PRCTICA N1.

DESPROTEINIZACION DE MUESTRAS
I. ESQUEMA DEL PROCEDIMIENTO: Se armara el siguiente sistema de tubos

Componentes/tubos Agua destilada

I 7 ml 1ml

II 7ml

III

IV 7ml

Suero 1ml Sangre 7ml Orina 2ml ATC 5% 1ml Tungstato de sodio 10% 1ml H2SO4 2/3 N 1ml ZnSO4 1ml Ba(OH)2 3ml Acido Actico 2% 1ml

II. RESULTADOS:

III. DISCUSION

A veces se requiere la desproteinizacion de una muestra. Esto se consigue fcilmente tratando el material biolgico en este caso sangre con reactivos precipitantes de protenas y centrifugando. Los dos reactivos mas utilizados en la desproteinizacion son el sulfato amoniaco y el acido tricloroacetico. Tambin se utiliza a veces el tungstato sdico y el cloro de aluminio. La desproteinizacion es la remocin de protenas de la sangre, suero o plasma para obtener un filtrado libre de protenas y poder cuantificar la muestra sin interferencias para evitar la formacin de espuma, turbidez, precipitado En esta prctica utilizamos la desproteinizacion de la muestra mediante un mtodo de metales pesados: Zn, Hg, Cd, Fe, Pb, etc. Se formara protenas insolubles con las formas ionicas de las molculas proteicas. Se producen enlaces de tipo salino entre los grupos carboxilo con carga negativa. Tambin utilizamos el acido tricloroacetico que se utiliza cuando se necesita conservar sustancias inestables como acido ascrbico. Hay otros mtodos para la desproteinizacion de una muestra entre ellos hay mtodos fsicos: aquellos que cuando no alteran las protenas que separa estos son el calor, la dilisis, la ultra centrifugacin y la ultrafiltracin. Tambin hay mtodos fisicoqumicos donde la protena separan por precipitacin, separndose luego por filtracin o centrifugacin, teniendo en cuanta la hidratacin, la deshidratacin, la deshidratacin con solventes miscibles con el agua, deshidratacin con soluciones salinas. Tambin hay el mtodo de los metales pesados y de cidos. IV. RESUMEN Y CONCLUSIONES 1. Demostramos la desproteinizacion de la muestra sangre con Ba(OH)2, ZnSO4, Tungstato de sodio 10%, ATC 5%. V. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS: (1) Tcnicas analticas de contaminantes qumicos aplicaciones toxicolgicas... Escrito por Miguel ngel Sogorb Snchez