M e t a b o l i c a nd S c i nt i g r a p h i c S t u di e s o f R a di o i o di na t e d Hu ma n

C - r e a c t i v e P r o t e i n i n He a l t h a nd Di s e a s e
Da v i d M . V i g u s h i n, M a r k B . P e p y s , a nd P h i l i p N . Ha wki ns
I mmu no l o g i c a l M e di c i ne U ni t , De p a r t me nt o f M e di c i ne , R o y a l P o s t g r a du a t e M e di c a l S c h o o l ,
Ha mme r s mi t h Ho s p i t a l , L o ndo n W12 O N N , U ni t e d K i ng do m
A b s t r a c t
P l a s ma a nd wh o l e - b o dy t u r no v e r s t u di e s o f h u ma n C - r e a c t i v e
p r o t e i n ( C R P ) , i s o l a t e d f r o m a s i ng l e no r ma l h e a l t h y do no r
a nd l a b e l e d wi t h 125 I , we r e u nde r t a ke n i n 8 h e a l t h y c o nt r o l s u b -
j e c t s a nd 3 5 h o s p i t a l i z e d p a t i e nt s i nc l u di ng c a s e s o f r h e u ma t o i d
a r t h r i t i s , s y s t e mi c l u p u s e r y t h e ma t o s u s , i nf e c t i o ns , a nd ne o p l a -
s i a . P l a s ma c l e a r a nc e o f ' 25 I - C R P c l o s e l y a p p r o x i ma t e d t o a
mo no e x p o ne nt i a l f u nc t i o n a nd wa s s i mi l a r i n t h e c o nt r o l a nd a l l
p a t i e nt g r o u p s . T h e r e wa s no e v i de nc e f o r a c c e l e r a t e d c l e a r a nc e
o r c a t a b o l i s m o f C R P i n a ny o f t h e di s e a s e s s t u di e d. T h e 19 - h
h a l f - l i f e wa s mo r e r a p i d t h a n t h a t o f mo s t h u ma n p l a s ma p r o -
t e i ns s t u di e d p r e v i o u s l y , a nd t h e f r a c t i o na l c a t a b o l i c r a t e wa s
i nde p e nde nt o f t h e p l a s ma C R P c o nc e nt r a t i o n. T h e s y nt h e s i s
r a t e o f C R P i s t h u s t h e o nl y s i g ni f i c a nt de t e r mi na nt o f i t s
p l a s ma l e v e l , c o nf i r mi ng t h e v a l i di t y o f s e r u m C R P me a s u r e -
me nt a s a n o b j e c t i v e i nde x o f di s e a s e a c t i v i t y i n di s o r de r s a s s o -
c i a t e d wi t h a n a c u t e - p h a s e r e s p o ns e . A p p r o x i ma t e l y 9 0% o f
i nj e c t e d r a di o a c t i v i t y wa s r e c o v e r e d i n t h e u r i ne a f t e r 7 d, a nd
s c i nt i g r a p h i c i ma g i ng s t u di e s wi t h 13 I - l a b e l e d C R P i n 10 p a -
t i e nt s wi t h di f f e r e nt f o c a l p a t h o l o g y s h o we d no s i g ni f i c a nt l o c a l -
i z a t i o n o f t r a c e r . T h e f u nc t i o ns o f C R P a r e t h u s l i ke l y t o b e
e f f e c t e d p r e do mi na nt l y i n t h e f l u i d p h a s e r a t h e r t h a n b y ma j o r
de p o s i t i o n a t s i t e s o f t i s s u e da ma g e o r i nf l a mma t i o n. ( J . C l i n.
I nv e s t . 19 9 3 . 9 0: 13 5 1- 13 5 7 . ) K e y wo r ds : C - r e a c t i v e p r o t e i n.
me t a b o l i s m * p l a s ma p r o t e i n
-
s c i nt i g r a p h y * t u r no v e r s t u di e s
I nt r o du c t i o n
C - r e a c t i v e p r o t e i n ( C R P ) ' i s t h e c l a s s i c a l a c u t e p h a s e p l a s ma
p r o t e i n, s e r u m l e v e l s o f wh i c h a r e e x t e ns i v e l y u s e d i n r o u t i ne
c l i ni c a l p r a c t i c e t o mo ni t o r t h e a c u t e p h a s e r e s p o ns e , a nd t h e r e -
f o r e t h e e x t e nt a nd a c t i v i t y o f ma ny i nf e c t i o ns , t i s s u e da ma g i ng
a nd i nf l a mma t o r y di s o r de r s ( 1) . A l o ng wi t h s e r u m a my l o i d P
T h i s wo r k h a s b e e n p r e s e nt e d i n p a r t a t me e t i ng s o f t h e R o y a l S o c i e t y
o f M e di c i ne i n De c e mb e r 19 9 1 a nd t h e B r i t i s h S o c i e t y f o r R h e u ma t o l -
o g y i n J u l y 19 9 2, a nd a t t h e T h i r d I nt e r na t i o na l C o nf e r e nc e o n S y s -
t e mi c L u p u s E r y t h e ma t o s u s , L o ndo n, U ni t e d K i ng do m, A p r i l 19 9 2.
A ddr e s s c o r r e s p o nde nc e t o Dr . P . N . Ha wki ns , I mmu no l o g i c a l
M e di c i ne U ni t , R o y a l P o s t g r a du a t e M e di c a l S c h o o l , L o ndo n W12
O N N , U ni t e d K i ng do m.
R e c e i v e d f o r p u b l i c a t i o n 17 A u g u s t 19 9 2 a nd i n r e v i s e d f o r m 27
O c t o b e r 19 9 2.
1. A b b r e v i a t i o ns u s e d i n t h i s p a p e r : A A , a my l o i d A p r o t e i n; A L , mo no -
c l o na l l i g h t c h a i n a my l o i d; C R P , C - r e a c t i v e p r o t e i n; P A F , p l a t e l e t - a c t i -
v a t i ng f a c t o r ; S A P , s e r u m a my l o i d P c o mp o ne nt .
c o mp o ne nt ( S A P ) , C R P i s a me mb e r o f t h e p e nt r a x i n f a mi l y
o f p r o t e i ns wh i c h a r e u nr e l a t e d t o o t h e r kno wn p r o t e i ns , b u t
wh i c h a r e t h e ms e l v e s s t a b l y c o ns e r v e d i n v e r t e b r a t e e v o l u t i o n
( 2) . N o p o l y mo r p h i s m o f e i t h e r t h e g e ne c o di ng s e q u e nc e o r o f
t h e p r o t e i n i t s e l f h a s b e e n de s c r i b e d i n ma n, no r h a s a ny i ndi -
v i du a l l a c ki ng C R P b e e n i de nt i f i e d, s u g g e s t i ng t h a t C R P h a s a n
i mp o r t a nt b i o l o g i c a l r o l e . T h i s ma y b e r e l a t e d t o s p e c i f i c b i nd-
i ng o f C R P t o p h o s p h o c h o l i ne - c o nt a i ni ng mo l e c u l e s i nc l u di ng
p l a s ma l i p o p r o t e i ns , c e l l me mb r a ne p h o s p h o l i p i ds , mi c r o b i a l
p r o du c t s a nd p h o s p h o l i p i d me di a t o r s , s u c h a s p l a t e l e t - a c t i v a t -
i ng f a c t o r ( P A F ) ( 3 , 4 ) . C o nt r a r y t o s o me r e p o r t s ( 5 , 6 ) , h u -
ma n C R P do e s no t b i nd t o c h r o ma t i n u nde r p h y s i o l o g i c a l c o n-
di t i o ns ( 7 , 8 ) b u t i t do e s b i nd a v i dl y a nd s p e c i f i c a l l y t o s ma l l
nu c l e a r r i b o nu c l e o p r o t e i n p a r t i c l e s wi t h i n wh o l e nu c l e i ( 9 ) .
B i ndi ng o f C R P t o s o l u b l e a nd p a r t i c u l a t e l i g a nds c a n o p -
s o ni s e t h e m f o r p h a g o c y t o s i s , p r e do mi na nt l y v i a t h e c l a s s i c a l
c o mp l e me nt p a t h wa y wh i c h c o mp l e x e d o r a g g r e g a t e d C R P a c -
t i v a t e s wi t h h i g h e f f i c i e nc y ( 10, 11) . T h e r e i s a l s o s o me e v i -
de nc e f o r t h e e x i s t e nc e o f r e c e p t o r s f o r C R P o n t h e s u r f a c e o f
p o l y mo r p h s a nd mo no c y t e / ma c r o p h a g e s , a nd i t h a s b e e n
c l a i me d t h a t C R P a nd/ o r i t s f r a g me nt s h a v e f u nc t i o na l a c t i v -
i t y i n mo di f y i ng t h e b e h a v i o u r o f t h e s e c e l l s ( 1 1- 14 ) . He t e r o l o -
g o u s , h u ma n, C R P p r o t e c t s mi c e a g a i ns t p ne u mo c o c c a l i nf e c -
t i o n ( 15 , 16 ) b u t t h e r e i s no e v i de nc e f o r a s i mi l a r p r o t e c t i v e
r o l e o f a u t o l o g o u s C R P , f o r e x a mp l e , i n t h e h u ma n o r t h e r a t
( 3 ) , o r f o r h u ma n C R P i n mi c e wi t h o t h e r i nf e c t i o ns . T h u s ,
a l t h o u g h t h e ma ny di f f e r e nt p r o p e r t i e s o f C R P wh i c h h a v e
b e e n de s c r i b e d s u g g e s t t h a t i t ma y c o nt r i b u t e t o l i p i d me t a b o -
l i s m, s c a v e ng i ng a nd r e p a i r o f da ma g e d c e l l s a nd t i s s u e s , h o s t
de f e nc e a g a i ns t i nf e c t i o n a nd mo du l a t i o n o f i nf l a mma t i o n, no
de f i ni t e i n v i v o f u nc t i o ns o f C R P h a v e y e t b e e n i de nt i f i e d.
I n no r ma l h e a l t h y s u b j e c t s C R P i s a t r a c e p l a s ma p r o t e i n
wi t h a me di a n l e v e l o f 0. 8 mg / l i t e r ( 17 ) . I t i s p r o du c e d b y
h e p a t o c y t e s i n wh i c h i t s s y nt h e s i s i s r e g u l a t e d b y c y t o ki ne s ,
p a r t i c u l a r l y I L - 6 ( 18 ) . C R P l e v e l s r i s e r a p i dl y a nd dr a ma t i c a l l y
i n r e s p o ns e t o b a c t e r i a l i nf e c t i o n, t r a u ma , t i s s u e ne c r o s i s , a nd
mo s t f o r ms o f i nf l a mma t i o n, a nd ma y e x c e e d 3 00 mg / l i t e r
wi t h i n 4 8 h o f a n a c u t e e v e nt ( 1, 2) . Hi g h l e v e l s ma y p e r s i s t
i nde f i ni t e l y i n c h r o ni c i nf l a mma t o r y s t a t e s . I n c o nt r a s t , t h e r e
a r e a f e w i mp o r t a nt di s o r de r s , p a r t i c u l a r l y s y s t e mi c l u p u s e r -
y t h e ma t o s u s ( S L E ) a nd r e l a t e d c o l l a g e n di s e a s e s , u l c e r a t i v e
c o l i t i s , a nd l e u ke mi a , i n wh i c h C R P l e v e l s u s u a l l y r e ma i n no r -
ma l , o r a r e o nl y mo de s t l y e l e v a t e d, e v e n i n t h e p r e s e nc e o f
s e v e r e t i s s u e da ma g i ng p a t h o l o g y ( 1, 2) . T h e me c h a ni s ms u n-
de r l y i ng t h i s p h e no me no n a r e no t kno wn, t h o u g h a f f e c t e d i ndi -
v i du a l s r e t a i n t h e c a p a c i t y t o de v e l o p a t y p i c a l ma j o r a c u t e
p h a s e r e a c t i o n i n r e s p o ns e t o i nt e r c u r r e nt mi c r o b i a l i nf e c t i o n
o r t i s s u e i nf a r c t i o n ( 1, 2) .
