajung n lichidul intercelular. Ptrund n celule numai dac acestea au nevoie de ei. Nevoia de GLUCOZA a celulelor determin sintetizarea proteinelor transportatoare care intr n structura membranei celulare, activitate stimulat de INSULIN. n absena insulinei : activitatea proteinelor transportatoare este de 20 ori mai mic, n celule nu ptrunde cantitatea suficient de glucoz, glucoza se acumuleaz n lichidul dintre celule i n plasma sanguin. Cnd concentraia de glucoz din snge depete 120 mg/100ml plasm sanguin suntem ameninai de diabet,concentraia normal fiind 100 mg glugoz/100mg plasm. NECESARUL DE ENERGIE PENTRU ABSORBTIA NUTRIENTILOR Absorbia nutrienilor necesit n mod direct sau indirect consumul de energie. Sursa direct este ATP. Absorbia de Na necesit ATP. Glucoza, galactoza i unii aminoacizi fiind absorbii o data cu sodiul, necesit energie n mod indirect. Fe, Ca si vitamina B12 se absorb cu ajutorul proteinelor transportatoare, a cror sintez necesit ATP. ATP este sursa direct de energie pentru toate procesele consumatoare de energie. Astfel sinteza unei legturi peptidice necesit 3 molecule de ATP.
266
Funcia respiratorie.
Producerea energiei n organism. Plantele sintetizeaz cu ajutorul luminii solare substanele organice. Energia solar este nmagazinat n legturi chimice. n organismul omului substanele organice sunt degradate pe doua ci: - degradarea hidrolitic (care furnizeaz 1% din energia produs n organism, are loc n tractul digestiv); - degradarea oxidativ (care furnizeaz 99% din energia produs n organism). Degradarea substanelor organice se poate face: pe cale anaerob (anoxic), cnd se elibereaz doar o mic parte din potenialul energetic al substanelor i pe cale aerob, pn la produi finali CO2 i H2O, cu eliberarea unei cantiti mari de energie, a ntregului potenial de energie, iar n cazul proteinelor cu eliberarea de CO2 , H2O i uree, potenialul energetic parial . Degradarea glucozei n lipsa O2 = GLICOLIZA ANAEROB, - produsul final fiind acidul lactic, - elibereaz 5% din potenialul energetic al glucozei. - bilanul energetic 2 molecule ATP/1 molecul de glucoz. Degradarea glucozei n prezena O2 = GLICOLIZA AEROB, - bilanul energetic 38 molecule ATP/1 molecul de glucoz. Nu toate reaciile implicate n degradarea glucozei, lipidelor, proteinelor elibereaz suficienta energie pentru sinteza ATP, dar toate furnizeaz energie din care o parte se pierde sub form de cldur. GLICOLIZA AEROB Acidul piruvic nu se transform n acid lactic ci reacioneaz cu coenzima A rezultnd acetil-coenzima A. n cazul c lipsete din organism vitamina B1, acidul piruvic nu se poate transforma n acetil coenzima A i glicoliza aeorb este blocat. Acidul piruvic n exces este toxic, n primul rnd pentru celulele nervoase; nu se poate valorifica potenialul energetic al glucozei. Acetil-coenzima A intr n ciclul citric(ciclul Krebs, ciclul acizilor tricarboxilici). n ciclul citric au loc 4 dehidrogenri succesive ale substanelor, formndu-se 3 molecule NADH i 1 molecul FADH / molecula de Acetil-coenzima A. 1 molecul glucoz 4 NADH + H + x 3 = 12 ATP 6 NADH + H + x 3 = 18 ATP 2 FADH2 x 2 = 4 ATP + 2 ATP + 2 ATP Total 38 ATP + NADH+ H i FADH2 transport H2 n LANTUL RESPIRATOR, unde: 1 NADH + H + asigur formarea a 3 ATP, 1 FADH2 2 ATP. LANTUL RESPIRATOR n materia nevie, expresia arderilor este focul, iar n materia vie este respiraia. Focul presupune eliberarea brusc a unei mari cantiti de energie prin reacia: O2 + C = CO2 O2 + H2 = 2H2O Arderile = oxidrile care au loc n materia vie au ca produi de ardere-oxidare: - CO2 + H2 O (n cazul glucidelor i lipidelor), CO2 + H2O + uree (n cazul proteinelor); - nu elibereaz brusc o cantitate mare de energie, sunt lente.
267
- Organismul animal este UN MOTOR CARE ARDE HIDROGEN, care provine din dehidrogenarea unor substane din ciclul citric sau din glicoliza anaerob. - H2 este transportat n lanul respirator de NADH+ H + i FADH2 NAD = forma oxidat ( nicotinamidadenindinucleotid) NADH = forma redus ( derivat al vitaminei PP) FADH=(flavinadenindinucleotid),(derivat al vitaminei B2). Lanul respirator este reprezentat de un ir de compui care au afinitate fa de H2, aceasta fiind cu att mai mare cu ct compuii sunt situai mai spre captul lanului. H2 nu poate trece de la un compus la altul dect n ordinea n care sunt dispui compuii. Oxidarea = combinarea unui compus cu O2 sau pierderea de H2 sau de e Reducerea = combinarea cu H2 sau acceptarea de e Reacia de oxidare elibereaz energia, care dac atinge o anumit cantitate, poate servi la sinteza moleculelor de ATP, sau, n caz contrar se pierde sub form de cldur. H2 preluat de la substrate de ctre NAD i FAD, are o energie potenial de reacie, eliberat treptat de-a lungul lanului respirator cu ocazia reaciilor de oxido-reducere succesive la care particip: H2 se desface n H+ i e e determin n continuare reacii succesive de oxido-reducere. n final e sunt acceptai de Oxigen care devine oxigen ionic, form n care reacioneaz cu H2 formnd apa metabolic i energie. n lanul respirator: - 2 atomi de H, (provenii din NADH+H + sau FADH2) se desfac n - 2 protoni i 2e ; - 2e sunt transportai n continuare prin lanul respirator i n final: - 2e reduc oxigenul respirator: O2 + 2e O22 2 H+ + O2 H2O NADH + H + intr la nceputul lanului respirator, iar FADH2 intr n una din etapele urmtoare ale lanului respirator, o molecul de NADH + H + permind sinteza a 3 molecule de ATP, iar o molecul de FADH2 permind sinteza a 2 molecule de ATP. n materia vie, CO2 rezult n urma unor reacii de decarboxilare i nu din reacia direct C + O2. Degradarea unei molecule de glucoz: - prin glicoliza anaerob duce la formarea de acid lactic + 2 ATP; - prin glicoliza aerob duce la formarea de CO2 + H2O + 38 ATP. Nu toate reaciile implicate n degradarea glucozei, lipidelor, proteinelor elibereaz suficienta energie pentru sinteza ATP, dar toate furnizeaz energie, din care, o parte se pierde sub form de cldur. Acidul adenozintrifosforic (ATP) este surs de energie a organismului. Este surs de energie pentru absorbia la nivelul intestinului si rinichiului pentru absorbia primar, pentru sinteza proteinelor se consun foarte mult ATP, pentru generarea potenialelor de aciune, pentru bioluminiscen, pentru descrcrile electrice la unii peti etc.
268
GLICOLIZA ANAEROBA GLUCOZA HC=O HCOH HO-C-H + ATP HCOH HCOH CH2OH GLUCOZO 6FOSFAT CHO HCOH HO-C-H + ADP HCOH HC-OH O CH2OPOH OH FRUCTOZO 6 FOSFAT O CH2OPOH HC=O OH H-COH HCOH H-COH O CH2OPOH OH
CH2OH HC=O + ATP HCOH HCOH HCOH O CH2OPOH OH O GLICERALDEHID -2H DIHIDROXIACETONFOSFAT 3P CH2 OH CH2HO + HOPOH +NAD 2 C=O O HCOH O OH CH2OPOH CH2OPOH OH OH ACID 3 FOSFOGLICERIC ACID 2 FOSFOGLICERIC H2O ACID 1, 3 O DIFOSFOGLICERIC O O +OHPOH +ATP C O P OH OH OH COOH COOH O HC OH + NADH + H+ OH + HOH HCOH HC O POH CH2OPOH OH OH -H2O CH2OPOH CH2OH O O ACID FOSFOENOLPIRUVIC ACID ENOLPIRUVIC ACID PIRUVIC ACID LACTIC COOH O COOH COOH C O P OH + ADP + H2O COH + ATP C = O + NADH + H+ CH3 -CH-COOH OH CH2 OH CH2 CH3 OH C O P OH CH2 OH
269
GLICOLIZA ANAEROB. Degradarea glucozei n lipsa O2 - produsul final fiind acidul lactic, - elibereaz 5% din potenialul energetic al glucozei. - bilanul energetic2 molecule ATP / 1 molecul de glucoz.
ACID PIRUVIC ACID LACTIC
CH3-CO-COOH
GLICOLIZA AEROB Degradarea glucozei n prezena O2 = GLICOLIZA AEROB, - bilanul energetic 38 molecule ATP/1 molecul de glucoz. Acidul piruvic nu se transform n acid lactic ci reacioneaz cu coenzima A rezultnd acetil-coenzima A. Piruvat decarboxilaza are ca enzim vitamina B1. n cazul c lipsete din organism vitamina B1, acidul piruvic nu se poate transforma n acetil coenzima A i glicoliza aeorb este blocat. Acidul piruvic n exces este toxic, n primul rnd pentru celulele nervoase. Acetil-coenzima A intr n ciclul citric(ciclul Krebs, ciclul acizilor tricarboxilici). n ciclul citric au loc 4 dehidrogenri succesive ale substanelor, formndu-se 3 molecule NADH i 1 molecul FADH / 1 molecul de Acetil-coenzima A. NADH+ H + i FADH2 transport H2 n LANTUL RESPIRATOR, unde: 1 NADH + H + asigur formarea a 3 ATP, iar 1 FADH2 2 ATP.
ACID PIRUVIC + COENZIMA A ACETIL-COENZIMA A PIRUVAT DECARBOXILAZA O
CH3COCOOH
HS CO A
+ NAD H2 CO2
CH3 C S CO A
Stocarea energiei n organism Formele sub care este stocat energia n organism sunt glicogenul i lipidele. Avantajele stocrii glicogenului: elibereaz energia i n condiii aerobe (glucoza), pe cnd grsimile nu; energia se elibereaz mult mai repede din glucoz dect din acizii grai. Avantajele stocrii grsimilor 1 g grsime furnizeaz 9 Kcal, deci: 0,1 g grsime furnizeaz 1 Kcal; 1 g glicogen furnizeaz numai 4 Kcal i , deoarece depunerea a 1 g glicogen se face cu 3 g H2O, deci total 4 g, rezult c 4 g (glicogen + ap) 4 Kcal , deci : 1 g glicogen stocat + ap furnizeaz 1 Kcal . La aceeai cantitate de energie furnizat, rezerva energetica stocat consumat de glicogen este de 10 ori mai grea dect cea de grsime. Psrile migratoare au un depozit energetic format de grsime care reprezint 40-50 % din greutatea corpului. Astfel o pasre de 3 Kg (3000 g) care are 40% grsime, are un depozit de numai 1200g grsime din care i se furnizeaz: 9Kcal x 1200g = 10 800 Kcal. Pentru a obine aceeai cantitate de energie din glicogen, rezerva de glicogen ar fi de 10 ori mai mare, deci 12 Kg. Glicogenul este stocat ca surs de energie de paraziii intestinali pentru care greutatea glicogenului nu conteaz, deoarece nu se deplaseaz i care triesc temporar n condiii anaerobe; i , de asemenea, pentru animalele puin mobile. Glicoliza anaerob este prezent i la om, se desfoar n condiii de efort foarte intens, cnd aprovizionarea esuturilor cu oxigen este insuficient. 270
Petii care ierneaz n apele dulci stttoare, care nghea la suprafa, i obin energia prin glicoliz anaerob. Dac acidul lactic care rezult, se acumuleaz n cantitate prea mare, devine toxic. Unii peti evit acest lucru producnd alcool etilic ca produs final al glicolizei anaerobe, i care poate fi eliminat din corp prin difuziune la nivelul branhiilor, spre deosebire de acidul lactic care nu poate fi eliminat prin branhii. Dei 1 g de alcool etilic elibereaz prin ardere 7 Kcal, deci dei alcoolul este un material energetic important, aceti peti l risipesc pentru a evita astfel toxicitatea acidului lactic.
O ACID PIRUVIC ACID LACTIC ALCOOL ETILIC CH3COCOOH CH3 CH COOH CH3 C + NADH + H + CH3 CH2 OH NADH + H+ - CO2 OH H
La aceti peti (cum este carasul auriu, de exemplu), cantitatea de alcool din snge este de 0,25 g/l snge. La om, o cantitate de alcool n snge de sub 0,5 g/l snge indic un nivel al alcoolemiei ce nu este sub influena alcoolului. Unele animale marine (peti, raci) triesc n oceane la adncimi de 100 900 m, unde concentraia O2 este foarte sczut, de 100 l (0,1 cm3 ) / l ap. Acestea i obin energia prin: metabolism anaerob ( glicoliz anaerob); sau sunt capabile s valorifice O2 chiar din aceste ape cu concentraie foarte sczut n O2. Lipsa oxigenului Lipsa oxigenului determin manifestrile legate de scufundarea la mare adncime a omului, mamiferelor, psrilor acvatice, care au respiraie aerian. Fr oxigen nu se poate supravieui deoarece nu se poate produce energia necesar prin matabolism anaerob. Celulele nervoase nu rezist la lipsa oxigenului mai mult de 10 15 secunde, i intr ntr-un proces de degradare ireversibil. n cazul mamiferelor acvatice, toate marile ordine de mamifere cu excepia primatelor i chiropterelor - liliecilor, au reprezentani adaptai la viaa acvatic. Focile i balenele sunt mamifere numai acvatice. Prin scufundarea omului la adncimi de peste 10 m, pentru mai mult timp, la revenirea la suprafa se produce embolia i moartea subit. La presiunea atmosferic obinuit, azotul nu se dizolv n lichidele din esuturi i n grsimi, dar la presiuni mari are loc aceast dizolvare a azotului. La scufundarea omului, la fiecare 10 m cobori n adncime, presiunea crete cu 1 atm (1 atm = 760 mm Hg). Compoziia aerului este de : oxigen = 20,97 %; azot = 79,1%; CO2 = 0,04%. La revenirea la suprafa, dac aceasta se face repede, organismul se decompreseaz i azotul din esuturi intr n snge i apar spaii ocupate de azot; cnd aceasta se ntmpl la creier sau la miocard, survine moartea celulelor nervoase sau ale miocardului i moartea organismului. Ieirea la suprafa a scufundtorilor se face conform unor tabele care indic n funcie de numrul de metri de ascensiune, ct timp trebuie s staioneze pentru ca decompresia organismului s se fac treptat i s se evite aerembolia. Mamiferele scufundtoare nu fac aerembolie pentru c resursele lor de aer de care dispun n plmni sunt insuficiente pentru a se dizolva cantiti mari de azot n esuturi. Astfel, caalotul se scufund pn la 1000 m, iar foca elefant pn la 1500 m. Toxicitatea oxigenului. Oxigenul ncepe s fie toxic dac este respirat timp ndelungat la presiune>300 mm Hg,(corespunztoare la 10 m adncime) i la suprafa, la presiune > 152 mm Hg. Dac se coboar la adncimi sub 10m, proporia oxigenului din aerul respirat trebuie s scad la 10% O2 0,1 atm i 90% N 0,9 atm , total: 1 atm. Cu acest amestec de aer se poate cobor pn la 40 m. La 10 m adncime sunt2 atm, din care : 0,4 atm corespund O2 i 1,6 atm corespund N2
271
Oxigenul poate fi n exces cu ocazia scufundrilor. 12 ore se poate respira chiar oxigen pur la 760 mm Hg. Primele semne ale toxicitii oxigenului sunt: senzaii de iritaie n plmni, tuse i durere la respiraie. Coborrile la adncime sunt limitate nu numai de toxicitatea oxigenului ci i de efectul narcotic al azotului la presiuni mai amari de 5 atm. Pentru evitarea efectului narcotic al azotului , acesta se nlocuiete cu heliu. Oxigenul poate fi n exces n condiii de oxigenoterapie , care de exemplu , dac se face la copiii prematuri pentru un timp mai ndelungat, poate s fie periculoas deoarece determin opacizarea corpului vitros i pierderea vederii. Adaptarea fiziologic a respiraiei la mamiferele acvatice Mamiferele scufundtoare pot sta un timp ndelungat sub ap (30 60 min.), iar omul nu mai mult de 4 min., explicaia acestei adaptri este capacitatea vital (CV) pulmonar diferit. Rezervele Foc de 30 Kg Om de 70 Kg de O2 plmni (CV=350ml O2) 16% 56 ml O2 CV = 4,5 l 720 ml O2 snge (4,5 l) 25% 1125 ml O2 Snge arterial: 1,5 l 300 ml O2 snge venos: 3,5 l 525 ml O2 muchi (6 kg)(45ml O2/Kg) 270 ml O2 16 Kg (15 ml O2/Kg) 249 ml O2 apa tisular (18 l ap) (5 ml O2/l) 90 ml O2 40 Kg ( 5 ml O2/Kg) 200 ml O2 mlO2 total: 1541 ml O2 / 30 Kg 1985 ml O2 / 70 Kg ml O2 /Kg 51 ml O2 / Kg 28,3 ml O2 / Kg Concluzii: 1. Cantitatea de O2 / Kg greutate corporal la foc este mai mare dect la om. 2. Foca i are stocate rezervele de O2 n snge, volumul de snge raportat la greutatea corporal fiind mai mare la foc dect la om. Numrul de globule roii i cantitatea de hemoglobin din snge este mai mare la foc dect la om, n raport cu greutatea corporal. 3. Foca stocheaz mai mult oxigen dect omul i n muchi, raportat la unitatea de greutate corporal. Coninutul de mioglobin din muchiul de foc este mult mai mare dect cel din muchii omului, raportat la greutatea corporal. Dup fierbere muchii de foc i de balen se nnegresc datorit coninutului mare de mioglobin. 4. Coninutul mare de oxigen din corpul de foc nu poate, totui, justifica timpul ndelungat pe care foca l poate parcurge sub ap. Aceast explicaie poate justifica un timp de aproximativ 5 minute. Explicaia fenomenului const i n faptul c foca i obine energia i din metabolism anaerob, glicemie anaerob din muchi. 5. Unul din cele mai importante explicaii asupra fenomenelor fiziologice la scufundare este reflexul cardiac la scufundare, care const n reducerea rapid a ritmului cardiac (la foc, de la 140 bti / min., la 40 bti /min.) i meninerea lui pe tot timpul scufundrii. Concomitent se produce vasoconstricie n majoritatea organelor din corp, cu excepia creierului i miocardului, pentru care, metabolismul aerob - O2 este indispensabil, iar presiunea sngelui rmne neschimbat. Durata de scufundare corespunde timpului n care rezervele de oxigen pot aproviziona creierul i miocardul ca organe vitale.
Bibliografie selectiva: GHERGHEL Pante, 2000. Fiziologie cu elemente de comportament.Casa crii de tiin. Cluj ROCA I. Dumitru., 1977. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti. ROIORU Corina, SEVCENCU C., GHERGHEL P., 1995. Lucrri practice de fiziologie animal pentru uzul studenilor. Univ. Babe-Bolyai, Cluj-Napoca. STRUNGARU Gr. POP Mircea., HELCO V., 1983. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic. Bucureti.
272
const n realizarea unei masive productiviti a ecosistemului cu exploatarea tot mai intens i mai extins a resurselor naturale, att biologice ct i nebiologice. n satisfacerea acestei tendine, interveniile omului n echilibrele sensibile i fragile ale naturii, submineaz nu numai existena normal i supravieuirea multor specii, dar nsi economia i chiar existena omenirii. Astfel, vorbind despre impactul omului asupra mediului nconjurtor se fac referiri la poluare (Zamfir, 1979). Agresiunea omului depete mult sfera polurii, polurea fiind una dintre modalitile prin care omul afecteaz calitatea mediului. Alte urmri ale impactului antropic duc la schimbarea structurii echilibrelor ecologice prin distrugerea sau dispariia din ecosistem a unor componente abiotice sau biologice, prin introducerea de elemente biologice, floristice sau faunistice etc.
TIPURI DE POLUANI I IMPACTUL ACESTORA ASUPRA MEDIULUI (dup European Environment Agency, 1998, Ionescu, 2000, Ozunu i Teodosiu, 2002) POLUANI IMPACT DESCRIEREA IMPACTULUI Dioxid de carbon, metan, Efect de ser Acumularea n stratosfer a unor gaze , ca rezultat al protoxid de azot activitilor umane, poate conduce la schimbri climatice Hidrocarburi cloro-fluorurate, Diminuarea Reducerea concentraiilor de ozon care protejeaz solveni clorurai, bromur de stratului de suprafaa Pmntului de excesul de radiaii UV, metil ozon datorit reaciilor chimice care au loc cu compuii halogenai Oxizi de sulf, oxizi de azot, Ploi acide Reaciile oxizilor cu apa din atmosfer, conduc la amoniac apariia precipitaiilor cu caracter acid, afectnd apele de suprafa, solul, ecosistemele acvatice i terestre, precum i mediul antropic. Compui organici biodegradabili, Poluarea apei Modificarea calitii apelor de suprafa (ruri, lacuri, compui anorganici cu caracter mri) i subterane, afectarea ecosistemele naturale i a reductor, populaiei din zon. suspensii solide, acizi, baze, nitrai i fosfai Compui organici Poluarea apei Degradarea calitii apelor i solului, datorit aciunii nebiodegradabili (insecticide, i solului compuilor nebiodegradabili/toxici, cu efecte pesticide, produse organice de cancerigene i mutagene. sintez, materiale plastice), La nivelul organismelor vii se manifest efecte de gudroane, azbest, bioacumulare. metale grele, Riscuri pentru utilizatorii amplasamentului datorit compui anorganici toxici prezenei substanelor toxice i / sau explozibile. Particule, pulberi minerale, oxizi Poluarea Deprecierea calitii factorilor de mediu, metalici, negru de fum, compui factorilor de afectarea ecosistemelor i a sntii oamenilor. organici volatili, SOx , NOx mediu, mai ales a aerului Deeuri menajere i industriale, Poluarea Agravarea problemelor de poluare a aerului/ apei/ toxice i / sau periculoase, deeuri factorilor de solului datorit gestionrii sau depozitrii inadecvate a din agricultur, mine,construcii mediu, mai deeurilor. nmol din staiile de epurare ales a solului Zgomot / vibraii datorate Poluare Impact ecologic nesemnificativ; disconfort, traficului, activitilor industriale fonic impact psihologic / social, i de construcie impact fiziologic semnificativ. Sistematizare inadecvat / design Impact vizual Diminuarea motenirii naturale, sociale i culturale, / disconfort modificri ale peisajului, florei i faunei, suprafeelor construite cu valoare istoric i arhitectural. Deversri de produse petroliere, Poluarea Impact semnificativ asupra mediului pe termen accidente chimice sau explozii. factorilor de scurt/mediu, mediu i efecte critice pe termen mediu/lung, accidente impact asupra populaiei i ecosistemelor. majore
274
Poluarea reprezint o modificare mai mult sau mai puin duntoare pentru om sau pentru speciile din ecosistemele naturale sau artificiale, ca rezultat al introducerii n mediu al poluanilor care reprezint deeuri ale activitii umane. Poluanii pot fi substane chimice (pesticide), factori fizici (caldura, zgomote) sau biologici (organisme, ageni patogeni). Dei fenomenele i gradul polurii sunt de o mare diversitate i complexitate se pot desprinde cteva caracteristici generale ale polurii: - poluarea crete datorit creterii numerice, fiind consecina activitii umane; - caracterul creterii polurii este exponenial, ca al factorilor care o genereaz; - n prezent nu se cunosc limitele polurii pentru securitatea omului, a ecosistemelor majore i a ecosferei, deoarece nu se cunoate capacitatea de suportabilitate a ecosistemelor i a ecosferei; - exist o tendin general de subestimare a importanei polurii, a stabilirii msurilor de control, ca i a limitelor admisibili. Dei cauzele acestei tendine sunt multiple: costul ridicat, ignorana, cea mai important cauz a subestimrii importanei polurii este faptul c, de cele mai multe ori, exist un decalaj n timp i spaiu ntre ptrunderea poluanilor n mediu i efectele lor ecologice. - Acest decalaj se datoreaz modului de desfurare a proceselor ecologice (circuitele geochimice, biogeochimice, concentrarea unor poluani n lungul lanurilor trofice etc., circulia aerului, apei), (Ozunu, Teodosiu, 2002). ELEMENTE DE ECOTOXICOLOGIE POLUAREA SOLULUI Solul ca sistem ecologic Solul este un ecosistem cu o biocenoz i un biotop ce acioneaz n conditii specifice, fiind substratul nutritiv indispensabil pentru creterea i dezvoltarea plantelor. Solul se caracterizeaz printr-o compoziie foarte complex, constituind un sistem complex de natur organo-mineral. Solul este un adevrat laborator chimic i biologic, ce reacioneaz prompt la orice intrri din afara ecosistemului i ieiri din ecosistem. Solul poate fi catalogat ca un organism viu, care se nate, evolueaz, se autoregenereaz (Ghidra, 2004). Solul este unul din elementele biosferei i n acelai timp mediul de via pentru plante. Solul depoziteaz, ndeosebi n humus, substana vie a uscatului i a energiei poteniale biotice, captate prin fotosintez, precum i elementele esentiale : carbon, azot, fosfor, potasiu, calciu. Ca mijloc principal de producie n agricultur, solul se degradeaz uor, mai ales cnd este exploatat neraional. Distrugerea stratului fertil se reface n timp ndelungat (3 cm de sol se refac n 300-1000 de ani, 20 cm se refac n 3-7 mii de ani) (Ghidra, 2004). Solurile se distrug ndeosebi prin eroziune, iar aceasta este activ prin lucrrile neraionale pe care le efectueaz omul. Omul constituie principalul factor care determin eroziunea solului cu efect final asupra apelor continentale i oceanelor. Se apreciaz c, volumul depunerilor de ml n oceane i mri de ctre apele curgtoare este de 24 miliarde to/an, fa de 9 miliarde to/an ct se depunea nainte de luarea n cultur a punilor i pdurilor. Solul este, de asemenea, degradat prin poluarea sa cu hidrocarburi, pesticide, metale acumulate n sol, care pot tulbura puternic echilibrul ecologic al acestuia. De aceea, pentru protecia solului sunt necesare msuri de ordin tehnic, dar i de ordin juridic. Poluarea solului Organizaia Mondial a Sntii consider c poluarea solului este consecina unor obiceiuri neigienice sau a unor practici necorespunttoare. Poluarea solului este rezultatul oricrei aciuni care produce dereglarea funcionrii normale a solului, care se manifest prin degradarea fizic, chimic i biologic a solului ce afecteaz negativ fertilitatea sa, respectiv capacitatea sa de producie. Datele statistice atest c poluarea a devenit un fenomen de o gravitate deosebit n sol, ea fiind cauzat de deeurile i pulberile
275
industriale, reziduurile din sectorul zootehnic, ngrminte, substante fito-farmaceutice, ierbicide, produse radioactive. Poluarea n sol acioneaz pe cale fizic, chimic, biologic i radioactiv, ceea ce face foarte dificil combaterea ei imediat. Unele substane care ptrund n sol rezist la descompunerea natural, degradarea lor este foarte lent i au un potenial ridicat de toxicitate. Dup diversele surse de poluare i dup elementele poluante, s-au descris mai multe tipuri de poluare a solului: poluare organic, poluare industrial, poluare radioactiv i poluare agricol. Poluarea organic. Reziduurile menajere, zootehnice, industriale (mai ales cele provenite de la ntreprinderile alimentare) determin poluarea organic. Poluarea organic persist un timp relativ redus, datorit marii capaciti a solului de degradare a acestor substane. Prin descompunerea biodegradarea - materiei organice i transformarea sa n substane minerale, se realizeaz un ciclu natural al elementelor chimice din sol n plante i animale, respectiv n om, revenind n sol i relund ciclul. Caracteristic pentru acest circuit este ciclul carbonului , dar i pentru alte elemente (oxigen, hidrogen, azot, fosfor, sulf etc.) care urmeaz indeaproape acelai ciclu. Procesele de biodegradare a substantelor organice din sol se desfoar aerob sau anaerob. n cazul unei poluri foarte intense i a unui sol srac n aer, se petrec procese anaerobe, pe cnd ntr-un sol bine aerat sau la cantiti redusc de poluani, au loc procese aerobe. Cele dou tipuri de procese se pot desfaura succesiv. Degradarea compuilor organici prin procese anaeobe nu este final, pe cnd procesele aerobe duc la descompunerea complet a substantelor organice poluate. La procesele anaerobe i aerobe particip un mare numr de microorganisme. Descompunerea substanelor poluante din sol are loc n straturile superioare (10-20 cm), unde poluanii sunt reinui de particulele de sol, datorit selectivitii acestuia. n prima faz, macromoleculele hidrocarbonate sunt descompuse pn la glucoz, iar n cea de-a doua pn la CO2 i H2O. Lipidele sunt descompuse la nceput n glicerin i acizi grai, iar n faza a doua, glicerina se descompune n CO2 i H2O, acizii grai descompunndu-se mult mai lent. Proteinele sunt descompuse ntr-o prim faz n polipeptide sub aciunea florei proteolitice, iar ulterior, sub influenta unor ectoenzime, n aminoacizi. Acetia, prin procese de dezaminare i de decarboxidare, ajung la amoniac . Din acest moment, procesul de degradare se consider terminat, urmat fiind de procesul de oxidare a amoniacului n nitrii ntr-o prima faz i a nitritilor n nitrai, n a doua faz. Procesul este identic i pentru sulf i fosfor, n sensul descompunerii pn la hidrogen sulfurat i hidrogen fosforat, iar mineralizarea ulterioar pn la sulfai i respectiv fosfai (Ghidra, 2004). Poluarea industrial Poluarea industrial este consecinta dezvoltrii explozive a industriei de la care rezult cantiti importante de deeuri din diferite procese de fabricaie i care n multe situaii se depoziteaz pe sol. Se consider c cel puin 50% din materile prime utilizate n industrie contribuie la formarea deeurilor industriale, din care n jur de 15% pot fi considerate toxice (Mnescu i colab., 1994). Consecintele acestei poluri constau, n mare parte, n degradarea avansat a solului, fapt ce creeaz mari dificulti de reintegrare a acestuia n circuitul agricol. Este vorba de reziduurile rezultate din industria minier, industria siderurgic i metalurgic, industria petrochimic i altele. Poluarea radioactiv Poluarea radioactiv a solului const din depunerile radioactive i depozitarea pe sol a reziduurilor cu coninut bogat n izotopi. Cele mai periculoase elemente radioactive sunt cele cu via lung, ca stroniu-90 (26 ani) i cesiu -137 (30 ani), dar importan au i iodul -131, bariul -140 i alii emii de reactoarele nucleare.
276
Poluarea cu produi chimici utilizati n agricuttur Dezvoltarea i perfecionarea tehnologiilor agricole duc inevitabil la chimizare accentuat, prin folosirea pe scar larg a ngrmintelor chimice, utilizarea insectofungicidelor i erbicidelor. Aceasta mbrac aspecte foarte variate i cu consecine multiple asupra lanurilor trofice din ecosistemele naturale cu repercusiuni asupra animalelor i omului (Bara i Laslo, 1997). Poluarea cu pesticide Pesticidele sunt substane utilizate pentru combaterea speciilor considerate ca duntoare pentru economie sau sntatea omului. Dintre multiplele ci ale polurii n agricultur, pe primul loc se situeaz folosirea, adeseori neraional, a produselor fitofarmaceutice, a pesticidelor: produsele pentru combaterea bolilor (fungicide i fungistatice, bactericide i virocide), produsele pentru combaterea insectelor i a duntorilor animali (zoocide, insecticide, acaricide, nematocide, larvicide, ovicide, aficide, moluscocide i raticide), pentru combaterea buruienilor (erbicide), dar i regulatori de cretere, stimulatori, inhibitori, feromoni sau substante repelente (dup Ghidra, Zaharia, 2002) Pesticidele acioneaz numai ntr-o mic proporie n scopul pentru care au fost utilizate. Se apreciaz c numai 30-40% din cantitatea de pesticide ajunge la plante, iar restul cade pe sol i n ap sau se mprtie n aer. Cantitatea de pesticide care ajunge pe plant i este reinut fr a cdea pe sol poart denumirea de "agrodisponibilitate" (Zaharia, 2001). n sol, pesticidele au impact negativ asupra microorganismelor , prin inhibarea unor enzime, scderea populaiilor de micromicete i diminuarea capacitii de reinere a azotului prin influentarea microorganismelor nitrificatoare i denitrificatoare. Descoperirea i diversificarea pesticidelor utilizate astzi a nceput n timpul i mai ales dup cel de-al doilea rzboi mondial cnd s-a trecut pe scar larg la producerea insecticidelor organoclorurate, organofosforice, a erbicidelor de mare eficacitate i adesea foarte selective n distrugerea anumitor grupe de microorganisme sau plante superioare, animale nevertebrate sau mamifere. Rspndirea cea mai larg au avut-o pesticidele organoclorurate, DDT (diclor-difenil-tricloretanul) i diferii produi derivai ai lui (HCH - hexaclorciclohexan, aldrin, dieldrin, etc.) (dup Zamfir, 1979) Aceti compui organoclorurai posed o serie de nsuiri caracteristice care explic diseminarea lor pe scar larg. Au o mare stabilitate chimic n condiiile mediului natural, degradarea producndu-se ncet. DDT are timpul de njumtire de circa 20 ani. Aceti produi de asemenea sunt greu solubili n ap i foarte solubili n grsimi, ceea ce face s se depoziteze n lipidele animalelor. Sunt substane destul de volatile, se adsorb uor pe particulele din sol, n ap, aer putnd fi transportate la mari distane. Aceste substane acioneaz asupra sistemului nervos i a metabolismului hormonilor sexuali la nevertebrate i asupra sistemului nervos la vertebrate. S-a stabilit de exemplu, c la psri - deregleaz metabolismul calciului, - blocheaz transferul ionilor de calciu inhibnd sursa de energie / ATPaza, - blocheaz transferul ionilor de calciu prin membran, - inhib o alt enzim: carbohidraza de care depinde depunerea CaCO3 n coaja oului, periclitnd reproducerea. Pot avea efecte mutagene i cancerigene. Cercetrile efectuate pe obolani arat c pesticidele organoclorurate n funcie de doza administrat, de vrsta animalelor, afecteaz fertilitatea, reduc numrul puilor nscui, provocnd malformaii la embrioni i tumori. Tratarea experimental a 7 specii de alge marine cu produse organofosforice n concentraiile de 1-1000 mg/l a dus la eclipsarea diviziunilor celulare, intensitatea
277
depinznd de concentraia i durata expunerii. La 5 specii de alge marine, s-a constatat o important scdere a fotosintezei. Unele cercetri privind aciunea pesticidelor asupra fito i zooplanctonului din ape dulci ajung la concluzia c n funcie de concentratia pesticidului organismele planctonice pot fi inhibate sau stimulate. Asociaia planctonic luat ca ntreg are o mare capacitate de tamponare a efectului pesticidelor, unele grupe de organisme pot modifica ciclurile azotului, fosforului, rezultatul poate fi mbogirea apei n aceste elemente i creterea biomasei fitoplanctonului. (dupa Zamfir, 1979) Efectele complexe asupra biocenozelor la tratamentele cu pesticide. n mediul acvatic erbicidele se dovedesc nocive nu numai pentru plante dar i multe specii de animale. Un efect secundar care accentueaz deteriorarea mediului acvatic l reprezint faptul c plantele moarte n urma tratamentului se descompun pe loc, duc la scderea oxigenului din ap, ceea ce sporete mortalitatea animalelor. Pesticidele afecteaz profund i complex structura i funcionarea reelelor trofice i a ecosistemelor n ntreg globul. Unele erbicide utilizate, cum ar fi 2.4D, afecteaz plantele leguminoase oprind fixarea N2 atmosferic. Alt serie de pesticide inhib procesul de descompunere a proteinelor. Un numr mare de pesticide afecteaz procesele nitrificrii care se dovedesc extrem de sensibile la asemenea tratamente. Rezultatul unei asemenea inhibiii este acumularea de NH3 i a azotiilor care sunt toxici pentru plante (la tutun). Problema atitudinii fa de pesticide este complex, innd seama de utilizarea pesticidelor n combaterea diferiilor duntori sau agenilor patogeni ai plantelor, animalelor i omului, dar n acelai timp de efectele negative adesea grave ca factor poluant local i global cu profunde consecine asupra strii multor ecosisteme, asupra economiei. Producerea i utilizarea pesticidelor deocamdat nu poate fi oprit dar sunt necesare msuri severe de interzicere a utilizrii substanelor cu o mare toxicitate i totodat dezvoltarea combaterii integrate n cadrul creia pesticidele i gsesc o utilizare raional (dup Zamfir,1979) n general, pesticidele au o mare remanen n sol, precum i proprietatea de a se transloca n mediile i n zonele cu care vin n contact. Remanena este diferit de la o grup la alta, pesticidele din grupa organo-cloruratelor avnd cea mai lung perioad de remanen. Folosirea repetat a anumitor tipuri de pesticide a dus la aparitia fenomenului de rezistent a agenilor patogeni i a duntorilor, ceea ce a condus la aplicarea acestora in doze tot mai mari i la crearea unor tipuri noi, cu toxicitate superioar. Persistena n sol se exprim prin timpul de injumtire, cnd dispare 50% din produs, notat cu TD 50, sau timpul pn la dispariia a 90% din produs TD 90. De exemplu, DDT are TD 50 de 3-10 ani, Aldrinul 10 ani. Dieldrinul 1-7 ani, HCH 2 ani. Datorit persistenei mari i toxicitii ridicate pentru om i animale, unele pesticide au fost interzise pentru folosire (ex. DDT, HCH, Aldrin, Dieldrin). La ora actual, pe plan mondial, circul 760 substane active, din aproximativ 1400 cunoscute. Date toxicologice, sumare, se public n diferite tratate de specialitate precum " Manualul pesticidelor ". (Ghidra, 2004). Pentru Romnia, cerinele toxicologice, concrete, necesare omologrii unui produs, sunt enunate n "Regulamentul privind organizarea i funcionarea comisiei interministeriale de omologare a produselor de uz fitosanitar i procedur de omologare a acestora n vederea fabricrii i utilizrii lor n agricultur i silvicultur ", aprobat n 1995 de ctre M.A.A.P., M.S.F. i M.A.P.M. Acest regulament oblig solicitantul omologrii unui nou produs s prezinte un dosar toxicologic pentru obinerea avizului necesar, care s indice urmtoarele tipuri de toxicitate:
278
toxicitatea acut (oral, dermal, de inhalare, iritarea ochilor, sensibilizarea pielii); toxicitatea subcronic (oral cumulativ la 90 zile); toxicitatea cronic (oral de lung durat i oncogenez); mutagenez; studii cu privire la reproducere (teratogenez, embriotoxicitate); comportarea n organismul mamiferelor (metabolizarea i eliminarea); reziduuri n produsele recoltate, ct i valorile NOEL (doza far efect), ADI (doza acceptat pentru o zi) i LMA (limita maxim admis n produse recoltate) (Ghidra, 2004). Se precizeaz impactul pesticidului asupra auxiliarilor, faunei utile din agroecosisteme. Clasificarea pesticidelor i utilizarea lor (Ghidra, 2004) Nr. crt. 1. Denumirea Zoocide -insecticide -rodenticide -moluscocide -nematocide -larvicide -aficide -acaricide Fungicide Bactericide Virocide Atractante Repelente Regulatori de cretere -defoliani -desicani -defloranti Utilizarea combaterea duntorilor la plante -insecte -roztoare -molute -nematozi -larve -afide -acarieni combaterea ciupercilor parazite combaterea bacteriilor combaterea viruilor mijloace de ademenire mijloace de respingere stimuleaz sau inhib creterea plantelor -defoliaz plante -uscarea plantelor -rrirea florilor
2. 3. 4. 5. 6. 7.
