PRCTICAS DE PARASITOLOGA

INTRODUCCIN: Una simple definicin etimolgica de raz griega, nos indica que un parsito es un " individuo que se alimenta junto a otro" (para = al lado; sito = alimentarse). Para evitar confusiones semnticas entre las denominaciones de los dos organismos que se alimentan juntos, optamos por denominar parsito al organismo que obtiene el beneficio, mientras que denominaremos hospedador o patrn, al que proporciona el alimento (1). Se sabe que las enfermedades parasitarias han producido a travs de los tiempos ms muertes y dao econmico a la humanidad que todas las guerras juntas. Generalmente en los pases con poco desarrollo socioeconmico es en donde las enfermedades parasitarias y la parasitosis se presentan con mayor frecuencia, vindose favorecido esto por las condiciones climticas clidas o templadas y por la falta de cultura mdica en el pueblo, ya que en los pases desarrollados social, mdica y econmicamente, las enfermedades parasitarias han sido erradicadas o tienen muy poca significacin. Es importante sealar que alguna parasitosis transmitida por el suelo y por fecalismo (ascariosis, uncinariosis, tricocefalosis, amibiosis, giardiosis, etc.) no solo se presenta en climas clidos sino inclusive en zonas templadas y an en fras. El impacto global de las enfermedades parasitarias en el mundo es muy importante ya que inciden de manera brutal sobre la salud, la esperanza de vida al nacimiento, y la productividad de millones de personas. La prevalencia de la parasitosis est estrechamente vinculada a diferenciales climticas, fenmenos demogrficos y al desarrollo socioeconmico de las diferentes zonas del planeta. No es de extraar que los protozoos y los helmintos patgenos sean parte de la vida cotidiana en los trpicos, sin ser privativos de ellos. Debe considerarse que el 75% de la poblacin mundial se encuentra establecida en pases en desarrollo y que el 50% de la misma est constituida por personas menores de 15 aos de edad, rango en que se presenta la mayor mortalidad por enfermedades infecciosas incluyendo las de etiologa parasitaria. Ante la magnitud del problema, algunas instituciones y fundaciones en el mundo han destinado parte de sus recursos econmicos y tecnolgicos para el estudio de la parasitosis. Entre las principales causas de mortalidad en pas, se observa que las defunciones por enfermedades infecciosas y parasitarias asociadas a naciones subdesarrolladas ocupan el 4to lugar. La mortalidad por enfermedades parasitarias es un problema comn a los diferentes grupos etreos, pero su magnitud destaca en la niez, evalundose en trminos de muerte prematura y que repercute en Aos de Vida Potencial Perdidos
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(AVPP) que es un valioso indicador para pases en desarrollo pues otorga mayor importancia a las causas de defuncin que inciden a edades tempranas. Es importante sealar que las medidas iniciadas en 1991 para control del clera se han visto recompensadas por una reduccin significativa de enfermedades diarreicas bacterianas y parasitarias. Dentro de la parasitosis en que juegan un papel los transmisores biolgicos, el paludismo, sin duda, la ms importante y sigue requiriendo de medidas preventivas y de vigilancia epidemiolgica. El hecho de que un pas tenga que sufrir enfermedades parasitarias con ndices de frecuencia importancia, no solo es seal de facultad desarrollo, sino que adems dichas parasitosis le estn produciendo grandes prdidas econmicas al pueblo que las soporta. En Amrica Latina el problema del parasitismo es muy importante y de las parasitosis intestinales, en particular enorme, ya que las encuestas epidemiolgicas realizadas por los distintos autores de los pases Latinoamericanos as lo sealan, tanto de las protozoosis como de las helmintiasis, encontrndose con frecuencia poliparasitismo en un mismo individuo, con afectacin principal de los preescolares y escolares. Si las parasitosis se evalan en trminos econmicos, se refleja la verdadera importancia que tienen para un pas determinado. En general, los conceptos que se toman en consideracin para efectuar dichas valoraciones son, entre otros: los gastos causados por atencin mdica, hospitalizacin, ausentismo en el trabajo, medicinas, prdida de salario, defuncin, etc., lo que expresado en dinero da una idea aproximada del problema. Se podran seguir mencionando ejemplos que sealen el impacto socioeconmico de las parasitosis, pero todos ellos nos llevaran a comprobar el elevado costo que tienen que pagar los pases subdesarrollados por mantener a la multitud de especies de parsitos que generalmente existen en sus habitantes. Es importante sealar que las costumbres de los pueblos hacen que aumenten o disminuyan algunas parasitosis, como por ejemplo la costumbre de no ingerir carne de cerdo parasitada por larvas de T. Solium que practican algunos pueblos del mundo como el israelita, hace que disminuyan o desaparezcan la teniasis, por el contrario la matanza clandestina de cerdos y la ingestin de carne con "zahuate", "granillo" o "tomatillo" (carne de cerdo cisticercosa) que con estos nombres la piden algunas personas del pueblo de Mxico, por ser ms barata y segn dicen ms sabrosa, incrementa las posibilidades de teniosis, y si adems, se practica el fecalismo al aire libre, aumentan las posibilidades de adquirir cisticercosis. Es notorio que la simple prctica del lavado de manos antes de comer, as como lavado de frutas y verduras disminuyen considerablemente las parasitosis intestinales (2).

HISTORIA DE LA PARASITOLOGIA: La parasitologa se inicia con el hallazgo de los parsitos por el hombre, hecho que tiene su origen en los tiempos ms remotos y que se pierde en la bruma del pasado histrico de la humanidad, pero los descubrimientos a este respecto por los antiguos chinos, griegos, egipcios, persas, etc., han quedado consignados de tal manera que el estudiante actual es capaz de reconocer por el anlisis de los manuscritos que dejaron para la posteridad, los adelantos que sobre los parsitos y enfermedades parasitarias se realizaron hace muchsimos aos. Los mdicos chinos en la antigedad, podan distinguir los cuadros clnicos del paludismo por el tipo de fiebres que observaron en: terciana, cuartana, estiotonal y relacionarlas con el paludismo como lo hicieron griegos y romanos siglos ms tarde. Entre los egipcios se describe probablemente al gusano Taenia saginata y se prescribe tratamiento para eliminarlo. Moiss entre los israelitas y despus de haber recibido instruccin mdica con los sacerdotes egipcios, dicta leyes sanitarias para proteger a su pueblo de plagas de insectos y de la carne de animales infectados con piedras (Cysticercus cellulosae forma larvaria de Taenia solium) que en los cerdos reconocan por el examen que se realiza mediante la inspeccin de la lengua, mtodo que se emplea aun hoy en da en muchos pases para hacer el diagnstico de cisticercosis en los cerdo vivos. Quizs uno de los primeros intentos de clasificacin de los parsitos fue realizado por Avicena, mdico persa al descubrir gusanos redondos, as como gusanos planos, seal los sntomas producidos por estos parsitos y prescribi remedios contra ellos. Los descubrimientos aqu sealados y muchos otros ms, han hecho que la parasitologa ocupe un lugar de primersima relevancia e importancia en Mxico y en el Mundo (3).

OBJETIVOS: 1. Valorar la magnitud de los problemas parasitarios a nivel nacional reconociendo las estrategias epidemiolgicas apropiadas para el control y prevencin. 2. Reconocer las principales presentaciones clnicas de las parasitosis. 3. Aplicar las principales tcnicas utilizadas para el diagnstico parasitario, los requisitos y caractersticas de una adecuada toma de muestra y los sistemas de derivacin a los laboratorios de diagnstico en parasitologa.

PARASITOLOGIA APLICA El diagnstico parasitolgico se inicia cuando el mdico considera que las manifestaciones clnicas que presenta un paciente, pueden deberse a una parasitosis y, para su confirmacin, le indica la realizacin de un examen parasitolgico. Para lograr un resultado certero, existen elementos que orientaran la bsqueda al microbilogo, y que estn relacionados con los antecedentes epidemiolgicos y clnicos del paciente.
Antecedentes

epidemiolgicos: lugar de residencia, procedencia, caractersticas de la vivienda, provisin de agua, tratamiento y eliminacin de excretas, presencia de animales domsticos, realizacin de viajes, antecedentes maternos, etc. Estos datos sern de ayuda para considerar qu tipo de parsitos pueden estar involucrados. clnicos: aunque en las parasitosis existe un amplio polimorfismo clnico, se dan una serie de signos y sntomas que pueden ser asociados y caracterizan a las diferentes entidades parasitarias. Ser de utilidad conocer talla, peso, edad, enfermedad de base y la presencia o no de: diarrea, tipo y evolucin, prurito anal, anorexia, decaimiento, vmitos, alteraciones del comportamiento, afecciones respiratorias, cuadros febriles, hepatoesplenomegalia, adenopatas, etc.

