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INMUNIDAD INNATA
La piel y los epitelios de los aparatos respiratorio, digestivo y genitourinario representan elementos propios de la inmunidad innata que impiden la penetracin de los patgenos en el organismo. Estas barreras naturales no median slo una accin de naturaleza pasiva, sino que contribuyen a la inmunidad antimicrobiana de la produccin de sustancias con actividad microbiosttica y microbicida, como tambin a travs de la produccin de un conjunto de mediadores capaces de inducir y orientar la respuesta inamatoria local. Esta respuesta, inducida a consecuencia del establecimiento de un foco infeccioso primario, involucra: sistema del complemento, protenas de fase aguda, interferones, neutrlos, macrfagos, clulas NK, clulas dendrticas mieloides y plasmacitoides, mastocitos, clulas NKT. La naturaleza del proceso infeccioso condicionar la participacin de cada uno de estos componentes en la defensa de nuestro organismo. El sistema del complemento desempea un papel destacado en la inmunidad frente a bacterias extracelulares. La activacin del complemento conducir al depsito de componentes activados sobre la supercie del microorganismo, lo que permite su reconocimiento por los fagocitos. Por otra parte, genera una respuesta inamatoria mediante la produccin de quimioatractantes capaces de atraer al foco infeccioso diferentes tipos celulares. Por su parte, los macrfagos, suelen tener un papel destacado en las infecciones por bacterias intracelulares. Los interferones de tipo I, las clulas NK y las clulas dendrticas plasmacitoides constituyen la principal barrera de contencin durante el transcurso de la infeccin viral aguda. Los mastocitos y los eosinlos suelen mediar una accin relevante frente a numerosas infecciones parasitarias, sobre todo en las etapas tempranas del proceso infeccioso. Las clulas de la inmunidad reconocen un grupo reducido de estructuras presentes en los patgenos denominadas patrones moleculares asociados con los patgenos (PMAP). y lo hacen a travs de una amplia familia de receptores denominados receptores de reconocimiento de patrones (RRP). La activacin de la inmunidad innata no slo contribuye de modo decisivo a la erradicacin del foco infeccioso, sino que tambin orienta el curso en el que se desarrollar posteriormente la inmunidad adaptativa.
INMUNIDAD ADAPTATIVA
Los linfocitos T y B constituyen los elementos celulares de la respuesta inmune adaptativa. A diferencia de los elementos celulares de la inmunidad innata, que reconocen un pequeo nmero de motivos conservados (PMAP), los linfocitos T y B reconocen motivos particulares presentes en los patgenos. Existen centenares de millones de motivos particulares reconocidos por los linfocitos T y B representados, por lo general, por secuencias aminoacdicas cortas de las protenas microbianas. Cada clon B o T reconocer un nico eptopo antignico a travs de su receptor antignico B (BCR) o T (TCR). La existencia de centenares de millones de clones diferentes brinda un repertorio adecuado para el reconocimiento de los diferentes antgenos microbianos. Este amplsimo repertorio linfocitario se desarrolla durante un proceso denominado ontogenia que transcurre, para los linfocitos T en el timo y para los linfocitos B, en la mdula sea y el bazo. A n de facilitar el encuentro del linfocito con su antgeno especco, el linfocito naive o virgen no deber buscar el antgeno en todo el organismo, sino en las regiones especializadas de los rganos linfticos secundarios, rganos donde se drenan todos los antgenos que han superado las barreras naturales del organismo. En forma cotidiana, los linfocitos naive ingresan en los rganos linfticos secundarios. Si no encuentran su antgeno especco, egresan de ellos, se vuelcan al torrente circulatorio y vuelven a intentarlo una y otra vez. Los antgenos casi nunca logran escapar a este sistema. El linfocito B o T que reconoci a su antgeno se activa, sufre un proceso denominado expansin clonal y genera una progenie compuesta de miles de clulas con idntica especicidad antignica. Al expandirse, una fraccin mayoritaria de los integrantes del clon expandido mediarn funciones efectoras que harn frente al patgeno. Una fraccin menor se diferenciar a clulas de memoria, las cuales pueden permanecer por aos y permiten en el futuro una respuesta rpida y eciente frente a una reexposicin al mismo patgeno. Las clulas de la inmunidad adaptativa slo son capaces de reconocer pptidos derivados del procesamiento del antgeno, presentados por molculas del complejo mayor de histocompatibilidad (CMH) de clase I (para los linfocitos T CD8+) o de clase II (para los linfocitos T CD4+), expresadas sobre la supercie de las Clulas Presentadoras de Antgeno (CPA). La presentacin de pptidos antignicos es, en realidad, la principal funcin de las molculas del CMH de clases I y II. Los linfocitos B son clulas especializadas en una nica funcin: la produccin de anticuerpos, funcin que llevan a cabo una vez que se han diferenciado en plasmocitos. Los linfocitos T, por el contrario, presentan diferentes subpoblaciones. Segun la expresin de las molculas CD4 y CD8, se distinguen dos subpoblaciones diferentes: T CD4+ y T CD8+. La expansin clonal y la memoria inmunitaria representan dos propiedades esenciales de la inmunidad adaptativa, no compartidas por la inmunidad innata.