Toxicitatea pesticidelor se exprima prin doza letal DL 50. n funcie de doza letal (DL50), pesticidele se clasific n patru grupe de toxicitate. Clasificarea pesticidelor n grupe de toxicitate (Ghidra, 2004) Grupa de toxicitate I II III IV DL 50 (mg/kg corp) 50 50-200 200-1000 >1000 Gradul de toxicitate Extrem de toxice Puternic toxice Moderat toxice Cu toxicitate redus
279
280
281
Poluarea cu ngrminte chimice ngrmintele chimice trebuie aplicate n doze tiinific stabilite pe baza analizei coninutului solului. Dac dozele aplicate nu sunt stabilite pe baza analizelor agrochimice ale solului, putem avea deficit sau exces de elemente nutritive. Dintre ngrmintele chimice cele mai des utilizate sunt cele azotoase , care constituie o important surs de poluare a mediului. S-a constatat, cu certitudine, c ngrmintele cu azot modific raporturile dintre populaiile distructive i celelalte populaii din sol i duc la inhibarea activitii bacteriilor fixatoare de azot. Nitraii i nitriii rezultai din aceste ngrminte se cumuleaz n plantele rdcinoase, dar i n cele furajere de pe punile i fneele pe care s-au aplicat cantiti mari de ngrminte pe baz de azot. Furajele, alimentele i apa cu coninut mare n nitrai, ajung n organismul uman i al animalelor i determin formarea de methemoglobin cu consecine grave pentru copii, pentru tineretul animalelor domestice hrnite artificial i pentru oameni i animalele cu afectiuni cardio-vasculare (Bara i Laslo, 1997). Unele legume acumuleaz excesul de azot i prin consumul lor, la om se formeaz nitrozoamine, substante cu potenial efect cancerigen. Continutul unor legume n azotai (Ghidra, 2004) Morcov Ridiche 'I'elin_ Mrar Ptrunjel Spanac 947 2480 2900 2174 583 1150
Salat 935
ngrmintele chimice, n special cele cu azot, folosite neraional, n doze prea mari au provocat fenomene severe de poluare a solului i apei, cu nitrai i afecteaz n mod serios sntatea oamenilor i animalelor din zonele respective (Ghidra, 2004). Poluarea cu reziduuri lichide Aceast poluare s-a extins odat cu creterea cantitilor de ape reziduale. Apele reziduale joac un rol igienic foarte important din punct de vedere epidemiologic (mprtierea agenilor patogeni sau condiionat patogeni), toxicologic (conin substanie toxice), ecologic (afecteaz capacitatea de autoepurare a apelor i de refacere a solurilor i prin aceasta diferitele lanuri trofice) i economic (distrugerea florei i faunei prin poluare). Solul reine substanele din apele reziduale . Sursele de poluare cu reziduuri lichide sunt: apele reziduale, fecaloid menajere, apele reziduale zootehnice, apele reziduale meteorice, apele reziduale incomplet epurate, reziduurile petroliere, ieiul, produsele petroliere i chimice. Apele reziduale fecaloid menajere provin din locuine i instituii publice. Volumul lor este aproximativ egal cu cel al apei potabile consumate. Compoziia acestor ape este specific i influenat foarte mult de cantitatea de ap consumat. Potenialul poluant al apelor fecaloid menajere este determinat de coninutul n substane organice (dejecii umane, resturi de la splarea corpului, locuinelor, pregtirea hranei), microorganisme, inclusiv patogene de dejecii, secreii, sput i substante chimice (detergeni, pesticide). Apele reziduale industriale, inclusiv cele radioactive, provin din procesele tehnologice i activitile de igienizare a agenilor economici i instituiilor publice. Compoziia apelor reziduale industriale este foarte variat datorit specificului proceselor tehnologice din industria chimic, alimentar, siderurgic. Ca urmare a specificului proceselor tehnologice, apele reziduale pot fi toxice sau netoxice, infecioase sau neinfecioase, bogate sau srace n substane organice sau anorganice.
282
Apele reziduale zootehnice provin din fermele de cretere i ngrare a animalelor. Compoziia acestor ape este asemntoare cu cea a apelor reziduale fecaloid menajere, ns concentratia de poluani este mult mai mare. Apele reziduale meteorice sunt surse de poluare naturale datorit coninutului bogat n ageni patogeni, substane toxice suspensii dintre cele mai diverse. Apele folosite la igienizarea strzilor sunt incluse tot n categoria apelor reziduale meteorice. Apele reziduale incomplet epurate provin de la staiile de epurare defecte sau depite din punct de vedere tehnologic, necorespunztor proiectate sau exploatate. Reziduurile petroliere apar, de regul, n apropierea sondelor sau rafinriilor de petrol, conductelor de transport a ieiului sau produselor petroliere i constituie importante surse de poluare a solului. ieiul i produsele petroliere chimice stocate i folosite n condiii necorespunztoare constituie surse importante de poluare a solului. Poluarea biologic a solului Cantitatea de substante organice existent n sol alturi de ali factori (temperatur, umiditate, aer) influeneaz viaa microorganismelor existente in sol. Ca urmare a acestui fapt numrul de germeni din sol este condiionat de ncrctura acestuia n substane organice i condiiile de via existente. Se apreciaz ca numrul de germeni din sol poate ajunge la cteve miliarde/g sol, ceea ce nseamn 2,5-l0 tone/ha. Microorganismele din sol alctuiesc microflora i microfauna. Microflora solului este variabil ca numr i ca structur, avnd o anumit stabilitate, o anumit persisten. Microflora solului este constituit din virusuri, bacterii, actinomicete, fungi i alge. Virusurile existente n sol pot fi patogene pentru om i animale. Bacteriile din sol se pot ntlni pn la o adncime de cca. 3 m, cntrind n totalitate pn la 2-6 tone/ha. Bacteriile din sol sunt saprofite, patogene sau condiionat patogene. Bacteriile au, n general, o via limitat n sol, cu excepia celor sporulate care pot supravieui mai mult timp. Bacteriile din sol pot proveni de la om sau de la animale. n cazul n care bacteriile provin de la om, ele sunt excretate sau secretate pe sol pe care-1 contamineaz. Transmiterea acestora prin intermediul solului se poate face fie spre un alt om, fie spre un animal compatibil. n situaia bacteriilor provenite de la animale, are loc eliberare acestora pe sol. Prin sol, bacteriile se transmit fie spre un alt animal sau spre om. Din grupa bacteriilor provenite de la animale menionm agenii patogeni ai unor boli foarte periculoase care prin intermediul solului se pot transmite i la om. Este cazul tetanosului, antraxului i crbunelui enfizematos. Antraxul supravieuiete n sol sub form sporulat chiar pn la 20 de ani i chiar mai mult. O alt bacterie, bacilul botulinic (Clostridium botulinum), n condiii de anaerobioz, n alimentele contaminate, se dezvolt i elibereaz o exotoxin neurotrop care poate genera toxiinfecii alimentare la om i la animale. Actinomicetele sunt numeroase n solurile bogate n substante organice. Ele sunt, de regul, saprofite, dar se ntlnesc i specii capabile s produc infecii. Miceii sunt ciuperci parazite care se intlnesc destul de des n stratul superficial al solului. Aceti ageni patogeni produc micotoxine n furaje. Algele au o importan deosebit n circuitul materiei n natur, pe de o parte al carbonului (algele autotrofe) i pe de alt parte al substantelor poluante (algele heterotrofe). Microfauna solului este alctuit din totalitatea microorganismelor animale. Este constituit n cea mai mare parte din protozoare, care se hrnesc cu bacterii i contribuie la limitarea nmulirii acestora din urm. n cadrul polurii biologice a solului, o categorie foarte important o reprezint paraziii - tenii, ascarizi etc. (Ghidra, 2004).
283
Distribuia pe vertical n sol, a microorganismelor este variabil. Asfel, ntre 0 i 3 cm numrul accestora este redus datorit radiatiilor ultraviolete. Numrul maxim se nregistreaz ntre 4 i 30 cm, pentru ca apoi s scad treptat, ajungnd s dispar la adncimea de 3 m. Acest aspect este foarte important prin prisma pericolului contaminrii surselor de ap subteran, mai ales a pnzei de ap freatic. Densitatea microorganismelor variaz n raport cu anotimpul. Cea mai mare densitate se ntlnete primvara i toamna. Poluarea cu emisii nocive Emisiile nocive rezult n urma proceselor industriale, din transporturi i din agricultur. Ele pot fi dispersate pe calea aerului la distane mari fa de surs i ajung la suprafaa solului sub forma ploilor acide sau a pulberilor sedimentabile. Att ploile acide ct i pulberile sedimentabile polueaz solul iar efectele lor sunt deosebit de nocive. Dintre cele mai nocive emisii sunt cele de plumb, cadmiu, cupru, zinc, fluor, oxizi de sulf i azot, care au produs i produc efecte negative asupra strii de sntate a oamenilor i animalelor din zona oraelor Copa-Mic, Baia-Mare, TurnuMgurele, Bucureti (Acumulatorul) (Ghidra, 2004). Clasificarea solurilor poluate Solul fiind un sistem foarte complex, poluarea i afecteaz proprietile, deci i fertilitatea. n plus, poluanii trec din sol n plante, ap sau aer, iar depoluarea este foarte dificil i costisitoare, uneori chiar nerealizabil. innd cont de aceste aspecte, solurile poluate din Romnia au fost clasificate n clase, tipuri i grupe . Clasificarea solurilor poluate (Ghidra, 2004) Simbol Specificare Observaii PF -poluare fizici Clase de poluare PC -poluare chimic PB -poluare biologic PR -poluare radioactiv -poluare prin excavare la zi Tipuri de poluare Pa Pb -poluare prin acoperire cu halde sterile, gunoaie Pc -poluare cu deeuri i reziduuri anorganice Pd -poluare cu substante aeropurtate Pe -poluare cu materiaie radioactive Pf -poluare cu deeuri organice din industria alimentar i Pg uoar Ph -poluare cu deeuri agricole i forestiere Pi -poluare cu dejectii animale Pj -poluare cu dejecii umane Pk -poluare prin eroziune i alunecare Pl -poluare prin srturare Pm -poluare prin acidifiere Pn -poluare prin exces de ap Po -poluare prin exces sau crust de elemente nutritive prin tasare, cruste produciei sub 5%) 0Pp --poluare practic nepoluat (reducerea Grad de poluare 1 -slab poluat(reducerea produciei cu 6-10%) 2 -mediu poluat (reducerea cu 11-25%) 3 -puternic poluat (reducerea cu 26-50%) 4 -foarte puternic poluat (reducerea cu 51-75%) Ca urmare a acestei clasificri, solurile poluate pot fi prezentate prin simboluri, ca de exemplu PFb4 = sol poluat fizic prin acoperire cu halde sterile i gunoaie, foarte puternic.
284
Autopurificarea i asanarea solurilor poluate Pedologii susin c solul poate fi tratat ca un organism foarte complex i se comport ca un organism viu. Datorit microorganismelor prezente n compoziia sa, solul poluat are capacitatea natural de autodepoluare i de autopurificare . Tendina natural de autopurificare a solului prin procese complexe (fizice, chimice, biologice) depinde de durata i intensitatea acestora, precum i de natura i gradul polurii. Pentru a se putea realiza autopurificarea trebuie s existe un echilibru ntre capacitatea de purificare i nivelul de poluare. Autopurificarea se realizeaz n mod diferit n raport cu natura poluanilor, respectiv dac sunt anorganici sau organici (Ghidra, 2004). Poluanii anorganici sunt nglobai n structura solului prin procese fizice (dizolvare i difuziune), chimice (neutralizare, reacii de oxido-reducere, combinaii cu substanele din sol) i biologice (asimilarea de ctre microflora autotrof, absorbia de ctre plante). Solurile puternic poluate se pot folosi pentru agricultur numai dup efectuarea unor lucrri de ameliorare. Poluanii organici sunt dezintegrai n compui simpli i dup aceea sunt nglobai n structura solului prin procese fizice, chimice i biologice. Autoepurarea conduce la mineralizarea substanelor organice n produi intermediari i finali sub aciunea microflorei heterotrofe i n acelai timp la autosterilizarea germenilor patogeni. Autosterilizarea se bazeaz pe incapacitatea agenilor patogeni de a se adapta la viaa saprofit i pe antagonismul biologic, generat de secreia de antibiotice i de existena bacteriofagilor i a organismelor bacterivore. Fenomenul este cu att mai intens cu ct procesele biochimice sunt mai intense. Influenta solului poluat asupra apei Poluarea apelor de suprafa i subterane , apare de cele mai multe ori ca urmare a practicrii unei agriculturi cu grad ridicat de chimizare, bazat pe utilizarea excesiv a pesticidelor i ngrmintelor chimice, n special cu azot. n acest sens, programele de supraveghere a calitii apei au scos n eviden faptul c n anul 1995, peste 36,3% din fntnile de interes personal i public aveau ap n care coninutul de azotai se situa cu mult peste lim ita maxim admis stabilit prin STAS 1342-1991. n multe zone din ara noastr sunt poluate i apele de adncime. Apele pluviale, dup cderea pe sol, dizolv i antreneaz cu ele cantiti mari de reziduuri chimice (ngrminte, pesticide) i organice (toxice rezultate n urma descompunerii cadavrelor i a dejeciilor). O parte din aceste reziduuri sunt reinute de complexul coloidal al solurilor, dar cea mai mare cantitate polueaz fie apele de suprafa, fie pe cele subterane prin infiltrare n pnza freatic. Solurile poluate, mai ales cele acidifiate cresc pH-ul apelor de suprafa i al celor subterane. Solurile poluate pot cauza fenomenul de eutrofizare a apei. Eutrofizarea apei const n mbogirea compoziiei sale, mai nti cu azot i fosfor i apoi cu potasiu, magneziu, cupru, zinc, cobalt. Influena solului poluat asupra plantelor n tara noastr, poluarea solurilor cu nitrai este destul de accentuat. Excesul de azot din sol produce la plante o serie de modificri, dintre care unele nefavorabile cum sunt: creterea luxuriant, cderea florilor, creterea sensibilitii la atacul bolilor i duntorilor, ngreunarea maturrii i colorrii fructelor, prelungirea perioadei de vegetaie. Solurile acidifiate creaz condiii de via foarte vitrege sau chiar improprii pentru o mare varietate de plante, mai ales pentru cele cultivate.
285
Solurile poluate cu erbicide nu permit creterea unor plante de cultur sensibile la acel erbicid i prin urmare rotaia culturilor i asolamentul sunt ngreunate. Agenii poluani ai solului, n special cei chimici, sunt integrai de plantele de cultur i se acumuleaz n diferite organe ale plantelor. Omul, prin consumul acestor organe, introduce n organismul su substante toxice, uneori cancerigene. Un exemplu tipic l reprezinta salata i ridichile care preiau azotul in exces din solul poluat i l acumuleaz n organele pe care omul le consum (frunze i tulpin). Prin ingerarea unor cantiti mari de azot, n corpul omului apar nitrozamine, care sunt substane cu efect cancerigen. Influenta solului poluat asupra animalelor Solurile poluate pot influenta starea de sntate a animalelor n mod direct i indirect. n mod direct, solul poluat cu ageni patogeni i toxine poate genera apariia unor boli infectocontagioase i parazitare sau a unor intoxicaii: padocurile, incintele fermelor zootehnice, punile, trgurile, locurile de mbarcare a animalelor, terenurile fertilizate (cu gunoi de grajd, dejecii pstoase, semilichide i lichide, ape reziduale), precum i zonele limitrofe unitilor zootehnice sunt sursele cele mai importante de contaminare cu ageni patogeni infectocontagioi. Contaminarea animalelor este posibil pe cale digestiv, aerogen i prin plgile deschise, ca urmare a unor carene minerale n alimentatie. Pe cale aerogen, contaminarea animalelor se poate face prin inhalarea prafului ce conine agenii patogeni infectocontagioi. n mod indirect infectarea animalelor se face prin intermediul biomasei vegetale. Factorii poluani ai solului, mai ales cei chimici i radioactivi, trec din sol n biomasa vegetal i de aici n corpul animalelor. Solurile poluate atrag dup sine modificarea structurii compoziiei floristice a vegetaiei, a valorii nutritive a acesteia, a raportului Ca/P , reducerea produciei de uniti nutritive la hectar, implicit a surselor de energie disponibil. Toate acestea au repercursiuni grave asupra produciei, reproduciei i strii de sntate a animalelor (Ghidra, 2004). Msuri tehnice de protecia solului i subsolului: Prevenirea degradrii fizice. Prevenirea acidifierii. Prevenirea carenei sau a excesului de elemente nutritive. Prevenirea eroziunii solului. Depoluarea solurilor de pesticide. Solul este suport i mediu de via pentru ecosistemele naturale i antropice. Toate formele de poluare a solului au efecte dezastruoase asupra ecosferei, iar refacerea calitilor solului este un proces de lung durat, sau imposibil. Pentru prevenirea i combaterea polurii solului trebuie avute n vedere tipurile de poluare la care acesta este supus. Pentru prevenirea degradrii fizice sunt necesare: pregtirea solului n condiii de umiditate optim; irigri efectuate la timp i n cantitatea corespunztoare; rotaia culturilor; efectuarea conform cerinelor i n graficul de timp a lucrrilor agrotehnice. Pentru prevenirea acidifierii trebuie: o utilizare corect, dup analiza solului, a fertilizanilor; controlul pH-ului solului; aplicarea de amendamente cu calciu n caz de sol acid. Pentru prevenirea carentei sau a excesului de elemente nutritive este necesar: asigurarea unui raport corespunztor P:K, pentru adncimea de 20 cm de sol; corectarea pH-ului cu amendamente, pentru a asigura pH=6,2 - 6,5; analize agrotehnice pentru controlul microelementelor coninute n sol.
286
Pentru prevenirea eroziunii solului, datorit apelor sau a pantei terenului de 5-8o sunt: stabilite culturi antierozionale; se execut cultura n fii, cu benzi nierbate; se fac lucrri de terasarea terenului; se aplic asolamente; arturile se execut pe curbele de nivel; se planteaz perdele forestiere; construcii pentru prevenirea i combaterea efectelor torenilor; se regenereaz pajitile ; se aplic o data la un an sau la doi ani ngrminte naturale.
Combaterea integrat a duntorilor (IPM-Integrated Pest Management) reprezint o alternativ la tehnica utilizrii insecticidelor i totodat se asigur o agricultur echilibrat. Depoluarea solurilor de pesticide se realizeaz prin: asolamente, degradarea pesticidelor n sol cu ajutorul altor subsante; utilizarea de plante ce pot distruge unele ierbicide. Astfel se comport porumbul, sorgul, trestia de zahr. Ingineria genetic contribuie att la dezvoltarea i diversificarea produciei agricole, ct i la protecia mediului. Noile soiuri de plante studiate sunt mai robuste, cu mas biologic sporit, cu rezisten mai mare la temperatur, vnt i duntori, adaptabile pe soluri srturate sau acide, n zone foarte umede sau foarte uscate. Prevenirea polurii solurilor este legat i de activitile din industrie, transporturi i cele menajere din aglomerrile urbane . Pentru mentinerea calitii solurilor sunt necesare i: msuri de reducerea polurii surselor amintite, stocarea corespunztoare a deeurilor de orice natur, evitarea polurii aerului i apelor. Deoarece efectele polurii solurilor afecteaz ntreaga ecosfer, n cadrul O.N.U. s-a elaborat Programul Naiunilor Unite pentru Mediul nconjurtor, UNEP. Dup Conferinta O.N.U. privind problemele mediului uman, de la Stockholm din 1972, n Romnia s-a instituit Sistemul National de Monitorizare a Calitii Mediului, n colaborare cu UNEP i FAO. Acest sistem de monitorizare are urmtoarele obiective referitoare la soluri: evolutia sistemetic a caracteristicilor calitative ale solurilor, o n funcie de utilizare (arabil, pajiti, livezi, vie, pduri) i de o aciunea factorilor externi, naturali i antropici; prognoza strii de calitate; avertizarea unitilor interesate i a factorilor de decizie despre apariia unor situaii nefavorabile; identificarea surselor de poluare; stabilirea msurilor tehnice i economice de prevenire i combatere a polurii solurilor; urmrirea n timp a aplicrii i eficienei acestor msuri; asigurarea fluxului informational ctre Sistemul national de monitorizare i ctre Sistemul internaional de referint din cadrul UNEP (Ghidra, 2004). 287
Substantele poluante sunt grupate n patru categorii dup cum urmeaz: compui anorganici; hidrocarburi aromatice, poliaromatice; hidrocarburi din petrol; compui organici organoclorurai; pesticide organoclorurate i triazinice. Pentru fiecare categorie de substante sunt prezentate valorile normale, pragurile de alert i pragurile de intervenie pe tipuri de folosin a solului, sensibile i mai puin sensibile. Exprimarea pragurilor de alert i de intervenie se face n mg/kg substan uscat. n tabelul alaturat sunt prezentate valorile pentru compui anorganici (20 metale: Sb, Ag, As, Ba, Be, B, Cd, Co, Cr-total i hexavalent-, Cu, Mn, Hg, Mo, Ni, Pb, Se, Sn, Tl, V i Zn), i 8 compui (cianuri libere, cianuri complexe, sulfocianati, F, Br, S, sulfuri i sulfati).
Valori de referin pentru urme de elemente chimice n sol Compui anorganici (mg/kg substan uscat) (Ghidra, 2004) Urme de element Valori normale Praguri de alert / tipuri de folosine sensibile 1. METALE Antimoniu(Sb) Arg int (Ag ) A rsen (As) Bariu (Ba) Beriliu (Be) Bor solubil (B) Cadmiu (Cd) Cobalt (Co) Crom (Cr): Crom total Crom hexavalent Cupru (Cu) Mangan (Mn) Mercur(Hg) Molibden (Mo) Nichel (Ni) Plumb (Pb) Seleniu (Se) Staniu (Sn) Taliu (Tl) Vanadiu (V) Zinc (Zn) II. ALTE ELEMENTE Cianuri (libere) Cianuri complexe Sulfocianati F luor(F ) Brom (Br) Sulf (elementar) Sulfuri Sulfati mai puin sensibile 20 20 25 1000 7,5 5 5 100 300 10 250 2000 4 15 200 250 10 100 2 200 700 10 200 20 500 100 5000 400 5000 Praguri de intervenie / tipuri de folosine sensibile mai puin sensibile 40 40 50 2000 15 10 10 250 600 20 500 4000 10 40 500 1000 20 300 5 400 1500 20 500 40 1000 300 20000 2000 50000
12,5 10 15 400 2 2 3 30 100 4 100 1500 1 5 75 50 3 35 0,5 100 300 5 100 _ 10 150 50 400 200 2000
20 20 25 625 5 3 5 50 300 10 200 2500 2 10 150 100 5 50 2 200 600 10 250 20 300 100 1000 1000 10000
n tabelul urmtor sunt prevzute valorile de referin pentru 4 hidrocarburi aromatice mononucleare (benzen, etilbenzen, toluen i xilen), 5 hidroxilbenzeni (fenol, catechol, resorcin, hidrochinon, cresol) i total hidrocarburi aromatice, 11
288
hidrocarburi aromatice polinucleare HAP - antracen, benzoantracen, benzofluoranten, benzoperilen, benzopiren, chrisen, fluoranten, indeno (1,2,3) naftalin, fenantren i piren, total HAP i total hidrocarburi din petrol.
Valori de referin pentru urme de elemente chimice n soluri. Hidrocarburi aromatice, poliaromatice, hidrocarburi din petrol (mg/kg substan uscat) (Ghidra, 2004) Urme de poluant Valori Praguri de alert P raguri de intervenie normale / tipuri de folosine / tipuri de folosine Mai puin Sensibile Mai puin Sensibile sensibile sensibile I. HIDROCARBURI AROMATICE MONONUCLEARE: Benzen <0,01 0,25 0,5 0,5 Etilbenzen <0.05 5 10 10 Toluen <0,05 15 30 30 Xilen 7,5 15 15 _<0,05 II. HIDROXIBENZENI: Fenol <0,02 5 10 10 Catechol <0,05 5 10 10 Rescorcin <0,05 2,5 5 5 Hidrochinon <0,05 2,5 5 5 Cresol <0,05 2,5 5 5 Total <0,5 25 50 50 hidrocarburi aromatice (HA) IIL HIDROCARBURI AROMATICE POLINUCLEARE (HAP): Antracen <0,05 5 10 10 100 BenzoantraceN <0,02 2 5 5 50 Benzofluoraten <0,02 2 5 5 50 Benzoperilen <0,02 Benzopiren <0,02 Chrisen ~_ <0,02 Fluoranten <0,02 Indeno (1,2,3) <0,02 piren 5 2 2 5 2 10 5 _ 5 10 5 5 5 10 25 1000 10 5 5 10 5 5 5 10 15 500 100 10 50 100 50 50 50 100 150 2000
2 50 100 25 40 20 10 10 10 150
Naftalin <0,02 2 Fenantren <0,02 2 Piren <0,05 5 Total HAP: <0,1 7,5 IV: HIDROCARBURI DIN PETROL Total <100 200 hidrocarburi din petrol
n tabelul alturat sunt prezentate valorile de referin pentru: total clorbenzeni; total clorfenoli; 7 difenili policlorurai i total difenili policlorurati; total policlordibenzen; total policlordibenzfurani.
Valori de referin pentru urme de elemente chimice n soluri. Compui organici organoclorurati (mg/kg substan uscat) (Ghidra, 2004) Urme de element Valori Praguri de alert/ Praguri de intervenie normale tipuri de folosine /tipuri de folosinte Sensibile Mai putin Sensibile Mai puin sensibile sensibile 1. CLORBENZENI, CLORFENOLI: Total clorbenzeni <0,1 5 10 10 Total clorfenoli 0,02 2,5 5 5 II BIFENILI POLICLORURATI: PCB28 <0,0001 0,002 PCB52 <0.0001_ 0,002 0,01 0.01 0,01 0,01
30 10 0,05 0,05
289
PCB 101 PCB118 PCB138 PCB 153 PCB180 Total bifenili policlorurati
IIL POLICLORDIBENDIONE (PCDD), POLICLORDIBENZFURANI (PCDF) Total PCDD <0,0001 0,0001 0,0001 0,001 0,001 Total PCDF <0,0001 0,0001 0,0001 0,001 0,001 , Valori de referin pentru urme de elemente chimice n soluri. Pesticide organoclorurate i triazinice (mg/kg substan uscat) (Ghidra, 2004) Valori Praguri de alert/tipuri Praguri de intervenie/ normale de folosin tipuri de folosin Sensibile Mai puin Sensibile Mai puin sensibile sensibile 1,5 0,75 0,75 0,75 0,75 0,3 0,15 0,05 0,15 2 2 1,0 0,5 05 0,5 0,2 0,2 0,1 0,05 0,10 2 2 4,0 2,0 2,0 2,0 2,0 0,8 0,4 0,2 0,4 5,0 5,0
Urme de element
I. PESTICIDE ORGANOCLORURATE: SUMA DDT <0,15 0,5 DDT <0,05 0,25 DDE <0,05 0,25 DDD <0,05 0,25 HCH <0,005 0,25 alfa-HCH <0,002 0,1 beta-HCH <0,001 0,05 gama-HCH <0,0001 0,02 Delta-HCH <0,001 0,05 Total pesticide organoclorurate Total <0,2 1 II. TRIAZINICE: Total <0,1 1 triazin
n legislaie se prezint atitudinea pe care trebuie s o aib autoritile competente, n funcie de valorile urmelor de elemente chimice determinate n sol prin analize de laborator, dup cum urmeaz: nu se vor stabili msuri speciale dac concentraiile de poluani n sol se situeaz sub valorile de alert pentru folosinta sensibil a terenurilor; vor dispune msuri de prevenire a polurii i de monitorizare suplimentar a surselor poteniale de poluare, n cazul n care concentraiile unuia sau a mai multor poluanti din soluri depesc pragurile de alert (exist impact potential), dar se situeaz sub pragurile de interventie pentru fiecare tip de folosin a terenului; se va interzice folosirea zonei afectate pentru folosinte sensibile, cnd concentratiile unuia sau a mai multor poluani din soluri depese pragurile de interventie pentru folosinta mai puin sensibil; nu va admite trecerea unui teren de la o folosin mai puin sensibil, la o folosin sensibil dect atunci cnd concentratiile de poluani din sol se ncadreaz sub nivelul de alert al folosintei sensibile a terenului; vor dispune executarea unor studii de evaluare a riscului cnd sunt depite, la unul sau la mai multi poluani, pragurile de intervenie pentru terenuri cu folosin sensibil sau mai puin sensibil. Autoritile competente vor decide dac trebuie luate msuri de remediere i obiectivele acestora.
290
Analiza probelor de sol Prelevarea probelor de sol se face conform Ordinului MAPPM nr.184/1997 privind Procedura de analizare a bilanurilor de mediu". Analizarea probelor de sol se va face n laboratoare autorizate , dup metode standard sau agreate la nivel internaional. Rspunderea pentru acurateea i precizia rezultatelor analizelor privind concentraiile agenilor poluani revine prii care execut prelevarea probelor i laboratoarelor ce execut analizele. Indicatorii direci se adreseaz substanelor chimice poluante ajunse n sol i care au o aciune nociv asupra sntii omului i animalelor prin ele nsele. Aciunea nociv a substanelor chimice din sol nu se realizeaz direct dect n mod excepional. Obinuit, aciunea nociv a substanelor chimice din sol se produce prin intermediul aerului, apei sau a plantelor. Din aceast cauz, unul din criteriile sanitare de baz n stabilirea concentraiilor maxime admise de substante toxice n sol este reprezentat de determinarea transferului de poluanti n ap, aer sau plante. n mod obinuit, n aer ajung substanele volatile, n ap substantele solubile, iar n sol substanele insolubile. Din aer i ap, n ultim instan, substanele ncorporate n acestea ajung n sol. Plantele concentreaz cea mai mare parte a substanelor chimice poluante din sol. Fixarea de ctre plante a substanelor chimice poluante din sol depinde ns, n mare msur, de felul sau tipul plantelor. Plantele care fixeaz cea mai mare cantitate dintr-o substan se numesc plante test. Pentru pesticide, plantele test sunt morcovul i cartoful. Pentru substanele chimice foarte solubile, plantele test sunt arborii fructiferi tineri. Flora microbiologic teluric, care ia parte la procesele de biodegradare a substanelor chimice sau a compuilor intermediari, reprezint un alt element important n aprecierea polurii solului. Studiul florei microbiene telurice implicate n procesele de biodegradare a poluanilor i a plantelor test va face posibil n viitor stabilirea concentratiei maxime admise a poluanilor din sol. Indicatorii indireci se stabilesc prin metode organoleptice, chimice i biologice. Organoleptic, solurile poluate prezint o structur mai omogen, cu granule mici, de culoare mai nchis i mirosuri particulare neplcute, conferite de produii de descompunere a substanelor organice poluante. Chimic, adaosul de substane strine conduce la modificarea compoziiei solurilor, reflectat n pH i n raportul dintre elementele componente. Un test chimic indirect al polurii l reprezint azotul organic. S-a impus indicele lui Hlebnikov sau cifra sanitar care reprezint raportul dintre azotul organic teluric i azotul organic total. Acest indicator este ntotdeauna subunitar, fapt care arat c nu tot azotul din sol este reinut de acesta ca azot teluric. Cu ct raportul este mai aproape de unitate, cu att se apreciaz c solul este mai puin poluat. Se consider c solul este : nepoluat, la un indice de 0,95; slab poluat, ntre 0,85 - 0,95; mediu poluat, ntre 0,70 - 0,85 i puternic poluat, sub 0,70. Biologic, solurile poluate prezint o ridicat ncrctur de germeni microbieni i elemente parazitare. Indicatorii polurii biologice a solului se refer la: numrul total de germeni/g sol; bacterii coliforme/g sol; bacterii perfrigens/g sol; bacteriofagii enterici/g sol, 291
bacterii termofile/g sol, numr ou geo-helmini/g sol. Din punct de vedere al nivelului polurii biologice, solurile se mpart n: nepoluate, slab poluate, mediu poluate i puternic poluate. Solul poate constitui o cale de transmitere a unor ageni patogeni, jucnd n acest fel un rol bine determinat n epidemologie. Solul poate reprezenta un pericol mai ales n cazul unei poluri recente i abundente cu dejecii provenite de la efective de animale bolnave. Numrul total de germeni (NTG) este un indicator igienic relativ. La stabilirea NTG, se iau n considerare numai germeni care se dezvolt la 37C. Germenii care se dezvolt la alte temperaturi se apreciaz c au numai un rol agrobiologic. Bacteriile coliforme reprezint un indicator sanitar ce exprim mai bine nivelul polurii, dar fr a putea stabili dac impurificarea este de natur uman sau animal. Pentru interpretarea nivelului de poluare cu bacterii coliforme se determin titrul coli. Titrul coli reprezint cantitatea minim de sol n care s-au identificat bacterii coliforme. Bacterii perfringens (Clostridium perfringens) (sporulate) pot aduce unele precizri legate de momentul impurifierii mediului. Dac izolrile acestora sunt simultane cu E. coli denot o impurificare recent, pe cnd prezena lor singure indic o poluare mai veche. Prezenta bacteriilor perfringens indic riscul unei infectii cu germeni patogeni de tipul Salmonella, Shigella, precum i a unor enterovirusuri; au o rezisten mai mare n mediul exterior dect enterobacteriaceele. La fel ca pentru bacteriile coli, se determin titrul perfringens , care are aceeai semnificatie ca titrul coli. Bacteriofagii enterici prezint importan deosebit n aprecierea momentului impurificrii. n cazul unei impurificri, primul apare fagul de coli, urmat de fagul tific 0, apoi de Vi , disprnd n ordine inversa apariiei. Mentinerea unei relaii proporionale ntre fag i bacterii indic o impurificare recent i continu, iar discordanta lor arat o impurificare veche. Bacteriile termofile (se dezvolt la temperatura de 72C) arat o fertilizare a solului cu gunoi de grajd. Oule de geohelminti (ascarizi, tricocefalii, strongili). Exist o concordan ntre nivelul de poluare a solului cu ou i larve de geohelminti i gradul de infestare a populaiei umane i animale. Examenul parazitologic al solului se face cu probe recoltate de pe puni i fnete, dar i n padocuri. Virusurile, odat ajunse n sol, se absorb pe granule, unde rmn ca atare, fiind greu de dezabsorbit i prelevat, fapt foarte important din punct de vedere igienic.
Indicatorii polurii biologice a solului (Ghidra, 2004) Nr. Titru Titru germeni/g sol bact.coliforme bact.perfringens 1 000 10 000 100 000 1 000 000 1 i peste 1-0,01 0,01-0,001 Sub 0,001 0,1 0,1-0,001 0,001-0,0001 Sub 0,0001
Solul are o mare capacitate de autoepurare. n conditii normale, solul cu grad mediu de poluare se autoepureaz vara n circa 5 zile, iar toamna i primvara n circa 10 zile. n solurile cu permeabilitate mare, bine aerate i cu umiditate redus, autoepurarea este mai rapid. Autoepurarea se bazeaz pe procesele biologice aerobe, oxidative, din care rezult o mineralizare integral a substantelor organice cu producerea de CO2, N2 i H2O. n cazul solurilor compacte, reci, cu umiditate ridicat i deficit de aerare, se desfoar procese biochimice anaerobe, de reducere. Produii finali, n acest ultim caz,
292
sunt: NH3 , CH4, H2S, acizii grai inferiori, aldehidele, mercaptanii, care nu pot fi folosii direct de ctre plante, fapt care conduce la acumularea lor n sol, difuzarea n ap sau degajarea n atmosfer. Autoepurarea conduce la mineralizarea substantelor organice, n produi intermediari i finali, sub actiunea microflorei heterotrofe i n acelai timp, la autosterilitatea de germeni patogeni. Autosterilitatea este generat de lipsa echipamentelor enzimatice pentru o via saprofit a germenilor patogeni i de antagonismul biologic (secretia de substante antibiotice, existena bacteriofagilor i organismelor bacterivore).Fenomenul este cu att mai intens, cu ct procesele biochimice sunt mai intense.
POLUAREA AERULUI Importanta aerului pentru sntatca plantelor, vieuitoarelor i omului Dintre cele cinci zone ale atmosferei, prezint interes numai cea mai apropiat de pmnt, denumit troposfer, care are o nlime cuprins ntre 6 i 18 km. n acest strat al atmosferei se constat o anume stabilitate a compoziiei chimice a aerului i o permanent schimbare a componentelor sale fizice. Importana sanogen a aerului rezid n principal n: -asigur condiia primar pentru existenta vieii; -oxigenul reprezint combustibilul necesar desfurrii proceselor metabolice vitale; -dinamica presiunii pariale a gazelor inspirate influenteaz organismul prin modificrile induse in concentraia acestora; -realizeaz un ecran protector mpotriva nocivitii unor componente ale radiaiei solare. Compoziia chimic natural a aerului Din punct de vedere chimic aerul este compus din: -gaze care particip i n procesul de respiraie: oxigen i bioxid de carbon, -gaze inerte: azotul; -gaze rare: ozon, argon, xenon, neon, kripton; -gaze radioactive: radon; -vapori de ap, cristale de ghea, polen, pulberi; -se ntlnete i o cantitate redus de bacterii. Aerul inspirat de om conine, la nivelul solului: O2 = 20,93%, N2 = 78,09%, CO2 = 0,03%, Ar = 0,93% (fr importan fiziologic) Dintre componentele aerului, interes pentru viaa plantelor, vieuitoarelor i omului prezint oxigenul i bioxidul de carbon (Beril i colab., 2002, Ghidra, 2004). Surse de poluare atmosferic Poluarea aerului const n schimbarea compoziiei cu efecte duntoare asupra biocenozelor i biotopurilor. Poluarea provine din surse naturale i surse antropice. Sursele naturale pot fi: solul, din care se elimin pesticidele solide sub form de praf; gaze i vapori de ap; plantele care elimin n aer polen; i animalele erupiile vulcanice (praf, gaze); cutremurele generatoare de praf n aer; praful cosmic i meteoriii. 293
Sursele artificiale sunt de fapt activiti umane desfurate n industrie, transport, agricultur. Sursele de poluare atmosferic pot fi fixe sau mobile. Sursele fixe sunt constituite din dispozitive de combustie industrial i menajer care emit pulberi, acizi de carbon, siliciu, azot; de asemenea, pot fi instalaiile industriale din chimie, metalurgie, care elimina oxizi de Fe, Mn, Cr, Ni, Zn, Pb. alt surs : vulcanii, apele stttoare care emit diverse gaze i vapori. Sursele mobile mprtie la distane mari diveri poluani. n aceast categorie intr vntul, psrile, apa (Zamfir, 1979). Poluanii atmosferici. Atmosfera poate fi afectat de substane solide, lichide sau gazoase. Pulberile solide provin din eroziuni ale rocilor naturale. Ele pot fi: anorganice: oxizi metalici, minerale, ciment; organice: de origine animal: lna; de origine vegetal: bumbac, in i sintetice; pesticide i colorani organici. Aciunea pulberilor asupra organismului uman depinde de natura substanelor, concentraia n aer, solubilitatea n apa i timpul de expunere. Dup aciunea toxic exist pulberi iritante (corozive): varul; pulberi alergice (bumbacul, cnepa); cancerigene: compui cu Cr, As, materiale radioactive. Substanele lichide : provin din diferite domenii industriale i pot forma aerosoli + aer, datorit volatilitii lor. Vaporii se pot mprtia la distane foarte mari, afectnd aparatul respirator, ochii; se pot depune pe plante dereglndu-le respiraia i afecteaz construciile. Scderea concentraiei de oxigen din aer este un fenomen nedorit care ridic serioase probleme. Rezerva de oxigen atmosferic se menine prin fotozintez, dar procesele de ardere a unor cantiti mari de combustibili fosili i scderea suprafeelor ocupate de ecosistemele naturale ce elibereaz oxigen, fac s nu se mai poat regla coninutul de oxigen atmosferic normal, prin fotosintez. CO apare n atmosfer n procesele de ardere incomplet a hidrocarburilor i din unele produse industriale. Are aciune asfixant prin blocarea hemoglobinei. Oxizii de azot sunt generai n cantiti mari de industria fertilizanilor cu N2. Acetia nu produc iritaii dar afecteaz alveolele pulmonare. Produii cu S provin din vulcani, din arderea combustibililor fosili-petrol, crbune de pmnt, din industria H2SO4 i industria alimentar. La plante SO2 ptrunde prin ostiole i mpreun cu H2O i CO2 provoac leziuni distrugnd clorofila. Rezistena plantelor la aciunea SO2 este diferit de aceea, pentru perdelele de protecie, spaiile verzi din orae i marginea drumurilor se aleg plante rezistente la poluare cum ar fi: fag, tuia, iedera, gladiole, irii, trandafiri. F i compuii cu F acionez asupra unor enzime i asupra clorofilei, frunzele cad timpuriu chiar n timpul verii, produciile sunt sczute, iar micoorganismele din sol se reduc. Smogul este un amestec de poluani diferii aflai ntr-o atmosfera umed i se prezint ca o cea alburie sau galben-cafenie. La alctuirea smogului particip produi ai motoarelor cu ardere intern-resturi de hidrocarburi incomplet arse, plumb, brom, bor, ali compui rezultai din benzin, oxizi de azot, mai ales NO2, CO, SO2. Sub aciunea razelor solare, mai ales a UV, ntre aceti compusi se produc reacii secundare i teriare din care iau natere alte substane ca ozon, acrolein, formaldehid, peroxiacetilnitrai (PAN) etc. Dintre acestea PAN i ozonul au efecte toxice deosebit de puternice. PAN - peroxiacetilnitraii - determin la plante leziuni foliare, necroze ale esuturilor frunzei, inhib fotosinteza. La animale i om irit ochii, afecteaz respiraia. Ozonul este toxic pentru plante, ptrunde prin stomate, atac esutul palisadic i intensific procesele oxidative ducnd la epuizarea rezervelor de hran ale plantelor. Ali compui ai smogului sunt cancerigeni (Zamfir, 1979). 294
Poluarea aerului Viaa pe Pmnt nu este posibil dect printr-un consum nentrerupt de aer. Drept urmare, pentru a asigura continuitatea vietii, este absolut necesar mentinerea puritii i caracteristicilor naturale ale atmosferei. Aceast cerint fundamental trebuie avut in vedere n toate activittile economice i sociale pentru ca omul s poat tri sntos i cu toate vietuitoarele din jurul lui, s-i poat ndeplini rostul pe Pmnt. Poluarea atmosferei a fost definit ca fiind introducerea de ctre om, direct sau indirect, de substante sau energie care au o actiune nociv, de natur s pun n pericol sntatea omului, s duneze resurselor biologice i ecosistemelor, s deterioreze bunurile materiale i s aduc atingere sau s pgubeasc valorile de agrement i alte utilizri legitime ale mediului (Lupan, 2001). n acelai timp, pentru c n general este extins pe spaii mari, poluarea atmosferei transfrontier a fost definit ca fiind acea poluare a crei surs fizic este cuprins total sau parial n zona supus jurisdictiei naionale a unui stat i care are efecte duntoare ntr-o zon supus jurisdiciei nationale a altui stat, la o distan la care nu este n general posibil s se disting contributia surselor individuale sau a grupurilor de surse de emisie (Lupan, 2001). Poluarea atmosferei, prin efectele sale negative asupra aerului, solului i apei, constituie una din problemele majore ale omenirii la nceputul mileniului trei. Aceast problem preocup tot mai mult i societatea romneasc. Poluarea atmosferic este n general transnaional i afecteaz suprafee mari ale globului pmntesc (Ghidra, 2004). Specialitii consider c atmosfera este poluat n momentul n care concentraia substanelor care intr n compoziia sa natural, precum i a substanelor chimice introduse in mod artificial (sistematic sau accidental), depete nivelul maxim admisibil i produce efecte negative asupra mediului nconjurtor, a structurilor sale i a fenomenelor meteorologice. In fiecare an atmosfera se mbogete" cu cca 200 milioane tone de oxizi de carbon, 50 milioane tone de hidrocarburi, 150 milioane tone de bioxid de sulf, 120 milioane tone de cenu i mii de tone de alte substante chimice nocive (Ghidra i Zaharia, 2002). Ca urmare a acestei mbogiri anuale", atmosfera poluat exercit o serie de efecte negative asupra mediului nconjurtor dintre care enumerm: a) Distrugerea progresiv a stratului de ozon din straturile superioare ale atmosferei ca urmare a acumulrii masive de oxizi de carbon, in special de bioxid de carbon. Oamenii de tiin estimeaz c efectele distrugerii stratului de ozon sunt multiple dintre care enumerm: creterea nivelului de iradiere cu radiaii ultraviolete, creterea procentului de cancer de piele, leucemie, cataracte, scderea produciei de plancton, n special din Antartica, scderea produciei de pete marin, reducerea produciei agricole (gru, porumb, soia, cartofi, orez). b) Formarea ozonului troposferic are efecte deosebit de grave asupra strii de sntate a oamenilor i a sntii i productivitii plantelor i animalelor ca urmare a dereglrii mecanismului de fotosintez. c) Ploile acide produc efecte negative att asupra mediului natural, ct i asupra celui artificial. Efectele asupra mediului natural se resimt prin modificarea calitii apelor de suprafa i de adncime, producerea de arsuri la nivelul plantelor i animalelor i chiar intoxicarea acestora. d) Accentuarea efectului de ser care produce schimbri climatice, cum ar fi: creterea temperaturilor medii anuale (nclzirea global), apariia unor fenomene meteorologice devastatoare (canicul insuportabil i prelungit, geruri nprasnice, uragane, taifunuri i furtuni devastatoare), reducerea produciei de alimente, dispariia unor specii de plante i animale, 295
nrutirea strii de sntate i pierderea de viei omeneti (Ghidra, 2004). Poluarea atmosferic este deosebit de periculoas, att prin efectele negative care le produce n mod direct asupra plantelor i animalelor, ct i prin nrutirea tuturor factorilor climatici. Cunoaterea exact a surselor de poluare a atmosferei, sub aspectul naturii i dinamicii acestora, este necesar pentru stabilirea msurilor de protecie a mediului nconjurtor. Dup natura sa, poluarea poate fi: fizic, chimic i biologic. Poluarea fizic Poluarea fizic este generat de introducerea n atmosfer a unui adaos de energie care perturb situaia normal, natural. n funcie de tipul energiei introduse suplimentar n atmosfer, putem avea: a) poluare sonor cauzat de energia mecanic; b) poluare termic produs de energia caloric; c) poluare cu radiaii penetrante determinat de energia radiant. a) Poluarea sonor apare ca urmare a inducerii oscilanilor n masele de aer pe care organul auditiv al omului i animalelor le percepe ca zgomote i vibraii. Zgomotele plcute (tonale) auzului sunt considerate armonice, iar cele neplcute (atonale), nearmonice. n general, zgomotele sunt definite ca fenomene sonore, generate de prezena mai multor sunete, nearmonice, cu intensitate, origine i durat diferite. Zgomotele se caracterizeaz prin: intensitate, frecven i trie. Intensitatea sunetului este dat de presiunea undei sonore, i se msoar cu sonometrul (fonometru). Se exprim n decibeli (dB). Frecvena sunetului este data de numrul oscilatiilor acustice produse n timp de o secund. Se msoar n Heri (o oscilaie/secund=l Hz). Tria sunetului este reprezentat de intensitatea senzatiei auditive a acestuia. Se msoar n foni (1 fon=l dB la frecventa de 1000 Hz). Orice zgomot are un prag minim de audibilitate de la care este perceput de urechea uman i un prag maxim de audibilitate. Intervalul cuprins ntre cele dou praguri poart denumirea de suprafa de audibilitate. Pragul minim de audibilitate este reprezentat de un sunet cu frecvena de 1000 Hz i intensitatea de 10-6W/cm2, iar pragul superior de audibilitate de un sunet cu frecvena de 1000Hz i intensitatea de 10-4W/cm2. n general, animalele i omul se obinuiesc cu zgomotele i vibraiile aflate sub pragul maxim de audibilitate, percepndu-le doar ca factori de stres, care, n timp, dac sunt frecvente produc efecte negative asupra organului auditiv. Zgomotele i vibraiile care depesc pragul maxim de audibilitate produc senzatia de durere i chiar leziuni la nivelul timpanului, inducnd de regul surditatea. Pentru prevenirea efectelor negative ale polurii sonore, prin Ordinul Ministerului Sntii nr. 526/1997 s-a stabilit c nivelul acustic echivalent continuu msurat la 3 m de peretele locuintei i la 1,5 m nime de la sol, nu trebuie s depeasc 50 dB pe timp de zi i de 40 dB pe timp de noapte (n intervalul 2200-600). Sunetele cu frecvena cuprins ntre 0 i 20 Hz se numesc infrasunete i sunt emise n urma exploziilor puternice i naintea cutremurelor de pmnt i a furtunilor. Unele animale percep aceste sunete i i modific comportamentul, devenind mai agitate. Sunetele cu frecventa mai mare de 20 mii Hz se numesc ultrasunete i sunt percepute de cini i pisici, dar nu se cunoate efectul acestora (Ghidra, 2004).