Antecedentes

Estos datos, unidos al antecedente epidemiolgico brindarn informacin para el diagnstico presuntivo y nos permitir conocer qu tipo de muestra ser la ms adecuada y representativa y qu metodologa se deber aplicar para alcanzar el diagnstico de certeza. En relacin a las enteroparasitosis el hombre acta en general como husped definitivo albergando los estadios parasitarios adultos con la consecuente eliminacin de elementos infectantes o potencialmente infectantes (huevos, larvas o quistes). El reconocimiento de stos servir en la mayora de los casos para alcanzar el diagnstico. Los parsitos cuyo hbitat son los tejidos, incluyendo la sangre, producen una sintomatologa ms florida, consecuencia de diferentes acciones directas, como destruccin de parnquimas, atrofias, hiperplasias, as como indirectas mediadas por mecanismos inmunolgicos. Adems la respuesta inmune del husped ante el estmulo de los antgenos parasitarios conduce la produccin de anticuerpos que pueden ser detectados con fines diagnsticos (4). Parasitismo: Los criterios que diferentes autores que han ido aportando para definir la relacin parasitaria son variables, haciendo hincapi unos en factores que otros no consideran. Se exponen algunas de las definiciones, que nos muestran la evolucin del concepto a lo largo del tiempo. Leuckart, defini lo parsitos en 1879, como: "Animales
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que encuentran su alimento y albergue en otros seres vivos". Para l, la forma de alimentarse es lo ms caracterstico de los parsitos. Posteriormente se aadi al concepto de parasitismo el hecho de que el parsito debe de causar un efecto perjudicial en el hospedador. El parsito depende para su vida del hospedador, al cual no destruye, pero le inflige un dao mayor o menor que puede llevarle a situaciones graves. Ejemplo: Aunque en circunstancias de cautividad o enfermedad, los parsitos pueden llevar a la muerte del hospedador, como sucede con el Okapi, que en la selva tropical alberga ms de 20 especies de gusanos intestinales, sin que aparentemente le causen problemas. Pero en cautividad, y alimentado con pienso como cualquier herbvoro, desmejora rpidamente y termina por morir. Leuckart opinaba que la diferencia entre el parasitismo y la depredacin estriba en el hecho de que la vctima es matada por el depredador, y es lo mismo que deca Elton (1935) la diferencia entre un depredador y un parsito es la misma que existe vivir del capital o vivir de las rentas. Para Leuckart tambin tiene importancia el tamao del parsito respecto al hospedador, siendo siempre ms pequeo que este ltimo. En realidad tambin existen depredadores de menor tamao que sus presas llamados parasitoides, que se introducen en las presas a menudo en forma de huevos, y desarrollan sus fases larvarias a expensas de su presa. Esto sucede en numerosas especies de insectos, fundamentalmente del orden de los Himenpteros (Aphelinus malli Cinpedo parasitoide del Pulgn langero, empleado en el control de plagas). Braun (1883), da un enfoque ecolgico a las relaciones parasitarias y seala que el parasitismo es un fenmeno puramente ecolgico, pues el hospedador constituye a la vez, adems de alimento, la habitacin que ocupa temporal o permanentemente. Los ectoparsitos que viven permanentemente sobre animales, son carnvoros que no destruyen a sus presas, siendo difcil saber si los hematfagos como los mosquitos, chinches, sanguijuelas, vampiros, etc, son parsitos o unos depredadores muy especializados. Las asociaciones parasitarias muestran tambin vez muchas gradaciones, atendiendo a la dependencia del parsito de su hospedador. Trnsitos entre las diferentes categoras de simbiosis los diferentes tipos de simbiosis y sus categoras son tiles para clasificar las asociaciones simbiticas naturales, pero existen ciertas asociaciones son transitorias. Tipos de parasitismo.- No todas las asociaciones interespecficas pueden ser consideradas como autnticas relaciones de parasitismo. Puede existir un pseudoparasitismo o parasitismo accidental, que se produce cuando un animal de vida libre entra en otro accidentalmente y mantiene, durante un cierto tiempo, vitalidad en el interior de este, e incluso puede llegar a producirle trastornos.

