Mendel (1865) a fost primul care a intuit existena unor factori ereditari (numii mai

trziu gene) ce determin formarea caracterelor fenotipice ereditare !forismul "o gen un
caracter a dominat genetica clasic pn cnd s"a sta#ilit c genele sunt alctuite din !$% iar
su#stratul molecular al oricrui caracter este o protein structural sau o enzim &onceptul
clasic 'o gen ( un caracter' a de)enit "o gen (ADN) o protein"* postulnd c informaia
ereditar coninut +n !$% se exprim prin sinteza unor proteine specifice* care stau la #aza
caracterelor !cest proces* care reprezint +n fond funcia genei* este precis coordonat i reglat
+n raport cu programul dez)oltrii ontogenetice a organismului sau de ctre necesitile sale +n
anumite condiii meta#olice* impuse de mediu
A. CONCEPIA CLASIC DESPRE FUNCIA GENEI
1. GENA UNITATE DE FUNCIE I MUTAIE.
,elaia "o gen un caracter" este axioma fundamental a geneticii clasice !ceast
'dogm' poate fi demonstrat prin studiul mutaiilor- modificarea genei va produce o modificare
ereditar a caracterului determinat de gen .xemplele sunt numeroase /i cunoscute 0
reamintim c pe cromosomul 1 exist o gen care determin prezena pigmentului melanic +n
iris /i retin2 mutaia ei are drept consecin a#sena melaninei /i albinismul ocular
3rict ar prea de paradoxal la prima )edere* mutaia 'de)elopeaz' existena unei gene
normale /i d informaii pri)ind modul ei de aciune /i de transmitere 4eneticianul depinde de
apariia mutaiilor pentru 'a +n)a' cum se produce /i se transmite un caracter normal $e aceea*
deseori denumirea unei gene normale s"a fcut printr"o a#re)iere de 5"6 litere a efectului genei
mutante (denumit +n lim#a englez) iar numele locusului* dup prima mutaie detectat
1
$e ex-
" &7 de la "cystic fibrosis" (sau muco)iscidoz)2
" 78 de la "familial hypercolesterolemia"2
" 9:; de la "phenyletonuria"2
" %71 de la "neurfibromatosis" tip <2
" $M$ de la !Duchenne muscular dystrophy2
" 9:$ de la !polycystic idney disease* /a
4ena normal e)ideniat prin mutaie (denumit uneori 'gen de tip sl#atic'* pentru a
su#linia forma 'standard' su# care se gse/te deo#icei +n natur)* se noteaz cu semnul = dup
denumirea efectului fenotipic al mutaiei2 +n funcie de modul de transmitere genele dominante se
scriu cu ma>uscule* iar cele recesi)e cu litere mici ?n prezent* aciunile de 'descifrare' a
genomului uman au impus utilizarea unei terminologii /i nomenclaturi unice (internaionale) a
genelor (care se regse/te +n '4.%!@A!0'* accesi#il +n linie la adresa
Bttp-CCDDDinfo#iogenfr)
1


$e ex* la $rosopBila* locusul pentru gena normal (de tip sl#atic) ce d o#i/nuit culoarea ro/ie a ocBilor a fost
numit ""hite" (prescurtat "#) deoarece prima mutant descris produca ocBi de culoare al#
1
EXPRESIA INFORMAIEI EREDITARE
(FUNCIA GENEI)
0e poate concluziona c +n toate studiile de genetic clasic se pleca de la caracter la
gen iar gena era considerat unitatea de functie i de muta$ie ,elaia 'o gen ( un caracter'*
care reflect +n esen relaia 'genotip ( fenotip'* ()ezi capitolul 1E6)* este +ns mult mai
complex* deoarece-
alturi de caracterele 'monofactoriale' sau monogenice* produse de o singur perecBe de gene
alele* exist numeroase caractere poligenice sau "multifactoriale'* determinate prin aciunea
mai multor gene nealele /i influenate de factori de mediu2 de o#icei caracterele monogenice
sunt caractere calitati)e* iar cele poligenice C multifactoriale sunt cantitati)e2
+n unele cazuri o gen poate a)ea efecte multiple /i poate determina mai multe caractere2 acest
fenomen se nume/te pleiotropie2 +n alte cazuri dou sau mai multe gene particip la realizarea
unui caracter2
exist numeroase interac$iuni alelice% nonalelice i cu mediul " care influeneaz efectul genei*
momentul sau tipul celular +n care se exprim o gen2
mutaii ale unor gene diferite se pot manifesta fenotipic identic sau asemntor2 acest
fenomen se nume/te heterogenitate genetic
2. POLIGENIA
!numite caractere fenotipice complexe* normale sau anormale) sunt produse prin
aciunea mai multor gene nealele (situate +n loci diferii) care au efecte cantitative% mici i aditive
(cumulati)e) !cest fenomen se nume/te poligenie. ?n acest caz 'a#aterea' de la regula 'o gen
( un caracter' este aparent* deoarece fiecare gen determin o parte din caracter %umrul
de gene care particip la realizarea caracterului este necunoscut2 el )ariaz la persoane diferite /i
de aceea distribu$ia caracterului respectiv &n popula$ie va corespunde unei curbe normale% de tip
'aussian (distribu$ie continu) ?n figura F1 sunt prezentate dou caractere normale " talia /i
tensiunea arterial sistolic G care prezint* +ntr"o populaie neselecionat* o distri#uie continu
@re#uie s su#liniem dou caracteristici eseniale ale poligeniei-
genele care produc caracterul ac$ionea( independent unele de altele2 +ntre ele nu exist
relaii de dominan"recesi)itate sau epistazie2
expresia fenotipic a genelor poate fi frec)ent influen$at de factori de mediu2 de aceea
caracterele produse prin aciunea com#inat a mai multor factori genetici /i factori negenetici
se numesc curent caractere multifactoriale !cest termen este mai larg /i nu tre#uie
ecBi)alat cu cel de poligenie2 acesta are un sens mai restricti) /i nu implic o component de
mediu
&aracterele multifactoriale normale (talia* tensiunea arterial* culoarea pielii* inteligena
/a) sau anormale (numeroase #oli comune* malformaii congenitale izolate C unice* unele forme
de cancere etc) sunt frec)ente /i ele )or fi discutate pe larg +ntr"un capitol distinct Hom su#linia
totu/i aici c +n aceste caractere multifactoriale componenta genetic este deseori reprezentat
totu/i de un numr mic de gene* ce prezint mai multe )ariante alelice +n populaie (unele dintre
ele a)nd efecte calitati)e* ma>ore)2 +n acest caz se )or#e/te de oligogenie
3. PLEIOTROPIA
9rin pleiotropie (sau polifenie) define/te fenomenul +n care o singur gen (dominant)
sau o perecBe de gene (recesi)e) produc efecte fenotipice di)erse +n mai multe sisteme de organe
/i funcii ?n genetica clinic se +ntlnesc numeroase cazuri de pleiotropie* ce reprezint diferite
sindroame
5
;n frumos exemplu +l reprezint sindromul Marfan ()ezi /i caseta F1) !cesta se
caracterizeaz prin trei categorii de semne-
2


9rin sindrom se +nelege un ansam#lu de semne C simptome care definesc o anumit entitate clinic sau un
anumit mecanism patogenic
2
modificri scBeletice- mem#re lungi* degete lungi /i fine (araBnodactilie)* Biperlaxitate
articular (ce produce frec)ent luxaii)* deformaii ale coloanei )erte#rale (cifoz* scolioz)
sau ale sternului (pectus carinatus sau exca)atum) etc2
modificri oculare- su#luxaieCectopie de cristalin* miopie sau Bipermetropie forte*
megalocornee etc2
modificri cardio)asculare- ane)risme (dilataii) ale aortei* prolaps de )al) mitral etc
CASETA 4.1 )*+* ,-./00
Sindromul Marfan
Definiie: Afec$iune a $esutului con1unctiv transmis autosomal dominant% cu e2pre3sivitate
variabil% i manifestat sub form de anomalii oculare% articulare i cardio3 vasculare4
Inciden: ,5,04000% fr predilec$ie geografic sau etnic4
Manifestri clinice: 6oala se manifest cu anomalii &n trei sisteme ma1or7 scheletic% ocular%
cardio3vascular8 mai rar se &nt9lnesc afectri cutanate% pulmonare i durale4 Anomaliile scheletice
includ7 talie &nalt dispropor$ionat (pe seama membrelor)% arahnodactilie% deformri ale sternului%
scolio(% la2itate i hipermobilitate articular4 Anomaliile oculare sunt repre(entate de miopie%
sublu2a$ie de cristalin% cornee plat% hipopla(ie irian4 *alforma$iile cardio3vasculare includ7
prolaps de valv mitral% insuficien$ aortic% dilata$ia i ruptura aortei ascendente4
*ulte semne ale sindromului *arfan se de(volt cu v9rsta
Patogenie: &n sindromul *arfan se produce : prin muta$ia genei ;6N, 3 o alterare a
structurii $esutului con1unctiv% care e2plic manifestrile sale clinice4 'ena ;6N, codific fibrilina ,%
o glicoprotein e2tracelular ce formea( microfibrile &n structura $esutului con1unctiv4 *uta$iile
;6N, sunt foarte variate i produc boala printr3un fenomen de dominan$ negativ (la hetero(igo$ii
An% fibrilina modificat produs de gena A% inhib formarea de microfibrile dei gena n codific o
fibrilin normal)4 <irca =0 > din ca(uri sunt produse de muta$ii noi4 +nteresant de subliniat c unele
muta$ii produc sindroame &nrudite cu sindromul *arfan7 arahnodactilia familial% fenotipul *A??
(de la mitral% aorta% seletal% sin)% ectopia de cristalin AD4
Genetic: gena ;6N, este locali(at pe ,-@,- i se transmite autosomal dominant4 6olnavii
au risc de -0> de a avea un copil afectat cu sindrom *arfan4
Diagnostic: Aentru afirmarea diagnosticului de ?indrom *arfan este necesar &ndeplinirea
urmtoarelor condi$ii7
Cazul index: criterii ma1ore &n cel pu$in dou sisteme diferite i implicarea unui al treilea8
Membri ai familiei: pre(en$a unui criteriu ma1or i anamne(a familial po(itiv
Diagnostic prenatal, screening neonatal: posibil &n ca(urile cu risc% prin anali(a muta$iei sau
studii de &nln$uire4 Nu se folosete pe scar larg4
Prognostic: re(ervat datorit afectrii cardio3 vasculare4
ratament: medical (beta blocante% pentru a &ncetini progresia dilata$iei aortice8 profila2ie
cu antibiotice% pentru profila2ia unei endocardite) i chirurgical pentru complica$iile cardio3
vasculare i osteo3 articulare4
@oate modificrile fenotipice din sindromul Marfan sunt rezultatul unei singure mutaii
genice* ce se transmite autosomal dominant !parent* +n acest caz exist o a#atere de la regula 'o
gen ( un caracter' dar explicaia efectelor multiple produse de o singur gen este (astzi)
simpl- mutaia genic determin un defect +n structura primar a fi#rilinei* component ma>or a
esutului con>uncti) Manifestrile multiple* produse prin alterarea esutului con>uncti) +n diferite
teritorii* au o legtur patogenic (un mecanism comun) ?n acest caz pleiotropia este
rela$ional ?ntr"un alt sindrom pleiotrop* sindromul Treacher-Collins, pertur#area dez)oltrii
fetale a celui de al doilea arc #ranBial )a produce modificri regionale corelate +n structurile ce se
3
dez)olt din acest arc- urecBe* maxilar superior /i mandi#ul2 pleiotropia este e)ident
relaional
6

9entru numeroase afeciuni pleiotrope conexiunea dintre diferite manifestri nu este nici
e)ident /i nici #ine +neleas ?n aceste cazuri se )or#e/te de o pleiotropie nerela$ional $e ex*
+n sindromul Bardet-Biedl nu exist (+nc) o legtur patogenic e)ident +ntre diferitele sale
semne- polidactilie* o#ezitate* surditate* Bipogonadism* retinit pigmentar /i retard mintal
!ceast 'sec)en' natural de modificri (care apar succesi)* la )rste diferite) este produs +ns
de o singur cauz- o mutaie recesi) a unei perecBi de gene alele (Bomozigot) 9rogresul
posi#ilitilor actuale de explorare /i analiz )a elucida pro#a#il mecanismul comun al
manifestrilor multiple +n pleiotropia nerelaional ,ecent* +n unele sindroame considerate
pleiotrope s"au e)ideniat microdeleii cromosomice ()ezi capitolul 1I&6)2 de ex sindromul
A!" (Bilms tumor3aniridia3genital defects3retardation syndrom produs de o microdeleie +n
regiunea 11p16) 9ierderea mai multor gene diferite dar )ecine* situate +n aceia/i regiune
cromosomic* ar explica di)ersitatea /i lipsa de corelaie a manifestrilor clinice !ceste cazuri
numite /i "sindroame ale genelor contigue" (sau +n)ecinate) ies +ns din 'sfera' pleiotropiei* care
se refer* prin definiie* la efectele multiple ale unei singure gene
@re#uie s su#liniem faptul c +n practica medical sindroamele pleiotrope ridic
pro#leme dificile de diagnostic pentru c semnele (care +n ansam#lu lor pun diagnosticul de
sindrom) nu sunt prezente totdeauna +n totalitatea lor (fie c unele nu se manifest dect la
anumite )rste* fie c pur /i simplu nu apar* datorit unei expresi)iti )aria#ile)
4. INTERACIUNILE GENEI
.xpresia fenotipic a unei gene poate depinde de- interaciunile cu gena alel (situat +n
acela/i locus pe cromosomul omolog)* influena altor gene /iCsau aciunea mediului
F1 <%@.,!&J<;%<A. !A.A<&.
4enele alele* situate +n loci omologi* pot fi identice (la homo(igo$i) sau diferite (la
hetero(igo$i) ?n stare Beterozigot (A5a)
F
manifestarea genelor alele depinde de relaiile 'de
for' care se sta#ilesc +ntre ele ;neori se manifest fenotipic numai una din genele alele /i
atunci gena /i caracterul corespunztor (A) sunt numite dominante 4ena (a) care nu se exprim
+n aceast situaie se nume/te recesi#$2 ea se manifest numai +n stare Bomozigot (a5a) sau la
Bemizigoi 1
a
K) !lteori* la Beterozigoi se manifest fenotipic am#ele gene alele2 +n aceast
situaie genele sunt codominante $e ex* intre alelele A,% A=% 6 /i 0 ale locusului grup sanguin
!EI se sta#ilesc urmtoarele relaii de dominan /i recesi)itate- genele A,% A= /i 6 sunt
dominante fa de gena I $e aceea* genotipurile A,5o* A=5o /i 65o )or corespunde grupelor !1*
!5 /i respecti) E2 fenotipul I )a fi determinat de genele recesi)e o5o2 gena A, este dominant
fa de A= /i genotipil A,5A= )a determina fenotipul !12 genele A,% A= /i 6 sunt codominante
+ntre ele* producnd fenotipul !1E sau !5E
.ste important de precizat c noiunile de dominan /i recesi)itate sunt )ala#ile pentru
caracter* se refer deci la fenotip- genele sunt clasificate ca dominante sau recesive pe ba(a
e2presiei lor fenotipice4 @otu/i* a/a cum )om )edea mai departe (&apitolul FE1)* la ni)el
molecular sau #iocBimic nu se poate face nici o distincie +ntre genele 'dominante' sau
'recesi)e'* deoarece de cele mai multe ori ambele tipuri de gene se manifest* codific o
protein
3
Hom )edea mai trziu c exist /i alte explicaii patogenice ale sindroamelor cu pleiotropie2 de ex interferena
unor ci meta#olice interconectate* ramificate
4
Aa scrierea concis a unui genotip (de ex !Ca2 !ECa#) linia ce separ sim#olurile genelor ne arat c acestea sunt
dispuse* separate* pe cromosomi omologi distinci
4
?n sfr/it* )om meniona c dominana poate fi complet* atunci cnd fenotipul
Beterozigotului A5a este identic cu cel al Bomozigotului A5A (de ex* +n sindromul Marfan) sau
incomplet (parial)
5
* cnd fenotipul Beterozigotului A5a este intermediar +ntre cel al
Bomozigoilor A5A /i a5a2 deaceea +n unele #oli cu transmitere dominant (de ex*
Bipercolesterolemia familial ()ezi capitolul 11.1) Bomozigoii A5A sunt mult mai gra) afectai
dect Beterozigoii A5a
F5 <%@.,!&J<;%<A. %.!A.A<&.
