METODOS ESPECTROMETRICOS

Segn la naturaleza de la excitacin medida

El tipo de espectrometra depende de la cantidad fsica medida. Normalmente, la cantidad que se mide es una intensidad de energa absorbida o producida. Se pueden distinguir estos tipos de espectrometra segn la naturaleza de la excitacin: * Electromagntica. Interacciones de la materia con radiacin electromagntica como la luz. * De electrones. Interacciones con haces de electrones. La espectroscopia Auger implica inducir el efecto Auger con un haz de electrones. En este caso la medida implica la energa cintica del electrn como variable. * De masa. Interaccin de especies cargadas con campos magnticos y/o elctricos, dando lugar a un espectro de masas. El trmino "espectroscopia de masas" est anticuado, ya que la tcnica es principalmente una forma de medida, aunque produzca realmente un espectro para la observacin. Este espectro tiene la masa (m) como variable, pero la medida es esencialmente de la energa cintica de la partcula. * Acstica. Frecuencia de sonido. * Dielctrica. Frecuencia de un campo elctrico externo. * Mecnica. Frecuencia de un estrs mecnico externo, por ejemplo una torsin aplicada a un trozo de material.

Segn el proceso de medida

La mayora de los mtodos espectroscpicos se diferencian en atmicos o moleculares segn si se aplican a tomos o molculas. Junto con esta diferencia, se pueden distinguir los siguientes tipos de espectrometra segn la naturaleza de su interaccin: * De absorcin. Usa el rango de los espectros electromagnticos en los cuales una sustancia absorbe. Incluye la espectrometra de absorcin atmica y varias tcnicas moleculares, como la espectrometra infrarroja y la resonancia magntica nuclear (RMN). * De emisin. Usa el rango de espectros electromagnticos en los cuales una sustancia irradia (emite). La sustancia primero debe absorber la energa. Esta energa puede ser de una variedad de fuentes, que determina el nombre de la emisin subsiguiente, como la luminescencia. Las tcnicas de luminescencia moleculares incluyen la espectrofluorimetra. * De dispersin. Mide la cantidad de luz que una sustancia dispersa en ciertas longitudes de onda, ngulos de incidencia y ngulos de polarizacin. El proceso de dispersin es mucho ms rpido que el proceso de absorcin/emisin. Una de las aplicaciones ms tiles es laespectroscopia Raman.

Tipos de espectrometra
ESPECTROMETRA DE ABSORCIN La espectrometra de absorcin es una tcnica en la cual la energa de un haz de luz se mide antes y despus de la interaccin con una muestra. Cuando se realiza con lser de diodo ajustable, se la conoce como espectroscopia de absorcin con lser de diodo ajustable. Tambin se combina a menudo con una tcnica de modulacin, como la espectrometra de modulacin de longitud de onda, y de vez en cuando con la espectrometra de modulacin de frecuencia a fin de reducir el ruido en el sistema. ESPECTROMETRA DE FLUORESCENCIA La espectrometra de fluorescencia usa fotones de energa ms elevada para excitar una muestra, que emitir entonces fotones de inferior energa. Esta tcnica se ha hecho popular en aplicaciones bioqumicas y mdicas, y puede ser usada con microscopa confocal, transferencia de energa entre partculas fluorescentes, y visualizacin de la vida media de fluorescencia. ESPECTROMETRA DE RAYOS X Cuando los rayos X con suficiente frecuencia (energa) interaccionan con una sustancia, los electrones de las capas interiores del tomo se excitan a orbitales vacos externos, o bien son eliminados completamente, ionizndose el tomo. El "agujero" de la capa interior se llena entonces con electrones de los orbitales externos. La energa disponible en este proceso de excitacin se emite como radiacin (fluorescencia) o quitar otros electrones menos enlazados del tomo (efecto Auger). La absorcin o frecuencias de emisin (energas) son caractersticas de cada tomo especfico. Adems, para un tomo especfico se producen pequeas variaciones de frecuencia (energa) que son caractersticas del enlace qumico. Con un aparato apropiado pueden medirse estas frecuencias de rayos X caractersticas o energas de electrones Auger. La absorcin de rayos X y la espectroscopia de emisin se usan en qumica y ciencias de los materiales para determinar la composicin elemental y el enlace qumico. La cristalografa de rayos X es un proceso de dispersin. Los materiales cristalinos dispersan rayos X en ngulos bien definidos. Si la longitud de onda de los rayos X incidentes es conocida, se pueden calcular las distancias entre planos de tomos dentro del cristal. Las intensidades de los rayos X dispersados dan informacin sobre las posiciones atmicas y permiten calcular la organizacin de los tomos dentro de la estructura cristalina. ESPECTROMETRA DE LLAMA

Las muestras de solucin lquidas son aspiradas en un quemador o una combinacin de nebulizador/quemador, desolvatadas, atomizadas, y a veces excitadas a un estado electrnico de energa ms alta. El uso de una llama durante el anlisis requiere combustible y oxidante, tpicamente en forma de gases. Los gases combustibles comunes que se usan son el acetileno (etino) o el hidrgeno. Los gases de oxidante suelen ser el oxgeno, el aire, o el xido nitroso. Estos mtodos son a menudo capaces de analizar elementos metlicos en partes por milln, billones, o posiblemente rangos ms bajos de concentracin. Son necesarios detectores de luz para detectar la luz con informacin que viene de la llama. * Espectrometra de emisin atmica. Este mtodo usa la excitacin de la llama; los tomos son excitados por el calor de la llama para emitir luz. Este mtodo suele usar un quemador de consumo total con una salida de incineracin redonda. Se utiliza una llama de temperatura ms alta que la usada en la espectrometra de absorcin atmica para producir la excitacin de tomos de analito. Ya que los tomos de analito estn excitados por el calor de la llama, no es necesaria ninguna lmpara elemental especial. Puede usarse un policromador de alta resolucin para producir una intensidad de emisin contra el espectro de longitud de onda por encima de un rango de longitudes de onda que muestran lneas de excitacin de elementos mltiples. O bien puede usarse un monocromador en una longitud de onda determinada para concentrarse en el anlisis de un solo elemento en una cierta lnea de emisin. La espectrometra de emisin de plasma es una versin ms moderna de este mtodo. * Espectrometra de absorcin atmica (a menudo llamada AA). Este mtodo usa un nebulizador pre-quemador (o cmara de nebulizacin) para crear una niebla de la muestra, y un quemador en forma de ranura que da una llama de longitud de ruta ms larga. La temperatura de la llama es lo bastante baja como para no excitar los tomos de la muestra de su estado basal. El nebulizador y la llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitacin de los tomos de analito se realiza mediante lmparas que brillan a travs de la llama en varias longitudes de onda para cada tipo de analito. En la absorcin atmica, la cantidad de luz absorbida despus de pasar por la llama determina la cantidad de analito en la muestra. Suele usarse un horno de grafito para calentar, desolvatar y atomizar la muestra con el fin de obtener una mayor sensibilidad. El mtodo del horno de grafito tambin puede analizar algn slido o muestras mezcladas. A causa de su buena sensibilidad y selectividad, es un mtodo que todava se usa para el anlisis de ciertos microelementos en muestras acuosas (y otros lquidos). * Espectrometra de fluorescencia atmica. Este mtodo usa un quemador con una salida de incineracin redonda. La llama se usa para solvatar y atomizar la muestra, y una lmpara emite luz a una longitud de onda especfica en la llama para excitar los tomos de analito. Los tomos de ciertos elementos pueden entonces fluorescer, emitiendo luz en diferentes direcciones. La intensidad de esta

luz fluorescente sirve para cuantificar la cantidad del elemento analizado en la muestra. Tambin puede usarse un horno de grafito para la espectrometra de fluorescencia atmica. Este mtodo no es tan comn como el de absorcin atmica o el de emisin de plasma.