296
b) Poluarea termic se produce datorit creterii temperaturii atmosferei peste limitele naturale. Poluarea termic poate fi direct sau indirect. Poluarea termic direct se realizeaz prin degajarea n atmosfer de energie termic rezultat n urma activitilor umane de producere a bunurilor de consum. Poluarea termic indirect este rezultatul distrugerii stratului de ozon la nivelul troposferei i apariiei efectului de ser" ca urmare a acumulrii unor gaze provenite din activitile umane, dintre care enumerm: metanul, bioxidul de carbon, amoniacul, bioxidul de azot, clorofluorocarbonii (freonii), bromofluorocarbonii (halonii). Razele solare penetreaz atmosfera i ajung n pmnt n proporie de cca. 46%. O parte din radiaiile solare ce ajung pe pmnt sunt reflectate (cele infraroii) n atmosfer. Ca urmare a faptului c stratul de gaze poluante acumulat n troposfer nu permite penetrarea de ctre razele infraroii (purttoare de cldur) ce vin dinspre pmnt, are loc creterea temperaturii. Acest fenomen aa cum a fost artat anterior, poart denumirea de ,,efect de ser" i a existat din momentul nceperii polurii atmosferei. Ca urmare a efectului de ser", oamenii de tiin estimeaz, c pn la sfritul secolului XXI, temperatura medie a Pmntului va crete cu 3C. La aceast cretere a temperaturii medii a Terrei, aportul cel mai important l au rile CSI, SUA, rile UE, China, Brazilia i India. c) Poluarea eu radiaii penetrante devine din ce n ce mai important, pe msur ce omul utilizeaz din ce n ce mai mult tehnicile nucleare. Fenomenul de emisie i propagare n spaiu a unor unde sau particule purttoare de energie poart denumirea de radiaie. Cele mai importante sub aspectul pericolului de poluare sunt radiatiile penetrante (electromagnetice i corpusculare) care produc efecte de natur fizic, chimic sau biologic. Radiaiile electromagnetice sunt reprezentate de cmpuri electromagnetice care se propag variabil n timp i spaiu, sub form de unde electromagnetice, purttoare de energie. Cele mai importante, din aceast categorie, sunt radiaiile X" i gama". Radiatiile corpusculare sunt reprezentate de fluxuri de particule atomice i se mai numesc i radioactive. Cele mai importante sunt radiaiile alfa", beta", pozitroni" i ,,neutroni". Radioactivitatea este fenomenul fizic prin care nucleul iniial se dezintegreaz spontan i ca urmare a emisiei de radiaii alfa, beta i gama se transform ntr-un nucleu final. Radioactivitatea genereaz efecte directe i indirecte asupra organismelor vegetale i animale. Efectele directe au repercusiuni n structura biologic iar efectele indirecte produc modificri ale mediului biochimic. Pentru producerea acestor efecte, este necesar ca organismele s fie expuse sau s acumuleze o anumit doz de radiaii. Doza de radiatii se poate exprima ca doz de expunere (n roentgen) sau ca doz absorbit (n rad.). Doza de expunere se determin prin msurarea ionizrii totale cauzat de fluxul de radiaii n unitatea de volum de aer, iar doza absorbit se determin prin msurarea ionizrii totale produs de fluxul de radiaii pe unitatea de mas de esut. Gradul de vtmare biologic depinde att de cantitatea de energie absorbit ct i de natura radiaiilor. Pentru a reprezenta ct mai fidel aciunea conjugat a celor dou variabile, a fost introdus, n radiologie, noiunea de factor de calitate. Produsul dintre doza absorbit i factorul de calitate poart denumirea de doz echivalent biologic i red mai fidel gravitatea efectului biologic produs. Doza echivalent biologic se exprim n rem, adic roentgen eqiuvalent man.
297
Sunt stabilite doze echivalente biologic maxim admise in cursul unui an de zile. Astfel, aceste doze sunt: 5 rem/an pentru expunere profesional, 1,5 rem/an pentru expunere neprofesional i 0,5 rem/an pentru persoane din populaia obinuit. Efectele negative ale polurii radioactive sunt de natur somatic (boli acute sau cronice, cancere, leucemii) sau genetice (mutaii genetice, aberaii cromozomale, malformaii) Poluanii radioactivi pot fi sub form lichid, solid sau gazoas. Sursele de poluare radioactiv pot fi naturale sau artificiale. Sursele naturale sunt reprezentate de apele i rocile radioactive. n general, n mediul nconjurtor se nregistreaz o radioactivitate natural normal care nu produce efecte negative asupra plantelor i animalelor. Avnd n vedere c apele i rocile sunt surse naturale de radioactivitate, se impune ca inainte de a fi folosite s fie evaluate dac depesc dozele biologic maxim admise. Sursele artificiale sunt reprezentate de minereurile radioactive, de combustibilii nucleari, de centralele nuclearoelectrice, reactoarele i acceleratoarele de particule, izotopi radioactivi, accidentele nucleare i exploziile provocate pentru perfecionarea armelor nucleare. Contaminarea radioactiv a plantelor i animalelor conduce la obinerea unor produse alimentare periculoase pentru organismul uman (Ghidra, 2004). Poluarea chimic Poluarea chimic a atmosferei se nregistreaz fie prin introducerea, accidental sau sistematic, a unor substante chimice strine de compoziia normal a acesteia, fie prin depirea nivelurilor normale ale unor componeni naturali, cum ar fi: bioxidul de carbon, ozonul. Sursele de poluare chimic sunt naturale i artificiale. Sursele naturale au o importan limitat la nivelul zonei unde se afl i sunt mult mai reduse ca cele artificiale. Dintre sursele naturale de poluare chimic citm: eroziunea solului, erupiile vulcanice, descompunerea substantelor organice. Sursele artificiale sunt mult mai numeroase iar ponderea lor crete vertiginos, afectnd zone tot mai ntinse. Poluarea chimic artificial a atmosferei a devenit transnaional. Intre sursele artificiale sunt mentionate cele stationare, mobile, fumatul, pregtirea hranei i nclzirea locuintelor. A. Sursele stationare cuprind marea complexitate a proceselor industriale precum i procesele de combustie (ardere). 1. Procesele industriale cele mai poluante sunt: idustria chimic, metalurgia feroas, metalurgia neferoas i industria materialelor de constructii. Industria chimic, prin fabricile de ngrminte, pesticide, acizi, cauciuc, mase plastice, celuloz, medicamente, evacueaz o mare cantitate de gaze, vapori i materiale sub form de pulberi i suspensii, dintre cele mai toxice. Metalurgia feroas polueaz cu substane aflate n suspensie (mangan, arsen, nichel, silicai, crbune, oxid de fier, floruri) i cu gaze toxice (hidrogen sulfurat, sulfai, oxizi de sulf, monoxid de carbon). Poluarea are loc n toate fazele procesului de producie (cocsificare, aglomerarea minereurilor, producerea de font n furnale, rafinarea metalelor n oelrii).
298
Metalurgia neferoas polueaz ca urmare a evacurii n atmosfer a unor mari cantiti de oxizi de carbon, azot, sulf, plumb, zinc, cupru, bariu, cadmiu i diverse floruri. Industria materialelor de construcii polueaz prin gazele rezultate n urma arderii combustibililor fosili, dar i prin produsele finite aflate sub form de suspensii sau pulberi n atmosfer in apropierea fabricilor de ciment, ghips, var, azbest. 2. Procesele de combustie (ardere) a crbunelui, petrolului i gazelor naturale au loc pentru a obtine energie necesar n scopuri industriale. Crbunele este combustibilul cel mai mult folosit i de aceea este cel mai poluant. Fumul rezultat n urma arderii crbunelui contine suspensii (carbon, siliciu, aluminiu, oxizi de fier, zinc, cadmiu, vanadiu, nichel, seleniu,) i gaze (oxizi de carbon, azot, sulf, acid fluorhidric, aldehide, vapori de ap) Petrolul i produsele sale reprezint combustibilii cu importan economic foarte mare. Din arderea lor rezult cenu (bogat n sulfati, seleniu, valadiu, ) i gaze (oxizi de carbon, azot, sulf, hidrocarburi policiclice). Gazele naturale au potentialul poluant cel mai redus dintre toti combustibilii fosili. In urma arderii gazelor naturale rezult hidrocarburi, oxizi de azot i oxizi de carbon. B. Sursele mobile se refer la mijloacele de transport rutiere, fluviale, aeriene i maritime. Mijloacele de transport, oricare ar fi ele, contribuie la poluarea atmosferei cu produii rezultati n urma arderii carburanilor (funingine, oxizi de carbon, bioxid de sulf oxizi de azot, hidrocarburi, suspensii, plumb, antioxidanti, lubrefianti, anticorozivi, detergeni) i a scurgerilor accidentale de combustibili i lubrefiani. C. Fumatul reprezint nu numai o obinuin ci i o important surs de poluare a mediului nconjurtor, mai ales din spaiile nchise. Acest obicei polueaz att aerul inhalat de fumtori ct i pe cel inspirat de nefumtorii din ncperea respectiv. S-a constatat c in urma fumatului tutunului, aerul este poluat cu pulberi fine de fum, nicotin, oxizi de carbon, hidrocarburi i nitrozamine cancerigene i cu alte aproximativ o mie de substante identificate, a cror actiune negativ nu este in totalitate cunoscut. D. Pregtirea hranei i nclzitul locuintelor polueaz atmosfera cu pulberi, cenu, oxizi de carbon, bioxid de sulf. Aceti poluanti afecteaz att aerul din interiorul locuintelor ct i al localitilor respective.(Ghidra, 2004). Poluanii chimici ai atmosferei. Este evident c poluantii afecteaz in mod diferit mediul nconjurtor i in special atmosfera. Principalii poluanti chimici ai atmosferei sunt: ozonul, compuii organici volatili, monoxidul de carbon, oxizii de sulf, oxizii de azot, hidrogenul sulfurat, amoniacul, clorul, substantele toxice aeropurtate, pulberile sedimentabile i in suspensie, substantele radioactive. Ozonul are molecula format din trei atomi de oxigen i se prezint sub forma unui gaz albstrui, foarte toxic, puternic oxidant i cu miros caracteristic. Pe cale natural, in atmosfer, ozonul se formeaz in urma descrcrilor electrice (fulgere) i sub aciunea razelor solare. Pe cale artificial, ozonul se formeaz din oxizi de azot, compui organici volatili, oxizi de carbon. Ozonul format in partea inferioar a troposferei constituie principalul poluant al atmosferei n zonele puternic industrializate. In timp ce
299
ozonul din straturile inferioare ale atmosferei este duntor vieii pe pmnt, ozonul din straturile nalte protejeaz viata pe pmnt deoarece, o permite evacuarea cldurii n spaiul interplanetar i o nu permite penetrarea de ctre razele ultraviolete, periculoase pentru plante i animale. Ozonul este implicat n formarea smogului, n zonele puternic industrializate producnd afectiuni ale aparatului respirator (astm bronic, reducerea funciilor pulmonare i dificultate respiratorie), iritarea ochilor, congestii nazale, slbirea sistemului imunitar i reducerea rezistentei la infectii. Concentraiile maxime de ozon admise in aer(conform STAS 12574-87) sunt de 0,03 mg/m3 pentru media pe 24 ore i de 0,1 mg/m3 pentru media de o jumtate de or (Ghidra, 2004). Compuii organici volatili (COV) provin din prelucrarea ieiului i a produselor petroliere, in urma arderii carburanilor folositi la autovehicule i din compostarea reziduurilor menajere, agricole, industriale. Cei mai cunoscuti i mai ntlnii compui organici volatili sunt: benzina, eterii de petrol, benzenul, acetona, cloroformul, fenolii, esterii, sulfura de carbon . Compuii organici volatili stau la baza formrii ozonului i impactul lor asupra atmosferei este similar cu al acestui gaz. Monoxidul de carbon este cel mai comun i mai rspndit poluant al mediului nconjurtor. Estimrile efectuate au artat c emisiile totale de monoxid de carbon n atmosfer sunt mai mari dect ale tuturor celorlalti poluani, luai mpreun. Monoxidul de carbon este un gaz incolor i inodor, mai uor dect aerul i rezult, n principal, n urma o arderilor incomplete din motoarele cu combustie intern, dar i o din arderea combustibililor fosili. Se combin foarte uor cu hemoglobina formnd un compus stabil, greu circulabil numit carboxihemoglobina. Inhalarea unor cantiti reduse de monoxid de carbon produce efecte negative la nivelul sistemului nervos central, respirator i vascular, persoanele respective acuznd ameeli, respiraie greoaie i chiar stri de lein. n situaiile cnd hemoglobina este fixat de monoxidul de carbon n procent mai mare (cca. 80%) se instaleaz moartea organismelor. n conformitate cu prevederile STAS 12574-87 care reglementeaz calitatea aerului din zonele poluate, concentratiile maxime admisibile de monoxid de carbon sunt de 6,0 mg/m3 pentru media de lung durat. n Romnia, cantitatea de monoxid de carbon admis n gazele de eapament ale autovehiculelor este de 2-4% din volumul acestora (Ghidra, 2004).
300
Aciunea fiziologic a mon oxidului de carbon Este de tiut faptul c expunerea omului la concentraii mari de monoxid de carbon poate produce moarte. Abia n ultimul timp au fost n amnunt cunoscute efectele expunerii la concentraii mici (100 ppm sau mai puin). Acest interval de concentraii este cel mai important, deoarece concentraiile ambiante de monoxid de carbon sunt deseori mai mici de 100 ppm. Efectul toxic al monoxidului de carbon asupra corpului este datorat n primul rnd reaciei dintre monoxidul de carbon i hemoglobina (Hb) din snge. In mod normal, hemoglobina funcioneaz n snge ca un sistem transportor, ce duce oxigenul sub forma oxihemoglobinei (O2Hb) de la plmni la celule i dioxidul de carbon din celule la plmni (CO2Hb). Hemoglobina poate forma ns i un compus cu monoxidul de carbon, carboxihemoglobina (COHb). Afinitatea monoxidului de carbon pentru hemoglobin este de 200 de ori mai mare dect cea a oxigenului i deci, cnd exist ambele posibiliti se formeaz COHb i nu O2Hb. Concentraia de COHb din snge este legat direct de concentraia de monoxid de carbon din aerul inhalat. Pentru o concentratie dat de monoxid de carbon n aerul ambiant, nivelul COHb din snge va atinge o concentraie de echilibru dup un anumit interval de timp. Aceast concentraie de echilibru a COHb poate fi meninut n snge atta timp ct concentraia de monoxid de carbon din aerul nconjurtor nu se modific. Concentratia normal de COHb din snge este de 0,5%. O parte din acesta este datorat monoxidului de carbon produs n corp prin metabolismul distructiv al hemului. Restul provine din concentraiile sczute de monoxid de carbon din aerul atmosferic. Procentajul COHb de echilibru n curentul sanguin al unei persoane expuse continuu la concentraii ambiante de monoxid de carbon sub 100 ppm poate fi uor calculat prin ecuatia urmtoare: % COHb n snge = 0,16 (conc.CO din aer, n ppm) + 0,5; 0,5 este procentajul normal de COHb din snge. Timpul necesar pentru ca procentajul de COHb din snge s ating echilibrul cu concentraia monoxidului de carbon din aer, este funcie de activitatea fizic a persoanei expuse. Echilibrul este atins mai rapid la persoanele implicate ntr-o activitate intens. Fumul de igar conine o concentratie de monoxid de carbon de peste 20000 ppm. Acest nivel ridicat de monoxid de carbon din aerul inhalat conduce la o concentraie mai ridicat de COHb n sngele fumtorilor, dect la nefumtori. La animale ca i la oameni, monoxidul de carbon afecteaz sistemul de transport al oxigenului. Datele experimentale obtinute n urma expunerii animalelor la monoxidul de carbon au dus la concluzia c o expunere ndelungat poate s produc schimbri morfologice n inim i creier. Expunerile de scurt durat la concentraii sczute de monoxid de carbon, produc efecte asupra sistemului nervos central, vascular i respirator. La plantele nalte, supuse unor expuneri la concentraii de monoxid de carbon pn la 100 ppm, timp de 1-3 sptmni, nu s-au determinat efecte de distrugere. Capacitatea de fixare a azotului de ctre bacteriile libere a fost inhibat prin expunerea timp de 35 ore la concentraii de monoxid de carbon de 2000 ppm. Intruct nivelele de monoxid de carbon depesc rar 100 ppm, chiar i pentru perioade mici de timp, daune importante asupra vegetaiei i microorganismelor par deocamdat imposibile (Ghidra, 2004).
301
Oxizii de sulf sunt reprezentai de bioxidul de sulf i de trioxidul de sulf. Sursele de poluare cu oxizi de sulf sunt naturale (cca. 66,65%) i artificiale (cca. 33,33%). Sursele artificiale provin n majoritatea cazurilor din arderea combustibililor fosili. Din totalul emisiilor de oxizi de sulf generate de sursele artificiale, cca.96% se produc n surse staionare (termocentrale, combinate chimice, combinate siderurgice) i numai 4% n surse mobile (automobile, tractoare, autocamioane, vapoare) Bioxidul de sulf este un gaz incolor, cu miros specific, ptrunztor i nbuitor. Este transportat uor de curentii de aer deoarece are proprietatea de a se fixa uor pe particule de praf. n atmosfer, in prezena vaporilor de ap, bioxidul de sulf se transform n acid sulfuric, producnd ploile acide, cnd se afl peste anumite limite. Ploile acide produc fenomene de fitotoxicitate asupra aparatului foliar al plantelor i contribuie la poluarea solului i a apelor terestre. La om i animale, bioxidul de sulf, ajuns la snge, produce tulburri n metabolismul glucidelor i n sistemul enzimatic. Concentraiile mai reduse, cuprinse ntre 1-5 ppm, provoac iritatia cilor respiratorii, iar cele mai mari, cuprinse ntre 5-10 ppm, produc spasmul bronic. Efectele toxice, nocive ale bioxidului de sulf sunt potentate (amplificate) n prezena pulberilor. Condiiile de calitate a aerului prevzute n STAS 12574-84 admit o concentratie maxima de bioxid de sulf de 0,75 mg/m3pentru media de scurt durat (0,5 ore), de 0,25 mg/m3 pentru durata de 24 ore i de 0,01 mg/m3 pentru un an de zile. Trioxidul de sulf, la temperatura camerei se gsete sub form gazoas i este mult mai toxic dect bioxidul de sulf. Efectele negative ce le produc asupra plantelor i animalelor sunt similare cu cele ale bioxidului de sulf, cu deosebirea c acestea apar la concentraii mult mai mici. n comparaie cu bioxidul de sulf, trioxidul de sulf este foarte corosiv, iar prezenta lui n ploile acide are efecte negative asupra corpurilor metalice (autoturisme, autovehicule, acoperiuri de tabl neagr). Prezenta dioxidului de sulf n atmosfer constituie principala cauz a proceselor distructive asupra plantelor. Multe plante prezint o sensibilitate accentuat n comparaie cu oamenii i animalele, la acest poluant. Sensibilitatea este funeie de concentraie i de timpul de expunere. Dioxidul de sulf provoae leziuni localizate, cu efecte generale asupra plantelor. Celulele sunt mai nti inactivate. Dac atacul este masiv, esuturile vegetale se distrug, rmnnd urme caracteristice asupra nervurilor. Dac atacul este minim i localizat la cteva celule, se observ pete brune ce pot persista mult timp nainte de cderea frunzelor. Prile atacate sunt eliminate, iar cele neatacate i reiau cu repeziciune funciile fiziologice normale. La criptogamele lezate apare cloroza, cu un aspect macroscopic foarte grav. Leziunile provocate de dioxid de sulf i tulburrile produse n asimilatia clorofilial diminueaz fotosinteza. Mecanismul actiunii toxice a dioxidului de sulf asupra plantelor este nca putin cunoscut. Se tie ns c aciunea sa toxic este determinat de proprietile sale oxido-reductoare i de aciditatea sa. O serie de factori ca luminozitatea puternic, umiditatea i temperatura favorizeaz apariia leziunilor chiar la concentratii mai mici de dioxid de sulf.Comportamentul diferitelor specii de vegetale la aciunea dioxidului de sulf este foarte variat. Plantele cu frunze suculente prezint cea mai mare sensibilitate, n timp ce plantele cu frunze aciculare prezint cea mai mare rezisten. Dioxidul de sulf ca poluant atmosferic exercit asupra lumii umane cu totul alte efecte dect dioxidul de sulf singur, aa cum se ntlnete uneori n atmosfera industrial.
302
Sinergismul cu ali poluani atmosferici, n special cu particulele solide, accentueaz efectele toxice ale dioxidului de sulf. Concentraiile de dioxid de sulf care produc efecte detectabile n organismele animale i umane sunt mult mai nalte dect cele carespunztoare pentru vegetaie. Efectele dioxidului de sulf asupra omului se manifest n primul rnd printr-o iritatie a sistemului respirator. Aceasta apare la concentraii de 5 ppm. n unele cazuri iritatia apare chiar la concentratii de 1-2 ppm i este nsoit de spasm bronic la concentratii de 5-10 ppm. n ceea ce privete aciunea toxic acut a dioxidului de sulf prin expuneri intermitente la concentratii mai ridicate, prerile diverilor autori sunt ntrutotul concordante. In privina aciunii cronice, prin expuneri continue la concentraii relativ mici, prerile sunt diferite i merg pn acolo nct neag o astfel de actiune. Numeroase cercetri au dovedit ns efectele cronice ale expunerilor ndelungate la concentraii mici. S-a dovedit c dioxidul de sulf odat intrat n organism prin cile respiratorii apare n snge i produce tulburri n metabolismul glucidelor i n procesele enzimatice. n prezena particulelor solide actiunea dioxidului de sulf determin efecte i mai grave. La concentratii anuale de 100 g /m3 particule asociate cu concentratii de 30 g /m3 dioxide de sulf se constat o cretere a sensibilitii la diferite boli ale copiilor. Concentraii de particule cuprinse ntre 100-130 g /m3 dioxid de sulf determin o cretere a maladiilor respiratorii la copii. Dac la o concentraie de 300 g /m3 particule cu o persistent n aer de cteva zile se asociaz o concentratie de 630 g /m 3 dioxid de sulf, bronitele cronice se agraveaz. La o concentratie de 750 g /m 3 particule asociate cu concentraii de 715 g 3 /m dioxid de sulf, probabilitatea de mortalitate i de apariie a unor boli foarte grave crete simitor. Experienele fcute pe loturi de animale expuse la inhalaii de dioxid de sulf au scos n evident o mortalitate crescut. Ca i la om, dac dioxidul de sulf este absorbit pe particule solide efectele sunt i mai grave. Efectul aditiv determin o cretere a numrului de mbolnviri i decese n rndul animalelor expuse. n ariile urbane, alturi de dioxidul de sulf, trioxidul de sulf este prezent in concentraii mai importante. Inhalat de oameni i animale, produce efecte iritante mult mai puternice dect dioxidul de sulf i determin aparitia spasmului bronic chiar n concentratii relativ sczute. Sinergismul cu dioxid de sudf i cu alte substante poluante prezente n atmosfer duce la apariia unor reacii fiziologice noi. Alte efecte . Oxizii de sulf atac diversele materiale mai ales cnd, n prezena umiditii, sunt trecuti n acid sulfuric, cu o capacitate de distrugere mai mare. Dioxidul de sulf n prezena particulelor are o capacitate de distrugere i mai mare. Astfel, oxizii de sulf corodeaz suprafeele metalice, deterioreaz i decoloreaz cldirile, atac marmora i orice piatr de constructie, deteriornd astfel monumentele. Aciditatea aerului poluat datorat oxizilor de sulf deterioreaz i decoloreaz esturile, obiectele de piele, hrtia. Oxizii de azot emanati n atmosfer sunt reprezentai n special de oxidul i bioxidul de azot. Aceti oxizi provin din surse naturale i artificiale. Sursele naturale produc cea mai mare cantitate de oxid de azot pe cale biologic. Sursele artificiale mbogesc" atmosfera cu cca. 5x107 t oxid de azot/an. Aceast cantitate provine, n mod aproximativ egal, din sursele artificiale stationare i mobile. Din cantitatea total de bioxid de azot, cca. 2% rezult n urma arderii resturilor menajere i industriale. Oxidul de azot este un gaz incolor care rezult n urma reactiei chimice a oxigenului cu azotul, care are loc la temperaturi foarte ridicate. 303
Bioxidul de azot rezult n urma contactului oxidului de azot cu aerul i se prezint sub forma unui gaz de culoare brun. Oxizii de azot, dac depesc anumite concentratii, au actiune vtmtoare asupra plantelor i animalelor. Cercetrile efectuate au scos n eviden c dac o plant este expus timp de o or la o concentraie de 25 ppm bioxid de azot, aceasta i pierde frunzele n totalitate. La om i animale, bioxidul de azot, n concentratie mica, produce iritarea sever a aparatului respirator, cu simptome de sufocri i arsuri nsoite de tuse violent cu expectoraie colorat n galben. La concentratii mai mari se nregistreaz simptome severe de asfixiere, convulsii i chiar blocarea respiratiei. n atmosfera poluat cu oxizi de azot, vizibilitatea este redus (datorit dispersiei i absorbiei luminii), strlucirea i contrastul obiectelor este redus, iar orizontul pare colorat galben-pal spre rou. Bioxidul de azot este de aproximativ patru ori mai toxic dect oxidul de azot. Condiiile de calitate ale aerului prevzute n STAS nr. 12574-87 admit o concentraie maxim de 0,3 mg/m3 pentru o expunere de 0,5 ore, de 0,1 mg/m 3 pentru 24 ore i de 0,01 mg/m3 pentru un an. Referitor la continutul gazelor de eapament in oxizii de azot, n tara noastr nu sunt nca fixate norme. n Canada i SUA, cantitile maxime admise sunt de 0,62g/km pentru autoturisme i de 1,43 g/km pentru autocamioane (Ghidra, 2004). Actiunea fiziologic a oxizilor de azot Prezenta oxizilor de azot n atmosfer produce deteriorri asupra plantelor. Este ns dificil de determinat cu exactitate, care efecte sunt rezultatul direct al aciunii oxizilor de azot i care al actiunii poluanilor secundari produi n ciclul fotolitic al oxizilor de azot. S-a dovedit c unii dintre aceti poluani secundari sunt foarte vtmtori pentru plante. Deteriorrile observate la unele plante sunt produse n urma expunerii directe n atmosfera de oxizi de azot din imediata apropiere a surselor industriale sau de laborator. Actiunea concentraiilor ridicate de dioxid de azot asupra plantelor s-ar putea datora i formrii de acid azotic. La o expunere de o or, la concentratii relativ ridicate de dioxid de azot, de exemplu de 25 ppm, se produce o cdere a frunzelor. Frunzele tinere ajunse la un stadiu avansat de dezvoltare sunt mai rezistente la dioxidul de azot dect cele care sunt n curs de dezvoltare. La o expunere de o or, la concentratii de 4-8 ppm, se observ la unele plante o necroz care cuprinde aproximativ 5% din suprafaa frunzei. Dac crete timpul de expunere, pragul scade att de mult nct s-au observat efecte la concentraii de 2,3-3,5 ppm, pentru timpi de expunere de 8-21 ore i la 1 ppm pentru 48 ore. O expunere continua la concentraii de 0,5 ppm dioxid de azot timp de 35 zile produce cderea frunzelor i o cloroz la citrice fr formare de leziuni cangrenoase. Efectele asupra expunerii vegetalelor la concentratii mai sczute dect cele menionate pentru perioade foarte lungi de timp nu sunt suficient de bine cunoscute. Se poate spune c efectul dioxidului de azot, prezent n atmosfera poluat, asupra vegetalelor trebuie nc studiat. Cercetrile asupra mortalitii animalelor indic faptul c dioxidul de azot este de patru ori mai toxic dect monoxidul de azot. La concentratiile gsite n atmosfera poluat, monoxidul de azot nu este iritant i nu este considerat un pericol pentru sntate. Potentialul
304
toxic ridicat al monoxidului de azot, la concentratiile aerului ambiant, se manifest prin capacitatea lui de a se oxida cu uurin la dioxid de azot mult mai toxic. n testele facute pe animale expuse la concentraii foarte mari de monoxid de azot s-a observat o paralizie a sistemului nervos central i convulsii. oarecii expui la concentratii de 2,5 ppm sunt narcotizati dup 6-7 minute, iar dup o expunere de 12 minute mor. Dac animalele narcotizate sunt scoase la aer curat, dup 4-6 minute de expunere i revin rapid. Experienele efectuate pe cobai expui timp de 4 ore la concentratii de 16-50 ppm monoxid de azot, nu au indicat efecte supra functiei pulmonare. Dioxidul de azot exercit un efect toxic foarte puternic. Informaiile respective provin mai ales din studiile de laborator fcute asupra animalelor. Concentratiile de dioxid de azot mai mari de 100 ppm sunt mortale pentru cele mai multe specii de animale i 90% din decese sunt cauzate de edem pulmonar. Sunt foarte rare speciile de animale care prezint rezisten la expuneri de dioxid de azot n concentraii de la 1 la 100 ppm. n general, n experianele efectuate la aceste concentratii moartea survine dup 10 minute, la aproximativ 21 ore de expunere, n functie de animal. Dup o expunere de 4 ore la concentratii de 53 ppm i 75 ppm dioxid de azot obolanii i cinii mor. Toxicitatea dioxidului de azot asupra animalelor crete odat cu creterea temperaturii. La o cretere a temperaturii de aproximativ 10C toxicitatea pentru obolani crete cu circa 25%. Prezenta altor iritanii influeneaz de asemenea capacitatea toxic a dioxidului de azot. Efectele toxice ale dioxidului de azot asupra animalelor se manifest prin schimbri n functionarea plmnilor, modificri n structura proteinelor, schimbri celulare, mrirea veziculelor pulmonare, modificri hematologice i enzimale, pierderi n greutate, susceptibilitate la infecii respiratorii. O scurt expunere la dioxid de azot (mai puin de 4 ore) produce schimbri reversibile n funcionarea plmnilor. Un timp de expunere scurt, ct i expunerea continua cauzeaza la obolani o cretere a respiraiei. Din punct de vedere patologic, la plmnii tuturor animalelor expuse se observ acelai mod general de reactie la dioxid de azot, indiferent de durata expunerii, dar efectele cresc cu rigurozitate odat cu creterea concentraiilor. Informaiile referitoare la efectele toxice ale dioxidului de azot asupra omului se gsesc n literatur, n numr redus i numai n legtur cu concentratii mai mari dect cele prezente n aerul ambiant. Exist numeroase mprejurri n care expunerile profesionale la actiunea monoxidului de azot pot afecta sntatea oamenilor. Pot aprea mai multe tipuri clinice de otrvire cu oxizi de azot. La unele cazuri apare o iritatie sever cu manifestri de arsuri i sufocri, tuse violent nsoit de expectoraie sever de culoare galben. La alte cazuri apar voma, somnolenta, slbiciune, pierderea cunotinei. Persoanele care sufer acest tip de otrvire nu prezint edem pulmonar i dac sunt scoase din mediu i pot reveni complet. Altfel, intoxicarea poate deveni fatal. Al treilea tip care sufer aa-zisa intoxicatie de oc" prezint simptome severe de asfixiere, convulsii i oprirea respiratiei. Aceste cazuri de intoxicare pot rezulta n urma inhalrilor de oxizi de azot n concentratii ridicate. Expunerile la concentratii variabile de dioxid de azot pot fi analizate n ase cazuri cu manifestrile clinice corespunztoare. Expunerile la concentraii de 500 ppm sau mai mari produc edem pulmonar acut i moartea survine n 48 ore. Expunerile la concentratii de 300-400 ppm produc edem pulmonar cu bronhopneumonie i moartea survine n 2-10 zile. Expunerile la concentraii de 150-200 ppm produc astuparea bronhiolelor prin ngroarea peretilor i moartea survine n 3-5 sptmni.
305
Expunerile la concentraii de 50-100 ppm produc focare pneumonice permanente urmate de reveniri spontane. Expunerile la concentraii de 25-75 ppm produc bronhopneumonie. Indivizii i revin complet. Expunerile cronice intermitente la concentraii de ordinul 10-40 ppm dioxid de azot pot provoca n ultim instan emfizem. Pragul pentru perceperea mirosului de dioxid de azot la om pare a fi de aproximativ 0,12 ppm. Alte e.fecte. Sub actiunea oxizilor de azot se produce o reducere a culorii coloranilor fixati pe fibrele textile i o tendin de nglbenire a anumitor aditivi ai textilelor. Cea mai mare sensibilitate la actiunea oxizilor de azot o prezint colorantii utilizai pentru fibre tip acetat de celuloz. Anumite fibre sintetice reactioneaz direct cu oxizii de azot producnd o coloraie galben, datorit unei proprieti a fibrei nsi. Concentratii de 0,066-0,084 ppm dioxid de azot produc efecte corosive asupra unor materiale (Ghidra, 2004). Hidrogenul sulfurat este un gaz incolor, cu miros caracteristic de ou stricate, care se percepe de la o concentratie de 0,13 ppm. Este mai greu dect aerul i se acumuleaz n zonele joase, depresionare. Este solubil n ap. Hidrogenul sulfurat existent n atmosfer este generat de surse naturale i surse artificiale. Sursele naturale sunt constituite din izvoarele sulfuroase, gazele vulcanice, depozitele de sulf, iei, gaze naturale, procesele de descompunere a materiilor organice. Se estimeaz, c, anual, pe plan mondial se produc peste 280 milioane tone de oxizi de azot din care 200 milioane tone n apele oceanice i 80 milioane tone pe uscat. Concentratia natural de hidrogen sulfurat existent n atmosfer este pn la 0,46 3 mg/m , nivel la care nu poate fi detectat de organele olfactive ale omului. Sursele artificiale cele mai importante se localizeaz n domeniul industrial (petrolier, petrochimic, chimic, siderurgic, alimentar) i agricol (zootehnic, ape reziduale) Hidrogenul sulfurat produce efecte negative asupra plantelor i animalelor, dac sunt depite concentraiile maxime admise. Este un gaz foarte toxic i are o actiune local la nivelul zonelor de contact, dar i o actiune general la nivelul ntregului organism. Actiunea local, la nivelul zonelor de contact, este iritant i se datorete dizolvrii i formrii de sulfuri alcaline prin combinare cu bicarbonatii. Actiunea general, la nivelul ntregului organism, este asfixiant i se datorete hidrogenului sulfurat care, odat cu ptrunderea n snge, se combin cu hemoglobina formnd sulfmethemoglobina i verdohemocromogenul. Actiunea hidrogenului sulfurat asupra plantelor este cu mult mai redus. Efectul negativ al hidrogenului sulfurat se nregistreaz i asupra vopselelor, precum i asupra obiectelor din cupru, zinc i aluminiu. Concentraiile maxime admise n aer pentru hidrogenul sulfurat sunt de 0,015 mg/l pentru 0,5 ore i de 0,008 mg/l pentru 24 ore (Ghidra, 2004). Amoniacul este un gaz incolor, cu miros neptor, caracteristic, care poate fi perceput la o concentratie de 20 ppm. Este mai uor dect aerul i se acumuleaz n partea superioar a ncperilor. Este foarte solubil n ap. Sursele de amoniac atmosferic sunt cele naturale i artificiale. Poluarea cu amoniac provine n proporie de 80% din sursele artificiale i de 20% din cele naturale. Dintre sursele artificiale cele mai importante sunt: agricultura (zootehnia de tip intensiv prin cantitile de dejecii) i industria (fabricile de amoniac, azotat de amoniu, uree i acid azotic). Asupra organismelor animale, amoniacul are o actiune local i una general. Actiunea local se manifest la nivelul cilor respiratorii i a mucoaselor oculare producnd traheobronite, bronhopneumonii, reducerea capacitii de schimb gazos a plmnilor, lcrimri intense, conjunctivite i cheratite.