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NEUTRFILOS
En condiciones normales, el lapso requerido para la transformacin del mielocito en neutrlo maduro circulante es de 5-7 das. No obstante, la existencia de procesos infecciosos puede reducirlo a 48 horas. Luego de 6 a 7 horas en circulacin, los neutrlos abandonan el lecho vascular y acceden a los tejidos perifricos en respuesta a la produccin de estmulos quimiotcticos. All sobreviven por un perodo de 6 a 48 horas para perecer luego por apoptosis. A diferencia de los linfocitos, los granulocitos carecen de la capacidad de recircular, es decir, una vez que se han extravasado no regresan a la circulacin.
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MACRFAGOS
Los macrfagos son clulas con alta capacidad fagoctica, que presentan gran capacidad microbiosttica y microbicida, mediada por mecanismos oxgeno-dependientes y oxgeno-independientes. Reconocen a los microorganismos y sus productos por RRP y a los microorganismos opsonizados por los RFc y los receptores para componentes del complemento. Por otra parte, expresan receptores para una amplia variedad de citocinas y quimiocinas. Los macrfagos poseen caractersticas que les son propias. (a) Se originan de monocitos circulantes que al extravasarse se diferencian a macrfagos. (b) Actan como clulas presentadoras de antgeno profesionales, no obstante, no son los macrfagos ni los linfocitos B los responsables de activar a los linfocitos T vrgenes o naive (proceso que ocurre en los
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rganos linfticos secundarios), e iniciar a la respuesta inmune adaptativa. Esta funcin es mediada por las clulas dendrticas. (c) En respuesta al reconocimiento de PMAP o citocinas, producidos por ellos mismos (efecto autocrino) o por otros tipos celulares, secretan un amplio espectro de citocinas. Segn el microambiente en el cual se ha diferenciado (tipo e intensidad de las seales que percibe, estimulatorias e inhibitorias), el macrfago podr activarse de modos diferentes y manifestar un perl funcional singular. Las quimiocinas producidas por el macrfago activado, junto con las producidas por otros tipos celulares partcipes en la reaccin inamatoria (clulas endoteliales, mastocitos, neutrlos y clulas dendrticas) inducen el reclutamiento de leucocitos en el sitio de lesin de modo de multiplicar su presencia en l. Cada patgeno o tipo de patgeno indica la produccin en el foco de lesin de un grupo particular de quimiocinas. stas alcanzan la luz de los pequeos vasos al interactuar con la cara luminal del endotelio mediante su unin a glucosaminoglicanos (GAG). La composicin particular de citocinas inmovilizadas dibuja en la cara luminal del endotelio las propiedades del patgeno invasor induce la migracin de los leucocitos ms aptos para combatirlo. Diversos eventos que ocurren tras la activacin del Macrfago. Los macrfagos presentan diferentes tipos de receptores que, al reconocer a sus ligandos (sealados en la ilustracin), conducen a su activacin. Esto induce la produccin de distintos mediadores, los que a su vez desarrollaran variadas respuestas.