ESPECTROMETRA DE EMISIN DE PLASMA Es similar a la emisin atmica por llama, y la ha sustituido en gran parte. * Espectrometra de plasma de corriente contnua (DCP). Un plasma de corriente contnua se crea por una descarga elctrica entre dos electrodos. Es necesario un gas de apoyo al plasma, y el ms comn es el argn. Las muestras pueden ser depositadas en uno de los electrodos. * Espectrometra de emisin ptica por descarga luminiscente (GD-OES) * Espectrometra de emisin plasma-atmica acoplada inductivamente (ICPAES) * Espectrometra de ruptura inducida por lser (LIBS), tambin llamada espectrometra de plasma inducida por lser (LABIOS) * Espectrometra de plasma inducida por microondas (MIP) ESPECTROMETRA DE CHISPA O ARCO Se usa para el anlisis de elementos metlicos en muestras slidas. Para materiales no conductores, se usa polvo de grafito para hacer conductora la muestra. En los mtodos de espectroscopia de arco tradicionales se usa una muestra slida que es destruida durante el anlisis. Un arco elctrico o chispa se pasan por la muestra, calentndola a alta temperatura para excitar los tomos. Los tomos de analito excitado emiten luz en varias longitudes de onda que pueden ser detectadas mediante mtodos espectroscpicos comunes. Ya que las condiciones que producen la emisin por arco no son controladas cuantitativamente, el anlisis de los elementos es cualitativo. ESPECTROMETRA VISIBLE Muchos tomos emiten o absorben la luz visible. A fin de obtener un espectro lineal fino, los tomos deben estar en fase gaseosa. Esto significa que la sustancia tiene que ser vaporizada. El espectro se estudia en absorcin o emisin. La espectroscopia de absorcin visible a menudo se combina con la de absorcin ultravioleta (espectroscopia UV/Vis). Aunque esta forma pueda ser poco comn al ser el ojo humano un indicador similar, todava se muestra til para distinguir colores. ESPECTROMETRA ULTRAVIOLETA

Todos los tomos absorben en la regin ultravioleta (UV) ya que estos fotones son bastante energticos para excitar a los electrones externos. Si la frecuencia es lo bastante alta, se produce la fotoionizacin. La espectrometra UV tambin se usa para la cuantificacin de protenas y concentracin de ADN, as como para la proporcin de protenas y ADN en una solucin. En las protenas se encuentran generalmente varios aminocidos, como el triptfano, que absorben la luz en el rango de 280nm. El ADN absorbe la luz en el rango de 260nm. Por esta razn, la proporcin de absorbancia 260/280nm es un buen indicador general de la pureza relativa de una solucin en trminos de estas dos macromolculas. Tambin pueden hacerse estimaciones razonables de la concentracin de ADN o protenas aplicando la ley de Beer. ESPECTROMETRA INFRARROJA La espectrometra infrarroja ofrece la posibilidad de medir tipos diferentes de vibraciones en los enlaces atmicos a frecuencias diferentes. En qumica orgnica, el anlisis de los espectros de absorcin infrarroja indica qu tipo de enlaces estn presentes en la muestra. ESPECTROMETRA RAMAN La espectrometra Raman usa la dispersin inelstica de la luz para analizar modos vibracionales y rotatorios de las molculas. Las "huellas digitales" que resultan son una ayuda para el anlisis. ESPECTROMETRA DE RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR (RMN) La espectrometra de resonancia magntica nuclear analiza las propiedades magnticas de ciertos ncleos atmicos para determinar diferentes ambientes locales electrnicos del hidrgeno, carbono, u otros tomos en un compuesto orgnico u otro compuesto. Se usa para determinar la estructura del compuesto. ESPECTROMETRA DE FOTOEMISIN La fotoemisin puede referirse a: * Emisin de electrones a partir de la materia despus de la absorcin de fotones energticos (efecto fotoelctrico). * Emisin de fotones a partir de los semiconductores y metales cuando los electrones que fluyen en el material pierden energa mediante deceleracin o recombinacin. ESPECTROMETRA MSSBAUER La espectrometra de transmisin o conversin electrnica (CEMS) de Mssbauer prueba las propiedades de los ncleos de istopos especficos en ambientes atmicos diferentes, analizando la absorcin resonante de rayos gamma de energa caracterstica, lo que se conoce como efecto de Mssbauer.

OTROS TIPOS DE ESPECTROMETRA * Fotoacstica. Mide las ondas sonoras producidas por la absorcin de radiacin. * Fototermal. Mide el calor desarrollado por la absorcin de radiacin. * De dicroismo circular. * De actividad ptica Raman. Usa los efectos de la actividad ptica y la dispersin para revelar informacin detallada sobre los centros quirales de las molculas. * De terahertzios. Usa longitudes de onda por encima de la espectrometra infrarroja y por debajo de las microondas o medidas de onda milimtricas. * De dispersin inelstica de neutrones, como la espectroscopia Raman pero con neutrones en vez de fotones. * De tnel de electrones inelsticos. Usa los cambios de corriente debidos a la interaccin de vibraciones electrnicas inelsticas a energas especficas que tambin pueden medir transiciones pticamente prohibidas. * Auger. Se usa para estudiar superficies de materiales a microescala. A menudo se usa en relacin con la microscopa de electrones. * De cavidad en anillo. * De transformacin de Fourier. La transformacin Fourier es un mtodo eficiente para tratar datos de espectros obtenidos usando interfermetros. Casi toda la espectrometra infrarroja (FTIR) y la resonancia magntica nuclear (RMN) se realizan con la transformacin de Fourier. * De tiempo resuelto. Se usa en situaciones donde las propiedades cambian con el tiempo. * Mecnica. Implica interacciones con vibraciones macroscpicas, como los fotones. Un ejemplo es la espectrometra acstica, que implica ondas sonoras. * De fuerza. Usa una tcnica analtica basada en AFM. * Dielctrica. * Infrarroja termal. Mide la radiacin termal emitida por materiales y superficies, y se usa para determinar el tipo de enlaces presentes en una muestra, as como su ambiente reticular. Estas tcnicas son muy usadas por los qumicos orgnicos, mineralogistas y gelogos.