306
Actiunea general se resimte prin ncetinirea reaciilor de oxidoreducere i interferarea sintezei hemoglobinei cu efecte negative asupra imunocompetenei i a indicatorilor de producie. Pentru amoniac, limitele maxime admise, potrivit STAS 12574-87 sunt de 0,3 3 mg/m pentru 0,5 ore i de 0,1 mg/m3 pentru 24 ore (Ghidra, 2004). Clorul este un gaz sufocant (la temperaturi obinuite), de culoare galben-verzuie. Este mai greu dect aerul i se acumuleaz, ca i hidrogenul sulfurat, n zonele joase, depresionare. Este solubil n ap i foarte corosiv pentru unele metale. Sodiul i potasiul ard n clor, iar altele (fierul, cuprul, fosforul) numai sub foun de pulberi fine. Sursele de poluare a atmosferei cu clor, cele mai importante sunt cele artificiale. n rndul acestora, cel mai important loc l ocup procesele de electroliz a clorurilor alcaline, de lichefiere a clorului, de fabricare a unor solveni organici, de fabricare a pesticidelor organoclorurate, a fibrelor sintetice, a celulozei i hrtiei. Clorul are efecte negative asupra organismului n functie de concentratia existent n atmosfer. La concentratii m ici, de cca 1,0 ppm, sunt iritate mucoasele oculare i ale cilor respiratorii. La concentratiile mai mari, de 14-21 ppm, clorul devine periculos dac organismul uman este expus mai mult de 60 minute. La concentraii de 100 ppm, este suficient expunerea de un minut pentru a produce edem pulmonar, pneumonii, emfizem, bronit i chiar moartea prin sufocare. Concentraia maxim admis de clor n aer este de 0,1 mg/m3 pentru o expunere de 0,5 ore i de 0,03 mg/m3 pentru 24 ore (Ghidra, 2004). Substantele toxice aeropurtate sunt de origine anorganic. Dup ce sunt emise n aerul atmosferic, sunt diseminate de curenii de aer pe zone foarte mari. O parte din aceste substane pot fi folosite direct in diferite procese tehnologice, iar alt parte se folosete ca materie prim pentru fabricarea a numeroase produse finite. Cele mai importante, din punctul de vedere al polurii atmosferei, sunt: acrilamidele, acroleina, aldehidele, arsenul, azbestul, benzenul, clorura de vinil, clorofluorocarbonii, bifenolpoliclorurai. Sursele de poluare cu substantele toxice aeropurtate provin din procesele industriale, din cele de manipulare a substantelor chimice, n urma exploziilor accidentale i a bombardamentelor. Substantele toxice aeropurtate dup ce sunt transportate de curenii de aer se depun pe sol, n ap i pe toate obiectele existente n zona respectiv, polundu-le i pe acestea. Oamenii i animalele se contamineaz direct prin inhalarea particulelor aeropurtate, dar i indirect prin consumul de ap i alimente poluate. Situatia este oarecum similar i la plante datorit depunerii particulelor aeropurtate pe frunze i extragerii apei i srurilor minerale din solul poluat (Ghidra, 2004). Pulberile sedimentabile i n suspensie sunt reprezentate de praf, cea i fum. Praful (pulbere sedimentabil) este format din particulele fine ale diferitelor substante chimice solide care se depun pe sol datorit gravitaiei. Ceaa i fumul (pulberi n suspensie) rmn n aer timp ndelungat, fiind formate din particule foarte fine care plutesc n atmosfer. Atunci cnd ceaa contine particule de substante toxice, ca de altfel i n cazul fumului, se nregistreaz actiuni alergice, fotodinamice, cancerigene, infectante, infestante, iritante, fibrozante sau pneumocancerigene. Substantele radioactive provin din diferite surse naturale i artificiale i se gsesc n atmosfer sub forma de gaze sau pulberi.
307
Mediul nconjurtor are o radioactivitate natural normal. Cel mai important element radioactiv natural care polueaz atmosfera este radonul. Radonul este deosebit de duntor pentru sntatea omului i a fost descoperit n apa potabil, n aerul locuinelor i chiar n materialele de construcie. n Romnia, pentru depunerile radioactive este stabilit drept limit de avertizare doza de 370 Bq/m3/zi, iar ca limit de alarmare cantitatea de 1800 Bq/m3/zi. Pulberile n suspensie au limita de avertizare de 185 m Bq/m3/zi, iar limita de alarmare este de 333 mBq/M3/zi (Ghidra, 2004). Poluarea biologic Aerul atmosferic, dei curat la prima vedere i inofensiv pentru organismele vii, conine permanent un numr foarte mare de microorganisme. Totalitatea acestor microorganisme alctuiesc microflora atmosferei. Microoganismele care alctuiesc microflora aerului pot fi grupate n virusuri, bacterii i fungi, care pot afecta omul, animalele i plantele. Microorganismele care pot afecta omul sunt grupate n saprofite, conditionat patogene i patogene. Dintre acestea, pot provoca boli numai microorganismele conditionat patogene i patogene, poate constitui o surs i o cale de transmitere a unor boli specifice, contagioase. Unele microorganisme din atmosfer joac un rol foarte important n procesele biologice de fermentaie i biodegradare a unor substante de origine animal sau vegetal. Microorganismele din atmosfer prezint importan pentru patologia animal i prin faptul c multe dintre ele pot deveni factori alergeni. Acestea nu se gsesc n atmosfer sub form de corpi microbieni izolai, ci sunt nglobate sau ader la particule de praf, fum sau vapori de ap. Ca urmare a acestui fapt, ele se prezint ca: picturi de secreie, nuclei de picturi i praf bacterian. Picturile de secretie provin din cavitatea nazal, bucofaringian sau din plmni. Au dimensiuni de peste 100 (i se depun destul de repede dup eliminare. Picturile de secreie sunt proiectate pn la maxim 5 m de surs. Ele se produc prin strnut, vorbire, tuse, tipete, rcnete, mugete. Nucleii de picturi se produc concomitent cu picturile de secretie, avnd deci origine comun. Nucleii de picturi au dimensiuni mult mai mici dact picturile de secretie i de aceea plutesc mult timp n aer pn se depun pe pmnt, animale, obiecte sau n ap. n drumul lor prin aer, nucleii de picturi pot pierde complet apa i s rmn un rest de substan organic sau numai un simplu microorganism. n acest fel dimensiunea lor scade, dar crete gradul de stabilitate i de rezisten la factorii de mediu. Praful bacterian se formeaz prin nglobarea n particulele de praf sau fixarea la suprafaa lor a microorganismelor. Aceste microorganisme pot proveni din picturile de secretie, nucleii de picturi, dejecii, secretii excreii patologice care se pot transforma n pulberi n urma deshidratrii (uscrii). Rezistenta germenilor n atmosfer poate fi de durat mai scurt sau mai lung n functie de prezena sau absena substanelor nutritive, uscciunii aerui razelor ultraviolete. La om, ca i la animale, unele boli se transmit prin intermediul picturilor de secretie, al nucleilor de picturi precum i cu aj utorul prafului bacterian. n cazul inhalrii microorganismelor patogene de ctre om i animale, acestea pot provoca boli respiratorii, iar cnd sunt ingerate odat cu apa i alimentele, pot declana boli digestive. Prin depunerea de plgi, microorganismele din aer pot declana infectii supurante. Aprecierea gradului de contaminare biologic a aerului se face cu ajutorul testelor bacteriologice (Ghidra, 2004).
308
Testele bacterilogice ale aerului n scopul punerii eviden a agentului etiologic se execut destul de rar, deoarece nu prezint importan deosebit. Importana practic a acestor analize este de ordin sanitar i ne confer un indiciu orientativ asupra potenialului patogen al aerului ambiental din locuine adposturi. In esen, metoda nu urmrete punerea n eviden a microorganismelor patogene i conditionat patogene, ci msura n care aerul, n special cel din locuinte i adposturi este ncrcat cu microflor duntoare omului i animalelor. Cu ocazia testelor bacteriologice se determin numrul total de ageni patogeni care se dezvolt la 37, streptococii hemolitici, stafilococii i germenii din grupul coli. Autoepurarea aerului atmosferic Aerul atmosferic, n caz de poluare, are capacitatea natural, ca ntr-o anumit perioad de timp s-i revin la compoziia iniial, normal. Acest proces, de revenire a aerului la compoziia normal, poart denumirea de autoepurare. n situaiile de poluare uoar i medie, autoepurarea aerului poate reface compozilia normal, natural, fr a mai fi necesar interventia artificial a omului. Dimpotriv, cnd poluarea nu reuete s reduc concentratia agenilor poluani sub limitele maxime admise, este imperios necesar intervenia omului. Capacitatea de autoepurare a aerului atmosferic depinde de urrntorii factori: a) Curentii de aer contribuie la mprtierea poluanilor din atmosfer la distane mari i prin aceasta realizeaz un proces de diluare" a concentraiei acestora. Starea de calm atmosferic contribuie la acumularea poluanilor i prin aceasta la creterea concentraiilor. b) Precipitaiile atmosferice antreneaz mecanic poluani lichizi i solizi i accelereaz dizolvarea i reducerea concentratiei acestora. c) Ceaa atmosferic mpiedic autoepurarea, deoarece poluanii rmn fixati pe particule ce plutesc n aer sub form de aerosoli. d) Anotimpurile influeneaz procesul de autoepurare prin temperaturi, curenti de aer, cantitatea i starea de agregare a precipitaiilor, radiaii solare, starea de vegetaie. e) Radiaiile solare stau la baza reaciilor fotochimice i biochimice ale cror produi pot fi toxici sau netoxici. n urma reactiilor, produii rezultati pot fi gazoi, lichizi sau solizi, iar viteza de mprtiere sau de depunere poate crete sau scade, n functie de starea de agregare. Radiaiile solare, fiind purttoare de energie termic, produc evaporarea apei i a altor substante volatile. f) Relieful influeneaz curenii de aer prin inversiunile termice pe care la produce, constituind uneori chiar bariere n calea lor. Depresiunile i locurile joase favorizeaz acumularea aerului poluat i creterea concentratiilor, de multe ori peste limitele maxime admise. Vile rurilor i prurilor favorizeaz formarea unor curenti de aer, reci, uneori cu vitez apreciabil, ceea ce are efect favorabil n procesul de autoepurare. g) Apele curgtoare influeneaz capacitatea de autoepurare a aerului att prin curenii pe care-i creaz, ct i prin creterea umiditii relative n zon i dizolvarea unor poluani. h) Vegetaia favorizeaz procesul de autoepurare prin retinerea poluanilor, scderea temperaturii i atragerea norilor de ploaie. Se estimeaz c 1 ha de pdure de fag poate reine anual cca. 68 t pulberi i 300 kg bioxid de sulf. i) Factorii urbanistici pot avea influen pozitiv sau negativ asupra procesului de autoepurare a aerului. Lipsa spaiilor verzi, strzile nguste, cldirile nalte i apropiatc produc creterea concentraiilor elemenlelor poluante. Dimpotriv, spaiile verzi ct mai mari, strzile largi i cldirile rational amplasate au influen benefic asupra circulaiei curentilor de aer i implicit asupra capacitii de autoepurare.
309
n concluzie, putem afirma c poluanii atmosferici persist n aer, sunt dizolvati sau antrenati de apa de precipitaii i de vnt (curenti de aer), ajung n apele de suprafa, sau pe sol, i realizeaz un adevrat circuit. Ca urmare a acestui fapt, poluarea nu dispare, ci este deplasat n alte areale i medii, iar aerul din zona respectiv ii micoreaz coninutul de poluani. n funcie de intensitatea fenomenelor de autopurificare, de cantitatea de poluani din atmosfer i de proprietile acestora, timpul de staionare n atmosfer este diferit. (Ghidra,2004) Timpii de staionare n atmosfer a unor ageni poluani (Bara i Laslo, 1997) Agent poluant Timpul de staionare SO2 1-6 zile NO 1-3 zile Fluor 3-7 zile CO 0,3 ani Hidrocarburi 1-2 zile Pulberi 3-7 zile Cripton -85 Zeci de ani Prevenirea polurii aerului atmosferic Timp ndelungat s-a considerat c bazinul aerian poate receptiona i neutraliza toate deeurile rezultate din activitatea uman care sunt eliberate n atmosfer. S-a constatat totui c acest volum este limitat i insuficient pentru diluia agenilor poluani. Meninerea unei puriti ct mai mari a aerului evit riscurile polurii. Concentratia maxim admis pentru fiecare categorie de noxe n parte nu trebuie s depeasc anumite nivele (care s produc efecte nocive asupra organismului). Pulberile n suspensie se admit n concentratie maxima de 2 mg/m3, dac contin peste 50% SiO2 i 10 mg/m3, dac contin sub 50% SiO2. Exprimate conimetric (nr. de particole de praf/cm3 aer) se admit 100-180 particole, dac conin SiO2 i 1200 particole, dac nu contin SiO2. (Ghidra, 2004). n zonele industriale i pe arterele de circulatie mare, poluarea atmosferie, avnd un caracter continuu, trebuie supravegheat n permanen, pentru a evalua riscul pe care l reprezint pentru oameni. Legea pentru protectia mediului nconjurtor vizeaz n primul rnd msurile preventive de evitare a intensificrii polurii i de reducere total a polurii existente. Pentru reducerea nivelului de poluare se impun: reducerea emisiunilor de ageni poluanti, canalizarea i captarea agenilor poluani i tratarea deeurilor i eliminarea lor. Aceste actiuni au drept scop protecia biotopilor de interes economic i tiinific, asigurarea lanurilor trofice normale ale biocenozelor, asigurarea puritii resurselor naturale a materialelor organogene, pstrarea elementelor mediului ambiant de interes estetic i recreativ. Pentru prevenirea polurii aerului atmosferic trebuie s se mai in cont de: amplasarea unitilor industriale (inclusiv a celor zootehnice), care pot reprezenta surse de poluare, plantarea de perdele de spaii verzi n jurul surselor de poluare, alegerea procedeelor de producie i functionare astfel nct poluarca s se reduc la minimum i sa se efectueze periodic controlul funcionrii instalaiilor, industriile generatoare de pulberi trebuie s-i doteze instalatiile cu dispozitive de reinere a acestora, sursele productoare de gaze toxice s fie dotate cu instalatii de epurare a acestora, prevenirea i reducerea polurii cu poluani rezultati din circulaia automobilistic, avertizarea populaiei din zonele cu un grad de poluare mai mare de anumite fenomene locale, reducerea numrului de microorganisme din ncperile nchise i nlturarea lor.
310
Concentraiile maxime admise pentru substanele impurificatoare din atmosfera zonelor locuite (Ghidra, 2004) Substana Concentratia mg/m3 Momentan Medie/24 ore Aceton 5,0 2,0 Acetaldehid 0,01 0,01 Acid azotic (n HNO3) 0,4 0,4 Acid clorhidric 0,3 0,1 Acid sulfuric 0,3 0,1 Acrolein 0,3 0,1 Alfa metilstiren 0,04 0,04 Amoniac 0,3 0,1 Anhidrid fosforic 0,3 0,1 Anhidrid ftalic 0,1 0,1 Arsen (compui cu As) 0,03 0,01 Benzine (n C) 6,0 2,0 Benzen 2,4 0,8 Bioxid de azot 0,3 0,1 Bioxid de sulf 0,75 0,25 Caprolactam 0,06 0,06 Clor 0,3 0,1 Clorbenzen 0,1 0,1 Crom hexavalent (n CrO3) 0,0015 0,0015 Dietilamin 0,05 0,05 Dimetilamin 0,005 0,005 Etilen 3,0 3,0 Fenoli (n fenol) 0,1 0,03 Fluor i compui (n fluor): -compui gazoi (HF i SiF4) 0,02 0,005 -fluoruri anorganice uor solubile 0,03 0,01 -fluoruri anorganice puin solubile 0,2 0,03 -amestec de fluoruri gazoase i solubile 0,03 0,01 Formaldehid 0,03 0,01 _ Furfurol 0,15 0,05 Hidrogen sulfurat _ 0,03 _ 0,01 Mangan i compui (n Mn) 0,03 0,01 Mercur 0,001 Metanol 3,0 1,0 Metacrilat de metil 0,1 0,1 -6 Metilmercaptan 9x10 Nitrobenzen 0,008 0,008 Oxid de carbon 6,0 Oxid de etilen 0,3 0,03 Pentoxid de vanadiu 0,002 Piridin 0,15 0,05 Plumb i compui (in Pb) 0,001 Substante oxidante (n 03) 0,1 0,03 Sulfur de carbon 0,03 0,01 Suspensii negre 0,2 0,075 Tetraclorur de carbon 3,0 1,0 Pulberi in suspensie 0,5 0,15 Pulberi sedimentabile 200 t/km2/an -
311
ROLUL SPAIILOR VERZI N PREVENIREA I COMBATEREA POLURII Spaiile verzi au un rol decisiv n prevenirea polurii i n combaterea ei, avnd efecte multiple asupra mediului prin : 1. Influena asupra microclimatului. 2. Importana arhitectonic-decorativ. 3. Consolidarea i asanarea unor terenuri, regularizarea cursurilor de ap, asigurarea prin plantaii ntinse a unui regim hidrologic constant din bazinele de alimentare ale rurilor, prevenind dezastrele inundaiilor sau ale diminurii debitelor la secet, prevenirea eroziunii solurilor. 4. Favorizarea nfiltrrii apei i a alimentrii stratelor subterane de ap, prin diminuarea vitezei scurgerilor de suprafa. 5. Diminuarea zgomotului pe strzi, bulevarde, cu 20-25 decibeli, de 4-6 ori n cartiere. 6. Protecia sanitar. 7. Purificarea aerului atmosferic (dup Zamfir, 1979) Influena spaiilor verzi asupra microclimatului se exprima prin efecte multiple: 1. Temperaturi cu 2-3oC mai mici vara; temperaturi mai crescut iarna. 2. Umiditatea relativ a aerului - mai crescut cu 7-14% datorit evaporrii apei din frunze, extins pe o distan de aprox. 600 m. 3. Diferentele de temperatura ntre zonele oraului determin apariia unor cureni de aer de 1m/s. 4. Protecia la vnturi puternice, diminundu-le cu 30- 60% la 30 m de margine i complet la 120 m, asigurnd o protecie extins pe 200-600 m. Atenuarea vntului are ca effect reducerea polurii cu praf. 5. Radiaia solar direct i cea difuz sunt absorbite n prop de 87%. Radiaia direct este mai mic (cu 20-25 de ori ntr-o pdure de fag dect n camp deschis.), iar radiaia difuz la baza tulpinilor este cu cca 40% mai sczut. Scderea rad este mai accent n cazul foioaselor cu coroane mari, dese: tei, ulm, arar,stejar, castan etc. dect n cazul arborilor cu coroane mici, rare :frasin, salcm, pin etc. (dup Zamfir, 1979) Protecia sanitar realizat de spaiile verzi se manifest prin : Ionizarea aerului este mai crescut deasupra acestor zone verzi, datorit 1. procesului de reinere de ctre plante a ionilor pozitivi ca urmare a legturii vegetaiei cu pmntul, ncrcat negativ; 2. procesului de respingere de ctre plante a ionilor negativi, favorabili strii de sntate a organismului, de la nivelul spaiilor verzi se desprind ioni negativi, care sunt luai de cureni i transportai; 3. prile verzi ale plantelor, pot emite electroni, care ionizeaz aerul; arborii cu frunze lanceolate i coniferele cu frunze aciculate, ofer puncte de descrcare a electricitii solului, ceea ce determin creterea ionizrii atmosferei ambiante. Ionii mici, ncrcai negativ stimuleaz organismul, n timp ce ionii mici ncrcai pozitiv l influeneaz nefavorabil (dupa Zamfir, 1979) Purificarea aerului atmosferic n prezena spaiilor verzi n spaiile verzi, aerul se mbogete n ozon, format sub influena evaporrii substanelor rinoase, care acioneaza asupra picturilor fine de ap din atmosfer formnduse i apa oxigenat. Ozonul i apa oxigenat sunt dezodorizani; ozonul are aciune uor narcotic, linititoare, antidepresive. Spaiile verzi constituite din pini, tuia, chiparoi, tei au effect stimultor asupra sistemului nervos , ozonul i emanaiile eterice sunt favorabile aparatului cardiovascular i respirator, activnd circulaia i respiratia, metabolismul general, eliminarea cataboliilor.
312
Spaiile verzi constituite din carpen, arar, frasin, stejar, alun, iasomie, mai ales aleile, coridoarele de stejar, au efect calmant sau calmant-inhibitor, de pasivitate psihosomatic, de inhibiie de protecie pentru refacerea forelor i terapie. EFECTUL SPAIILOR VERZI ASUPRA PURIFICARII AERULUI ATMOSFERIC Purificarea aerului de praf, fum, gaze provenite din circulaia rutier, industrie, activ menajer, se realizeaza prin: EPURARE MECANIC, EPURARE BACTERIOLOGIC, EPURARE CHIMIC, EPURARE MECANIC: reinerea prafului n coronamente i iarb, ndeprtat prin stropiri artificiale. EPURARE BACTERIOLOGIC a aerului prin degajarea de ctre plante a substantelor bactericide: -Microflora depus pe frunze este supus sterilizrii naturale prin aciunea simultan a radiaiilor ultraviolete i a ozonului degajat de plante, mai ales de conifere. -Ozonul are att o aciune bactericid direct, ct i o aciune oxidant asupra materiilor organice depuse pe frunze, prin aceasta actiune a ozonului se distruge substratul nutritiv al germenilor patogeni, efect progresiv de la periferia spre centrul zonei verzi. -Frunzele i florile multor plante elimin substane volatile fitoncide, care distrug microorganisme i ciuperci patogene (Betula, Quercus, Tilia, Pinus etc. eman bactericide pentru bacilul difteric, bacilul tuberculozei etc.). EPURARE CHIMIC a aerului este legat de activitatea clorofilian a plantelor. Fotosinteza creeaz o ritmicitate alternativ de degajare i de absorbie a oxigenului i bioxidului de carbon. Unele plante fixeaz gaze nocive din atmosfer (bioxidul de sulf este fixat i metabolizat de unele plante) (dup Zamfir, 1979). Impactul negativ al poluarii atmosferice asupra zonelor verzi. Zonele verzi pot suferi din cauza poluanilor atmosferici, funingine, gaze, gudroane, acizi etc.(n jurul termocentralelor electrice, uzinelor chimice, metalurgice, de ciment, plantele sunt puternic afectate). Aerosolii industriali acioneaz asupra plantelor pe distane de sute de metri sau zeci de km. Sunt nocivi mai ales oxizii de sulf i de azot, fluorul, clorul, praful i cenua. Gazele toxice: bioxidul de sulf, acioneaz asupra protoplasmei celulelor vegetale pe care le lezeaz i distrug, chiar n concentraie de 1 mg/m 3 . Praful i cenua, acoper orificiile respiratorii i limiteaz ptrunderea razelor solare spre clorofila frunzelor, perturb creterea, modific culoarea frunzelor , care se usuc mai devreme i cad. Coniferele i pomii fructiferi sunt cei mai sensibili. Nucul-Juglans regia i mrulMalus domestica, prezint uscarea vrfurilor ramurilor i cderea florilor; Gorunul-Quercus petraea i plopul-Populus nigra, prezint deformri ale coronamentului i uscarea masiv a ramurilor, n zona siderurgic Hunedoara, Clan. Arborii: ulmul, frasinul, pinul sunt att de sensibili la SO2, nct pot constitui indicatori de poluare a aerului la aceast substan (dup Zamfir, 1979). Indicatori de poluare: Mucata-rotat-Pelargonium zonale indic prezena SO2, prin nlbirea frunzelor. Iris germanica, Vitis vinifera, Lotus corniculatus etc prezint arsuri i necroze foliare, n atmosfer cu SO2, care n contact cu picturile de ap de pe frunze se transform n acid sulfuros i acid sulfuric. Tutunul-Nicotiana tabacum, este sensibil la oxidani. Brassica este sensibil la hidrocarburi poliedrice aromate, la plumb, fier, clor etc. Lichenii sunt deosebii de sensibili la poluanii atmosferici i au caracter de indicatori specifici, cu diferite scri de sensibilitate specifice. Studiul lichenoflorei n Europa, SUA, Canada au dus la elaborarea scrii de notare i a indicilor gradului de poluare a aerului.
313
POLUAREA APEI Importana ecofiziologic a apei Apa, ca un lichid transparent i incolor care, n stare pur, este o combinatie de oxigen i hidrogen, constituie unul din elementele componente ale mediului natural, o surs natural, regenerabil, vulnerabil i limitat. Apa apare ca un element indispensabil pentru via, pentru individ i societate. Ea este materie prima pentru activiti productive, surs de energie i cale de transport. Apa este factorul dominant in mentinerea echilibrului ecologic. Din acest punct de vedere, apa reprezint o valoare inestimabil i indispensabil vieii, substituirea ei nefiind posibil. (Lupan, 2000.) Prin importantele sale funcii, apa asigur viabilitatea organismelor, fiind: -component structural al nutrientilor energogeni; -mediu biologic pentru desfurarea reaciilor biochimice i participant la aceste reactii; -factor de mare eficacitate in procesul de termoreglare; La o persoan adult, apa reprezint 65% din greutatea corporal, dou treimi din aceasta gsindu-se in compartimentul intracelular (Beril i colab., citati de Ghidra, 2004). Poluarea surselor de ap n raport cu particularitile hidrologice i fizico-geografice ale bazinelor naturale de ap din Romnia, cercetrile ecotoxicologice din 1953 pn n prezent, au evideniat variaiile indicatorilor microbiologici i fizico-chimici, gradul de impurificare determinat de surse organizate sau naturale, capacitatea de autopurificare a apei n aval de aceste surse de impurificare, repercursiunile folosirii acestor ape asupra strii de sntate a populaiei riverane (Zamfir, 1979). 1. Evidenierea impurificrii bacteriene a unor cursuri de ap n unele perioade explic apariia afeciunilor transmise digestive in colectiviti riverane. 2. Indicatorii chimici, pe lng evidenierea gradului de mineralizare a unei ape (cloruri, nitrai, fosfai, reziduuri etc.) pot arta i impurificarea cu reziduuri organice sau minerale. Astfel, de ex., n urma deversrii efluenilor fecalo-menajeri n bazinele naturale, cresc indicatorii bacteriologici i chimici. Creterea substanelor minerale este mai mare n cazul deversrilor de ape reziduale industriale (ex., suspensii de cloruri, de la forarea sondelor). Creterea indicatorilor de mineralizare a apelor este n direct dependen de compoziia chimic a rocilor bazinului de alimentare (ex., traversarea unui masiv de sare n zona Tg.Ocna de ctre Trotu, concentraia clorurilor crete de la 10-20 mg/l n amonte la peste 120 mg/l n aval). 3. Nivelul suspensiilor n ape are variaii foarte importante n raport cu natura albiei i a malurilor, cu suprafaa bazinului de alimentare, cu gradul de acoperire cu vegetaie, cu modul de prelucrare agricol a solului, cu deversrile menajere i mai ales industrial reziduale, in aval nivelul suspensiilor fiind mai mare. La es , nivelul suspensiilor este mai mare (Suceava are suspensii de 20 mg/l n zona montan pietroas i acoperit cu vegetaie i de 60 mg/l n zona de es, cu maluri argiloase, cu terenuri arabile intens cultivate). n interpretarea rezultatelor de laborator privind suspensiile i mineralele se ine cont de condiiile meteorologice, mai ales de precipitaii, de afluenii i de debitul rului. 4. Polurile naturale ale apelor cu metale grele (plumb, mercur). Plumbul din ape poate proveni din surse naturale: pulberi de silicai, aerosoli halogenai vulcanici, fumul de la incendii de pdure, meteorii etc. care produc poluarea aerului cu plumb i secundar, poluarea apelor, solului, alimentelor etc. Plumbul rezultat din descompunerea radonului , exist ca urme de izotopi radioactivi ( 210 Pb). 314
Mercurul, poluant ubicuitar ca i plumbul, se gsete sub form de sulfuri, mai ales n scoara terestr, n concentraie de 50 g / kg. Poate fi transferat n atmosfer, hidrosfer, biosfer prin reducerea srurilor anorganice de mercur la mercur metallic, care este vaporizat, formnd compui organo-mercurici volatili i sau solubili, cu sau fr intervenia germenilor microbieni. 5. Contaminarea industrial intens a mediului cu plumb i mercur face imposibil delimitarea de contaminarea natural. 6. Procesul de nflorire a apelor Tot mai frecvent se produce impurificarea natural a apelor, mai ales a lacurilor cauzat de procesul numit nflorirea apelor, care const n dezvoltarea exuberant a unor organisme fitoplanctonice (alge albastre sau verzi, flagellate, diatomee etc.). Dezvoltarea masiv i ulterior descompunerea acestei mase de organisme fitoplanctonice deterioreaz calitatea apelor, le coloreaz, produce scderea brusc a coninutului de oxigen dizolvat, incrcarea apei cu substane nocive, moartea petilor i a altor organisme acvatice, aceast poluare secundar fcnd imposibil utilizarea apei ca surs n economie. Factorii care provoac nflorirea apei sunt variai: climatici (lumina solar, curenii de aer), hidrobiologici (suprafaa, adncimea, micarea apei etc.), fizico-chimici (temperatura, pH-ul, cantitatea de bioxid de carbon i de sruri nutritive, mai ales de fosfor i azot etc.). Algele albastre secret substane deosebit de toxice pentru om i animale, acestea fiind biliproteide ciclice (albumin toxic) i peptide ciclice, 1/100 mg din aceast substan / kg corp acionnd mortal. Folosirea pe scar larg a ngrmintelor azotoase n agricultur, a detergenilor, prin antrenarea azotului i fosforului pe care le conin, intensific procesele de nflorire a apei. Poluarea natural poate cauza contaminarea apelor cu substane cancerigene de tipul hidrocarburilor 3,4-benzpirenului. De exemplu, plantele superioare sintetizeaz hidrocarburi policiclice aromatice, care prin descompunerea frunzelor i cderea lor pe sol, sunt puse n libertate i pot ajunge n apele de infiltraie, in cele subterane. Substane toxice ca ergotul, glucosizii cianogenici, organofluorurile, aflatoxina i alte toxine fungice, cicazina, nitrozaminele etc., care se ntlnesc natural n mediu, devin un risc pentru poluarea apelor din cauza practicilor agricole, nmagazinrilor i conservrilor de alimente (Ghidra,2004). Unele poluri naturale produse dup dezghe sau ploi abundente, conduc la acumularea in ape a substanelor organice poluante, a germenilor care pot cauza epidemii (febra tifoid, dizenterii etc.) (Zamfir, 1979). Poluarea apei const n modificarea calitilor sale naturale n urma nglobrii n aceasta a unor elemente strine, rezultate din o serie de fenomene naturale sau artificiale, care o fac improprie scopurilor n care este folosit anterior. Dup origine, poluarea poate fi: natural sau artificial, iar dup dinamica de realizare: permanent, intermitent i accidental (Ghidra, 2004). Poluarea natural Poluarea natural este de amploare mai redus ca poluarea artificial. Aceasta se exercit asupra tuturor surselor de ap, respectiv: apele de suprafa i subterane i poate fi intermitent sau accidental. Apele pluviale se polueaz n trei etape, din care primele dou se petrec n atmosfer, iar a treia dup cderea acestora pe pmnt. Prima etap a polurii apei meteorice se produce n momentul condensrii vaporilor de ap din atmosfer pe nucleii de condensare". 315
A doua etap a polurii apei pluviale se nregistreaz pe parcursul splrii atmosferei" de ctre precipitaii, n drumul lor de la locul de formare la suprafaa Terrei. n procesul de splare a atmosferei, apa pluvial nglobeaz n compoziia ei gaze, pulberi i microorganisme, polundu-se. A treia etap a polurii apei pluviale const n nglobarea n compozitia sa a poluanilor, ntlnii dup cderea pe sol, aa cum sunt: dejeciile, apele reziduale, resturile vegetale, ngrmintele chimice, pesticidele, pulberile depuse pe sol. Apele pluviale poluate contamineaz la rndul lor, apele de suprafa, iar n anumite conditii pot polua chiar apele subterane, eel mai frecvent apele freatice. Apele subterane se pot polua natural, n anumite conditii, prin intermediul apelor pluviale sau de suprafa. De asemenea, se pot polua cu hidrocarburi, cu sruri, radioactiv, termic. Poluarea artificial Gradul de dezvoltare demografic, urbanistic, industrial i agrozootehnic determin nivelul polurii artificiale. Sursele artificiale de poluare cele mai importante sunt reprezentate de reziduurile menajere, industriale i agrozootehnice. Poluarea artificial se poate clasifica dup modul de emisie a poluantilor i dup natura acestora. Dup modul de emisie a poluantilor a fost descris o poluare permanent i una accidental. Poluarea permanent poate fi, la rndul ei, continua i intermitent, emisia poluanilor putndu-se realiza din surse organizate (ape reziduale) sau neorganizate (resturi menajere). Poluarea aceidental se poate nregistra n cazul ndeprtrii necontrolate a diferiilor poluani sau n situaia accidentelor propriu-zise. Dup natura poluanilor, poluarea poate fi fizic, chimic i biologic (Ghidra,2004). Poluarea artificial fizic Poluarea artificial fizic a apei poate fi termic, cu substane cu densitate redus i radioactiv. Poluarea termic este consecinta deversrii n apele de suprafat, a apelor de rcire, cu temperaturi ridicate, chiar pn la 100C, din diverse ramuri industriale, n special de la centralele atomoelectrice. Consecinta acestui amestec este creterea temperaturii apei de suprafa la asemenea niveluri, care provoac distrugerea biocenozei i alterarea proceselor de autoepurare a acesteia. Poluarea cu substante cu densitate redus este cel mai nou tip de poluare. Poluanii pot fi plutitori (detergeni), rmnnd la suprafata apei i reducnd astfel procesele de autoepurare, sau sedimentabili, n timp, dup intrarea n combinatie sau absorbirea de ctre alte substane. Poluarea radioactiv a apei subterane i de suprafa este consecina depozitelor naturale de roci radioactive din scoara terestr i respectiv a radionuclizilor proveniti din diverse activiti umane (explozii nucleare, reactoare atomice, prelucrarea minereurilor radioactive). Nivelurile de poluare pot ajunge la limite duntoare pentru om i animale. Poluarea artificial chimic Poluarea artificial chirnic a apei se ntlnete cel mai frecvent i se realizeaz cu o mare diversitate de substane organice sau anorganice. 0 mare parte din aceste substante au persisten ndelungat, iar altele sunt mai uor degradabile. Substantele chimice anorganice pot avea un potential toxic, ridicat i favorizeaz apariia unei patologii de poluare caracteristic, patologia chimic de natur hidric".
316
Aceast patologie se manifest, la consumatori, prin intoxicatii acute, subacute sau cronice sau prin efecte potentiale n limp. Efectele potentiale n timp pot aprea direct la consumatori, manifestate printr-o simptomatologie necaracteristic sau la urtnaii acestora. Poluarea cu substante chimice poate modifica caracterele organoleptice i fizice ale apei. Ca urmare, pot aprea reactii de respingere a acesteia, datorit disconfortului i reaciilor dezagreabile pe care le genereaz. Poluarea apei poate avea efecte ecologice i economice dintre cele mai importante. Efectele ecologice apar ca urmare a perturbrilor pe care le genereaz apa poluat n dezvoltarea biocenozei. Se poate nregistra distrugerea sau ntrzierea dezvoltrii microorganismelor, afectnd asfel procesele de autoepurare, mentinnd poluarea sau, din contr, dezvoltarea luxuriant a microorganismelor, n special vegetale, care pot contribui la accentuarea polurii apei. Efectele economice apar datorit distrugerii florei i faunei, precum i a limitrii sferei de folosire a apei, ca urmare a dificultilor legate de epurarea ei. Poluarea chimic a apei se poate realiza cu: substante oxice; substante indezirabile, micropoluani chimici organici i substane indicatoare de poluare. a) Poluarea cu substante toxice Substantele toxice sunt reprezentate de: nitrati, cianuri i metale grele (arsen, bariu, cadmiu, cobalt, crom, fluor, mercur, plumb i seleniu) (Ghidra, 2004). Poluarea cu nitrati s-a extins i accentuat odat cu folosirea sistematic a ngrmintelor azotate, n scopul creterii produciei agricole. Nitriii s-au depistat n concentratii peste limitele normale n apele de suprafa i de adncime, n unele produse de origine vegetal, animal i n organismul uman. A crescut incidenta intoxicatiilor cu nitriti sau a methemoglobinemiei, n special la tineretul bovin. n zonele n care se practic agricultura intensiv, continutul n nitriti al apei ajunge sau chiar depete 100 mg/l, concentraii care genereaz stri morbide caracteristice. Stasul de calitate pentru apa de but (1342/1991) prevede concentratii admise de azotai de 45 mg/1, iar Stasul 4706/1988 prevede pentru apele de suprafa de categoria I, 10 mg nitrati/1 i pentru apele de categoria a II-a, 30 mg nitrati/l. Pentru apele de categoria a III-a nu s-au stabilit limite. Intoxicaiile se produc n conditii de cretere a pH-ului la peste 4. Pentru evitarea intoxicatiilor cu nitrai, este necesar cunoaterea, prin examene sistematice de laborator, a coninutului n nitrai a tuturor surselor de ap. Poluarea cu cianuri se realizeaz prin apele reziduale industriale. Toxicitatea apei poluate cu cianuri este dependent de factorii care favorizeaz disocierea acestora n acid cianhidric liber, respectiv de pH-ul, temperatura i concentraia n ioni a acesteia. Poluarea cu arsen. Sursele sunt reprezentate de apele reziduale industriale i pesticidele cu arsen. Arsenul are aciune toxic i cancerigen. Concentratia admis este de 0,05 mg/dm3 n apa potabil i de 0,01 mg/dm3 n apele folosite la irigaii. Poluarea apei cu cadmiu provine din: industria minier, metalurgic, chimic, termoenergetic, agricultur (ngrminte fosfatice, fertilizanti naturali, pesticidele), transporturi motorizate, conductele de ap (galvanizate, de cupru, de polietilen, de policiorur de vinil, emailate). Cadmiul este un toxic cumulativ pentru rinichi i ficat. Este incriminat n hipertensiunea arterial. Concentratia admis este de 0,005 mg/dm 3 n apa potabil i de 0,003 mg/dm3 n apele de suprafa.
317
Poluarea cu cobalt se realizeaz ca urmare a emisiilor industriale. Fluorul, n exces, este incriminat n tulburrile cardio-vasculare. Concentraia admis este, n apele de suprafa, de 1 mg/dm3. Poluarea cu fluor este consecinta emisiilor industriale. Fluorul, n exces, este incriminat n fluoroz, producerea de microfocare necrotice n cord i vase, precum i arteroscleroz. Concentratia admis n apa potabil este de 1,2 mg/dm3, iar n apele de suprafa, de 0,5 mg/dm3. Poluarea cu mercur s-a extins continuu i provine din: industria de extractie i prelucrare; agricultur (folosirea fungicidelor) i domeniile care folosesc combustibili fosili. Fondul normal de mercur este de 0,05-1 mg/l. Mercurul migreaz n lantul alimentar al animalelor prin plantele acvatice, alge. Strbate plancenta, avnd un efect toxic, uneori mai puternic asupra produsului de concepie, dect asupra mamei. Are efect toxic i cancerigen. Concentratia admis de mercur este de 0,001 mg/dm3 att pentru apa potabil, ct i pentru apele de suprafa. Poluarea apei cu plumb s-a extins odat cu: dezvoltarea industriei chimice, metalurgice i constructoare de maini, producerea benzinei cu plumb i folosirea fungicidelor in agricultur. Stasul 1342/1991 i stasul 4076/1988 prevd concentratii admise de plumb de 0,05 mg/dm3 att pentru apa potabil, ct i pentru apele de suprafat (Ghidra, 2004). b) Poluarea cu substane chimice indezirabile Substantele indezirabile sunt reprezentate de elementele chimice care intr in compoziia natural a apei aa cum sunt: aluminiul, fierul i manganul sau de elemente chimice provenite din poluare, aa cum sunt cuprul i zincul. Substantele chimice indezirabile produc, in concentratii mari, modificri organoleptice i fizice ale apei, fcnd-o improprie pentru consum. Unele dintre substantele chimice indezirabile (cupru i zinc) pot avea n concentraii mari, chiar efect toxic. n asemenea concentratii, apa poluat are caracterele organoleptice att de puternic afectate nct animalele nu o consum. Practic, nu se ntlnesc intoxicaii cu substane indezirabile. Poluarea cu aluminiu. Aluminiul poate fi regsit in ap i ca urmare a polurii sau a adugirii voluntare ca coagulant, pentru favorizarea limpezirii acesteia in activitatea de tratare. Concentratia admis exceptional in apa de but este de 0,2 mg/dm 3. n cantiti excesive, aluminiul are efecte negative asupra organismelor, datorit aiinitii mari pentru fluor. Poate intra in reactie chiar cu fluorul din smalul dintilor. Poluarea cu cupru s-a extins odat cu dezvoltarea industriei metalelor neferoase, fabricilor de mtase vegetal i a industriei chimice, ca i a tratrii apei contra algelor. Cuprul este implicat n apariia tulburrilor cardiovasculare, modific gustul (amar astringent), culoarea (albastr) i turbiditatea apei. Concentratia maxima de Cu admis este de 0,1 mg/dm3, n apa potabil i de 0,05 mg/dm3 n apele de suprafa. Poluarea cu fier sub form de sruri feroase sau ferice (sulfati, fosfai i siiicai) favorizeaz dezvoltarea ferobacteriilor, care au efect corosiv asupra conductelor metalice. Modific gustul (metalic-astringent) i culoarea (galben-portocaliu) apei. Fierul n exces imprim apei un gust metalic i o culoare roiatic. Concentratia admis excepional n apa de but este de 0,3 mg/dm3 ap, iar n apele de suprafa de categoria I este de 0,3 mg/dm3 ap.