T h e i s o l a t i o n o f p u r e C R P f r o m t h e p l a s ma o f a s i ng l e no r -
ma l h e a l t h y i ndi v i du a l , wh i c h we r e p o r t h e r e , h a s e na b l e d u s t o
s t u dy t h e i n v i v o di s t r i b u t i o n a nd me t a b o l i s m o f h u ma n C R P
i n h e a l t h a nd i n v a r i o u s di s e a s e s , i nc l u di ng r h e u ma t o i d a r t h r i -
t i s ( R A ) , S L E , b a c t e r i a l i nf e c t i o n, a nd ne o p l a s i a .
M e t a b o l i c S t u di e s o f Hu ma n C - r e a c t i v e P r o t e i n 13 5 1
J . C l i n. I nv e s t .
T h e A me r i c a n S o c i e t y f o r C l i ni c a l I nv e s t i g a t i o n, I nc .
0021- 9 7 3 8 / 9 3 / 04 / 13 5 1/ 07 $ 2. 00
V o l u me 9 1, A p r i l 19 9 3 , 13 5 1- 13 5 7
M e t h o ds
I s o l a t i o n o f C R P . Hi g h l y p u r i f i e d h u ma n C R P wa s p r e p a r e d b y c a l -
c i u m- de p e nde nt a f f i ni t y c h r o ma t o g r a p h y , r e v e r s e a f f i ni t y c h r o ma t o g -
r a p h y a nd g e l f i l t r a t i o n ( 19 , 20) , f r o m 10 l i t e r s o f s e r u m f r o m a s i ng l e
a c c r e di t e d no r ma l do no r t o t h e B r i t i s h N a t i o na l B l o o d T r a ns f u s i o n
S e r v i c e . T h e s e r u m wa s f i r s t h e a t e d t o 5 6 0C f o r 3 0 mi n, wh i c h i s kno wn
t o i na c t i v a t e h u ma n i mmu no de f i c i e nc y v i r u s ( 21 ) . T h e y i e l d o f 8 mg
o f s t e r i l e no np y r o g e ni c C R P c o ns i s t e d e x c l u s i v e l y o f i nt a c t p e nt a me r i c
C R P mo l e c u l e s a s s h o wn b y a na l y t i c a l g e l f i l t r a t i o n o n S u p e r o s e 12
( P h a r ma c i a B i o s y s t e ms L t d. , M i l t o n K e y ne s , U K ) a nd no nde na t u r i ng
4 - 3 0% g r a di e nt P A GE ( P h a r ma c i a ) . I t wa s > 9 9 % p u r e i n r e du c e d
S DS 10% P A GE a nd wa s f u l l y f u nc t i o na l l y a c t i v e i n t e r ms o f c a l c i u m-
de p e nde nt b i ndi ng t o p h o s p h o e t h a no l a mi ne - S e p h a r o s e . A na l y s i s b y
e l e c t r o s p r a y ma s s s p e c t r o me t r y ( 22) y i e l de d a s i ng l e s p e c i e s o f ma s s
23 , 027 D, c o r r e s p o ndi ng p r e c i s e l y t o t h e kno wn a mi no a c i d s e q u e nc e
o f t h e C R P s u b u ni t ( 23 , 24 ) i nc l u di ng t h e a mi no - t e r mi na l p y r r o l i do ne
c a r b o x y l i c a c i d r e s i du e ( 25 ) .
R a di o i o di na t i o n o f C R P . C R P wa s o x i da t i v e l y r a di o l a b e l e d wi t h
c a r r i e r - f r e e ' 25 I ( I M S . 3 0; A me r s h a m I nt e r na t i o na l , A me r s h a m, U K )
a nd ' 23 I ( M e dg e ni x , F l e u r u s , B e l g i u m) u s i ng N - b r o mo s u c c i ni mi de ( 26 ,
27 ) , a nd r e s u l t i ng i n 8 5 - 9 5 % i nc o r p o r a t i o n o f t h e i s o t o p e . F r e e u n-
b o u nd r a di o i o di ne wa s r e mo v e d b y g e l f i l t r a t i o n o n S e p h a de x G25
( P DI O c o l u mn; P h a r ma c i a ) , a nd t h e l a b e l e d p r o t e i n wa s t h e n p a s s e d
t h r o u g h a s t e r i l e
0. 22- A r m
f i l t e r i nt o a s t e r i l e ni t r o g e n- f i l l e d v i a l . T h e
s p e c i f i c a c t i v i t y o f ' 25 I - C R P u s e d f o r t u r no v e r s t u di e s wa s 3 7 M B q / mg ;
f o r g a mma c a me r a i ma g i ng a nd l o c a l i z a t i o n s t u di e s , ' 23 I - C R P wa s l a -
b e l e d wi t h a s p e c i f i c a c t i v i t y o f 5 GB q / mg . Gr e a t e r t h a n 9 5 % o f t h e
a c t i v i t y wa s s h o wn t o b e p r o t e i n b o u nd b y p r e c i p i t a t i o n wi t h c o l d 10%
wt / v o l T C A .
C h a r a c t e r i z a t i o n o f i o di na t e d C R P . T h e i o di na t e d C R P wa s s t e r i l e
a nd no n- p y r o g e ni c i n r a b b i t s . I t wa s s t r u c t u r a l l y a nd f u nc t i o na l l y i ndi s -
t i ng u i s h a b l e f r o m p u r e C R P i n no nde na t u r i ng g r a di e nt P A GE , r e -
du c e d S DS - P A GE , g e l f i l t r a t i o n a nd b i ndi ng t o p h o s p h o e t h a no l a mi ne -
S e p h a r o s e a nd p h o s p h o c h o l i ne - S e p h a r o s e . T h e l a b e l e d C R P wa s a l s o
t e s t e d b y c o mp a r i ng i t s i n v i v o p l a s ma c l e a r a nc e wi t h t h a t o f u nl a b e l e d
C R P i n t wo f e ma l e C B A / C a mi c e a nd o ne N ZW r a b b i t . O ne mo u s e
r e c e i v e d a s i ng l e i nt r a v e no u s i nj e c t i o n o f I , u g o f ' 25 1I - C R P mi x e d wi t h
200
. g
o f u nl a b e l e d C R P p u r i f i e d f r o m p o o l e d ma l i g na nt a s c i t e s f l u i d.
T h e o t h e r mo u s e r e c e i v e d 1 , u g o f 125 1I - C R P mi x e d wi t h 0. 3 ml o f p o o l e d
wh o l e a c u t e p h a s e s e r u m c o nt a i ni ng 7 3
j i g
o f C R P . T h e r a b b i t r e c e i v e d
5 M g o f ' 25 1I - C R P mi x e d wi t h 1 ml o f p o o l e d wh o l e a c u t e p h a s e s e r u m
c o nt a i ni ng 24 4 M g o f C R P . A l l a ni ma l s we r e b l e d a t i nt e r v a l s a f t e r
i nj e c t i o n, t h e s e r a we r e s e p a r a t e d a nd b o t h t h e T C A - p r e c i p i t a b l e r a di o -
a c t i v i t y a nd t h e h u ma n C R P c o nc e nt r a t i o n we r e me a s u r e d i n e a c h
s a mp l e . C R P c o nc e nt r a t i o n wa s me a s u r e d b y e l e c t r o i mmu no a s s a y
( r a ng e 2- 14 3 mg / l i t e r , C . V . < 10%) ( 28 ) i n t h e mo u s e s a mp l e s a nd b y
a s e ns i t i v e mo no c l o na l a nt i b o dy i mmu no r a di o me t r i c a s s a y ( r a ng e 10-
5 , 000 M g / l i t e r , C . V . < 10%) ( 29 ) i n t h e r a b b i t e x p e r i me nt .
' 25 I - C R P c l e a r a nc e s t u di e s - e x p e r i me nt a l s u b j e c t s . E i g h t no r ma l
h e a l t h y a du l t v o l u nt e e r s , f o u r ma l e a nd f o u r f e ma l e , a g e d 20- 3 2 y r ,
a nd 3 3 h o s p i t a l i z e d p a t i e nt s we r e s t u di e d. S i x t e e n p a t i e nt s h a d c h r o ni c
i nf l a mma t o r y di s e a s e s : R A ( s i x p a t i e nt s ) , S L E ( s i x ) , o t h e r c o nne c t i v e
t i s s u e di s o r de r s ( t wo ) , s y s t e mi c v a s c u l i t i s ( o ne ) , a nd C r o h n' s di s e a s e
( o ne ) . E l e v e n o t h e r p a t i e nt s h a d b a c t e r i a l i nf e c t i o ns : a c u t e a s p i r a t i o n
p ne u mo ni a ( o ne p a t i e nt ) , l o we r u r i na r y t r a c t i nf e c t i o ns ( f i v e ) , a c u t e
p y e l o ne p h r i t i s ( o ne ) , p o s t o p e r a t i v e p s o a s a b s c e s s ( o ne ) , mi no r c e l l u l i -
t i s ( o ne ) , a nd o s t e o my e l i t i s ( t wo ) . F i na l l y , f i v e p a t i e nt s h a d ma l i g na nt
ne o p l a s i a : b r o nc h o g e ni c c a r c i no ma ( t wo p a t i e nt s ) , mu l t i p l e my e l o ma
( o ne ) , l y mp h o ma ( o ne ) , a nd a de no c a r c i no ma o f u nkno wn p r i ma r y
s i t e ( o ne ) .
T u r no v e r s t u dy p r o t o c o l . A f t e r e x c l u di ng a h i s t o r y o f a dv e r s e r e a c -
t i o ns t o i o di de , t h y r o i d u p t a ke o f r a di o i o di ne wa s b l o c ke d b y t h e p r i o r
a dmi ni s t r a t i o n o f o r a l p o t a s s i u m i o di de . 18 0 kB q o f ' 25 I - C R P wa s a d-
mi ni s t e r e d b y b o l u s i nt r a v e no u s i nj e c t i o n, r e s u l t i ng i n a n e f f e c t i v e do s e
e q u i v a l e nt o f 0. 04 5 mS v . V e no u s b l o o d s a mp l e s we r e dr a wn f r o m t h e
c o nt r a l a t e r a l f o r e a r m a t 10- mi n i nt e r v a l s f o r t h e f i r s t 3 0 mi n, h o u r l y f o r
t h e
f o l l o wi ng
6 h a nd t h e n da i l y f o r 7 d. C o ns e c u t i v e 24 - h u r i ne c o l l e c -
t i o ns we r e o b t a i ne d f o r t h e s t u dy p e r i o d. P r o t e i n b o u nd r a di o a c t i v i t y i n
0. 5 - ml a l i q u o t s o f a l l s e r u m s a mp l e s , a nd t o t a l r a di o a c t i v i t y i n 1- ml
a l i q u o t s o f e a c h 24 - h u r i ne c o l l e c t i o n we r e c o u nt e d s i mu l t a ne o u s l y
wi t h a s t a nda r d a l i q u o t o f t h e i nj e c t e d ma t e r i a l . T h e r e s u l t s we r e e x -
p r e s s e d a s a p e r c e nt a g e o f t h e i nj e c t e d q u a nt i t y p e r l i t e r o f s e r u m o r
u r i ne . I n o ne no r ma l s u b j e c t a nd t wo p a t i e nt s wi t h r a i s e d p l a s ma C R P
l e v e l s e a c h wh o l e b l o o d s a mp l e , i t s c l o t a nd s e r u m s a mp l e we r e
c o u nt e d s e p a r a t e l y i n o r de r t o a s s e s s u p t a ke o f t r a c e r b y b l o o d c e l l s ; no
s u c h u p t a ke wa s de t e c t e d. T h e t o t a l C R P c o nc e nt r a t i o n wa s me a s u r e d
b y e l e c t r o i mmu no a s s a y ( 28 ) a nd wh e n ne c e s s a r y b y i mmu no r a di o me t -
r i c a s s a y ( 29 ) i n a l l s e r u m s a mp l e s , a nd a l l t h e s u b j e c t s r e p o r t e d h e r e
h a d c o ns t a nt v a l u e s t h r o u g h o u t t h e p e r i o d o f s t u dy . O t h e r i ndi v i du a l s
i n wh o m s e r u m C R P c o nc e nt r a t i o ns v a r i e d h a v e b e e n e x c l u de d f r o m
t h i s r e p o r t .