Ejemplo: Es frecuente que en los pases clidos se produzca la llamada escarabiasis. Es decir, que escarabajos Tenebrinidos sean ingeridos por los hombres con los alimentos (arroz, harinas) y posteriormente se expulsen con las heces, en diferentes fases de desarrollo. Otro tipo de parasitismo accidental lo constituira el caso de los parsitos errtico o larva migrans. Es una infestacin que sufre el hombre de un parsito no especfico, y por lo tanto, no consigue cerrar su ciclo biolgico y se desarrolla de forma anormal errando durante cierto tiempo bajo el tejido cutneo y por las vsceras. Verdadero parasitismo: Cuando en las relaciones de simbiosis que se establecen entre especies diferentes, una de ella (el parsito) pasa a depender de determinados productos metablicos (alimento, enzimas digestivas) de la otra, la relacin se hace entonces obligatoria, e ineludible, porque el parsito no puede, normalmente, sobrevivir privado del estrecho contacto con su hospedador, bien durante toda su vida o en ciertas fases de ella. Parasitismo facultativo u ocasional: Determinados organismos de existencia libre, ocasionalmente se adaptan a la vida sobre o en el interior de un hospedador, pudiendo llevar posteriormente vida libre. Ejemplo: Las sanguijuelas Glossiphonia complanata y Haemopis sanguisuga normalmente depredadoras de otros invertebrados, puede ser hematfagas de vertebrados si se le presenta la ocasin. Lo mismo sucede con el chinche Reduvius personatus, que son cazadores pero pueden ser hematfagos de mamferos. Podemos encontramos muy diversos grados de dependencia entre el parsito y su hospedador. Dependiendo del tiempo que dure la relacin, podemos encontrar parsitos intermitentes o temporales, que visitan a su hospedador temporalmente para satisfacer alguna de sus necesidades metablicas. Ejemplo: Los artrpodos hematfagos) que, tras sucionar la sangre de sus hospedadores, llevan una existencia libre. Otros lo son durante toda la vida. No pueden vivir con independencia de sus hospedadores, ni por ubicacin, ni por alimentacin. Ejemplo: Algunos parsitos como las filarias (un tipo de Nematodos), tienen una dependencia total y son siempre endoparsitos, por lo que para encontrar un nuevo hospedador, necesitan realizar cambios importantes en su biologa. El parasitismo cclico: Algunos parsitos lo son slo en su estado adulto, conservando una fase larvaria de vida libre, y en algunos casos exclusivamente la fase de huevo, en cuyo interior se desarrolla el juvenil. Esta fase libre, es con frecuencia un estado de resistencia que permite la transmisin e infestacin de nuevos hospedadores.
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1) Una fase parasitaria en el ciclo biolgico: a) Parasitismo protlico: La fase larvaria o juvenil es parsita y el adulto libre. b) Parasitismo imaginal: La fase adulta es parsita y las larvas o huevos son libres. Es el tipo ms comn. 2) Parasitismo recurrente, en diferentes fases de una generacin: Un mismo individuo a lo largo de su ontogenia vive varias veces como parsito, alternando con fases libres. 3) Alternancia de generaciones libres y parsitas: Ejemplo: El Nematodo Rhabdias bufonis, cuyos adultos son hermafroditas, vive parsitos en los pulmones de las ranas. Los huevos salen al exterior originando machos y hembras de vida libre, que se reproducen formando larvas que buscan a un nuevo hospedador para seguir una existencia parasitaria. 4) Recurrencia al parasitismo en diferentes generaciones: En animales con ciclos biolgicos complejos en los que varias generaciones recurren al parasitismo. Ejemplo: Como sucede con los Trematodos en los que existes varias generaciones: 1huevo - miracidio - esporoquiste; 2- redia; 3- redia hija; 4- cercaria - metacercaria adulto. Huevos, miracidios y cercarias son libres, mientras que en el resto hay recurrencia al parasitismo. Tipos de ciclos vitales de los parsitos. La ontogenia del parsito comprende una serie sucesiva de estados: huevo, larva y adulto. Cuando el parsito puede desarrollar su ciclo completo dentro del mismo hospedador, se dice que son parsitos monoxenos (de un solo hospedador). Pero en ocasiones el ciclo de vida de los parsitos es ms complejo, al tener que aadirse, para el desarrollo de alguno de sus estados, un nuevo hospedador. Es decir, el adulto parasita un hospedador diferente del de las larvas. Los que tienen este ciclo de vida se llaman parsitos heteroxenos (diferentes hospedadores). A su vez pueden coincidir otra serie de circunstancias que dan variabilidad al ciclo. Tipos de hospedadores. En los parsitos heteroxenos, dependiendo del estado en que se encuentre, el hospedador que lo alberga recibe un determinado nombre que hace alusin al mismo. As por ejemplo, el hospedador que porta al parsito en estado adulto se denomina hospedador definitivo. En l, el parsito adulto se reproduce por anfigonia (reproduccin sexual con fecundacin).
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Los otros hospedadores utilizados por el parsito para sus fases larvarias se llaman hospedadores intermediarios. En ellos, los parsitos sufren importantes cambios en su desarrollo y alcanzan la forma juvenil que llegando al hospedador definitivo alcanzar la madurez sexual. Los hospedadores intermediarios son infectados por la ingestin de huevos del parsito o invadidos activa o pasivamente por sus formas larvarias. Los parsitos no se reproducen en el hospedador intermediario, y si lo hacen es por va asexual o por partenognesis. A veces pueden existir varios hospedadores intermediarios, y tantos hospedadores intermediarios como estadios larvarios del parsito. Si no se ha descubierto reproduccin sexual en el parsito, como en Trypanosmidos, no se puede conocer cul es el hospedador definitivo ni el intermediario, se habla entonces de hospedador vertebrado u hospedador invertebrado. Hospedador paratnico, es un hospedador adicional al ciclo biolgico, que no es necesario para el parsito, pero que aumenta las posibilidades de xito del parsito, al permitirle seguir con vida y a la espera de su hospedador definitivo. Hospedador acumulador: Es un caso especial de hospedador paratnico, que favorece que el ciclo del parsito pueda completarse. Etapas de la vida parasitaria: La llegada a la vida parasitaria se ha producido por evolucin a partir de la vida libre. Como lo demuestra el hecho de que muchos animales parsitos siguen conservando una fase de vida libre, aunque a veces reducida exclusivamente a la fase de huevo. Si bien la vida dentro del hospedador ofrece todo tipo de ventajas al parsito que la consigue, el camino para llegar a instalarse en un nuevo hospedador est lleno de obstculos y dificultades que el parsito debe de vencer antes de poder establecerse en su nuevo hospedador. De la superacin de todas estas etapas depende el xito del asentamiento. Siguiendo a Cheng (1978) podemos diferenciar tres FASES o ETAPAS en los procesos de adaptacin a la vida parasitaria: 1- Contacto hospedador- simbionte; 2- Asentamiento del simbionte; 3- Salida del simbionte. Reacciones del hospedador frente a los parsitos: Tras el contacto entre el parsito y el potencial hospedador, se desarrolla en este ltimo una serie de reacciones que tienden a neutralizar la accin del parsito y protegerse de la
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invasin. Los animales, en general, tienen mecanismos para reconocer lo propio frente a lo extrao y desencadenan respuestas innatas (no especficas) que son genticos y una capacidad natural de defensa y otras de carcter inmunitario de tipo adaptativo. Mientras que la respuesta innatas es similar e independiente del parsito, y no se altera en encuentros sucesivos, la respuesta adquirida tiene dos importantes caractersticas: la especificidad y la memoria. Tipos de respuestas innatas: exige un contacto directo con las clulas responsables de la detencin o destruccin del parsito. Forman la primera lnea defensiva y estn presentes en las superficies corporales de los animales y en muchos invertebrados constituyen la nica barrera defensiva.

Fagocitacin: La actividad fagoctica de las clulas de la hemolinfa, cuando el tamao del parsito lo permite, es de gran importancia.

En muchos casos se producen reacciones locales, como respuesta de las clulas o tejidos de la zona de implantacin del parsito. Son de stos tipo:

La respuesta inflamatoria es la base de las reacciones inespecficas de los vertebrados. Tiene tres funciones: limitar la invasin parasitaria, facilitar la llegada de clulas inflamatorias al lugar de la penetracin y potenciar diversos aspectos del metabolismo del hospedador. Es producida por la dilatacin vascular, acmulo leucocitario y extravasacin de fluidos tisulares, y se produce bien en el punto de penetracin o en el lugar de localizacin del parsito. Formacin de una cpsula: Cuando un parsito es demasiado grande para ser fagocitado, tras una leucocitosis, se suele producir la encapsulacin. En Insectos la encapsulacin es un proceso de tipo celular, mientras que en Moluscos est formado principalmente por fibras.

Se dan procesos inflamatorios y existe una estimulacin del desarrollo de tejido conectivo que engloba al parsito aislndolo del resto del organismo y produciendo generalmente la muerte del parsito, aunque en ocasiones puede seguir un desarollo normal, como sucede con la larva del Nematodo Angiostringylus cantonensis parsito del caracol africano Achantina fulica. A veces, tambin se forman depsitos calcreos en torno a la cpsula como en Trichinella spiralis.

Formacin de perlas: Es un caso especial de reaccin defensiva del manto de los Bivalvos ante algunos parsitos, que rodea a los mismos con una secrecin de ncar que puede llegar a ser muy gruesa. El parsito nacarizado muere.

La nacarizacin no precisa presencia de parsito (sustancias qumicas), la simple introduccin de un cuerpo extrao la desencadena, lo que se utiliza para producir perlas cultivadas.

La melanizacin: En los Insectos (y algunos Moluscos) se produce un acumulo de melanina en torno al parsito invasor que puede llegar a producir la muerte del mismo, especialmente cuando son Helmintos o artrpodos. La velocidad de melanizacin vara dependiendo del tipo de parsito. Factores humorales: Algunos son de tipo bactericida, otros actan como txicos de determinados parsitos causndoles la muerte al contacto con la hemolinfa del hospedador. Formacin de agallas y tilacias: Es una reaccin tisular a sustancias irritantes fabricadas por los parsitos que originan la hiperplasia y/o hipertrofia de tejidos o clulas en estados embrionarios. Las clulas tienen un marcado carcter indiferenciado. Estas neoformaciones tienden al aislamiento de los parsitos que quedan en el fondo de un saco. El primer caso es propio de vegetales, en las yemas de las hojas. En los animales es mucho menos frecuente y tambin reciben la denominacin de zoocecidias y slo se producen en estado huevo o larva. Se pueden encontrar en algunos Ispodos, Coppodos, Gasterpodos y numerosos Mizostmidos.