.xpresia fenotipic a unei gene nu depinde +ntotdeauna numai de gena +ns/i* fiind
deseori influenat de aciunea alteiCaltor gene (nealele)* deci de 'fondul genetic' al
organismului* la care se poate aduga /i efectul unor factori de mediu !ceste aciuni determin
gradul de penetran$ i e2presivitate a unei gene sau sunt implicate +n fenomenul de epista(ie
a %enetrana define/te pro#a#ilitatea unei gene mutante de a se manifesta fenotipic
(indiferent de intensitate) .ste o noiune cantitati) (de tipul 'tot sau nimic') )ala#il +n special
pentru genele dominante
6
* +n stare Beterozigot Multe gene au o penetran$ complet% puternic*
/i se manifest ori de cte ori exist +n genotip .xist +ns gene mutante care au o penetran$
incomplet* redus ?n aceste cazuri* unele persoane (de ex <<<6 din figura F5) posed gena
anormal* ce produce camptodactilia* care nu se poate manifesta fenotipic ('nonpenetran') dar
se transmite la urma/i* unde se exprim mai mult sau mai puin complet2 se realizeaz astfel 'un
salt' peste o generaie
&auzele penetranei incomplete* reduse* nu sunt clare dar se discut efectul antagonic al
unor gene (supresoare sau !epistatice) /iCsau al unor factori de mediu !supra fenomenului
de penetran )om re)eni mai pe larg ulterior ()ezi capitolul 5$5)2 )om preciza +ns c
penetrana este un termen clinic ce poate fi influenat de )rst /i sex* precum /i de capacitatea
de explorare a fenotipului pacientului
# E&presi#itatea reprezint gradul (intensitatea sau se)eritatea) de manifestare clinic
(fenotipic) a unei gene mutante /i penetrante la #olna)ii din aceea/i familie (figura F5) sau din
familii diferite .xpresi)itatea* spre deose#ire de penetran* este o noiune calitativ4
$eseori genele dominante cu efecte multiple (pleiotrope) se manifest diferit la persoane
cu acela/i genotip (A5n) ?n aceste cazuri expresi)itatea )aria#il poate interesa- spectrul
semnelor (anomaliilor) manifeste* se)eritatea* )rsta de de#ut a #olii sau a unor elemente
componente Aa #olna)ii diferii din aceea/i familie se pot +ntlni forme complete de #oal*
forme pariale sau fruste (oligo" C monosimptomatice) $e ex* la #olna)ii cu sindrom Marfan
pot s nu apar toate anomaliile celor trei sisteme afectate (scBelet* ocBi* aparat cardio)ascular)
sau se)eritatea clinic poate s fie diferit $e menionat c expresi)itatea )aria#il este
frec)ent +n #olile dominante autosomale pleiotrope* dar se poate +ntlni la toate #olile ereditare*
indiferent de modul de transmitere
&auzele expresi)itii )aria#ile nu sunt deo#icei cunoscute ()ezi /i 5$5) 0e in)oc
factori de mediu ce influenteaz intensitatea de manifestare a #olii* interaciunea genei #oal
cu alte gene* numite modificatoare /i +n final mutaii diferite (ca localizare si efecte) +n
aceia/i gen (!heterogenitate alelic) 3 do)ad indirect a existenei genelor modificatoare
o reprezint expresia mai frec)ent sau exclusi) a unor caractere (determinate de gene
autosomale) la un anumit sex $e ex- cal)iia frontal* guta /i Leratoza palmoplantar " mai
frec)ente la #r#ai /i aplazia /malului dentar sau cderea precoce a dinilor " mai frec)ente la
femei
!/a cum am precizat* penetrana /i expresi)itatea unor gene mutante sunt termeni clinici
&unoa/terea lor are o deose#it importan practic deoarece poate influena calitatea
5


$ominana incomplet se mai nume/te semidominan
6


0e consider c fenomenul de penetran poate interesa /i gene recesi)e2 +n aceast situaie pacientul Bomozigot
(aa) care ar tre#ui s manifeste #oala este sntos /i greu de deose#it de Beterozigotul (%a) normal
5
diagnosticului /i* funcie de aceasta* corectitudinea sfatului genetic- neindentificarea prezenei
unei gene mutante (nonpenetran sau manifestare oligo C monosimptomatic) la o persoan
purttoare )a duce la o e)aluare gre/it a riscului de recuren la urma/i
;n alt fenomen de interaciune genic se refer la situaiile +n care dou sau mai multe
gene interacioneaz +n realizarea normal a unui caracter2 dac una din gene sufer o mutaie ea
suprim efectul celeilalte C celorlalte gene 7enomenul +n care o gen interfereaz C suprim
expresia fenotipic a unei alte gene nealele se nume/te epista'ie $e exemplu* dez)oltarea /i
funcia normal a aparatului auditi) este dependent de implicarea a dou perecBi de gene- una
(D5D) controleaz formarea normal a coBleei* iar cealalt (C5C) 3 dez)oltarea ner)ului auditi)
Mutaia uneia din aceste gene (d5d sau eCe) produce surditate cBiar dac cealalt perecBe de gene
este normal2 o coBlee normal (D5D) nu poate funciona dac nu se dez)olt ner)ul acustic (e5e)
/i in)ers nedez)oltarea coBleei (d5d) determin surditate (de percepie) cBiar dac ner)ul este
integru (C5C) ;n alt exemplu de epistazie +l reprezint statusul secretor* definit prin capacitatea
unor indi)izi ('secretori') de a elimina C secreta antigenele de grup sanguin !E3 +n secreii
(sali)* lacrimi* licBid spermatic etc) !ceast proprietate este determinat de o gen dominant
?e53 2 +n stare recesi) (se5se) nu se produc aceste antigene si indi)izii sunt 'nesecretori'* cBiar
dac exist genele !EI
.pistazia poate fi realizat fie de prezena unei gene supresoare (epistatice) +n stare
recesi) (aa)* fie de prezena unei gene dominante (!n) /i de aceea exist o epistazie recesi)* +n
primul caz* sau o epistazie dominant* +n al doilea caz <ndiferent de tip se pune firesc +ntre#area-
cum poate o gen s afecteze expresia altor geneM ?n exemplul surditii rezult e)ident c
dez)oltarea anormal a caracterului (aparat auditi)* +n acest caz) depinde de dez)oltarea
Crealizarea ordonat a unor pri anatomice componente (coBlee2 ner) acustic)* fiecare controlat
de o gen distinct ?n alte cazuri de interaciune genic este )or#a de o cale meta#olic simpl
sau ramificat* +n care fiecare etap este controlat de o enzim distinct* codificat de o anumit
gen2 mutaia unei gene /i a#sena unei enzime #locBeaz calea meta#olic /i +mpiedic apariia
produsului final* cBiar dac celelalte gene /i enzime sunt normale ?n cazul caracterului secretor
gena 0eC" /i genele !E3 acioneaz +n diferite etape ale formrii antigenelor de grup sanguin
+ntr"o form Bidrosolu#il ()ezi FE5)
F6 <%@.,!&J<;%<A. 4.%.A3, &; M.$<;A
%u tre#uie s uitm c acti)itile tuturor genelor au loc +n mediul celular* care la rndul
lui este influenat de factori ai mediului extern $e aceea* gradul de penetran /i expresi)itate a
multor gene depinde* +ntr"o oarecare msur* de factorii de mediu (fizici sau cBimici) Aa
$rosopBila* )ariaiile de temperatur pot reduce penetrana unor gene de la 1IIN la zero sau pot
influena intensitatea lor de expresi)itate Aa om* expresi)itatea )aria#il a polidactiliei este
foarte pro#a#il condiionat de mediu- faptul c o persoan poate a)ea un deget suplimentar
complet la o mn /i nici unul sau numai un rudiment la cealalt mn sau la picior pledeaz
pentru aciunea unui factor de mediu uterin care a interferat expresi)itatea genei
0 ne reamintim c efectele noci)e ale fenilcetonuriei (9:;) se manifest numai atunci
cnd se acumuleaz fenilalamin prin aport alimentar ()ezi capitolul 1E51c)2 eliminarea
acestui aminoacid din alimentaie pre)ine retardul mintal pe care"l poate cauza expresia complet
a genei pentru 9:; ,spunsul )aria#il al diferitelor persoane la anumite medicamente
(farmacogenetica)* reprezint un alt exemplu con)ingtor al interaciunii dintre gene /i factorii de
mediu .ste de>a cunoscut ()ezi capitolul 1E56#) efectul antimalaricelor* sulfamidelor sau al
consumului de #o# la persoanele cu deficien$ (n !)%*- a#sena enzimei* de o#icei
nemanifest* de)ine e)ident (printr"o criz de anemie Bemolitic) dup aciunea acestor factori
de mediu
5. HETEROGENITATEA GENETIC
6
%umeroase #oli ereditare umane* indiferent de modul lor de transmitere* prezint o
heterogenitate genetic$ @ermenul se refer de regul la situaia +n care muta$ii genice
(genotipuri) diferite determin un fenotip identic sau asemntor4 8eterogenitatea poate fi
produs de mutaii +n loci diferii (Beterogenitate de locus sau nonalelic) sau mutaii diferite +n
acela/i locus (Beterogenitate alelic) sau de am#ele
a +eterogenitatea de locus C nonalelic poate fi u/or demonstrat prin analiza ar#orilor
genealogici ai diferitelor familii +n care o #oal genetic se manifest identic2 aceast analiz
genealogic )a e)idenia modaliti diferite de transmitere ale aceleia/i afeciuni* do)edind
existena unor mutaii diferite +n loci diferii .le )or fi apoi confirmate prin studiul !$%
$e ex* retinita pigmentar$ " o cauz frec)ent de afectare /i pierdere a )ederii* datorat
degenerrii retiniene +nsoit de o distri#uie anormal a pigmentului +n retin " se prezint su#
forme de transmitere ereditar diferite- autosomal dominante (15 forme)* autosomal recesi)e (5
forme) /i legat de 1 (trei forme) !u fost localizate peste 5I de regiuni cromosomice
O
ce conin
loci care produc retinita pigmentar (dintre ace/tia 8 au fost de>a identificai)
.xist multe alte exemple de Beterogenitate de locus- al#inismul* surditatea congenital*
Bipotiroidia congenital etc ?n prezent* analiza genotipic molecular (la ni)el !$%) a
demonstrat c multe afeciuni cu un mod unic de transmitere pot fi Beterogene $e exemplu*
nanismul Bipofizar* osteogenesis imperfecta* rinicBiul policBistic etc pot fi produse de mutaii +n
loci diferii (ta#elul F1) .)ident* +n aceea/i familie toi #olna)ii )or a)ea acela/i genotip sau*
mai exact* aceea/i mutaie
Ta,el 4.1 E&emple de ,oli (n care e&ist$ heterogenitate de locus
Boala *escriere Cromosomii pe care
sunt locali'ai locii-
,oal$
Eoala !lzBeimer $emen progresi) 1* F* 1P* 51
Eoala &Barcot"Marie"@ootB %europatie periferic 1* 5* 8* 11* 1O* 1
Eoala policBistic renal a
adultului (!$9:$)
!cumulare de cBisti renali ducnd la
insuficien renal cronic
16* F
&ancerul colorectal
nonpolipozic ereditar (!$)
&ancer colorectal 5p* 5Q* 6* O
&ancer de sn ereditar (!$) 9redispoziie la cancer de sn sau o)ar aparut
precoce
16* 1O
Melanomul familial &ancer piele 1* P
3steogenesis imperfecta Eoala oaselor de sticl O /i 1O
,etinita pigmentar ,etinopatie progresi) /i pierderea )ederii R 5I regiuni
cromosomice
0cleroza tu#eroas &on)ulsii* angiofi#roame faciale* macule
Bipopigmentate pe piele* retard mintal
P* 16
# +eterogenitatea alelic$ este reprezentat de mutaii diferite +n acela/i locus (aceea/i
gen) care produc fenotipuri asemntoare clinic* deose#ite doar prin intensitatea de manifestare
a #olii ;n exemplu caracteristic +l reprezint distrofia muscular Duchenne i boala 6ecer "
afeciuni caracterizate prin atrofie muscular progresi) /i inexora#il2 ele sunt determinate de
mutaii diferite ale aceleia/i gene (locus)* situat pe cromosomul 1 $e/i efectele fenotipice sunt
asemntoare* #oala EecLer este o form moderat de distrofie muscular .xplicaia acestui
fenomen este c unele alele nu a#olesc complet sinteza /i deci funcia unei proteine
7
$ac adugm /i formele sindromice de retinit pigmentar (asociat cu alte anomalii C manifestri) exist
peste 6I de #oli diferite ce se manifest cu retinit pigmentar
7
.xist numeroase alte exemple de Beterogenitate alelic- muco)iscidoza (forme cu sau
fr insuficien pancreatic)* Bemofilia !* #eta"talasemia* neurofi#romatoza* surditatea* #oala
@aS"0acBs etc 0e spune c heterogenitatea alelic este o regul +n #olile mendeliene la om $e
aceea +n multe #oli recesi)e persoanele afectate nu au genotipuri pur Bomozigote2 ele sunt
hetero'igoi compu-i deoarece au dou alele mutante diferite (a,5a=)
?n unele afeciuni genetice (de exemplu* mucopolizaBaridozele* Bomocistinuria*
osteogenesis imperfecta* surditatea congenital etc) se +ntlnesc am#ele forme de Beterogenitate*
alelic /i nonalelic (de locus) ;n exemplu sugesti) +l reprezint sindromul Ehlers-*anlos
(0.$) ()ezi capitolul 11E5)* o afeciune a esutului con>uncti) (produs printr"un defect +n
structura colagenului) caracterizat prin Biperelasticitate cutanat* Biperlaxitate articular /i
fragilitate tisular crescut 0.$ prezint mai multe su#tipuri clinice definite /i prin alte semne
clinice* care le difereniaz ?n familii diferite 0.$ se transmite diferit " autosomal dominant sau
recesi)* legat de 1 " demonstrnd o )erita#il Beterogenitate de locus !naliza clinic /i
molecular rele) cel puin 1I tipuri distincte de 0.$ /i o ampl Beterogenitate alelic2 exist*
spre exemplu* /ase forme autosomal dominante* din care cel puin o parte sunt produse de
mutaii diferite ale aceluia/i locus ()ariante alelice)
c. +eterogenitatea clinic$. @re#uie s menionm c Beterogenitatea alelic nu produce
totdeauna fenotipuri asemntoare $in contra* mutaii diferite ce intereseaz aceeai gen (+n
exoni diferii) pot a)ea un aspect clinic )ariat* producnd uneori cBiar boli diferite2 acest
fenomen se nume/te heterogenitate clinic sau fenotipic $e exemplu* mutaii diferite +n gena
pentru glo#in produc sicLlemia (!,)* talassemia (!,)* Bemoglo#ina insta#il (!$) /i
metBemoglo#inemia (!$) 0indromul 8urler /i sindromul 0cBeie sunt dou forme diferite de
mucopolizaBaridoz (#oal de stoca> a mucopolizaBaridelor +n lizozomi) de/i sunt produse de
)ariante alelice ale aceleia/i gene (care afecteaz aceia/i enzim* alfa"A"iduronidaza) distinte ;n
alt exemplu- unele mutaii +n gena "ET (11Q15) (ce codific un receptor tirozinLinazic* implicat
+n migrarea celulelor din creasta neural) care se +nsoesc de pierderea func$iei genei* produc o
insuficient dez)oltare a ganglionilor colonici /i secundar distensia colonului* tul#urri de
motilitate /i constipaie se)er cronic (,oala +irschprung)2 alte mutaii +n aceia/i gen* care se
+nsoesc de c9tig de func$ie* produc trei forme de cancer ereditar al glandelor tiroid /i
suprarenal (neoplaziile endocrine multiple *CN=A /i *CN=6 precum /i cancer medular
tiroidian)2 un al treilea grup de mutaii +n gena DCE produc am#ele #oli la acela/i indi)id $in
exemplele prezentate mai sus rezult c Beterogenitatea clinic este frec)ent /i important2
explicaia cea mai simpl a acestui fenomen este c exoni /i* implicit* domenii distincte ale unei
proteine pot +ndeplini funcii diferite* iar prin mutaii )ariate +n aceea/i gen sunt afectate aceste
funcii* rezultnd #oli diferite
d. .mportana practic$ a fenomenului de heterogenitate genetic$ -i clinic$.