Espectrmetros
Un espectrmetro (tambin llamado espectroscopio o espectrgrafo) es un instrumento ptico que se usa para medir las propiedades de la luz sobre una porcin especfica del espectro electromagntico. Su utilidad es realizar anlisis espectroscpicos para identificar materiales. La variable medida es generalmente la intensidad de la luz, pero tambin podra ser, por ejemplo, el estado de polarizacin. La variable independiente es, por lo general, la longitud de onda de la luz, que suele expresarse como una fraccin de metro, aunque a veces se expresa como una unidad directamente proporcional a la energa del fotn, tales como el nmero de onda o los voltios de los electrones (que tiene una relacin recproca a la longitud de onda). Un espectrmetro se usa en espectroscopia para producir lneas espectrales y medir sus longitudes de onda e intensidades. Son instrumentos que funcionan en una amplia variedad de longitudes de onda, desde rayos gamma y rayos X hasta el infrarrojo lejano. Si la regin de inters est restringida a un rango cercano al espectro visible, el estudio se llama espectrofotometra. En general, cada espectrmetro funcionar sobre una pequea porcin de este rango total debido a las diferentes tcnicas usadas para medir las distintas porciones del espectro. Por debajo de las frecuencias pticas (es decir, en el rango de las microondas y radiofrecuencias), el analizador de espectro es un dispositivo electrnico estrechamente relacionado. Espectroscopios Los espectroscopios se usan a menudo en astronoma y en algunas ramas de la qumica. Los primeros aparatos de este tipo eran simplemente un prisma con graduaciones que marcaban las longitudes de onda de la luz. Los espectroscopios modernos, como los monocromadores, generalmente usan una rejilla de difraccin, una hendidura mvil y una especie de fotodetector, adems de estar automatizados y controlados por un ordenador. El espectroscopio fue inventado por Gustav Robert Georg Kirchhoff y por Robert Wilhelm Bunsen. Cuando un material se calienta hasta la incandescencia emite una luz que es caracterstica de la composicin atmica del material. Las frecuencias de luz particulares dan lugar a bandas bruscamente definidas en la escala, que son similares a huellas digitales. Por ejemplo, el elemento sodio tiene una doble banda amarilla muy caracterstica, conocida como lneas D del sodio a 588.9950 y 589.5924 nanmetros, cuyo color ser familiar a quien haya visto una lmpara de vapor de sodio de baja presin.

En el diseo del espectroscopio original, a principios del siglo XIX, la luz entraba en una hendidura y una lente colimadora transformaba la luz en un haz delgado de rayos paralelos. La luz pasaba entonces por un prisma (en espectroscopios porttiles, por lo general un prisma Amici) que refractaba el haz de luz en un espectro, debido a que las diferentes longitudes de onda eran refractadas en cantidades diferentes por la dispersin. Esta imagen se vea entonces a travs de un tubo con una escala que se transpona sobre la imagen espectral, permitiendo su medida directa. Con el desarrollo de la pelcula fotogrfica, se cre el espectrgrafo, que era ms exacto. Estaba basado en el mismo principio que el espectroscopio, pero tena una cmara en lugar del tubo de inspeccin. En aos recientes, la cmara ha sido sustituida por circuitos electrnicos construidos alrededor del tubo fotomultiplicador, permitiendo el anlisis espectrogrfico en tiempo real con mucha ms exactitud. En los sistemas espectrogrficos tambin se usan series de fotosensores en lugar de la pelcula. Tal anlisis espectral, o espectroscopia, se ha convertido en un importante instrumento cientfico para analizar la composicin de material desconocido, y para estudiar fenmenos y teoras astronmicas. El espectrmetro mide longitudes de onda. Espectrgrafos Un espectrgrafo es un instrumento que transforma una forma de onda de dominio temporal entrante en un espectro de frecuencia, o generalmente en una secuencia de tales espectros. Hay varias clases de mquinas a las que se llama espectrgrafos, segn la naturaleza precisa de las ondas. Los primeros espectrgrafos usaban papel fotogrfico como detector. La clasificacin espectral de estrellas y el descubrimiento de la secuencia principal, la ley de Hubble y la secuencia de Hubble, se hicieron con espectrgrafos que usaban papel fotogrfico. El pigmento vegetal fitocromo fue descubierto con un espectrgrafo que usaba plantas vivas como detectores. Los espectrgrafos ms recientes usan detectores electrnicos, como cmaras CCDs que pueden usarse tanto para luz visible como para luz ultravioleta. La eleccin exacta del detector depende de las longitudes de onda de la luz que va a ser registrada. El prximo Telescopio Espacial de James Webb contendr un espectrgrafo cercano al infrarrojo (NIRSpec) y un espectrmetro en mitad del infrarrojo (MIRI). Un espectrgrafo de escala usa dos rejillas de difraccin, giradas 90 grados una respecto a la otra y colocadas cerca. Por lo tanto, se usa un punto de entrada y no una hendidura, mientras que un segundo chip CCD registra el espectro. Con este pequeo chip se consigue un espectro muy fino, y tiene como ventaja que la ptica colimadora no tiene que ser optimizada para coma o astigmatismo, ya que la aberracin esfrica puede ser establecida a cero.

A veces al espectrgrafo se le llama policromador, como analoga de monocromador.

Espectrometra ultravioleta-visible
La espectrometra ultravioleta-visible o espectrofotometra UV-Vis implica la espectroscopia de fotones en la regin de radiacin ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los rangos visible y adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el infrarrojo (IR) cercano. En esta regin del espectro electromagntico, las molculas se someten a transiciones electrnicas. Esta tcnica es complementaria de la espectrometra de fluorescencia, que trata con transiciones desde el estado excitado al estado basal, mientras que la espectrometra de absorcin mide transiciones desde el estado basal al estado excitado. APLICACIONES La espectrometra UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinacin cuantitativa de soluciones de iones metlicos de transicin y compuestos orgnicos muy conjugados. Soluciones de iones metlicos de transicin Las soluciones de iones metlicos de transicin pueden ser coloreadas (es decir, absorben la luz visible) debido a que los electrones en los tomos de metal se pueden excitar desde un estado electrnico a otro. El color de las soluciones de iones metlicos se ve muy afectado por la presencia de otras especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de una solucin diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amonaco se intensifica el color y cambia la longitud de onda de absorcin mxima. Compuestos orgnicos Los compuestos orgnicos, especialmente aquellos con un alto grado de conjugacin, tambin absorben luz en las regiones del espectro electromagntico visible o ultravioleta. Los disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los compuestos solubles en agua, o el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los disolventes orgnicos pueden tener una significativa absorcin de UV, por lo que no todos los disolventes son adecuados para su uso en espectrometra UV. El etanol absorbe muy dbilmente en la mayora de longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente pueden afectar la absorcin del espectro de un compuesto orgnico. La tirosina, por ejemplo, aumenta su mximo de absorcin y su coeficiente de extincin molar cuando aumenta el pH de 6 a 13, o cuando disminuye la polaridad de los disolventes.

Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores, stos son a menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones cuantitativas. La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una solucin es directamente proporcional a la concentracin de la solucin. Por tanto, la espectrometra UV/VIS puede usarse para determinar la concentracin de una solucin. Es necesario saber con qu rapidez cambia la absorbancia con la concentracin. Esto puede ser obtenido a partir de referencias (las tablas de coeficientes de extincin molar) o, con ms exactitud, determinndolo a partir de una curva de calibracin. El espectrofotmetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (CLAR). La presencia de un analito da una respuesta que puede ser proporcional a la concentracin. Para resultados precisos, la respuesta del instrumento al analito debe compararse con la respuesta a un estndar, lo que es muy similar al uso de curvas de calibracin. La respuesta (por ejemplo, el pico de altura) para un concentracin particular se conoce como factor de respuesta. LEY DE BEER-LAMBERT La espectrometra UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa para determinar las concentraciones de especies absorbentes en solucin, usando la Ley de Beer-Lambert.

donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una determinada longitud de onda, I es la intensidad de transmisin, L la longitud de ruta a travs de la muestra, y c la concentracin de las especies absorbentes. Para cada especie y longitud de onda, es una constante conocida como absortividad molar o coeficiente de extincin. Esta constante es una propiedad fundamental molecular en un solvente dado, a una temperatura y presin particular, y tiene como unidades 1/M * cm o, a menudo, U/M * cm. La absorbancia y extincin a veces son definidas en trminos de logaritmo natural en lugar de logaritmo de base 10. La ley de Beer-Lambert es til para la caracterizacin de muchos compuestos, pero no sirve como relacin universal para la concentracin y absorcin de todas las sustancias. En molculas complejas de gran tamao, como los tintes orgnicos (Xylenol Naranja o Rojo Neutro, por ejemplo), a veces se encuentra una relacin polinmica de segundo orden entre la absorcin y la concentracin.

ESPECTROFOTMETRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE El instrumento utilizado en la espectrometra ultravioleta-visible se llama espectrofotmetro UV-Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a travs de una muestra (I), y la compara con la intensidad de luz antes de pasar a travs de la muestra (Io). La relacin I / Io se llama transmitancia, y se expresa habitualmente como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisin: A = - log (%T) Las partes bsicas de un espectrofotmetro son una fuente de luz (a menudo una bombilla incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lmpara de arco de deuterio en el ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de difraccin o monocromador para separar las diferentes longitudes de onda de la luz, y un detector. El detector suele ser un fotodiodo o un CCD. Los fotodiodos se usan con monochomadores, que filtran la luz de modo que una sola longitud de onda alcanza el detector. Las rejillas de difraccin se utilizan con CCDs, que recogen la luz de diferentes longitudes de onda en pxeles. Un espectrofotmetro puede ser nico o de doble haz. En un instrumento de un solo haz (como el Spectronic 20), toda la luz pasa a travs de la clula muestra. La Io debe medirse retirando la muestra. Este fue el primer diseo, y todava est en uso en la enseanza y laboratorios industriales. En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la muestra. Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a travs de la muestra. Algunos instrumentos de doble haz tienen dos detectores (fotodiodos), y el haz de referencia y el de la muestra se miden al mismo tiempo. En otros instrumentos, los dos haces pasan a travs de un bloqueador que impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida del haz de muestra y la del haz de referencia. Las muestras para espectrofotometra UV-Vis suelen ser lquidas, aunque la absorbancia de los gases e incluso de los slidos tambin puede medirse. Las muestras suelen ser colocadas en una clula transparente, conocida como cubeta. Las cubetas suelen ser rectangulares, con una anchura interior de 1 cm. Esta anchura se convierte en la longitud de ruta, L, en la Ley de Beer-Lambert. Tambin se pueden usar tubos de ensayo como cubetas en algunos instrumentos. Las mejores cubetas estn hechas con cuarzo de alta calidad, aunque son comunes las de vidrio o plstico. El cristal y la mayora de los plsticos absorben en el UV, lo que limita su utilidad para longitudes de onda visibles.

ESPECTRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE Un espectro ultravioleta-visible es esencialmente un grfico de absorbancia de luz frente a una longitud de onda en el rango del ultravioleta o la luz visible. Este espectro puede ser producido directamente con los espectrofotmetros ms sofisticados, o bien pueden registrarse los datos de una sola longitud de onda con los instrumentos ms simples. La longitud de onda se representa con el smbolo . Del mismo modo, para una determinada sustancia, puede hacerse un grfico estndar del coeficiente de extincin () frente a la longitud de onda (). Este grfico estndar sera efectivamente "la concentracin corregida" y, por tanto, independiente de la concentracin. Para una sustancia determinada, la longitud de onda en la cual se produce el mximo de absorbancia en el espectro se llama max, y se pronuncia "lambda-max". Las reglas de Woodward-Fieser son un conjunto de observaciones empricas que pueden utilizarse para predecir max, la longitud de onda de la absorcin UV -Vis, para compuestos orgnicos conjugados como dienos y cetonas. Las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos de enlace en una determinada molcula, y son valiosos para determinar los grupos funcionales dentro de la molcula. La absorcin UV-Vis no es, sin embargo, una prueba especfica para ningn compuesto determinado. La naturaleza del disolvente, el pH de la solucin, la temperatura, la concentracin de electrolitos, y la presencia de sustancias interferentes pueden influir en los espectros de absorcin de los compuestos, as como las variaciones en la anchura de la hendidura (ancho de banda efectivo) en el espectrofotmetro.

Espectrometra infrarroja
La espectrometra de infrarrojos (espectroscopia IV) es un tipo de espectrometra de absorcin que utiliza la regin infrarroja del espectro electromagntico. Como las dems tcnicas espectroscpicas, puede ser utilizada para identificar un compuesto o investigar la composicin de una muestra. La espectrometra infrarroja se basa en el hecho de que los enlaces qumicos de las sustancias tienen frecuencias de vibracin especficas, que corresponden a los niveles de energa de la molcula. Estas frecuencias dependen de la forma de la superficie de energa potencial de la molcula, la geometra molecular, las masas atmicas y, posiblemente, el acoplamiento vibracional. Si la molcula recibe luz con la misma energa de esa vibracin, entonces la luz ser absorbida si se dan ciertas condiciones. Para que una vibracin aparezca en el espectro infrarrojo, la molcula debe someterse a un cambio en su momento dipolar durante la vibracin. En particular, una aproximacin de Born-Oppenheimer y aproximaciones armnicas; es decir, cuando el hamiltoniano molecular correspondiente al estado electrnico estndar puede ser aproximado por un oscilador armnico cuntico en las cercanas de la geometra molecular de equilibrio, las frecuencias vibracionales de resonancia son determinadas por los modos normales correspondientes a la superficie de energa potencial del estado electrnico estndar. No obstante, las frecuencias de resonancia pueden estar, en una primera aproximacin, en relacin con la longitud del enlace y las masas de los tomos en cada extremo del mismo. Los enlaces pueden vibrar de seis maneras: estiramiento simtrico, estiramiento asimtrico, tijeras, rotacin, giro y wag. Con el fin de hacer medidas en una muestra, se transmite un rayo monocromo de luz infrarroja a travs de la muestra, y se registra la cantidad de energa absorbida. Repitiendo esta operacin en un rango de longitudes de onda de inters (por lo general, 4000-400 cm-1) se puede construir un grfico. Al examinar el grfico de una sustancia, un usuario experimentado puede obtener informacin sobre la misma. Esta tcnica funciona casi exclusivamente en enlaces covalentes, y se usa mucho en qumica, en especial en qumica orgnica. Se pueden generar grficos bien resueltos con muestras de una sola sustancia de gran pureza. Sin embargo, la tcnica se utiliza habitualmente para la identificacin de mezclas complejas.