C u r v e f i t t i ng a nd me t a b o l i c a na l y s i s . P l a s ma a c t i v i t y da t a we r e f i t -
t e d t o a s i ng l e e x p o ne nt i a l f u nc t i o n b y no n- l i ne a r r e g r e s s i o n. P l a s ma
v o l u me s we r e e s t i ma t e d f r o m b o dy s u r f a c e a r e a , a nd c a l c u l a t e d f r o m
t h e y - a x i s i nt e r s e c t a t no t i o na l t i me z e r o . T h e s y nt h e s i s r a t e f o r C R P
wa s de r i v e d f r o m t h e a r e a u nde r t h e c u r v e a nd i t s b i o l o g i c a l h a l f - l i f e
a nd f r a c t i o na l c l e a r a nc e r a t e f r o m t h e v a l u e o f t h e e x p o ne nt . T h e
wh o l e - b o dy r e t e nt i o n o f r a di o a c t i v i t y wa s c a l c u l a t e d a t da i l y i nt e r v a l s
b y s u b t r a c t i ng t h e c u mu l a t i v e a c t i v i t y e x c r e t e d i n t h e u r i ne f r o m t h e
t o t a l i nj e c t e d r a di o a c t i v i t y . S t a t i s t i c a l s i g ni f i c a nc e o f di f f e r e nc e s b e -
t we e n C R P me t a b o l i s m i n no r ma l c o nt r o l s a nd di s e a s e g r o u p s wa s
s o u g h t b y o ne wa y a na l y s i s o f v a r i a nc e .
' 23 I - C R P s c i nt i g r a p h i c i ma g i ng s t u di e s . F o r i ma g i ng a nd l o c a l i z a -
t i o n s t u di e s C R P wa s l a b e l e d wi t h ' 23 1, a me di u m e ne r g y p u r e g a mma
e mi t t e r , wh i c h h a s a s h o r t h a l f - l i f e o f 13 . 2 h a nd i s i de a l l y s u i t e d t o i n
v i v o s c i nt i g r a p h i c i ma g i ng ( 27 , 3 0) . A f t e r t h y r o i d b l o c ka de , e a c h s u b -
j e c t r e c e i v e d 200 M B q o f ' 23 I - C R P b y b o l u s i nt r a v e no u s i nj e c t i o n, r e -
s u l t i ng i n a n e f f e c t i v e do s e e q u i v a l e nt o f 4 mS v , c o mp a r a b l e t o t h a t o f
a n i nt r a v e no u s p y e l o g r a m o r b a r i u m s e r i e s . A nt e r i o r a nd p o s t e r i o r
wh o l e b o dy s c i nt i g r a p h i c i ma g i ng we r e p e r f o r me d i mme di a t e l y a f t e r
i nj e c t i o n a nd a t 6 , 24 , a nd 4 8 h u s i ng t h e I GE - S t a r c a m g a mma c a me r a
( I GE M e di c a l S y s t e ms , S l o u g h , U K ) wi t h a me di u m e ne r g y p a r a l l e l
h o l e c o l l i ma t o r . R e g i o na l v i e ws a nd q u a nt i t a t i v e a na l y s i s o f t r a c e r l o c a l -
i z a t i o n t o l i v e r , s p l e e n, ki dne y s a nd o t h e r s i t e s o f i nt e r e s t we r e p e r -
f o r me d. T h r e e f e ma l e a nd 7 ma l e p a t i e nt s , a g e d 26 - 8 4 y r , we r e s t u di e d.
F o u r p a t i e nt s h a d ma l i g na nt ne o p l a s ms : me t a s t a t i c b r o nc h o g e ni c c a r c i -
no ma ( t wo p a t i e nt s ) , mu l t i p l e my e l o ma a nd s y s t e mi c A L a my l o i do s i s
( o ne ) , a nd r e t r o p e r i t o ne a l T c e l l l y mp h o ma ( o ne ) . T h r e e p a t i e nt s h a d
l o c a l i nf e c t i o ns , r e s p e c t i v e l y : t h o r a c i c v e r t e b r a l o s t e o my e l i t i s , p ne u -
mo c o c c a l l o b a r p ne u mo ni a , a nd p o s t - o p e r a t i v e p s o a s a b s c e s s . T h r e e
p a t i e nt s h a d a c t i v e i di o p a t h i c i nf l a mma t o r y di s e a s e s , r e s p e c t i v e l y :
C r o h n' s di s e a s e o f t h e t e r mi na l i l e u m c o mp l i c a t e d b y s y s t e mi c A A
a my l o i do s i s , p o l y my o s i t i s , a nd S L E c o mp l i c a t e d b y a n i nt e r c u r r e nt
a c u t e i nf e c t i v e p h a r y ng i t i s .
E t h i c a l a p p r o v a l . A l l p a r t i c i p a nt s g a v e i nf o r me d wr i t t e n c o ns e nt
a nd t h e p r o j e c t wa s a p p r o v e d b y t h e R e s e a r c h E t h i c s C o mmi t t e e o f
Ha mme r s mi t h Ho s p i t a l a nd t h e A dmi ni s t r a t i o n o f R a di o a c t i v e S u b -
s t a nc e s A dv i s o r y C o mmi t t e e o f t h e De p a r t me nt o f He a l t h , U ni t e d
K i ng do m.
R e s u l t s
C l e a r a nc e o f i o di na t e d C R P i n v i v o i n a ni ma l s . T h e i n v i v o
p l a s ma c l e a r a nc e o f 125 I - C R P i n mo u s e a nd r a b b i t wa s i ndi s t i n-
g u i s h a b l e f r o m t h a t o f i s o l a t e d u nl a b e l e d C R P , o r o f C R P p r o -
v i de d i n wh o l e a c u t e p h a s e s e r u m. I n mi c e t h e
t l 2
wa s 4 h a nd
i n t h e r a b b i t i t wa s 7 h , v a l u e s s i mi l a r t o t h o s e p r e v i o u s l y r e -
p o r t e d ( 3 1- 3 3 ) . T o g e t h e r wi t h t h e p r e c i s e ma s s s p e c t r o me t r i c
c o nf i r ma t i o n o f t h e s t r u c t u r e o f t h e s u b u ni t s o f t h e s i ng l e do -
no r C R P a nd t h e i n v i t r o b i o c h e mi c a l e v i de nc e f o r f u l l s t r u c -
t u r a l a nd l i g a nd- b i ndi ng i nt e g r i t y o f t h e l a b e l e d C R P , t h e s e
o b s e r v a t i o ns e s t a b l i s h t h e v a l i di t y o f t h e p r e s e nt p r e p a r a t i o ns
a s i n v i v o t r a c e r s o f C R P me t a b o l i s m.
13 5 2 D. M . V i g u s h i n, M . B . P e p y s , a nd P . N . Ha wki ns
C l e a r a nc e o f ' 25 I - C R P i n no r ma l v o l u nt e e r s . I n no r ma l s u b -
j e c t s t h e r e wa s a n i ni t i a l di s t r i b u t i o n p h a s e l a s t i ng s e v e r a l h o u r s
du r i ng wh i c h p l a s ma a c t i v i t y f e l l r e l a t i v e l y r a p i dl y . T h i s wa s
f o l l o we d b y a s l o we r s t e a dy de c l i ne t h r o u g h o u t t h e 7 - d s t u dy
p e r i o d du r i ng wh i c h t h e me a n ( S D) p l a s ma h a l f - l i f e wa s 18 . 8
( 3 . 9 ) h . P l a s ma c l e a r a nc e wa s p a r a l l e l e d b y wh o l e b o dy r a di o a c -
t i v i t y wi t h a de l a y o f 24 h , i ndi c a t i ng t h a t s u b s t a nt i a l t i s s u e
s e q u e s t r a t i o n o f ' 25 I - C R P di d no t o c c u r ( F i g . 1) . A t 7 d t h e
wh o l e - b o dy c l e a r a nc e wa s me a n ( S D) 8 8 ( 6 . 9 %) o f t h e i nj e c t e d
do s e . P l a s ma 25 1I - C R P a c t i v i t y v a l u e s c l o s e l y a p p r o x i ma t e d t o
a mo no e x p o ne nt i a l f u nc t i o n i n a l l s u b j e c t s . T o t a l p l a s ma C R P
l e v e l s r e ma i ne d c o ns t a nt t h r o u g h o u t t h e p e r i o d o f s t u dy ( me -
di a n 0. 8 mg / l i t e r ) e na b l i ng v a r i o u s me t a b o l i c p a r a me t e r s t o b e
c a l c u l a t e d. T h e f r a c t i o na l c l e a r a nc e r a t e o f C R P wa s 9 2% o f t h e
p l a s ma p o o l p e r da y , a nd e q u a l t o t h e f r a c t i o na l c a t a b o l i c r a t e
me a s u r e d di r e c t l y f r o m t h e c u mu l a t i v e u r i na r y e x c r e t i o n o f
125 1. T h e s y nt h e s i s r a t e o f C R P wa s
-
2. 4 mg / 24 h a nd t h e
c a l c u l a t e d no t i o na l t i me z e r o v o l u me o f di s t r i b u t i o n wa s
-
1. 4
t i me s g r e a t e r t h a n t h e p l a s ma v o l u me e s t i ma t e d f r o m b o dy
s u r f a c e a r e a , c o ns i s t e nt wi t h t h e e x p e c t e d b e h a v i o u r o f a mo l e -
c u l e o f ma s s 115 , 13 5 D, a nd i ndi c a t i ng t h a t C R P i s p r e do mi -
na nt l y i nt r a v a s c u l a r .
C l e a r a nc e a nd me t a b o l i c a na l y s i s o f ' 25 I - C R P i n p a t i e nt s
wi t h i nf l a mma t o r y a nd no ni nf l a mma t o r y di s e a s e . I n 5 p a t i e nt s
wi t h a c t i v e R A , wh o h a d a me di a n c i r c u l a t i ng C R P c o nc e nt r a -
t i o n o f 5 9 mg / l i t e r ( r a ng e 13 - 15 2) , t h e p l a s ma t u r no v e r o f
' 25 1- C R P di d no t di f f e r s i g ni f i c a nt l y f r o m no r ma l h e a l t h y v o l u n-
t e e r s ( F i g . 2) . T h e t u r no v e r wa s a l s o no r ma l i n o ne p a t i e nt
wi t h i na c t i v e R A ( T a b l e I ) . T h e c l e a r a nc e wa s s i mi l a r l y u na f -
f e c t e d i n 11 p a t i e nt s wi t h b a c t e r i a l i nf e c t i o ns , me di a n p l a s ma
C R P c o nc e nt r a t i o n 25 mg / l i t e r ( r a ng e 10- 7 1) ( F i g . 2) a nd
100
9 0
8 0
7 0
c
6 0
0
5 0
10
a 5 4 0
3 0
20
10
0
0 24 4 8 7 2 9 6
t i me ( h )
120 14 4 16 8
F i g u r e 1. C l e a r a nc e o f ' 25 I - h u ma n C R P i n v i v o i n no r ma l c o nt r o l s .