G-CSF, M-CSF, GM-CSF, PDGF, FGF, VEGF QUEMOCINAS
Quemocinas
IL-12 e IL-18
MACRFAGO
Promueven la diferenciacin de los linfocitos T CD4+ en un perl TH1 e inducen la produccin de por clulas NK y interfern-L posiblemente por macrfagos y clulas dendrticas
IL-10 y TGF-
Activacin de mecanismos microbicidas, produccin de citocinas y quemocinas Reclutamiento e incremento en su potencialidad citxica Degranulacin de mastocitos, liberacin de histamina, produccin de leucotrienos, citocinas y quemocinas
NEUTRFILO
ENZIMAS
Fosfolipasa A2
RECEPTORES DE RECONOCIMIENTO DE PATRONES HUMORALES COMPONENTES DEL COMPLEMENTO
-l anti-tripsina
ANTIOXIDANTES
Ceruloplasmina
Cresta Morgado, Pablo
Factor B, C3 y C5
Protena C-Reactiva, Protena de unin a Manosa, Filcolinas H y L. Conducen a la activacin del complemento y promueven la fagocitosis
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MASTOCITO
EL MASTOCITO, UNA CLULA CLAVE EN EL DESARROLLO DE LA RESPUESTA ALRGICA
Los mastocitos se diferencian de clulas progenitoras hematopoyticas bajo la inuencia de la IL-3 y el stem-cell factor en mdula sea. Los precursores de los mastocitos migran a diferentes tejidos donde son retenidos para culminar su diferenciacin a expensas de factores de crecimiento producidos en forma local. Los mastocitos se localizan estratgicamente en zonas donde hay mayor interaccin entre el husped y el medio ambiente. Suelen ubicarse en la mucosa y la submucosa de los tractos gastrointestinal y respiratorio, en el piel y en los rganos linfoides. Los granulocitos baslos, a pesar de ser fenotpica y funcionalmente similares a los mastocitos, se diferencian a partir de precursores y bajo la inuencia de factores de crecimiento comunes con el eosinlo. Los baslos maduran en la mdula sea y se encuentran en la circulacin en un porcentaje menor del 1% respecto del total de leucocitos. Al igual que los mastocitos, los baslos expresan en forma constitutiva el receptor de alta anidad para la porcin Fc de la IgE (RFcI). La IgE producida se difunde a los diferentes tejidos y se une a travs de los receptores RFcI a la supercie de baslos y mastocitos tisulares. Ante una nueva exposicin al antgeno (alergeno), ste se une a la IgE presente sobre la supercie de los mastocitos o baslos. La unin del alergeno a dos o ms molculas de IgE desencadena una cascada de seales intracitoplasmticas que culmina con la liberacin de mediadores preformados, almacenados en los grnulos citoplasmticos, as como de mediadores neosintetizados.
. FASE TEMPRANA .
EOSINFILO IgE
cuente formacin de edemas. Tambin estimula terminaciones nerviosas de diverso tipo, lo que desencadena prurito y dolor. Por otro lado, es un estmulo ecaz para la secrecin de cido en el estmago. Los mastocitos producen proteasas, estas representan las protenas ms abundantes en los grnulos de secrecin. La mas destacada es la triptasa, cuyas funciones mas importantes son: escisin de bringeno y activacin de colagenasas, induccin autcrina de la liberacin de histamina, activacin de eosinlos y estimulacin de la proliferacin de broblastos. Los mastocitos y los baslos producen tambin proteoglucanos, como condroitn sulfato, mientras que la heparina es producida exclusivamente por los mastocitos. Estas molculas forman una intrincada red con carga negativa que actua como una matriz de reserva para los diferentes mediadores cargados positivamente y previenen su diseminacin. Asi, los mediadores son liberados de los proteoglucanos en diferentes tiempos despus de la exocitosis de los grnulos.
EOSINFILOS
Los eosinlos suelen ubicarse en la piel y las mucosas y cumplen un papel relevante en el desarrollo de los procesos alrgicos, ya que producen dao al epitelio respiratorio y a la musculatura lisa bronquial y potencian la reaccin inamatoria local. El eosinlo pone en juego un conjunto de mecanismos promotores de la inamacin. Sus grnulos contienen protena bsica mayor (MBP), protena catinica del eosinlo, neurotoxina y peroxidasa. Al liberarse, la protena catinica acta sobre clulas presentes en su entorno e induce la formacin de poros que alteran la permeabilidad de la membrana celular y conducen a su muerte. Por su parte, la MBP incrementa la reactividad del msculo liso y desencadena, adems, la desgranulacin de mastocitos y baslos. Los eosinlos contribuyen tambin a la lesin tisular mediante la produccin de intermediarios reactivos del oxgeno generados por el estallido respiratorio. Producen, adems, mediadores lipdicos, citocinas y quimiocinas capaces de modular diferentes aspectos de la respuesta inmune. Los eosinlos, con frecuencia se acumulan en los tejidos luego de su infeccin por parasitos extracelulares como los helmintos. Parecen cumplir una funcin importante en la defensa innata contra estos patgenos. Sus mecanismos de accin no han sido denidos con claridad. Su efecto protector estara mediado por: la liberacin de sus grnulos, que contienen protenas txicas; y por la produccin de intermediarios reactivos del oxgeno.
BASFILOS
Algunas caractersticas de los baslos ya fueron comentadas al referirnos a los mastocitos, ahora se comentarn brevemente algunas nociones acerca de su rol como modulador de la respuesta inmune. Los baslos se consideran posibles clulas inmunorreguladoras dado que representan la mas potente fuente de IL-4, la cual conduce a la diferenciacin de la celula TCD4+ en Th2. Se demostr a traves de distintos experimentos que los baslos son clulas con capacidad para producir IL-4, presentar antgenos a clulas TCD4+ naive y promover su diferenciacin hacia un perl Th2 durante reacciones alrgicas y respuestas inmunes antiparasitarias. Es conocido que los baslos producen IL-4 en respuesta a varios estmulos dependientes o no de RFcEI. A su vez pueden captar la histamina del microambiente (sea liberada por los mismos baslos o por mastocitos). La concetracin de histamina intracelular actuara como regulador para la sintesis y liberacin de IL-4, IL-6 e histamina.