Mecanismos adquiridos de defensa interna: Una vez que el parsito ha superado los mecanismos de resistencia innata, se ponen en marcha otros sistemas especficos de resistencia inmunitaria que posee un componente celular y otro humoral. El desarrollo de verdaderos anticuerpos en invertebrados no est demostrado, aunque si respuestas humorales contra infecciones bacterianas (Stephens, 1963; Briggs, 1964) y en algunos Anlidos y Artrpodos se han mostrado inmunidad a los trasplantes.( Hildemamm y Cooper, 1970) La nica evidencia de inmunidad celular adquirida se ha encontrado en el caracol Biomphalaria glabrata, previamente curado de una infeccin por Schistosoma mansoni, que en una segunda infeccin muestra ciertas reacciones tisulares, no presentadas en el primer contacto con el Trematodo. Reacciones de inmunidad: Los elementos celulares responsables de las reacciones inmunes son: los leucocitos, los macrfagos, leucocitos polimorfonucleares, clulas asesina y los linfocitos T. Mientras que el componente humoral se compone del complemento y de los anticuerpos procedentes de los linfocitos B. La respuesta inmunitaria es la base para el desarrollo de nuevos mtodos de diagnstico (inmunodiagnstico), ya que las infecciones por protozoos desarrollan inmunidad
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adquirida, al igual que los diferentes helmintos, y desde el punto de vista prctico (inmunoprofilaxis) puede ensayarse para la inmunizacin frente a determinados parsitos. Esto ltimo solo se ha conseguido en unos pocos casos. Algunas reacciones frente a los helmintos parsitos: Sirven para el diagnstico de determinadas parasitosis de Trematodos, Cestodos y Ascridos.
o Reaccin

CHR: Cuando las cercarias de Schistosoma mansoni se ponen en contacto con suero de un mamfero afectado, se forma en torno a la cercaria una reaccin de precipitacin. o Aglutinacin cercarial: Es otro tipo de reaccin inmunolgica producida que muestra la presencia de anticuerpos frente a Schistosoma mansoni . Esta prueba se realiza para el diagnstico con suero de conejo, hamster, o ratn, que estn infectados. o Precipitacin cercarial: Semejante a la CHR, pero la cubierta granulosa precipitada en torno a la cercaria. Esta reaccin no es uniforme. Su valor de diagnostico no es fiable. o Inmovilizacin miracidial: Es la respuesta de los miracidios a los efectos de los anticuerpos del suero de hospedadores infectados. o Precipitacin de nematodos: En un suero con anticuerpos, en torno a los orificios oral y anal de los nematodos se forman precipitados blancos opacos. Evasiones de la respuesta inmunitaria.- A pesar de las defensas del hospedador, los parsitos son capaces de evadir la respuesta inmune del mismo e instalarse en l produciendo infecciones agudas o crnicas. Para ello aprovechan situaciones de menoscabo en el hospedador y desarrollan respuestas a las defensas del mismo. Constitucin gentica del hospedador: Existen hiptesis que proponen que determinadas constituciones son responsables de las fuertes infecciones parasitarias, tanto dentro de un grupo de especies, como en una misma especie hay poblaciones ms sensibles que otras a padecer infestaciones parasitarias. Estado fisiolgico del hospedador: La gestacin, lactacin, estrs y desnutricin, son factores que afectan negativamente al hospedador, ya que la alteracin hormonal tiene efectos adversos en la produccin de clulas linfoides y produce inmunodepresin y descenso en el nmero de linfocitos T, lo que todo ello unido facilita el acceso del parsito. El estrs producido por las bajas temperaturas facilita la infeccin bacteriana en los animales. Ejemplo: Los pollos, en condiciones normales, son resistentes al antrax, pero son susceptibles de contraerlo en ambientes fros.
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La edad: Tanto los animales neonatos, como los viejos son ms susceptibles de infestaciones por parsitos que los maduros. En los neonatos, a pesar de que es sistema inmunitario es competente, se desconoce la causa del aumento de parasitosis. En los animales viejos, hay un descenso progresivo de la capacidad funcional de los linfocitos T y B. Por su parte el parsito puede reducir el carcter inmunogeno de los antgenos parasitarios del hospedador, escondindose en el interior de las clulas de los hospedadores, o en las partes del cuerpo donde los ataques inmulolgicos son menos eficaces. Manipulacin de la respuesta inmunitaria del hospedador: La presencia de los parsitos pueden producir inmunodepresin por la patologa provocada por el mismo. Produccin y liberacin de enzimas que destruyen los anticuerpos del hospedador: Fasciola hepatica que digieren por medio de proteasas la fraccin activa de los anticuerpos producidos por el hospedador. Densidad de poblacin y comportamiento del hospedador: Tanto de los hbitos depredadores de los hospedadores definitivos, como de la densidad de poblacin de los hospedadores intermediarios, depende el destino y distribucin de muchos parsitos. Se puede considerar como un indicador de la productividad del medio la riqueza diversidad de los parsitos de una determinada zona. El agua: La ausencia de medio acuosa puede impedir el desarrollo de gran nmero de especies parsitas de Trematodos, que utilizan los invertebrados acuticos. En otras ocasiones las fases larvarias de vectores de parsitos, como los mosquitos, slo se completan con la existencia de medios encharcados. Muchos estados larvarios e infectivos de parsitos son libres y nadadores, por lo que la ausencia del medio impiden su ciclo. (Miracidios y formas infectivas de Nematodos) La mayor velocidad de la corriente de los cursos de agua favorece la infestacin experimental de ratones por metacercarias de Schisostoma mansoni , pues cuando el nmero de cercarias, por volumen de agua, es constante, a mayor velocidad del agua se produce en el mismo tiempo mayor nmero de encuentros y pr lo tanto mayor posibilidad de infestacin. Factores fsicos como T, concentracin de Oxgeno, pH, salinidad, pueden tambin influir en la densidad de los parsitos.
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La variacin estacional: A lo largo de las diferentes estaciones anuales se producen fluctuaciones tanto del nmero como de la composicin de la fauna parsita sobre un determinado hospedador. Propagacin a nuevos hospedadores. Con el desarrollo de las comunicaciones y el movimiento de animales y del hombre, los radios de accin de determinados parsitos se han ampliado, pudiendo encontrar nuevos hospedadores intermediarios adecuados. Por evolucin, (mutaciones casuales), los animales muestran una progresiva tolerancia a factores ambientales nuevos, ligeramente diferentes, que tiende a ampliar su distribucin. En este aspecto, los parsitos ven limitadas sus posibilidades con respecto a los animales libres, pues los ambientes internos de los diferentes hospedadores no suelen mostrar "ligeras diferencias", si no "grandes diferencias", por lo que para los parsitos la adaptacin es total o no lo es. Como ya hemos visto, las afinidades de los parsitos por sus hospedadores (especificidad), es muy variable. Puesto que el ambiente de los parsitos es menos mutable que el de sus hospedadores, los animales con ste tipo de vida pueden cambiar relativamente poco, en ellos la evolucin se produce ms lentamente. Sin embargo en determinadas ocasiones un parsito puede adaptarse a un hospedador que no est filogeneticamente emparentado con su hospedador habitual. Para muchos parasitlogos esta diferencia en los hospedadores indica que no se trata de la misma especie de parsito, si no de especies diferentes, o como poco, variedades o razas de una misma especie. Una situacin semejante se produce con la existencia de subespecies o razas geogrficas de animales de vida libre. DIAGNOSTICO PARASITOLOGICO El diagnstico por el laboratorio de las parasitosis generalmente se confirma por el hallazgo directo del parsito, o por la deteccin de la respuesta inmune que provoca siendo importante por lo tanto el empleo de las mejores tcnicas y de personal debidamente capacitado, cuidadoso y que disponga de los medios y el tiempo necesario para realizarlos. Bsicamente en materia fecal se buscan dos tipos de parsitos: Protozoariosy Helmintos; en el primer caso el laboratorio deberde determinar si el objeto examinado es o no un
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protozoario. La diferenciacin de protozoarios con objeto no parasitarios es uno de los mayores problemas para el microscopista; existen tres grupos de objetos no parasitarios que pueden confundirse con ellos, clulas del husped, detritus fecales y organismos no protozoarios. A.- fijacin y conservacin de parsitos.- Para conservar los parsitos de forma indefinida, a fin de que su morfologa y estructura no se alteren con el tiempo, es preciso fijar los tejidos. Dependiendo del grupo zoolgico al que pertenezca el parsito que pretendemos conservar, y la naturaleza de sus estructuras corporales, la tcnica empleada podr variar. En el caso de que se trate de animales blandos, musculosos o retrctiles, previamente a la fijacin se debe proceder a la relajacin del animal, para que pueda permitir su estudio y determinacin sin alteraciones morfolgicas. Relajacin: Los animales pueden ser dormidos o relajados con varios procedimientos: a) Con lquidos calientes (70-75C). El lquido de Travasos a 70-75C hace que el cuerpo, de los Nematodos sumergidos el l, se relaje y estire, antes de que mueran. b) Con fro: Colocando a los ejemplares en medio isotnico y enfrindolos en la nevera. (En el caso de las duelas y otros platelmintos, da buen resultado situar los animales entre dos lminas de cristal y mantenerlas apretadas hasta su muerte y posterior fijacin.) c) Colocando los ejemplares vivos en medio isotnico al que se le va aadiendo lentamente solucin alcohlica de mentol y en el que deben de permanecer una hora. Conservacin indefinida: Los parsitos se pueden conservar indefinidamente en lquidos con base en fijadores como el formol 4% o el alcohol 70 %, dependiendo del filo, pero conviene realizar una fijacin previa con fijadores ms especficos. Etiquetado: Para que un espcimen o una muestra tengan valor y puedan servir como base de un estudio cientfico debe ineludiblemente de ir acompaado de etiquetas identificativas en la que se indiquen: Nombre especfico, Nombre del hospedador, Ubicacin del parsito, Localidad de recogida, fecha, y colector. B.- DETECCIN Y DIAGNSTICO.- Los procedimientos seguidos para la determinacin de los diferentes grupos de parsitos dependen de la naturaleza, localizacin y abundancia de los mismos, siendo algunos ms adecuados que otros. Examen de sangre.-Condiciones generales del Laboratorio y material de Anlisis: La preparacin de buenas extensiones sanguneas depender en gran medida de la pulcritud
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de los porta y cubreobjetos, as como del resto del material analtico, que debe de estar perfectamente lavado en alcohol y secado, antes de preparar la extensin. Para preparaciones permanentes se debe utilizar material nuevo. La preparacin de sangre fresca debe ser suficientemente delgada para que no queden los parsitos enmascarados por las clulas sanguneas. Se coloca una gota en un porta (pudiendo diluirse con suero salino) y se tapa con cubre para evitar la coagulacin. El anlisis de sangre fresca es prctico para la deteccin de trypanososmas y microfilarias, por su caracterstica forma de moverse. Los trypanosomas se ven con un objetivo potente y poca iluminacin. Las microfilarias se detectan con bajos aumentos. El movimiento en vivo de los parsitos atrae la atencin del observador facilitando el trabajo. Pero para su determinacin especfica es necesario realizar una posterior tincin permanente. Preparaciones permanentes: Es preferible emplear sangre, eliminando previamente con alcohol la grasa de la piel. La incisin debe ser limpia y profunda, sin que se precise apretar la herida para que sangre. La extensin debe de ser rpida para evitar la coagulacin. Es preferible la sangre arterial pues la venosa distorsiona los resultados Para el estudio de parsitos de la Malaria, Trypanosomas, Filarias y otros, se deben de hacer frotis, tanto finos como gruesos. a.- Frotis: Es una capa de clulas sanguneas regularmente distribuidas. Los frotis delgados producen poca distorsin en la estructura morfolgica de los parsitos. Se usan para detectar la malaria, trypanosomas y microfilarias. Es fundamental que la extensin sea delgada. Si la pelcula de sangre es demasiado gruesa no se ve la estructura del parsito. Se coloca una gota de sangre a 2 cm del extremo de un porta; con el borde de otro porta se contacta con la gota de sangre y se deja que se extienda la sangre por la lnea de contacto. Se desplaza el segundo porta sobre el primero con una inclinacin de 30, haciendo una extensin uniforme y fina. Se deja secar al aire. Posteriormente puede teirse. Los frotis gruesos o Preparaciones en gota gruesa se hacen colocando una gota de sangre sobre un porta, y con la esquina de otro porta se extiende la sangre con movimiento circular y un dimetro de 15 mm. Se deja orear toda la noche, y la sangre se hemoliza a l colocar el portaobjetos en agua destilada. (Se puede omitir la hemolsis si se tie con Giemsa 1:50).