318
Poluarea cu mangan nsoete obinuit poluarea cu fier i contribuie la modificarea gustului i aspectului apei.Manganul in prezena substantelor organice favorizeaz dezvoltarea microorganismelor.Concentratia admis exceptional n apa potabil este de 0,3 mg/dm3 ap, iar n apele de suprafa de categoria I este de 0,1 mg/dm3 ap. Poluarea cu zinc. Apa poluat cu zinc nu ajunge s produc intoxicaii datorit faptului c aceasta are efect emetizant (provoac vrsturi) i gust astringent. Concentratia admis exceptional n apa potabil este de 2mg/dm3 apa, iar n apele de suprafa de 0,03 mg/dm3 ap. c) Poluarea cu micropoluanti chimici organici Micropoluanii chimici se gsesc n ap in cantiti foarte mici. Acetia au efecte negative asupra apei, modificndu-i proprietile organoleptice i fizice, dar i asupra organismelor care i inger.Actiunea asupra organismelor poate fi toxic, cancerigen i cumulativ (modific reactivitatea, mrete sensibilitatea la agresiunile microbiologice ). In aceast categorie sunt cuprini: detergenii, fenolii, produsele petroliere i pesticidele (Ghidra, 2004). Poluarea cu detergenti a apelor de suprafa a ajuns n momentul de fa un adevrat pericoi. Se disting dou mari clase de detergeni: ionici (anionici i cationici) i neionici. Utilizarea detergenilor este aproximativ n urmtoarea proporie: 95% neionici i 5% cationici (ionici). Caracteristica de baz a detergenilor este aceea c scad tensiunea superficial a lichidelor n care sunt dizolvati, motiv pentru care sunt denumii ageni de suprafa. Majoritatea detergenilor din comert contin dou elemente de baz: agentul tensioactiv, care n general este ABS (alchil-benzen-sulfonai) i sruri sodice: fosfati, carbonati, sulfati, silicai, perborai. Sursa de poluare cu detergeni este reprezentat de apele reziduale fecaloidmenajere (inclusiv apele stradale), industriale (fabrici textile, pielrie, spltorii) i fungicidele i insecticidele folosite n agricultur (care contin ageni tensioactivi). n concentratia de 1 mg/1 produc spumarea apei, fapt considerat ca pincipalul indiciu de poluare pe lng imprimarea unui aspect i miros caracteristic. Detergenii pot persista n sol 1-3 ani, de unde sunt antrenati n apele subterane, n care au fost depistai n cantitate de 0,5 mg / dm3, iar n apele de suprafat concentraiile admise sunt, de asemenea, de 0,5 mg/dm3 ap. Prezena detergenilor n apele reziduale creeaz probleme deosebite n exploatarea staiilor de epurare comunale (mpiedic sedimentarea, reduc gradul de oxigenare a apelor reziduale i capacitatea de absorbtie a substanelor toxice), mresc permeabilitatea solurilor i a mucoasei digestive. Poluarea apei cu fenoli reprezint n momentul de fa o problem de o importan major, att prin larga rspndire a acesteia, ct i prin consecintele deplorabile asupra proprietilor organoleptice i diverselor folosine ale apei. Sursa de fenoli o reprezint apele reziduale provenite de la instalatiile de distilarea i prelucrarea crbunilor, gudroanelor i lemnului, cocserii i industria petrochimic. Inconvenientul principal al polurii apei cu fenoli este acela c, n cazul dezinfectiei cu clor, formeaz clorfenolii, produi greu oxidabili cu gust neplcut. Concentraia admis de fenoli pentru apele de suprafa de categoria I este de 0,001 3 mg/dm ap. Germenii fenol-oxidanti reprezint indicatorii de poluare a apei cu reziduuri de fenol, dar totodat i indicatori de autopurificare a acesteia.
319
Poluarea cu pesticide (insecticide, fungicide, ierbicide, rodenticide) a avut aceeai dinamic de extindere ca i aceea cu nitrati. Din toat gama de pesticide, cele mai periculoase s-au artat a fi cele organoclorurate, care au proprietatea de a se acumula n organism, n special n tesutul adipos. Se apreciaz c pesticidele organoclorurate pot avea o actiune mutagen i caneerigen. Este acceptat la aceast dat ideea c, n cazul unor boli cronice, pesticidele organoclorurate ncorporate n organism se mobilizeaz n circulaie, realiznd o concentratie nociv pentru organism. Concentratia admis n apa potabil pentru toate pesticidele dintr-o clas este 0,5 mg/dm3 ap, iar n apele de suprafa trebuie s lipseasc pesticidele organofosforice i nitroderivaii. Pentru organoclorurate sunt prevzute concentratii admise de 0,0001 mg/dm 3 ap, iar pentru ierbicide sunt prevzute concentraii admise de 0,00 1 mg/dm3 ap. Poluarea apei cu reziduuri petroliere reprezint o problem deosebit de important i greu de prevenit i remediat. n prezent, acest gen de poluare a devenit periculos, iar consecintele ei asupra proprietilor organoleptice ale apei, faunei i florei acvatice sunt deosebit de nocive i durabile. Reziduurile de petrol ajung n bazinele naturale de ap prin deversarea de ape reziduale rezuitate de la rafinrii, instalaii de cracare i alte instalatii de prelucrare a titeiului. Aceste reziduuri conduc la creterea temperaturii i turbiditii, la formarea unei pelicule de petrol la suprafaa apei sau a unor emulsii (ap-petrol sau petrol-ap) i la schimbarea compoziiei apei, prin dizolvarea n aceasta a substanelor petroliere solubile, toxice in anumite concentratii, pentru organismele acvatice, om i animale. Indicatorii de poluare cu reziduuri petroliere sunt substanele extractibile, ca indicator chimic global, ce evideniaz totalitatea reziduurilor i germenii petrol oxidanti, ca indicator bacteriologic care, folosind pentru dizolvarea lor substantele petroliere, se nmultesc cu att mai intens, cu ct acest substrat este mai bogat. Concentratiile admise n apele de suprafa sunt de 0,1 mg/dm3 ap(Ghidra,2004). Poluarea apei cu hidrocarburi aromatice policiclice (HAP) i are ca surse industria (cauciucului, chimic, petrochimic, termoenergetic), pierderile de petrol sau alte produse petroliere, transportul marin, apele reziduale menajere i de splare a strzilor, particulele de sol. Concentraia admis in apa potabil este de 0,01 mg/dm3 ap i de 0,0002 mg/dm3 ap de suprafa. Poluarea cu reziduuri provenite de la prelucrarea lemnului (celuloz, hrtie, plei fibrolemnoase, placaje, plci aglomerate) este important, att prin cantitatea apelor reziduale deversate, ct i prin gradul lor ridicat de toxicitate. Apele reziduale de acest tip conin in special substante organice (zaharuri, acizi: acetic, grsimi i altele), leii sulfitice. Apele de suprafa n care s-au deversat reziduuri celulozice contin, ntre ali germeni, un numr mare de Klebsiella, care pot genera infectii respiratorii i genitourinare. Poluarea apei cu azbest (mineral fibros) i are ca surs: solul, industria extractiv i instalaiile de aprovizionare cu ap (conducta de azbociment). Eutrofizarea apei const n mbogirea compoziiei sale ntr-o prim etap cu azot i fosfor, iar ntr-o a doua etap cu potasiu, magneziu, cobalt, cupru, zinc. Sursele principale de poluare sunt reprezentate de reziduurile agricole, urbane. Creterea cantitii de substante organice n ap sau apariia lor la un moment dat este sinonim cu poluarea apei cu germeni (acetia nsotesc de obicei substantele organice). Prezena substanelor organice n ap favorizeaz persistena n timp a germenilor, inclusiv a celor patogeni, indicnd riscul de mbolnviri.
320
d) Poluarea cu substante chimice indicatoare ale polurii Substantele chimice indicatoare ale polurii au efecte nocive sau de alt natur asupra organismelor i nu modific caracterele apei sau domeniile de folosire ale acestora. Aceste substante se pot gsi obinuit in ap. n vederea interpretrii semnificatiei prezentei substantelor indicatoare ale polurii se fac analize in dinamic. Modificarea concentratiei, in sensul creterii acestui tip de substane chimice, are o semnificaie igienic deosebit, un rol ,,indicator", privind prezena altor elemente (chimice, microbiologice i parazitare) care pot avea aciune negativ asupra sntii animalelor care ingera apa poluat. In aceast categorie de substante sunt cuprinse: oxigenul dizolvat, deficitul de oxigen, cerinta biochimic de oxigen, substantele oxidabile, diversele forme de azot, (azotul total, amoniacul i nitriii), fosfaii i hidrogenul sulfurat. Oxigenul dizolvat n ap, sub raport cantitativ, depinde de temperatura apei, presiunea aerului, continutul n substante oxidabile i numrul de microorganisme. Scderea concentratiei de oxigen din ap atrage dup sine reducerea capacitii de autoepurare a apei i pierderea proprietilor de potabilitate (gustul devine fad). Concentraia admis n apa potabil i apa de suprafa de categoria I este de 6 mg/dm3 ap. Deficitul de oxigen din ap reprezint diferente dintre cantitatea de oxigen dizolvat n ap n conditii de saturaie i cantitatea de oxigen gsit n proba de ap analizat. Aceasta caracterizeaz starea igienic a apei, adic, cu ct deficitul de oxigen este mai mare, cu att nivelul polurii este mai crescut i pericolul pentru sntatea consumatorului mai ridicat. Cerinta biochimic de oxigen (CBO205) reprezint cantitatea de oxigen consumat de microorganismele din ap la temperatura de 20C, ntr-un interval de timp de 5 zile, pentru descompunerea biochimic a substantei organice coninut n ap. Substanele oxidabile din ap-consumul chimic de oxigen (CCO) reprezint substanele ce se pot oxida, att la rece, ct i la cald, sub actiunea unui oxidant (permanganat de K sau dicromat de K). Consumul chimic de oxigen exprimat n permanganat de K are valori admise exceptional de 12 mg/dm 3 n apa potabil i de 20 mg/dm3 n apa de suprafa de categoria I. Oxidabilitatea reprezint cantitatea de oxigen echivalent cu consumul de oxidant. Substantele organice din ap (de origine teluric sau din poluare) sunt oxidate la cald, iar cele anorganice la rece. Azotul organic din ap provine din compuii biologici (proteine, peptide i aminoacizi). Azotul total din ap este reprezentat de azotul organic i anorganic (amoniac, nitriti i nitrai). Amoniacul din ap rezult din descompunerea incomplet a substantelor organice care contin azot sau pot proveni din sol. Prezenta amoniacului in ap este un indicator al unei polri recente (ore, zile), deci al unui rise de imbolndviri ridicat. Concentratia admis exceptional in apa potabil este de 0, l mg/dm3 ap, iar in apele de suprafa de categoria I de 0,1 mg/dm3 ap. Azotatii din ap. Prezenta acestora este un indicator al unei poluri mai vechi, al unui rise de mbolnviri redus. Prezena simultan a amoniacului i nitritilor este un indicator al unei poluri continue, deci al unui rise de mbolnviri mare. Concentratia admis exceptional in apa potabil este de 0,3 mg/dm3 ap, iar in apele de suprafa de categoria I, de 1 mg/dm3 ap. Fosfatii din ap sunt consecinta unei poluri cu: ape reziduale industriale, pesticide, ngrminte, detergeni. Prezena fosfatilor in ap favorizeaz eutrofizarea acesteia, stimulnd dezvoltarea algelor. Concentratia admis exceptional in apa potabil este de 0,5 mg/dm3 ap. Fosforul in apele de suprafa are o valoare admis de 0,1 mg/dm' ap.
321
Hidrogenul sulfurat din ap este indicatorul proceselor anaerobe de descompunere a substantelor organice din aceasta, a lipsei de oxigen. Concentratia admis exceptional n apa potabil este de 0,1 mg/dm3 ap, iar n apele de suprafa de categoria I trebuie s lipseasc. Putrescibilitatea apei este indicatorul degradrii anaerobe a substantelor organice din aceasta, a deficitului de oxigen. Apa putrescibil eman un miros dezagreabil. Autoepurarea apelor Autoepurarea apei este complexul de procese naturale: fizice, chimice, biochimice i biologice, prin care se inactiveaz i degradeaza poluanii din aceasta, redndu-i calitile avute anterior polurii. Procesul de autoepurare tipic se produce numai in apele de suprafa. in cele subterane, autoepurarea se realizeaz odat cu cea a solului. Sunt cunoscute 4 tipuri de procese naturale de autoepurare care se pot desfura simultan i in succesiune, in functie de procesul polurii(Ghidra,2004). Autoepurarea fizic Autoepurarea fizic se realizeaz n situatia n care poluarea este produs de substane n suspensie. Aceasta este consecinta unor procese care acionez direct sau indirect i se realizeaz prin amestec, dilutie, sedimentare, radiatii solare i temperatur. Amestecul i diluia se realizeaz simultan dup deversarea apelor poluate n receptori (ape curgtoare sau stttoarc). Viteza de amestecare i diluare este direct proporional cu viteza apei curgtoare i este mai mare n apele curgtoare dect n cele stttoare. Gradul de diluare este conditionat de raportul dintre debitul receptorului i emisarului de ape poluate. Cu ct acest raport este mai mare, cu att se nregistreaz dilutii mai puin agresive sub raportul toxicitii i capacitii infectante sau infestante, datorit neatingerii pragului toxic sau a dozei minime infectate sau infestate. Sedimentarea const n depunerea particuielor n suspensie din ap, ceea ce conduce la limpezirea acesteia. Intensitatea i viteza de sedimentare este determinat de mrimea i forma particulelor, de adncimea, duritatea i temperatura apei. Viteza de sedimentare este direct proporional cu dimensiunea i greutatea particulelor, precum i cu marimea temperaturii apei. Microorganismele, paraziii i elementele parazitare din ap sedimentaez odat cu particulele n suspensie de care sunt absorbite sau sub actiunea propriei greuti. Radiaiile solare acioneaz direct, prin razele ultraviolete care au efect bactericid, la suprafaa apei i la o mic adncime a acesteia i indirect, prin razele infraroii i luminoase, care acioneaz prin creterea temperaturii apei, respectiv prin stimularea unor reactii fotochimice i a activitii organismelor acvatice. Temperatura apei mai ridicat favorizeaz viteza de sedimentare precum i intensitatea reaciilor chimice i proceselor biologice i biochimice. Autoepurarea chimic Autoepurarea chimic se realizeaz cnd poluarca este produs cu substane anorganice dizolvate in ap i joac, in general, un rol secundar. Se realizeaz prin reacii de oxidare, reducere, precipitare ntre poluani sau ntre acetia i substantele naturale din ap, avnd drept consecin reducerea gradului de toxicitate i mbuntirea calitii apei. Autoepurarea biochimic i biologic Autoepurarea biochimic i biologic se ntlnete cnd poluarea este consecinta substantelor organice, i se realizeaz de ctre organismele acvatice (biocenoza) i joac rolul principal n salubrizarea apelor poluate. Calitatea i cantitatea biocenozci este determinat de nsuirile biotopului (apei).
322
Biocenoza este mentinut de existenta unor lanturi trofice, constituite pe baza resurselor de substane nutritive din ap, care conduc la succesiunea unor anumite tipuri de organisme n aceasta. In procesul de autoepurare biochimic i biologic rolul principal revine bacteriilor. Astfel, n poluarea cu produi anorganici, intervin bacteriile autotrofe specializate pentru fiecare element chimic i produii lui, pe care i asimileaz i ncorporeaz, n propria compoziie, epurnd apa. n cazul polurii cu substante organice intervin, n cinci etape, mai multe tipuri de organisme: bacterii heterotrofe i autotrofe, organismele bacterivore, consumatorii de ciliate i consumatorii de macronevertebrate. n prima etap, predomin procesele biochimice de oxido-reducere, n urma crora substantele organice sunt descompuse n produi simpli, solubili, folosii cu consum de oxigen de bacteriile heterotrofe. Pe msura intensificrii proceselor biochimice numrul bacteriilor heterotrofe crete mult, fapt care conduce la reducerea pn la dispariie a oxigenului dizolvat n ap i la trecerea la faza de sintez organic. A doua etap este dominat de procesele de sintez organic realizate de bacteriile autotrofe fotosintetizante i chemosintetizante. Acestea asimileaz produii finali de mineralizare rezultai n prima etap oxidativ, respectiv amoniacul, bioxidul de azot, trioxidul de azot i bioxidul de carbon, n componena propriei celule. Sinteza organic se face pe seama consumului de energie solar, fapt care are drept consecin creterea cantitii de oxigen dizolvat n ap. In a treia etap se nregistreaz multiplicarea organismelor bacterivore (ameobe, ciliate, flagelate). Aceste microorganisme consum bacteriile, coloizii i diverse detritusuri din ap, accentund procesul de autoepurare. In a patra etap apar i se multiplic macronevertebratele (spongieri, lamelibrahiate). Macronevertebratele sunt consumatori de ciliate, care n plus filtreaz apa, reinnd substantele coloidale i particulele solide, aereaza i consum mlul. In etapa a cincea apar i se dezvolt plante cu clorofil (alge i plante superioare). Acestea fixeaz substantele coloidale i prin procesul de fotosintez elibereaz oxigen,mbogind continutul apei n elemente eseniale pentru viat. n momentul n care apa are un grad avansat de epurare apar consumatorii de macronevertebrate, constituiti n principal din peti, care marcheaz terminarea procesului de autoepurare. Se menioneaz c procesele de autoepurare se desfaoar simultan, iar succesiunea organismelor biocenozei nu este net delimitat, coexistnd concomitent specii din diferitele faze ale autoepurrii. In final, apa revine la nsuirile fizico-chimice naturale, putnd fi folosit ca atare pentru consum sau pentru corectarea unor parametri, prin tratarea n procesul de epurare. Obinuit, autoepurarea apelor curgtoare poluate ntr-o singur repriz se realizeaz n circa 10 zile, inclusiv de germenii patogeni. Distrugerea germenilor patogeni este consecina faptului c acetia nu beneficiaz n ap de condiii de viata i multiplicare, nregistrnd, astfel fenomene de mbtrnire i atenuare a patogenitii. De asemenea, distrugerea se datoreaz antagosnismelor i concurenei cu alte organisme acvatice (aciunea bacterivor). Se menioneaz, de asemenea, aciunea litic a fagilor, care duce la distrugerea germenilor. Autoepurarea este mai intens vara, nregistrnd o stagnare iarna. n general, autoepurarea apelor de suprafa este insuficient pentru a-i asigura potabilitatea, impunnd necesitatea prelucrrii acesteia (Ghidra, 2004).
323
Bibliografie selectiva /Ecotoxicologie 1. ANGELESCU A., PONORAN I., CIOBOTARU V., 1999. Mediul ambiant si dezvoltarea durabil, Ed. A.S.E., Bucureti. 2. BARA V., C. LASLO, 1997. Elemente de ecotoxicologie i protecia mediului nconjurtor, Ed. Universitii, Oradea. 3. GHIDRA V., ZAHARIA C., 2002. Ecotoxicologie. Ed. Studia, Cluj,p.129 4. GHIDRA V. 2004. Ecotoxicologia si monitorizarea principalilor poluanti. Ed. Studia.Cluj.192p. 5. LUPAN E., Dreptul mediului, Ed. Luminalex, Bucureti, 2001. 6. MNESCU S., M. CUCU, LIGIA M. DIACONESCU, 1994. Chimia sanitar a mediului, Ed. Medicaid, Bucureii. 7. NEGOIU D., ANGELA KRIZA, 1977. Poluanti anorganici in aer i protecia ecosistemelor, Ed. Acaderniei, Bucureti. 8. OZUNU AL., CARMEN TEODOSIU, 2002. Prevenirea polurii mediului. Ed.Univ.TRANSILVANIA Brasov. 9. RU C. i col., 1979. Poluarea i protecia mediului nconjurtor, Ed. tiinific, Bucureti. 10. RU C. i col., 1989. Prevenirea i combaterea polurii solului, Ed. Ceres, Bucureti. 11. RU C. i col, 1994. Dimensiunea ecologic a unei agriculturi durabile si competitive in Romdnia, Probleme agronomice, teorie i aplicatie", vol. XIV (1-2), 13-14. 12. OROP V., D. VASILE, Solul, o bogie natural care trebuie aprat, vol. Ecologie i protecia ecosistemelor, Craiova, 1982. 13. V CORNELIA, 1998. Prezenta nitrailor si nitriilor in produsele vegetale, Hortinform" 2/66. 14. VIAN SANDA, ANGELESCU ANCA, ALPOPI CRISTINA, 2000. M e d i u l inconjurtor, Poluare i protecie, Ed. Economic; Bucureti. 15. ZAHARIA C ., Protecia mediului, Ed. Lumina, 2001. 16. ZAMFIR, GH., 1979. Efectele unor poluani i prevenirea lor. Ed. Acad. RSR.Bucureti. 17. *** Ordinului 756/1997 pentru aprobarea Reglementrii privind evaluarea polurii mediului. Praguri de alert i praguri de intervenie. 18. ***HG nr. 1408 din 19/11/2007. Publicat in Monitorul Oficial, Partea I nr. 802 din 23/11/2007. Privind modalitatile de investigare si evaluare a poluarii solului si subsolului. 19. ***HG nr. 1403 din 19/11/2007. Publicat in Monitorul Oficial, Partea I nr. 804 din 26/11/2007 privind refacerea zonelor n care solul, subsolul si ecosistemele terestre au fost afectate. 20. *** Ministerul Mediului i Dezvoltrii Durabile (MMDD) 2008. Proiectul de Ghid Tehnic privind modalitile de investigare i evaluare a polurii solului i subsolului.
324
INDICATORI BIOLOGICI DE POLUARE Utilizarea bioindicatorilor Utilizarea indicatorilor biologici pentru caracterizarea gradului de poluare se bazeaz pe reaciile biologice ale indivizilor, ale populaiilor sau ale biocenozelor n diferite condiii de poluare a mediului.Utilizarea bioindicatorilor are ca justificare pe faptul c diferii poluani acioneaz asupra organismelor n mod diferit (selectiv) i de aceea diferitele funcii fiziologice vor fi influenate diferit. Unele funcii sunt mai sensibile i pot fi utilizate ca indiciu al existentei sau chiar al intensitii (concentraiei) noxei (Oros, 2002). De exemplu, funcia hematopoietic a organismului uman sau animal este foarte sensibil la aciunea radiaiilor ionizante i prin urmare, examenul hematologic este foarte util n depistarea precoce a aciunii radiaiilor ionizante (Ciplea i Ciplea, 1978). Diferitele populaii sau specii de vieuitoare reacioneaz diferit n prezena anumitor factori nocivi din mediul ambiant, unele fiind mai sensibile altele mai rezistente. Aceast sensibilitate poate fi constatat prin: diminuarea cantitativ a populaiei, disparitia populaiei respective, proliferarea avantajat a populaiei. Biocenozele n ntregime sunt influenate de prezena anumitor poluani, ele modificndu-i structura, productivitatea i chiar reeaua trofic. Sensibilitatea indicatorilor biologici este determinat i de faptul c ei sunt expui permanent aciunii poluanilor existeni n mediul lor de via. Indicatorii biologici pot evidenia efectele unui singur poluant sau efectele de sinergism datorate mai multor poluani existeni concomitent n mediu. De asemenea, vieuitoarele sunt cel mai adesea expuse aciunii pe durat lung (continu) a poluanilor i pot exprima efectele cumulative n timp ale acestora. Muli indicatori biologici au capacitatea de a absorbi, a fixa i chiar de a acumula i concentra anumite elemente sau compui din mediu, unii dintre acetia fiind ageni poluani. Prin urmare, determinarea i msurarea concentraiei acestor substane n corpul vieuitoarelor pot da indicii preioase cu privire la existena unei poluri trecute (nedetectabile n prezent n mediu). Pe lng termenii de indicatori biologici sau bioindicatori se utilizeaz i termenii de biomonitori, biomarkeri, bioacumulatori (Oros, 2002). Utilizarea unui organism viu pentru monitorizarea mediului se numete biomonitoring, ca activitate de observaie continu a unei zone cu ajutorul unui biomonitor. Biomonitorul este organul sau organismul care permite o estimare semicantitativ a expunerii la un anumit poluant i care trebuie s aib caliti de bioacumulator. Bioacumularea este capacitatea organismelor vii de a acumula elemente n concentraii mai mari dect media celor acumulate de aceeai specie care triete ns ntr-un mediu considerat nepoluat. Bioindicarea este activitatea de folosire a unui organism pentru a obine informaii asupra calitii mediului n care triete. El poart denumirea de bioindicator. Analiza organismelor care sunt biomonitori ofer informaii importante referitoare la cantitatea relativ dintr-un anumit poluant n mediu, biomonitorii fiind subiectul supravegherii permanente. n prezent, pentru monitorizarea calitii mediului s-au pus la punct reele la nivel regional, naional sau internaional cu puncte de msurare stabilite, aparate de msur sofisticate i extrem de precise i metode de determinare chimice i fizicochimice foarte costisitoare. Acestea ofer rezultate precise i sistematice pentru evoluia i starea polurii tuturor factorilor de mediu principali: ap, aer, sol. Biomonitoringul nu poate nlocui aceste sisteme de monitorizare, dar le poate completa n mod fericit (Oros V., 2002).
325
Bioindicatorii sunt exceleni indicatori ai polurii cronice i pot oferi un numr mare de date cu costuri sczute i cu indicii privind biodisponibilitatea poluanilor - acea parte a coninutului de poluant care poate atinge receptorii biologici. Utilizarea indicatorilor biologici s-a dezvoltat la nceput mai mult pentru mediul acvatic (Ramade, 1992), ns n prezent se cunosc i se utilizeaz un numr foarte mare de indicatori biologici pentru caracterizarea calitii aerului, apei i solului. n calitate de bioindicatori se pot utiliza vieuitoare din categoriile vegetale, animale sau microorganisme aparinnd unor grupe taxonomice foarte variate. Scopul biomonitoringului n monitoringul de mediu se practic, n general, determinarea concentraiilor poluanilor monitorizai n biotopuri, respectiv n aer, ape i soluri - adic n componenta abiotic a ecosistemelor. Activitatea de monitoring constituie un instrument util dar fr finalitate, dac se limiteaz la doar la componenta abiotic a mediului. Finalitatea monitorizrii mediului trebuie s fie evaluarea efectelor ecotoxicologice ce pot rezulta in situ ca urmare a polurii analizate (i asupra componentei biotice). Cele dou laturi ale monitoringului : fizico-chimic i ecologic, permit, mpreun, stabilirea: cilor critice de contaminare a ecosistemului studiat, prin care populaiile speciilor celor mai sensibile sunt expuse la un anumit poluant (sau la mai muli poluani) i la ce concentraii ale poluanilor. stabilirea relaiei concentraie - rspuns ecotoxicologic, stabilirea pragului de contaminare (pentru un anumit ecosistem) sub care nu vor exista efecte nocive sau efectele nu vor excede un maxim tolerabil. Considernd deci c monitoringul are o dubl finalitate, aceea de a studia concentraiile repartiia poluanilor n mediu precum i efectele lor asupra populaiilor i ecosistemelor expuse, se constat ns c n practic monitoringul se consacr n majoritatea cazurilor numai detectrii concentraiilor prezente n biotopuri (ap, aer, sol, sedimente) - de aceea i termenul "monitoring" se suprapune practic cu aceast activitate, n timp ce partea cealalt este consacrat prin biomonitoring i prin studii ecotoxicologice i studii de risc (Oros V., 2002). Alegerea speciilor ca bioindicatori Caracteristicile generale pe care ar trebui s le aib un bioindicator, stabilite pentru biomonitorizarea polurii apelor (Ramade, 1992), sunt: 1. Toi indivizii speciei bioindicatoare ar trebui s prezinte o corelaie identic i simpl ntre coninutul propriu de substan poluant i concentraia medie a acestei substane poluante n mediu sau n alimentaie, indiferent de localizare i de condiiile de mediu; 2. Specia trebuie s fie capabil s acumuleze poluantul fr a fi omort i fr perturbarea reproducerii, la nivelele maxime ale poluantului observate n mediu; 3. Indivizii ar trebui s fie sedentari pentru a fi siguri c concentraiile gsite sunt ntradevr n raport cu localizarea geografic luat n considerare; 4. Specia trebuie s fie abundent pe ansamblul ariei studiate i s aib o rspndire biogeografic pe arie mai larg pentru comparaii ntre zone distincte; 5. Speciile cu longevitate mare sunt preferabile pentru c ele permit probarea pe diferite categorii de vrst. Indivizii mai n vrst au suportat expuneri de lung durat i pot oferi date cu privire la efectele pe termen lung; 6. Indivizii trebuie s fie de talie suficient de mare pentru a furniza cantitile de esuturi necesare pentru efectuarea analizelor. Specia cercetat trebuie s fie uor de colectat i suficient de rezistent (animale) pentru a fi dus n laborator (de exemplu pentru studii de decontaminare) (Oros V., 2002).
326
n alegerea bioindicatorilor apar probleme specifice legate de teren chiar dac unele specii ar corespunde acestor criterii restrictive. Exist foarte rar o relaie simpl ntre concentraia de poluant din mediu i din esuturile vii, excepie fiind briofitele acvatice pentru PCB (difenili policlorurai) i pentru metale grele. Factorii care influeneaz fiabilitatea bioindicatorilor. Eficacitatea cu care un bioindicator prezint o estimare a concentraiei unui poluant n mediu este influenat de numeroi factori intrinseci care in de caracteristicile speciei i ale individului bioindicator i factori extrinseci care in de mediul de via. Principalii factori intrinseci care condiioneaz eficiena bioindicatorilor: ratele de acumulare i de excreie; starea ecofiziologic a indivizilor; caracteristicile populaionale ale eantionului; interferena poluanilor n efectele lor toxicologice asupra speciei . Raportul dintre rata de acumulare i cea de excreie (eliminare) a unui poluant este diferit la diferite specii. Dac o substan este acumulat rapid i este degradat i eliminat lent atunci nivelul concentraiei gsit n acea specie bioindicatoare va reflecta mai degrab concentraia maxim atins de poluant n biotop i mai puin concentraia medie a poluantului (de exemplu, n peti, DDT-insecticidul Diclor-Difenil-Tricloretanul). Concentraia n organism va fi mai mare dect cea observat n mediu. Dac substana poluant se fixeaz i se elimin cu viteze apropiate atunci concentraiile gsite n organisme vor fi similare cu cele gsite n biotop i vor nsoi ndeaproape fluctuaiile concentraiilor din biotop. Starea fiziologic a indivizilor intervine n ratele de acumulare i n concentraiile de echilibru ale poluanilor n organism. Aceste condiii ecofiziologice ale indivizilor variaz n general n funcie de ritmul sezonier al activitii indivizilor (speciei). La Gammarus pulex (puricele de balt) s-au constatat variaii sezoniere ale coninuturilor de PCB (difenili policlorurai) legate i de variaia cantitii de grsimi n organism, acestea variind i ele n funcie de sezon. ntr-o populaie dintr-o specie bioindicatoare, concentraia poluantului variaz n funcie de vrsta i talia indivizilor. Primele constatri n acest sens s-au facut pentru DDT i alte insecticide organoclorurate la peti (Ictalurus cactus, Micropterus salmoides) gsindu-se variaii de la 1 la 10 ori a concentraiei n funcie de vrst (Hunt i Bishoff, 1960; Ramade, 1987, citai de Oros V., 2002). Observaii asemntoare sau obinut i pentru plante i animale terestre. Bioacumularea nu este modificat dac doi poluani diferii se gsesc mpreun n mediu . Organismul bioindicator va acumula fiecare poluant n funcie de expunere, de concentraie, i de biodisponibilitatea sa. Exist ns i unele excepii. De exemplu, bioacumularea cuprului i cadmiului n peti este mai puternic atunci cnd metalele exist mpreun n mediu dect dac ele sunt singure (Hewitt i Anderson, 1978; Ramade, 1992, citai de Oros V., 2002). Exist i cazuri cnd cei doi poluani inhib reciproc absorbia i acumularea lor n organisme. Factorii extrinseci care influeneaz bioconcentrarea poluanilor cuprind toi factorii ecologici abiotici (temperatura, precipitaiile (n cazul plantelor), pH-ul apelor, salinitatea apelor etc.), (Oros V., 2002)
327
Bioconcentrarea i bioacumularea Metalele grele, unii compui organici i elementele radioactive, reprezint poluani xenobiotici care nu pot fi degradai ori sunt foarte greu degradali n mediu. Metalele grele precum fierul, cuprul, plumbul, zincul, mercurul, cadmiul sau nichelul sunt poluani importani provenii din industria extractiv (extracia minier, prepararea minereurilor, metalurgia extractiv), dar aceti paluani pot rezulta i din alte industrii precum industria chimic, industria energetic etc. Acetia sunt emii de ctre agenii poluatori n aer, n ap sau n sol sub diferite forme fizico-chimice. Spre deosebire de marea majoritate a poluanilor din alte categorii, metalele grele emise n aer, n ap i n sol nu sufer procese de biodegradare (Oros V., 2002) Metalele grele pot fi transformate n compui organometalici (mai puin toxici), pot suferi o serie de reacii de oxidare sau de reducere, pot s fie fixai pe minerale argiloase prezente n soluri i n sedimente. Aceste procese contribuie la autopurificarea mediului n cazul contaminrii cu metale grele. Practic fiecare metal are un comportament propriu n mediu i realizeaz un circuit biogeochimic specific, influenat ns tot mai mult de factorul antropogen. Exist specii capabile s acumuleze n organismul lor anumite substane n concentraii de zeci de mii de ori mai mari dect concentraia lor n mediul nconjurtor. Studiul polurii a confirmat existena acestui proces i n cazul unor poluani printre care i metalele grele. Astfel, pentru a desemna acest proces se utilizeaz dou noiuni: bioconcentrarea i bioacumularea. Bioconcentrarea semnific creterea direct a concentraiei unui poluant n timp ce el trece din ap ntr-un organism acvatic. Termenul poate fi extins i la organismele terestre: trecerea din aer sau din sol n organismul plantelor prin absorbie transfoliar sau transradicular, ori trecerea din aer n organismul animal prin inhalare. Bioacumularea este specific pentru organismele animale i include absorbia direct a poluantului plus acumularea pe cale alimentar. Ca msur a acestor procese se utilizeaz factorul de concentrare care este raportul dintre concentraia poluantului ntr-un organism i concentraia sa n biotop: Factorul de concentrare Fc = [ Me ] organism [ Me ] biotop n cazul unei reele trofice n interiorul unei biocenoze, fenomenul de bioacumulare se poate repeta de mai multe ori, la fiecare trecere de la un nivel trofic la altul, respectiv de la un organism prad la un organism prdtor. n astfel de cazuri avem de-a face cu un proces de bioamplificare, iar pentru caracterizarea lui se utilizeaz termenul de factor de transfer. Dac presupunem c ntr-o piramid ecologic un organism prdtor situat pe nivelul trofic n+l are concentraia de poluant Xl , iar prada sa situat pe nivelul trofic n are concentratia X0 atunci factorul de transfer (Ft) de la nivelul trofic n+1 este definit de raportul: Factorul de transfer Ft = [ n + 1 ] [ n ] = X1 X0
Considernd c prdtorul de pe nivelul n+1 are o anumit greutate corporal (b1) i consum o cantitate (a1) de prad de pe nivelul trofic n care are o concentraie de poluant X0 el va mai absorbi i pe cale direct (din ap) o cantitate de poluant notat f1, dar n acelai timp el elimin n mediu o parte din poluantul acumulat (kl ).
328
n acest caz, factorul de transfer de la nivelul 0 la nivelul 1 Ft(0,l) va putea fi definit de relaia: iar concentraia de echilibru pentru organismul prdtor va fi:
Ft(0,l) = a1 f1 b1 k l
X1=
a1 f1 . X0 b1kl
Dac prdtorul devine el nsui prad al unui carnivor de nivel trofic superior (n+2), atunci factorul de transfer va fi: Ft(l,2) = a2 f2 b2 k2 Concentratia de echilibru X2 va fi: X1 = a2 f2 . b2k2 a1 f1 . X0 b1kl
n realitate, transferul unui poluant pe parcursul unei reele trofice se efectueaz dup trei modele n funcie de valoarea factorului de transfer mediu: - dac Ft > 1 se produce bioamplificarea; - dac Ft = 1 se observ un simplu transfer al poluantului fr creterea concentraiei sale care va ti aceeai la baza i la vrful piramidei; - dac Ft < 1 va exista o descretere a concentraiei poluantului pe parcursul lanurilor trofice. Acestea din urm sunt cele mai des ntlnite cazuri i se datoreaz capacitii de autoreglare a ecosistemelor naturale, in general (dup Oros V., 2002). Circulaia mercurului n interiorul hidrosferei. Se constat c mercurul, ai crui compui sunt foarte toxici pentru toate vieuitoarele, prezint i el un ciclu biogeochimic n care procesul de prim importan, care mobilizeaz o parte din mercurul depus n sedimente, este procesul de metilare produs de ctre unele bacterii anaerobe. Acest proces se produce n condiii de mediu reductor i n prezen de materie organic. Astfel de condiii se ntlnesc n sedimentele de pe fundurile lacurilor sau ale mlatinilor, estuarelor sau deltelor unde difuzia oxigenului este slab, materia organic abund datorit sedimentrii corpurilor moarte ale plantelor i animalelor, pH-ul este uor acid, iar potenialul redox este uor pozitiv (dup Ramade, 1992) . n aceste condiii, bacteriile transform mercurul prin metilare ntr-o prim etap n monometilmercur care este foarte solubil n ap i ca urmare difuzeaz uor n mediul acvatic. n continuare el poate fi transformat n dimetilmercur care fiind un gaz se va degaja n atmosfer. Multe cercetri au stabilit c n general vieuitoarele sunt predispuse la un proces de bioacumulare a mercurului. S-a evideniat n cazul mercurului i procesul de bioamplificare. Chiar n condiii de poluare minim a apelor cu mercur, n organismul vieuitoarelor acvatice se acumuleaz cantiti semnificative de mercur, cu att mai mari, cu ct organismul se afl pe o poziie superioar n lanul trofic i cu ct lanul trofic este mai lung. Aa este cazul tiucii care poate acumula pn la 4 ppm mercur n carnea sa ntr-un ecosistem acvatic practic nepoluat. n condiii naturale, speciile marine superprdtori prezint concentraii ridicate de mercur. De exemplu, petele spad conine 1,08 ppm n camea crud, tonul 0,2-0,9 ppm, rechinul 0,70 ppm ( Ramade, 1987). Procesul de bioamplificare poate conduce la catastrofe ecologice cum a fost cazul Minamata din Japonia. n aceast mic localitate situat pe rmul unui golf relativ izolat exista n anii 1950 o uzin care arunca n golf apele reziduale cu un coninut de mercur, dar concentraia n apele golfului se meninea n limitele acceptate de normele existente.