CLULAS DENDRTICAS
CLULAS DENDRTICAS INMADURAS Son funcionalmente aptas para cumplir dos funciones esenciales: 1- Capturar antgenos en los tejidos perifricos y procesarlos de manera adecuada. 2- Sensar las propiedades del fnomeno inamatorio/ infeccioso en el tejido perifrico permitiendole madurar hacia perles diferentes. Las Clulas dendrticas inmaduras se caracterizan por: - Alta capacidad para captar antgenos. Basicamente a travs de dos mecanismos, endocitosis mediada por receptores (via clatrinas) y pinocitosis. - Alta capacidad de procesamiento antignico. Diferentes tipos de receptores expresados por las clulas dendrticas que median la endocitosis de antgenos
Receptores Scavengers
SR-A CD 36 LOX-1
CD 91 es capaz de reconocer e internalizar pptidos antignicos marcados con las proteinas de shock trmico provenientes de clulas necrticas o apoptticas
CLULAS DENDRTICAS MADURAS La percepcin de estmulos inamatorios o componentes microbianos activa a las clulas dendrticas e induce una serie de cambios (maduracin) que incrementan de manera espectacular su capacidad para activar a los linfocitos T naive. Este proceso de maduracin se acompaa de: - Notable disminucin en su capacidad endoctica. Esto permite una presentacin antignica especica y restringida a los antgenos encontrados en la periferia (foco inamatorio/infeccioso). - Incremento de la expresin de las molculas coestimulatorias (CD 40, CD 80 (B7.1), CD 86 (B7.2)). - Aumento de la expresin de complejos pptido antignico/molcula de clase II del CMH. - Incremento en la expresin de receptores de quimiocinas (CCR7) y de migracin hacia los rganos linfticos secundarios. El proceso de maduracin induce una serie de cambios en el patrn de expresin de receptores de quimiocinas. Por un lado, disminuye la expresin de aquellos que retenan a la clula dendrtica en el tejido perifrico, y por otro, aumenta la expresin de los receptores que le permiten migrar hacia rganos linfticos secundarios (por ejemplo: CCR7). Los ligandos de CCR7 son molculas que se expresan en el endotelio de los vasos linfticos y en las Venas de Endotelio Alto (HEV) de la zona T.
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CCR7
CLULA VELADA
La clula Dendrtica es transportada pasivamente por la corriente linftica. Durante su recorrido es llamada clula Velada. Al ganglio ingresa por los vasos aferentes al seno subcapsular. Desde alli, a travs de los senos trabeculares, ingresa a los senos medulares. Las clulas estromales del rea T producen un gradiente adicional de las quimiocinas CCL19 y CCL21, lo que determina la quimioatraccin de las Clulas Dendrticas hacia la paracorteza del ganglio.
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EXTRAVASACIN DE LINFOCITOS EN LOS RGANOS LINFTICOS SECUNDARIOS Y SU ENCUENTRO CON LAS CLULAS DENDRTICAS
El ingreso de los linfocitos en los rganos linfaticos secundarios ocurre a travs de vnulas poscapilares denominadas Vnulas de Endotelio Alto (HEV, High Endothelial venules). Poseen un endotelio especializado con caractersticas diferentes a los endotelios de las vnulas de otros tejidos, tanto morfolgica como funcionalmente. A excepcin del bazo, todos los rganos linfticos secundarios contienen HEV, por lo general ubicadas en las reas paracorticales o reas T. El proceso de migracin sitioespecco est determinado por el patrn de expresin de molculas de adhesin y de receptores de quimiocinas en el linfocito y la expresin de sus contrarreceptores y quimiocinas en los tejidos. Como ocurre con otras poblaciones leucocitarias, la extravasacin linfocitaria es un proceso que involucra una secuencia de eventos conocida como cascada de adhesin leucocitaria. Los pasos de esta cascada incluyen: el rolling, la adherencia estable y la transmigracin.
Linfocito
L-selectina
CCR7
LFA-1( L 2)
GlyCAM-1
Ganglio Linftico
Los linfocitos Proceso de rolling La unin de CCL21 y CCL19 a su circulantes mediado por la receptor acceden unin de la al ganglio linftico L-selectina a sus linfocitario media la a travs de las ligandos: GlyCAM-1 activacin de la HEV y CD34 integrina LFA-1(L2)
CCR7
Los linfocitos circulantes reconocen el endotelio de las HEV a travs de la L-selectina que se une a carbohidratos sulfatados y sialilados de las molculas GlyCAM-1 y CD34. Esta interaccin media el primer paso de la cascada de extravasacin, el rolling. Las quimiocinas CCL19 y CCL21 adheridas a glucosaminoglicanos de la cara luminal endotelial activan a la integrina LFA-1 e incrementan la anidad por su ligando ICAM-1. La adherencia estable mediada por LFA-1 activada da lugar a la migracin transendotelial.