7enomenul de Beterogenitate genetic* frec)ent intlnit +n eredopatologie* are o deose#it
importan practic pentru acurateea diagnosticului clinic /i etiologic* tratamentul difereniat al
unei manifestri clinice produs de genotipuri diferite /i* #ine+neles* pentru realizarea unui sfat
genetic corect (+n funcie de modul diferit de transmitere) <at succint cte)a exemple /i deci
argumente care demonstreaz importana practic a cunoa/terii acestui fenomen
Eratamentul4 ?n cazul unei afeciuni cu Beterogenitate genetic (de ex* Bemofilia ! /i E2
Biperfenilalaninemie) diagnosticul )a fi incomplet dac nu se precizeaz tipul etiopatogenic /i
acest lucru poate a)ea consecine negati)e +n tratament2 aplicarea unei terapii identice unor
#oli genotipic diferite* dar cu aceea/i manifestare clinic* risc s fie deseori fr succes $e
exemplu* Biperfenilalaninemia* care produce secundar de#ilitate mintal* poate fi cauzat de o
deficien a enzimei fenilalaninBidroxilaza (+n 9:;* forma clasic) sau de unele anomalii ale
meta#olismului #iopterinei2 9:; poate fi tratat cu succes prin restricia dietetic a
fenilalaninei +n timp ce +n a doua situaie acela/i tratament este ineficace
8
Arognosticul #olilor cu Beterogenitate alelic (de ex* distrofie muscular $ucBenne /i
distrofie muscular EecLer) este deasemeni diferit
?fatul genetic4 ,iscul de recuren a retinitei pigmentare este 5IN +n formele autosomal
dominante* 55N +n cazurile autosomal recesi)e /i 5IN la #iei +n formele recesi)e legate de
12 fr precizarea modului de transmitere* deci a diagnosticului etiologic* sfatul genetic +n
retinita pigmentar nu poate fi corect realizat
B. CONCEPIA ACTUAL DESPRE FUNCIA GENEI
1. GENELE CONTROLEAZ SINTEZA PROTEINELOR
.xplicnd funcia genei prin relaia 'o gen ( un caracter'* genetica clasic nu a putut
rspunde la +ntre#area- "cum ac$ionea( genele &n formarea% de(voltarea i func$ia
organismuluiF"
9rima formulare a unui rspuns corect aparine unui medic englez sir !rcBi#ald 4arrod*
care postuleaz o legtur specific +ntre gene /i proteine ?n 1PI5* 4arrod descrie alcaptonuria*
o #oal ereditar care se transmite +n succesiunea generaiilor +n concordan cu legile lui
Mendel Eolna)ii sufer de artrit /i urina lor de)ine neagr dup expunerea la aer 4arrod a
presupus c #oala este determinat de un bloc biochimic produs de lipsa enzimei care
meta#olizeaz acidul Bomogentizic (figura F6) 0imptomatologia #olii este rezultatul
acumulrii acidului Bomogentizic +n organism ca urmare a 'bara1ului' cii meta#olice 9rin
acela/i mecanism el explic mecanismul altor trei #oli ereditare* inclusi) al,inismul unde a
descris un #loc meta#olic pe calea de transformare a tirozinei +n melanin 4arrod a sta#ilit astfel
o relaie clar +ntre gene /i enzime /i a introdus +n medicin conceptul de /erori (nn$scute de
meta,olism/ (prefigurnd era patologiei molecuare)
$in pcate* ca /i +n cazul lui Mendel* importana remarca#ilelor cercetri de genetic ale lui 4arrod n"a
fost perceput nici de medici /i nici de #iologi !#ia peste FI de ani* experienele efectuate de Eeadle /i
@atum la Neurospora crasa au demonstrat fr ecBi)oc relaia 'o gen ( o enzim'* aducndu"le autorilor
un #inemeritat 9remiu %o#el (1P58)
Eeadle /i @atum (1PFF) au studiat meta#olismul triptofanului /i argininei la %eurospora crasa (mucegaiul
al#) .i au sta#ilit etapele #iosintezei triptofanului din arginin /i au demonstrat c fiecare etap este
catalizat de o enzim diferit !poi* au iradiat sporii ciupercii /i culti)ndu"i pe medii nutriti)e au o#inut
mai multe )ariante (mutante)2 ele nu puteau sintetiza triptofanul deoarece una din etape era #locat* fie prin
lipsa enzimei* fie prin inacti)area ei* produs de modificarea structurii sale @oate aceste modificri erau
ereditare* reprezentnd consecine ale mutaiilor produse prin iradiere ,ezult e)ident c genele +/i
exercit efectul lor fenotipic prin controlul sintezei unor enzime (proteine)
%umeroase alte do)ezi o#inute la microorganisme* plante* animale /i om au demonstrat
incontesta#il c genele +/i exercit controlul asupra organismului prin influena lor asupra
formrii proteinelor 9rin enorma lor di)ersitate /i complexitate structural* ca /i prin rolul lor
structural* catalitic (enzime) sau reglator* proteinele determina aproape toate caracterele
organismului ,elaia "o gen o en(ima (protein)" a de)enit +n scurt timp "o gen un
polipeptid"% deoarece unele proteine formate din dou sau mai multe polipeptide (de ex*
Bemoglo#ina) sunt codificate de gene distincte* care controleaz fiecare sinteza unui polipeptid
,elaia 'o gen " un polipeptid' nu este general )ala#il deoarece unele gene codific
diferite tipuri de !,%2 de aceea gena a fost definit ca un segment de !$% ce determin sinteza
unui produs funcional 4enele care codific proteine sunt numite /i gene structurale
2. STRUCTURA PROTEINELOR
?ntruct proteinele reprezint 'suportul' #iocBimic al caracterelor noastre fenotipice /i
sinteza lor este determinat genetic* pentru a +nelege mecanismul complex al relaiei "o gen
9
o protein" sunt utile cte)a noiuni sintetice despre stuctura acestor compu/i organici* cu rol
)ital +n organism
9roteinele sunt alctuite din una sau mai multe catene polipeptidice* formate prin
polimerizarea a 5I de tipuri de aminoacizi $e/i diferii +n complexitatea lor* ei au la #az o
structur comun de tipul-
H
H2N C COOH

R
,adicalul R difer de la un aminoacid la altul si determin structura /i proprietile
aminoacidului !minoacizii se unesc +ntre ei prin legturi peptidice (figura FF) formnd o caten
liniar polipeptidic2 aceasta are 'o coloan )erte#ral' (+n zig"zag) alctuit din T&T%T* pe care
se fixeaz lateral /i +n mod alternati) gruparea , (figura F5) Numrul% tipul i secven$a
aminoaci(ilor &n lan$ul polipeptidic alctuiesc structura primar a polipeptidului (proteinei)
0ec)ena aminoacizilor dintr"o protein reprezint elementul esenial al structurii sale*
deoarece- este unic% constant% specific fiecrei proteine /i este determinat genetic 0ec)ena
aminoacizilor determin func$ia proteinei i antigenicitatea ei deoarece prin interaciunile dintre
aminoacizii situai +n diferite situsuri din structura polipeptidului se realizeaz structurile
spaiale* tridimensionale* ce determin acti)itatea sa #iologic
9rin legturi de Bidrogen +ntre aminoacizii +n)ecinai se formeaz* +n anumite poriuniCzone ale proteinei
structuri secundare de tip alfa (+n elice) sau #eta (foaie pliat) (figura F6) 9rin interaciuni +ntre aminoacizi
din diferite poziii ale catenei aceasta capt spontan o configuraie tridimensional* spaial* ce reprezint
structura ter$iar a polipeptidului (figura FO) ;nele proteine au dou sau mai multe catene identice sau
diferite* ce formeaz singure sau +mpreun cu alte molecule neproteice complexe macromoleculare (structura
cuaternar) <onfigura$ia spa$ial caracteristic a unei proteine determin activitatea ei func$ional
G
$e
notat c proteinele funcionale nu sunt totdeauna sintetizate +n forma lor acti) .le sufer modificri post"
translaionale care determin activarea proteinei
!minoacizii care interacioneaz +ntre ei pentru a forma structura tridimensional* #iologic
acti)* sau care alctuiesc a/a numitele 'situsuri funcionale ale proteinei sunt deose#it de
importani2 +nlocuirea lor* +n urma unor mutaii* duce la o protein anormal (cu o structur
spaial modificat) /i la pierderea acti)itii proteinei ?nlocuirea altor aminoacizi* neimplicai +n
legturile spaiale sau +n situsul funcional este mai puin important /i poate produce variante
proteice normale
3. GENELE STRUCTURALE DETERMIN SECVENA AMINOACIZILOR
N PROTEIN
4enele care codific proteine conin mesa>ul codificat necesar pentru asam#larea
specific (+ntr"o anumit ordine) a aminoacizilor +n protein !ceast relaie a fost elegant
demonstrat prin studiul mutaiilor care produc diferite tipuri de Bemoglo#in anormal /i* +n
special* prin cercetarea drepanocitozei sau sicLlemiei* o anemie Bemolitic cu Bematii +n form
de secer ('falciforme')
*repanocito'a 0sic1lemia2 este o #oal genetic* cu transmitere autosomal recesi)*
frec)ent +n populaia originar din !frica tropical (1-5II nn)* precum /i +n #azinul
Mediteranean* 3rientul Mi>lociu /i <ndia !ceast distri#uie geografic caracteristic se explic
prin a)anta>ul selecti) fa de malarie pe care +l au Beterozigoii snto/i (1 - 55 nn) prote>ai de
formele gra)e de paludism
Eoala se manifest la Bomozigoi (a5a) printr"o anemie hemolitic sever* produs prin
distrugerea Bematiilor cu form anormal "&n secer" (figura F8a)2 aceste Bematii se formeaz
8
9rin di)erse tratamente fizico"cBimice legturile dintre diferii aminoacizi ce formeaz structura teriar se pot rupe
/i proteina 'denaturat' +/i pierde acti)itatea #iologic
10
+n condiiile scderii tensiunii (concentraiei) oxigenului +n anumite teritorii capilare 7ormele
acute se +nsoesc de dureri +n mini C picioare sau alte organe (splin* mezenter* rinicBi etc)*
produse de microinfarcte prin ocluzia capilarelor de ctre Bematiile +n secer* care au o
deforma#ilitate redus Hemoli(a se asociaz cu splenomegalie /i infarcte splenice recurente care
determin pierderea funciei ei imune /i cu suscepti#ilitatea crescut la unele infecii #acteriene
(pulmonare)* cauza principal de deces 8eterozigoii (N5a) prezint 'trstura siclemic'2
o#i/nuit ei sunt snto/i* dar scderea #rutal a concentraiei 3
5
(altitudine) poate produce prin
'sicLlizarea' Bematiilor* o anemie Bemolitic acut /i infarcte splenice
?n 1PFP* 9auling /i cola#oratorii si au demonstrat existena unei anomalii a
Bemoglo#inei din eritrocitele '+n secer'* numit 8#0* care se deose#e/te electroforetic de 8#!
(normal) deoarece* datorit unei mutaii genice* moleculele lor de #eta"glo#in sunt diferite
(figura F8#) &ercettorii au sta#ilit c la persoanele Beterozigote (N5a)* cu trstur sicLlemic*
exist un amestec de 8#! /i 8#0 ;lterior (1P56)* <ngram a descoperit c 8#0 are unul din cei
1F6 de aminoacizi ai catenei #eta* /i anume cel din poziia 6 +nlocuit cu un alt aminoacid (#eta 6
acid glutamic()alin) !ceast unic scBim#are a moleculei de 8# produce modificarea formei
eritrocitului /i toate manifestrile clinice ale #olii 9auling /i <ngram au demonstrat astfel pentru
prima dat c muta$ia unei gene strcturale poate produce o substitu$ie a unui aminoacid &n
proteina corespunztoare /i au postulat c drepanocitoza sau sicLlemia reprezint prototipul de
,oal$ molecular$'
$up 1PO5* identificarea* localizarea /i sec)enarea genei normale pentru #eta"glo#in /i
a alelei sale mutante (U
0
) au sta#ilit cu precizie tipul de mutaie- +n codonul 6 (4!4) al genei
#eta"glo#inei* adenina este +nlocuit cu timina* formnd codonul 4@4 care semnific )alina <at
deci* c modificarea unui singur nucleotid din cele trei miliarde de nucleotide care alctuiesc
genomul uman este cauza modificrilor patologice o#ser)ate la #olna)ii cu drepanocitoz
.xplicaia patogenic a acestei #oli moleculare este acum simpl (figura F8c)- moleculele de
8#0 coninnd su#unitatea #eta mutant fixeaz +n mod normal 3
5
dar +n sngele deoxigenat ele
sunt relati) insolu#ile* comparati) cu 8#! normal2 aceast proprietate fizic st la #aza
fenomenului de sicLlizare ?n condiiile scderii concentraiei de oxigen molecula de 8#0 agreg
/i formeaz polimeri a)nd forma unor fi#re care distorsioneaz eritrocitul /i"l fac mai puin
deforma#il ca +n mod normal2 el nu mai este capa#il s tra)erseze prin capilarele fine (cu un
diametru inferior celui al Bematiei)* #locBeaz fluxul sanguin /i produce Bipoxie local (micro"
infarcte dureroase) .ritrocitele +n secer se Bemolizeaz (+n splin) genernd o anemie cronic
0tudii ulterioare au e)ideniat numeroase alte tipuri de Bemoglo#inopatii ereditare +n care
scBim#area structurii 8# era rezultatul su#stituiei unui singur aminoacid $e exemplu* 8#&
rezult printr"o su#stituie nucleotidic +n acela/i codon 6 al genei #et"glo#inei* care duce la
+nlocuirea acidului glutamic cu lizina ! de)enit astfel e)ident /i unanim acceptat c genele
determin sec)ena primar a aminoacizilor dintr"o protein specific
$escrierea ampl a defectului molecular +n drepanocitoz permite cte)a concluzii
importante pri)ind concepia actual despre funcia genei-
(1) 4enele care codific proteine conin (su# forma unei sec)ene de nucleotide) informaia
genetic necesar pentru asamblarea specific (&ntr3o anumit ordine) a aminoaci(ilor +ntr"o
protein specific2 mutaiile genice produc o scBim#are (su#stituie) a sec)enei unuiCunor
codon(i) /i secundar o modificare a structurii proteinei* care poate genera o boal molecular2
(5) ?n aciunea genei se pot identifica trei categorii de efecte corelate- efectul primar* la ni)el
molecular (protein)2 efectul secundar* la ni)el celular /i efectele ter$iare multiple (pleiotropie)*
la ni)el fenotipic* de organ C organism (semne /i simptome) ?n practica medical se recunosc
clinic sau paraclinic efectele teriare ale genei mutante adic #oala ereditar cu di)ersele sale
manifestri2 efectele primare (proteina anormal) nu sunt cunoscute +n multe #oli monogenice
dar teBnicile recente de analiz a structurii /i funciei genei )or rezol)a enigma acestor 'pete
al#e'2
11
(6) Aa Beterozigoi (N5a) se manifest (exprim) la ni)el molecular am#ele gene /i
persoanele Beterozigote cu trstura sicLlemic (genotip !C0) produc /i 8#! /i 8#0 ,ezult c
no$iunile de dominant i recesiv NI sunt valabile la nivel molecular% cu numai la nivel fenotipic
(de organism)2
(F) .xpresia am#elor gene alele la Beterozigoi permite identificarea lor* prin studiul efectelor
primare /i uneori secundare (la ni)el celular) Depistarea heteo(igo$ilor snto/i purttori de
gen mutant are o deose#it )aloare practic +n pre)enirea na/terii unor Bomozigoi #olna)i (doi
prini Beterozigoi* N5a* au un risc de 55N de a a)ea un copil a5a Bomozigot* #olna))
(5) &unoa/terea modificrii nucleotidice +n gena mutant care produce o #oal molecular
permite* prin metodele actuale de analiz a !$%* diagnosticul genotipic precoce al #olii* fie
prenatal fie postnatal* +n stadiile asimptomatice 0e descBide* de asemenea* perspecti)ele unei
terapii genice* prin inseria unei gene normale pentru #eta"glo#in +n celulele unui pacient la care
#oala este consecina mutaiei acestei gene
4. RELAIA !O GEN " UN POLIPEPTID! ESTE MULT MAI COMPLE#
.)oluia cuno/tinelor despre structura molecular a genei* #azat pe posi#ilitatea
analizei ei directe* a e)ideniat o serie de fenomene care se a#at de la relaia fundamental 'o
gen (de structur) ( un polipeptid' ?n esen este )or#a de situaiile +n care o gen poate
produce mai multe polipeptide asemnatoare sau diferite sau in)ers* mai multe gene distincte*
situate uneori la distan una de alta 3 astfel de gen particip la sinteza unui singur polipeptid
sau a unei proteine multipeptidice
9rimul fenomen* /o gen$ 3 mai multe polipeptide/* se realizeaz prin mecanisme
di)erse ce inter)in +n diferite etape ale expresiei genei (transcripie* maturare* translaie*
procesarea postranslaional a proteinelor) 7r a intra +n detalii )om preciza c cel mai frec)ent
mecanism este matisarea alternativ $up cum /tim de>a (capitolul 6E1)* marea ma>oritate a
genelor umane au o structur discontinu* fiind alctuite din exoni /i introni2 +n procesul de
formare a !,%m matur din pre!,%m* intronii sunt excizai iar exonii sunt unii C legai unul de
altul (matisare) ;nele celule 'decid' s foloseasc +ns numai anumii exoni si astfel dintr"un
mesager primar unic se pot produce (printr"o 'selecie' a exonilor /i 'matisare alternati)')* +n