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Los frotis gruesos, aunque producen la distorsin de los parsitos, permiten analizar mayor cantidad de sangre y aumentan la probabilidad de detectarlos, haciendo el anlisis tres veces ms rpido. Sin embargo, si se hacen mal resultan intiles. b.- Fijacin: Se pueden sumergir en alcohol metlico absoluto, durante 30 segundos. c.- Coloracin: A veces el colorante lleva incorporado el fijador, por lo que es simultnea. - Coloracin Wright (con alcohol metlico). De rpida accin y buenos resultados. - Coloracin Giemsa: De ms precisin. d.- Examen de otros tejidos: Improntas tisulares: Ayudan a localizar parsitos intracelulares como Leishmania y Toxoplasma Los ndulos linfticos en fresco, material de bipsia heptica o mdula sea se aplican sobre un portaobjetos limpio y se deja secar y se tie como una extensin sangunea. Examen de contenido duodenal. Debe de hacerse una diseccin cuidadosa con apertura del tubo digestivo mediante incisin, y un raspado de la mucosa interior. Es el mtodo ms fiable para el estudio de larvas de Strongyloides o Nematodos y Cestodos adultos, as como de otros parsitos intestinales como Giardia, Isospora y Criptosporidium. e.- Mtodos serolgicos: Son cada vez ms tiles para el diagnstico de parasitosis, en las que no se puede llegar al diagnstico con los anlisis de sangre o coprolgicos, o en estudios epidemiolgicos generalizados (Laboratorio de Sanidad Animal de Jove, Gijn.). Tambin sirven para confirmar diagnsticos poco seguros de amebiasis heptica, toxoplasmosis, esquistosomiasis y toxoplasmosis. Entre las ms frecuentes se encuentran las de inmunofluorescencia, precipitina en portaobjetos, tubo y agar, fijacin de complemento, aglutinacin de partculas y de inmunoensayo de enzimas ligada (ELISA). f.- Estudios Coprolgicos: Examen de heces. (Atencin a la contaminacin fecal)
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Existen diversos procedimientos indicados segn el tipo de parsito que se pretende identificar, siendo importante usar la adecuada, pues de lo contrario el parsito se hace muy difcil o imposible de identificar. g.- Tcnicas de concentracin: Deteccin de huevos larvas de helmintos y quistes de protozoos. Para facilitar el encuentro de los elementos diagnsticos, con estas tcnicas se produce la concentracin de los mismos en la muestra tomada. Tienen como objeto la separacin de quistes de Protozoos y huevos y larvas de helmintos del resto de la materia fecal, por medio de su densidad especfica: por sedimentacin y por flotacin. Tcnicas de Sedimentacin: Mtodo sin centrifugacin: 1- Se emulsionan 3 gramos de heces junto a un volumen de agua 20-30 veces superior, en un matraz (se pueden utilizar perlas de cristal para su disgregacin). 2- Se filtra a travs de una gasa mojada (o una malla de dimetro calibrados, segn el tamao del parsito que busquemos), a una copa cnica graduada de 500 ml, que se llena con agua hasta 2.5 cm del borde. Se agita para suspender uniformemente. 3- Se deja reposar 30-40 mints. y quita el sobrenadante hasta la marca de 100 ml y se vuelve a llenar de agua. Se repite 3- 4 veces hasta que el sobrenadante aparezca claro. 1. Se tira el sobrenadante hasta 10 ml. Sedimentar 30 mint. Observacin al microscopio de 2-3 gotas entre porta y cubreobjetos largo ( de 40 mm). Recomendado: Para huevos de trematodos y operculados de cestodos (de gran densidad).

Tcnica de sedimentacin de Ritchie: formol-ter) Mtodo con centrigugacin.