PREPARACIN DE LA MUESTRA Las muestras lquidas pueden ser prensadas entre dos planchas de una sal de alta pureza (como el cloruro de sodio). Estas placas deben ser transparentes a la luz infrarroja para no introducir ninguna lnea en el espectro de la muestra. Las placas obviamente son solubles en agua, por lo que la muestra, los reactivos de lavado y el medio deben ser anhidros (es decir, sin agua). Las muestras slidas se preparan mezclando una cierta cantidad de muestra con una sal altamente purificada (por lo general bromuro de potasio). Esta mezcla se tritura y se prensa con el fin de formar una pastilla por la que pueda pasar la luz. La pastilla necesita ser prensada a altas presiones para asegurar que sea translcida, pero esto no puede lograrse sin un equipo adecuado (por ejemplo, una prensa hidrulica). Al igual que el cloruro de sodio, el bromuro de potasio no absorbe la radiacin infrarroja, por lo que las nicas lneas espectrales provendrn del analito. MTODO TPICO Un haz de luz infrarroja es generado y dividido en dos rayos. Uno pasa por la muestra, y el otro por una referencia que suele ser la sustancia en la que est disuelta o mezclada la muestra. Ambos haces se reflejan de vuelta al detector, pero primero pasan a travs del separador, que alterna rpidamente cul de los dos rayos entra en el detector. Las dos seales se comparan y, a continuacin, se registran los datos. Hay dos razones por las que se utiliza una referencia: * Evita que las fluctuaciones de energa elctrica de la fuente afecten a los resultados finales, ya que tanto la muestra como la referencia se ven afectadas del mismo modo. Por esa misma razn, tambin impide la influencia de variaciones sobre el resultado final, debido al hecho de que la fuente no necesariamente emite la misma intensidad de luz para todas las longitudes de onda * Permite que los efectos del disolvente se anulen, porque la referencia es normalmente la forma pura del disolvente en el que se encuentra. USOS Y APLICACIONES La espectrometra infrarroja se utiliza ampliamente tanto en la industria como en la investigacin cientfica, porque es una tcnica rpida y fiable para medidas, control de calidad y anlisis dinmicos. Los instrumentos actuales son pequeos y pueden ser transportados, incluso para tomar medidas de campo. Con los avances en tecnologa de filtrado computacional y la manipulacin de los resultados, se pueden medir con precisin las muestras en una solucin (el agua produce una banda larga de absorbancia en el rango de inters, lo que dara un espectro ilegible sin dicho tratamiento computacional). Algunas mquinas incluso

dicen automticamente qu sustancia est siendo analizada a travs de miles de espectros de referencia almacenados en la memoria. Haciendo medidas a una frecuencia especfica a travs del tiempo, se pueden seguir los cambios en la naturaleza o la cantidad de un enlace en particular, lo que es especialmente til para medir el grado de polimerizacin en la fabricacin de polmeros. Las mquinas modernas pueden medir en el rango de inters con gran frecuencia, como 32 veces por segundo. Esto se puede hacer mientras se toman medidas simultneas con otras tcnicas. As las observaciones de reacciones qumicas son procesadas con mayor rapidez, y de forma ms precisa y exacta. ESPECTROMETRA DE INFRARROJOS POR TRANSFORMADA DE FOURIER La espectrometra infrarroja por transformada de Fourier (FTIV) es una tcnica de anlisis para obtener el espectro infrarrojo con mayor rapidez. En lugar de registrar los datos variando la frecuencia de luz infrarroja monocromtica, se gua la luz IV (con todas las longitudes de onda de pista utilizada) a travs de un interfermetro. Despus de pasar por la muestra, la seal medida da el interferograma. La realizacin de una transformada de Fourier de la seal produce un espectro idntico al de la espectrometra infrarroja convencional (dispersiva). Los espectrofotmetros FTIV son ms baratos que los convencionales, porque es ms simple construir un interfermetro que un monocromador. Adems, la medida de un solo espectro es mucho ms rpida en esta tcnica, debido a que la informacin de todas las frecuencias se toman al mismo tiempo. Esto permite hacer mltiples lecturas de una sola muestra y obtener un promedio, lo que aumenta la sensibilidad del anlisis. Debido a sus mltiples ventajas, casi todos los modernos espectrofotmetros de infrarrojos son FTIV.

Espectrometra de resonancia magntica nuclear

La espectrometra de resonancia magntica nuclear (RMN), ms comnmente conocida como espectrometra RMN, es una tcnica que explota las propiedades magnticas de ciertos ncleos. Las aplicaciones ms importantes para su uso en qumica orgnica son la espectrometra RMN de protones y la de carbono-13. En principio, la RMN es aplicable a cualquier ncleo que posea espn. Pueden obtenerse muchos tipos de informacin mediante un espectro RMN. Al igual que se utiliza la espectrometra de infrarrojos para identificar grupos funcionales, el anlisis de un espectro RMN unidimensional proporciona informacin sobre el nmero y tipo de entidades qumicas en una molcula. El impacto de la espectrometra RMN en las ciencias naturales ha sido sustancial. Puede utilizarse, entre otras cosas, para estudiar mezclas de analitos, para comprender efectos dinmicos como el cambio en la temperatura y los mecanismos de reaccin, y es una herramienta de valor incalculable para la comprensin de la estructura y funcin de las protenas y los cidos nucleicos. Este tipo de espectrometra se puede aplicar a una amplia variedad de muestras, tanto en solucin como en estado slido.

TCNICAS BSICAS DE ESPECTROMETRA RMN Cuando se sitan dentro de un campo magntico, los ncleos activos de RMN (como el 1 H, o el 13 C) absorben a una frecuencia caracterstica del istopo. La frecuencia de resonancia, la energa de la absorcin y la intensidad de la seal son proporcionales a la fuerza del campo magntico. Por ejemplo, en un campo magntico de 21 Tesla, los protones resuenan a 900 MHz. Es comn referirse a un imn de 21 T como imn de 900 MHz, aunque distintos ncleos resuenan a una frecuencia diferente en este campo. En el campo magntico terrestre, los mismos ncleos resuenan en frecuencias de audio. Este efecto se utiliza en los espectrmetros RMN y otros instrumentos. Debido a que estos instrumentos son fciles de transportar y baratos, a menudo se utilizan para la enseanza y el trabajo de campo. Desplazamiento qumico

