Schema de principiu gaz cromatograf

Injectie Detector

Procesare date

Debitmetru Coloana Rezervor eluent Cuptor

Faza mobil ( (eluentul) )

Faza mobila:
transporta proba prin coloana cromatografic t fi asigur mediul de repartiie difereniat

Regulatorul de debit:
controleaza debitul eluentului, gazos sau lichid, n regim izobar sau cu gradient debitmetru n cazul GC pomp n cazul LC

Sistemul de injec j ie
Permite introducerea manual (sering) sau automat (injector) a probei Asigur reproductibilitatea cantitii de prob introduse n coloan Injectoarele j sunt dispozitive p cu construcie diferit pentru cromatografia gazoas i cea lichid. Eficiena separrii i calitatea rezultatelor depind n mare msur de etapa p de introducere a p probei.

Picul cromatografic g si cromatograma g

Compusii sunt purtati de faza mobila de-a lungul fazei stationare cu viteze diferite de parcurs, ceea ce duce la separarea lor. C Compu i sunt separai di dintr-o prob b complex l sub b form de zone distincte cu o distribuie de tip G Gauss a concentra t iei i il lor i in f faza stationara. t ti Picul cromatografic, respectiv electroforetic, este reprezentarea grafic a acestei concentraii Gaussiene. Maximul picului corespunde zonei de concentratie maxima a compusului. g este reprezentarea p g grafica a Cromatograma separarii amestecului de compusi.

Coloana cromatografic g
sediul fazei staionare conine, la un moment dat, cele dou faze cromatografice i amestecul de compui este locul unde se realizeaz separarea componentelor probei din cauza interaciunii moleculelor amestecului cu faza staionar (preferenial fa de faza mobil) componenii din prob rmn n urma eluentului, n funcie de diferenele care exist ntre constantele lor d echilibru de hilib d de reparti tiie, i ntre t cele l dou d faze: f K1 K2 ca urmare se produce o difereniere a vitezelor lor de migrare i, n final, f separarea

Detectorul
pune n eviden componenii care prsesc coloana cromatografic antrenai de faza mobil este capabil s perceap o anumit proprietate specific componenilor probei (nespecifica eluentului)
termica electrica electromagnetica optica radiometrica

Detectorul
detectorul transform informaia d despre proprietatea i t t perceput t ntr-un t semnal electric astfel nct s poat fi reprodus d sub bf form grafic fi exist dou categorii g de detectori:
universali: pot evidenia un numr mare de componen p i specifici: pot detecta numai anumii componen p i

este piesa cea mai important a unui cromatograf dup coloana cromatografic

Calculatorul
este conectat sistemului cromatografic printr-un program (soft) specializat are rol dublu
asigur comanda operaiilor cromatografice (automatizare): startul i sfritul eluiei, operarea n condiii izocratice sau de gradient, volumul i ordinea probelor de injecie etc. preia semnalele amplificate de la detector, stocheaz i prelucreaz rezultatele separrii sub form de tabele de valori i-sau cromatograme

Reperele p p picului cromatografic g

- lrgimea picului la punctul de

inflexiune (Wi); - lrgimea picului la jumtate din nlimea lui (W0,5); - lrgimea g picului p la baz determinat ntre punctele n care tangenta la curb prin punctul de inflexiune intersecteaz abscisa (Wb); - nlimea picului (H); - nlimea picului la punctul de inflexiune (Hi/H0,61); - nlimea picului la jumtatea lui (H0,5) - deviaia standard la punctul de inflexiune a curbei Gauss ( )

wi = 2

wh = 2,354

wb = 4

Picul cromatografic g
Picul cromatografic g d informaii despre p dou tipuri de parametri:
calitativi (identificare):
timpul de retenie absolut; volumul de retenie absolut; timpul de retenie relativ; volumul de retenie relativ; retentia factorul de capacitate

cantitativi (dozare):
aria nlimea picului cromatografic (pt picuri f inguste).

Cromatograma g

Timpul de retenie absolut: 0 - tR1 Timpul de retenie relativ: tel - tR1 Timpul mort: 0 - tel

Timpul p de retenie absolut

Timpul de retenie absolut (tR)
reprezint timpul scurs de la injectarea probei n sistemul cromatografic, pn n momentul deteciei unui rspuns maxim (eluia uneia din speciile separate) ntre 0 i tR1 dac dou specii nu prezint constante de echilibru de repartiie diferite, ele co co-elueaz elueaz (ies sub acelai pic) i au acelai tR

Timpul p de retenie relativ

Timpul de retenie relativ - (sau timp de retenie ajustat, sau timp de sorbie) (tR)
corespunde timpului pe care o specie de analit l petrece n faza staionar ntre tel i tR1 diferena dintre timpul de retenie absolut i timpul de retenie relativ corespunde perioadei de timp pe care solutul a petrecut-o doar n faza mobil

Timpul p mort
Timpul mort (timpul de desorbie) (tM)
timpul necesar frontului de faz mobil pentru a parcurge coloana cromatografic (intre 0 si tel)

definiie alternativ
timpul de retenie absolut al unui compus care nu interacioneaz deloc cu faza staionar i iese din coloan odat cu eluentul (constanta sa de distribuie K fii d nul fiind l)

Retenia si factorul de capacitate p

Retenia
d definitie: fi iti viteza it relativ l ti de d migrare i a moleculelor l l l unui i compus fa de cele ale eluentului reprezint capacitatea fazei mobile de a reine moleculele componenilor amestecului

V R= Vel
Factorul de capacitate (k)
raport t al l numrului l id de moli li ai i aceluia l i i compus repartiza ti i la echilibru ntre cele dou faze

nS k= nM

Cromatograma
4 2 3 5 6

Timp Coloana 0 start; 1 pic de sistem (iese din coloana eluentul si compusii neretinuti); 2 pic frontal; 3 pic simetric; 4-5 picuri suprapuse, substante neseparate); 6 pic cu coada