Muy til para la concentracin de quistes y huevos, puede aplicarse a muestras fijadas. (Empleada en el Ambulatorio de la Lila). Tcnicas de flotacin: Los resultados se mejoran en la separacin de los parsitos, basados en la diferencia del peso especfico entre los huevos de helmintos, larvas y quistes de protozoos y la solucin

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utilizada (cuya densidad oscila entre 1.18 y 1.20) por lo que los huevos de los Nematodos flotan. (Los de los Trematodos, y Cestodos Pseudofilineos , no). Los huevos pueden concentrarse en la superficie por centrifugacin (estratificacin segn diferencias de densidades) o por ascensin. (Tubos verticales en la gradilla durante 1 hora). Observacin al microscopio: Tras la concentracin por cualquiera de los mtodos se lleva una gota del material obtenido al portaobjetos y se aade una gota de colorante de Iodo para teir los quistes de los protozoos que puedan existir. Tcnica de recuento de huevecillos: Sirve para el control de la eficacia del tratamiento empleado, ya que con su conocimiento se puede inferir la magnitud de la infestacin del parsito, y si este responde al mismo, ya que existen datos numricos de la cantidad de huevos que diariamente liberan cada hembra adulta de helminto. Se debe evaluar un peso conocido de heces, aunque existen muchas variables que pueden influir en la alteracin de los datos (malas digestiones, tipo de dieta, ciclos de produccin de los huevos, consistencia de las heces) (5). Toma de Muestras Para que la muestra recogida sea adecuada debe impedirse que el paciente ingiera medicamentos a base de carbn, sales de bario, magnesio, bismuto y purgantes oleosos Asimismo, debe recomendarse que unas 72 horas antes de la toma de muestra se reduzca en la dieta las fculas y verduras. Las heces deben recogerse en frascos de cierre hermtico, limpios y secos, impidiendo la contaminacin con orina, y deben ser remitidas en su totalidad al laboratorio. En lneas generales, a excepcin de los casos que ms adelante se indican, el examen fecal puede demorarse hasta 24 horas, una mayor dilacin puede alterar el aspecto de las posibles formas parsitas existentes, imponiendo la necesidad de aplicar procedimientos para la conservacin de la muestra. Una excesiva conservacin da la misma sin adoptar precauciones, puede ocasionar: A.- Alteracin en la morfologa de los quistes de protozoos. B.- Destruccin de las fases trofozoicas de protozoos. C.- Embrionamiento e incluso eclosin de los huevos de ciertos nematodes (Ancylostoma, Necator, etc).D.- Metamorfosis de fases larvarias, p.e. paso de larva rabditoide a filariforme en Strongyloides. Si las circunstancias en que ha de realizarse la toma de muestras, impone un retraso en su examen, superior a las 24 horas, debern aadirse elementos que acten como conservadores o fijadores (6).

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ENVO Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA Condiciones especficas: Las muestras deben mantenerse en un ambiente fresco y lejos de la luz solar, se deben evitar las temperaturas extremas o el desecamiento, deben contener cantidades ptimas y estar en frascos o contenedores rotulados y con soluciones conservadoras.

Rechazo de una muestra: Es importante controlar cada hoja de pedido y verificar si tiene toda la informacin (etiquetado). De no cumplirse ello, se debe establecer contacto con la persona responsable para efectuar las correcciones necesarias. Los criterios para rechazar una muestra son los siguientes: No indicar el tipo de muestra o procedencia. No indicar el examen requerido. Demora en el envo al laboratorio. Muestra sin rotular o mal rotulada. Muestra que presente evidencia de haber sido derramada. Recipiente o contenedor inapropiado. Muestra con contaminacin.
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 Muestra escasa o seca en el hisopo o contenedor. Presencia de una sola muestra, a pesar de la presencia de varias rdenes. Volumen o cantidad inadecuada. En casos de rechazar una muestra, el personal de laboratorio debe explicar al solicitante las observaciones y motivos en la ficha de solicitud de diagnstico. Si no fuera posible la obtencin de otra muestra, revisar nuevamente los exmenes realizados. Tener en cuenta el examen parasitolgico por microscopia (7). OBSERVACIN E IDENTIFICACIN DE PARSITOS PARASITOSIS SANGUNEAS Y TSULARES POR PROTOZOOS MALARIA

AGENTES ETIOLOGICOS: Los parsitos causantes de la malaria son esporozoarios del orden Eucoccida, familia Plasmodiidae, gnero Plasmodium. Diferentes especies parasitan al hombre y a diversos animales. Las 2 especies principales de Plasmodium que afectan al hombre son, P. vivax y P. falciparum. Existen otras 2 especies, de importancia regional, que son P. malariae y P. ovale. Morfolgicamente pueden diferenciarse las 4 especies de Plasmodium cuando se observan preparaciones coloreadas. En sangre circulante se deben diferenciar tres formas parasitarias: a). Trofozoitos. Constan de dos partes, citoplasma que se colorea de azul y ncleo o cromatina, de color rojo. El citoplasma en los parsitos jvenes tienen forma de anillo y en los adultos es ameboide o en banda. La cromatina siempre es una masa nica compacta. El eritrocito parasitado puede sufrir deformaciones y presentar granulaciones rosadas, segn las especies. Los trofozoitos adultos de P. falciparum se ven nicamente en infecciones severas. b). Esquizontes. Presentan 2 ms masas de cromatina, segn el grado de maduracin. Cada masa de cromatina est rodeada de citoplasma. Los esquizontes maduros al terminar de dividir su cromatina estn constituidos por un acumulo de merozoitos, a veces en forma de roseta y con el pigmento malrico de color caf en la parte central del parsito. Segn la especie de Plasmodium, los eritrocitos parasitados presentan cambios de forma y tamao y presencia o ausencia de grnulos. En infecciones por P. falciparum slo se observan esquizontes circulantes en casos muy severos.
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c). Gametocitos, Ocupan casi todo el eritrocito o pueden estar libres. Constan de un citoplasma voluminoso de color azul que contiene pigmento malrico. La cromatina se presenta como una masa nica, algunas veces difusa, segn el sexo del gametocito. Estos son redondeados, con excepcin de P. falciparum que tiene forma alargada. Ciclo Esquizognico. El ciclo en el hombre comienza con la penetracin intracapilar de los esporozoitos a travs de la piel. Estas formas parasitarias son fusiformes, mviles, de aproximadamente 14 mieras de longitud, que rpidamente pasan a la circulacin, donde permanecen alrededor de 30 minutos antes de invadir los hepatocitos. Existen 2 etapas de reproduccin esquizognica, la preeritroctica y la eritroctica. a). Etapa pre-eritroctica. Se inicia con la penetracin de los esporozoitos a los hepatocitos. Dentro de cada hepatocito parasitado se forma el esquizonte tisular primario, constituido por mltiples ncleos con su correspondiente citoplasma. Este esquizonte madura, deformando la clula heptica y despus de 6 a 12 das sufre ruptura, liberando miles de merozoitos tisulares, los cuales van a la circulacin para invadir los eritrocitos. En P. vivax y P. ovale algunas formas tisulares se desarrollan muy lentamente en el hgado y pueden permanecer latentes por varios meses, por lo cual se han llamado hipnozoitos, cuando estos salen tardamente a la circulacin producen las recadas. Esto no sucede con P. falciparum y P. malariae. El nmero de merozoitos en el esquizonte preeritroctico, se ha calculado as: P. malariae 2.000, P. vivax 10.000; P. ovale, 15.000 y P. falciparum 30.000. b). Etapa eritroctica. Los merozoitos procedentes de esquizontes tisulares invaden los eritrocitos, en donde toman inicialmente forma anillada, denominados trofozoitos, que al madurar adquieren una configuracin irregular. Utilizan la hemoglobina para su nutricin, aprovechando la globina de la clula, de la cual queda como producto residual el pigmento malrico o hemozoina, que aparece en protoplasma del parsito como acmulos de color caf oscuro. Al dividir su cromatina constituye el esquizonte, que madura y toma forma de roseta, llamada as por distribucin de los fragmentos de cromatina, el citoplasma y el pigmento malrico.
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el se la P.