CCL19 CCL21
Dentro del OLS, los linfocitos T se distribuyen en el rea paracortical colocalizndose con las clulas interdigitadas dendrticas. Esta distribucin es consecuencia de la expresin de CCR7 sobre el linfocito y de la produccin de sus ligandos, CCL19 y CCL21 por las clulas interdigitadas dendrticas y las clulas estromales del rea T. El linfocito se une transitoriamente a las CPA, lo cual detiene su migracin. Esta unin transitoria involucra interacciones de baja anidad mediadas por integrinas, que le permiten al linfocito T hacer un muestreo de un amplio nmero de molculas del CMH sobre cada CPA para detectar la posible presencia de su antgeno especco.
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CLULA DENDRTICA
CLULA DENDRTICA
CLULA DENDRTICA
ICAM-2 ICAM-1
CMH CLASE II
TCR CD4+
LFA-1 T CD4+ Primeras interacciones entre la clula dendrtica y la el T CD4+. Se establecen entre moleculas de adhesin y son inespeccas. T CD4+ El reconocimiento del pptido antignico induce un cambio conformacional en las LFA-1 que aumenta la anidad por sus ligandos, lo que estabiliza la unin entre ambas clulas para poder reconocer adecuadamente el antgeno. T CD4+ La segunda seal es inducida por la interaccin entre las moleculas coesimulatorias (B7.1/B7.2) y el CD28 del T CD4+
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. T h2 .
MASTOCITO
. T h1 .
MACRFAGO
NKT IL-4
NK
IFN-
Th2
Th1
IL-2, IFN-T, TNF- , TNF-
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LAS CLULAS TH1 Y TH2 SON CLULAS T EFECTORAS QUE, AL ACTIVARSE EN LOS TEJIDOS PERIFRICOS, NO REQUIEREN LA PERCEPCIN DE SEALES COESTIMULATORIAS
Las clulas T efectoras, tanto Th1 como Th2, a n de activarse en los tejidos perifricos y producir las citocinas propias de cada perl, debern reconocer nuevamente el mismo complejo pptido antignico-molcula CMH que reconocieron originalmente en el rgano linftico secundario. Sin embargo, la activacin de las clulas T efectoras no requiere seales coestimulatorias. Ello explica que en los tejidos perifricos las clulas T CD4+ efectoras puedan activarse por macrfagos y linfocitos B y, eventualmente, por clulas parenquimatosas que puedan expresar, a consecuencia del fenmeno inamatorio en curso, molculas de clase II del CMH.
Th2
LINFOCITO B NK
Th1
T CD8+
MASTOCITO EOSINFILO
MACRFAGO
CLULAS T CD8+
ACTIVACIN DE CLULAS T CD8+ CITOTXICAS
Los linfocitos T CD8+ vrgenes o naive, al igual que los linfocitos T CD4+ vrgenes, se extravasan en los rganos linfticos secundarios a n de encontrar el antgeno. Una vez que ingresan en el rea T, interactuarn con las clulas dendrticas para sensar en su supercie la presencia de pptidos antignicos presentados por molculas de clase I del CMH. Si reconocen estos pptidos de modo adecuado los linfocitos T se activan, se expanden y se diferencian a linfocitos efectores T CD8+ citotxicos. A n de facilitar el reconocimiento antignico, se establecen interacciones entre las molculas de adhesin expresadas por las clulas T CD8+ y las clulas dendrticas, similares a las que ocurren entre las clulas T CD4+ y las clulas dendrticas. Si no encuentran el antgeno, las clulas T CD8+ retornan a la circulacin sangunea a travs de los vasos linfticos eferentes y el conducto torcico. Rpidamente volvern a extravasarse a los rganos linfticos secundarios y recomenzarn la bsqueda de su antgeno especco, en forma similar a lo que sucede con los linfocitos T CD4+ naive. La activacin de los linfocitos T CD8+ vrgenes tambin requiere la percepcin de dos seales: La primera deviene del reconocimiento antignico por el TCR. La segunda, de la percepcin de seales coestimulatorias. En relacin con la seal 2, es importante destacar que el tenor de coestimulacin requerido por una clula T CD8+ virgen para activarse es mayor que el requerido por una clula T CD4+ virgen. Por lo que en la mayora de los procesos infecciosos este tenor resulta insuciente para su activacin. A travs de su interaccin con clulas T CD4+ especcas para el antgeno, la clula dendrtica incrementa la expresin de molculas coestimulatorias para generar una seal 2 de magnitud suciente para activar linfocitos T CD8+ naive. De este modo, la clula dendrtica interacta primero con las clulas T CD4+ e inducen su activacin. En consecuencia, la clula T CD4+ incrementa la expresin de CD40L, molcula que interacta con CD40 expresada en la supercie de la clula dendrtica, transduciendo una seal estimulatoria. Ello se traduce en una expresin incrementada de las molculas coestimulatorias B7.1 y B7.2. De este modo, las clulas dendrticas adquieren un tenor de molculas coestimulatorias suciente para generar la seal 2 de activacin, conducente a la produccin de IL-2 y a la sntesis del receptor de alta anidad para la IL-2.
