Sunteți pe pagina 1din 4

LP 2 AMG Moase PROTEINA C REACTIVA - CRP metoda dublei difuzii Ouchterlony si metoda latex Metoda Ouchterlony metoda imunochimica

ca bazata pe reactia de precipitare in mediu solid imunodifuzie radiala dubla. Metoda latex metoda imunochimica bazata pe reactia de aglutinare. PROTEINA C REACTIVA - CRP Definitie Este o proteina clasica de faza acuta a inflamatiei, care apare ca raspuns rapid la bolnavii cu: - diferite infectii microbiene (cu streptococ, pneumococ etc.) - in inflamatii (reumatism), - in infarctul miocardic, in tumori, etc. Rolul Proteina C reactiva este sintetizata in ficat si initiaza opsonizarea si fagocitoza celulelor care patrund in organism, dar - rolul ei principal rezida in fixarea si neutralizarea substantelor toxice endogene provenite din leziunile celulare. Proteina C reactiva este o proteina care nu exista in mod normal in serul uman. Semnificatie clinica - Ea are importanta alaturi de alte teste cum ar fi VSH si fibrinogen. - Toate cele trei indica prezenta unui sindrom inflamator (este marker al inflamatiei). - Prin proteina C reactiva se poate masura si riscul ca un pacient sa prezinte o boala cardiovasculara. Astfel, daca el are o concentratie de sub 1mg/l atunci riscul este practic 0, iar daca are peste 3mg/l atunci riscul este foarte ridicat. Dozarea CRP e utila in:

depistarea proceselor inflamatorii sistemice (cu exceptia lupusului eritematos diseminat, si a rectocolitei hemoragice) aprecierea eficacitatii tratamentului antiinfectios, sau antiinflamator

detectia precoce a unor complicatii postoperatorii (infectii ale plagii, tromboze, pneumonie) diferentierea intre infectie si reactie de rejet dupa transplant de maduva osoasa

Reactia prin care se pune in evidenta proteina C reactiva este o reactie in urma caruia are loc un fenomen de precipitare (imunodifuzia dublu radiala-Ouchterlony) sau aglutinare (metoda latex). Proteina C reactiva precipita prin testarea serului de cercetat cu un antiser specific in caz de boli inflamatorii. 1. Testul de imunodifuzie dubl radial (Ouchterlony) Aceast metod se bazeaz pe difuzia antigenului i a anticorpilor unul ctre cellalt, ntr-un mediu gelozat, care iniial nu are ncorporat nici un reactant (Rpuntean, 1994). n dou godeuri alturate, decupate dintr-un gel de agar se umplu, unul cu protein anticorp i unul cu protein antigel omoloag, Ag i Ac vor difuza unul spre cellalt iar la locul de ntlnire va aprea o linie de precipitat. Pentru realizarea acestei metode se utilizeaza urmtoarele: - ser de examinat, proaspt sau pstrat la 20oC. - ser de referin (conine PCR Ag standard) - gel de agar - lam de microscop sau cutii Petri - antiser monospecific Mod de lucru - Agarul topit se toarn pe lama de microscop n cantitate de 3,5 ml gel. - Dup solidificare s-au decupat godeuri de 3 mm diametru, n model radial, unul central i 6 periferice. - Godeurile se umplu cu reactani cu ajutorul micropipetei, astfel: n godeul central se pune antiser iar n celelalte se repartizeaz: n I i IV ser de referin iar n II, III, V i VI serurile de cercetat. - Placile au fost puse la termostat, n cutii umede, pentru a se mpiedeca uscarea agarului. - Citirea se face n camer obscur, la o surs de lumin, (dup 2 ore sunt vizibile, dup 4 ore sunt clare, dup 24 ore sunt mult ntrite). Rezultatele se exprim n prezent sau absent

2. Determinarea proteinei C-reactiv (CRP) prin metoda LATEX Este un test calitativ sau semicantitativ. CRP este o -globulin, al crui nivel crete n procesele inflamatorii, n faza acut a unor afeciuni i dup operaii chirurgicale. Principiul metodei Reactivul CRP-Latex este o suspensie de particule de polistiren sensibilizate cu anticorp uman de protein C-reactiv. Cnd reactivul ajunge n contact cu serul care contine anticorpi de CRP, are loc o reacie antigen-anticorp usor de vizualizat, fiind o reactie de aglutinare a latexului. Reactivi i materiale - Reactiv CRP Latex: 2 sau 4 ml de reactiv latex - Control pozitiv: 0,5 ml ser uman, CRP>15mg/l - Control negativ: 0,5 ml ser uman, CRP1mg/l - Lame i baghete de unic folosin - Plci de reacie cu 6 locuri Proba: ser proaspt sau conservat, nehemolizat, fr impuriti Mod de lucru - Se aduc reactivii i serurile de analizat la temperatura camerei - Se pune o pictur (40-50l) de prob i 1 pictur din fiecare control n godeuri separate de pe plac - Se adaug 1 pictur reactiv latex - Se amestec cu bagheta picturile - Se observ prezena sau absena aglutinrii n 3 min Rezultate 1. Rezultat pozitiv apare aglutinare vizibil a particulelor de latex Aceasta reprezint un nivel de CRP 6mg/l n serul testat 2. Rezultat negativ nu apare aglutinare n interval de 3 min Aceasta reprezint un nivel de CRP <6mg/l n serul testat

Valori normale 6 8 mg/l Valoarea CRP crete foarte mult n fazele acute ale bolii, atingnd o valoare de 500 mg/l

S-ar putea să vă placă și