E a c h p o i nt r e p r e s e nt s t h e a r i t h me t i c me a n o f t h e v a l u e s i n e i g h t
h e a l t h y no r ma l s u b j e c t s . T h e s t a nda r d de v i a t i o ns f e l l wi t h i n t h e r a ng e
0. 6 - 6 . 4 % f o r p l a s ma c l e a r a nc e ( . ) , a nd 4 . 7 - 7 . 1% f o r wh o l e b o dy
r e t e nt i o n ( - ) .
100
9 0
8 0
7 0
6 0 , 6 0
5 0
4 0
3 0
20
10
3 0
20h
0 24 4 8 7 2 9 6
t i me ( h )
F i g u r e 2. P l a s ma c l e a r a nc e o f 125 1- h u ma n C R P i n v i v o i n p a t i e nt s
wi t h i nf l a mma t o r y di s e a s e o r b a c t e r i a l i nf e c t i o n. E a c h p o i nt r e p r e -
s e nt s t h e a r i t h me t i c me a n o f no r ma l c o nt r o l s o r t h e p a t i e nt s i n e a c h
g r o u p : o , no r ma l c o nt r o l s ( n = 8 ) ; . , a c t i v e S L E ( n = 5 ) ; o , a c t i v e
r h e u ma t o i d a r t h r i t i s ( n = 5 ) ; . , b a c t e r i a l i nf e c t i o n ( n = 11) .
r e ma i ne d c o ns t a nt i n t wo c a s e s wh o we r e r e s t u di e d a f t e r s u c -
c e s s f u l t r e a t me nt a nd no r ma l i z a t i o n o f C R P l e v e l s ( no t
s h o wn) . I n a c t i v e S L E u nc o mp l i c a t e d b y i nf e c t i o n t h e c i r c u l a t -
i ng C R P c o nc e nt r a t i o n i s o f t e n wi t h i n no r ma l l i mi t s a nd i s
r a r e l y mo r e t h a n mo de s t l y e l e v a t e d ( 3 4 ) . I t wa s t h e r e f o r e o f
p a r t i c u l a r i nt e r e s t t h a t p l a s ma c l e a r a nc e o f 125 1- C R P wa s no r -
ma l , b o t h i n f i v e p a t i e nt s wi t h a c t i v e di s e a s e a nd no e l e v a t i o n
o f C R P l e v e l ( F i g . 2) a nd i n o ne p a t i e nt wi t h a n i nt e r c u r r e nt
b a c t e r i a l i nf e c t i o n a nd a p l a s ma C R P c o nc e nt r a t i o n o f 5 6 mg /
l i t e r ( T a b l e I ) . T h e v o l u me o f di s t r i b u t i o n f o r t h e t r a c e r wa s
no t i nc r e a s e d i n a ny o f t h e p a t i e nt s , e x c l u di ng f i r s t p a s s e x t r a -
v a s c u l a r l o c a l i z a t i o n.
T h i s c o ns t a nc y o f C R P t u r no v e r wa s c o nf i r me d i n f o u r
p a t i e nt s wi t h , r e s p e c t i v e l y , a c t i v e p o l y my o s i t i s , a c t i v e S L E
o v e r l a p s y ndr o me , i na c t i v e p o l y a r t e r i t i s a nd C r o h n' s di s e a s e
wi t h A A a my l o i do s i s a nd i n f i v e i ndi v i du a l s wi t h ma l i g na nt
ne o p l a s i a ( T a b l e I ) . T h e f r a c t i o na l c a t a b o l i c r a t e o f C R P wa s
t h u s i nde p e nde nt o f t h e p l a s ma C R P c o nc e nt r a t i o n, wh i l s t
t h e r e wa s a di r e c t l i ne a r r e l a t i o ns h i p b e t we e n p l a s ma l e v e l s a nd
t h e c a l c u l a t e d r a t e o f C R P p r o du c t i o n ( F i g . 3 ) . T h i s r a t e i s
e v i de nt l y g r e a t l y i nc r e a s e d du r i ng t h e a c u t e p h a s e r e s p o ns e a nd
ma y e x c e e d 3 6 0 mg / 24 h .
' 23 I - C R P s c i nt i g r a p h y . S c i nt i g r a p h s we r e o b t a i ne d a f t e r t h e
i nt r a v e no u s i nj e c t i o n o f ' 23 I - C R P i n 10 p a t i e nt s wi t h di s e a s e s
i n wh i c h i nf l a mma t i o n a nd t i s s u e da ma g e we r e p r o mi ne nt ,
i nc l u di ng a p a t i e nt wi t h a c t i v e p o l y my o s i t i s a nd no r ma l C R P
a nd o ne wi t h a c t i v e S L E a nd a r a i s e d C R P ( 5 8 mg / ml ) , p o s s i -
b l y r e l a t e d t o i nt e r c u r r e nt i nf e c t i v e p h a r y ng i t i s . I n a l l t h e s e
s u b j e c t s t h e di s t r i b u t i o n o f t r a c e r a c t i v i t y wa s c o nf i ne d t o t h e
b l o o d p o o l a nd no s e l e c t i v e t i s s u e o r o r g a n l o c a l i z a t i o n c o u l d
b e i de nt i f i e d ( F i g . 4 ) . De s p i t e t h e a dmi ni s t r a t i o n o f p o t a s s i u m
M e t a b o l i c S t u di e s o f Hu ma n C - r e a c t i v e P r o t e i n 13 5 3
T a b l e I . M e t a b o l i s m o f C R P i n He a l t h a nd Di s e a s e
P l a s ma F r a c t i o na l
S u b j e c t s n P l a s ma C R P h a l f - l i f e c l e a r a nc e r a t e S y nt h e s i s r a t e
mg / l i t e r h %/ h u g / kg - h
N o r ma l 8 0. 8 ( 0. 5 ) 18 . 8 ( 3 . 9 ) 3 . 9 ( 0. 9 ) 1. 5 ( 1. 3 )
C h r o ni c i nf l a mma t i o n
A c t i v e R A 5 7 3 ( 5 6 ) 19 . 0 ( 5 . 7 ) 3 . 9 ( 0. 9 ) 9 1. 9 ( 7 8 . 1)
I na c t i v e R A 1 1 19 . 2 3 . 6 2. 1
A c t i v e S L E 5 3 ( 1) 17 . 7 ( 2. 2) 4 . 0 ( 0. 5 ) 5 . 2 ( 2. 3 )
A c t i v e S L E + i nf e c t i o n 1 5 6 14 . 0 4 . 9 112. 9
S L E - o v e r l a p s y ndr o me 1 1 14 . 8 4 . 7 1. 9
P o l y my o s i t i s 1 4 16 . 7 4 . 2 6 . 9
P o l y a r t e r i t i s no do s a 1 9 18 . 9 3 . 8 14 . 6
C r o h n' s di s e a s e 1 14 14 . 5 4 . 8 27 . 7
I nf e c t i o ns
A c u t e b a c t e r i a l i nf e c t i o n 9 3 1 ( 20) 19 . 9 ( 2. 8 ) 3 . 6 ( 0. 6 ) 4 3 . 4 ( 28 . 4 )
C h r o ni c o s t e o my e l i t i s 2 22 ( 13 ) 18 . 4 ( 0. 4 ) 3 . 8 ( 0. 1) 25 . 3 ( 14 . 7 )
N e o p l a s i a
Wi t h A P R 3 6 2 ( 6 1) 16 . 9 ( 4 . 5 ) 4 . 3 ( 1. 1) 103 . 4 ( 8 0. 7 )
N o A P R 2 3 ( 0) 26 . 9 ( 8 . 2) 2. 8 ( 0. 8 ) 3 . 5 ( 1. 5 )
V a l u e s a r e g i v e n a s me a n ( S D) . O ne - wa y a na l y s i s o f v a r i a nc e c o mp a r i ng
t 1/ 2
i n e a c h o f t h e ma i n di s e a s e g r o u p s ( c h r o ni c i nf l a mma t i o n, b a c t e r i a l
i nf e c t i o n, ne o p l a s i a ) wi t h t h e no r ma l c o nt r o l s g a v e F = 1. 05 2, P = 0. 3 8 2.
i o di de , mi no r u p t a ke o f r a di o a c t i v i t y wa s o c c a s i o na l l y s e e n i n
t h e s a l i v a r y g l a nds , t h y r o i d, a nd s t o ma c h . T h i s no ns p e c i f i c l o -
c a l i z a t i o n r e f l e c t s t h e kno wn di s t r i b u t i o n o f f r e e r a di o i o di ne ,
a nd q u a nt i t a t i v e l y r e p r e s e nt e d < 1% o f t h e i nj e c t e d r a di o a c t i v i t y .
Di s c u s s i o n
T h e s e s t u di e s a r e t h e f i r s t t o de s c r i b e t h e i n v i v o t u r no v e r a nd
di s t r i b u t i o n o f h u ma n C R P i n ma n i n h e a l t h a nd di s e a s e . T h e
C R P u s e d, u nl i ke t h a t i n a l l p r e v i o u s r e p o r t e d wo r k o n h u ma n
C R P , wa s i s o l a t e d f r o m t h e s e r u m o f a s i ng l e no r ma l h e a l t h y
do no r . T h i s wa s e s s e nt i a l , o n e t h i c a l g r o u nds , t o a v o i d a ny r i s k
o f t r a ns mi s s i b l e di s e a s e . T h e r a di o i o di na t e d p r o t e i n r e t a i ne d i n
f u l l i t s no r ma l s t r u c t u r e a nd l i g a nd- b i ndi ng p r o p e r t i e s i n v i t r o .
F u r t h e r mo r e , t h e l a b e l e d C R P wa s h a ndl e d i n v i v o i n l a b o r a -
t o r y a ni ma l s i n a ma nne r i de nt i c a l t o p u r i f i e d h u ma n C R P
wh i c h h a d no t b e e n l a b e l e d, a nd t o c o mp l e t e l y u nt r e a t e d C R P
a dmi ni s t e r e d b y i nj e c t i o n o f wh o l e a c u t e p h a s e h u ma n s e r u m.
I n t h a t t h e r e i s no e v i de nc e f o r p o l y mo r p h i s m o f e i t h e r t h e g e ne
c o di ng s e q u e nc e f o r h u ma n C R P o r t h e p r o t e i n i t s e l f , t h e b e -
h a v i o r o f t h e l a b e l e d i s o l o g o u s t r a c e r c a n b e c o nf i de nt l y t a ke n
t o r e f l e c t t h a t o f a u t o l o g o u s C R P i n t h e b o dy .