CMH CLASE II ICAM-2 ICAM-1 TCR CD4+ B7.1 B7.2 CD28 LFA-1 T CD4+ La celula T CD4+ interactua con la clula dendrtica. La unin CD40-CD40L produce una seal de activacin que conduce al incremento de las moleculas coestimulatorias en la clula dendrticas. Cresta Morgado, Pablo T CD8+
CMH CLASE I
CD40 CD40L
La clula dendrtica se encuentra ahora en condiciones de inducir una seal 2 adecuada que permita la activacin del linfocito T CD8+ naive. La seal 1 est dada por el reconocimiento los pptidos antignicos presentados por las molculas de clase I del CMH a travs del TCR. 13
PAPEL DE LAS CLULAS T CD8+ EN LA INMUNIDAD ANTIINFECCIOSA Las clulas T CD8+ desempean un papel central en la inmunidad antiviral y participan, adems, en la respuesta inmune generada contra ciertas bacterias y parsitos, que se localizan en el citosol, al menos en algunos estadios del proceso infeccioso. La inmunidad conferida por las clulas T CD8+ se ejerce por dos mecanismos: Destruyendo clulas infectadas (citotoxicidad). Produciendo un amplio grupo de citocinas y quimiocinas. CITOTOXICIDAD MEDIADA POR LINFOCITOS T CD8+ CITOTXICOS El proceso de activacin, expansin clonal y diferenciacin a linfocitos T citotxicos se completa aproximadamente 5 das. Durante este perodo, las clulas T CD8+ sintetizan los componentes presentes en sus grnulos secretorios, como granzinas y perforinas. Los linfocitos TCD8+ efectores abandonan luego el rgano linftico secundario y se dirigen a los tejidos inamados, en busca de clulas infectadas por el mismo patgeno que dio lugar a su activacin. Durante su diferenciacin, los linfocitos T cambian el patrn de expresin de diversas molculas de adhesin de forma tal que puedan reconocer el endotelio activado y extravasarse hacia el sitio de infeccin. Los linfocitos T citotxicos que han arribado al sitio de infeccin contactan con las clulas del tejido, infectadas o no, a travs de interacciones no especcas. En este proceso participan las molculas LFA-1, cuya expresin se encuentra incrementada en el linfocito activado. Estas molculas interactan con molculas de adhesin expresadas en la clula diana (ICAM-1 e ICAM-2). Esta interaccin es transitoria a menos que el linfocito T citotxico reconozca el pptido antignico presentado por CMH de clase I sobre la membrana de la clula diana. En ese caso, se produce un cambio en la anidad de la molcula LFA-1 por su ligando, que tiene como consecuencia la estabilizacin de la unin entre el linfocito T citotxico y la clula diana. Ello precede la puesta en marcha del mecanismo citotxico que llevar a la apoptosis de la clula infectada. Las clulas T CD8 citotxicas pueden destruir a las clulas diana por dos mecanismos conducentes a su apoptosis: Mediante la liberacin de granzinas y perforinas. A travs del sistema FasL/Fas. El primero de los mecanismos mencionados parece ser el ms relevante. Una vez que el linfocito T citotxico descarg el contenido de sus grnulos sobre la membrana de la clula diana se separa de sta y puede volver a reconocer y matar otras clulas infectadas. De hecho, el reconocimiento del antgeno a travs del TCR no slo induce la descarga de los grnulos sino estimula adems la sntesis de perforina y granzimas para la formacin de nuevos grnulos. Los linfocitos T CD8+ efectores, a diferencia de los naive, no requieren seal 2 para activarse. Ello les permite destruir clulas parenquimatosas infectadas, propias de los diferentes tejidos, que no suelen expresar molculas coestimulatorias. PRODUCCIN DE CITOCINAS Y QUIMIOCINAS POR LINFOCITOS T CD8+ Los linfocitos T CD8+ contribuyen a la inmunidad tambin a travs de la liberacin de citocinas y quimiocinas proinamatorias. Entre las citocinas producidas se destacan el interfern- y el TNF-. El interfern- acta en forma directa inhibiendo la replicacin viral y adems incrementa la expresin de molculas de clase I del CMH facilitando el reconocimiento del pptido antignico por parte de los propios linfocitos T citotxicos. El interfern- cumple un papel crucial en la activacin de los macrfagos y en la promocin de la diferenciacin de los linfocitos T CD4+ en un perl Th1. Por su parte, el TNF- media una actividad inamatoria mediante diferentes mecanismos. Trabajos recientes han demostrado la capacidad de las clulas T CD8+ de producir quemocinas capaces de reclutar neutrlos, monocitos y clulas Th1 en el foco infeccioso.