329
In rndul populaiei locale care se hrnea cu pete din golf s-a nregistrat un numr mare de mbolnviri i circa 1000 de decese fr a se putea stabili cauza. Cercetrile au stabilit c intoxicaiile cu mercur s-au datorat acestor fenomene naturale de bioacumulare i bioamplificare pornind de la un nivel de poluare considerat ca acceptabil (Oros V., 2002). Bioindicatori in apele dulci A. Macrofite acvatice O serie de alge, briofite, fanerogane amfibii sau hidrofite prezint aptitudini accentuate de concentrare n esuturi att a unor elemente minerale (metale grele) ct i a unor compui organici xenobiotici din ape. Muchii acvatici cu potenial de bioacumulare sunt: Fontinalis, Amblystegium, Rhychostegium, Plathyhypnidium, Cindidotus etc.. Pe la mijlocul anilor 1970-1980 s-a realizat o prim sistematizare a utilizrii muchilor acvatici pentru evidenierea i monitorizarea polurii apelor fluviale cu metale grele (Empain i Lambinon, 1975, 1976; Descy, 1976, citai de Ramade, 1992, Oros V., 2002). O serie de cercetri au stabilit c Fontinalis squamosa i Fontinalis antipyretica au o capacitate mare de bioacumulare a Zn i altor metale toxice. Ele prezint o bun corelaie ntre concentraia Zn din ap i coninutul de metal din esuturi. Mai trziu s-a constatat c ultima specie acumuleaz i PCB sau ali compui organici xenobiotici, sau metale mai rare (concentratii foarte sczute) ca Ag, Bi, Sn. Alge. Alga roie Lemanea sp. este una dintre puinele macrofite care poate tri n imediata apropiere a apei dintr-un iaz de steril de la o exploatare de Pb din ara Galilor. Ea are nsuirea c se poate dezvolta n ape cu concentraii mari de metale toxice, putnd fi gsit n ape cu coninut de 1,16 mg / L Zn (Harding i Whitton, 1981, Ramade, 1992, Oros V., 2002). Fanerogame. Typha latifolia (papura) s-a dovedit un bioacumulator eficace al Zn, acumulnd n rdcini pn la 1400 mg Zn / kg atunci cnd plantele au crescut pe sedimente cu coninut de 10 mg Zn /kg de sediment (Blake i colab., 1987, dup Ramade, 1992). B. Molute i alte nevertebrate acvatice
Molutele lamelibranhiate (bivalve sau scoici) constituie bioindicatori exceleni pentru contaminarea apelor att a celor continentale ct i a celor marine. Ele au capaciti considerabile de bioacumulare i n plus sunt sedentare (i duc viaa pe un teritoriu restrns) ceea ce este foarte util n a detecta i a localiza mai precis sursa de contaminare. Multe dintre ele au un ciclu de via lung (mai multe luni sau mai muli ani) ceea ce ofer posibilitatea de a studia modificrile n timp ale strii mediului sau de a integra efectele prelungite ale emisiilor periodice (sau episodice) de concentraii diferite de poluani n mediu (Oros V., 2002). In apele dulci, bivalvele de talie mare ca Unio (scoica de lac), Anodonta (scoica de ru), Dreissenia prezint un interes deosebit datorit frecvenei lor relativ mari. Ele au un regim alimentar microfag (se hrnesc cu microorganisme i alte vieuitoare mici din ap) i prin urmare vor reflecta bine contaminarea apei, spre deosebire de alte bivalve care triesc n nmol i au un regim alimentar detritofag (filtreaz nmolul i se hrnesc cu substane organice i vieuitoare mici din nmol sau sediment). La acestea se pot aduga i unele bivalve de talie mic din mediul dulcicol precum sferiidele: Sphaerium, Pisidium. C. Petii Speciile de peti situate la vrful piramidei ecologice, avnd un regim de rpitori sau rpitori superiori sunt susceptibili s prezinte factori de concentrare de 105-106 n raport cu coninutul n ap al anumitor contaminani minerali sau organici.
330
Petii au fost utilizai pe scar larg ca bioindicatori de poluare a ecosistemelor acvatice cu metale grele sau cu alte elemente toxice . Astfel, studiul bioacumulrii Cu la pstrvul curcubeu (Salmo gairdneri) a demonstrat o foarte bun corelaie ntre concentraia de Cu din corpul petelui i coninutul din ap i n corelaie cu durata de expunere (Dixon i Spragve, 1981, dup Ramade, 1992). tiuca (Esox lucius) s-a dovedit un excelent bioindicator pentru monitorizarea polurii ecosistemelor dulcicole cu mercur. n acest caz s-a stabilit o corelaie foarte bun ntre coninutul corporal de Hg n tiuc i coninutul de Hg n sedimente. Capacitatea sa de bioconcentrare depinde i de pH-ul apei, fiind mai mare n apele acide. Bioindicatori n apele marine n apele marine, n special molutele lamelibranhiate (bivalve sau scoici) sunt utilizate ca bioindicatori datorit calitilor lor principale: - capacitate de bioacumulare; - corelaia ntre coninutul de poluani n ape sau n sedimente i cel din corpul moale al vieuitoarelor; - viaa lor relativ sedentar i ciclul lung de via. Aceste caliti au fost utilizate n anii 1970-1980 prin realizarea unor programe de monitorizare a calitii apelor de coast n zonele litorale ale Europei de Nord-Vest i Marii Britanii, i pe coastele SUA att la Atlantic ct i la Pacific. n zona European s-a urmrit n special contaminarea cu mercur pe eantioane de midii (Mytilus edulis) de mrime standard 30 mm (Wolf, 1975, dup Ramade, 1992). n SUA s-au utilizat ca bioindicatori midii (Mytilus edulis) i stridii (Ostrea lamellosa) prelevate o dat pe an din 107 localiti de coast i s-au analizat din corpul moale metalele grele, elementele radioactive, hidrocarburile i compuii organoclorurai. Rezultatele au artat c poluarea este repartizat mai degrab uniform cu unele zone cu poluare mai deosebit datorit emisiilor din surse locale industriale (Goldberg i colab., 1978, dup Ramade, 1992). Bioindicatori pentru mediile terestre A. Lichenii Lichenii constituie bioacumulatori puternici datorit capacitii lor de a prelua poluanii prezeni n aerul atmosferic. Ei triesc pe suporturi srace n substane nutritive (roci, trunchiuri de copaci etc.) i filtrez volume mari de aer pentru nutriie, prelund i poluanii. Ca urmare au rol important n biomonitorizare. Lichenul fiind o simbioz ciuperc - alg, nu are o membran exterioar respectiv o cuticul (cum are frunza plantelor superioare) de aceea aerul i umiditatea ptrund uor n corpul lichenilor (n tal). Astfel lichenii acumuleaz diferite elemente i compui fr selecie (inclusiv particule). Materialele absorbite se acumuleaz neexistnd un sistem de excreie. n perioadele uscate apa se evapor, talul reine srurile (i poluanii), se ntrete iar la revenirea ploilor organismul revine la viaa activ. Rspunsurile lichenilor la poluani pot cuprinde modificri morfologice sau fiziologice (de exemplu, coninut sczut de clorofil, cretere slab, capacitate limitat de regenerare). De exemplu, la Hypogymnia physodes (Kauppi i Mikkonen, 1980; Kovacs i Howard, 1992, citai de Oros v., 2002) s-au observat urmtoarele efecte ale polurii aerului: modificri externe: - schimbarea culorii talului; - scderea dimensiunii talului; creterea densitii (ntrirea) talului. modificri anatomice: - creterea numrului de celule moarte i plasmolizate;- scderea numrului i dimensiunilor celulelor algale. modificri fiziologice: - modificri n celulele algale (att vii ct i moarte);
331
- diminuarea absorbiei CO2 i a respiraiei; - modificri n coninutul de ap al talului; diminuarea fixrii de azot; - diminuarea activitii enzimei fosfataz; - creterea concentraiei de poluani reziduali; - scderea coninutului de clorofil i modificarea raportului dintre clorofile (clorofila a/clorofila b); - modificarea (scderea) pH-ului; - leierea K i Mg din tal. Avnd o sensibilitate deosebit fa de poluani, lichenii sunt utilizai ca bioindicatori, pentru diverse categorii de poluani: SO2, NOX, HF, Cl2, O3, peroxiacetat, metale grele, elemente radioactive, fertilizatori, pesticide, erbicide (Oros V., 2002). Ca metod de testare pentru acumularea poluanilor se utilizeaz prelevarea de probe de tal din lichenii care cresc spontan n zona studiat. Se aleg specii epifite care nu sunt dependente de sol i se colecteaz poriuni de tal care au o suprafa de contact cu substratul ct mai mic. Se practic utilizarea unor licheni dintr-o zon nepoluat care sunt transplantai n zona de studiu. n Franta, s-au utilizat 3 specii de licheni corticali (de pe scoara copacilor) din pdurea Fontainbleau de lng Paris ca bioindicatori pentru a monitoriza poluarea cu plumb a aerului datorit gazelor de eapament de la autovehiculele care circul pe autostrad. Speciile Parmelia physodes, Parmelia caperata i Evernia prunastri au servit n acest proiect. Rezultatele au dovedit o descretere accentuat a concentraiilor de Pb n aer pe distana a 80 m fa de surs (oseaua) iar n continuare scderea este mai lent (Dereulle, 1981, citat de Oros V., 2002). Valorile trebuie comparate cu coninutul de 50 ppm Pb n lichenii care cresc n zone nepoluate. Cladonia rangiferina i Cladonia nitei pot fi utilizate ca bioindicatori acumulatori pentru U, Fe, Pb, Ti (Beckett i colab., 1982; Kovacs i Harwood, 1992 citai de Oros V., 2002). Mercurul poate fi acumulat de lichenii: Alectoria capillaris, Alectoria tremontii, Hypogymnia physodes, Cladonia sp., Collema sp. (Siegel i Siegel, 1976, dup Kovacs i Harwood, 1992 citai de Oros V., 2002). S-a studiat coninutul de Cr din lichenii Parmelia caperata i Parmelia reducta gsii n ierbarele vechi n comparaie cu cei actuali din zona Ohio i West Virginia. S-au gsit 4,47 g/g la lichenii din 1883, 6,16 g/g la lichenii din 1903 i 20 g/g la cei din 1970. Cel mai larg utilizat bioindicator este lichenul Hypogymnia physodes. Pe lng sulf el poate acumula foarte multe metale realiznd valori mari ale factorului de concentrare (de exemplu, n zona unui combinat siderurgic din Danemarca): Cd 70 x Fe 28 Pb 62 x Mn 28 Cu 35x Zn 26 Cr 34 x Ni 9 x V 31X Un test, cu 9 specii de licheni bioindicatori, s-a organizat la uzina de incinerare a deeurilor menajere de lng Grenoble n Frana n anii 1995-1996, pentru studierea emisiilor de metale grele de la aceast uzin. S-a urmrit acumularea de Pb i Cd. S-au utilizat un numr de 9 specii de licheni, prelevai dintr-o zon martor nepoluat, s-au divizat n 3 loturi fiecare, un lot a fost expus direct la fumul emis pe coul uzinei, al doilea lot a fost expus n aerul ambiant din uzin, iar al treilea lot a fost pstrat ca martor n laborator. n probele martor concentraia pentru Pb a fost sub 30 ppm la toate speciile, la lotul expus direct la co concentraiile au fost mai mari - aproape 70 ppm, la probele din incinta uzinei - coninuturi relativ mari (pn la 60 ppm). De exemplu, la Hypogymnia physodes lotul martor cca 28 ppm, la lotul expus direct cca 45 ppm, iar la lotul pstrat n uzin 35 ppm. Rezultatele sunt asemntoare i n privinta Cd dar concentraiile sunt mai mici (Oros V., 2002). B. Briofitele (muchii) prezint o sensibilitate deosebit fa de poluarea aerului. Ca urmare, numrul speciilor de briofite a fost mult diminuat n zonele urbane, n centrele industriale intens poluate.
332
Unele specii s-au stins iar altele s-au redus ca numr de indivizi (i biomas) i ca arie de rspndire. De exemplu, n Olanda au disprut n ultimii 100 de ani 15% din speciile de briofite terestre i 13% din speciile de briofite epifite. n 1968 Ruhling i Tyler citai de Oros V., 2002, au utilizat ca bioindicatori speciile de muchi Pleurozium schreberi, Hyloconium splendens i Hypnum cupressiforme pentru a studia comparativ coninuturile n Pb ale acestor specii din ierbarele vechi din Stockholm cu acelea din probele actuale. Rezultatele au evidenliat o cretere brusc a coninutului de Pb n muchi ncepnd din anii 1920, perioad cnd a nceput utilizarea plumbului alchilat n benzin. n 1990 aceleai 3 specii au fost utilizate ntr-un proiect de biomonitorizare a polurii de fond cu 8 metale (As, Cd, Cr, Cu, Fe, Pb, Ni, V, Zn) n rile scandinave, Germania i Olanda. S-a ntocmit o hart a polurii cu aceste metale a Europei de Nord. Elementele radioactive sunt i ele acumulate n muchi mai intens dect n plantele superioare. Astfel, Pleurozium schreberi a fost utilizat pentru monitorizarea cderilor de La, Zr i alte elemente n urma testelor nucleare (Svenson i Lindon, 1965; Kovacs i Harwood, 1992, citai de Oros V., 2002). n Ungaria s-au utilizat speciile Ceratodon purpureus, Tortula ruralis i Bryum argenteum pentru biomonitorizarea cderilor de 137Cs dup accidentul de la Cernobl. n cazul metalelor grele s-a stabilit urmtoarea secven a toxicitii acestora pentru briofite (este asemntoare i la plantele cu flori): Hg > Pb > Cu > Cd >Cr > Ni > Zn n mediu se produc adesa efecte aditive, sinergice, poluarea find polimetalic. Unele briofite sunt tolerante la concentraiile mari de metale n mediu. Exist chiar comuniti numite "muchi de cupru" cuprinznd specii din genurile Gymnocella, Merceya i Mielichoferia. Ele cresc pe sol mbogit n Cu fr a fi afectate, creterea lor este comparabil cu a celor din situri nepoluate. Unele specii au o capacitate deosebit de mare de acumulare a metalelor uneori pn la concentraii extrem de mari. De exemplu, Hyloconium splendens originar dintr-o min de cupru a acumulat Pb, Cd, Cu, Zn n concentraie de 17320 ppm (n comparaie cu plantele superioare Picea 349,5 ppm, Clintonia 548,5 ppm n acelai mediu) (Oros V., 2002). C. Plante superioare, bioindicatori pentru metale grele. Plante cu flori - specii ierboase Specii acumulatoare. Majoritatea plantelor ruderale sunt capabile s acumuleze cantiti mari de poluani, inclusiv metale grele fr apariia unor simptome externe. Ele sunt foarte comune, cosmopolite astfel c pot prezenta date pentru evaluri comparative pe suprafee mari. Diferite organe ale plantei conin cantiti diferite de metale grele. Cele mai mari cantiti se pot detecta n rdcini i n frunze, n timp ce mugurii, florile i fructele contin cantiti mici. Analiza din rdcini este recomandat n special n acele arii unde solul este contaminat cu cantiti mari de metale grele. Analiza din frunze indic att poluarea din sol ct i poluarea cu praf din aer, direct pe frunze. Splarea probelor de material vegetal este discutat (controversat). Dac dorim numai coninutul de metal acumulat n plant este necesar splarea. Durata i modul de splare trebuie standardizat. Pentru probele destinate determinrilor de poluani din lanurile trofice (exemplu, plante - erbivore - carnivore) splarea nu este necesar (Oros V., 2002).
333
Dintre speciile acumulatoare de metale (dup Oros V., 2002) mai cunoscute sunt:
- Melandrium album (opaia) - Lolium perenne (raigras) - Plantago lanceolata (ptlgina) - Lepidium draba (urda vacii) - Polygonum aviculare (troscot) - Thlaspi (pungulia) 4,286 g/g 1,683 g/g 1,547 g/g 1,437 g/g 1,190 g/g 1000-3500 g/g (pentru Ni i Zn).
Specii indicatoare . Lolium perenne i Lolium multiflora sunt foarte adecvate pentru a fi utilizate ca indicatori de expunere. Aceste plante sunt frecvente n parcuri, pe marginea drumurilor, a oselelor. Pe lng metale grele, ele sunt indicatori pentru S i F. Alte specii ierboase utilizate ca bioindicatori pentru metale grele sunt: - Melandrium album (opai) - (Pb) - Thlaspi (punguli) - (Ni, Zn) - Solidago canadensis (splinu sau snziena-de-grdin) - (lng autostrad 110 ppm Pb, departe de autostrad conine 6,4-21,8 ppm) - Artemisia vulgaris (pelin), Calamagrostis epigeios (trestia de cmp), Chelidonium majus (rostopoasca), Plantago major (ptlgina mare), Poa annua (firua) - utilizate pentru metale grele ntr-un studiu n Berlin; - Equisetum arvense (coada calului) - acumulare de Hg n zona distrus de vulcanul Sf.Elena din SUA; - Achillea millefolium (coada oricelului), Artemisia vulgaris (pelin), Plantago lanceolata (ptlgina), Amaranthus retroflexus (moul curcanului) - bioindicatorii pentru V; - Hypericum perforatum (pojarnig), Hedera helix (iedera), Urtica dioica (urzica moart) pentru Pb, Cu, Zn, Cd, Hg (Holvarth i Rump, 1970, dup Oros V., 2002); - Vaccinium myrtillus (afinul), Vaccinium vitis-idaea (merior) - pentru Cd, Fe, Mn, Pb (Czukojovska i colab., 1980, dup Oros V., 2002). Teste standard se efectueaz cu Lolium multiflorum (raigras aristat) - pentru SO2, F, metale grele. Expunerea se face pe o durat de 14-28 zile utiliznd ghivece cu plante crescute din semine (plante de 6-8 sptmni). Arbori i arbuti de foioase Frunzele arborilor fixeaz metale grele din zonele poluate (de exemplu, pe marginea oselelor n apropierea uzinelor) att din sol ct i direct din aer. Coninutul de metale acumulat n frunze variaz cu specia, cu gradul de poluare, dar i cu vrsta frunzelor. Toamna, frunzele au concentraia cea mai mare (frunze cztoare) i este perioada optim pentru determinare. Efecte ale metalelor asupra arborilor: diminuarea creterii copacului, diminuarea creterii frunzelor, cderea timpurie a frunzelor (dup Oros V., 2002). - Specii sensibile: Betula pendula (mesteacn), Fraxinus excelsior (frasin), Sorbus aucuparia (scoru de munte), Tilia cordata (tei), Malus domestica (mr). - Alte specii considerate rezistente: Eleagnus angustifolia (slcioara), Populus canadensis (plop canadian), Salix alba (salcie), Sambucus nigra (soc negru). - Specii relativ rezistente (acumulatori): Carpinus betulus (carpen), Quercus robur (stejar), Fagus sylvatica (fag), Quercus palustris (stejar de balt), Acer saccharum (arar), Platanus acerifolia (platan). - Indicatori acumulatori -sunt specii cu posibil rezisten.
334
Coninuturi de diferite metale n frunzele unor arbori de foioase (indicatori-acumulatori) (dup Oros V., 2002)
Valori medii (ppm) Valori maxime n zone rurale (ppm) (ppm)
Alianthus glandulosa (oetar) Aesculus hippocastanus (castan slbatic) Tilia tomentosa (tei) Sophora japonica (salcm japonez) Celtis occidentalis (smbovin american) Robinia pseudaccacia (salcm) Acer platanoides (paltin de cmp) Platanus acerifolia (platan)
- Specii - indicatori pentru microelemente i ultramicroelemente (dup Oros, 2002): Pentru Argint (Ag )- Robinia pseudaccacia (salcm); Pentru Bor (B) - Rosa rugosa (mce), Acer campestre (artar de cmpie), Aesculus hippocastanus (castan slbatic), Morus alba (dud alb), Platanus hybrida (platan), Salix alba (salcie), Sambuccus nigra (soc); Pentru Bismut (Bi) - Robinia pseudaccacia (salcm); Pentru Ceriu (Ce) - Thuja occidentalis, Aesculus hyppocastanus (castan slbatic); Pentru Cobalt (Co) - Sophora japonica (Salcam japonez); Pentru Crom (Cr) - Koelrenteria paniculata; Pentru Cesiu (Cs)- Rosa rugosa (Mce cultivat); Pentru Europiu (Eu) - Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Pentru Fluor (F) - Sophora japonica (Salcam japonez); Pentru Galiu (Ga) - Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Pentru Lantan (La) - Rosa rugosa; Pentru Molibden (Mo) - Robinia pseudaccacia; Pentru Nichel (Ni) - Rosa rugoza, Sophora japonica, Thuja orientalis, Aesculus hyppocastanus; Pentru Stibiu (Sb) - Thuja occidentalis, Aesculus hyppocastanus; Pentru Staniu (Sn) - Thuja occidentalis; Pentru Toriu (Th ) - Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Pentru Uraniu (U ) - Rosa rugosa, Thuja occidentalis; Pentru Vanadiu (V ) - Rosa rugosa, Thuja occidentalis, Robinia pseudaccacia, Aesculus hyppocastanus; Pentru Wolfram (W ) - Robinia pseudaccacia; Pentru Zinc (Zn)- Robinia pseudaccacia. Coniferele sunt indicatori mai sensibili dect copacii cu frunze cztoare datorit faptului c durata de via a acelor (frunzelor) este de 3-4 ani i sunt expuse polurii i pe perioadele de iarn. Acele de conifere rein i fixeaz poluanii o perioad mai lung de timp. Majoritatea speciilor de conifere rspund la concentraii mici de poluani precum SO2, HF, rspunsul fiind diminuarea vitezei de cretere; lungimea lstarilor tineri i a acelor este mai mic, iar uneori pot aprea i cloroze, necroze sau cderea frunzelor (acelor). Poluarea cu SO2 la concentraii n aer de peste 1 ppm produce o decolorare rocatgalben brun a acelor, apar pete pe lng stomatele saturate cu ap, acele cad, coroana devine mai mic datorit diminurii creterii.
335
Efectele cronice pot fi observate n cazul polurii frecvente cu SO2 la concentraii n aer de peste 0,05 ppm. Poluarea cu SO2 i HF poate fi indicat de conifere i prin determinarea coninutului din frunze (coniferele sunt i acumulatori ). La Picea abies coninutul de sulf n frunze, la plantele situate in apropierea uzinelor cu emanaii de SO2, poate ajunge pn la 2000 ppm n acele vechi de 2-3 ani i pn la 200-300 ppm n acele tinere. Coninutul de fluoruri n plantele situate lng sursa de emisie de HF poate ajunge la 500 ppm n acele de 2 ani (Oros, 1996). Specii de conifere sensibile la poluarea cu SO2 sunt: Abies alba, Picea abies, Pinus banksiana, Pinus nigra, Pinus silvestris, Pinus strobus, Larix decidua, iar fa de poluarea cu HF sunt sensibile: Abies alba, Picea abies, Pinus ponderosa, Pinus silvestris, Pinus strobus. Unele specii pot fi utilizate i pentru indicarea polurii cu oxidani fotochomici: Picea abies, Pinus banksiana, Pinus strobus. Indicarea polurii cu metale grele se face prin acumularea acestora, mai ales n acele coniferelor (coniferele sunt acumulatori de metale grele). Astfel, Picea abies, Pinus silvestris, Pinus nigra, Taxus baccata, Thuja occidentalis sunt specii adecvate pentru indicarea polurii cu Fe, Mn,Cu, Pb. Zn,Cd,Ag, Hg. Plante de tis (Taxus baccata) au fost utilizate ntr-un proiect de evaluare a polurii cu metale grele n oraul Darmstadt din Germania n perioada 1978-1984, coninutul de metale (Pb, Cu, Cd, Ni, Cr, Hg) indicnd o scdere a polurii n perioada menionat (Kovacs, 1992, dup Oros V., 2002). CONCLUZII Reelele de monitoring prin analize fizico-chimice a polurii mediului au avantajul c furnizeaz informaii privind valorile absolute ale polurii factorilor de mediu i evoluia spaio-temporal a acesteia. Ele sunt limitate din punct de vedere al numrului de puncte de msurare i al poluanilor determinai. Aceste reele nu furnizena informaii privind efectele polurii asupra fiinelor vii. Sistemele de biomonitoring completeaz rezultatele reelelor clasice de monitoring prin analize fizico-chimice, caracterizndu-se prin urmtoarele: Bioindicatorii constituie un mijloc de detecie n cazul absenei sau insuficienei mijloacelor tradiionale, pentru a urmri dispersia unei poluri sau pentru o cartografiere a zonelor afectate. Staiile de bioindicatori permit cu uurint modificri in privina spaiului (prin uurina deplasrii) i n privina timpului (durata de expunere), ceea ce nu aste posibil n cazul staiilor fixe ale reelelor clasice de monitoring. Staiile de biomonitoring permit ndesirea i completarea, la costuri moderate, a reelelor preexistente de monitoring. Utilizarea bioindicatorilor poate orienta alegerea punctelor de amplasament pentru instalarea staiilor fizico-chimice, furniznd informaii prealabile asupra nivelelor de poluare. Bioindicatorii i bioacumulatorii permit evaluarea unor poluani mai puin urmrii prin analizele clasice (HF, metale grele etc.) (Oros, 2002) Sistemele de biomonitoring prezint i aspecte indirecte de complementaritate: - aspecte economice: obinerea de rezultate privind productivitatea biologic, privind alegerile de soiuri ameliorate; - aspecte de sntate public: riscurile de acumulare a poluanilor pe calea lanurilor alimentare (riscurile unor grdini de zarzavat amplasate n orae sau n zonele periurbane poluate); - aspecte psihologice i pedagogice: o mai bun sensibilizare a publicului prin faptul c se recurge la organismele vii. 336
Pe lng avantajele privind posibilitatea rapid i facil de instalare, costul redus (posibilitatea unui numr mare de puncte de msurare), cel mai important avantaj al biomonitorizrii este acela c bioindicatorii integreaz poluarea produs pe o anumit durat de timp i reflect efectele acestei poluri integrate. Bioindicatorii surprind i evenimentele de poluare care au putut scpa altor sisteme de monitoring i astfel se pot obine informaii asupra acestor evenimente chiar dup derularea lor. n acelai timp, cu ajutorul bioindicatorilor putem obine informaii asupra polurii istorice existente pe anumite situri de interes public, comercial sau cu ocazia operaiilor de vnzare-cumprare. Biomonitorizarea nu evaluenz valorile absolute ale polurii ci, mai ales, partea biodisponibil a polurii, aducnd informaii utile privind efectul polurii asupra mediului (Oros V., 2002).
Bibliografie selectiv CIPLEA, L.,L, CIPLEA, A., 1978, Poluarea mediului ambiant. Ed. Tehnic, Bucureti, 188 - 191. Comninellis, Ch., 1994, Electrochim. CSUROS, M., 1997, Environmental Sampling and Analysis, Lab.Manual, CRC Press LLC. KOVACS, M., 1992, Biological Indicators in Environmental Protection, Ellis Horwood, London. OROS Vasile, 2002. Biomonitoring. In Poluarea si monitorizarea mediului, Ed.Univ. Transilvania, Brasov. p.60-73. RAMADE, F., 1987, Precis d'Ecotoxicologie. Ecologie Fondamentale. Mc Grow Hill. Ramade, F., 1992, Precis d'Ecotoxicologie. Maisson, Paris.
337
acumuleaz PCB, ali compui organici xenobiotici, metale mai rare (Ag, Bi, Sn. )
A. Macrofite acvatice.
Alge.
Alga roie Lemanea sp. este una dintre puinele macrofite care poate tri n imediata apropiere a apei dintr-un iaz de steril de la o exploatare de Pb din ara Galilor. Se poate dezvolta n ape cu concentraii mari de metale toxice, 1,16 mg / L Zn .
3/20/2010
338
Typha latifolia (papura) bioacumulator al Zn, acumulnd n rdcini pn la 1400 mg Zn / kg, pe sedimente cu coninut de 10 mg Zn/kg de sediment (Ramade, 1992).
3/20/2010
Unio (scoica de lac), Anodonta (scoica de ru), Dreissenia de talie mic: Pisidium . 3/20/2010
Sphaerium
Template copyright www.brainybetty.com 2005 5
339
C. Petii
Petii au fost utilizai pe scar larg ca bioindicatori de poluare a ecosistemelor acvatice cu metale grele sau cu alte elemente toxice.
Molutele lamelibranhiate
n zona European s-a urmrit contaminarea cu mercur pe midii (Mytillus edulis) de mrime standard 30 mm n SUA s-au utilizat ca bioindicatori midii i stridii (Ostrea lamellosa)
prelevate o dat pe an.
S-au analizat din corpul moale metalele grele, elementele radioactive, hidrocarburile i compuii organoclorura i copyright Template
3/20/2010 www.brainybetty.com 2005 7
340
Parmelia coperata,
Evernia prunastri Rezultatele au dovedit o descretere a concentraiilor de Pb n aer pe distana a 80 m fa de osea (Dereulle, 1981). Valorile trebuie comparate cu coninutul de Template copyright 3/20/2010 www.brainybetty.com 2005 n zone nepoluate. 10 50ppm Pb n lichenii care cresc
Cel mai larg utilizat bioindicator este lichenul Hypogymnia physodes. Pe lng sulf el poate acumula foarte multe metale realiznd valori mari ale factorului de concentrare (de exemplu, n zona unui combinat siderurgic din Danemarca): Cd de 70 x, Pb 62 x, Cu 35x, Cr 34 x, V 31X, Fe si Mn 28 x, Zn 26 x, Ni 9 x .
3/20/2010
12
341
Bioindicatori pentru Pb. Speciile de muchi Pleurozium schreberi, Hyloconium splendens, Hypneum cupressiforme Studiu comparativ (Ruhling,Tyler,1968 ): coninuturile n Pb ale speciilor din ierbarele vechi din Stockholm si ale unor probe actuale. Rezultatele au evideniat o cretere brusc a coninutului de Pb ncepnd din anii 1920,cnd nceput utilizarea plumbului alchilat n benzin. n 1990 aceleai 3 specii au fost utilizate n biomonitorizarea polurii de fond cu 8 metale (As, Cd, Cr, Cu, Fe, Pb, Ni, V, Zn) n rile Template copyright scandinave, Germania i Olanda. S-a ntocmit o hart 3/20/2010 www.brainybetty.com 2005 13 a polurii cu aceste metale a Europei de Nord
Elementele radioactive sunt i ele acumulate mai intens n muchi. Pleurozium schreberi a fost utilizat pentru monitorizarea cderilor de La, Zr, alte elemente n urma testelor nucleare. n Ungaria, biomonitorizarea cderilor de 137Cs dup accidentul de la Cernobl, cu Ceratodon purpureus,
Efecte aditive, sinergice. Poluarea polimetalic Unele briofite sunt tolerante la concentraiile mari de metale n mediu . Muchii de cupru" - genurile Gymnocella, Merceya , Mielichoferia, cresc pe sol mbogit n Cu, ca si in siturile nepoluate. Unele briofite au o capacitate mare de acumulare a metalelor uneori pn la concentraii extrem de mari: Hyloconium splendens, originar dintr-o min de cupru a acumulat Pb,Cd,Cu,Zn n concentraie de 17 320 ppm (comparativ cu Picea 349,5 ppm Template copyright iClintonia 548,5 ppm) 3/20/2010 www.brainybetty.com 2005 15
342
Melandrium album(opaia)4,286g/g - Lolium perenne (raigras)1,683g/g Plantago lanceolataptlgina 1,547 g/g - Lepidium draba a (urda vacii)1,437 g/g - Polygonum aviculare troscot 1,190 g/g - Thlaspi (pungulia) 1000-3500 g/g Template copyright 3/20/2010 (pentru Ni i Zn). www.brainybetty.com 2005 a
16
Specii indicatoare pentru metale grele n parcuri, pe marginea drumurilor, a oselelor. Lolium perenne i Lolium multiflora a, (metale grele, S i F). Thlaspi (punguli)(Ni,Zn) Melandrium album (opai) (Pb) Solidago canadensis s (splinu)(Pb) Equisetum arvense (Hg) (coada calului)
Template copyright n zona distrus de vulcanul Sf.Elena din SUA; 3/20/2010 www.brainybetty.com 2005 17
Artemisia vulgaris (pelin) Calamagrostis epigeios trestia Chelidomium majus rostopoasca Plantago major ptlgina mare Poa annua firu a 3/20/2010
18
343
Achilea milefolium m (coada oricelului), Artemisia vulgaris (pelin), Plantago lanceolata (ptlgina), Amaranthus retroflexus (moul curcanului). Template copyright
3/20/2010 www.brainybetty.com 2005
19
20
21
344
BIOINDICATORI Testele standard cu bioindicatori pentru mediile terestre se efectueaz cu Lolium multiflorum pentru SO2, F, metale grele. Expunerea se face pe o durat de 14-28 zile utiliznd ghivece cu plante crescute din semine (plante de Template copyright 6-8 3/20/2010 sptmni www.brainybetty.com 2005 22
BIOINDICATORI PENTRU MEDIILE TERESTRE.
- 1. Specii sensibile: Betula pendula (mesteacn), Fraxinus excelsior (frasin) Sorbus aucuparia (scoru de munte) Tilia cordata (tei), Malus domestica (mr). - 2. Indicatorii acumulatori sunt Template copyright speciile cu posibil www.brainybetty.com rezisten. 3/20/2010 2005
BIOINDICATORI PENTRU MEDIILE TERESTRE
, ,
23
Coninuturi de diferite metale n frunzele unor arbori de foioase medii Valori maxime Bioindicatori-acumulatori Valori (ppm) (ppm)
Alianthus glandulosa (oetar) Aesculus hippocastanus (castan slbatic) Tilia tomentosa (tei) Sophora japonica Celtis occidentalis Robinia pseudaccacia (salcm) 1027 874 806 754 565 596 2112 1483 2458 2076 1239 1194 1101
345
- 3. Specii considerate rezistente: Eleagnus angustifolia (slcioara) Populus canadensis (plop canadian), Salix alba (salcie) Sambucus nigra (soc negru). - Specii relativ rezistente (acumulatori): Carpinus betulus (carpen), Quercus robur (stejar), Fagus sylvatica (fag), Quercus palustris (stejar de balt), Acer saccharum (arar), Template copyright Platanus acerifolia (platan). 3/20/2010 www.brainybetty.com 2005
Arbori i arbuti de foioase. Bioindicatori
, ,
24
Ag Robinia pseudaccacia B Rosa rugosa (mce), Acer campestre (artar de cmpie), Aesculus hippocastanus ,
Morus alba , Platanus hybrida (platan) , Salix alba (salcie), Sambuccus nigra (soc); Template copyright www.brainybetty.com 2005 (salcm); Bi3/20/2010 Robinia pseudaccacia
Thuja occidentalis, Aesculus hyppocastanus ; Co Sophora japonica ; Cr Koelrenteria paniculata; Cs Rosa rugosa; Eu Rosa rugosa, Thuja occidentalis; F Sophora japonica; Ga Rosa rugosa, Thuja occidentalis; La Rosa rugosa; Template copyright Mo 3/20/2010 Robinia pseudaccacia; www.brainybetty.com 2005
Ce
26
27
346
Specii de conifere sensibile la poluare sunt utilizate pentru indicarea polurii cu : SO2: Abies alba, Picea abies, Pinus banksiana, Pinus nigra, Pinus silvestris, Pinus strobus, Larix decidua, HF : Abies alba, Picea abies, Pinus ponderosa, Pinus silvestris, Pinus strobus. oxidani fotochimici: Picea abies, Template copyright Pinus banksiana, Pinus strobus. 32 3/20/2010 www.brainybetty.com 2005
BIOINDICATORI PENTRU MEDIILE TERESTRE.
Coniferele
Indicarea polurii cu metale grele se face prin acumularea acestora, mai ales n acele coniferelor (Oros, 1996, 2002).
Coniferele sunt acumulatori de metale grele.
Speciile adecvate pentru indicarea polurii cu Fe, Mn, Cu, Pb, Zn, Cd, Ag, Hg, sunt:
Picea abies, Pinus silvestris, Pinus nrigra, Taxus baccata, Template copyright Thuja occidentalis 3/20/2010 www.brainybetty.com 2005
Bioindicatori ai polurii cu Fe, Mn, Cu, Pb, Zn, Cd, Ag, Hg
33
Picea abies
Pinus silvestris
3/20/2010
Pinus nigra
34
347
Thuja occidentalis
3/20/2010
35
Coniferele
Plantele de tis
(Taxus baccata) au fost utilizate ntr-un proiect de evaluarea polurii cu metale grele n oraul Darmstadt din Germania n perioada 1978-1984. Coninutul de metale (Pb, Cu, Cd, Ni, Cr, Hg) indic o scdere a polurii n perioada menionat
(Kovacs, 1992, citat de Oros, 2002). Template copyright
3/20/2010 www.brainybetty.com 2005 36
348
Bibliografia:
1. ADAMS, V.D., 2000, Water & Wastewater Examination Manual, Lewis Publishers. 2. APOSTU S., 2006 Organisme modificate genetic (OGM) Folosite n alimentaia i sntatea omului i 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39.
animalelor. Ed.RISOPRINT ClujNapoca ARINI Ioana, CRISTESCU D., 2006. Biologie animal i vegetal. Ed.Paralela 45, Bucureti. ANDREW BALL, 2002. Bioremedierea solurilor si apelor. In. Managementul deseurilor. Cap 5. Rds. V. Oros, Camelia Draghici, Ed. Univ, Transilvania Brasov, 2002, p.129-133 BADEA Elena Marcela, PUN I. O., 2006. Plante modificate genetic n cultur. Impactul agronomic, ecologic i economic. Ed. MIRTON, Timioara, BARNEA M., PAPADOPOL C., 1975. Poluarea i protecia mediului. Ed. tiinific i enciclopedic. BERCA M., 2005. Teorie i practic n biotehnologii genetice. Ed. Ceres, Bucureti. BOLDOR O., TRIFU M., RAIANU O., 1981. Fiziologia plantelor. Ed. Didactic i pedagogic Bucureti. BOLDOR O., RAIANU O., TRIFU M.,1983. Fiziologia plantelor,lucrri practice. Ed. Did. i pedagogic. BURTIC Georgeta, MICU Daniela, NEGREA Corina, ORHA Adina, 2005. Poluanii i mediul nconjurtor. Ed.Politehnic, Timioara CIPLEA L.I., CIPLEA Al., 1975. Poluarea mediului ambiant. Ed. Tehnica. Bucuresti COTESCU I.,1971. Fiziologie celular normal i patologic. Ed. medical, Bucureti. CIPLEA L.L, CIPLEA A., 1978, Poluarea mediului ambiant. Ed. Tehnic, Bucureti, 188 - 191. Comninellis, Ch., 1994, Electrochim. CSUROS M., 1997. Environmental Sampling and Analysis, Lab.Manual, CRC Press LLC. DALEAViorica, MANEA Florica, 2002. Monitorizarea solului.In Poluarea si monitorizarea mediului , Ed..Univ. Transilvania, Brasov. p.55-60. DORDEA Manuela, COMAN N., 2005. Ecologie uman. Casa Crii de tiin, Cluj-Napoca. DOBROT CRISTINA, MASAMICHI YAMASHITA, 1999. Creterea i dezvoltarea plantelor. Casa de ed.Gloria FABIAN ANA, ONACA RODICA, 1999. Ecologie aplicat. Casa de editur SARMIS, Cluj GHIDRA V. 2004. Ecotoxicologia si monitorizarea principalilor poluanti. Ed. Studia.Cluj. GHIDRA V., ZAHARIA C. 2002. Ecotoxicologie. Ed. Studia, Cluj-Napoca HAIDUC IOVANCA, L.BOBOS, 2005. Chimia mediului i poluanii chimici, Ed. Fundaiei pentru Studii Europene, Cluj-Napoca. KOVACS, M., 1992, Biological Indicators in Environmental Protection, Ellis Horwood, London. LUJERDEAN Augusta, VARGA Andrea, 2002. Biochimie descriptiva. Ed.Napocastar. MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/ MILIC C.I., DOROBANU N., NEDELCU Polixenia, BAIA V., SUCIU T., POPESCU Florica, TEU Viorica, MOLEA Ioana 1982. Fiziologia plantelor Ed. Did. i Pedag. Bucureti OROS V., 2002. Biomonitoring. In Poluarea si monitorizarea mediului, Ed.Univ. Transilvania, Brasov. p.60-73. OROS V, DRAGHICI Camelia, 2002. Managementul deseurilor. Ed. Univ, Transilvania Brasov. OZUNU AL., TEODOSIU Carmen, 2002. Prevenirea polurii mediului. Ed. Univ. Transilvania Brasov. GHERGHEL P., 2000. Fiziologie cu elemente de comportament. Casa crii de tiin. Cluj PETERFI, t., SLGEANU, N., 1972. Fiziologia plantelor. Ed. didactica si pedagogica, Bucureti PETRESCU I., 1986. Biochimie. Ed. Univ. Babe-Bolyai, Facult. Biologie, Geografie si Geologie. RAMADE, F., 1987, Precis d'Ecotoxicologie. Ecologie Fondamentale. Mc Grow Hill. Ramade, F., 1992, Precis d'Ecotoxicologie. Maisson, Paris. RAICU P., IONESCU-VARO M., GANCEVICI G., MOISESCU Gabriele, 1972. Celula. Ed. Acad.RSR. ROIORU Corina, SEVCENCU C., GHERGHEL P., 1995. Lucrri practice de fiziologie animal pentru uzul studenilor. Univ. Babe-Bolyai, Cluj-Napoca. ROCA I. D., 1977. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic, Bucureti. SHLEANU V., STUGREN B., 1976. Mic enciclopedie de biologie i medicin. Ed. t. i enciclopedic. STRUNGARU GR., POP M., HELCO V., 1983. Fiziologia animalelor. Ed. Didactic i pedagogic. TRIFU M., BRBAT I., 1997. Fiziologia plantelor. Capitole alese. Ed. Viitorul romnesc. ZAMFIR, GH., 1979. Efectele unor poluani i prevenirea lor. Ed. Acad. RSR. Bucureti.