I n no r ma l s u b j e c t s c l e a r a nc e o f C R P f r o m t h e p l a s ma wa s
mo no e x p o ne nt i a l wi t h a b i o l o g i c a l h a l f - t i me o f 19 h , i ndi c a t -
i ng e x t r e me l y r a p i d t u r no v e r c o mp a r e d wi t h t h e ma j o r i t y o f
p l a s ma p r o t e i ns . T h i s f i ndi ng i s c o ns i s t e nt wi t h p r e v i o u s o b s e r -
v a t i o ns t h a t e l e v a t e d c i r c u l a t i ng l e v e l s o f C R P f a l l b y u p t o 5 0%
p e r da y wh e n t h e a c u t e - p h a s e s t i mu l u s r e s o l v e s ( 3 5 ) . I n s e v e r a l
i ndi v i du a l s 100% o f t h e i nj e c t e d r a di o a c t i v i t y wa s r e c o v e r e d i n
t h e u r i ne a f t e r 7 d i ndi c a t i ng t h a t t h e r e wa s no l o c a l i z a t i o n
a nd/ o r s e q u e s t r a t i o n o f t h e l a b e l e d p r o t e i n. S l i g h t l y l o we r r a t e s
o f r e c o v e r y i n o t h e r s u b j e c t s p r o b a b l y r e f l e c t mi no r l o s s o f r a -
di o a c t i v i t y v i a t h e g a s t r o i nt e s t i na l t r a c t , wh i c h a c c o u nt s f o r u p
t o 5 % i n t u r no v e r s t u di e s o f o t h e r r a di o i o di na t e d p l a s ma p r o -
t e i ns . I n t h e o ne no r ma l a nd t wo p a t i e nt s i n wh o m i t wa s
s o u g h t t h e r e wa s no u p t a ke / b i ndi ng t o b l o o d c e l l s . A na l y s i s o f
t h e s i ng l e c o mp a r t me nt mo de l u s e d h e r e s u g g e s t s t h a t
-
3 0%
o f C R P i s e x t r a v a s c u l a r , t h o u g h i n f r e e e q u i l i b r i u m wi t h t h e
p l a s ma p o o l , a nd i s c o ns i s t e nt wi t h t h e e x p e c t e d b e h a v i o r o f a
mo l e c u l e o f ma s s 115 , 13 5 D.
A mo ng s t p a t i e nt s s t u di e d wi t h a v a r i e t y o f i nf l a mma t o r y
a nd ne o p l a s t i c c o ndi t i o ns , r e s u l t i ng i n e l e v a t e d l e v e l s o f c i r c u -
25 0
200
: 2-
v
15 0
c m
00
: L
0
M * 100
5 0
0
0
0 5 0 100 15 0
me a n s e r u m C R P c o nc e nt r a t i o n ( mg I I )
200
F i g u r e 3 . R e l a t i o ns h i p b e t we e n me a n s e r u m C R P c o nc e nt r a t i o n i n
e a c h i ndi v i du a l du r i ng t h e p e r i o d o f s t u dy a nd t h e e s t i ma t e d r a t e o f
s y nt h e s i s . L i ne a r r e g r e s s i o n a na l y s i s : r =
0. 9 8 , s l o p e
=
1. 3 9 , n
=
4 2.
13 5 4 D. M . V i g u s h i n, M . B . P e p y s , a nd P . N . Ha wki ns
F -
4 m.
F i g u r e 4 . Wh o l e - b o dy s c i nt i g r a p h s a f t e r i v i nj e c t i o n o f 123 1- h u ma n
C R P . L e f t : A nt e r i o r i ma g e a t 24 h o f a p a t i e nt wi t h r i g h t l o we r l o b e
p ne u mo c o c c a l p ne u mo ni a s h o wi ng di s t r i b u t i o n o f i s o t o p e i n t h e
b l o o d p o o l o nl y wi t h no l o c a l i z a t i o n t o t h e s i t e o f i nf e c t i o n. A c t i v i t y
s e e n i n t h e t h y r o i d a nd s t o ma c h r e p r e s e nt s u p t a ke o f t r a c e s o f f r e e
r a di o i o di ne , wh i l s t t h e b l a dde r c o nt a i ns e x c r e t e d b r e a kdo wn p r o du c t s
o f t h e l a b e l e d p r o t e i n. M i ddl e : P o s t e r i o r i ma g e a t 6 h o f a p a t i e nt
wi t h a p o s t o p e r a t i v e l e f t p s o a s a b s c e s s s h o wi ng no r ma l b l o o d p o o l
di s t r i b u t i o n wi t h s i g na l f r o m t h e l i v e r , s p l e e n, h e a r t a nd ki dne y s .
T h e r e i s no s i g na l f r o m t h e s i t e o f t h e l e s i o n. R i g h t : P o s t e r i o r i ma g e
a t 6 h o f a p a t i e nt wi t h my e l o ma a nd e x t e ns i v e h e p a t i c a nd r e na l A L
a my l o i do s i s wh o h a d p r e v i o u s l y u nde r g o ne s p l e ne c t o my . T r a c e r i s
di s t r i b u t e d i n t h e b l o o d p o o l o nl y .
l a t i ng C R P a nd i n wh o m t h e r e wa s l i ke l y t o b e a n a b u nda nc e o f
t h e p u t a t i v e l i g a nds wi t h wh i c h C R P mi g h t i nt e r a c t , t h e r e we r e
no di f f e r e nc e s i n t h e t u r no v e r a nd c l e a r a nc e o f 125 1I - C R P . R e -
s u l t s f o r t h e p l a s ma h a l f - l i f e , f r a c t i o na l c a t a b o l i c r a t e di r e c t l y
me a s u r e d f r o m t h e u r i na r y e x c r e t i o n o f r a di o a c t i v i t y , a nd
wh o l e - b o dy r e t e nt i o n o f r a di o a c t i v i t y a f t e r 7 d we r e i de nt i c a l t o
no r ma l c o nt r o l s , i ndi c a t i ng t h a t t h e r e wa s no s u b s t a nt i a l s e -
q u e s t r a t i o n o r a l t e r e d h a ndl i ng o f C R P i n t h e s e di s e a s e s t a t e s .
I n t wo p a t i e nt s wi t h i nf e c t i o ns , wh o we r e s t u di e d b o t h du r i ng
t h e a c u t e p h a s e o f t h e i l l ne s s a nd s u b s e q u e nt l y wh e n s e r u m
C R P l e v e l s h a d no r ma l i z e d, i de nt i c a l t u r no v e r p r o f i l e s we r e
o b t a i ne d. S i mi l a r l y , no di f f e r e nc e s we r e o b s e r v e d i n p a t i e nt s
wi t h a c t i v e S L E a nd p o l y my o s i t i s , i n wh o m c h a r a c t e r i s t i c a l l y
no r ma l c i r c u l a t i ng l e v e l s o f C R P we r e p r e s e nt .
T h e f a i l u r e o f p a t i e nt s wi t h S L E a nd wi t h p o l y my o s i t i s t o
mo u nt a ma r ke d s e r u m a c u t e p h a s e r e s p o ns e o f C R P t o t h e
i nf l a mma t i o n a nd t i s s u e da ma g e c a u s e d b y t h e s e di s e a s e s
t h e ms e l v e s i s t h u s du e t o f a i l u r e o f C R P p r o du c t i o n r a t h e r t h a n
a c c e l e r a t e d c l e a r a nc e , a nd t h e s a me i s l i ke l y t o b e t r u e o f t h e
f e w o t h e r di s o r de r s wh i c h s h o w t h e s a me l i mi t e d C R P r e -
s p o ns e : s c l e r o de r ma , S j o g r e n' s di s e a s e , u l c e r a t i v e c o l i t i s , a nd
l e u ke mi a
( 1, 2) .
C R P me a s u r e me nt s a r e no t u s e f u l f o r mo ni -
t o r i ng u nc o mp l i c a t e d
di s e a s e a c t i v i t y i n t h e s e p a r t i c u l a r di s -
o r de r s , b u t ,
a s
p r e v i o u s l y r e p o r t e d, t h e y c a n ma ke a v i t a l c o n-
t r i b u t i o n t o
di a g no s i s
a nd ma na g e me nt o f i nt e r c u r r e nt i nf e c -
t i o n i n s u c h p a t i e nt s ( 3 4 , 3 6 ) . I n c o nt r a s t , de mo ns t r a t i o n t h a t
t h e
o nl y s i g ni f i c a nt
de t e r mi na nt o f p l a s ma C R P l e v e l s i s t h e
r a t e o f
s y nt h e s i s i mp o r t a nt l y
v a l i da t e s t h e c l i ni c a l u s e o f s e r u m
C R P me a s u r e me nt s t o mo ni t o r di s e a s e a c t i v i t y i n a l l o t h e r di s -
o r de r s wh i c h a r e c h a r a c t e r i z e d b y a ma j o r a c u t e p h a s e r e -
s p o ns e , i n t h a t t h e p r o du c t i o n r a t e o f C R P i n e a c h i ndi v i du a l i s
l i ke l y
t o r e f l e c t t h e
p r e s e nc e ,
e x t e nt a nd a c t i v i t y o f di s e a s e .
A l t h o u g h
t h i s i s
p r e s u ma b l y
t r u e a l s o f o r t h e p r o du c t i o n r a t e s
o f o t h e r
a c u t e - p h a s e p r o t e i ns ,
s u c h a s c l o t t i ng f a c t o r s , c o mp l e -
me nt
p r o t e i ns , p r o t e i na s e i nh i b i t o r s , a nd t r a ns p o r t p r o t e i ns ,
t h e i r
c l e a r a nc e ,
i n c o nt r a s t t o t h a t o f C R P , i s dr a ma t i c a l l y a f -
f e c t e d
b y
t h e a c t i v a t i o n a nd/ o r c o mp l e x f o r ma t i o n i nv o l v e d i n
t h e i r
p h y s i o l o g i c a l
f u nc t i o ns . T h e i r p l a s ma l e v e l s a r e t h e r e f o r e
no t r e l i a b l e a s i ndi c e s o f t h e a c u t e p h a s e r e s p o ns e i t s e l f .
T h e
p r e s e nt f i ndi ng s
wi t h h u ma n C R P i n ma n c o nf i r m
p r e v i o u s
wo r k i n
e x p e r i me nt a l
a ni ma l s i n wh i c h t h e c l e a r a nc e
o f b o t h
i s o l o g o u s
a nd h e t e r o l o g o u s C R P wa s r a t h e r c o ns t a nt
a nd
g e ne r a l l y i nde p e nde nt
o f p l a s ma C R P c o nc e nt r a t i o n. A l -
t h o u g h we h a v e p r e v i o u s l y r e p o r t e d a ne g a t i v e c o r r e l a t i o n b e -
t we e n f r a c t i o na l c a t a b o l i c r a t e a nd a u t o l o g o u s p l a s ma C R P
c o nc e nt r a t i o n i n r a b b i t s wh i c h h a d r e c e i v e d s u b c u t a ne o u s c a -
s e i n
i nj e c t i o ns ( 3 2) ,
t h i s wa s no t o b s e r v e d i n a ni ma l s wh i c h
we r e
u nde r g o i ng
a na t u r a l l y o c c u r r i ng a c u t e p h a s e r e s p o ns e ,
no r wa s i t f o u nd
b y
o t h e r s
( 3 1 ) . C R P c l e a r a nc e wa s a l s o u na f -
f e c t e d
b y
t h e i nt r a v a s c u l a r p r e s e nc e o f e v e n ma c r o mo l e c u l a r
l i g a nds
t o wh i c h C R P
b i nds ,
s u c h a s a p o B - c o nt a i ni ng l i p o p r o -
t e i ns
( i n
t h e
r a b b i t )
o r
p ne u mo c o c c a l
C - p o l y s a c c h a r i de ( 3 2,
3 3 ) .
