ENZIME Enzimele sunt biocatalizatori, reprezentnd o clas special de molecule proteice dotate cu activitate catalitic.

Sintetizate de ctre celula vie, enzimele catalizeaz ansamblul de reacii chimice termodinamic posibile, condiionnd desfurarea, coordonarea i autoreglarea acestor reacii specifice materiei vii. Se caracterizeaz prin: Sunt cei mai eficieni catalizatori; u se consum i nu se transform !n reaciile catalitice; "atalizeaz reaciile termodinamic posibile, determinnd scderea energiilor de activare a moleculelor de substrat asupra crora acioneaz; u modific starea final de echilibru a reaciilor, ci mresc numai viteza cu care se realizeaz acest echilibru;
A+ B C + D
$ #

Se disting printr%o specificitate a funciei catalitice care poate fi: a& de aciune determinnd mecanismele de producere a unui anumit tip de reacie; de e'emplu: o'idazele catalizeaz reaciile de o'idare; decarbo'ilazele catalizeaz reaciile de decarbo'ilare; hidrolazele catalizeaz reaciile de hidroliz etc. b& de substrat ( ele au capacitatea de a recunoate numai un anumit reactant denumit substrat. )ozarea activitii enzimelor se bazeaz pe proprietatea lor de a cataliza o anumit reacie caracterizat printr%o anumit vitez:
v= K dS = dt

viteza de reactie

=cantitatea de substrat care se transforma in unitatea de timp *iteza de reacie e'prim activitatea unei enzime. + reacie enzimatic se petrece !n dou faze: #& Substrat [ S ] + Enzima[ E ] [ ES ] $& [ ES ] [ E ] + [ P ] Substratul [S ] se transform !n produsul sau produii de reacie [P ] , iar enzima [ E ] este eliberat putnd reaciona cu noi molecule de substrat. *iteza de reacie a enzimelor este influenat de diferii factori: "oncentraia substratului [S ] ; "oncentraia enzimei [ E ] ; ,emperatur; p-%ul mediului de reacie; efectorii enzimatici.
#
S P
E

Concentraia substratului [S ] .e msur ce concentraia substratului !n mediul de reacie crete, crete proporional i viteza de reacie. "nd [S ] atinge o anumit valoare, v nu mai crete proporional ci atinge o valoare ma'im care devine independent de [S ] . /ceast valoare a lui v se numete viteza ma'im de reacie. v ma' de reacie, care nu mai depinde de [S ] , indic faptul c toate situsurile catalitice ale moleculei de enzim sunt saturate de substrat. /cea cantitate de substrat pentru care viteza de reacie este 0 din viteza ma'im de reacie se numete constanta 1ichaelis 2 K M &. 3iind o concentraie, K M se e'prim !n moli4litru.
K M = [ S ] = moli 4 litru

e'prim afinitatea enzimei fa de substratul su de reacie. + valoare mic a lui indic o afinitate mare a enzimei pentru substratul su de reacie i reciproc, o valoare mare a lui K M indic o afinitate mic a enzimei pentru substratul su de reacie.
KM KM

Influena concentraiei enzimei asupra vitezei de reacie 5a concentraii relativ mari de substrat viteza unei reacii enzimatice variaz liniar cu cantitatea de enzim. 6n acest sens se va urmri viteza reaciei de hidroliz a ureei sub aciunea ureazei, incubndu%se o cantitate constant de substrat cu cantiti variabile de enzim. Clasificarea internaional a enzimelor include 6 clase: #. +78)+9E):",/;E ( e': lactatdehidrogenaza 25)-& $. ,9/ S3E9/;E ( e': creatinfosfo<inaza 2".=&, transaminaza glutamat piruvica 2,>.&, transaminaza glutamat o'alil%acetica 2,>+& ?. -8)9+5/;E: fosfataza alcalina, fosfataza acida, amilaza serica si urinara, colinesteraza
@. 58/;E A. 8;+1E9/;E B. 58>/;E 2S8 ,E,/;E&

Exprimarea cantitativ a activitii enzimatice *iteza de reacie enzimatic este proporional cu cantitatea de enzim !n condiiile unor parametri e'perimentali riguros stabilii: p-, temperatur optim, concentraie suficient de substrat, coenzim, activatori enzimatici, absena inhibitorilor enzimatici. 6n principiu, determinarea activitii enzimatice se poate efectua pe diferite ci e'perimentale, ca: a& 1surarea gradului de transformare a substratului prin stabilirea scderii concentraiei acestuia !ntr%un anumit interval de timp; b& 1surarea concentraiei produsului de reacie format !ntr%un anumit interval de timp;
$

c& 1surarea cineticii de reacie, urmrind !n timp viteza de transformare a substratului sau de formare a produsului de reacie. .entru e'primarea cantitativ a activitii enzimatice se utilizeaz urmtoarele mrimi care se definesc astfel: :nitatea de activitate enzimatic 2:& reprezint cantitatea de enzim ce catalizeaz transformarea a # micromol 2 # mol & de substrat4min4litru !n condiii e'perimentale definite. 6n mod curent, activitatea enzimatic se e'prim i ca miliuniti per m5 2m:4m5&. /ctivitatea enzimatic specific reprezint numrul de uniti enzimatice raportate la # mg de protein 2:4mg&. /ctivitatea enzimatic molecular reprezint numrul de molecule de substrat transformate de ctre o molecul de enzim !n timp de # minut. Exemplu: )eterminarea activitii enzimatice !n serul sanguin se poate efectua printr%una din urmtoarele ci: dozarea unui substrat al reaciei enzimatice !n prezena enzimei care catalizeaz reacia respectiv; activitatea enzimatic reprezint diferena !ntre concentraia substratului transformat !n produs de reacie de ctre enzim i concentraia substratului netransformat; dozarea unui produs format !n reacia catalizat de enzim, !ntr%un anumit interval de timp; dozarea unei coenzime care particip la o reacie enzimatic; de e'emplu, se determin viteza de reducere sau de o'idare a coenzimei 2 /)C, /).C&, vitez care este proporional cu activitatea enzim