acela/i esut sau +n esuturi diferite* fie proteine +nrudite* cu funcie analog G numite isoforme "
(de ex- cele patru tipuri de #az ale mielinei* troponinei &* distrofinei etc) sau cBiar proteine
complet diferite ca funcie (figura FP) $e exemplu* gena calcitoninei produce un transcript
primar din care +n celulele & ale tiroidei se formeaz !,%m pentru calcitonin iar +n neuroni
(creier)* printr"o maturare diferit* se formeaz un mesager pentru un 'polipeptid +nnrudit' cu
funcie de tip neuromeditor 7enomenul de matisare alternati) a >ucat* foarte pro#a#il* un rol
important +n e)oluie deoarece prin rearan>area diferitelor segmente codante (exoni) din structura
genei s"au produs proteine cu funcii noi
!/sa cum )om )edea ()ezi capitolul FE) exist /i alte mecanisme prin care o gen (ca
unitate de transcripie) poate produce o )arietate de produse !lturi de matisarea alternati)
)om mai meniona acum folosirea alternativ a unuia dintre promotorii multipli prin care
rezult isoforme cu diferite proprieti- expresia +n diferite perioade ontogenetice* specificitatea
tisular* localizarea su#celular* capacitatea funcional ;n alt mecanism este clivarea
posttransla$ional prin care dintr"un singur polipeptid gigant se produc* prin secionarea* mai
multe polipeptide mici2 acest mecanism se +ntlne/te +n cazul sintezei unor Bormoni dintr"un
proBormon (de ex* pro3opiomelanocortina din care rezult !&@8* VM08* WM08* VA98* U"
endorfina)
!l doilea fenomen* /mai multe gene3un polipeptid/ se o#ser) +n cazul
polipeptidelor alctuite din regiuni diferite $e ex* lanurile u/oare (A) /i grele (8) ale
imunoglo#inelor prezint o regiune )aria#il (H) " care alctuie/te situsul de recunoa/tere si
12
fixare al antigenului " /i o regiune constant (&)2 ele sunt specificate de gene distincte* situate
la distan pe acela/i cromosom ?n limfocitele E care produc anticorpi se produce o rearan>are
(recom#inare somatic) a genomului ()ezi capitolul 15) /i o anumit gen H este asociat cu o
gena &* formnd o sec)en complet funcional ce codific lanul respecti) al imunoglo#inei
(figura F1I)
5. INTERACIUNILE GENICE N CONCEPIA ACTUAL
&oncepia clasic despre funcia genei postuleaz c expresia fenotipic a unei gene este
influenat de alte gene alele sau nealele* precum /i de aciunea mediului !ceste interaciuni
sunt mult mai e)idente la ni)el molecular
+nterac$iunile alelice exprimate prin relaiile de dominan"recesi)itate dintre genele alele
sunt )ala#ile la ni)el fenotipic* influennd expresia unui caracter Aa ni)el molecular se
manifest de o#icei am#ele gene alele* producnd o protein normal sau anormal* +n cazul
genelor mutante ;neori anumite gene nu au nici un efect primar (gene amorfe C silenioase) $e
ex* gena I a sistemului de grup sanguin !EI sau genele mutante recesi)e pentru
agamaglo#ulinemie sau afi#rinogenemie Aa Beterozigoii N5a* gena mutant a poate codifica o
protein (enzim) nefuncional2 cantitatea total de protein C enzim normal se reduce la
1umtate fiind totu/i suficient* +n condiii #azale* pentru a asigura o funcie normal /i ca atare
indi)idul s fie (aparent) sntos ()ezi trstura sicLlemic)
+nterac$iunile nealelice /i +n special fenomenul de epista'ie pot fi demonstrate mai
con)ingtor la ni)el molecular* prin aciunea coordonat a mai multor gene ce inter)in +n
producerea unui compus final ;n frumos exemplu +l reprezint formarea antigenelor !E8 pe
suprafaa Bematiilor /i +n secreii
!ntigenele !* E /i 8 sunt macromolecule complexe prezente su# form alcool"solu#il
(glicosfingolipide) pe suprafaa Bematiilor /i Bidrosolu#il (glicoproteine) +n secreii* dar numai
la persoanele 'secretoare' !ntigenele !E8 eritrocitare sunt glicosfingolipide complexe care au
o parte central fixat cu un capt +n mem#rana eritrocitului2 pe acest 'miez' se leag lateral* +n
zona extramem#ranar* mai multe catene glucidice 0pecificitatea antigenic este determinat de
glucidul terminal 7ormarea antigenelor !* E* 8 este determinat de aciunea coordonat a
genelor 8* 0e /i !*E*3
P
care* prin intermediul unor enzime (glicoziltransferaze)* fixeaz diferite
tipuri de glucide la axul sfingolipidic sau glicoproteic (figura F11)
'ena dominant H codific o enzim (fucoziltransferaz) care acioneaz asupra unui
precursor /i adaug o molecul de fucoz* formnd su#stana 8
'enele dominante A i 6 acioneaz asupra su#stanei 8 /i* prin intermediul unor transferaze
specifice* fixeaz o molecul de acetilgalactozamin (antigenul !) /i* respecti)* galactoz
(antigenul E) 'ena recesiv 0 este inacti)* nu modific su#stana 8* care se )a regsi ca
atare la persoanele de grup sanguin I
0"a +nregistrat /i situaia foarte rar de Bomozigoi (h5h) pentru gena 8 la care precursorul nu
este transformat +n su#stan 82 genele ! sau E* de/i exist +n stare normal nu au efect /i
fenotipul (numit Eom#aS) corespunde grupei I (dar fr su#stan 8)
Aa secretori* alturi de gena H5 * acioneaz /i gena dominant ?e5 care )a determina sinteza
/i excreia antigenelor !* E /i 82 la nesecretori (se5se) efectul genei 8 este 'anulat' prin
aciunea genelor se5se iar precursorul rmne netransformat 4ena ?e5 are deci aciune
epistatic asupra genei 8
.fectul mediului asupra expresiei genelor se manifest +n regla>ul cantitati) (/i uneori
calitati)) al sintezei proteinelor
9
!naliza molecular a genelor !* E* I a fot recent realizat ?ntre alelele ! /i E exist o diferen de sec)en de
numai patru nucleotide !lela I prezint o deleie a unui nucleotid care (fiind o mutaie 'framesBift') determin
pierderea acti)itii transferazice
13
C. MECANISMELE MOLECULARE ALE E#PRESIEI
GENICE
.xpresia informaiei genetice se realizeaz +n toate celulele pe #aza unui flu2
informa$ional% unidirec$ional i universal
,0
* care se conformeaz dogmei centrale a geneticii-
A*4 3 A"4m 3 polipeptid 0protein$2 (figura F15) 9rima etap a expresiei informaiei
ereditare este sinteza !,% (cu a>utorul unei !,% polimeraze !$%"dependente
,,
)* prin
copierea informaiei din !$%2 aceast etap are loc +n nucleu i mitocondrii /i se nume/te
transcripie. ! doua etap este sinteza unui polipetid* prin decodificarea ("traducerea")
informaiei !,%m +ntr"o sec)en caracteristic de aminoacizi2 acest proces are loc +n
citoplasm* pe ribosomi* /i este denumit translaie. ,ealizarea acestor etape se #azeaz pe
principiul coliniarit$ii- o sec)en liniar de nucleotide din !$% este copiat
(complementar) +ntr"o sec)en liniar de nucleotide +n !,%2 apoi ea este decodificat (prin
!citire +n grupe de trei nucleotide numite codoni) +ntr"o sec)en* de asemenea* liniar de
aminoacizi ce formeaz un polipeptid
?nainte de a descrie mecanismele moleculare ale expresiei genice sunt utile
urmtoarele precizri-
Numai o mic propor$ie din ADN al celulelor eucariote este e2primat i determin o
protein .ste )or#a de !$% genic codant ()ezi capitolul 5&56)* iar din acesta diferite
tipuri de celule difereniate transcriu numai anumite segmente de !$% (unit$i de
transcrip$ie)
?ntregul proces al exprimrii informaiei genetice este supus unui riguros control care
regleaz tipul de celul +n care se produce sinteza proteinei* precum /i momentul%
cantitatea i ritmul acestui proces
.rorile mecanismelor moleculare ale exprimrii informaiei genetice )or genera* firesc* o
serie de #oli2 descifrarea acestor mecanisme )a cre/te posi#ilitile de diagnostic /i
tratament
1. TRANSCRIPIA
11 $!@. 4.%.,!A.
Transcipia este procesul de copiere a informaiei genetice a unei gene* su# form
codificat% complementar /i antiparalel% +ntr"o molecula de !,% !cest proces are loc +n
nucleu
A"4 este format din ri#onucleotide* cu structura general 5%-"-46n * +n care % X acid fosforic* " X
ri#oza
15
iar 4 X #aza azotat (Adenina* !uanina* Citozina /i 7 racilul ) 9rin polimerizarea
ri#onucelotidelor (+n sensul 5Y6Y) rezult o monocaten* de o#icei scurt 0e deose#esc mai multe tipuri
de !,%* cu funcii diferite- !,%m sau mesager este codant deoarece prin translaie )a determina sinteza
unui polipeptid2 !,%r sau ri#osomal (mai multe tipuri) )a participa la formarea ri#osomilor* iar !,%t
sau de transfer inter)ine direct +n transportul aminoacizilor la ri#osomi2 alte tipuri sunt !,%sn /i !,%sno
(ce inter)in +n procesarea intronilor sau a !,%r) <n cele ce urmeaz )om discuta mai ales transcripia
!,%m realizat de !,% polimeraza << !$% dependent
9entru a se sintetiza in vivo un !,%m sunt necesare- ADN ca model sau matri$*
enzima ADN polimera( ++* factori de transcrip$ie necesari pentru gBidarea /i acti)area !,%
10
?n realitate fluxul informaional nu este exclusi) unidirecional /i uni)ersal- unele sec)ene de !$%
(retrotransposoni) sunt transcrise +n !,% /i apoi su# aciunea unei transcripta(e in)erse sunt retrocopiate /i
integrate aleatoriu +n !$%2 prin acela/i mecanism unele retro)irusuri (de ex* 8<H) care au ca material genetic
!,% se pot insera +n !$%"ul celulelor eucariote prin retrotranscripie
11
.xist trei tipuri de !,% polimeraza- < " pentru !,%r2 << "pentru pre"!,%m2 <<< " pentru !,%t
12
,i#oza este "o(a" (glucidul) descoperit la '"ocLefeller .nstitut of BiocBemistrS' din %eD KorL
14
polimerazei /i ribonucleotide acti)ate Numai una din cele dou catene ale ADN (JK-K)
este transcris i servete ca "matri$" pentru sinteza unei molecule complementare /i
antiparalele (5Y6Y) de !,%m2 dar aceasta nu este* la diferite gene* aceia/i caten care este
copiat +n lungul moleculei !$%* la diferite gene 0figura F162 !legerea catenei transcrise
depinde +n mare parte de localizarea /i orientarea promotorului% locul unde se fixeaz prin
intermediul factorilor de transcripie* !,% polimeraza
&ele dou catene ale !$%"ului* catena transcris (6Z(5Z) /i catena de referin (5Z(6Z)* au o
nomenclatur diferit !,%m* care se formeaz prin transcripie* )a a)ea aceeai secven$ de
nucleotide (exceptnd +nlocuirea @ cu ;) /i acelai sens (5Y6Y) ca /i catena !$% netranscris moti)
pentru care aceasta se nume/te caten$ sens iar catena transcris este numit adesea antisens
18
. ,aportul
dintre sec)ena /i polaritatea !,%m pe de o parte /i cele dou catene ale !$% pe de alt parte* precum
/i unii termeni prin care se definesc aceste catene sunt prezentai mai >os-
9:...AT!TTAC!AC!T... 8: catena !$% 'sens' (netranscris* de referin)
8:...TACAAT!CT!CA... 9: catena !$% 'antisens' (transcris)

@ranscripie

9:...A7!77AC!AC!7... 8: !,%m
?nainte de a descrie procesul de transcripie este necesar s precizm un element
important ADN este identic &n toate celulele somatice (rezultate prin mitoze succesi)e din
celula zigot)2 diferen$ierea lor structural /i funcional implic expresia anumitor gene
specifice de esut* care funcioneaz +mpreun cu genele constituti)e (!domestice sau
mena1ere de la !houseeeping genes deoarece sunt acti)e +n toate celulele) ce controleaz
meta#olismul celular ()ezi capitolul 6E6) $e aceea* expresia genelor specific tisulare
implic acti#area selecti#$ a acestor gene (prin inter)enia unor molecule specific tisulare)*
recunoa-terea lor de ctre !,% polimeraz /i modularea e&presiei lor ca moment* cantitate
/i ritm 7r a intra +n detalii* )om preciza c aceste procese se realizeaz prin-
(1) realizarea unei configura$ii !deschise active a cromatinei +n anumite teritorii prin
relaxarea structurii sale (!decondensare) /i acetilarea Bistonelor nucleosomale ()ezi
capitolul 5$56)2
(2) inter)enia sec)enelor sau elementelor cis3reglatoare din regiunea 5Z situat +n
amonte de zona central* transcris* a genei- promotorul (cu casetele @!@! sau 4& /i &!!@)
reprezint semnalul de start al transcripiei* ce sta#ile/te locali(area i direc$ia de aciune a
!,% polimerazei2 sec)enele specifice de esut2 acti)atorii etc ()ezi structura genei* capitolul
6E15) @oate aceste elemente sunt inta unor proteine trans3reglatoare numite generic
factori de transcripie (@7)2 fixarea lor este determinant att pentru demara>ul transcripiei
ct /i pentru intensitatea ei ;iecare gen posed o combina$ie particular de elemente cis3
reglatoare (figura F1F)
9rocesul de transcripie la eucariote se desfsoar +n dou mari etape* determinate de
structura 'discontinu' ('fragmentat') a genelor eucariote !cestea sunt-
formarea ADN mesager precursor (pre"!,%m) sau transcriptul primar
1F
* prin transcripia
integral a genei (exoni /i introni)2
maturarea pre3ADNm% printr"o serie de modificri din care rezult !,%m matur* ce )a
trece +n citoplasm
15 73,M!,.! !,%m 9,.&;,03,
7ormarea pre"!,%m +ncepe prin decondensarea zonei din !$% care conine gena
sau genele ce )or fi transcrise !cest proces implic inter)enia unor factori de transcripie
13
,eferirile la structura genei se fac +ntotdeauna la catena sens (de ex* secven$ele reglatoare de la captul -K al
genei se refer la sec)enele situate la captul 5Y al catenei sens /i nu al catenei transcris* unde de fapt ele exist
/i acioneaz [[[)
14
Moleculele de transcript primar au fost denumite iniial ADN nuclear heterogen (hnADN)4
15
de clas$ . (@7 <)* modificarea cBimic a Bistonelor (acetilare* deplasarea 81 etc) care va
reduce gradul de compactare a filamentelor cu nucleosomi /i deplasarea (printr"un mecanism
+nc necunoscut) a nucleosomilor din zona de !$% transcris +ntr"un anumit moment
7ormarea pre"!,%m se realizeaz +n trei etape
(1) +ni$ierea transcrip$iei4 9rin con)enie primul nucleotid din !$% cu care se +ncepe
transcripia reprezint 'situsul de iniiere al transcripiei' (0<@ sau <%,)
15
/i este numit =1
iar nucleotidul care +l precede "1 9rimul 'pas' al transcripiei este fixarea A"4 polimera'ei
+n regiunea promotor, situat spre captul 5Y al genei% +n amonte de 0<@ ?n aceast regiune*
de circa 1II p#* se gsesc sec)ene nucleotidice speciale* identice la ma>oritatea genelor
(sec)ene 'consensus')* numite @!@! #ox* &&!!@ #ox /i 4& #ox @re#uie spus foarte clar
c ADN polimera(a nu poate recunoate direct promotorul i nici nu poate ini$ia singur
transcrip$ia 9entru aceasta sunt necesari o serie de factori de transcripie (@7 << sau de clas
<<) care se fixeaz pe sec)enele promotorului pentru a ghida i activa ADN polimera(a
.nzima /i factorii de transcripie formeaz un comple& multiproteic de iniiali'are
1)
. !,%
polimeraza este poziionat /i acti)at pentru a +ncepe transcripia la 0<@* cu nucleotidul =1
(5) Eranscrip$ia propriu(is (elonga$ia)4 $up fixarea !,% polimerazei* cele dou catene ale
!$% sunt separate (prin aciunea @7 <<7* cu aciune de Belicaz)* eli#erndu"se catena
transcris JK-K* care ser)e/te drept matri$ (tipar) pentru a/ezarea secven$ial i
complementar a ri#onucleotidelor acti)ate2 ele )or fi apoi polimerizate de ctre !,%
polimeraz
1O
* formndu"se !,%m2 Eranscrip$ia se face numai &n sensul -KJK (deci !,%m
este antiparalel fa de catena transcris)* fapt ce asigur marea fidelitate a !citirii
informa$iei genetice !,%m se desprinde treptat de pe catena transcris (rmnd fixat
temporar numai la captul 6Z)* iar cele dou catene ale !$% se reunesc treptat* su# aciunea
unei topoisomeraze* /i refac du#lul Belix @re#uie su#liniat un fapt important- +n molecula de
!,%m precursor care se formeaz " numit /i transcriptul primar
18
" sunt copia$i at9t e2onii
c9t i intronii4
(6) Eerminarea transcrip$iei se face cnd !,% polimeraza +ntlne/te situsul de terminare a
transcrip$iei8 aici se afl sec)ena !!@!!! (citit pe catena netranscris) care semnaleaz
cli)area 6Y a transcriptului primar'2 ea )a corespunde +n pre!,%m sec)enei !!;!!!
0ecionarea !,%m sintetizat are loc (su# aciunea unei nucleaze) la 15"6I nucleotide +n a)al
de sec)ena !!;!!! din !,%* +n dreptul 'situsului de poliadenilare/.