F o r ma t i o n o f
C R P - l i g a nd c o mp l e x e s i n t h e c i r c u l a t i o n
t h u s do e s no t a c c e l e r a t e C R P c l e a r a nc e , wh i c h a p p a r e nt l y p r o -
c e e ds u nde r a l l c i r c u ms t a nc e s a t a c o ns t a nt ma x i mu m r a t e v i a
a me c h a ni s m wh i c h i s
a p p a r e nt l y
no t s a t u r a b l e . T h i s do e s no t
p r e c l u de
t h e
p o s s i b i l i t y
t h a t C R P b i ndi ng ma y mo du l a t e t h e
r a t e
a nd/ o r
s i t e o f c l e a r a nc e o f l i g a nds c o mp a r e d wi t h t h e i r f a t e
i n t h e a b s e nc e o f C R P . I nde e d h u ma n C R P p a s s i v e l y a dmi ni s -
t e r e d t o mi c e a l t e r s i n f a v o u r o f t h e s p l e e n t h e b a l a nc e o f
s p l e ni c
a nd
h e p a t i c u p t a ke
o f p ne u mo c o c c i , o f C - p o l y s a c c h a -
r i de - c o a t e d mo u s e
e r y t h r o c y t e s
a nd o f f r e e C - p o l y s a c c h a r i de ,
a l t h o u g h
t h e o v e r a l l b l o o d c l e a r a nc e r a t e o f t h e s e l i g a nds i s no t
a f f e c t e d
( 3 , 3 3 , 3 7 , 3 8 ) . Ho we v e r , we h a v e p r e v i o u s l y f o u nd no
e v i de nc e f o r t h e
p r e s e nc e
o f s i g ni f i c a nt a mo u nt s o f C R P c o m-
p l e x e d
wi t h
a ny
ma c r o mo l e c u l a r l i g a nd i n a c u t e p h a s e s e r a
f r o m
p a t i e nt s
wi t h v a r i o u s i nf e c t i o ns , i nf l a mma t o r y a nd ne o -
p l a s t i c c o ndi t i o ns ( 3 9 , 4 0) .
A
p o s s i b l e
r o l e o f C R P i n r e c o g ni z i ng a nd b i ndi ng t o ma t e -
r i a l s
e x p o s e d
i n s i t e s o f i nf l a mma t i o n a nd t i s s u e da ma g e , s u g -
g e s t e d b y
i n v i t r o s t u di e s o f C R P b i ndi ng ( 4 1 ) i s no t s u p p o r t e d
b y
o u r r e s u l t s .
S c i nt i g r a p h y
wi t h ' 23 I - l a b e l e d C R P i n 10 i ndi v i d-
u a l s wi t h l o c a l i z e d a nd
s y s t e mi c i nf e c t i v e , i nf l a mma t o r y a nd
ne o p l a s t i c
c o ndi t i o ns f a i l e d t o de mo ns t r a t e a ny t i s s u e l o c a l i z a -
t i o n o f l a b e l e d C R P .
U s i ng
t h e a na l o g y o f " 23 I - S A P l o c a l i z a t i o n
i n
a my l o i do s i s ( 27 , 3 0) ,
f o c a l de p o s i t i o n o f a s l i t t l e a s 1% o f t h e
i nj e c t e d
ma t e r i a l
mi g h t
h a v e b e e n de t e c t e d u s i ng t h e s e me t h -
o ds . A s
e x p e c t e d
f r o m i n v i t r o l i g a nd b i ndi ng s t u di e s a nd i n
v i v o s t u di e s i n
e x p e r i me nt a l
mu r i ne a my l o i d ( 4 2) t h e r e wa s no
l o c a l i z a t i o n o f i s o l o g o u s C R P t o a my l o i d de p o s i t s i n t wo i ndi -
v i du a l s wi t h we l l do c u me nt e d e x t e ns i v e s y s t e mi c A A a nd A L
a my l o i do s i s , r e s p e c t i v e l y . I nt e r e s t i ng l y , t h e r e wa s no di s c e r n-
i b l e l o c a l i z a t i o n o f ' 23 I - C R P t o t h e a f f e c t e d l u ng i n a p a t i e nt
M e t a b o l i c S t u di e s o f Hu ma n C - r e a c t i v e P r o t e i n 13 5 5
. . , A l
: . ;
i 4 ,
wi t h p ne u mo c o c c a l l o b a r p ne u mo ni a i ndi c a t i ng t h a t t h e C -
p o l y s a c c h a r i de o f t h e c a u s a t i v e o r g a ni s m wa s e i t h e r no t a v a i l -
a b l e , o r no t s u f f i c i e nt l y a b u nda nt i n t h e t i s s u e s . A l t h o u g h t h e r e
h a v e b e e n a f e w r e p o r t s o f t h e v a r i a b l e p r e s e nc e o f i mmu no h i s -
t o c h e mi c a l l y de t e c t a b l e C R P i n i nf l a mma t o r y a nd/ o r ne c r o t i c
t i s s u e l e s i o ns ( 4 3 - 5 0) , i na p p r o p r i a t e f i x a t i o n a nd s t a i ni ng t e c h -
ni q u e s h a v e s o me t i me s b e e n u s e d ( 4 8 , 4 9 ) o r e s s e nt i a l c o nt r o l s
f o r i mmu no l o g i c a l s p e c i f i c i t y o mi t t e d ( 4 8 ) . S i g ni f i c a nt C R P i s
p r e s e nt o nl y r a r e l y a t s i t e s o f i nf l a mma t i o n p e r s e , a l t h o u g h i t
de f i ni t e l y do e s a p p e a r i n s ma l l a mo u nt s o n f r a nkl y ne c r o t i c
mu s c l e f i b r e s i n c a r di a c o r s ke l e t a l mu s c l e da ma g e d b y e x t r e me
e x p e r i me nt a l p r o c e du r e s ( 3 , 4 3 , 4 4 , 5 0) . T h e p r e s e nt f a i l u r e t o
de t e c t s i g ni f i c a nt t i s s u e de p o s i t i o n o f 123 1I - C R P i n a ny o f t h e
v a r i o u s p a t h o l o g i e s s t u di e d i s t h e r e f o r e c o mp a t i b l e wi t h t h e
p a u c i t y o f c o nv i nc i ng i mmu no h i s t o c h e mi c a l e v i de nc e , b u t we
c a nno t e x c l u de t h e p o s s i b i l i t y t h a t a v i d b i ndi ng o f a u t o l o g o u s
C R P t o p o t e nt i a l t i s s u e l i g a nds a t a n e a r l y s t a g e o f di s e a s e ma y
h a v e b l o c ke d t h e i r s u b s e q u e nt a v a i l a b i l i t y f o r i nt e r a c t i o n wi t h
t h e t r a c e r .
A mo ng p r e v i o u s s p e c u l a t i o ns a b o u t t h e f u nc t i o n o f C R P ,
t h e r e s u l t s r e p o r t e d h e r e a r e mo s t c o ns i s t e nt wi t h t h e o r i g i na l
s u g g e s t i o n o f P e p y s ( 1) t h a t C R P a c t s t o b i nd a nd t h e r e b y
ne u t r a l i z e o r " de t o x i f y " h a r mf u l s u b s t a nc e s wh i c h g a i n a c c e s s
t o t h e c i r c u l a t i o n. S u c h s u b s t a nc e s ma y b e o f e x t r i ns i c , mi c r o -
b i a l o r i g i n, l i ke C - p o l y s a c c h a r i de a nd r e l a t e d ma t e r i a l s , wh i c h
a r e wi de l y di s t r i b u t e d i n na t u r e , o r o f a u t o l o g o u s o r i g i n. F o r
e x a mp l e , C R P e f f i c i e nt l y b l o c ks t h e b i o l o g i c a l a c t i v i t y o f t h e
p o t e nt p h o s p h o c h o l i ne - c o nt a i ni ng i nf l a mma t o r y me di a t o r ,
P A F ( 4 , 5 1, 5 2) . C R P a l s o b i nds t o l y s o p h o s p h o l i p i ds ( 5 3 ) a nd
ma y p r e v e nt t h e i r da ma g i ng e f f e c t s ( 4 , 5 1, 5 2) . F u r t h e r mo r e ,
C R P ma y b l o c k t h e p h o s p h o l i p a s e a c t i v i t i e s wh i c h p r o v i de
s u b s t r a t e s f o r t h e c y c l o a nd l i p o o x y g e na s e p a t h wa y s ( 4 ) . I nt e r -
e s t i ng p r e l i mi na r y da t a f r o m mi c e t r a ns g e ni c f o r r a b b i t C R P
s h o w t h a t t h e p r e s e nc e o f t h i s x e no g e ne i c C R P , i n a s p e c i e s
wh i c h p r o du c e s v e r y l i t t l e o f i t s o wn C R P , e f f i c i e nt l y p r o t e c t s
t h e a ni ma l s f r o m e ndo t o x i n l e t h a l i t y a nd t h a t t h e me c h a ni s m
o f t h i s p r o t e c t i o n i s l a r g e l y v i a i na c t i v a t i o n o f P A F ( 5 4 , 5 5 ) . A
ma j o r r o l e o f C R P ma y t h e r e f o r e b e t o b i nd a nd ne u t r a l i z e
P A F a nd o t h e r b i o l o g i c a l l y a c t i v e p h o s p h o l i p i d l i g a nds i n
p l a s ma a nd t i s s u e f l u i ds . R a i s e d c o nc e nt r a t i o ns o f C R P a r e
p r e s e nt i n c o ndi t i o ns l i ke l y t o b e a s s o c i a t e d wi t h i nc r e a s e d p r o -
du c t i o n a nd/ o r r e l e a s e o f s u c h me di a t o r s a nd ma y t h e r e b y
s e r v e t o c o nt r o l t h e i r e f f e c t s . T h e r a b b i t C R P t r a ns g e ni c mi c e
a r e a l s o a p p a r e nt l y p r o t e c t e d a g a i ns t GS a - i ndu c e d a l v e o l i t i s
( 5 6 ) , a nd a f u r t h e r r o l e o f C R P a nd/ o r i t s f r a g me nt s i n mo du -
l a t i ng c h e mo t a x i s a nd a c t i v i t y o f ne u t r o p h i l s ( 1 1- 14 ) wo u l d b e
c o mp a t i b l e wi t h t h e p r e s e nt f i ndi ng s o f u nv a r y i ng c l e a r a nc e
a nd l a c k o f t i s s u e de p o s i t i o n o f C R P i n h u ma ns .
A c kno wl e dg me nt s
We wi s h t o t h a nk o u r c o l l e a g u e s a t Ha mme r s mi t h Ho s p i t a l f o r r e f e r -
r i ng s o me o f t h e p a t i e nt s s t u di e d, M s . S u z a nne R i c h a r ds o n f o r t e c h ni -
c a l a s s i s t a nc e a nd M s . B e t h S o nt r o p f o r e x p e r t s e c r e t a r i a l a s s i s t a nc e .
T h e wo r k wa s s u p p o r t e d b y g r a nt s f r o m t h e M e di c a l R e s e a r c h
C o u nc i l , t h e We l l c o me T r u s t a nd t h e A r t h r i t i s &R h e u ma t i s m C o u nc i l
f o r R e s e a r c h .
R e f e r e nc e s
1. P e p y s , M . B . 19 8 1. C - r e a c t i v e p r o t e i n f i f t y y e a r s o n. L a nc e t . i : 6 5 3 - 6 5 6 .
2. P e p y s , M . B . , a nd M . L . B a l t z . 19 8 3 . A c u t e p h a s e p r o t e i ns wi t h s p e c i a l
r e f e r e nc e t o C - r e a c t i v e p r o t e i n a nd r e l a t e d p r o t e i ns ( p e nt a x i ns ) a nd s e r u m a my -
l o i d A p r o t e i n. A dv . I mmu no l . 3 4 : 14 1- 212.