falciparum realiza la formacin de esquizontes en los eritrocitos adheridos a las paredes de los capilares viscerales. El esquizonte maduro al romper el eritrocito libera un nmero de merozoitos, de acuerdo a la especie de Plasmodium. La liberacin de merozoitos ocurre cada 48 horas en P. vivax, P. falciparum y P. ovale y cada 72 horas en P. malariae. Cada una de estas formas del parsito invade a un nuevo eritrocito y da comienzo a otro ciclo eritroctico. Algunos merozoitos, al parecer, tienen una determinacin gentica para constituir los elementos masculinos y femeninos o sean los gametofitos, que circulan como formas infectantes para los mosquitos y no producen sintomatologa en el hombre. Estos gametocitos no llevan a reactivacin de la infeccin humana y si no son ingeridos por los mosquitos, desaparecen espontneamente de la sangre. En P falciparum los gametocitos aparecen en la sangre circulante 1 a 3 semanas despus de haber parasitemia asexuada y permanecen 4 a 6 semanas despus de terminada. En P. vivax aparecen y desaparecen junto con las formas asexuadas. Esta forma de malaria presenta mayor nmero de complicaciones y por lo tanto es la ms grave. Es frecuente cometer errores en el diagnstico clnico por sus variadas manifestaciones y complicaciones. Su perodo de incubacin es de 11 a 14 das y los sntomas premonitorios pueden ser ms marcados. DIAGNOSTICO. Clnicamente la malaria puede confundirse con otras enfermedades febriles, especialmente cuando se presentan complicaciones o cuadros clnicos atpleos. Si el paciente ha tomado drogas antipaldicas que no curaron su malaria, el diagnstico se dificulta por la sintomatologa irregular. El laboratorio difcilmente comprueba estas infecciones cuando presentan con bajas parasitemias. Entre las enfermedades febriles que simulan un paludismo, estn: fiebre amarilla, fiebre tifoidea y paratifoidea, absceso heptico, hepatitis, fiebre recurrente, pielonefritis, brucelosis, tuberculosis, dengue, leishmaniasis visceral y procesos spticos. El diagnstico de certeza se hace en el laboratorio por el hallazgo de los parsitos. La bsqueda de parsitos circulantes se puede hacer en cualquier momento, aunque algunos recomiendan el perodo afebril, cuando est ocurriendo el ciclo eritroctico y es ms fcil encontrar los parsitos en los glbulos rojos. Segn esto, en P. falciparum, el tiempo ms oportuno sera despus del paroxismo febril para poder localizar los trofozoitos jvenes, ya que la esquizogonia ocurre a nivel de los capilares. Los gametocitos persisten durante ms tiempo que las otras formas, an despus del tratamiento completo con curacin de la infeccin y por lo tanto su presencia no indica
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enfermedad. Para mayor seguridad en el diagnstico de pacientes que han recibido drogas antimalricas o en las formas crnicas, se recomienda tomar muestras cada 6 a 8 horas, durante 3 das. Examen microscpico. Se hace por gota gruesa y extendido, teidos con los colorantes derivados del Romanowsky, como son Giemsa, Wright, Leishman y Field. En la sangre circulante se pueden encontrar todas las formas del ciclo eritrocitico, inclusive los gametocitos, con excepcin de los esquizontes de P. falciparum, que slo entran a circular en casos graves de la enfermedad. El recuento de parsitos por mm3 es importante para determinar el grado de infeccin, seguir la evolucin del paciente, para el pronstico y para la evaluacin de la eficacia del tratamiento. a). Gota gruesa. Este procedimiento es ms eficaz para el diagnstico, que el extendido, pues permite visualizar mayor nmero de parsitos, por la mayor cantidad de sangre que se estudia. Es necesario Usar los glbulos rojos para permitir la visualizacin de los parsitos, que quedan fijados a la placa, como ocurre con los leucocitos. Como los eritrocitos se han destruido, no se puede establecer su relacin con el parsito. La observacin de trofozoitos pequeos en anillo, como nicas formas, sugiere infeccin por P. falciparum y la presencia de trofozoitos y esquizontes orienta hacia el diagnstico de otras especies. Los gametocitos, si existen, y las caractersticas morfolgicas de los parsitos, completan el diagnstico en la gota gruesa. b). Extendido. Este mtodo facilita la observacin del detalle morfolgico de los parsitos y su relacin con los eritrocitos, por lo tanto permite confirmar con mayor certeza la especie de Plasmodium. En parasitemias bajas este examen puede ser negativo, mientras que la gota gruesa puede ser positiva. En los programas de erradicacin de malaria en las reas endmicas, se toman muestras de sangre para examen de gota gruesa, a toda persona febril o con sospecha clnica. Se considera febril a quien tenga fiebre en el momento de la visita o haya tenido en los tres das anteriores. En zonas no malricas se toman muestras de sangre a las personas febriles con sospecha clnica o epidemiolgica de padecer malaria, por proceder de una zona endmica. Otros exmenes de laboratorio. Se realizan para conocer el estado del paciente y sus complicaciones. El hematocrito y la hemoglobina muestran el grado de anemia. La eritrosedimentacin est aumentada. Especialmente en la fase inicial de la enfermedad pueden existir otros cambios hematolgicos como leucopenia, neutropenia, linfocitosis y aumento de los reticulocitos. Debido a la hemlisis, la bilirrubinemia esta aumentada. Tambin se pueden requerir otros exmenes de laboratorio segn las complicaciones que se presenten en la enfermedad, como los estudios de funcin renal, heptica y coagulacin. Reacciones serolgicas. En la actualidad los mtodos ms empleados son: hemaglutinacin indirecta, inmunofluorescencia y procedimientos inmunoenzimticos
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como ELISA, que utilizan como antgeno extractos de parsitos libres de clulas. Para la inmunofluorescencia, se prefieren antgenos homlogos, presentes en los parsitos de sangre de enfermos altamente parasitados, parsitos circulantes de Plasmodium humanos. Ocasionalmente las pruebas serolgicas son negativas en presencia de parasitemias confirmadas microscpicamente (8). PLASMODIUM VIVAX

Trofozoito

Esquizonte

Gametocito

Gnathostoma Spinigerum: La gnatostomosis es una entidad clnica causada por la migracin cutnea (superficial o profunda), visceral, neurolgica y ocular de formas larvarias de nematodos espirridos pertenecientes al gnero Gnathostoma. Este sndrome de larva migratoria representa un importante problema de salud pblica en el pas, con varios miles de casos reportados en diferentes estados de la repblica, en varios de los cuales la enfermedad es considerada endmica. El principal factor de riesgo es la ingesta de carne cruda o mal cocida, sobre todo de pescado de agua dulce. Morfologa. Los nematodos adultos (machos y hembras) se encuentran en una masa nodulares con un pequeo orificio en cavidad gstrica o esfago de los hospederos definitivos, presentan color parduzco en mamferos por acumulacin de oxihemoglobina en fluidos corporales, su forma es cilndrica y miden entre 1.2 - 3.5 cm de longitud.

