II.

MATERIAL BIOLOGIC I METODE DE STUDII

n calitate de material biologic au servit fructele uscate i proaspete (pstrate la
frigider temperatura +4
O
C) la dou forme noi de aronie A.melanocarpa (Michx.) Elliot (
forma 1 i 2 ) i a doua forme noi de ctin de ru H.rhamnoides L. ( 1-13 i 3-13 ) create n
Grdina Botanic.
Plantele i fructele formelor noi au fost caracterizate printr-un complex de parametri
morfologici i tehnologici: culoarea, greutatea (100 fructe), forma i mrimea fructelor,
numrul de fructe pe lujeri (10 cm), perioada de maturare i recoltare a fructelor.
S-a efectuat studiul chimic al celor mai principale grupe de substane biologic active
n fructele formelor noi de A.melanocarpa i H.rhamnoides:
determinarea calitativ i cantitatiov a acidului ascorbic;
determinarea calitativ i cantitativ a flavonozidelor;
determinarea calitativ i cantitativ a taninurilor.
Metode de analiz a acidului ascorbic:
Studiu calitativ. Pentru identificarea acidului ascorbic s-a utilizat metoda CSS [analiza
chimica a plant. Medicin]. Se mrunesc 0,5 g de fructe de (aronie, ctin de ru) se adaug 5
ml ap, se amestec i peste 15 min. se filtreaz. Extractul obinut se picur cu capilarul pe
plac, alturi se picur acid ascorbic pur. Placa se plaseaz n camera cromatografic cu
sistemul de solveni acetat de etil acid acetic glacial (80:20). Dup cromatografiere de
aproximativ 20 min. ( parcursul solventului e de aproximativ 13 cm ) cromatograma se usuc
la aer.
Cromatograma se trateaz cu soluie 0,04% (sau 0,001 n) de 2,6-
diclorfenolindofenolat de sodiu n ap. Acidul ascorbic se identific sub form de pat alb pe
fond roz.
Studiul cantitativ. S-a realizat prin tehnici [analiza chimic] conform crora: 10 g
fructe (catin de ru, aronie) se piseaz n mojar, adugnd treptat 150 ml ap distilat. Se
macereaz 10 min., apoi se amestec, se centrifugheaz i se filtreaz. n balonul conic de 50-
100 ml se adug 1 ml soluie 2% acid clorhidric, apoi 1 ml de extract analizat i 13 ml de
ap, urmeaz titrarea cu soluie 0,001 H de 2,6-diclorfendindofenolat de sodiu pn la apariia
culorii roz, care persist timp de 0,5-1 min. Titrarea se efectueaz cel mult 2 min. n cazul
culorii intensive a filtratului ori a coninutului sporit de acid ascorbic (2,6diclor
fenolindofenolat de sodiu se cheltuie peste 2 ml), determinat prin titrarea de prob, se
dilueaz nainte de titrare de 2 i mai multe ori.

Metode de analiz a flavonozidelor:
Studiu calitativ.

Studiu cantitativ.
Metode de analiz calitativ i cantitativ a flavonoidelor. Identificarea
flavonoidelor prin reacii specifice de colorare sau sedimentare (cianidinic, cu acetat de Pb,
soluie de amoniac, acid azotic, soluie de vanilin n HCl, soluie de NaOH n alcool etilic
sau n acid sulfuric concentrat, soluie de AlCl
3
) conform metodicelor [33,37,44,49].
Metode de analiz calitativ i cantitativ a taninurilor. Reacii calitative de
identificare (cu gelatin, sare mijlocie a acetatului de Pb, aluni de Fe i amoniu, cristale
NaNO
3
i HCl, FeCl
3
i HCl, ap de Br, cromat de K n bisulfat de Na) au fost aplicate
conform [33,37,44,49]. Modul de preparare: la 1g de produs mrunit se adaug 100 ml de
ap purificat. Extracia are loc pe baia de ap timp de 20-30 min, dup rcire se filtreaz.
Modul de aplicare i efectele reaciilor vor fi descrise n paragraful 5.3.4. Determinarea
coninutului de taninuri a fost efectuat prin metoda titrimetric [].