@ranscripia unei gene poate fi realizat de mai multe molecule de !,% polimeraz*
formndu"se mai multe copii de !,%m ce conin aceea/i informaie genetic (aceast
"amplificare" )a cre/te considera#il +n cursul translaiei /i astfel o gen )a determina mii de
molecule proteice identice)
16 M!@;,!,.! !,%m 9,.&;,03,
Maturarea nuclear a pre"!,%m cuprinde dou procese distincte* destinate s fac
!,%m mai 'disponi#il /i mai util' translaiei (figura F15)
a. Modificarea e&tremit$ilor A"4m determin cre/terea stabilit$ii sale (protecie
la degradarea de ctre endonucleaze) si faciliteaz transportul +n citoplasm* recunoaterea /i
fi2area sa la su#unitatea FI0 ri#osomal
Aa captul -K se adaug* la primul nucleotid al transcriptului primar* o molecul de O"metil"
guanozin* ce formeaz o structur special* numit +n l englez "cap" (bonet)2
15
3rice a#atere de la '0<@' )a determina sinteza unui mesager diferit de cel normal
16
@7 <<$ se fixeaz pe sec)ena @!@! iar @7 <<E /i . fixeaz !,% polimeraza2 complexul este sta#ilizat de @7
<<!2 la ace/tia se adaug @7 <<7* cu acti)itate de helica(% care desface cele dou catene ale !$%
17
!,% polimeraza se deplaseaz ca 'un cursor pe un fermoar'
18
Moleculele de pre"m !,% sunt cunoscute /i su# numele de '!,% BeterogenY (Bn!,%)
16
Aa e2tremitatea JK se adaug
1P
o serie de 5I"5II de nucleotide cu adenin* formnd o
!coad poliadenilic !ceast operaie de poliadenilare este caracteristic !,%m (exist
o singur excepie- !,%m pentru Bistone nu este poliadenilat)
,! %rocesarea A"4 precursor. !/a cum am precizat* transcriptul primar !,%
conine sec)ene complementare cu +ntreaga regiune transcris din gen (zona central sau
cadrul de lectur) ce conine exoni (regiuni e2primate* codante) /i introni (regiuni
intercalare* necodante) $up sintez* transcriptul !,% primar sufer o procesare complex
ce const +n decuparea precis /i eliminarea !,% intronic urmat de reunirea5legarea 'cap
la cap' a !,% exonic* care )a forma A"4m matur* alctuit dintr"o serie continu /i
contigu de exoni (cine)a spunea foarte plastic c +n aceast operaie "se separ gr9ul de
neghin")4 !ceste fenomene sunt denumite "splicing" +n lim#a englez* "epissage" +n lim#a
francez2 termenii corespund cu)ntului romnesc "matisare"* termen teBnic care se refer la
"&ndirea a doua capete"4 C2ci(ia i reunirea sunt operaii foarte delicate care tre#uie s fie
deose#it de precise- o eroare de decupare cu un singur nucleotid modific 'cadrul de lectur'
/i* dup translaie* )a produce o protein anormal
9rocesul este dependent de existena unor sec)ene nucleotidice"semnal situate la
grania exoni"introni- 9;!T(4; +n !,%) sau situs donor /i 6ZA! sau situs acceptor2 o alt
sec)en important este !branch site (ce poate fi tradus ca situs de branare% de legtur)*
ce conine nucleotidul A* situat foarte aproape de captul 6Z al intronului Mecanismul de
decupare (figura F16) se deruleaz +n trei etape- (1) secionare la >onciunea 5Z4;2 (5)
ata/area nucleotidului terminal 4 la nucleotidul ! al situsului de #ran/are /i formarea unei
lasouC#ucl2 (6) secionarea intronului la >onciunea 6Z!4* +ndeprtarea lui /i unirea
segmentelor de !,% exonic ,eaciile sunt mediate de un complex !,%"proteine
(!spliceosome) ce cuprinde cinci tipuri dr !,%sn (small nuclear)* numite ;1";6* dotate
cu acti)itate enzimatic (ribo(ime) /i peste 5I de proteine
3rdinea exonilor +n !$% /i transcriptul primar este pstrat +n !,%m matur $ar
exist o anumit flexi#ilitate +n utilizarea exonilor* +n sensul c (su# aciunea unor factori +nc
necunoscui) +n celule diferite* )or fi reinui +n !,%m matur numai o parte din exoni* alii
putnd fi +ndeprtai o dat cu intronii !cest proces denumit matisarea alternativ a exonilor
(figura FP) explic producerea +n esuturi diferite a unor mesageri /i deci a unor proteine
diferite (asemntoare dar nu identice) pe #aza informaiei unei singure gene 0)ezi capitolul
FEF)
<. T"A4S=A>.A
! doua etap a expresiei genice este translaia
<?
- procesul de decodificare a
informaiei genetice din m!,% care permite aran1area secven$ial specific a amino acizilor
/i polimerizarea lor +ntr"o caten polipeptidic
9rocesul de translaie necesit* firesc* 'un dicionar' reprezentat de codul genetic /i un
aparat de translaie care tre#uie s includ* printre alte componente* /i 'traductorul'*
reprezentat de moleculele de !,% de transfer (!,%t)
51 &3$;A 4.%.@<&
<nformaia din structura unei gene este scris su# forma unei anumite secven$e a
celor patru tipuri de nucleotide- !*4*@*& .a este copiat (transcris) complementar
(;*&*!*4) +n !,%m /i apoi tradus +ntr"o anumit sec)en de aminoacizi* care )or forma
19
9rin aciunea unei poli"! polimeraze
20
$enumirea de transla$ie semnific traducerea informaiei scris +n 'lim#a>ul' nucleotidelor +n !,%m +n
'lim#a>ul' de aminoacizi al peptidelor
17
o caten polipeptidic2 aceast transla$ie se face cu a>utorul unui fel de dicionar #iling)
care este codul genetic
&odul genetic reprezint "un sistem de coresponden$e" +ntre o anumit sec)en de trei
nucleotide numit codon /i un anumit aminoacid 0ta#elul F52. &u cele patru !litereale
alfabetului genetic se pot scrie !cuvinte alctuite din trei litere2 gena ar fi deci !o fra(
format dintr"o +n/iruire de codoni* ce determin o anumit sec)en a aminoacizilor +ntr"un
polipeptid $escifrarea
51
codului genetic (1P65) a fost o descoperire extraordinar* "mai
fantastic dec9t descifrarea hieroglifelor"% deoarece a marcat decisi) de#utul erei #iologiei
moleculare2 de aceea :Borana /i %iren#erg au primit premiul %o#el (1P68)
Ta,elul 4.< Codul genetic
PRIMA
BAZ
A DOUA BAZ A
TREIA
BAZ
U C A G
U
UUU phe UCU ser UAU tyr UGU cys U
UUC phe UCC ser UAC tyr UGC cys C
UUA leu UCA ser UAA $%&' UGA* $%&' A
UUG leu UCG ser CAU $%&' UGG trp G
C
CUU leu CCU pro CAG his CGU arg U
CUG leu CCC pro CAA his CGC arg C
CUA leu CCA pro CAG gln CGA arg A
CUG leu CCG pro CAG gln CGG arg G
A
AUU ile ACU thr AAU asn AGU ser U
AUC ile ACC thr AAC asn AGC ser C
AUA ile ACA thr AAA lys AGA arg A
AUG met ACG thr AAG lys AGG arg G
G
GUU val GCU ala GAU asp GGU gly U
GUC val GCC ala GAC asp GGC gly C
GUA val GCA ala GAA glu GGA gly A
GUG val GCG ala GAG glu GGG gly G
A()*+,*), '*-%). /0,-&/1,2,
ala (A) alanina gly (G) glicina pro (!) prolina
arg (R) arginina his (H) histi"ina ser (#) serina
asn (N) asparagina ile ($) isoleucina thr (%) treonina
asp (&) aci"ul aspartic leu (') leucina trp (() tripto)anul
cys (C) cisteina lys (*) li+ina tyr (,) tiro+ina
gln (-) glutamina met (.) metionina val (/) valina
glu (0) aci"ul glutamic phe (1) )enilalanina 2 stop
* 3n anumite con"i4ii UGA poate speci)ica selenocisteina (5al 26lea aminoaci")
7r a intra +n detalii )om meniona succint proprietile codului genetic
(1) <odul genetic este triplet pentru moti)ul logic c 6 este prima putere a lui F (cele patru
tipuri de nucleotide) care formeaz 6F de com#inaii* suficiente pentru cei 5I de amino acizi
care se gsesc +n structura proteinelor
(5) <odul genetic are un codon ini$iator (AI') i trei codoni stop (;!!* ;!4* ;4!)*
)erita#ile semne de punctuaie cu care se +ncepe /i se termin sinteza polipeptidului &odonii
stop sunt numii /i "codoni nonsens" deoarece nu semnific nici un aminoacid &eilali 61 de
codoni sunt "codoni sens" ce semnific 5I de amino acizi (ta#elul F1)
21
&odul genetic a fost descifrat experimental folosind drept !,%m polinucelotide sintetice cu o sec)en
cunoscut /i analiznd sec)ena de aminoacizi a proteinei sintetizate artificial $e exemplu* !,%m sintetic
poliuracil a produs un polipeptid alctuit exclusi) din fenilalanin2 astfel s"a sta#ilit c tripletul ;;; codific
fenilalanin
18
(6) <odul genetic este degenerat (redundant) deoarece mai muli codoni semnific un
acela/i amino acid (de aceea ei se numesc "codoni sinonimi") .xceptnd metionina /i
triptofanul* codificai de un singur codon* ceilali 18 amino acizi sunt codificai de 5"6 codoni
(deseori deose#ii prin al treilea nucleotid) $egenerescena nu s"a sta#ilit la +ntmplare
deoarece aminoacizii cei mai reprezentai +n proteine sunt cei care posed cei mai muli
codoni &u toat conotaia sa peiorati)* caracterul degenerat al codului genetic este un
avanta1 pentru celul deoarece unele mutaii genice ce produc codoni sinonimi nu modific
proteina codificat de gen (mutaii silen$ioase sau iso3semantice)4 0e poate afirma c
degenerescena codului genetic este un )erita#il sistem de protec$ie contra efectelor
muta$iilor
(F) <odul genetic este nesuperpo(abil (deoarece codonii )ecini nu au un nucleotid comun) i
fr virgule (+ntruct codonii sunt adiaceni* neseparai printr"un nucleotid cu rol de
')irgul')2 codonii sunt definii prin simpla grupare de c9te trei
55
$ac* printr"o mutaie* +ntr"
unul dintre codon se suprim (deleie) sau se inser (adiie) 1"5 nucleotide (sau un alt numr
care nu este un multiplu de trei) se produce o decalare a cadrului de lectur al genei*
rezultnd (printr"o nou grupare cte trei* ali codoni2 +n proteina sintetizat se modific to$i
aminoacizii +ncepnd cu locul +n care s"a produs mutaia (numit !frame3shift)
(5) <odul genetic este lipsit de ambiguitate +ntruct un codon semnific +ntotdeauna un
anumit aminoacid* totdeauna acela/i
(6) <odul genetic este universal * acela/i la toate organismele* #acterie* plant* animal sau
om @otu/i codul genetic mitocondrial are cte)a mici diferene fa de cel nuclear (codoni cu
sensuri diferite)2 unele au fost gsite /i la le)uri* paramecii /i la unele arBeo#acterii &u toate
aceste foarte mici excepii caracterul uni)ersal al codului genetic este e)ident !cest lucru
este foarte important +n 'ingineria genetic' deoarece #acteriile recom#inante* +n care s"a
introdus o gen uman* fa#ric proteina uman folosind codul genetic #acterian care* +n fond*
este acela/i ca /i la om
?nainte de a +ncBeia* )om su#linia importana cunoa/terii codului genetic /i pentru
+nelegerea mecanismului /i consecinelor unor mutaii genice (punctiforme) ce produc
+nlocuirea sau inseriaCadiia unui nucleotid (ta#elul F6) ()ezi capitolul 6E5)
Ta,elul 4.8. Consecinele unor mutaii genice prin su,stituia, inseria sau adiia
unui nucleotid (ntr-un codon
Su,stituia unui nucleotid
!;4 ;4; !!! &&!
Met cis lSs pro
Mutaie silenioas$ Mutaie missens
(cu sens gre/it)
Mutaie nonsens
!;4 ;4C !!! &&!
Met cis lSs pro
!;4 ;4! !!! &&!
Met trp lSs pro
!;4 ;4A !!! &&!
Met Stop
.nseria sau deleia unui nucleotid
!;4 ;;; !!! 4;; ;&4
Met G 9Be G ASs GHal G 0er
Mutaii frames"ift
(mutaii cu decalarea cadrului)
!;4 ;;; !!! !4; ;;& 4
MetG9Be G 4lu G 0er G 9Be
!;4 ;;; !!-4 ;;; &4!
Met G 9Be G ASs G AeuG !rg
55 !9!,!@;A $. @,!%0A!J<.
22
3rice deleie sau adiie a unui nucleotid )a scBim#a 'cadrul de lectur al genei' deci practic toi codonii
(formai prin gruparea cte trei) ce urmeaz dup locul deleieiCadiiei nucleotidice
19
!paratul de translaie este alctuit din numeroase componente- !,%m* ri#osomii*
!,%t* aminoacizi* factori de iniiere* factori de elongaie* enzime* surse de energie etc ?n
sintez* !,%m furnizeaz informaia (sec)ena de codoni) care )a fi translat +ntr"o sec)en
de amino acizi +n protein2 el se fixeaz pe ri#osom (o particul alctuit din !,%r /i
proteine) /i care reprezint platforma de sintez a polipeptidului !,%t fixeaz un aminoacid
specific /i apoi amplaseaz acest aminoacid +n polipeptid* folosind informaia din !,%m
a2. "i,osomii sunt organite citoplasmatice (descrise de 4eorge .mil 9alade* premiul
%o#el* +n 1POF)* )erita#ile "platforme de asamblare a aminoaci(ilor &n proteine" pe #aza
instruciunilor !,%m ,i#osomii eucariotelor sunt alctuii din dou su#uniti inegale*
\deose#ite prin constanta de sedimentare (0)- FI0 /i 6I0]* care sunt de o#icei disociate /i
li#ere +n citoplasm2 ele se reunesc la +nceputul translaiei pentru a forma ribosomul activ
7iecare su#unitate este alctuit din A"4 ri,osomal /i proteine
56
* care au rol structural /i
funcionalCcatalitic (faciliteaz- fixarea moleculelor de !,%m /i !,%t la ri#osom2 deplasarea
ri#osomului* /a) ,i#osomii prezint patru situsuri func$ionale- pe su#unitatea mic se afl
situsul de fixare al extremitii 5Z a !,%m iar pe su#unitatea mare- situsul 9 (peptidil) /i !
(aminoacil) unde se fixeaz moleculele de !,%t cuplate cu aminoacizii lor specifici* precum
/i situsul de fixare al peptidil"transferazei* enzima ce polimerizeaz aminoacizii +ntr"un
polipeptid ?n procesul de translaie* ri#osomii se deplasea( +n lungul moleculei de !,%m*
spre captul 6Z 9e msura deplasrii* ali ri#osomi pot +ncepe translaia aceleia/i molecule de
!,%m* alctuind +mpreun un poliri,osom
,2. A"4 de transfer 0A"4t2 transport aminoacizii din citoplasm la ri#osomi*
locul sintezei proteice !ici !,%t recunoate codonul din !,%m corespunztor
aminoacidului respecti)* pe care +l poziioneaz +n dreptul acestui codon2 deci !,%t are rolul
de "translator"4
!,%t este un micropolimer de ri#onucleotide (O5"1II nucleotide)* monocatenar* cu o
structur secundar /i teriar '+n trefl' (figura F1O) * relati) identic la toate tipurile de
!,%t .l posed dou situsuri importante2-
extremitatea 6Y38 este terminat prin nucleotidele <<A* iar la poziia 6Z a ri#ozei adeninei
se fixeaz aminoacidul transportat* cu a>utorul unei enzime aminoacil3ADNt3sinteta(a2
anticodonul* un grup de trei nucleotide situat +n #ucla opus extremitii 6Y382 el
recunoa/te* prin complementaritate* codonul din !,%m corespunztor aminoacidului
5F

c2. En'imele -i cofactorii proteici ai translaiei sunt* deasemeeai elemente
importante ?n procesul de translaie sunt implicate amino"acil"!,%t"sintetazele /i peptidil"
transferaza4 Aminoacil-A"4t-sinteta'ele sunt 5I de enzime cu o du#l specificitate-
recunosc fiecare un anumit aminoacid (foarte pro#a#il pe #aza configuraiei sale spaiale)
precum /i !,%t corespunztor ?n acest proces de +ncrcare* mecanismul de recunoa/tere
+ntre o anumit enzim /i !,%t specific a fost recent descifrat- enzima recunoa/te specific fie
anticodonul unor molecule de !,%t fie o perecBe de nucleotide (de exemplu* ;4 pentru
.=alanin) situate spre extremitile terminale 5Y /i 6Y ale !,%t (figura F1O)2 ele formeaz
un )erita#il al doilea cod genetic4 %eptidil-transfera'a catalizeaz formarea legturii
peptidice +ntre doi aminoacizi
23
Aa eucariote su#unitatea mic are un tip de !,%r (180) /i 66 proteine ri#osomale iar cea mare trei tipuri de
!,%r (50* 5*80* 580) /i F5 proteine ri#osomale Moleculele de !,%r sunt codificate de gene prezente +n mii de
copii pe #raele scurte ale cromosomilor acrocentrici* care formeaz 'regiunile organizatoare de nucleoli'
0tructura !,%r /i a proteinelor ri#osomilor la procariote este diferit de cea de la eucariote /i acest lucru are o
importan deose#it deoarece unele amti#iotice (de ex* streptomicina) care acioneaz la ni)elul ri#osomilor
sunt acti)e la #acterii /i fr efect asupra ri#osomilor /i sintezei proteice la om
24
@eoretic ar tre#ui s existe +n celul 61 de molecule diferite de !,%t pentru cei 61 de codoni sens <n realitate
numrul lor este mai mic (^FI) dar superior celor 5I de aminoacizi2 deci un acela/i tip de aminoacid )a fi purtat
de mai muli !,%t specifici (iso"acceptori)* diferii prin anticodonul lor prin al treilea nucleotid2 aceast
flexi#ilitate este denumit +n lim#a englez !"obble (a /o)i)
20
Cofactorii proteici inter)in +n diferite etape ale translaiei .i sunt reprezentai de
factorii de ini$iere (<7 1"6)* factorii de elongaie (.7 1"5) /i un factor de terminare (,7)
<nacti)area lor (prin diferite toxine micro#iene) #locBeaz procesul de translaie /i produce
moartea celular

56 9,3&.0;A $. @,!%0A!J<..