Dependiendo del entorno qumico local, los diferentes protones en una molcula resuenan a frecuencias ligeramente diferentes. Dado que tanto este desplazamiento como la frecuencia de resonancia fundamental son directamente proporcionales a la fuerza del campo magntico, el desplazamiento de frecuencia se convierte en un campo independiente de valor adimensional conocido como desplazamiento qumico. El desplazamiento qumico se reporta como una medida relativa de algunas frecuencias de resonancia de referencia. (Para los ncleos 1 H, 13 C, y 29 Si, se usa como referencia el tetrametilsilano o TMS.) Esta diferencia entre la frecuencia de la seal y la frecuencia de la referencia se divide por la frecuencia de la seal de referencia para obtener el desplazamiento qumico. Los desplazamientos de frecuencia son muy pequeos en comparacin con la frecuencia RMN fundamental. Un desplazamiento de frecuencia tpico podra ser de 100 Hz, en comparacin con una frecuencia RMN fundamental de 100 MHz, por lo que el desplazamiento qumico se expresa generalmente en partes por milln (ppm). Mediante la comprensin de los diferentes entornos qumicos, el desplazamiento qumico puede ser utilizado para obtener informacin estructural sobre la molcula en una muestra. La conversin de los datos en bruto a esta informacin se llama asignacin del espectro. Por ejemplo, para el espectro 1H-RMN del etanol (CH3CH2OH), cabra esperar tres seales especficas en tres desplazamientos qumicos especficos: uno para los grupos CH3, uno para el grupo CH2 y otro para el grupo OH. Un grupo CH3 tpico tiene un desplazamiento de alrededor de 1 ppm, un CH2 adjunto a un OH tiene un desplazamiento de alrededor de 4 ppm y un OH tiene un desplazamiento en torno a 2-3 ppm, dependiendo del disolvente utilizado. A causa del movimiento molecular a temperatura ambiente, los tres protones metilo alcanzan un promedio durante el curso del experimento RMN (que normalmente requiere unos pocos milisegundos). Estos protones se degeneran y forman un pico al mismo desplazamiento qumico. La forma y el tamao de los picos son indicadores de la estructura qumica. En el ejemplo anterior -el espectro de protones de etanol-, el pico de CH3 sera tres veces ms grande que el OH. Del mismo modo, el pico de CH2 sera el doble en tamao al pico de OH, pero slo 2/3 del tamao del pico de CH3. El software de anlisis moderno permite analizar el tamao de los picos para comprender cmo muchos protones dan lugar al pico. Esto se conoce como integracin, un proceso matemtico que calcula el rea bajo un grfico (lo que, en esencia, es un espectro). El analista debe integrar el pico y no medir su altura, porque los picos tambin tienen anchura y, por ende, su tamao depende de su rea y no de su altura. Sin embargo, cabe mencionar que el nmero de protones, o cualquier otro ncleo observado, es slo proporcional a la intensidad, o integral, de la seal RMN, en los experimentos RMN unidimensionales ms simples. En

experimentos ms elaborados, como los que suelen utilizarse para obtener el espectro RMN del carbono-13, la integral de las seales depende de la tasa de relajacin del ncleo, y de sus constantes de acoplamiento escalar y dipolar. Muy a menudo, estos factores son poco conocidos, por lo que la integral de la seal RMN es muy difcil de interpretar en los experimentos ms complicados.

Acoplamiento-J Parte de la informacin ms til para determinar la estructura en un espectro RMN unidimensional proviene del acomplamiento-J o acoplamiento escalar (un caso especial de acoplamiento espn-espn) entre los ncleos activos de RMN. Este acoplamiento surge de la interaccin de los diferentes estados espn a traves de los enlaces qumicos de una molcula, y resulta en la divisin de seales RMN. Estos patrones de divisin pueden ser complejos o simples y, del mismo modo, pueden ser interpretables o engaosos. Este acoplamiento proporciona informacin detallada sobre la conectividad de los tomos en una molcula. El acoplamiento a ncleos equivalentes n (espn ) divide la seal en un multiplete n + 1 con ratios de intensidad que siguen el tringulo de Pascal. El acoplamiento a espines adicionales conducir a nuevas divisiones de cada uno de los componentes del multiplete; por ejemplo, el acoplamiento a dos ncleos diferentes de espn , con constantes de acoplamiento muy distintas, conducir a un doblete de dobletes (abreviatura: dd). Hay que tener en cuenta que el acoplamiento entre ncleos que son qumicamente equivalentes (es decir, que tienen el mismo desplazamiento qumico) no tiene efecto de los espectros RMN, y los acoplamientos entre ncleos que son distantes (por lo general ms de 3 enlaces en molculas flexibles) suelen ser demasiado pequeos para observar divisiones. Los acoplamientos de largo alcance, de ms de tres enlaces, se observan a menudo en compuestos aromticos y cclicos, conduciendo a patrones de divisin ms complejos. Por ejemplo, en el espectro de protones para el etanol que se ha descrito anteriormente, el grupo CH3 se divide en un triplete con una relacin de intensidad de 1:2:1 mediante los dos protones CH2 vecinos. Del mismo modo, el CH2 se divide en un cuarteto con una relacin de intensidad de 1:3:3:1 mediante los tres protones CH3 vecinos. En principio, los dos protones CH2 tambin se dividen de nuevo en un doblete para formar un doblete de cuartetos mediante el protn hidroxilo, pero el intercambio intermolecular del protn hidroxilo acdico a menudo resulta en una prdida de informacin del acoplamiento. El acoplamiento a cualquier ncleo de espn , tal como el fsforo-31 o el flor-19, funciona de esta manera (aunque las magnitudes de las constantes de

acoplamiento pueden ser muy diferentes). Pero los patrones de divisin difieren de los descritos anteriormente para los ncleos con espn superior a debido a que el nmero cuntico de espn tiene ms de dos valores posibles. Por ejemplo, para el acoplamiento al deuterio (un ncleo de espn 1) divide la seal en un triplete 1:1:1, porque el espn 1 tiene tres estados de espn. Del mismo modo, un ncleo de espn 3/2 divide una seal 1:1:1:1 en un cuarteto y as sucesivamente. El acoplamiento combinado con el desplazamiento qumico (y la integracin de protones) nos dice no slo el entorno qumico de los ncleos, sino tambin el nmero de ncleos activos RMN vecinos en la molcula. En los espectros ms complejos, con mltiples picos en desplazamientos qumicos similares, o en el espectro de ncleos distintos del hidrgeno, el acoplamiento es a menudo la nica manera de distinguir ncleos diferentes. Acoplamiento de segundo orden (o fuerte) La descripcin anterior asume que la constante de acoplamiento es pequea en comparacin con la diferencia en frecuencias RMN entre los espines inequivalentes. Si la separacin del desplazamiento disminuye (o la fuerza del acoplamiento aumenta), los patrones de intensidad del multiplete se distorsionan, y luego se vuelven ms complejos y difciles de analizar (especialmente si ms de dos espines estn involucrados). La intensificacin de algunos picos en un multiplete se logra a expensas del resto, que a veces casi desaparece en el ruido de fondo, aunque el rea integrada bajo los picos se mantenga constante. En la mayora de RMN de alto campo, sin embargo, las distorsiones suelen ser modestas y las distorsiones caractersticas (techo) pueden ayudar a identificar los picos. Los efectos de segundo orden disminuyen cuando la diferencia de frecuencia entre multipletes aumenta, por lo que el espectro RMN de alto campo (es decir, de alta frecuencia) muestra menos distorsin que los espectros de frecuencia menor. Los primeros espectros a 60 MHz eran ms propensos a la distorsin que los espectros de mquinas posteriores que operan en frecuencias de 200 MHz o superiores. Inequivalencia magntica Pueden ocurrir efectos ms sutiles si los espines qumicamente equivalentes (es decir, ncleos relacionados por simetra y con la misma frecuencia RMN) tienen diferentes relaciones de acoplamiento respecto a los espines externos. Los espines que son qumicamente equivalentes pero no son indistinguibles (sobre la base de sus relaciones de acoplamiento) se denominan espines con inequivalencia magntica. Por ejemplo, los sitios 4 H del 1,2-diclorobenceno se dividen en dos pares qumicamente equivalentes por simetra, pero un individuo miembro de uno de los pares tiene diferentes acoplamientos a los espines que componen el otro par. La inequivalencia magntica puede dar lugar a espectros