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CLULAS B
Al activarse, las clulas T no slo se expanden sino que tambin se diferencian a clulas efectoras capaces de mediar diferentes acciones de naturaleza microbiosttica o microbicida. Mientras que la activacin de los Los anticuerpos constituyen un componente esencial de la inmunidad adaptativa. Con ellos se combate a los microorganismos que replican en los espacios extracelulares y se previene la dispersin de los que se multiplican dentro de las clulas. Existen al menos tres poblaciones de linfocitos B: clulas B2, clulas B1 y clulas B de la zona marginal del bazo. La poblacin B2, es la ms abundante en la circulacin sangunea y en los tejidos linfticos secundarios. Es de uso corriente referirse a estas clulas cuando se habla de linfocitos B. Estas clulas sufren un proceso de maduracin en la mdula sea y el bazo desde donde salen a la periferia expresando receptores antignicos (BCR) de isotipo IgM e IgD. Los plasmocitos derivados de los linfocitos B2 son los encargados de producir anticuerpos contra antgenos proteicos. Para que esto suceda los linfocitos B2 requieren no slo reconocer al antgeno a travs de la Ig de supercie, sino tambin recibir seales coestimulatorias por parte de linfocitos Th2 que reconocen en los B2 al pptido antignico unido a molculas de clase II del CMH. Las otras dos poblaciones de linfocitos B se distinguen de la poblacin B2 por ser capaces de diferenciarse y producir anticuerpos sin necesidad de tener que recibir seales coestimulatorias de parte de los linfocitos Th2. ACTIVACIN DE LOS LINFOCITOS B: PRIMERA Y SEGUNDA SEALES DE ACTIVACIN El primer paso en la activacin del linfocito B consiste en el reconocimiento del antgeno por parte de la inmunoglobulina de supercie, componente esencial del BCR. El reconocimiento del antgeno tiene dos consecuencias principales: a) transduce seales de activacin al interior del linfocito B y b) media la endocitosis del antgeno y su consiguiente procesamiento por la va exgena. De esta manera se expresan sobre la supercie del linfocito B, junto con molculas de clase II del CMH, pptidos derivados del antgeno que sern reconocidos por linfocitos Th2 especcos. La unin del antgeno al BCR constituye la primera seal de activacin para el linfocito B. Sin embargo, el reconocimiento del antgeno no es suciente para inducir la proliferacin del linfocito B y su diferenciacin en clula productora de anticuerpos. Para que esto ocurra es necesario que reciba una segunda seal de activacin, proveniente del linfocito Th2 especco. Este proceso se conoce como colaboracin TB. El reconocimiento por parte del TCR del pptido antignico presentado por la molcula de clase II del CMH induce en el linfocito Th2 la expresin de CD40L, la que reconoce en la membrana del linfocito B a la protena CD40. La unin CD40CD40L permite la entrada del linfocito B que ha reconocido al antgeno en el ciclo celular. Sin embargo, para que la proliferacin y la diferenciacin se lleven a cabo es necesario tambin que los linfocitos Th2 secreten la citocina IL-4, la cual interacta con receptores especcos presentes en la membrana del linfocito B. COOPERACIN DEL LINFOCITO TH2-LINFOCITO B EN EL GANGLIO. FORMACIN DEL CENTRO GERMINAL Los antgenos que ingresan en el organismo a travs de los tejidos perifricos son endocitados por clulas CPA, en particular por clulas dendrticas, que luego los transportan a los ganglios drenantes a travs de los linfticos aferentes. Por su parte, los linfocitos T vrgenes ingresan en la zona paracortical de los ganglios atravesando las HEV y los que reconocen el pptido antignico presentado adecuadamente por la CPA son retenidos y activados, producindose la expansin clonal de estos linfocitos. Los linfocitos B vrgenes que ingresan en el ganglio atravesando las HEV son atrados hacia los folculos primarios por la quimiocina CXCL13 secretada por las clulas foliculares dendrticas. Cuando un linfocito B virgen del folculo primario entra en contacto con el antgeno a travs de su BCR, aumenta la expresin del receptor CCR7, especco para las quimiocinas CXCL19 y CXCL21 predominantes en la zona paracortical T del ganglio linftico e inicia por consiguiente la migracin hacia esa regin. Por su parte, en ausencia de IL-12 en su entorno, los linfocitos T que se activaron en respuesta al antgeno presentado por la CPA se diferencian a linfocitos Th2 y migran hacia el borde del folculo primario. En este sitio interactan con los linfocitos B especcos, se produce la colaboracin T-B y ambas poblaciones linfocitarias proliferan durante varios das. Algunos de los linfocitos B abandonan este primer foco de proliferacin y se dirigen a la mdula del ganglio linftico diferencindose en plasmocitos. Estos producen los primeros anticuerpos de la respuesta humoral, que son de clase IgM. Otros linfocitos B del foco de proliferacin migran hacia el interior del folculo primario atrados por la quimiocina CXCL13.