@ranslaia se realizeaz +n trei etape succesi)e- iniierea* elongaia /i terminarea
translaiei 0figura F1822 fiecare etap implic molecule diferite /i necesit energie (furnizat
de !@9 sau 4@9)
.niierea translaiei este o etap complex care* +n esen* )a plasa primul aminoacid
(!!) al proteinei (de la extremitatea sa %8
5
"terminal) +n dreptul codonului iniiator !;4
din !,%m* ce corespunde metioninei* /i )a asam#la +n aceast poziie cele dou su#uniti ce
)or forma ri#osomul acti)
?ntr"un prim timp* !,%m se fixeaz (cu <ap /i sec)ena 5Z&&!&&A7!&"6Z) pe
su#unitatea mic a ri#osomului
55
2 apoi* se formeaz un comple2 de ini$iere +ntre !,%m*
!,%t"1 '?ncrcat' cu !!"1 (metionin) /i diferii factori de iniiere ai translaiei (<75* <76) cu
rol catalizator2 anticodonul !,%t"iniiator este +n contact cu codonul !;4 al !,%m. !poi*
prin aciunea unui alt <7* se fixeaz su#unitatea mare 6I0 /i ri#osomul de)ine activ% deci
capa#il de a participa la sinteza polipeptidic !,%t"iniiator se )a palsa direct +n situsul 9 al
su#unitii mari a ri#osomului 0figura F18).
Elongaia este o etap relati) simpl /i repetat succesi) +n cursul crie se formeaz
legturi peptidice +ntre !! a/ezai sec)enial pe #aza ordinii codonilor din !,%m
$up plasarea !,%t1 +n poziia 9 a ri#osomului +n situsul ! (amino"acil) li#er )ine /i
se plaseaz !,%t"5 +ncrcat
=L
cu !!"5* codificat de al doilea codon din !,%m <n acest
momen* su# aciunea enzimei peptidil-transfera'a se realizeaz legtura peptidic +ntre
primii doi aminoacizi* formndu"se un dipeptid (legat la !,%t5) $up formarea dipeptidului*
su# influena factorului de elongaie .75* 4@9 /i a unei transloca(e* ri#osomul se deplaseaz
cu trei nucleotide +n lungul !,%m* +n direcia 5Y6Y !stfel !,%t"1 este scos din situsul 9
care )a fi ocupat de !,%t"5* care poart dipeptidul
5O
?n situsul ! eli#erat se fixeaz !,%t"6
cu !!"6 /i* printr"o nou legtur peptidic* !!"6 este fixat la la dipeptid
&iclul celor trei faze (acro/area !!^!,%t la ri#osom* formarea legturii peptidice*
translocarea ri#osomului) se repet /i astfel catena polipeptidic cre/te la fiecare ciclu cu un
amino acid $e su#liniat c pe msur ce un ri#osom a)anseaz +n lungul catenei de m!,%
ali ri#osomi
58
pot +ncepe 'lectura' acestei catene formndu"se astfel sute sau mii de molecule
proteice identice ("amplificare") $esigur +n procesul de sintez a polipeptidului se pot
produce erori dar ele sunt corectate prin diferite mecanisme* ce implic diferite enzime /i
factori de elongaie
Terminarea. .longaia polipeptidului se opre-te cnd ri#osomul a>unge la un codon
stop* situsul de terminare a translaiei ?
n acest moment se produce dezasam#larea complexului ri#osom"!,%m"polipeptid (prin
inter)enia unui factor proteic* ,7) /i polipeptidul este eli#erat din ri#osom ,i#osomul poate
fi reciclat pentru o nou sintez iar polipeptidul sufer o serie de modificri posttranslaionale
/i capt forma tridimensional specific
25
!sociere !,%m la aceast su#unitate /i potri)irea exact a codonului !;4 se face printr"o sec)en purinic
special* situat cBiar +naintea codonului iniiator /i complementar unei sec)ene pirimidinice din !,%r
su#unitii mici ;n rol cert dar +nc neclar are /i structura "cap" de la extremitatea 5Y a ri#osomului
26
7ixarea este fa)orizat de un factor de elongaie* .71
27
@recerea !,%t din situsul 9 +n ! se nume/te transloca$ie4
28
,i#osomii fixai la aceea/i molecul de !,%m formeaz "un polisom" (sau poliri#osom)
21
3. LOCALIZAREA PROTEINELOR
7iecare protein* sintetizat pe #aza informaiilor unei gene* funcioneaz +ntr"un
anumit compartiment celular2 de ex* tu#ulina"+n citosol2 Bistonele"+n nucleu2 succinat
coenzima ! reductaza"+n mitocondrii2 glicozil"transferazele"+n aparatul 4olgi2 receptorii
Bormonilor peptidici"pe mem#rana celular2 colagenul"+n spaiul extracelular etc 3rice
protein cu o localizare special posed +n structura ei una sau mai multe sec)ene"semnal
care )or determina* ca un )erita#il cod po/tal* adresa sa de destinaie
3 prim sortare a polipeptidelor nou sintetizate separ proteinele care )or ramne +n
interiorul celulei de cele care )or fi exportateCexcretate la exteriorul celulei !ceast decizie
iniial este determinat de prezena unei sec)ene de 15"6I aminoacizi (Bidrofo#i)* situat la
captul % terminal al proteinelor care )or fi excretate2 ea se nume/te peptid signal (semnal
peptidic) /i lipse/te la proteinele cu destinaie intracitoplasmatic $up ce s"au +ncorporat
circa OI de !! dintr"o protein excretat* sec)ena semnal de)ine )izi#il din canalul
ri#osomic /i pe ea se fixeaz o particul numit 0,9 (?ignal Decognition Aarticule)
=M
* care
opre/te translaia &omplexul ?DA3semnal peptidic recunoa/te /i se fixeaz pe un receptor
(!docing protein) situat pe suprafaa citosolic a reticulului endoplasmic (,.) (figura
F1P) $up fixare* semnalul peptidic tra)erseaz mem#rana ,. iar ri#osomii ce efectueaz
translaia se fixeaz la ,.2 apoi particula 0,9 este eli#erat /i translaia se reia dar
polipeptidul sintetizat este diri>at +n lumenul ,. (unde sec)ena peptidic care '/i"a fcut
datoria' a fost de>a cli)at)* fiind apoi transportat la exteriorul celulei
9rintr"un mecanism asemntor se realizeaz transportul proteinelor nucleare sau
mitocondriale sau celor destinate aparatului 4olgi ?n cazul proteinelor lizozomale /i
mem#ranare mecanismele sunt diferite 9roteinele (proteazele) destinate lizozomilor au o
sec)en de aminoacizi care determin adiia posttranslaional a mano(ei3L3fosfat2 aceast
modificare determin diri>area acestor glicoproteine din ,. sau aparatul 4olgi +n interiorul
lizozomilor $ac accidental modificare nu se produce transportul proteazele lizozomale
neprocesate )a fi anormal (+n mucolipidoze /i #oala celulei <) 9roteinele ata/ate la mem#ran
se fixeaz prin sec)ene peptidice /i 0,9 la un receptor din )ecintatea unui por mem#ranar2
ele +ncep s tra)erseze mem#rana prin acest por pn cnd se a>unge la o sec)en ce opre/te
transferul /i determin inseria proteinei +n ptura lipidic a me#ranei
4. MODIFICRILE POST3TRANSLAIONALE ALE PROTEINELOR.

9e msur ce un polipeptid se sintetizeaz* +n anumite zone se formeaz prin repliere
structuri secundare ( "elice +n proteinele fi#rilare sau U"pliere* +n proteinele glo#ulare)
(figura F6) prin interaciuni (puni de Bidrogen* puni disulfidice) +ntre diferii aminoacizi
+n)ecinai sau situai mai la distan2 +n felul acesta* la sfr/itul sintezei* polipeptidul ia
configuraia spaial* tridimensional* specific* care +i determin acti)itatea
0tructura tridimensional a proteinelor este rezultatul interactiunilor fizice care se sta#ilesc +ntre
aminoacizii constituieni &u toate acestea s"a constatat c plicaturarea iniial a moleculelor proteice este
un proces mediat de o serie de proteine numite 'chaperones' (8sp6I* 8spOI si 8spPI) .le se cupleaz la
ni)elul lanului polipeptidic nascent /i pre)in mai +nti iniierea plicaturrii extremitaii %"terminale pn
cnd +ntregul proces de translaie nu este finalizat $e asemeni* proteinele cBaperones au un rol important
+n cazul proteinelor care tre#uiesc transportate +n diferite compartimente celulare* precum mitocondriile
sau reticulul endoplasmatic* pre)enind plicaturarea acestora pn la atingerea destinaiei
?n afara modificrilor conformaionale* polipeptidele pot suferi /i alte modificri
calitati)e* permanente sau re)ersi#ile care* +n esen* fac ca o protein s de)in acti)
29
0,9 este alctuit din 6 proteine /i o mic molecul de !,% O0A*
22
Modificrile re)ersi#ile ale proteinelor sunt reprezentate +n special de acetilarea
Nys (+n cazul Bistonelor) sau fosforilarea ?er (+n cazul Linazelor)2 aceste modificri pot
influena* uneori decisi)* acti)itatea proteinei
Modificrile permanente pot fi de asemenea numeroase /i importante
<livarea proteolitic a catenei peptidice4 $up sinteza catenelor polipeptidice are loc cel
mai adesea cli)area metioninei iniiale /i* la unele proteine* a mai multor aciziaminai de la
extremitatea %8
5
(sec)ena 'peptid signal') %umeroase proteine sunt sintetizate su# forma
unui precursor inactiv (pro"Bormon* proferment) care nu poate aciona asupra su#stratului2
dup sintez* precursorul este cli)at proteolitic /i rezult o protein matur* acti)
funcional ;n exemplu sugesti) este reprezentat de sinteza insulinei (figura F5I) !lteori
dintr"un singur precursor proteic(de exemplu* proopiomelanocortina) se pot produce mai
multe polipeptide cu funcie diferit
Hidro2ilarea unor aminoaci(i* de exemplu prolina /i lizina +n cazul colagenului* asigur
sta#ilitatea unor complexe proteice (tripla elice de colagen)
'lico(ilarea este un proces +ntlnit +n cazul glicoproteinelor* care sunt de regula fie
secretate* fie localizate la suprafata celulelor 4licozilarea poate fi iniat la ni)elul ,. (%"
glicozilarea unei asparagine prin adugarea unui oligozaBarid comun alctuit din 1F
reziduuri glucidice care )a fi procesat ulterior) sau +n interiorul aparatului 4olgi (3"
glicozilarea unei serine prin ata/area unui rest de %"acetilglucozamin sau a unei treonine)
Adugarea de lipide este caracteristic proteinelor care )or fi ancorate +n mem#rana
plasmatic ?n cazul proteinelor care se )or localiza la faa intern a mem#ranei plasmatice
pot fi +ntlnite trei tipuri principale de adiii lipidice- %"miristoilarea (la ni)elul glicinei
situate la extremitatea amino a proteinelor)* prenilarea (la ni)elul lanurilor laterale ale
aminoacizilor ramificai- cisteina* serina si treonina) /i palmitoilarea (la ni)elul atomului
de sulf al cisteinei) ?n cazul proteinelor care se localizeaz la faa extern a mem#ranei
plasmatice sunt ata/ate grupri glicolipidice* de regul la captul &"terminal al lanului
peptidic
9roteinele pot fi compuse din unul sau mai multe polipeptide (formnd o protein
multimeric2 de exemplu* Bemoglo#ina* fi#rele de colagen etc)* fiecare fiind supuse unor
modificri posttranslaionale !stfel* ele pot intraciona cu o serie de cofactori specifici (de
exemplu* cationi #i)aleni &a=5* 7e=5* &u=5* _n=5 sau molecule mici necesare acti)itii
enzimatice* cum ar fi %!$=) sau ligan(i @oate acestea )or influena puternic conformaia /i
deci acti)itatea proteinei
5. SINTEZA PROTEINELOR 4 ORIGINEA I EVOLUIA VIEII .
3riginea acizilor nucleici /i a proteinelor* a codului genetic* a aparatului /i
mecanismului de translaie sunt pro#leme interesante /i actuale* deoarece ele reprezint* +n
esen* su#stratul #iocBimic al originii )ieii 7aptele certe sunt puine iar ipotezele numeroase
/i di)ergente $ogma central a geneticii- A*4 A"4 proteine implic existena unor
molecule informaionale dar /i a unor proteine catalitice care s realizeze diferitele etape ale
transferului informaiei genetice 0e pune firesc +ntre#area- cine a aprut mai +nti pe 9mnt*
proteinele sau acizii nucleici2 dac se acord prioritate acizilor nucleici atunci nimeni nu poate
rspunde la +ntre#area- cum a fost posi#il replicarea* transcripia sau translaia acizilor
nucleici +n a#sena unor proteine catalitice !stfel* la ni)el molecular* clasica dilem 'oul sau
gina' se traduce printr"o nou dilem 'acizii nucleici sau proteinele'
!$% nu poate fi 'molecula originar' deoarece este lipsit de acti)iti catalitice
,ecent s"au descoperit +ns ri,o'imele* molecule de !,% dotate cu acti)itate catalitic /i s"a
presupus c !,% ar putea fi +n acela/i timp o molecul informaional /i enzimatic* putnd
s realizeze singur stocarea* conser)area /i expresia informaiei ereditare 0"ar putea deci
23
prezuma c )iaa a +nceput '+n supa pre#iotic' prin formarea spontan a moleculelor de
!,%* amino acizi /i polipeptide care* acionnd +n sim#ioz* ar fi realizat complexe
ri#onucleoproteice capa#ile de 'proliferare /i perenizare' 7oarte pro#a#il* !,% a aprut
+naintea !$% &aracterul cBimio"reacti) al sistemului determin +ns insta#ilitatea sa /i
riscul de auto"distrugere 9entru a e)ita acest lucru s"a trecut la o etap superioar 'acizi
nucleici #icatenari'* prin asocierea a dou molecule complementare de !,% !ceast
structur mult mai complex pierde acti)itatea enzimatic (preluat de alte molecule
polipeptidice) dar asigur sta#ilitate precum /i perpetuarea informaiei* prin replicare
&aracterul uni)ersal al codului genetic permite ipoteza logic c toate organismele )ii
au a)ut un strmo/ comun .l a)ea un cod genetic de>a ela#orat* identic cu cel actual2 +n
cursul e)oluiei acest cod genetic a rmas +ngBeat* nu a suferit modificri 0e poate
concluziona c apariia codului genetic /i a aparatului su traductor s"a fcut deci +n etapa
pre#iotic !cizii nucleici* primul pas al e)oluiei #iologice* au aprut pe cale abiogen /i
apoi s"au specializat* unii >ucnd rol de matri* alii pe cel de translatori !stfel* acizii
nucleici au do#ndit capacitatea de a diri>a asam#larea aminoacizilor (aprui prin acela/i
mecanism a#iogen) <niial ei realizau acest proces am#iguu /i #idirecional2 ulterior* selecia
/i e)oluia au exclus am#iguitatea /i au sta#ilit un sens unidirecional de lectur a informaiei
din !$% .)ident* +n a#sena unor molecule fosile* toate acestea rmn la ni)el de ipoteze
3 pro#lem* corelat cu e)oluia iniial a lumii )ii* este a#sena intronilor la #acteriile
actuale /i prezena lor la eucariote sau la #acteriile fosile de tip arBeo#acterii 9n nu de
mult se considera c organismele eucariote pro)in dintr"o #acterie 3ri* aceast idee pare
gre/it- procariotele /i eucariotele actuale pro)in pro#a#il dintr"un strmo/ comun asemntor
arBeo#acteriilor* care posed un genom cu introni 9ro#a#il c /i codul genetic a)ea mici
diferene fa de cel actual* fiind foarte asemntor cu cel al mitocondriilor .)oluia s"a fcut
prin pierderea intronilor* total la procariotele actuale parial la eucariote
6I
$eci #acteriile
actuale* lipsite de introni ar fi punctul maxim al e)oluiei ([[) deoarece utilizarea !$% este
mai performant dect la eucariote .xplicaia s"ar putea #aza pe timpul de +nmulire foarte
scurt (minute) ce face posi#il succesiunea +n timp a unui numr aproape infinit de generaii*
oricum mult mai mare ca al eucariotelor superioare !ceast scBem seductoare nu explic
+ns amplificarea taliei genomului odat cu 'p/irea' pe treptele superioare ale e)oluiei
eucariotelor
3 alt pro#lem )izeaz +ns/i originea genelor actuale cu o structur '+n mozaic'
&ompararea (cu a>utorul ordinatoarelor) a sec)enei de aminoacizi a diferitelor proteine rele)
la unele proteine existena unor domenii comune cu ale altor proteine 0pre exemplu* +n
structura receptorilor pentru lipoproteinele A$A exist un domeniu care se gse/te +n
structura proteinei &P a complementului sau alte domenii care exist +n receptorul .47
(epidermal gro"th factor) +n factorul <1 a coagulrii sau proteinei & $eoarece fiecare
domeniu este codificat de un anumit exon* se poate concBide c genele care determin
proteinele respecti)e au exoni comuni 9entru a explica acest fenomen s"a presupus c
'genele pentru proteinele actuale s3au format ca 1ocul de Nego' adic* prin asam#larea
unor exoni (ce ar putea fi ni/te 'gene mai mici') ce codific anumite uniti funcionale* +ntr"o
structur mai complex* deci o gen 'mai mare' ce determin o protein mai complex* cu
proprieti specifice2 mai clar* aceea/i exoni ar fi fost folosii +n asam#larea unor gene
diferite <ntronii prezeni +nc de la primele #acterii ancestrale ar fi* +n aceast concepie*