muy complejos que slo pueden ser analizados mediante modelado computacional. Estos efectos son ms comunes en los espectros RMN de sistemas aromticos y otros no flexibles, mientras que el promedio conformacional de los enlaces CC en molculas flexibles tiende a igualar los acoplamientos entre protones en carbonos adyacentes, reduciendo los problemas con la inequivalencia magntica. ESPECTROMETRA DE CORRELACIN La espectrometra de correlacin es uno de los diversos tipos de espectrometra de resonancia magntica nuclear (RMN) bidimensional. Este tipo de experimento RMN es mejor conocido por su acrnimo, COSY. Otros tipos de espectrometra RMN bidimensional son la espectrometra-J, la de intercambio (EXSY), la de efecto Overhauser nuclear (NOESY), la de correlacin total (TOCSY), y experimentos de correlacin heteronuclear como el HSQC, HMQC y HMBC. Los espectros bidimensionales RMN proporcionan ms informacin acerca de una molcula que los espectros RMN unidimensionales, y son especialmente tiles para determinar la estructura de la molcula, en particular para molculas que son demasiado complicadas para la RMN unidimensional. El primer experimento bidimensional, COSY, fue propuesto por Jean Jeener, un profesor de la Universit Libre de Bruxelles, en 1971. Este experimento fue posteriormente implementado por Walter P. Aue, Enrico Bartholdi y Richard R. Ernst, que publicaron sus trabajos en 1976. RESONANCIA MAGNTICA NUCLEAR DE ESTADO SLIDO Una variedad de circunstancias fsicas impide que las molculas sean estudiadas en solucin, ni tampoco mediante otras tcnicas espectroscpicas a un nivel atmico. En los medios de fase slida, tales como cristales, polvos microcristalinos, geles, soluciones anisotrpicas, etc, se da en particular el acoplamiento dipolar y la anisotropa de desplazamiento qumico, que se convierten en dominantes para el comportamiento de los sistemas de espn nuclear. En la espectrometra RMN convencional en estado de solucin, estas interacciones adicionales daran lugar a una ampliacin considerable de las lneas espectrales. Diversas tcnicas permiten establecer condiciones de alta resolucin, que pueden, al menos para los espectros de 13 C, ser comparables a los espectros RMN en estado de solucin. Dos conceptos importantes para la alta resolucin en la espectrometra RMN de estado slido son la limitacin de la posible orientacin molecular mediante orientacin de la muestra, y la reduccin de las interacciones magnticas nucleares anisotrpicas mediante giro de la muestra. De este ltimo enfoque, destaca el mtodo del giro rpido en torno al ngulo mgico, cuando el sistema est compuesto por ncleos de espines 1/2. Una serie de tcnicas intermedias,

con muestras de alineamiento parcial o movilidad reducida, se estn utilizando tambin en espectrometra RMN. Las aplicaciones de la RMN de estado slido suelen utilizarse en investigaciones sobre protenas de la membrana, fibrillas de protenas, todo tipo de polmeros, anlisis en qumica inorgnica, y tambin otras ms "exticas" como las hojas de plantas y las pilas de combustible. ESPECTROMETRA RMN APLICADA A PROTENAS Gran parte de la reciente innovacin dentro de la espectrometra RMN se ha dado en el campo de estudio de las protenas, y se ha convertido en una tcnica muy importante en la biologa estructural. Un objetivo comn de estas investigaciones es obtener una alta resolucin de las estructuras tridimensionales de las protenas, similar a lo que puede lograrse por cristalografa de rayos X. En contraste con la cristalografa de rayos X, la RMN se limita sobre todo a las protenas relativamente pequeas, de menos de 35 kDa, aunque los avances tcnicos permiten la resolucin de estructuras ms grandes. La espectrometra RMN es a menudo la nica manera de obtener informacin de alta resolucin, en todo o en parte, de protenas no estructuradas. Las protenas son varios rdenes de magnitud ms grandes que las pequeas molculas orgnicas que se mencionaron anteriormente en este artculo, pero la misma teora se aplica a la RMN. Debido al mayor nmero de elementos presentes en la molcula, los espectros unidimensionales bsicos se ven solapados con la superposicin de seales, hasta el punto de que el anlisis resulta imposible. Por lo tanto, se realizan experimentos multidimensionales (2, 3 o 4D) para hacer frente a este problema. Para facilitar estos experimentos, es conveniente marcar isotpicamente la protena con 13 C y 15 N, debido a que los istopos 12 C predominantes de forma natural no son activos a la RMN, mientras que el momento cuadrpolo nuclear del istopo 14 N predominante de forma natural impide que se pueda obtener informacin de alta resolucin a partir de este istopo de nitrgeno. El mtodo ms importante utilizado para la determinacin de la estructura de las protenas utiliza experimentos NOE para medir las distancias entre pares de tomos dentro de la molcula. Posteriormente, las distancias obtenidas se utilizan para generar una estructura 3D de la molcula usando un programa de ordenador.

Espectrometra de absorcin atmica

En qumica analtica, la espectrometra de absorcin atmica es una tcnica para determinar la concentracin de un elemento metlico determinado en una muestra. Puede utilizarse para analizar la concentracin de ms de 62 metales diferentes en una solucin.Aunque la espectrometra de absorcin atmica data del siglo XIX, la forma moderna fue desarrollada en gran medida durante la dcada de los 50 por un equipo de qumicos de Australia, dirigidos por Alan Walsh.