3 . P e p y s , M . B . , I . F . R o we , a nd M . L . B a l t z . 19 8 5 . C - r e a c t i v e p r o t e i n: b i ndi ng
t o l i p i ds a nd l i p o p r o t e i ns . I nt . R e v . E x p . P a t h o l . 8 3 - 111.
4 . V i g o , C . 19 8 5 . E f f e c t o f C - r e a c t i v e p r o t e i n o n p l a t e l e t - a c t i v a t i ng f a c t o r - i n-
du c e d p l a t e l e t a g g r e g a t i o n a nd me mb r a ne s t a b i l i z a t i o n. J . B i o l . C h e m.
26 0: 3 4 18 - 3 4 22.
5 . R o b e y , F . A . , K . D. J o ne s , T . T a na ka , a nd T . - Y . L i u . 19 8 4 . B i ndi ng o f
C - r e a c t i v e p r o t e i n t o c h r o ma t i n a nd nu c l e o s o me c o r e p a r t i c l e s : a p o s s i b l e p h y s i o -
l o g i c r o l e o f C - r e a c t i v e p r o t e i n. J . B i o l . C h e m. 25 9 : 7 3 11- 7 3 16 .
6 . Du C l o s , T . W. , L . M a r ne l l , L . R . Zl o c k, a nd R . W. B u r l i ng a me . 19 9 1.
A na l y s i s o f t h e b i ndi ng o f C - r e a c t i v e p r o t e i n t o c h r o ma t i n s u b u ni t s . J . I mmu no l .
14 6 : 1220- 1225 .
7 . P e p y s , M . B . , a nd P . J . G. B u t l e r . 19 8 7 . S e r u m a my l o i d P c o mp o ne nt i s t h e
ma j o r c a l c i u m- de p e nde nt s p e c i f i c DN A b i ndi ng p r o t e i n o f t h e s e r u m. B i o c h e m.
B i o p h y s . R e s . C o mmu n. 14 8 : 3 08 - 3 13 .
8 . B u t l e r , P . J . G. , G. A . T e nne nt , a nd M . B . P e p y s . 19 9 0. P e nt r a x i n- c h r o ma -
t i n i nt e r a c t i o ns : s e r u m a my l o i d P c o mp o ne nt s p e c i f i c a l l y di s p l a c e s H 1- t y p e h i s -
t o ne s a nd s o l u b i l i z e s na t i v e l o ng c h r o ma t i n. J . E x p . M e d. 17 2: 13 - 18 .
9 . Du C l o s , T . W. 19 8 9 . C - r e a c t i v e p r o t e i n r e a c t s wi t h t h e U 1 s ma l l nu c l e a r
r i b o nu c l e o p r o t e i n. J . I mmu no l . 14 3 : 25 5 3 - 25 5 9 .
10. K a p l a n, M . H. , a nd J . E . V o l a na ki s . 19 7 4 . I nt e r a c t i o n o f C - r e a c t i v e p r o -
t e i n c o mp l e x e s wi t h t h e c o mp l e me nt s y s t e m. I . C o ns u mp t i o n o f h u ma n c o mp l e -
me nt a s s o c i a t e d wi t h t h e r e a c t i o n o f C - r e a c t i v e p r o t e i n wi t h p ne u mo c o c c a l C -
p o l y s a c c h a r i de a nd wi t h t h e c h o l i ne p h o s p h a t i de s , l e c i t h i n a nd s p h i ng o my e l i n. J .
I mmu no l . 112: 213 5 - 214 7 .
1 1. K i l p a t r i c k, J . M . , a nd J . E . V o l a na ki s . 19 9 1. M o l e c u l a r g e ne t i c s , s t r u c t u r e ,
a nd f u nc t i o n o f C - r e a c t i v e p r o t e i n. I mmu no l . R e s . 10: 4 3 - 5 3 .
12. B u c h t a , R . , R . Ge nna r o , M . P o nt e t , M . F r i dki n, a nd D. R o me o . 19 8 8 .
C - r e a c t i v e p r o t e i n de c r e a s e s p r o t e i n p h o s p h o r y l a t i o n i n s t i mu l a t e d h u ma n ne u -
t r o p h i l s . F E B S ( F e d. E u r . B i o c h e m. S o c . ) L e t t . 23 7 : 17 3 - 17 7 .
13 . K e w, R . R . , T . M . Hy e r s , a nd R . 0. We b s t e r . 19 9 0. Hu ma n C - r e a c t i v e
p r o t e i n i nh i b i t s ne u t r o p h i l c h e mo t a x i s i n v i t r o : p o s s i b l e i mp l i c a t i o ns f o r t h e
a du l t r e s p i r a t o r y di s t r e s s s y ndr o me . J . L a b . C l i n. M e d. 115 : 3 3 9 - 3 4 5 .
14 . S h e p h a r d, E . G. , S . M . B e e r , R . A nde r s o n, A . F . S t r a c h a n, A . E . N e l , a nd
F . C . de B e e r . 19 8 9 . Ge ne r a t i o n o f b i o l o g i c a l l y a c t i v e C - r e a c t i v e p r o t e i n p e p t i de s
b y a ne u t r a l p r o t e a s e o n t h e me mb r a ne o f p h o r b o l my r i s t a t e a c e t a t e - s t i mu l a t e d
ne u t r o p h i l s . J . I mmu no l . 14 3 : 29 7 4 - 29 8 1.
15 . M o l d, C . , S . N a ka y a ma , T . J . Ho l z e r , H. Ge wu r z , a nd T . W. Du C l o s .
19 8 1. C - r e a c t i v e p r o t e i n i s p r o t e c t i v e a g a i ns t S t r e p t o c o c c u s p ne u mo ni a e i nf e c t i o n
i n mi c e . J . E x p . M e d. 15 4 : 17 03 - 17 08 .
16 . Y o t h e r , J . , J . E . V o l a na ki s , a nd D. E . B r i l e s . 19 8 2. Hu ma n C - r e a c t i v e
p r o t e i n i s p r o t e c t i v e a g a i ns t f a t a l S t r e p t o c o c c u s p ne u mo ni a e i nf e c t i o n i n mi c e . J .
I mmu no l . 128 : 23 7 4 - 23 7 6 .
17 . S h i ne , B . , F . C . de B e e r , a nd M . B . P e p y s . 19 8 1. S o l i d p h a s e r a di o i mmu no -
a s s a y s f o r C - r e a c t i v e p r o t e i n. C l i n. C h i m. A c t a . 1 17 : 13 - 23 .
18 . He i nr i c h , P . C . , J . V . C a s t e l l , a nd T . A ndu s . 19 9 0. I nt e r l e u ki n- 6 a nd t h e
a c u t e p h a s e r e s p o ns e . B i o c h e m. J . 26 5 : 6 21- 6 3 6 .
19 . de B e e r , F . C . , a nd M . B . P e p y s . 19 8 2. I s o l a t i o n o f h u ma n C - r e a c t i v e
p r o t e i n a nd s e r u m a my l o i d P c o mp o ne nt . J . I mmu no l . M e t h o ds . 5 0: 17 - 3 1.
20. P o nt e t , M . , R . E ng l e r , a nd M . F . J a y l e . 19 7 8 . O ne s t e p p r e p a r a t i o n o f b o t h
h u ma n C - r e a c t i v e p r o t e i n a nd C l t . F E B S ( F e d. E u r . B i o c h e m. S o c . ) L e t t . 8 8 : 17 2-
17 8 .
21. M c Do u g a l , J . S . , L . S . M a r t i n, S . P . C o r t , M . M o z e n, C . M . He l de b r a nt ,
a nd B . L . E v a t t . 19 8 5 . T h e r ma l i na c t i v a t i o n o f t h e a c q u i r e d i mmu no de f i c i e nc y
s y ndr o me v i r u s , h u ma n T l y mp h o t r o p i c v i r u s - I I I / l y mp h a de no p a t h y - a s s o c i a t e d
v i r u s , wi t h s p e c i a l r e f e r e nc e t o a nt i h e mo p h i l i c f a c t o r . J . C l i n. I nv e s t . 7 6 : 8 7 5 - 8 7 7 .
22. P o u l t e r , L . , B . N . Gr e e n, S . K a u r , a nd A . L . B u r l i ng a me . 19 9 0. T h e
c h a r a c t e r i s a t i o n o f na t i v e a nd r e c o mb i na nt p r o t e i ns b y e l e c t r o s p r a y ma s s s p e c -
t r o me t r y . I n B i o l o g i c a l M a s s S p e c t r o me t r y . A . L . B u r l i ng a me , a nd J . A . M c C l o s -
ke y , e di t o r s . E l s e v i e r S c i e nc e P u b l i s h e r s B . V . , A ms t e r da m. 119 - 128 .
23 . L e i , K . - J . , T . L i n, G. Zo n, E . S o r a v i a , T . - Y . L i u , a nd N . D. Go l dma n.
19 8 5 . Ge no mi c DN A s e q u e nc e f o r h u ma n C - r e a c t i v e p r o t e i n. J . B i o l . C h e m.
26 0: 13 3 7 7 - 13 3 8 3 .
24 . Wo o , P . , J . R . K o r e nb e r g , a nd A . S . Wh i t e h e a d. 19 8 5 . C h a r a c t e r i z a t i o n o f
g e no mi c a nd c o mp l e me nt a r y DN A s e q u e nc e o f h u ma n C - r e a c t i v e p r o t e i n, a nd
c o mp a r i s o n wi t h t h e c o mp l e me nt a r y DN A s e q u e nc e o f s e r u m a my l o i d P c o mp o -
ne nt . J . B i o l . C h e m. 26 0: 13 3 8 4 - 13 3 8 8 .
25 . O l i v e i r a , E . B . , E . C . Go t s c h l i c h , a nd T . - Y . L i u . 19 7 7 . P r i ma r y s t r u c t u r e o f
h u ma n C - r e a c t i v e p r o t e i n. P r o c . N a t i . A c a d. S c i . U S A . 7 4 : 3 14 8 - 3 15 1.
26 . M a t h e r , S . J . , a nd B . G. Wa r d. 19 8 7 . Hi g h e f f i c i e nc y i o di na t i o n o f mo no -
c l o na l a nt i b o di e s f o r r a di o t h e r a p y . J . N u c i . M e d. 28 : 103 4 - 103 6 .
27 . Ha wki ns , P . N . , M . J . M y e r s , J . P . L a v e nde r , a nd M . B . P e p y s . 19 8 8 .
Di a g no s t i c r a di o nu c l i de i ma g i ng o f a my l o i d: b i o l o g i c a l t a r g e t i ng b y c i r c u l a t i ng
h u ma n s e r u m a my l o i d P c o mp o ne nt . L a nc e t . i : 14 13 - 14 18 .
28 . F a g a n, E . A . , R . F . Dy c k, P . N . M a t o n, H. J . F . Ho dg s o n, V . S . C h a dwi c k,
a nd M . B . P e p y s . 19 8 2. S e r u m l e v e l s o f C - r e a c t i v e p r o t e i n i n C r o h n' s di s e a s e a nd
u l c e r a t i v e c o l i t i s . E u r . J . C l i n. I nv e s t . 12: 3 5 1- 3 6 0.
29 . Wa s u nna , A . , A . Wh i t e l a w, R . Ga l l i mo r e , P . N . Ha wki ns , a nd M . B .
P e p y s . 19 9 0. C - r e a c t i v e p r o t e i n a nd b a c t e r i a l i nf e c t i o n i n p r e t e r m i nf a nt s . E u r . J .