349
MALSCHI Dana, 2009. Elemente de biologie, ecofiziologie i microbiologie. Facultatea de tiinta Mediului, Ed. Bioflux online, Cluj-Napoca, ISBN 978-606-92028-4-5. http://www.editura.bioflux.com.ro/carti-2009/
Partea a III-a
Microbiologia mediului
Cuprins................................................................................................................................................................350 Introducere..........................................................................................................................................................351 1. Microbiologia. Noiuni generale....................................................................................................................353 Importana microbiologiei mediului. Microorganismele - clasificare, descriere, eco-fiziologie. Poziia bacteriilor n lumea vie. Ramurile microbiologiei. Dezvoltarea microbiologiei ca tiin Importana microorganismelor. Microorganismele din apele dulci, marine, din heletee. Microorganismele din sol. Activitatea specific a microorganismelor 2. Bacteriile..........................................................................................................................................................360 Rspndire n natur. Morfologia bacteriilor. Structura celulei bacteriene: peretele celular, membrana citoplasmatic, mezozomii, citoplasma, nucleoidul, ribozomii, aparatul fotosintetic, incluziunile, vacuolele, capsula, cilii, pilii, endosporii. 3. Conceptul de bacterie. Caracteristici structurale, chimice, fizice.............................................................374 Pigmenii bacterieni. Enzimele bacteriene 4. Virusurile........................................................................................................................................................382 Originea virusurilor. Rspndirea virusurilor n natur. Morfologia virusurilor. Structura particolei virale. Reproducerea i multiplicarea virusurilor. Influena factorilor de mediu asupra virusurilor. Cultivarea virusurilor. Clasificarea virusurilor. 5. Nutriia microorganismelor.................................................................................................................388 1. Bacterii fototrofe 1.1. Oxyphotobacteria 1.1.1. Cianobacteriile. Grupul 11 (Bacterii fototrofe oxigenice). Grupul Prochlorophytes. 1.1.2. Bacteriile halofile extreme din genul Halobacterium, 1.2. Anoxyphotobacteria Subgrupul 1 (Bacterii sulfuroase purpurii cu globule de sulf n celul): Chromatium, Thiocapsa, Thiocystis, Thiospirillum. Subgrupul 2 Bacterii sulfuroase purpurii cu globule de S n afara celulei : Ectothiorhodospira. Subgrupul 3 (Bacterii nesulfuroase purpurii): Rhodopseudomonas i Rhodospirillum. Subgrupul 4 (Bacterii cu bacterioclorofil g): Heliobacillus i Heliobacterium. Subgrupul 5 (Bacterii sulfuroase verzi): Chlorobium. Subgrupul 6 (Bacterii verzi multicelulare filamentoase): Chloroflexus. Subgrupul 7 (Bacterii chemotrofe anaerobe cu bacterioclorofil) : Erythrobacter.
350
2. Bacteriile chimiotrofe 2.1. Bacterii chimiolitoautotrofe (Chemolitoautotrofe) 2.1.1. Bacterii care oxideaza hidrogenul (Hidrogenbacterii=bacterii hidrogenice) 2.1.2. Bacterii care oxideaz monoxidul de carbon (Carboxidobacteriile) 2.1.3. Bacterii care oxideaz amoniacul (Nitritbacteriile) 2.1.4. Bacteriile care oxideaza nitriii (Nitratbacteriile) 2.1.5. Bacteriile care oxideaza sulful (bacteriile sulfoxidante=sulfoficatoare) 2.1.6. Bacter1ile care utilizez fierul (Ferobacteriile=bacteriile feruginoase) 2.1.7. Bacteriile metanogene (Metanobacterii) 2.1.8. Bacteriile acetogene. Alte tipuri de nutriie chimiolitoautotrof: Mixotrofia. Sintrofia. Hrnirea ncruciat (cross-feeding) 6. Bacteriile chimioorganoheterotrofe..............................................................................................................412 Alte tipuri de nutriie: Cometabolismul. Biotransformarea. 7. Microbiologia aplicata a mediului................................................................................................................417 Microbiota solului................................................................................................................................417 Microbiota apei....................................................................................................................................420 Tehnici de laborator. Examinarea caracterelor morfologice i tinctoriale..............................424 Microbiologie medical.......................................................................................................................429 Microbiologia produselor alimentare...............................................................................................449 Anexa. Plane.....................................................................................................................................................462 Bibliografie..........................................................................................................................................................466
Microbiologia mediului
Introducere
In cadrul tiinelor biologice, Microbiologia mediului are ca obiectiv general cunoaterea microorganismelor, a funciilor i a importanei lor n ecosistemele naturale i antropizate, n scopul familiarizrii studenilor cu aspectele practice ale identificrii, evalurii i limitrii situaiilor de risc cauzate de microorganisme, precum i pentru conservarea i utilizarea durabil a microorganismelor folositoare, pentru susinerea procesului de dezvoltare durabil a mediului i societii contemporane. Microbiologia mediului ofer cunotine pentru: nsuirea unor noiuni generale legate de microorganismele din sol i alte medii de via; delimitarea principalelor grupe de microorganisme (bacterii, fungi microscopici, alge unicelulare, protozoare, virusuri) ; cunoaterea morfologiei i structurii celulare a microorganismelor ; cunoaterea nutriiei, respiraiei i multiplicrii microorganismelor, cunoaterea microorganismelor implicate n ciclurile biogeochimice ale elementelor (C, N, P, S, Fe); cunoaterea relaiilor ecologice ntre microorganisme, ntre microorganisme i plante, ntre microorganisme i animale, la nivelul microbiotei solului, apei, aerului, produselor alimentare, microbiotei de patogeni ai plantelor, animalelor i omului etc. Prezentarea aspectelor practice are ca scop nsuirea unor metode generale de studiere a microorganismelor i a unor tehnici de lucru specifice laboratorului de microbiologie (sterilizarea materialelor, inocularea microorganismelor, prepararea mediilor nutritive de cultur folosite pentru izolarea i cultivarea microorganismelor, efectuarea preparatelor microscopice, colorarea frotiurilor, examinarea microscopic), evidentierea proprietilor biochimice; studierea microflorei solului, apei, aerului, a microflorei patogene la om i animale, la plante i alimente; cunoaterea i realizarea n laborator a unor analize legate de unele procese microbiene ce au loc n sol, respectiv n mediul acvatic, a unor teste microbiene de detectare a polurii mediului ambiant. Tematica : Importana microbiologiei mediului. Microorganismele - clasificare, descriere, eco-fiziologie. Importana complexului biocenotic al solului (macro i micropopulaia solului), importana microorganismelor din mediul natural i antropic. Metodele cantitative i calitative de cercetare microbiologie.
351
Populaia microbian a solului (bacterii, actinomicete, ciuperci, alge, protozoare, virusuri). Taxonomia, morfologia, fiziologia, ecologia i rolul microbiotei solului. Taxonomia, morfologia, ecofiziologia i rolul bacteriilor i actinomicetelor din sol Taxonomia, morfologia, ecofiziologia, rolul ciupercilor, algelor, protozoarelor, virusurilor din sol
Ecofiziologia microbiotei solului. Natura microorganismelor din sol. Microbiota autohton. Microbiota alohton. Tipuri de microorganisme din sol. Numrul, densitatea i distribuia
microorganismelor din sol. Factorii care condiioneaz distribuia microorganismelor n sol
352
1. Microbiologia. Noiuni generale. 1.1. Importana microbiologiei mediului. Obiectul microbiologiei. Microorganismele clasificare, descriere, eco-fiziologie. Microorganismele fiind un grup de vieuitoare cu implicaii majore n viaa tuturor sistemelor biologice, necesit un studiu aprofundat, pentru a nelege rolul lor n aceste sisteme, astfel nct activitatea lor s poat fi modelat n sensul dorit de om fr a se crea perturbaii ireparabile. Microbiologia prezint: descrierea microorganismelor, alctuirea lor morfo-structuraI, modul de hrnire prin care ele intervin n lanurile trofice ale ecosistemelor i modul de reproducere prin care ele se rspndesc i populeaz diferite habitate; rolul microorganismelor n ecosisteme i implicaiile lor asupra organismelor; interrelaiile complexe care exist ntre microorganisme i mediul lor de via, fcndu-se referire la factorii mediului abiotic, dar i a celorlalte vieuitoare din ecosistem cu care microorganismele stabilesc diferite tipuri de interrelaii care contribuie la funcionarea ecosistemului din care fac parte. Cunotine de microbiologie general privind: descrierea celor mai comune microorganisme din punct de vedere al caracteristici lor morfologice, structurale i fiziologice, prezentarea grupelor sistematice i funcionale i a corelaiilor ecologice ale acestora (Drgan-Bularda, Samuel, 2006, Drgan-Bularda, 2000, Krueger, Gillham, Coggin, 1973, Pamfil, 1999, Zarnea, 1994), sunt completate de aspecte particulare din domeniile microbiologiei solului (Drgan-Bularda, Kiss, 1986, Eliade, Ghinea, tefanic, 1975, Kiss i colab., 1991, Papacostea P. 1976, Ru, Crstea, 1983, tefanic, Sndoiu, Gheorghi, 2006), apelor (Nicolescu, 2002), microbiologiei medicale (Schffler, Altekrger, 1994), alimentare (Marinescu, Drgnescu,1990) industriale (Mooc, 1962), agricole (Raicu, Baciu, 1978, Bobe, 1983, Hodian, Pop, 1976) etc., prezentate ntr-un context sistemic, astfel nct nsuirea lor s constituie fundamentul tiinific pentru folosirea lor n practic. nelegerea i acumularea de cunotine se bazeaz pe elemente de chimie, biochimie, ecologie, etc. 1.2. Definiia microbiologiei ca tiin Microbiologia este tiina biologic care se ocup cu studiul structurii, dezvoltrii i aciunii microorganismelor. Ea are un caracter aplicativ care cuprinde un sistem organizat de cunotine, prin care se explic legile dup care se desfoar viaa microorganismelor. Microbiologia studiaz morfologia, fiziologia, biochimia, sistematica microorganisme-lor, originea i evoluia fenomenelor ereditare i variabilitatea microorganismelor, ct i relaiile lor cu mediul abiotic i biotic. Microorganismele sunt un grup heterogen de organisme unicelulare i pluricelulare, care dispun de un metabolism propriu i sunt capabile de a se nmuli. Microorganismele sunt vieuitoare unicelulere sau pluricelulare, observabile numai la microscop. Dimensiunile celulei, reprezentnd un organism, sunt de ordinul micrometrilor. Coloniile lor, formate din milioane de celule, se vd cu ochiul liber. Termenul de microorganism a fost dat de Louis Pasteur (1822-1895), cu etimologia : mikros = mic (grec.), bios = via. 1.3. Clasificarea microorganismelor Microorganismele se clasific, dup organizarea tipului celular, n urmtoarele grupe: virusuri i viroizi - forme acelulare. procariote - bacterii, cianobacterii, actinomicete, richetsii, micoplasme. eucariote - fungi: drojdii (levuri), micromicete (ciuperci microscopice, mucegaiuri, fungi filamentoi), alge microscopice (alge verzi, verzi-glbui), diatomee, protozoare, rotifere (metazoare).
353
n sens restrns microbiologia face referire numai la virusuri i viroizi, bacterii, ricketsii i micoplasme, actinomicete i fungi microscopici, celelalte grupe fiind studiate de botanic i zoologie. ncadrarea sistematic a fiecrui grup este controversat. Astfel, n prezent este acceptat ideea c virusurile i viroizii nu sunt organisme vii, ele fiind considerate entiti intermediare ntre lumea vie i lumea chimic organic. Organismele vii, cu organizare celular au fost ncadrate n regnuri. ncadrarea fiecrui grup ntr-un anumit regn este controversat. Astfel exist o clasificare cu 5 regnuri. Virusurile i viroizii sunt parazii obligai intracelulari, care se pot multiplica doar ntr-o celul gazd vie. De asemenea transmiterea lor se face exclusiv prin mediatori celulari. Microorganismele, ca forme celulare, pot tri heterotrof parazit pe diferite vieuitoare, producnd boli, heterotrof saprofit pe materii organice sau anorganice sau autotrof. Cunoaterea microorganismelor sub diverse aspecte i n special din punct de vedere al transformrilor pe care acestea le produc asupra substratelor anorganice sau organice pe care se dezvolt este deosebit de important n practic. Nu de mai mic importan sunt microorganismele parazite, care ocup un loc important n patologia agricol, zootehnic i medical. 1.4. Poziia bacteriilor n lumea vie Bacteriile au fost ncadrate, n regnul vegetal, n diviziunea I Protophyta (plante primitive), clasa Schizomycetes (bacterii), dup Bergey, 1957 (citat de Dragan-Bularda i Samuel, 2006), pe baza unor considerante fiziologice i morfologice, deoarece : 1. printre bacterii se ntlnesc specii autotrofe, fotoautotrofe ca i plantele fotoautotrofe sau chimioautotrofe, pe cnd animalele sunt organisme heterotrofe; 2. substanele nutritive ptrund n celula bacterian sub form solubil, ca i n corpul plantelor, cu excepia bacteriilor care pot folosi celuloza etc., care este n prealabil scindat de enzimele extracelulare. Animalele pot ingera hran sub form solid, pe care o diger, o transform n substane solubile, digestia realizndu-se, la majoritatea animalelor, cu un aparat morfologic difereniat. Bacteriile i plantele nu dispun de un aparat digestiv similar. 3. Bacteriile ca i majoritatea plantelor pierd apa i substanele hidrosolubile prin difuzie din interiorul celulei spre exterior, prin peretele celular (ele nu au un aparat excretor specializat). 4. Bacteriile (cu excepia micoplasmelor) au un perete celular care este rigid datorit mucopeptidului. Peretele celular bacterian, ca i peretele celulozic al celulei vegetale, nconjoar membrana citoplasmatic. n cursul plamolizei, celula bacterian i cea vegetal, i pstreaz forma iniial, datorit rigiditii peretelui celular. Celulele animale nu dispun de un perete rigid. 5. Diviziunea bacteriilor, ca i a celulei vegetale, are loc n direcia perpendicular pe axul longitudinal al celulei. La celulele animale, cu unele excepii, diviziunea se produce de-a lungul axului longitudinal. 6. Amidonul, principala substan nutritiv de rezerv a plantelor, se ntlnete i la bacterii. Animalele nu sintetizeaz amidon, dar polizaharidul lor de rezerv, glicogenul (absent la plante) se gsete i n multe bacterii. Avnd n vedere faptul c, ntre procariote i eucariote exist mari deosebiri, ncadrarea bacteriilor n rndul plantelor este arbitrar i nelogic, efectuat doar conform cu aprecierea pretiinific c n lumea vie ar existenta dou categorii de organisme, plantele i animalele, (Dragan-Bularda i Samuel, 2006). Descoperirile cercetrilor din lumea microscopic au evideniat faptul c unele microorganisme nu pot fi clasate n nici unul dintre cele dou regnuri tradiionale. Exist grupuri de microorganisme cu caractere intermediare (de ex. Euglena, Chlamydomonas, Volvox etc.).
354
1. Hogg, 1860 a propus gruparea microorganismelor ntr-un regn nou: Primigenum, denumit ulterior Protoctista. 2. Haekel, 1866, propune gruparea tuturor formelor inferioare de via n regnul denumit Protista, n care au fost ncadrate, n perioada 1894-1904, numai organismele unicelulare sau unicelulare-coloniale. 3. Stanier, 1970, dup criteriul nivelului de organizare biologic, clasific n regnul Protista, organisme unicelulare, cenocitice sau multicelulare, dar nedifereniate, care nu formeaz esuturi, delimitnd: protiste inferioare, care au celule procariote (bacterii i alge albastre) i protiste superioare, care au celule eucariote (alge i ciuperci microscopice, protozoare). 4. Copeland, 1938, Hutchinson, 1967 i Weisz, 1971, clasifica n 4 regnuri: 1. Monera (Mychota), care includ bacteriile propriu-zise i algele albastre-verzi. 2. Protoctista (Protista), incluznd organisme eucariote inferioare cu organizare unicelular, unicelular-colonial, sinciial sau multicelular, fr difereniere celular avansat (algele microscopice, ciupercile microscopice i protozoarele). 3. Plantae (Metaphyta) (Weisz), corespunznd plantelor terestre i acvatice. 4. Animalia (Metazoa) (Weisz), incluznd organisme animale multicelulare. Aceast clasificare are o serie de imperfeciuni legate de organismele simple, i anume, faptul c: regnul Protista reprezint o confederaie de organisme cu diferite niveluri intermediare de organizare, superioare procariotelor, dar inferioare plantelor vasculare i animalelor superioare i este lipsit de unitate, are limite de organizare ale organismelor foarte largi, nu are difereniere clar fa de organismele superioare, este foarte bogat i diferit fa de regnul Monera (Dragan-Bularda i Samuel, 2006). 5. Clasificarea organismelor n sistemul celor 5 regnuri, propus de Wittaker (1969) utilizeaz dou criterii de grupare a organismelor vii (Dragan-Bularda, Samuel, 2006): 1. stabilirea a trei niveluri de organizare: a) procariot, b) eucariot unicelular, c) eucariot multicelular-multinuclear; 2. existena a trei modaliti principale de nuriie: a) nutriia fotosintetic (secundar absorbtiv), caracteristic plantelor, b) nutriia ingestiv, tipic pentru animale), c) nutriia absorbtiv, caracteristic fungilor. Sistemul celor 5 regnuri, elaborat de Wittaker are urmtoarea structur: 1. Regnul MONERA, include organisme unicelulare de tip procariot, corespunznd bacteriilor, organisme cu existen unicelular-solitar sau unicelular colonial (cu excepia actinomicetelor, care au organizare de tip micelian). Modul de nutriie este preponderent absorbtiv, iar metabolismul de tip foto- sau chemotrof. Reproducerea se face prin diviziune asexuat, mai rar prin nmugurire. Sunt nemotile sau motile (prin cili=flageli, alunecare-trre). 2. Regnul PROTISTA, care include organisme primar unicelulare sau unicelular-coloniale de tip eucariot; modul de nutriie este diferit (absorbie, ingestie, fotosintez sau combinaii ale acestor tipuri); reproducerea este de tip diferit incluznd diviziunea asexuat (la nivel haploid) i procese sexuate adevrate cu cariogamie i meioz; sunt nemotile sau motile prin flagel de tip superior.
355
3. Regnul PLANTAE, care include organisme multicelulare cu celule eucariote, ce au perete celular celulozic, prezint frecvent vacuole n citoplasm i pigmeni fotosintetizani n plastide. Modul principal de nutriie este cel fotosintetic, unele linii au devenit absorbtive. Esenial nemotile, triesc ancorate pe un substrat. Prezint difereniere structural care duce la apariia unor procese de fotosintez i la formarea de esuturi specializate (fotosintetice, vasculare, de acoperire). Reproducerea este sexuat, cu cicluri de generaii alternative haploide i diploide. 4. Regnul FUNGI, ce include organisme multicelulare (exceptnd subregnul Gymnomycota), cu nuclei de tip eucariot, dispersai ntr-un sinciiu micelial, acoperit cu perete celular, adesea septat, caracterizate prin absena plastidelor i a pigmenilor fotosintetici. Nutriia este de tip absorbtiv. Diferenierea somatic este absent sau limitat. Prezint cicluri reproductive tipice, cu procese sexuate i asexuate. Miceliile sunt haploide, la cele inferioare i dicariotice la multe forme superioare. 5. Regnul ANIMALIA, ce include organisme multicelulare de tip eucariot, fr perete celular, fr plastide i pigmeni fotosintetizani. Nutriia este de tip ingestiv. La formele superioare, nivelul de organizare i de difereniere tisular depete cu mult celelalte regnuri. 6. Clasificarea organismelor n sistemul celor 5 regnuri dup Lynn Margulis i Karlene Schwartz, 2000. n urma acumulrii de noi date n domeniul ultrastructurii celulelor i a datelor de biologie molecular, Lynn Margulis i Karlene Schwartz, 2000, prezint o nou form de mprire a lumii vii n cele 5 regnuri (DraganBularda i Samuel, 2006), crend dou supraregnuri: 1. Supraregnul Prokarya (Prokaryotae), incluznd organismele lipsite de nucleu adevrat. 2. Supraregnul Eukarya (Eukaryotae), incluznd organismele cu nucleu bine individualizat. 1. SUPRAREGNUL PROKARYA (PROKARYOTAE), cuprinde un singur regn: REGNUL BACTERIA (MONERA), cu dou subregnuri: 1. SUBREGNUL ARCHAEA (arhebacterii-bacterii strvechi), ncadrate n diviziunea Mendosicutes, divizat n dou ncrengturi (filumuri) notate cu: B-1 Euryarchaeota, ce cuprinde bacterii metanogene i halofile B-2 Crenarchaeota, unde intr bacterii termoacidofile. 2. SUBREGNUL EUBACTERIA cuprinde 12 ncrengturi notate cu B3 B14, la care aparin bacterii cu perete celular ce prezint peptidoglican (cu excepia micoplasmelor), i sunt Gram-negative sau Gram-pozitive: B-3 Proteobacteria, B-4 Spirochaetae, B-5 Cyanobacteria, B-6 Saprospirae, B-7 Chloroflexa, B-8 Clorobia, B-9 Aphragmabacteria, B-10 Endospora, B-11 Pirellulae, B-12 Actinobacteria, B-13 Deinococci, B-14 Thermotogae. 2. SUPRAREGNUL EUKARYA (EUKARYOTAE), include organismele cu nucleu bine individualizat, cuprinde 4 regnuri: 1. REGNUL PROTOCTISTA, cu 30 de ncrengturi. 2. REGNUL ANIMALIA, cu 37 de ncrengturi 3. REGNUL FUNGI, cu 3 ncrengturi 4. REGNUL PLANTAE, cu 12 ncrengturi.
356
1.5. RAMURILE MICROBIOLOGIEI n funcie de aplicaiile practice, microbiologia se mparte n numeroase ramuri: - virusologia (inframicrobiologia)-studiaz forme acelulare de organizare ale materiei vii - bacteriologia - studiaz bacteriile, - micologia - studiaz fungii, - imunologia - studiaz reacia gazdei la aciunea unui agent infecios, - microbiologia agricol - studiaz transformrile produse de microorganisme asupra elementelor chimice din sol (microbiologia solului), ct i cu studiul microorganismelor patogene pentru plantele de cultur (fitopatologia) i pentru speciile de animale din zootehnie (microbiologia veterinar). - microbiologia medical - se ocup cu studiul microorganismelor patogene pentru om i combaterea lor. - microbiologia industrial - se ocup cu studiul modificrilor (alterrilor) produse de unele microorganisme saprofite sau utilizarea altora n scopul preparrii diferitelor alimente. - microbiologia acvatic studiaz microorganismele care se dezvolt n ape i acioneaz n productivitatea bazinelor acvatice i interaciunea lor cu celelalte tipuri de organisme vii din acest mediu. 1.6. DEZVOLTAREA MICROBIOLOGIEI CA TIIN Studiul microorganismelor a preocupat oamenii de tiin nc din antichitate. Microbiologia este o tiin nou deoarece microorganismele au putut fi evideniate numai n sec. al VII-lea, o dat cu descoperirea microscopului. Se poate spune c microbiologia s-a dezvoltat ca tiin numai dup ce n optic s-au acumulat o serie de cunotiine care au permis inventarea i perfecionarea microscopului. Astfel, lumea microorganismelor ncepe s fie cunoscut odat cu observaiile fcute de cercettorul amator Antonie van Leeuwenhoek, care a construit primul microscop care mrea de 160 de ori. n Olanda, la 1695, Antonie van Leeuwenhoek, ca pasionat al studiului la microscopul care mrea de 160-300 de ori, a descoperit o lume ntr-o pictur de ap; a examinat apa de ploaie, apa din canalele oraului, infuzia de piper, saliva uman i a descoperit o lume minuscul, format din animalicule, mobile n cmpul microscopic. n saliv a observat mai multe tipuri de bacterii. A efectuat primele desene care demonstreaz existena microorganismelor. Descoperirile sale au fost trimise sub form de epistole (rapoarte), la Royal Society, Londra, i au fost publicate n 1695, n cartea Arcana naturae ope microscopiorum detecta (Tainele naturii descoperite cu microscopul). Perioada morfologic a microbiologiei, a nceput dup descoperirea bacteriilor i protozoarelor de ctre Leeuwenhoek. Savanii au urmrit: evidenierea microorganismelor din medii naturale (ape, soluri, produse alimentare), stabilirea i clasificarea tipurilor morfologice de microorganisme. Savantul suedez Karol Linn, n 1735, nu a putut clasifica micoorganismele, denumindu-le chaos. Dar, nomenclatura binar a speciilor, introdus de Linn, este utilizat n microbiologie. Astfel, antraxul este denumit Bacillus antracis. Perioada fiziologic a microbiologiei este introdus de Louis Pasteur (18221895), care poate fi considerat printele microbiologiei moderne. El a dat o interpretare tiinific fenomenelor produse de microorganisme, a imaginat o serie de tehnici de studiu a acestora i a descoperit o serie de microorganisme. ntre 1850-1890, din raiuni practice, pentru obinerea berii, oetului etc, descoper bacteriile patogene. Solicitat de industriaii francezi pentru problemele alterrii vinurilor i berii, a examinat o pictur de bere nealterat, n care a observat celulele de drojdie sferice i o pictur de bere alterat, n care a observat pe lng celulele sferice de drojdie i celule n form de bastonae-cauza alterrii. Descoperirile lui au revoluionat biologia, medicina, tiinele agricole, industria alimentar. 357
Pasteur a obinut primele vaccinuri (vaccinul antirabic) i a realizat primele vaccinri mpotriva turbrii. A studiat microorganismele care produc boli (antrax-dalac-crbune produs de Bacillus antracis). A folosit pentru studierea microorganismelor, medii nutritive lichide (urina uman, care conine urme de glucide-zaharuri, azot, uree, NH3, sruri minerale, unde bacteriile se pot dezvolta, cresc i produc opalescen). Medicul Robert Koch (1843-1916), bacteriolog, a introdus tehnica colorrii preparatelor microscopice n studiul unor ageni patogeni, descoperind agentul infecios al tuberculozei, a introdus mediile nutritive solidificate, pe baz de agar-agar (polizaharid podus de algele roii), a descris cu entuziasm cele mai gingae forme artistice ale naturii. Alte nume de marc ale microbiologiei sunt Ilia Mecinikov, (1845- 1916) care a pus bazele imunologiei, Paul Ehrlich (1854-1915), Alexander Fleming (1881-1915), care a deschis era antibioticelor i muli alii. n 1875 Martin Mateevici Terekovski a folosit primul experimentul n microbiologie, artnd c n infuzia de fn triesc fiine vii care respir i se nmulesc. Serghei Nicolaevici Vinogradski, studiind microorgasnidsmele din sol, a descoperit chimiosinteza, procesul de sintez a substanelor organice celulare utiliznd energia chimic obinut prin reacii de oxidare: NH3 NO2 NO3 (n cazul bacteriilor nitrificatoare care formeaz nitrai); S SO42- (n cazul bacteriilor sulfoficatoare care formeaz sulfai). n ara noastr bazele microbiologiei au fost puse de Victor Babe (1854-1926), care a studiat bacteriile ce produc boli la om i animale, a studiat boli infecioase ca lepra, tuberculoza, holera, febra tifoid, turbarea. a introdus n tehnica de laborator procedeul de colorare vital, care a permis punerea n eviden a structurii bacteriilor i profilaxia unor boli. A descoperit antibiozacapacitatea unor microorganisme de a lupta mpotriva altora, de a inhiba dezvoltarea altora; i antibioticul, produs al antibiozei. Victor Babe este fondatorul virusologiei n Romnia. Ioan Cantacuzino (1863-1934) a pus bazele imunologiei n ara noastr, fiind organizatorul colii romneti de microbiologie. Traian Svulescu a pus bazele fitopatologiei, iar Dumitru Mooc (1898-1969) a avut contribuii importante n domeniul microbiologiei alimentare. Realizrile microbiologiei actuale au devenit posibile pe baza dezvoltrii fizicii, biologiei i n special a biochimiei. Perioada actual este perioada biologiei i geneticii moleculare n microbiologiei. 1.7. IMPORTANTA MICROORGANISMELOR a. Microorganismele din apele dulci, marine, din heletee au o deosebit importan pentru viaa acestor medii. Astfel, unele microorganisme pot sintetiza substan organic din elemente chimice anorganice participnd la producia primar a bazinelor acvatice. Alte microorganisme sintetizeaz substane organice pornind de la alte tipuri de substane organice mai simple ducnd astfel la fertilizarea apelor i mbogirea lor n nutrieni mai ales azotai. Rolul cel mai important este ns n descompunerea resturilor de plante i animale din care transform substanele organice pn la substane anorganice capabile a fi asimilate de plantele verzi n producia primar. n felul acesta microorgnaismele acvatice contribuie la reciclarea elementelor chimice necesare vieii n bazinele respective (Carmen Nicolescu, 2002).
358
b. Microorganismele din sol au un rol primordial n fertilitatea solului, transformnd substanele organice n substane anorganice. n absena lor, s-ar acumula n sol resturile de plante i animale i treptat s-ar epuiza rezervele de sruri minerale i bioxid de carbon, iar viaa nu ar mai fi posibil. Microorganismele joac un anumit rol i n descompunerea rocilor, n formarea sulfailor i nitrailor, unele fixeaz azotul atmosferic, iar altele produc bioxid de carbon, att de necesar n producia primar a plantelor superioare. n concluzie, putem spune c microorganismele stabilesc echilibrul ntre substanele organice i anorganice, ntre materia vie i cea nevie. 1.8. ACTIVITATEA SPECIFIC A MICROORGANISMELOR Microorganimele sunt rspndite n natur pretutindeni, ele avnd o plasticitate i adaptabilitate mai mare dect orice alt organism viu. Ele au toate dimensiuni microscopice, adic nu pot fi observate cu ochiul liber dect prin intermediul miroscopului. Observaia lor microscopic este ns destul de anevoioas. Pentru a uura cunoaterea lor se recurge la observaia indirect, fie prin observarea activitii lor (a transformrilor induse de ctre ele n mediul de via), fie prin izolare i cultivare artificial n laborator. Activitatea microorganismelor se concretizeaz n transformarea mediului lor de via. Este ceea ce se numete degradarea substratului. n cursul degradrii substratului, microorganismele, prin activitatea lor vital, induc o serie de transformri biochimice ale acestuia. Se folosete termenul de degradare a substratului ntruct microorganismele folosesc substane complexe din substrat pe care le transform n substane mai simple. Toat activitatea microorganismelor are la baz transformri (reacii) biochimice. Pentru ca o reacie biochimic s aibe loc, n afar de condiii de mediu favorabile (temperatur, pH, prezena sau absena de oxigen i substrat), are nevoie de catalizatori, reprezentai de enzime secretate de ctre microorganisme. Deci toate reaciile de transformare a substratelor prin intermediul microorganismelor sunt reacii enzimatice care au loc n interiorul celulei lor sau n mediu sub aciunea enzimelor secretate pe substrat. Activitatea microorganismelor se desfoar, dup cum am vzut, pretutindeni n natur. Pentru activitatea uman este important att aceast activitate natural a microorganismelor, cum este cazul descompunerii materiilor organice din sol i ape (Nicolescu, 2002), putrezirea produselor naturale (Drgan-Bularda, Kiss, 1986; Eliade, Ghinea, tefanic, 1975; Kiss i colab., 1991; Papacostea P. 1976; Ru, Crstea, 1983; tefanic, Sndoiu, Gheorghi, 2006), etc., ct i activitatea lor n cadrul unor amenajri artificiale, n incinte industriale (Marinescu, Drgnescu,1990; Mooc, 1962), n domeniul medical (Schffler, Altekrger, 1994) i agricol (Raicu, Baciu, 1978; Bobe, 1983; Hodian, Pop, 1976). n natur, microorganismele triesc n biocenoze complexe mpreun cu alte microorganisme ct i cu alte tipuri de vieuitoare, ntre ele existnd interrelaii deosebit de complexe a cror cunoatere este important pentru a putea ghida aceste procese n funcie de interesul practic al omului. Creterea microorganismelor n laborator nu reprezint un scop n sine dect n activitatea de cercetare. n laborator microorganismele sunt izolate i purificate din natur pentru a fi folosite n activitatea practic (Drgan-Bularda, Kiss, 1986; Drgan-Bularda, Samuel, 2006; DrganBularda, 2000). 359
2. BACTERIILE
2.1. Rspndire n natur. Bacteriile sunt microorganisme unicelulare, cu organizare celular procariot, caracterizat prin faptul c nu au un nucleu adevrat, ci doar un echivalent al acestuia, fr membran nuclear, numit nucleoid, format dintr-un singur cromozom, alctuit din ADN bicatenar circular. Din punct de vedere genetic sunt haploide. Reproducerea este asexuat. n natur, sunt rspndite n toate mediile de via, ocupnd toate habitatele naturale. Marea lor rspndire se datorete prolificitii i plasticitii lor metabolice, care a permis adaptarea lor rapid la condiiile variate de mediu. Rezervorul natural de bacterii este solul de unde ele sunt rspndite i n celelalte medii de via, apa i aerul. Marea varietate de bacterii este determinat de echipamentul lor enzimatic i de proprietile structurale. 2.2. Morfologia bacteriilor. Caracterele morfologice se refer la aspectul exterior al bacteriilor. Fiind organisme unicelulare individul este reprezentat de o singur celul, morfologia referindu-se la aspectele externe ale celulei i anume la form i mrime. Mrimea bacteriilor ester de 0,5-20. Cel mai ftecvent ele au 1-5, dar exist i bacterii de 25 (sulfobacteriile). Mrimea este controlat genetic, dar influenat de factorii de mediu. Mrimea bacteriilor permite calcularea greutii lor specifice, a suprafeei celulare, a volumului i a masei, mrimi care sunt utilizate frecvent n microbiologia acvatic n vederea stabilirii aportului microbiotei la circuitul materiei n bazinele acvatice. Greutatea specific oscileaz la bacteriile acvatice ntre 1,07-1,30, fiind dependent de compoziia lor chimic. Suprafaa celular poate varia ntre 0,25 - 33 2. Volumul celulei este dependent de specie. Pentru calcularea biomasei celulare se pot folosi datele din tabelul alturat. Valorile corespunztoare ale biomasei n funcie de volumul celulelor bacteriene (dupa Dgan-Bularda, Samuel, 2006). Parametru Dupa Zobell 1963 Dup Kuzneov i Romanenko 1966 Pentru ape oligotrofe Pentru ape eutrofe 3 Volum mediu 0,2 0,53 -10 Masa umeda 2 . 10 mg Masa uscata 4 . 10-11 mg 7,5 . 10-11 mg Continut de C 2 . 10-11 mg 3,75 . 10-11 mg Forma celulei bacteriene Forma celulelor prezint cteva tipuri de baz de la care provin numeroase forme derivate. Form de coc - perfect sferic (genul Micrococcus), forma lanceolat (microbacterii), reniform (pneumococii), oval (enterococii). n urma diviziunii prin sciziune binar a cocului ntr-un singur plan se formeaz formele derivate de diplococi sau streptococi (lanuri de coci), prin sciziunea n 2 planuri perpendiculare tetrada, prin sciziunea n 3 planuri sarcina (pachete de 8 coci), prin sciziunea neordonat stafilococi. Form de bacil - forma cilindric (de bastona). Celulele pot fi drepte sau uor curbate, cu capete drepte (Exp. Escherichia coli) sau rotunjite (Exp. Bacillus anthracis). Forme derivate sunt i cele de suveic, de mciuc sau de picot, care apar mai ales prin deformarea celulelor care conin spor.
360
Forme derivate de bacterii cilindrice sunt: Forma filamentoas - caracteristic bacteriilor care triesc n ape (Exp. bacterii sulfuroase, feruginoase). Ele sunt formate din celule cilindrice puse cap la cap nvelite ntr-o teac comun n care se acumuleaz fier sau mangan. Forma pedunculat - capul este cilindric, iar pedunculul este de cteva ori mai lung i prevzut n capt cu o ventuz de prindere de substrat (Exp. actinomicete din sol Caulobacter). Forma spiralat sau elicoidal prezint diferite variante: vibrionul - form de spir incomplet (de virgul). spiril - form cu mai multe spire rigide. spirochet form cu mai multe spire flexibile, care se pot strnge i relaxa (Exp. Leptospira). Form poliedric - (Exp. Archebacteriile). Form de trihom. Trohomul este un grup de celule sub forma unui filament multicelular, uniseriat, rezultat din diviziune (Exp. Leucothrix, Beggiatoa, Sphaerotilus). Form prostecat. Prosteca este un apendice semirigid situat n continuarea unei celule procariote cu care aceasta se fixeaz de substrat. Numeroase bacterii nu au o form caracteristic, aceasta putnd fi variabil n funcie de condiiile de mediu sau de cultur, de vrsta culturii i de temperatur.
361
2. stratul specific situat spre exterior, este difereniat pe grupe de bacterii i confer acestora proprieti tinctoriale (de colorare) diferite (Exp. coloraia Gram). Comportamentul difereniat la colorare se explic prin structura diferit a acestui strat. Bacteriile Gram pozitive (denumite astfel dup comportarea lor n urma aplicrii tehnicii de colorare Gram, colorndu-se n violet nchis ), au acest strat format din peptidoglicani, repartizat n mai multe substraturi, cu grosimea de 0,02-0,08 . n structura peptidoglicanului mai exist proteine, alte polizaharide i substane specifice - acizii teichoici care asigur o sarcin negativ la suprafaa bacteriilor, datorit gruprilor fosfat pe care le conin. Acizii teichoici sunt polimeri lungi, flexibili formai din poliglicerolfosfat i polirivitolfosfat. Aceast proprietate este important n separarea bacteriilor prin filtrare, cnd se folosesc filtre cu sarcin pozitiv. Bacteriile Gram negative (care se coloreaz n rou) au stratul specific subire, de 10 nm, format dintr-un singur substrat, dar care are o structur mai complex. n compoziia sa intr un macropolimer de natur lipozaharidic format din fosfolipide i lipoproteine. El formeaz un complex peptodoglicanlipoprotein. Dintre componenii stratului extern cel mai important este lipopolizaharidul, care este un constituent termostabil, care confer acestor bacterii i caracterele endotoxice i de patogenitate.
Detalii privind structura peretelui celular (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). Peretele celular Este formaiunea rigid a celulei care nconjoar membrana plasmatic, fiind bine definit structural. El este acoperit la unele specii de o capsul sau un strat mucos pericelular, iar la bacteriile ciliate i piliate este strbtut de cili i respectiv de pili. Datorit indicelui de refracie sczut peretele celular este invizibil la celulele vii examinate la microscopul fotonic (excepie la Beggiatoa mirabilis). Punerea lui n eviden a fost posibil prin colorare selectiv, prin examinarea la microscopul electronic, prin metoda plasmolizei (peretele celular se deprteaz de citoplasm). Peretele celular se studiaz pe preparate obinute prin dezintegrri celulare prin ultrasonare sau agitare cu perle de sticl, cu ajutorul tehnicii de microdisecie sau prin provocarea unui oc osmotic (inducia de plasmoliz sau plasmoptiz) ori a autolizei celulare. Examinat la microscopul electronic , peretele celular izolat are aspectul unui sac gol, care conserv forma bacteriei din care provine i are o constituie asemntoare ochiurilor unei plase, care apare ca fiind format din fascicule de fibre paralele ce se ncrucieaz. Grosimea lui variaz ntre 15 i 35 nm, n mod excepional 80 nm la Lactobacillus acidophilus. Este mai subire la celulele tinere dect la celulele btrne. n funcie de prezena i particularitile de structur ale peretelui celular s-au propus 4 diviziuni n cadrul supraregnului Prokarya, regnul Bacteria: 1. Firmicutes (firmus=lat, tare; cutis=piele, nveli), corespunznd bacteriilor Gram-pozitive, cu perete celular gros, lipsit ns de membrana extern. 2. Gracilicutes (gracilis=lat. subire), corespunznd bacteriilor Gram-negative, cu perete celular n mod obinuit subire, avnd n structura sa membran extern. 3. Tenericutes, corespunznd ncrengturii Aphragmabacteria (Micoplasme), care cuprinde bacterii Gram-negative fr perete celular uniform. 4. Mendosicutes (mendos=nesigur, incert), corespunznd subregnului Archaea (gr. archae=vechi), ce cuprinde arhebacteriile (bacterii metanogene, halofile i termoacidofile). Mai pot fi remarcate particulariti de structur i de natur chimic ale peretelui celular la bacteriile acidorezistente , la care se ntlnesc mai multe tipuri de lipide complexe. n funcie de structur i compoziie chimic, pereii celulari bacterieni aparin la 3categorii, care coincid cu modul de colorare Gram-pozitiv, Gram-negativ, acidorezistent. Pereii celulari bacterieni din cele 3 categorii au drept constituent comun peptidoglicanul, dar se deosebesc n ceea ce privete raportul, prezena, natura, cantitatea i aranjamentul structural al proteinelor, polizaharidelor i lipidelor. Peretele celular al bacteriilor Gram-pozitive Apare la microscopul electronic ca un strat unic. Componentul principal este peptidoglicanul, reprezentnd 80-90% din greutatea uscat.