Cresta Morgado, Pablo 15
Una vez en el interior del folculo primario, los linfocitos B siguen proliferando en forma muy activa y dan lugar al centro germinal. A estos linfocitos B proliferantes se los conoce como centroblastos. Debido a su rpida expansin (sufren aproximadamente una divisin celular cada 6 a 8 horas) desplazan a los linfocitos B en reposo que conforman el folculo primario, los cuales se disponen formando la zona del manto alrededor del ncleo de clulas proliferantes. Los centros germinales se desarrollan alrededor de una semana despus de la estimulacin antignica. Estn compuestos mayoritariamente por los centroblastos que se disponen formando lo que se conoce como zona oscura. Tambin integran parte del centro germinal linfocitos T CD4+ y clulas foliculares dendrticas (CFD) que proveen las seales estimulatorias necesarias para la expansin y diferenciacin de los linfocitos B. En cuanto a los linfocitos T CD4+ del centro germinal, poseen caractersticas particulares que los diferencian de los Th1 y Th2. Esta poblacin de linfocitos T CD4+ puede ser denominada linfocitos T foliculares. Cuando los centroblastos dejan de proliferar, se transforman en centrocitos, los que junto con los linfocitos T CD4+ y las CFD conforman la zona clara del centro germinal. Si bien los anticuerpos producidos por los linfocitos B del foco primario cumplen un papel protector importante, la diferenciacin de los linfocitos B en el centro germinal provee al organismo de anticuerpos ms ecaces para el control de los patgenos. En el centro germinal los genes que codican las cadenas pesada y liviana de la Ig sufren una serie de modicaciones importantes que darn como resultado la produccin de anticuerpos de mayor anidad por el antgeno y de isotipo diferente de la IgM. Estas modicaciones moleculares comprenden: 1) la hipermutacin somtica que altera la porcin variable de la Ig, y 2) el cambio o switch del isotipo que reemplaza la porcin constante de una cadena pesada por otra de una clase diferente. HIPERMUTACIN SOMTICA Y AUMENTO DE LA AFINIDAD DE LOS ANTICUERPOS La hipermutacin somtica es un mecanismo por el cual la porcin variable de las cadenas pesadas y livianas de las Ig sufren mutaciones puntuales con una tasa muy alta. Este mecanismo constituye la base molecular de un proceso muy ventajoso para el organismo: la generacin de anticuerpos de mayor anidad para los antgenos involucrados en el proceso infeccioso. Como las mutaciones se producen al azar, muchas de ellas son perjudiciales para la clula B que las porta, lo que conduce a su apoptosis. Por ltimo, algunas mutaciones van a incrementar la anidad de la Ig por el antgeno y sern los linfocitos B que han sufrido estas mutaciones los que sean seleccionados en el centro germinal. Los centrocitos estn programados para morir por apoptosis a menos que reciban seales de supervivencia enviadas por los linfocitos T colaboradores. El antgeno forma un complejo inmune y ste se une a la supercie de la CFD. El centrocito podr reconocer entonces al antgeno sobre la supercie de la CFD, y deber arrancrselo a n de endocitarlo y presentarlo a los linfocitos TCD4+ colaboradores. Para que estas interacciones sea posibles, el centrocito deber contactar con el antgeno a travs de su BCR, endocitarlo, procesarlo y presentrselo al linfocito TCD4+ especco. La interaccin del centrocito con el linfocito TCD4+ involucra esencialmente las mismas molculas que participan en la cooperacin T-B. Slo los centrocitos que hayan sufrido mutaciones que incrementen la anidad de la Ig por el antgeno podrn recibir las seales de supervivencia impartidas por los linfocitos T CD4+, ya que tendrn ms probabilidades de competir con xito en la captura del antgeno que los centrocitos que posean Ig de baja anidad. En el centro germinal se produce, adems de la maduracin de la anidad de los anticuerpos, el cambio de isotipo de Ig (por ejemplo a IgG). Las distintos clases o isotipos de Ig cumplen funciones inmunolgicas diferentes.
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CXCL13
CMH CLASE II
. SEAL UNO .
Migracin a la paracorteza para interacturar con una clula Th2. Colaboracin T-B
CENTROBLASTO
IL-4
. SEAL DOS .
LINFOCITO B MEMORIA 17