Gnathostoma sp. adulto 24 Bulbo ceflico con 8 hileras de ganchos

En el extremo anterior del gusano se encuentra el bulbo ceflico, retrctil, con 8 - 10 hileras de ganchos simples, una boca rodeada por dos labios trilobulados provistos de papilas, con anfidios entre ellos. Dentro del bulbo se inician cuatro sacos musculares que se prolongan hasta el tercio anterior del cuerpo y son utilizados para la contraccin y expansin ceflica durante la migracin tisular. El cuerpo, separado de la cabeza por un cuello estrecho, est cubierto de espinas cuticulares cuya distribucin, forma y tamao vara de acuerdo a la especie. Las larvas L3, formas infectantes para hospederos intermediarios, paratnicos y el humano, miden alrededor de 3.0 - 4.5 mm de longitud y tienen una estructura general semejante a la del parsito adulto; su bulbo ceflico presenta 3 4 hileras de ganchos. El nmero de coronas y de sus ganchos, su tamao, as como la forma, densidad y arreglo espacial de las espinas, las estriaciones cuticulares, el nmero de ncleos en clulas epiteliales intestinales, son algunos de los criterios morfolgicos utilizados en la identificacin de especie. Tambin se utilizan tcnicas moleculares, entre ellas la secuenciacin de DNA ribosomal (9). El ciclo biolgico de los nematodos del gnero Gnathostoma es complejo e involucra diferentes hospederos definitivos: mamferos silvestres o domsticos; intermediarios: diversas especies de crustceos y peces de agua dulce y paratnicos: aves ictifagas, anfibios y reptiles. El ciclo ms conocido es el de G. spinigerum y fue descrito por Prommas y Daensvang entre 1933 y 1937, es el nico ciclo que se conoce con detalle; el de las otras especies solo se tienen datos incompletos. Los parsitos adultos se alojan en el estmago o esfago de gatos, perros, marsupiales, porcinidos y cerdos, entre otros,Los adultos de G. spinigerum, se localizan en cavidades formadas por clulas hiperplsicas infiltradas por un exudado inflamatorio en la mucosa gstrica de perros, tigres, gatos, mapaches y tlacuaches. Estas cavidades son ocupadas por gusanos de ambos sexos. Las hembras liberan huevos fertilizados que son eliminados con las heces del hospedero. Cuando los huevos fertilizados son depositados en cuerpos de agua dulce como ros, lagos, presas o diques, con temperaturas entre 24 y 28 C, inician su desarrollo diferencindose hacia una forma conocida como larva de primer estadio (L1), la cual sufre una muda y se transforma en una larva L2. La L2 es una larva rhabditoide que eclosiona del huevo a travs de un oprculo, y se mueve libremente en el agua. En este proceso, que dura aproximadamente 7 das, la larva es ingerida por pequeos crustceos (coppodos) de los gneros Cyclops, Eucyclops, Mesocyclops, Tropocyclops y Acantocyclops. En un periodo 7 a 10 das, la larva L2 se transforma a larva L3 temprana (L3T) en el hemocele de los coppodos infectados que sirven de alimento a diversas especies de
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peces dulceacucolas. En el estmago de los peces, se libera la larva L3T, que perfora la pared y migra hacia el tejido muscular esqueltico donde se enquista y transforma en larva L3 de estadio avanzado (L3A).Los peces infectados con larva L3A pueden ser depredados por vertebrados como ranas y culebras as como aves ictifagas o mamferos que no son hospederos naturales del parsito.Es importante sealar que la larva L3A es la forma que parasita al hombre, siendo ste un hospedero accidental que adquiere la enfermedad cuando consume carne infectada de pescado cruda o insuficientemente cocida en platillos como cebiche, sushi y sashimi. El ciclo biolgico se completa cuando los segundos hospederos intermediarios o paratnicos son ingeridos por los hospederos definitivos en los que la larva L3A se transforma en parsito adulto (10). Patogenia. Se ha atribuido la patologa causada por Gnathostoma a una combinacin de factores: Mecnico - taumtico. Debido a la penetracin y migracin de la larva, armada de ganchos y espinas cuticulares. Toxinas de excrecin/secrecin. Se ha identificado un componente de accin semejante a la acetilcolina. Enzimas proteolticas (hialuronidasa, entre otras), y catepsina L proteasas que pudieran tener algn papel en la degradacin de clulas ingeridas o hemoglobina. Es posible que se trate de la substancia hemoltica a la que hacen referencia trabajos previos. La reaccin inflamatoria del hospedero.

Espectro clnico. Despus de un breve perodo de incubacin (24 - 48 h) suelen presentarse signos y sntomas inespecficos como nusea, vmito, diarrea, malestar general, urticaria, dolor epigstrico y en hipocondrio derecho, y eosinofilia. La migracin subcutnea es la ms frecuente. Se hace evidente semanas despus o cuando han transcurrido meses e incluso aos. Las formas clnicas son: Inflamatoria o paniculitis eosinoflica migratoria Larva migrans cutnea Seudofurunculosa

La forma inflamatoria es la ms frecuente y corresponde histolgicamente a una paniculitis migratoria eosinoflica. La lesin inicial aparece en gran parte de los casos en regin torcica o abdominal y se manifiesta como una placa edematosa de tamao variable, eritematosa, no depresible, sin bordes definidos, con aumento de la temperatura
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local, que se acompaa de prurito, hiperestesia y rara vez dolor. El episodio dura una semana en promedio y se desvanece (con zona hemorrgica o pigmentada residual, transitoria) para presentarse de nuevo en otro sitio transcurrido un perodo de tiempo variable. Con cierta frecuencia los brotes posteriores tienden a ser menos intensos. La larva migrans cutnea debida a Gnathostoma se caracteriza por la formacin de tneles subcutneos indurados, eritematosos, sinuosos y pruriginosos, semejantes a los causados por Ancylostoma caninum, pero mayores. La forma seudofurunculosa consiste en ppulas foliculares y pstulas confinadas a una regin del cuerpo (11). CALIBRACIN DE MICRMETRO OCULAR El microscopio se emplea para observar objetos pequeos. Consta esencialmente de dos lentes. La ms cercana al objeto a observar se denomina objetivo y la ms cercana al observador se denomina ocular. El objetivo forma una imagen real y ampliada del objeto con la cual el ocular forma una nueva imagen virtual ms ampliada que es observada por el ojo. De esta manera se alcanzan aumentos muy superiores a los que se pueden obtener con un microscopio simple (lupa). En general, la disposicin del ocular respecto al objetivo es tal que los rayos emergentes del ocular sean paralelos, de este modo la imagen final se forma en el infinito y la observacin se realiza a ojo relajado. Construccin de un microscopio compuesto. Elementos necesarios: 2 lentes convergentes de distinta distancia focal, 2 pantallas milimetradas, objeto, lmpara, banco ptico.

Para la construccin de un microscopio elemental compuesto se utilizarn dos lentes, una de corta distancia focal que ser el objetivo y otra de mayor distancia focal que ser el ocular. Cmo debe ir ubicado el ocular de modo de obtener una imagen final en el infinito (Sugerencia: puede usar el objeto cruz y una pantalla para determinar los planos objetoimagen del objetivo y con ello posicionar el ocular). Recuerde alinear correctamente todos los elementos empleados. Para medir este aumento se reemplaza el objeto por una pantalla milimetrada, luego se coloca una segunda pantalla milimetrada a 25 cm de los ojos y simultneamente se observan por el microscopio las dos pantallas (una con cada ojo). Se deber establecer
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cuantas divisiones de la pantalla posterior (N1) coinciden con las de la pantalla ms cercana (N2) y calcular dicho aumento. D'=N2/N1 Microscopio de Laboratorio En esta parte de la prctica se utilizar un microscopio de laboratorio el cual consta de varios objetivos y un ocular compuesto. El microscopio est diseado de modo tal que la distancia entre el objeto y la posicin donde se forma la imagen del objetivo esta estandarizada, a fin de que al cambiar de objetivo el ajuste necesario para mantener el objeto enfocado es mnimo. a) Calibracin del micrmetro ocular.- El ocular del microscopio posee una escala que es necesario calibrar para los distintos aumentos que se puede lograr con el mismo. Pare ello se observar una platina que tiene una escala de dimensiones conocidas, es decir hay una distancia X entre las divisiones de la misma. Por el microscopio se observan ambas escalas y se determinar el nmero N de divisiones de la platina que coinciden con n divisiones del micrmetro del ocular. Se deber calibrar para cada objetivo del microscopio. b) Determinacin del aumento eficaz del microscopio.- Se observara una platina milimetrada por el microscopio y simultneamente otra a ojo desnudo ubicada a 25 cm del observador de modo de estimar los diferentes aumentos del mismo. c) Medicin de un objeto.- Usando la escala calibrada del ocular se medir un objeto para los distintos aumentos del microscopio (12). CONCLUSIONES: Los conocimientos aprendidos de esta prctica y teora me has sido de mucha ayuda para dar a conocer y sobre todo fomentar la prevencin del parasitismo y tratar de poner lmites a ciertas formas de consumo de alimentos de forma inadecuada. Como se indicaba al inicio el parasitismo es un problema social mundial y que causa cientos de muertos en nuestro medio y no se logran aplicar correctamente las medidas polticas de salud adecuada y necesaria para la erradicacin de enfermedades.

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: 1. 2. 3. 4. http://www.unioviedo.es/bos/Asignaturas/Parasit/TodoTema1.htm http://www.monografias.com/trabajos12/paras/paras.shtml http://www.cecyt15.ipn.mx/polilibros/parasit/UNIDAD1/historia.html http://www.saberdeciencias.com.ar/index.php/apuntes-de-parasitologia/158diagnostico-parasitologico-generalidades 5. http://www.unioviedo.es/bos/Asignaturas/Parasit/TodoTema1.htm 6. http://personal.us.es/cariza/web/para/practicas/cuadernos/analisis-coprologicoparasitario.pdf 7. http://www.carloshaya.net/laboratorio/media/tomademuestras.pdf 8. http://www.ungefcm.gq:8081/datas/agentesbiologicos/contenidos/generales/bibliogr afia_basica/microcap88.pdf 9. http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/gnathosmosis.html 10. http://gnathostomosis.blogspot.com/2009/05/ciclo-biologico.html 11. http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/gnathosmosis.html 12. http://www.lfp.uba.ar/Minotti/fiibyg/instrumentos.pdf

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