362
Compozitia chimic a principalelor tipuri de perete celular la bacterii (dup Willet, 1977 i Drgan-Bularda, Samuel, 2006). Bacterii Bacterii Bacterii Gram-pozitive Gram-negative acidorezistente Peptidoglican Peptidoglican Peptidoglican 0,02-0,06 m (multistrat) 0,01 m (monostrat) 0,01 m (monostrat ?) Proteine Lipoproteine Lipoproteine Acizi teichoici Lipopolizaharide Acid micolic Acizi teichuronici Fosfolipide Arabinogalactani Polizaharide Polizaharide Ceara D. Factorul cord. Sulfolipide. Micozide. Acesta apare foarte net dup colorare cu sruri ale metalelor grele i poate fi degradat dup tratare cu lizozim. Sensibilitatea la lizozim este mai mare n faza de cretere logaritmic (stratul peptidoglicanic puin dezvoltat) dect n cea staionar n care sinteza acestuia continu pentru a produce perei mai groi. Pe lng peptidoglican, peretele celular al bacteriilor Gram-pozitive mai conine proteine i polizaharide care includ acizii teichoici, teichuronici, neteichoici i polizaharide neutre (dup DraganBularda i Samuel A. D, 2006). Peptidoglicanul (sin. murein, prin analogie cu denumirea de protein, de la lat. murus=perete ), numit i glicopeptid, mucopeptid, glucozaminopeptid, mucocomplex, este componentul parietal caracteristic i comun tuturor bacteriilor, cu excepia micoplasmelor, a formelor L i a bacteriilor halofile extreme. Este un heteropolimer alctuit dintr-o component glicanic i alta peptidic. Componenta glicanic, foarte uniform, are structura unor lanuri lineare formate din resturile alternante a dou N-acetilhexozamine: N-acetilglucozamina i acidul N-acetilmuramic , legate ntre ele prin legturi -1,4. Gruprile carboxil (COOH) ale resturilor de acid N-acetilmuramic furnizeaz punctele de legare ale lanurilor peptidice (dup DraganBularda i Samuel A. D, 2006). Componenta peptidic conine un tetrapeptid cu structura L-alanil-D-glutamil-L-R3-D-alanin, n care restul L-R3 difer de la o bacterie la alta. L-R3 poate fi: acidul L-glutamic, L-lizina, L-ornitina, Lhidroxilizina, L-DAP (diaminopimelat). Peptidele de la un lan polizaharidic se leag de peptidul de la lanul adiacent. Legturile se realizeaz fie n mod direct (peptid-peptid), fie prin intermediul unor puni de natur peptidic (peptid-punte peptidic-peptid). Astfel, la Bacillus subtilis unele peptide se leag ntre ele prin intermediul unui rest de D-alanin. La Staph. aureus se formeaz puni interpeptidice din 5 resturi de glicin. Datorit legturilor interpeptidice, peptidoglicanul se prezint ca o molecul unic, gigant i rigid, care formeaz n jurul protoplastului bacterian o reea ca o plac rigid, cu ochiuri mici. La bacteriile Gram-pozitive , molecula gigant, cu o foarte mare variabilitate de compoziie chimic, are o structur de reea tridimensional, deoarece legturile ncruciate (cross - linked) se fac n dou planuri ale spaiului (Dragan-Bularda i Samuel A. D, 2006). Peptidoglicanul poate fi atacat de lizozim i de penicilin. Lizozimul atac specific legturile glicozidice -1,4 dintre acidul muramic (atomul de carbon 1) i N-acetilglucozamin (resturile glicozaminil, atomul de carbon 4), determinnd liza celulelor n repaus. Lizozimul (o carbohidraz), descoperit de Fleming, este o enzim murolitic care se gsete n organismul uman i animal (n lacrimi, saliv, mucus nazal, snge, ficat, rinichi, lapte de om i lipsete n laptele de vac). Industrial se obine din ou. Enzime asemntoare lizozimului se gsesc i n unii bacteriofagi, n mixobacterii, streptomicete i plante. Lizozimul dei este o enzim extracelular atac componenta glicanic n zona central a macromoleculei (fiind deci o endo-acetilmuramidaz). Penicilina, care inhib treapta terminal n biosinteza mureinei (formarea punilor peptidice) lizeaz numai celulele care cresc rapid. Acizii teichoici (teichos=grec. zid, perete) sunt molecule polimere lungi i flexibile, formate din 1,5poli-ribitolfosfat i 1,3-poli-glicerolfosfat) localizate exclusiv n peretele celular, membrana plasmatic i straturile capsulare ale bacteriilor. Sunt prezeni numai la bacteriile Gram-pozitive i aparin la 3 categorii distincte: 1. acizi teichoici parietali, 2. acizi teichuronici i 3. acizi teichoici membranari. Acizii teichoici parietali, de la suprafaa celulei, sunt legai covalent de stratul peptidoglicanic al peretelui celular. Ei sunt modificai la diferite bacterii prin adiie la unitile poliol de D-alanin, D-lizin, glucoz, galactoz, N-acetilglucozamin, care le asigur capacitatea de antigene de suprafa. Ei nu se gsesc la toate bacteriile Gram-pozitive, iar formarea lor este dependent de condiiile de cultivare. Acizii teichuronici, alctuii din N-acetilglucozamin i acid glucuronic, legai de uniti dizaharidice repetate, sunt i ei legai de peretele celular i pot fi gsii la aceeai bacterie asociai cu acizii teichoici. Acizii teichoici membranari sau lipoteichoici sunt legai covalent de fraciunea glicolipidic a membranei plasmatice i formeaz o reea ntre aceasta i peretele celular. Ei sunt constitueni caracteristici pentru bacteriile Gram-pozitive, dect cei teichoici, sinteza lor nefiind dependent de condiiile de cretere.
363
Ei sunt formai din 25-30 resturi de glicerolfosfat (legturi 1,3-fosfodiester) substituite diferit cu grupri glicozil i D-alanil, legate de o component glicolipidic, ngropat n stratul extern al membranei plasmatice i considerat identic cu glicolipidul liber al acestuia. Acizii teichoici confer, n general, o serie de proprieti bacteriilor Gram-pozitive i anume: a. un rol marcant n meninerea unei concentraii de ioni metalici, n particular Mg2+ ; b. au un rol arhitectural, contribuind la modificarea structurii tridimensionale a peptidoglicanului de care sunt legai; c. la unele specii, ca de exemplu, la Streptococcus pyogenes, acizii teichoici i teichuronici joac rol de determinani de patogenitate (inhib fagocitoza) i acioneaz ca determinani ai reaciilor de hipersensibilitate ; d. leag i controleaz activitatea autolizinelor cu rol n cretere i diviziunea peretelui celular; e. acioneaz ca receptori de fagi i de colicine (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). PERETELE CELULAR AL BACTERIILOR GRAM-NEGATIVE Are o structur mai complex, cu toate c este mai subire , aprnd sub form de triplustrat. Este alctuit din: 1. complexul peptidogligan-lipoprotein; 2. membrana extern a peretelui celular. Complexul peptidoglican-lipoprotein este situat n zona median a peretelui, avnd o grosime de 1,5-3 nm, fiind n acelai timp electrodens. El poate fi ndeprtat cu lizozim. Este legat de membrana plasmatic prin intermediul unor peptidoglicani i este lipit de ea, din cauza presiunii de turgor a celulei vii (care mpinge membrana plasmatic maleabil pe stratul neelastic peptidoglicanic). De asemenea, este legat covalent de stratul membranei externe prin intermediul unor molecule globulare de lipoproteine , situate pe suprafaa sa extern, care strbat spaiul periplasmic. Acest complex reprezint circa 2,4-10% din greutatea peretelui celular i contine acid Nacetilmuramic, N-acetilglucozamin, 2,6-diaminopimelat, alanin i glutamat n proportii molare de 1:1:1:2:1 (compoziie chimic foarte asemntoare la toate bacteriile Gram-negative). Membrana extern este o structur foarte caracteristic pentru bacteriile Gram-negative. Este situat la exterior fa de stratul peptidoglicanic i membrana plasmatic (membrana intern). Are o grosime de 6-20 nm, putnd fi ndeprtat cu detergeni 2%, fenol 45% sau EDTA 30-60%. Este alctuit din fosfolipide (35%), proteine (15%) i lipopolizaharide (50%) (Dragan-Bularda, Samuel 2006). S-a lansat ipoteza c fosfolipidele ar forma un strat continuu intern, pe cnd lipopolizaharidele ar fi la exterior (ar fi asociate cu stratul extern). Dintre constituenii membranei externe, cel mai mult studiat este lipopolizaharidul, constituent termostabil, care determin activitatea endotoxic, patogenitatea, unele proprieti antigenice i sensibilitatea la fagi. Lipopolizaharidele sunt alctuite, n general, dintr-o component lipidic (lipidul A) legat covalent de un oligozaharid (portiunea central R), care la rndul lui este legat de un polizaharid. Structura lipidului A, ca i cea a poriunii R, sunt relativ invariabile, avnd constitueni relativ similari la diferite specii. Polizaharidul este n schimb variabil ca structur i compoziie chimic, reprezentnd o bun parte din determinanii specificitii antigenice ai celulei, formnd antigenul O (somatic) sau polizaharidul O. Lipopolizaharidele sunt rspunztoare de multe dintre proprietile biologice ale bacteriilor Gramnegative. Specificitatea serologic a celulelor bacteriene este conferit, n principal, de poriunea variabil polizaharidic, care corespunde antigenului O al acestor bacterii. Acest antigen acioneaz i ca situs specific receptor pentru anumii fagi. Lipidul A este rspunztor de proprietile endotoxice ale lipopolizaharidului i confer endotoxinelor bacteriene caracterul de termostabilitate (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006).
Semnificatia biologic a peretelui celular Peretele celular reprezint sistemul de susinere mecanic. Datorit rigiditii sale determin forma caracteristic a celulelor. Asigur protecia fa de ocul osmotic. Presiunea osmotic intern este de circa 5-6 atm la E. coli , de circa 20-30 atm la Staph. aureus. Fr suportul rigid al peretelui celular, membrana plasmatic nu ar putea rezista acestei presiuni interne, neputnd asigura protejarea protoplastului. Peretele celular particip la procesul de cretere i diviziune celular, urmnd membrana citoplasmatic n formarea septurilor transversale, separnd cele dou celule fiice dup replicarea cromosomului bacterian. Unii constitueni parietali determin o anumit specificitate, servind ca receptori pentru bacteriofagi.
364
Unii constitueni parietali joac rol n conjugare (recunoatere a celulelor apte de conjugare) putnd s acioneze ca factori antigenici. Peretele celular conine enzime autolitice capabile s atace structura glicopeptidului, aceste enzime devenind active n momentul sporulrii, n cel al germinrii, precum i n biosinteza peretelui celular, respectiv n reglarea acestui proces. La bacteriile Gram-negative, membrana extern joac rol de barier impermeabil pentru moleculele hidrofobe. ndeplinete functia de transport pasiv (de sit molecular) permind trecerea unor oligopeptide, oligozaharide, a unor substante hidrofobe cu o greutate molecular de circa 700 dal. n cazul transportului pasiv intervin molecule proteice transmembranare (porine) care formeaz canale moleculare prin membrana extern. Membrana extern a peretelui celular reine n spaiul periplasmic enzimele degradative sintetizate n celul, dup ce au traverse membrana plasmatic, precum i o gam larg de molecule nutritive. Astfel, prin aceast funcie, activitile enzimatice au loc n afara membranei plasmatice (protejnd constituentii citoplasmatici), iar degradarea moleculelor mari la produi simpli (monomeri) are loc n apropierea proteinelor de legare i a permeazelor specifice care permit transportul selectiv n celul a unor molecule mai mari de 700 dal. Tot membrana extern este sediul unor sisteme de transport specifice (de ex. vitamina B12, maltoza, maltodextrinele, ionii ferici i nucleozide). Membrana extern este implicat n nglobarea unor bacteriocine i n adsorbia unor fagi. Receptorul pentru fagul lambda () la E. coli , este o protein cu GM de 55.000 dal, este localizat exclusiv n membrana extern i este implicat i n transportul maltozei. Lipopolizaharidele membranei externe a peretelui celular poart un mare numr de determinani antigenici (antigene somatice). La Salmonella s-au descris 1000 de serotipuri. Cu toat rigiditatea sa, peretele celular bacterian posed i un anumit grad de elasticitate, observat mai bine la bacteriile motile (cnd acestea ntlnesc un obstacol, celula se poate deforma uor pentru a reveni apoi la forma iniial). O alt nsuire a peretelui celular este ductibilitatea, care const n posibilitatea corpului bacterian de a suferi uoare ntinderi sau tensiuni fr s se rup (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). PROTOPLASTUL
Protoplastul reprezint ansamblul structurilor celulare rmase dintr-o bacterie Gram - pozitiv dup ndeprtarea integral a peretelui celular sub actiunea lizozimului. mbrcat n membrana citoplasmatic protoplastul se menine n medii izotonice sau hipertonice ca formaiune aproximativ sferic, pstrnd proprietile i activitile vitale ale celulei din care provine i anume: respiraia, sinteza de proteine i de acizi nucleici, viabilitatea n culturi, etc. Protoplastul nu mai este capabil de a reface prin sintez peretele celular, dac acesta a fost complet ndeprtat. Funcia de barier osmotic ndeplinit de membrana citoplasmatic este mai labil n lipsa peretelui celular rigid i, drept consecin, n medii hipotonice protoplastul se lizeaz. Ar fi posibil ca formaiuni similare protoplatilor s se gseasc i n condiii naturale, la periferia coloniilor btrne, de exemplu n lacuri, unde ar putea supravieui, cu toat fragilitatea lor, n anumite condiii (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). La bacteriile Gram-negative , peretele celular nu poate fi ndeprtat complet prin tratare cu lizozim, ci doar i pierde din rezisten. n medii hipotonice, prin tratare cu lizozim, celula se lizeaz, iar n medii hipertonice se transform n sferoplast, corp sferic echivalent unui protoplast, dar nconjurat de constituenii peretelui care au rezistat la aciunea lizozimului. Protoplatii aparinnd unor specii diferite de bacterii (de ex. mutante de Bacillus megaterium i Bacillus subtilis) fuzioneaz n prezena substantelor cu rol de ageni de fuzionare, rezultnd bacterii bi- sau multinucleate. Acestea, n cursul reversiei la forma bacilar (prin refacerea peretelui celular), duc la apariia unor bacterii cu genotip haploid modificat prin recombinare genetic cu caractere provenind de la cele dou bacterii originare (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006).
365
SPAIUL PERIPLASMIC Spaiul periplasmic sau zona periplasmic este un compartiment ntlnit numai la bacteriile Gram-negative, delimitat spre interior de membrana citoplasmatic, iar spre exterior de un strat care acioneaz ca o sit molecular, corespunznd membranei externe a peretelui celular (Mitchell, 1961 citat de Dgan-Bularda M., Samuel Alina Dora, 2006). Deci, spaiul periplasmic i complexul peptidoglican-lipoprotein ocup aceeai zon a peretelui celular, n care primul adpostete constituenii periplasmatici, iar cellalt susine i ntrete nveliurile celulei. La E. coli spaiul periplasmic conine fosfataz alcalin, acid hexozofosfataz, fosfodiesteraz ciclic i numeroase enzime hidrolitice, RN-aze, DN-aze, penicilinaze etc. Spaiul periplasmic conine numeroase enzime implicate n nutriie. Spaiul periplasmic conine o serie de proteine specifice, neenzimatice, proteine de legare, care leag specific anumite substane (zaharuri, aminoacizi, ioni anorganici) transportndu-le pn la nivelul proteinelor de transport legate de membran. Aceste proteine pot fi eliberate uor din celule, prin oc osmotic. Cu ajutorul anticorpilor cuplai cu feritin s-a demonstrat c proteinele spaiului periplasmic sunt rspndite difuz sau concentrate n bonete polare, n zone n care acest spaiu este mrit (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). Semnificaia biologic a spaiului periplasmic. Membrana extern a peretelui celular las s treac n regiunea periplasmatic numeroase substraturi hidrofile (tetra- i pentameri de aminoacizi, dimeri i trimeri de carbohidrai). Funcia principal a enzimelor periplasmice (fosfataze, sulfataze, amidaze etc.) este de a pregti chimic substanele care difuzeaz prin membrana extern pentru trecerea lor prin membrana plasmatic n citoplasm. Prin acest mecanism, enzimele degradative (hidrolitice) acioneaz pe o larg varietate de substraturi ntlnite n natur de bacteriile Gram-negative, care difuzeaz pn n aceast zon a peretelui celular unde sunt convertite n molecule transportabile n celul, imediat accesibile proteinelor de legare i permeazelor. Prezena enzimelor degradative n asociere cu peretele celular face ca produii rezultai din aciunea lor, n imediata apropiere a permeazelor, s nu se piard n mediu i s fie imediat preluai de sistemele de transport i folosii n metabolism, conferind astfel bacteriilor Gram-negative un deosebit avantaj biologic. De aceea, bacteriile adaptate la viaa n mri, ruri, lacuri etc. sunt n majoritatea lor Gram-negative (Costerton i colab., 1974, dup DrganBularda, Samuel, 2006). Spre deosebire de bacteriile Gram-negative, cele Gram-pozitive elibereaz cea mai mare parte din enzimele lor extracelular, n mediu. Acest mecanism este avantajos pentru bacteriile care triesc n condiii de mare concentraie de substrat i de mare densitate populaional, ntruct produii rezultai din activitatea enzimelor extracelulare, neasociai cu peretele celular, sunt accesibili tuturor celulelor aflate n vecintatea locului lor de producere. Unele proteine periplasmice (de ex. citocromii periplasmatici) ndeplinesc i funcia de purttori, ntre enzimele legate de membran i substraturi. Proteinele de legare au rol i n chimiotaxie, respectiv n motilitate (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006).
366
MEMBRANA CITOPLASMATIC, acoper de jur mprejur citoplasma celular. Se mai numete i membran plasmatic sau membran celular. Ea acoper citoplasma bacterian separnd-o de suprafaa intern a peretelui celular, de care este strns lipit, datorit diferenei de presiune osmotic ntre coninutul celular i mediul extern. Membran plasmatic poate fi strns ataat de peretele celular (la bacteriile Gram pozitive) sau detaat la o mic distan de peretele celular (la bacteriile Gram negative). La microscopul electronic apare ca o formaiune triplu stratificat. Este alctuit din 75% fosfolipide care formeaz o reea macromolecular n care se gsesc prinse 25% proteine globulare.
Membrana plasmatic poate fi evideniat la microscopul fotonic prin colorri selective (cu albastru Victoria) sau prin examinarea bacteriilor vii n cmp ntunecat cnd apare ca o linie net, luminoas. La microscopul electronic, n seciuni ultrafine, apare ca o formaiune triplu stratificat, cu o grosime de 7,5-10 nm, alctuit din dou straturi ntunecate care separ un strat mai clar. Robertson a numit aceast structur unitate de membran. Modelul de structur acceptat este modelul mozaicului fluid (Singer-Nicolson, 1972). Acesta propune o aezare caracteristic a componentelor specifice ale membranei reprezentate de lipide , proteine i glucide , n acord cu proprietile lor, satisfcnd exigenele termodinamice i furniznd o explicaie satisfctoare a proprietilor generale ale biomembranelor (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). Dup acest model, fosfolipidele formeaz un film fluid, discontinuu, n care plutesc proteinele globulare, n timp ce glucidele interacioneaz fie cu unele, fie cu altele. Lipidele sunt reprezentate de fosfolipide cu structur complex avnd o extremitate polar hidrofil (hidrosolubil n stare izolat), alctuit dintr-o grupare fosfat (PO43-) i ali constitueni, legai printr-o molecul de glicerol i alt extremitate polar hidrofob (insolubil n ap), reprezentat de doi acizi grai. n contact cu apa, gruprile polare poart de regul sarcini electrice. Deoarece cele dou extremiti ale moleculelor lipidice au solubiliti incompatibile, n suspensie apoas ele se organizeaz spontan pentru a forma un dublu strat de molecule, discontinuu i fluid, vscos, n care moleculele sunt aranjate n aa fel, nct capetele ionice polare (hidrofile) sunt expuse spre soluia apoas de ambele pri ale membranei, iar lanurile nepolare (hidrofobe) ale acizilor grai sunt orientate n direcie opus contactului cu apa. n acest fel, cele dou monostraturi de molecule formeaz mpreun dou straturi hidrofile periferice separate de poriunea central hidrofob. Structura de dublu strat fosfolipidic explic proprietile de permeabilitate ale membranei. Acest strat este impermeabil fa de particulele ncrcate i fa de ioni i este uor penetrabil de molecule liposolubile. Fiecare dublu strat este un lichid bidimensional n care moleculele lipidice difuzeaz lateral, schimbndu-i pozitia pn la un milion de ori ntr-o secund. n schimb, deplasarea unei molecule de pe un monostrat pe altul (tranziia flip-flop) se face foarte rar, ceea ce permite meninerea compoziiei membranei i a structurii ei caracteristice. Dublul strat fosfolipidic trebuie s fie suficient de fluid pentru a permite o micare liber a proteinelor membranare implicate n procesele de transport activ. Gradul de fluiditate depinde de natura lanurilor laterale ale acizilor grai din moleculele fosfolipidice (n special cu lanuri laterale nesaturate). Fosfolipidele formeaz matricea structural a membranei i sunt rspunztoare de integritatea structural a acesteia. Prin structura caracteristic a dublului strat, ele confer membranei permeabilitatea la cele mai multe molecule hidrosolubile (care sunt insolubile n regiunea uleioas a prii de mijloc a membranei) (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). Proteinele , n funcie de poziia lor n structura membranei, sunt de dou tipuri: proteine integrate i proteine de suprafa. Proteinele integrate (intrinsece, integral proteins) sunt, n general, insolubile n ap i nu pot fi ndeprtate fr ruperea dublului strat lipidic. Ele au o orientare fix, fiind ndreptate n aceeai direcie (cele aparintoare aceluiai tip). Cele mai multe strbat toat grosimea membranei celulare (proteine transmembranare ), dar unele pot fi expuse fie numai pe suprafaa intern (citoplasmatic), fie spre suprafaa extern. Regiunile lor dirijate spre interior sau/i spre exterior au caracter hidrofil. Proteinele de suprafa (periferice, extrinsece) nu sunt inserate n dublul strat lipidic, ele fiind n general hidrosolubile i situate fie pe suprafaa intern, fie pe cea extern, de regul legate de proteinele integrate. Din punct de vedere funcional, proteinele de membran pot fi: 1. proteine enzimatice care realizeaz biosinteza nveliurilor celulare (membrana plasmatic, polimerii parietali i extraparietali); 2. proteine de transport care asigur transferul moleculelor solubile din mediu n celul i invers; 3. citocromi i alte proteine aparinnd sistemului transportor de electroni; 4. proteine cu activitate adenozintrifosfatazic (ATP-azic); 5. proteine implicate n turnover-ul lipidelor i al proteinelor membranare (fosfolipaze, proteaze, peptidaze). Glucidele reprezint componentul cel mai slab reprezentat n structura membranei. Pot fi glicoproteine (polizaharide legate de proteine) sau glicolipide (polizaharide ce interacioneaz cu anumite lipide) (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006).
367
Semnificaia biologic a membranei plasmatice. Dup Drgan-Bularda i Samuel, 2006, membrana plasmatic reprezint singura suprastructur citoplasmatic permanent a celulei bacteriene i are rolul de a delimita spaiul intracelular.
Ea formeaz un compartiment nchis, far s reprezinte o grani fizic inert a celulei, ci doar o structur funcional capabil s asigure o deosebire net ntre interiorul i exteriorul celulei. Ea are o asimetrie funcional, n sensul c suprafaa intern funcioneaz diferit de cea extern. Aceast asimetrie functional are la baz o asimetrie de structur molecular manifestat pe mai multe ci: a. cele dou monostraturi lipidice includ proporii variate ale diferitelor tipuri de molecule lipidice; b. carbohidraii sunt prezeni numai pe suprafaa extern a membranei, n timp ce proteinele periferice sunt situate aproape ntotdeauna pe faa intern; c. fiecare tip de protein integrat are o orientare definit, care este aceeai pentru fiecare molecul de acelai tip. Membrana plasmatic acioneaz ca o barier osmotic fiind semipermeabil. Ea asigur schimburile necesare i selective ntre mediul extern i cel intracelular, meninnd constant compoziia chimic i ionic a celulelor. Proprietile de permeabilitate ale membranei plasmatice pot fi sintetizate astfel: a. substanele uor solubile n solvenii lipidelor ca i unii anioni (Cl-) traverseaz uor biomembranele; b. unii ioni (Na+, K+), glucidele, proteinele nu o pot traversa uor, fiind necesare mecanisme speciale de transport. Substanele de secreie traverseaz n sens invers membrana plasmatic comparativ cu cele nutritive. Dac celula moare, semipermeabilitatea ei dispare i constituenii celulari trec n mediu.
Membrana plasmatic joac rolul mitocondriilor din celulele eucariote. Particip la reduplicarea ADN. Particip la sinteza aparatului fotosintetic, a capsulei i mpreun cu mezosomul la sinteza peretelui celular. Este implicat n motilitatea bacterian ntru-ct una din structurile corpusculului bazal al cilului este strns legat de structura sa. Unele proteine legate de membran sau aflate n contact lax cu ea (acestea fiind localizate n spaiul periplasmatic) joac rolul de chemoreceptori. Membrana plasmatic particip la formarea i eliminarea unor proteine, ca enzimele i oxinele, care pot fi sintetizate n membrana plasmatic sau pe suprafaa ei extern i eliminate prin pinocitoz invers (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). In concluzie, membrana celular este implicat n multe procese celulare. Membrana celular are rolul de a delimita spaiul intracelular. Funcioneaz ca o barier osmotic a celulei, fiind semipermeabil. Ea realizeaz reglarea schimbului de substane ntre mediul de cultur i celul. La nivelul ei sunt localizate i enzime de tipul permeazelor, hidrolazelor i fosfatazelor care i confer rol de transport. Particip la formarea i eliminarea exoenzimelor i a exotoxinelor. Are rol n procesul de oxido-reducere al celulei, la nivelul ei fiind localizate majoritatea enzimelor respiratorii. Intervine n sinteza peretelui celular. MEZOZOMII se formeaz prin invaginarea membranei celulare. Au rol n replicarea ADN-ului i n (distribuia) materialului genetic n timpul diviziunii celulare, fiind echivalenii fusului de diviziune din celulele eucariote. Sunt de asemenea sediul enzimelor din ciclul energetic al celulei fiind echivalentul mitocondriilor din celulele eucariote. CITOPLASMA reprezint coninutul celular format dintr-un sistem coloidal complex, n care sunt dizolvate substane organice i anorganice cu rol n metabolismul celular. Ea formeaz matricea celular. 368
Citoplasma este un sistem coloidal complex format din proteine, glucide, lipide, ap i substante minerale, sistem n care apa i compuii dizolvai n ea acioneaz ca faza extern a unui sol (Lamana, 1949, citat de Drgan-Bularda, Samuel, 2006). ntruct n citoplasm coexist strile de coacervare, de emulsie i de soluie, ar putea fi caracterizat ca un complex de stri fizice ntr-o continu transformare. Se caracterizeaz prin meninerea permanent a strii de gel, ceea ce are ca rezultat o imobilitate a coninutului (lipsa curenilor citoplasmatici) i reprezint o condiie indispensabil a meninerii nemiscibilitii nucleului cu citoplasma, neexistnd membrane intracelulare (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). Citoplasma bacterian nu prezint organizare definit ca n cazul celulei eucariote care conine organite difereniate i delimitate de membrane. Aspectul ei este variabil n funcie de vrsta celulei i de condiiile de mediu. La celulele tinere i n condiii normale de dezvoltare, citoplasma ader la peretele celular i se prezint ca o mas dens omogen i intens colorabil. La celulele btrne citoplasma i pierde afinitatea tinctorial, se retract centripet, capt o structur granular, cu vacuole (evideniate la microscopul electronic), ndeprtndu-se de peretele celular. n citoplasma bacteriilor tinere proteina dominant este EFTu (Elongation Factor Termounstable), care reprezint circa 5% din totalul proteinelor. Acest factor particip la formarea legturilor dipeptidice, la nivelul ribosomilor.La bacteriile examinate pe seciuni mai puin fine (circa 50 nm) zona citoplasmatic apare ca find plin de agregate de ribosomi, iar n seciuni foarte fine apare lipsit de particule structurate, fiind amorf, iar ribosomii rari. Citoplasma conine toi constituenii celulari interni. n interiorul citoplasmei se gsesc: materialul nuclear, incluziunile, vacuolele i ceilali constitueni ai protoplastului. ntre particulele coloidale aflate n suspensie n citoplasm i lichidele intracelulare exist o interdependen continu i un schimb permanent de diferii atomi i molecule, o distribuie variabil de fore electrice i de atracii chimice, ocuri fizice reciproce etc., toate procesele intracitoplasmatice evolund ntr-o stare de echilibru relativ stabil. O caracteristic a citoplasmei bacteriene este prezena unei mari cantiti de ARN, ceea ce explic bazofilia ei intens (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). NUCLEOIDUL. Spre deosebire de celulele eucariote care au un nucleu cu structur bine definit, mrginit de o membran i coninnd un numr definit de cromosomi, capabili de diviziune mitotic, nucleul bacterian reprezint o form primitiv de organizare, lipsit de membran, inclus n citoplasm. Este localizat n general n centrul celulei i este legat de membrana citoplasmatic prin mezozom. Nucleoidul nu sufer modificri de tip mitotic n timpul diviziunii. Datorit caracterului su particular, aceast structur a fost denumit cu numeroi termeni: nucleoid, nucleosom, material nuclear, nucleoplasm, echivalent nuclear sau nucleu, prin analogie funcional cu structura echivalent a celulelor eucariote. Materialul nuclear este format dintr-un singur cromozom, n structura cruia intr o molecul gigantic de ADN bicatenar circular ce conine cca. 100 de gene, care condiioneaz ntreaga activitate a celulei bacteriene. Extras prin metode speciale, cromosomul bacterian s-a dovedit a fi alctuit dintr-o singur molecul de ADN, de form circular (extremitile ei nefiind libere, ci reunite) cu o lungime de 1400 m i un diametru de 2,5 nm, corespunznd diametrului moleculei de ADN dublu catenar (dublu spiralat) (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). Prin microscopia electronic, care difereniaz structurile n funcie de densitatea lor, s-a putut evidenia nucleul bacterian. La celulele bacteriene tinere nucleul apare ca o zon clar, puin dens, n mijlocul citoplasmei opace, mai dense. Nucleul apare ca o zon mai opac. Pe seciuni ultrafine s-a observat c regiunea nuclear este plin cu fibrile fine, cu diametrul de 2-5 nm, aranjate n siruri ondulate, paralele. Ele sunt formate din ADN i corespund cromosomului bacterian.
369
ADN extranuclear (Elemente genetice extracromosomale) Genomul bacterian cuprinde dou categorii de determinanti genetici: gene eseniale (eucromosomale) n cromosom i gene accesorii (informaie genetic neesenial) pentru mai bun adaptare la mediu, n plasmide sau elemente genetice transpozabile (EGT). n afara nucleoidului, unele bacterii conin ADN extracromozomial n formaiuni formate din inele de AND bicatenar numite plasmide, care au rol n transferul de material genetic ntre diferite celule bacteriene, asigurnd variabilitatea genetic a acestora, care este necesar meninerii i evoluiei speciilor bacteriene. La o serie de bacterii s-a evideniat i ADN extranuclear (extracromosomal), n elementele genetice extracromosomale. Plasmidele sunt elemente genetice separate fizic de cromosomul bacterian, capabile de replicare independent. n categoria plasmidelor tipice intr: plasmidele F (factori de fertilitate), plasmidele Col (colicinogene), plasmidele R (rezisten la antibiotice), plasmide de toxigenitate (confer bacteriilor patogenitate i virulen), plasmide cu gene tumorigene (de ex. Plasmida Ti de la Agrobacterium tumefaciens (de la engl. Tumour inducing), plasmide degradative (la Pseudomonas sp.) cu gene pentru descompunerea unor hidrocarburi. Molecula de ADN din plasmide este mai mic dect cea din cromosom, este tot bicatenar, circular, ataat la membrana citoplasmatic prin intermediul mezosomului. Aceasta reprezint circa 0,04-8% din lungimea cromosonlului de E.coli. GM este cuprins ntre 1106-200-106 dal. Plasmidele cu GM peste l00106 se gsesc la bacteriile Gramnegative (Pseudomonas, Agrobacterium). Se prezint sub forma unei molecule de ADN circular, inchis covalent. Unele pot fi i molecule circulare deschise i chiar lineare. Se gsesc sub 3 forme: superspiralat, circular-deschis (o caten nchis i una deschis) i linear (nlnuit, ca zalele ntr-un lan). Din punctul de vedere al capacitii plasmidelor de a media material genetic se deosebesc: 1. plasmide conjugative (infecioase, transmisibile), determinnd apariia pililor (numite i plasmide de sex), de ex. plasmidele F, Hfr sau Col, R i 2. plasmide neconjugative (neinfecioase), la care transferul de gene se face prin intermediul fagilor. Plasmidele F (Fertility) sunt prezente la bacteriile F+ ca plasmide libere n citoplasm. Acestea sunt celule mascule donatoare de material genetic. Ele pot transmite plasmida F n celule receptoare (celule femele). Bacteriile Hfr (High frequency of recombination = frecven ridicat de recombinare) conin o plasmid F integrat n cromosom, ce determin transfer de gene cromosomale prin procesul de conjugare. Aceste bacterii sunt denumite i supermascule (dup Drgan-Bularda, Samuel, 2006). RIBOZOMII Sunt corpusculi alctuii din ARN structurat cu proteine, de form caracteristic. Ei sunt responsabili de sinteza proteic intracelular. n acest proces, ribozomii individuali au tendina de a se grupa n iruri lineare pentru a forma polisomi de-a lungul filamentelor de ARNm. APARATUL FOTOSINTETIC este reprezentat de ntregul complex de structuri membranoase, care particip n procesul de conversie a energiei luminoase n energie chimic. Spre deosebire de eucariote, unde aparatul fotosintetic este localizat ntr-o structur bine delimitat (cloroplastele), la procariote, este localizat n invaginrile plasmatice care au diferite forme. 370
INCLUZIUNILE sunt formaiuni structurale inerte care apar n citoplasm. Pot fi constituite din lipide, glicogen, granuloz, granule de polifosfai i diferite metale. Ele apar la sfritul perioadei de cretere. Prezena i abundena lor variaz n funcie de condiiile de mediu. Ele sunt structuri legate de activitatea metabolic a celulei, reprezentnd n cele mai multe cazuri materiale de rezerv pentru celul. In funcie de compoziia lor chimic pot fi
1. polimeri organici (de ex. incluzii de glicogen, amidon, incluzii lipidice de PHB poli--hidroxibutirat; carboxisomii-ribulozo-1,5-bifosfat carboxilaz/oxigenaz (Rubisco), o enzim cheie n fixarea CO2); 2. polimeri anorganici (polifosfat n granule de volutin-o rezerv de fosfor i energie intracelular; granulele de cianoficin-polimeri de acid aspartic i arginin - rezerve inelare de azot); 3. incluzii anorganice simple (granule de carbonat de calciu i de sulf coloidal). Dup structura lor evideniat pe electronografii sunt de dou tipuri: incluzii nconjurate de membrane (de ex. cele de poli--hidroxibutirat, incluziile cu sulf) i incluzii nenconjurate de membrane (ca de ex. cele de glicogen, de volutin, de cianoficin). O bacterie dintr-o anumit specie formeaz un singur tip de depozit celular, cu mici excepii. Incluziile polizaharidice (de glicogen i de amidon) sunt prezente n special la bacteriile sporulate aerobe. Ele apar ca mase mici de 50-100 nm, puternic refringente, vscoase, care se coloreaz cu iod n galbenbrun (glicogenul) sau n albastru (amidonul) n contrast cu citoplasma de culoare glbuie. Incluziile de poli--hidroxibutirat (PHB) (poliester al acidului -hidroxibutiric cu GM de circa 60.000-250.000 dal), se mai numesc i incluzii lipidice. Pot fi evideniate la microscopul fotonic cu ajutorul coloranilor grsimilor (liposolubili), ca Negru de Sudan sau Sudan III. n celulele vii, ele apar ca granule foarte refringente, cu diametrul de 100-800 nm delimitate la periferie de o membran monostratificat, electronotransparent, groas de 2 nm, derivat dintr-un strat al membranei plasmatice. Incluziile PHB conin 98% PHB i circa 2% lipide i proteine i reprezint un material de rezerv tipic pentru procariote . Incluziile de PHB sunt sintetizate i acumulate n concentraii mari (pn la 60% din greutatea uscat) cnd creterea bacteriilor este limitat printr-un deficit de azot i n prezena unor surse de carbon i energie (de ex. glucoz, acetat). Ele apar la bacteriile obligat aerobe i la cele facultativ anaerobe cultivate n prezena O2. Amintim cteva bacterii la care s-a demonstrat formarea de PHB: Bacillus, Rhizobium, Azotobacler, Nitrobacter etc. La bacteriile obligat anaerobe granulele lipidice se formeaz mai rar. Aa de ex. Chromatium i Rhodospirillum (bacterii fototrofe) fixeaz PHB numai n condiii anaerobe. Acidul poli--hidroxibutiric (PHB) conine 6-110, de obicei 60 monomeri (acid -hidroxibutiric). Utilizarea PHB ncepe cnd sursa exogen de energie nu mai este accesibil celulelor, fiind iniiat de o depolimeraz care elibereaz PHB din granule pentru a fi oxidat la acetoacetat (de ctre o dehidrogenaz specific -D(-)--hidroxibutirat-dehidrogenaz NAD). Granulele lipidice constituie rezerve de carbon i energie . Ele dispar cnd mediul este deficitar n surs de carbon i energie i este bogat n surs de azot. Incluziile de volutin (polifosfat anorganic) au fost descrise pentru prima dat la Corynebacterium diphtheriae sub denumirea de corpusculi metacromatici de ctre Victor Babe (corpusculi Babe-Ernst). Apar sub forma unor granule sferice cu diametrul de 48 nm - 1m, electronoopace, fr structur intern, situate n regiunea nucleoplasmic. Sunt alctuite din polimeri liniari de fosfat (polimeri ai H3PO4). Polifosfaii determin metacromazia volutinei. Formarea volutinei este n funcie de genul sau specia bacteriei i de compoziia mediului. Se gsete la membrii genului Mycobacterium, la unele specii de Corynebacterium. n general, este mai frecvent ntlnit la bacteriile Gram-pozitive , dar este prezent i la unele bacterii Gram-negative (de ex. Spirillum volutans, Pasteurella multocida). Unii autori consider c incluziile de volutin ar fi formate dintr-un complex polifosfat-ARN-proteine. Semnificaia biologic a incluziilor citoplasmatice . Volutina reprezint o rezerv de fosfor, azot i energie intracelular, avnd funcii termodinamice echivalente fosfatului bogat n energie al ATP. Particip n procesele de fosforilare. Formarea lor reprezint i o modalitate de a prentmpina perturbrile echilibrului osmotic. Polifosfatul se sintetizeaz prin adugarea secvenial a resturilor de fosfat la pirofosfat: P-P + ATP ------> -P-P-P- + ADP. Degradarea polifosfatului, urmeaz calea invers i furnizeaz ATP pentru celul. S-a susinut c nu exist o legtur general ntre virulena bacteriilor i capacitatea lor de a forma volutin. Astfel, la genul Corynebacterium speciile patogene formeaz, iar cele nepatogene nu formeaz volutin. La genul Mycobacterium toate speciile (patogene + saprofite) formeaz volutin, iar Spirillum volutans conine mult volutin cu toate c este o bacterie saprofit. Polifosfaii au potenial de legare, putnd lega ioni de Mg2+, Ca2+, Mn2+, dar i metale grele (Pb2+, Hg2+, etc.).
371
Incluziile de sulf apar sub forma unor picturi sferice birefringente, strlucitoare, cu diametrul variabil (0,1-1 m), acoperite de o membran unistratificat alctuit din uniti globulare proteice cu GM de circa 13.000 dal, avnd o grosime de 2,5 nm. Se gsesc n sulfobacterii. La Beggiatoa i Chromatium sunt localizate intracitoplasmatic, iar la Thirhodaceae n pungi invaginate ale membranei plasmatice situate ntre peretele celular i membrana plasmatic. Sulful rezult din oxidarea H2S. Se gsesc n cantiti mari la bacteriile care cresc n medii bogate n H2 S i reprezint un depozit de rezerv, deoarece dispar prin oxidarea sulfului dac mediul devine srac n H2 S. Incluziile de carbonat de calciu se gsesc la unele sulfobacterii sub forma unor cristale mari de CaCO3 (la Thiorhodaceae, Achromatiaceae). Rolul lor nc nu se cunoate. Incluziile proteice (incluziuni parasporale ) se prezint sub forma unor cristale (octaedre bipiramidale avnd dimensiuni de 7,7 nm 11 nm i GM de circa 230.000 dal. S-au evideniat la diferite varieti de Bacillus thuringiensis (alesti, sotto, finitimus). Formarea lor este corelat cu sporularea i s-ar datora supraproduciei de proteine ale nveliului sporal i depozitrii lor intracelular. Conin o toxin i distrug larvele lepidopterelor (distrug bariera intestinal i determin moartea lor cu fenomene de paralizie). Din acest motiv varietile de Bacillus thuringiensis se numesc bacterii insecticide , folosindu-se n practic pentru combaterea biologic a insectelor defoliatoare ale pdurilor, pomilor fructiferi, porumbului etc. Carboxisomii au o structur granular (10 nm). Sunt pachete poliedrice de ribulozo-1,5-bifosfat carboxilaz/oxigenaz (Rubisco), o enzim cheie n fixarea CO2 pe calea metabolic a pentozofosfailor (ciclul Calvin). Se mai numesc i corpuri poliedrice datorit profilului lor poligonal. Sunt prezeni la toate cianobacteriile , n numr variabil, n cele ale bacteriilor capabile de fotosintez anoxigenic, precum i la bacteriile chimiolitoautotrofe (chimiosintetizante). Nu sunt s