fragmente de gene nefuncionale
D. REGLAREA E#PRESIEI GENELOR.
30
0tudiul genelor pentru actin la diferite organisme rele) diferene +n numrul intronilor* care scade odat cu
e)oluia
24
&elulele corpului uman* indiferent de structura /i funcia lor* posed aceea/i
informaie genetic* deoarece rezult prin mitoze succesi)e din zigot .xpresia genic este
+ns diferit ;nele gene (constituti)e C domestice* de la houseeeping genes) sunt exprimate
continuu* +n toate tipurile celulare* fiindc produ/ii lor proteici sunt necesari permanent
celulei (sinteze proteice* producere de energie etc)2 multe alte gene au o expresie limitat la
anumite esuturi specifice iar altele sunt complet /i permanent inacti)ate ?n plus* expresia
genelor `autorizate s se exprime prezint o limitare spa$ial (pentru anumite organe*
esuturi* celule* componente celulare) /i temporal (stadii diferite ale dez)oltrii* diferenierii*
ciclului celular)* fiind adaptat la natura /i intensitatea stimulilor extracelulari (factori
inducti#ili) @oate aceste fenomene presupun inter)enia unor mecanisme complexe de control
a expresiei genice
Mecanismele de reglare ale expresiei genelor au fost descifrate iniial la procariote2 ele
se #azeaz pe cele#rul model al operonului descris +n 1P61 de ctre aaco# /i Monod la .
coli (9remiul %o#el* 1P65)
3peronii regrupeaz +ntr"o singur unitate funcional mai multe gene de structur (ce codific enzime
diferite care sunt +ns implicate +n acela/i lan meta#olic)* precum /i gene de reglare a transcripiei
4enele reglatoare produc prin intermediul unor su#stane (represori) inacti)area sau acti)area genelor
de structur* de o#icei su# aciunea unor factori de mediu (inductori* corepresori)
Mecanismele de regla> genic descrise la procariote nu sunt +ns dect parial aplica#ile la
eucariote (reglarea inducti#il)* /i deci la om* pentru dou moti)e eseniale- genomul uman
nuclear este enorm (comparati) cu al #acteriilor) /i puternic compactat +n fi#rele de
cromatin% +n nucleu ,ecunoa/terea /i acti)area unei sec)ene scurte de nucleotide*
corespunztoare unei gene* +ntr"un timp minim este foarte dificil $e aceea +n celulele
difereniate* anumite gene sunt de>a preselec$ionate* prin modificarea dispoziiei cromatinei4
Aa eucariote funcioneaz +n mod cert mecanisme de regla1 multiple ce acioneaz +n
fiecare etap (la ni)eluri diferite) a exprimrii genelor sau fluxului de informaie A*4
A"4m proteine@ ele sunt adesea +nlnuite /iCsau ar#orescente* reducnd considera#il
efortul de selec$ie al unor gene ce tre#uie exprimate /i permind o a1ustare a vite(ei i
intensit$ii reac$iei la diferii stimuli .tapa principal a reglrii expresiei genice se desf/oar
+n toate celulele la ni)elul iniierii transcripiei !$% (controlul transcripional% ce )izeaz
recrutarea* poziionarea /i acti)area !,%polimerazei <<) $ar mecanismele de control
acioneaz /i la celelalte ni)eluri* post"transcripionale* +n care este implicat !,%m
(procesarea pre!,%m* transportul /i sta#ilitatea !,%m* translaia* procesarea proteinelor)
Mecanismul molecular comun pentru ma>oritatea formelor de reglare a expresiei
genice este reprezentat de fixarea /i interaciunea unor factori proteici la sec)enele de
reglare ale acizilor nucleici* situate +n )ecintatea genei (pe !$%) sau pe !,% transcris
7actorii proteici reglatori sunt codificai de gene situate la distan2 deoarece ei tre#uie s
migreze la situsul de aciune sunt numii generic factori trans-reglatori (sau trans"acti)i)
0ec)enele de reglare la care se fixeaz ace/ti factori se gsesc +n aceia/i regiune !$% sau
molecul de !,% ca /i gena sau transcriptul !,% ce tre#uie reglat2 de aceea aceste sec)ene
se numesc generic elemente cis-reglatoare (sau cis"acti)e) <n afar de factorii genetici*
controlul expresiei genice poate fi influenat si de factori negenetici (care nu intereseaz
sec)ena de nucleotide a !$%)* cu alte cu)inte informaia genetic ramne nemodificat /i*
de aceea* au fost denumite modificari epigenetice (epi G peste)
1. REGLAREA PRETRANSCRIPTIONAL 5EPIGENETIC6
A E#PRESIEIE GENICE
,eglarea pretranscripional a expresiei genice )izeaz manifestarea lor spaial +n
anumite organe* esuturi* linii sau tipuri celulare /i cBiar celule indi)iduale $up cum se /tie*
coninutul +n !$% al tuturor celulelor umane nucleate (pro)enite prim mitoze succesi)e din
25
zigot) este )irtual identic dar* exceptnd genele domesticeCconstituionale care se
exprim +n toate celulele (deoarece codific proteine eseniale pentru )iaa celulei)* toate
celelalte gene au o expresie specific tisualar sau celular !ceasta presupune selec$ia
anumitor gene +n celulele em#rionare difereniate /i men$inerea acestei expresii difereniate +n
descendena lor !m#ele fenomene sunt realizate prin inter)enia unor mecanisme epigenetice
/i a unor mecanisme de control la distan prin structura cromatinei
1.1 M.&!%<0M.A. .9<4.%.@<&.
?n nucleul celulelor* moleculele de !$% formeaz cu Bistonele structuri compacte su#
forma fi#relor de cromatin 9entru ca s se iniieze transcripia unei gene tre#uie ca factorii
proteici de reglare s ai#e acces la promotorul genei !ceasta implic o modificare a structurii
cromatinei* mai ales +n regiunile de eucromatin* acti)e transcripional <n general este )or#a
de o serie de modificari ale histonelor sau de metilarea ADN (mecanism general de meninere
a represiei transcripiei) @oate aceste modificari epigenetice au dou trsturi eseniale-
caracterul reversibil (care le fac extrem de utile +n reglarea expresiei genice) si poten$ialul lor
ereditar (se pot transmite in succesiunea generaiilor* precum /i +n cursul di)iziunilor
celulare)
a2. Modificari ale histonelor
Modificrile Bistonelor (metilare* acetilare* fosforilare /i u#iQuitinare) au rol important
+n reglarea expresiei genice /i reprezint un marLer epigenetic esenial !ceste modificri
intereseaz cozile aminoterminale ale Bistonelor* #ogate +n aminoacizi precum lizina*
arginina /i serina* care sunt inta modificrilor epigenetice 7iecare dintre modificrile
menionate mai sus intereseaz specific anumii aminoacizi
(1) Metilarea histonelor poate a)ea loc la ni)elul mai multor reziduuri de lizin sau arginin
ale acestor Bistone* dar cele mai importante sunt- metilarea la ni)elul reziduului ASsF al
Bistonei 86 (86":F) care este asociat cu e2presia activ a genelor* respecti) metilarea
reziduului ASsP al Bistonei 86 (86":P) care este asociat cu atenuarea trasncriptiei !ceste
modificari sunt rezultatul acti)itii unor Biston"metiltransferaze
(5) Acetilarea histonelor se afla su# controlul unor Biston"acetiltransferaze (8!@) care
determina o rela2are a structurii cromatinei ce fa)orizeaz transcripia si* respecti) a unor
Biston"deacetilaze (8$!&) care produc o compactarea a structurii cromatinei /i suprimarea
transcriptiei
Modificrile Bistonelor se asociaz cu modificri ale structurii cromatinei &romatina
inacti) transcripional se afl +ntr"o conformaie puternic condensat /i asociat cu fixarea
strns a Bistonei 81 <n scBim# cromatina acti) adopt o conformaie 'mai deschis'
produs de acetilarea Bistonelor nucleosomale /i* pro#a#il* de Bipometilarea citozinei <n
sfr/it* exista o serie de modific$ri ale cromatinei induse componenta 0b<C0%7 a
complexului transcripional care* +n prezena !@9* desface structura nucleosomilor /i
fa)orizeaz transcripia
,2. Metilarea A*4.
Metilarea !$% este al doilea marLer epigenetic esenial Aa om* metilarea !$% are
loc aproape exclusi) +n poziia 5Y a citozinei din cadrul dinucleotidelor <p'
J,
* concentrate +n
anumite regiuni denumite insule <p'% localizate foarte adesea la ni)elul regiunilor promotor a
numeroase gene* precum /i +n interiorul unor gene amprentate ()ezi mai >os) Metilarea !$%
este gu)ernat de aciunea unor A*4-metiltransfera'e /i* pro#a#il* a unor !$%"demetilaze
!u fost identificate dou clase importante de !$%"metiltransferaze- DN*E, este
metiltransferaza de meninere* care metileaz dinucleotidele &p4 din catenele !$% nascente
31
,eamintim c litera p desemneaz aici legatura fosfodiester ce exista intre & /i 4 /i nu punile de Bidrogen ce
se sta#ilesc +ntre catenele complementare)
26
+n cursul procesului de replicare a !$%2 funcia sa este eseniala +n meninerea modelului
de metilare a !$% +n succesiunea generaiilor de celule (figura F51) DN*EJA si DN*EJ6
sunt metiltransferaze de novo* implicate +n sta#ilirea modelului nou de metilare a !$% +n
di)ersele etape ale dez)oltarii $%M@1 si $%M@6! interacioneaza cu Biston"deacetilazele
(8$!&) /i ca urmare pot represa transcripia &a urmare* +ntre metilarea !$% /i deacetilarea
Bistonelor exista o strans interdependen
Metilarea !$% asociat cu deacetilarea Bistonelor (care cre/te gradul de condensare al
cromatinei) reprezint mecanismul principal de represie al transcripiei la )erte#rate /i poate
fi considerat ca o poziie standard @oate sec)enele care sunt transcrise acti) tre#uie s fie
nemetilate (cel putin +n regiunea promotor) 9entru aceasta pledeaz modificrile +n metilare
care au loc +n timpul gametogenezei /i dez)oltrii em#rionare
$ez)oltarea em#rionar precoce necesit capacitatea de a acti)a numeroase gene*
urmat de inacti)area selecti) a unora dintre acestea* pe msur ce are loc diferenierea
celular !ceasta reprogramare a +ntregului genom a fost demonstrat a apare imediat dup
fertilizare /i este consecina* cel puin +n parte* a unei demetilri rapide a am#elor genomuri
parentale asociat cu decondensarea cromatinei /i acti)area genelor eseniale dez)oltrii
precoce $emetilarea apare iniial la ni)elul pronucleului masculin /i se pare c prin
mecanisme acti)e (inter)enia unor !$%"demetilaze)* pentru ca dup formarea zigotului s
continue pasi)* la ni)elul +ntregului genom nou constituit (figura F55) 9n +n stadiul de
#lastocist ma>oritatea genomului este demetilat* excepie facnd genele amprentate ()ezi mai
>os) $up implantarea em#rionului au loc fenomene de metilare de novo care sunt asociate cu
sta#ilirea diferitelor linii celulare /i* deci* cu diferenierea celular Metilarea apare iniial la
ni)elul celulelor interne ale #lastocistului care )or forma ulterior )iitorul em#rion* +n timp ce
celulele care formeaza trofo#lastul (din care deri)a placenta* sacul gal#en etc) ramn
Bipometilate
Metilarea !$% poate inter)eni +n represia expresiei genice prin cte)a mecanisme
distincte ?n primul rnd* prezena gruprilor metil ata/ate !$% poate inBi#a legarea unor
factori de transcripie la sec)enele lor int ?n al doilea rnd* represarea expresiei genice
poate fi mediat de ctre o serie de proteine (M.&95* ME$1* ME$5* etc) etc care au
capacitatea de a recunoa/te /i a se lega specific la gruprile metil ata/ate citozinei
&unoa/terea acestor fenomene este departe de a fi +ncBeiat dar consecinele practice
+ncep s se +ntre)ad Hom meiona dou aspecte-
3 serie de proteine implicate +n reglarea metilrii !$% sau a reglrii metil"dependente a
expresiei genice au fost identificate recent a fi inta mutaiilor care produc cate)a boli
genetice4 !stfel* mutatiile M.&95 sunt responsa#ile de producerea sindromului "ett
(3M<M 615O5I) #oal genetic dominant legat de 1* letal la sexul masculin*
caracterizat prin dez)oltare neurologic normal pn la )rsta de O"18 luni urmat de o
deteriorare rapid a funciilor neurologice cu demen* autism* mi/cri caracteristice ale
minilor* ataxie /i microcefalie do#andit Mutaiile $%M@6E sunt asociate sindromului
.CA (3M<M 5F586I)* #oal autosomal recesi) caracterizat prin anomalii faciale*
imunodeficien si Bipometilarea regiunilor cu !$% satelit ale cromosomilor 1* P si 16* cu
insta#ilitatea cromosomilor respecti)i
3 caracteristic a modificrilor epigenetice amintite (modificari ale Bistonelor si
metilarea !$%) este poten$ialul lor reversibil* ceea ce a condus la posi#ilitatea dez)oltarii
unor noi inte terapeutice +n di)erse #oli +n care aceste mecanime de reglare sunt pertur#ate
!/a sunt azacitidina si decita#ina* inBi#itori ai metilrii !$% sau acidul Bidroxamic*
inBi#itor al Biston"deacetilazelor (8$!&)
c2 Bariaii (n configuraia A*4
!/a cum am precizat +n capitolul 5E5* structura !$% nu este fix* rigid .a poate
suferi o serie de modificri conformaionale care influeneaz interaciunea dintre anumite
27
sec)ene ale !$% /i diferite molecule exogene reglatoare Supra(nrularea A*4
(controlat de topoisomera(e) ar face #azele din regiune promotor a genelor mai accesi#ile
proteinelor reglatoare Mutaiile genelor pentru topoisomera(e sau inBi#itorii acestor enzime
produc o diminuare important a transcripiei unor gene
@recerea de la forma E a !$% unor gene la forma C a A*4 ar putea fi )ital pentru
reglarea acti)itii genice !stfel* la ni)elul unei gene care codific o component a sistemului
imun s"a do)edit c sec)ena reglatorie din regiunea promotor este mai +nti con)ertit +n
forma de !$%"_ /i a#ia apoi este acti)at 0pre deose#ire de concepia clasic se consider
c trecerea tranzitorie +n configuraia _ ar face sec)enele !$% mult mai accesi#ile la factorii
de transcripie
!u fost identificate /i alte )ariaii de la forma elicoidal clasic a !$% !stfel*
poriunea monocatenar a !$%* cu care se termin telomerele fiecrui cromsomom* formeaz
o #ucl care se plicatureaz /i determin un aspect de Duadruple& (Quadruplex 4) !semenea
structuri au fost +ns identificate /i +n alte regiuni ale !$% #ogate +n 42 de exemplu* +n
imediata )ecintate a genei c"MK&* implicat +n producerea multor cancere Mutaiile care
determin a#olirea acestei structuri au drept consecin acti)area acestei oncogene
<n sfr/it* exist situaii +n care expresia unor gene este asociat cu o ade)arat
reconfigurare a genomului produs prin recombinari somatice !/a este cazul genelor
implicate +n sinteza imunoglo#ulinelor sau a receptorilor @&,
15 <M9A<&!J<< !A. M.&!%<0M.A3, .9<4.%.@<&. ?% &3%@,3A;A
.19,.0<.< 4.%<&.