P e di a t r . 14 9 : 4 24 - 4 27 .
13 5 6 D. M . V i g u s h i n, M . B . P e p y s , a nd P . N . Ha wki ns
3 0. Ha wki ns , P . N . , J . P . L a v e nde r , a nd M . B . P e p y s . 19 9 0. E v a l u a t i o n o f
s y s t e mi c a my l o i do s i s b y s c i nt i g r a p h y wi t h ' 23 I - l a b e l e d s e r u m a my l o i d P c o mp o -
ne nt . N . E ng l . J . M e d. 3 23 : 5 08 - 5 13 .
3 1. C h e l l a du r a i , M . , S . S . M a c i nt y r e , a nd I . K u s h ne r . 19 8 3 . I n v i v o s t u di e s o f
s e r u m C - r e a c t i v e p r o t e i n t u r no v e r i n r a b b i t s . J . C l i n. I nv e s t . 7 1: 6 04 - 6 10.
3 2. R o we , I . F . , M . L . B a l t z , A . K . S o u t a r , a nd M . B . P e p y s . 19 8 4 . I n v i v o
t u r no v e r s t u di e s o f C - r e a c t i v e p r o t e i n a nd l i p o p r o t e i ns i n t h e r a b b i t . C l i n. E x p .
I mmu no l . 5 8 : 24 5 - 25 2.
3 3 . B a l t z , M . L . , I . F . R o we , a nd M . B . P e p y s . 19 8 5 . I n v i v o t u r no v e r s t u di e s o f
C - r e a c t i v e p r o t e i n. C l i n. E x p . I mmu no l . 5 9 : 24 3 - 25 0.
3 4 . P e p y s , M . B . , J . G. L a nh a m, a nd F . C . de B e e r . 19 8 2. C - r e a c t i v e p r o t e i n i n
s y s t e mi c l u p u s e r y t h e ma t o s u s . I n S y s t e mi c L u p u s E r y t h e ma t o s u s . C l i n. R h e u m.
Di s . 8 : 9 1- 103 .
3 5 . C o x , M . L . , A . G. R u dd, R . Ga l l i mo r e , H. M . Ho dki ns o n, a nd M . B .
P e p y s . 19 8 6 . R e a l - t i me me a s u r e me nt o f s e r u m C - r e a c t i v e p r o t e i n i n t h e ma na g e -
me nt o f i nf e c t i o n i n t h e e l de r l y . A g e A g e i ng . 15 : 25 7 - 26 6 .
3 6 . S t a r ke , I . D. , F . C . de B e e r , P . J . Do nne l l y , D. C a t o v s ky , J . M . Go l dma n,
D. G. Ga l t o n, a nd M . B . P e p y s . 19 8 4 . S e r u m C - r e a c t i v e p r o t e i n l e v e l s i n t h e
ma na g e me nt o f i nf e c t i o n i n a c u t e l e u ka e mi a . E u r . J . C a nc e r 20: 3 19 - 3 25 .
3 7 . N a ka y a ma , S . , C . M o l d, H. Ge wu r z , a nd T . W. Du C l o s . 19 8 2. O p s o ni c
p r o p e r t i e s o f C - r e a c t i v e p r o t e i n i n v i v o . J . I e f nmu no l . 128 : 24 3 5 - 24 3 8 .
3 8 . N a ka y a ma , S . , H. Ge wu r z , T . Ho l z e r , T . W. Du C l o s , a nd C . M o l d. 19 8 3 .
T h e r o l e o f t h e s p l e e n i n t h e p r o t e c t i v e e f f e c t o f C - r e a c t i v e p r o t e i n i n S t r e p t o c o c -
c u s p ne u mo ni a l i nf e c t i o n. C l i n. E x p . I mmu no l . 5 4 : 3 19 - 3 26 .
3 9 . de B e e r , F . C . , B . S h i ne , a nd M . B . P e p y s . 19 8 2. R a di o me t r i c l i g a nd
b i ndi ng a s s a y f o r C - r e a c t i v e p r o t e i n: c o mp l e x e d C - r e a c t i v e p r o t e i n i s no t de t e c t -
a b l e i n a c u t e p h a s e s e r u m. C l i n. E x p . I mmu no l . 5 0: 23 1- 23 7 .
4 0. de B e e r , F . C . , A . K . S o u t a r , M . L . B a l t z , I . T r a y ne r , A . F e i ns t e i n, a nd
M . B . P e p y s . 19 8 2. L o w de ns i t y a nd v e r y l o w de ns i t y l i p o p r o t e i ns a r e s e l e c t i v e l y
b o u nd b y a g g r e g a t e d C - r e a c t i v e p r o t e i n. J . E x p . M e d. 15 6 : 23 0- 24 2.
4 1. V o l a na ki s , J . E . 19 8 2. C o mp l e me nt a c t i v a t i o n b y C - r e a c t i v e p r o t e i n c o m-
p l e x e s . A nn. N Y A c a d. S c i . 3 8 9 : 23 5 - 25 0.
4 2. Ha wki ns , P . N . , M . J . M y e r s , A . A . E p e ne t o s , D. C a s p i , a nd M . B . P e p y s .
19 8 8 . S p e c i f i c l o c a l i z a t i o n a nd i ma g i ng o f a my l o i d de p o s i t s i n v i v o u s i ng 123 I - l a -
b e l e d s e r u m a my l o i d P c o mp o ne nt . J . E x p . M e d. 16 7 : 9 03 - 9 13 .
4 3 . K u s h ne r , I . , a nd M . H. K a p l a n. 19 6 1. S t u di e s o f a c u t e p h a s e p r o t e i n. I . A n
i mmu no h i s t o c h e mi c a l me t h o d f o r t h e l o c a l i z a t i o n o f C x - r e a c t i v e p r o t e i n i n r a b -
b i t s . A s s o c i a t i o n wi t h ne c r o s i s i n l o c a l i nf l a mma t o r y l e s i o ns . J . E x p . M e d.
114 : 9 6 1- 9 7 3 .
4 4 . K u s h ne r , I . , L . R a ki t a , a nd M . H. K a p l a n. 19 6 3 . S t u di e s o f a c u t e p h a s e
p r o t e i n. I I . L o c a l i z a t i o n o f C x - r e a c t i v e p r o t e i n i n h e a r t i n i ndu c e d my o c a r di a l
i nf a r c t i o n i n r a b b i t s . J . C l i n. I nv e s t . 4 2: 28 6 - 29 2.
4 5 . P a r i s h , W. E . 19 7 6 . S t u di e s i n v a s c u l i t i s . V I I . C - r e a c t i v e p r o t e i n a s a
s u b s t a nc e p e r p e t u a t i ng c h r o ni c v a s c u l i t i s : o c c u r r e nc e i n l e s i o ns a nd c o nc e nt r a -
t i o ns i n s e r a . C l i n. A l l e r g y . 6 : 5 4 3 - 5 5 0.
4 6 . Gi t l i n, J . D. , I . Gi t l i n, a nd D. Gi t l i n. 19 7 7 . L o c a l i z a t i o n o f C - r e a c t i v e
p r o t e i n i n s y no v i u m o f p a t i e nt s wi t h r h e u ma t o i d a r t h r i t i s . A r t h r i t i s R h e u m.
20: 14 9 1- 14 9 9 .
4 7 . Du C l o s , T . W. , C . M o l d, P . Y . P a t e r s o n, J . A l r o y , a nd H. Ge wu r z . 19 8 1.
L o c a l i z a t i o n o f C - r e a c t i v e p r o t e i n i n i nf l a mma t o r y l e s i o ns o f e x p e r i me nt a l a l l e r -
g i c e nc e p h a l o my e l i t i s . C l i n. E x p . I mmu no l . 4 3 : 5 6 5 - 5 7 3 .
4 8 . R o dr i g u e s , M . M . , a nd P . G. R o b e y . 19 8 2. C - r e a c t i v e p r o t e i n i n h u ma n
l a t t i c e c o r ne a l dy s t r o p h y . C u r r . E y e R e s . 2: 7 21- 7 24 .
4 9 . R e y no l ds , G. D. , a nd R . P . V a nc e . 19 8 7 . C - r e a c t i v e p r o t e i n i mmu no h i s t o -
c h e mi c a l l o c a l i z a t i o n i n no r ma l a nd a t h e r o s c l e r o t i c h u ma n a o r t a s . A r c h . P a t h o l .
L a b . M e d. 11 1: 26 5 - 26 9 .
5 0. R o we , I . F . , L . N . Wa l ke r , D. E . B o wy e r , A . K . S o u t a r , L . C . S mi t h , a nd
M . B . P e p y s . 19 8 5 . I mmu no h i s t o c h e mi c a l s t u di e s o f C - r e a c t i v e p r o t e i n a nd a p o -
l i p o p r o t e i n B i n i nf l a mma t o r y a nd a r t e r i a l l e s i o ns . J . P a t h o l . 14 5 : 24 1- 24 9 .
5 1. F i l e p , J . , a nd E . F o l de s - F i l e p . 19 8 9 . E f f e c t s o f C - r e a c t i v e p r o t e i n o n h u -
ma n ne u t r o p h i l g r a nu l o c y t e s c h a l l e ng e d wi t h N - f o r my l - me t h i o ny l - l e u c y l - p h e ny l -
a l a ni ne a nd p l a t e l e t - a c t i v a t i ng f a c t o r . L i f e S c i . 4 4 : 5 17 - 5 24 .
5 2. F i l e p , J . G. , F . He r ma n, E . K e l e me n, a nd E . F o l de s - F i l e p . 19 9 1. C - r e a c t i v e
p r o t e i n i nh i b i t s b i ndi ng o f p l a t e l e t - a c t i v a t i ng f a c t o r t o h u ma n p l a t e l e t s . T h r o mb .
R e s . 6 1: 4 11- 4 21.
5 3 . V o l a na ki s , J . E . , a nd K . W. A . Wi r t z . 19 7 9 . I nt e r a c t i o n o f C - r e a c t i v e
p r o t e i n wi t h a r t i f i c i a l p h o s p h a t i dy l c h o l i ne b i l a y e r s . N a t u r e ( L o nd. ) . 28 1: 15 5 -
15 7 .
5 4 . X i a , D. , C . L i n, J . Y u n, T . Wa g ne r , T . M a g nu s o n, a nd D. S a mo l s . 19 9 1.
T r a ns g e ni c mi c e e x p r e s s i ng r a b b i t C - r e a c t i v e p r o t e i n ( C R P ) r e s i s t e ndo t o x e mi a .
F A S E B J . 5 : 16 28 . ( A b s t r . )
5 5 . X i a , D. , a nd D. S a mo l s . 19 9 2. P r o t e c t i v e e f f e c t o f r a b b i t C - r e a c t i v e p r o t e i n
( R A B - C R P ) a g a i ns t me di a t o r s o f s e p t i c s h o c k i n t r a ns g e ni c mi c e . F A S E B J .
6 : 13 4 4 . ( A b s t r . )
5 6 . He u e r t z , R . M . , D. X i a , D. S a mo l s , a nd R . 0. We b s t e r . 19 9 2. T r a ns g e ni c
mi c e e x p r e s s i ng p l a s ma r a b b i t C - r e a c t i v e p r o t e i n e x h i b i t di mi ni s h e d v a s c u l a r
p e r me a b i l i t y a nd ne u t r o p h i l i nf i l t r a t i o n i n C S a - i ndu c e d a l v e o l i t i s . F A S E B J .
6 : 106 4 . ( A b s t r . )
M e t a b o l i c S t u di e s o f Hu ma n C - r e a c t i v e P r o t e i n 13 5 7