PRINCIPIOS EN LOS QUE SE BASA La tcnica hace uso de la espectrometra de absorcin para evaluar la concentracin de un analito en una muestra. Se basa en gran medida en la ley de Beer-Lambert. En resumen, los electrones de los tomos en el atomizador pueden ser promovidos a orbitales ms altos por un instante mediante la absorcin de una cantidad de energa (es decir, luz de una determinada longitud de onda). Esta cantidad de energa (o longitud de onda) se refiere especficamente a una transicin de electrones en un elemento particular, y en general, cada longitud de onda corresponde a un solo elemento. Como la cantidad de energa que se pone en la llama es conocida, y la cantidad restante en el otro lado (el detector) se puede medir, es posible, a partir de la ley de Beer-Lambert, calcular cuntas de estas transiciones tienen lugar, y as obtener una seal que es proporcional a la concentracin del elemento que se mide. INSTRUMENTOS

Para analizar los constituyentes atmicos de una muestra es necesario atomizarla. La muestra debe ser iluminada por la luz. Finalmente, la luz es transmitida y medida por un detector. Con el fin de reducir el efecto de emisin del atomizador (por ejemplo, la radiacin de cuerpo negro) o del ambiente, normalmente se usa un espectrmetro entre el atomizador y el detector. Tipos de atomizadores Para atomizar la muestra normalmente se usa una llama, pero tambin pueden usarse otros atomizadores como el horno de grafito o los plasmas, principalmente los plasmas de acoplamiento inductivo. Cuando se usa una llama, se dispone de tal modo que pase a lo largo lateralmente (10 cm) y no en profundidad. La altura de la llama sobre la cabeza del quemador se puede controlar mediante un ajuste del flujo de mezcla de combustible. Un haz de luz pasa a travs de esta llama en el lado ms largo del eje (el eje lateral) e impacta en un detector. Anlisis de los lquidos Una muestra de lquido normalmente se convierte en gas atmico en tres pasos: 1. Desolvacin. El lquido disolvente se evapora, y la muestra permanece seca. 2. Vaporizacin. La muestra slida se evapora a gas. 3. Atomizacin. Los compuestos que componen la muestra se dividen en tomos libres. Fuentes de luz La fuente de luz elegida tiene una anchura espectral ms estrecha que la de las transiciones atmicas. * Lmparas de ctodo hueco. En su modo de funcionamiento convencional, la luz es producida por una lmpara de ctodo hueco. En el interior de la lmpara hay un ctodo cilndrico de metal que contiene el metal de excitacin, y un nodo. Cuando un alto voltaje se aplica a travs del nodo y el ctodo, los tomos de metal en el ctodo se excitan y producen luz con una determinada longitud de onda. El tipo de tubo catdico hueco depende del metal que se analiza. Para analizar la concentracin de cobre en un mineral, se utiliza un tubo catdico de cobre, y as para cualquier otro metal que se analice. * Lsers de diodo. La espectrometra de absorcin atmica tambin puede ser llevada a cabo mediante lser, principalmente un lser de diodo, ya que sus propiedades son apropiadas para la espectrometra de absorcin lser. La tcnica se denomina espectrometra de absorcin atmica por lser de diodo (DLAAS o

DLAS), o bien, espectrometra de absorcin por modulacin de longitud de onda. MTODOS DE CORRECCIN DE FONDO El estrecho ancho de banda de las lmparas catdicas huecas hace que sea raro el solapamiento espectral. Es decir, es poco probable que una lnea de absorcin de un elemento se solape con otra. La emisin molecular es mucho ms amplia, por lo que es ms probable que algunas bandas de absorcin molecular se superpongan con una lnea atmica. Esto puede resultar en una absorcin artificialmente alta y un clculo exagerado de la concentracin en la solucin. Se utilizan tres mtodos para corregir esto: * Correccin de Zeeman. Se usa un campo magntico para dividir la lnea atmica en dos bandas laterales. Estas bandas laterales estn lo suficientemente cerca de la longitud de onda original como para solaparse con las bandas moleculares, pero estn lo suficientemente lejos como para no coincidir con las bandas atmicas. Se puede comparar la absorcin en presencia y ausencia de un campo magntico, siendo la diferencia la absorcin atmica de inters. * Correccin de Smith-Hieftje (inventada por Stanley B. Smith y Gary M. Hieftje) La lmpara catdica hueca genera pulsos de alta corriente, provocando una mayor poblacin de tomos y auto-absorcin durante los pulsos. Esta auto-absorcin provoca una ampliacin de la lnea y una reduccin de la intensidad de la lnea a la longitud de onda original. * Lmpara de correccin de deuterio. En este caso, se usa una fuente de amplia emisin (una lmpara de deuterio), para medir la emisin de fondo. El uso de una lmpara separada hace de este mtodo el menos exacto, pero su relativa simplicidad (y el hecho de que es el ms antiguo de los tres) lo convierte en el ms utilizado.

Espectrometra Mossbauer
La espectrometra Mssbauer es un mtodo para determinar el grado de oxidacin qumica y el entorno de los elementos qumicos. El efecto Mssbauer, que se basa en este espectrmetro, le vali el Premio Nobel de Fsica a su descubridor, Rudolf Ludwig Mssbauer. Esta tcnica es conocida sobre todo por el estudio del hierro, pero tambin es aplicable a cualquier especie qumica cuyo ncleo atmico presente un espn no nulo. TEORA BSICA La muestra se excita mediante una radiacin gamma (fotones) que vara la energa de transicin nuclear. Para eso, se dispone una fuente de radiacin que emite continuamente, y se desplaza la fuente mediante oscilaciones, produciendo el efecto Doppler-Fizeau el cambio de energa. Un detector se encuentra detrs de la muestra. Cuando la energa de radiacin incidente se corresponde con la energa de transicin electrnica, la radiacin se absorbe, y por lo tanto la intensidad recogida baja. As pues, esta es una espectrometra de absorcin. El espectro Mssbauer consta de un conjunto de multipletes cuya forma y posicin (desplazamiento qumico) es caracterstico tanto del nmero de oxidacin como de la naturaleza y la geometra de los vecinos ms cercanos al elemento qumico estudiado. APLICACIONES * Corrosin acuosa. En la corrosin acuosa del hierro y el acero, se forman diferentes fases de oxidacin. La espectrometra Mssbauer es parte del estudio de estas fases.

* Espectrmetro a bordo de sondas espaciales. Este instrumento es parte del equipo de las sondas Spirit, Opportunity y Beagle 2 enviadas a Marte en 2003. Sus funciones son, entre otras: a) Determinar la composicin y abundancia de minerales ricos en hierro para posibles operaciones futuras. b) Medir el magnetismo de diversos materiales marcianos (suelo, polvo, rocas). * Corrimiento al rojo gravitacional. La relatividad general predice que la frecuencia observada de una seal emitida a la superficie de una estrella disminuye con la distancia al observador. Intuitivamente, es una traduccin del hecho de que cualquier partcula, incluidos los fotones, pierden la energa para salir de un campo gravitacional. Del mismo modo, una seal de frecuencia emitida a la parte superior de una torre, ser captada en la parte inferior de la torre de altura h con una frecuencia ' calculada segn la frmula.

donde g es la aceleracin de la gravedad terrestre y c la velocidad de la luz. Para una altura de 10 metros, y ' se diferencian slo en 10 elevado a -15, una diferencia muy difcil de medir. Histricamente, la primera evidencia de este efecto tuvo lugar en 1960 por parte de RV Pound y GA Rebka al utilizar el efecto Mossbauer descubierto un ao antes .