a2 Controlul la distan$ al e&presiei genice
Aa eucariote ma>oritatea genelor sunt transcrise indi)idual @otu/i s"au descris
elemente cis"acti)e care exercit un control la distan asupra unei regiuni cromosomice ce
conine un grup de gene* a cror acti)itate )a fi reglat +n mod coordonat $e asemenea*
foarte pro#a#il* cromosomii sunt organizai +n domenii func$ionale de e2presie genic
(domenii de cromatin) acti)e (eucromatin) sau inacti)e (Beterocromatin)* separate de
elemete de grani$ (numite /i !insulators) ce +mpiedic rspndirea efectelor sec)enelor
acti)atoare (enBancer) /i atenuatoare (silencer) de la o regiune la alta se pare c exist o
organizarea funcional a cromosomilor +n domenii cromatiniene cu expresie genic diferit
012. "eglarea e&presiei genelor prin /efecte de po'itie/
3 do)ad elegant a existenei unor domenii de cromatin cu acti)iti transcripionale
diferite a fost adus de rearan>amentele cromosomice care* atunci cnd repoziioneaz o gen
acti) +n proximitatea unor #locuri de Beterocromatin centromeric sau telomeric* pot
suprima expresia genic !cest efect de po'iie demonstrat iniial la $rosopBila a fost
identificat recent /i la om !stfel* +n distrofia muscular$ facio-scapulo-humeral$* #oal
neuromuscular progresi)* autosomal dominant* gena 708$ este situat aproape de
telomerul cromosomului FQ2 +n cazul +n care se produce o deleie a segmentului intercalar
aflat +ntre gen /i #locul de Beterocromatin telomeric se reduce distana dintre ele* gena este
represat printr"un efect de poziie 7enomene asemntoare s"au descris /i +n alte #oli
.xistena unor sec)ene nucleotidice care controleaz la distan un domeniu de
cromatin mai larg a rezultat din studiul #olilor asocite cu rupturi cromosomice !stfel*
acti)itatea genelor AAOL de pe 11p16 /i ?)OM de pe 1OQ5F poate fi suprimat prin rupturi
produse la sute de :# de aceste gene (care sunt normale /i nemodificate ca localizare)2 este
)or#a de un efect la distan analog efectului de poziie descris mai sus
0<2. "eglarea coordonat$ a e&presiei genelor 0#locus control region$2
28
0e presupune c unul din efectele diferenierii celulare este de a selecta genele ce
)or fi transcrise +ntr"o anumit celul /i de a le plasa &ntr3o configura$ie spa$ial special (de
tipul unei #ucle cromatiniene) care face promotorii genelor din aceast structur mai
accesi#ili la !,% polimeraz /i la factorii de transcripie 0"a demonstrat* de exemplu* c
genele din familia alfa"glo#inei (c* d1* d5) /i familia #eta"glo#inei ( * * /i ) sunt
situate una dup alta ()ezi figura 616) +n aceea/i #ucl cromatinian .xpresia lor +n linia
eritroid este determinat de ni/te situsuri situate la extremitile #uclei (regiunea =C" de la
Nocus <ontrol Degion)* direct accesi#ile proteinelor reglatoare !ceast regiune asigur
reglarea temporal /i specificitatea tisular a expresiei genelor din familia "glo#inei- genele
glo#inelor sunt acti)ate +ntr"o sec)en temporal precis* +n anumite stadii ale dez)oltrii
ontogenetice* care corespunde cu ordinea lor linear pe cromosom
?n cursul dez)oltrii umane se sintetizeaz forme diferite de Bemoglo#in G em#rionar* fetal* adult
()ezi caseta 66) Aa aceast diversitate ontogenetic a tipurilor de 8# se adaug /i faptul c procesul
de sintez a 8# are loc +n situsuri diferite +n diferite perioade (sac gal#en* ficat* splin* mdu)
osoas) !m#ele fenomene implic acti)area /i inacti)area sec)enial* +n momente precise /i esuturi
)ariate* a diferitelor gene ce alctuiesc familia alfa"glo#inei (c* d1* d5) /i #eta"glo#inei (e* 4V* !V* W /i
U)2 acest proces de Pcomutare a hemoglobinei (`hemoglobin s"itching) permite sinteza su#unitii
adec)ate de Bemoglo#in pentru o anumit perioad de dez)oltare (figura 61F)
Mecanismele care determin expresia unei anumite gene +ntr"o anumit perioad /i esut implic
sec)enele de reglare din regiunea promotor a fiecrei gene precum /i o sec)en reglatoare comun
numit Nocus <ontrol Degion (N<D) situat +n amonte de genele de structur N<D este necesar pentru a
sta#ili care gen din grup se )a exprima +ntr"o anumit perioad de timp /i +n ce esut <nteresant este
faptul c +n familia U glo#inei expresia temporal a genelor se face &n direc$ia -QJQ% &n ordinea
(RST) &n care se gsesc pe cromosom* fa de N<D $e asemenea s"a sta#ilit c N<D pentru glo#in
are mai multe sec)ene cis3reglatoare pe care se fixeaz factorii de transcripie 4!@!"1 /i %7."5 ce
determin expresia genelor numai +n celulele eritroide 7ixarea factorilor de transcripie la N<D
modific structura cromatinei la ni)elul genelor #eta* permind altor @7 s acceseze gene indi)iduale
din grup !poi* +ntre factorii de transcripie (@7) fixai pe N<D si @7 fixai pe promotorul unei anumite
gene are loc o interaciune (inclusi) o apropiere fizic* prin realizarea unei #ucle +n !$%) care
acti)eaz sau represeaz transcripia unei anumite gene &omutrile de expresie +n anumite esuturi se
fac de asemenea prin inter)enia unor @7 specifici tisulari
!#ilitatea unei singure regiuni de control* cum este N<D* s regleze un grup de gene /i
nu una singur* reprezint un ni)el superior de control al expresiei genice
65
&ontrolul
com#inat prin A&, /i @7 specifici +n diferite esuturi produc o comutare ordonat a sintezei
8# +n cursul dez)oltrii
,2. E&presia monoalelic$
Aa ma>oritatea genelor* am#ele alele matern /i patern se exprim (la ni)el
molecular)2 nu exist nici"o discriminare +ntre ele (dac nu inter)ine o mutaie deci o diferen
genetic) @otu/i* la om mai multe gene #ialelice exprim &n mod normal numai una din cele
dou alele parentale* fie cea matern* fie cea patern2 prin aceast e&clu'ie alelic$ sau
e&presie monolelic$ se produce un fel de hemi(igo$ie func$ional $e/i iniial era considerat
o raritate* expresia monoalelic a fost demonstrat la mai multe gene /i se poate +mpri +n
dou categorii-
.xcluzia alelic +n funcie de originea parental* reprezentat de fenomenul de amprentare
genomic2
.xcluzia alelic independent de originea parental2 decizia de excludere* prin represie* a
uneia din cele dou alele este +ntmpltoare dar definiti)* se transmite ca atare celulelor
fiice2 +n acest grup se +ncadreaz-
" excluderea alelic prin inacti)area cromosomului 12
" excluderea alelic dup un rearan>ament !$% programat (de exemplu*
expresia genelor imunoglo#ulinelor +n limfocitele E sau a receptorilor celulelor @ +n
limfocitele @)
32
!semenea mecanisme s"au descris /i pentru alte grupe de gene (de ex* genele pentru receptorii celulelor @)
29
" excluderea alelic prin mecanisme necunoscute (de exemplu* genele
receptorilor olfaci)i +n neuroni /a )
012. Amprentarea genomic$
7enomenul de amprentare genomic se refer la prezena unor modificri epigenetice
cromosomice care pot a)ea drept consecin expresia +ntr"o manier dependent de originea
parental a genelor !mprentarea genomic a fost identificat prin studii de partenogenez
care au do)edit faptul ca genomul patern /i matern nu sunt ecBi)alente ;lterior au fost
identificate o serie de #oli produse ca urmare a disomiei uniparentale a unor cromosomi* adic
mo/tenirea am#elor copii ale unui cromosom de la acela/i printe 0tudiul unor asemenea #oli
a permis identificarea primelor gene amprentate
Eolile genetice asociate unor tul#urari ale genelor amprentate se caracterizeaz prin
manifestri fenotipice care depind de originea parental a defectului genetic &ele mai #ine
caracterizate asemenea sindroame sunt sindroamele EecLDitB"biedemann (cromosomul
11p155) si 9rader"billiC!ngelman (15Q11"16)
Sindromul Bec1Eith-iedemann (3M<M 16I65I) este caracterizat prin gigantism*
macroglosie* omfalocel /i predispoziie pentru dez)oltarea unor tumori Eoala este asociat cu
expresia #ialelic a genei pentru factorul de crestere insulin3lie tip = (<475)* gen exprimat
+n mod normal numai de pe cromosomul patern* sau prin mutaii ale unei alte gene amprentate
din )ecintate* &$:%1&
?n cazul sindroamelor 9rader"billi si !ngelman sunt implicate cel mai adesea deleii
largi ale regiunii cromosomice 15Q11"16
!tunci cnd defectul intereseaz cromosomul de origine patern manifestarile clinice
corespund sindromului %rader-illi (3M<M 1O65OI) caracterizat prin o#ezitate*
Bipostatur /i retard mintal moderat 4enele incriminate sunt 0%,9% /i necdina* am#ele
cu expresie de pe cromosomul patern
$efectele care intereseaz cromosomul de origine materna determin sindromul
Angelman (3M<M 1I586I) caracterizat prin ataxie* Biperacti)itate* retard mintal se)er cu
lipsa )or#irii /i crize de rs <n unele cazuri #oala este determinat de defecte ale genei
;E.6! care este exprimat exclusi) matern la ni)el cere#ral
<n ultimii ani au fost identificate cel puin FI de gene amprentate (o list a genelor
amprentate la om poate fi gasit pe <nternet la adresa- """4geneimprint4com) !cestea sunt
localizate grupat* +n anumite regiuni cromosomice (de exemplu gruprile de pe cromosomii
11p si 15Q) 4enele amprentate au o serie de trsturi comune-
expresia monoalelic care depinde de originea parental (expresia fie numai a alelei
materne* fie numai a alelei paterne)*
prezenta unor insule &p4 +n regiunea promotor sau +ntr"un intron care sufer metilare
difereniat (dependent de asemeni de originea parental)*
prezena frec)ent a unor molecule de !,% care sunt transcrise de pe catena !$% opus
(!,% antisens) G cu rol important +n reglarea expresiei acestor gene
.xpresia monoalelic a genelor amprentate este un fenomen extrem de complex
%umeroase gene prezint acest model monoalelic doar +n anumite etape ale dez)oltrii
ontogenetice sau doar +n anumite esuturi $e exemplu* gena <475 este exprimat #ialelic +n
cursul dez)oltarii em#rionare precoce (/i aceasta fa)orizeaz procesele de cre/tere
caracteristice acestei etape)* pentru a do#ndi apoi expresie exclusi) de pe cromosomul
patern2 exceptie fac unele esuturi (ficat etc) +n care se pastreaz expresia #ialelic
4enele amprentate sunt implicate +n controlul unor procese extrem de importante +n
cursul dez)oltarii /i* ca urmare* alterarea expresiei normale a acestora (fenomen denumit
pierderea amprentarii G de la loss of imprinting G A3<) este asociat cu numeroase #oli*
precum cancerele sau #olile asociate cu tul#urri de comportament
0<2. .nacti#area cromosomului F la femei
30
Aa femeile 11 compensarea doza>ului genic (fa de #r#aii 1K) este realizat
prin inacti)area unui cromosom 1* fenomen care apare precoce +n cursul dez)oltarii
em#rionare 9rocesul de inacti)are con)erte/te un cromosom 1 din forma de eucromatin
acti) +ntr"o form Beterocromatinian puternic condensat /i inacti) transcripional
(cromatina sexuala 1 sau corpusculul Earr +n celulele epiteliale #ucale) <nacti)area nu
intereseaz cromosomul 1 +n intregime- regiunile pseudoautosomale de la extremitile
comosomului 1 pot ramane acti)e ca /i o serie de gene de"a lungul cromosomului !cest
proces de inacti)are este eminamente epigenetic si este controlat de un centru de inacti#are
F.C, care a fost identificat la ni)elul poriunii proximale a #ratului lung (1Q16) Aa scurt
timp dup implantarea em#rionului feminin* la acest ni)el* pe unul din cei doi cromosomi 1
se constat cre/terea marcat a expresiei genei 1<0@ (de la O inactivation specific transcript)
care codific o molecul de !,% netranscris !cest tip particular de !,% im#rac
cromosomul 1 /i acest fenomen este esenial +n cadrul procesului de inacti)are
$e/i gena 1<0@ este esenial pentru inacti)area cromosomului 1* expresia sa nu este suficient pentru
realizarea acestui proces complex &atena opus celei de pe care este transcris gena 1<0@ contine
informaia codificat pentru o molecul antisens numit @0<1* care regleaz +n cis expresia 1<0@ !lte
modificari asociate cromosomului 1 inacti) sunt metilarea ADN* in special la ni)elul promotorilor
genelor* hipoacetilarea Bistonei 8F* metilarea ASsP a Bistonei 86 /i asocierea cu unele )ariante
Bistonice precum macro85!1 /i macro 85!5
Aa om inacti)area cromosomului 1 este considerat a fi &nt9mpltoare
JJ
@otu/i* +n
cazul unor anomalii cromosomice care intereseaz un cromosom 1 (precum deleiile unuia
dintre cromosomii 1 sau translocaii 1"autosomale) se o#ser) o inactivarea prefern$ial*
ne+ntampltoare* a cromosomului 1 normal ?n aceste cazuri se consider c fenomenul de
inacti)are s"a produs la +ntmplare dar rezultatul final este consecina unor procese de selecie
secundar +n cursul dez)oltarii em#rionare precoce a acelor celule care sunt caracterizate
printr"un ecBili#ru genetic mai #un &u toate acestea* mai recent au fost identificate /i cazuri
aparent idiopatice de inacti)are preferenial a unui dintre cei doi cromosomi 1* a cror
etiologie genetic a fost documentat
082. E&presia monoalelic$ prin e&clu'ia (ntGmpl$toare a unei alele
.xpresia monoalelic datorat amprentrii genetice intereseaza un numar relati) redus
de gene &u toate acestea* expresia monoalelic este un fenomen relati) frec)ent +ntlnit la
ni)elul genomului uman <n acest caz este +ns )or#a despre e&clu'ia alelic$* fenomen care se
refer la expresia unei gene de la ni)elul unui singur cromosom din perecBea de omologi* fr
a se ine cont de originea parental a acestuia .xpresia poate deci interesa cromosomii
materni +n unele celule /i cromosomii paterni +n alte celule !cest mod de expresie este +ns
pstrat fix +n cursul succesiunii generaiilor de celule
$e/i nu este #ine +neles* fenomenul de excluzie alelic implic cu siguran
mecanisme epigenetice care au permis coordonarea expresiei unor gene aflate la distan +n
genom <n unele cazuri excluzia alelic este foarte pro#a#il /i consecina unor rearan>amente
cromosomice care apar la ni)el somatic !sa este cazul expresiei monoalelice +ntlnite +n
cazul genelor care codific imunoglo#ulinele +n limfocitele E sau receptorii @&, la ni)elul
limfocitelor @ ()ezi /i capitolul <munogenetica) .xpresia monoalelic este intalnit /i +n cazul
genelor legate de 1 la femei* dar +n acest caz este explicat de inacti)area +ntmpltoarea a
unuia din cei doi cromosomi ;n exemplu foarte complex il reprezint genele care codific
receptorii olfacti)i la ni)elul neuronilor mucoasei nazale 7amilia genelor pentru receptorii
olfacti)i este cea mai mare familie de gene la om* continnd peste 1III de copii organizate +n
circa 55 de grupuri (clusters) la ni)elul a numero/i cromosomi ?n fiecare neuron olfacti) are
loc expresia unui singur asemenea grup de gene* /i aceasta implic existena unor fenomene
de reglare a expresiei genice capa#ile s acioneze la ni)elul +ntregului genom
33
Aa unele mamifere exist do)ezi pri)ind implicarea unor fenomene de amprentare
31
2. REGLAREA TRANSCRIPIONAL.
&ontrolul transcripional al expresiei genice )izeaz reglarea acti)itii !,%
polimerazei <<* enzima ce transcrie genele care codific proteine /i sintetizeaz !,%m
,eglarea transcripional implic interaciunea unor proteine (factori trans3reglatori) cu
sec)ene specifice de pe !$% (elemente cis3reglatoare)* interaciune care determin
transcripia specific a anumitor gene +ntr"un anumit moment pentru a se produce o cantitate
adec)at dintr"o anumit protein
51 .A.M.%@.A. &<0",.4A!@3!,.
.lementele cis"reglatoare sunt sec)ene scurte de !$% ale cror funcii sunt limitate
la o anumit gen2 dup fixarea unor factori 'trans"reglatori' specifici (factori de transcripie)*
aceste sec)ene permit recunoa/terea genei de ctre !,% polimeraz /i regleaz specificitatea
/i intensitatea transcripiei* adaptnd"o la ne)oile celulare
,eamintim ()ezi capitolul 6E15) c unele elemente cis"reglatoare au o localizare
perfect definit +n promotorul genei- EAEA bo2% <AAE bo2% '< bo22 pe aceste sec)ene se
fixeaz factorii de transcripie generali care formeaz* +mpreun cu !,% polimeraza*
complexul de iniiere a transcripiei sau comple2ul transcrip$ional ba(al ()ezi capitolul
F&15) !lte sec)ene (situate mai +n amonte) confer specificitatea tisular a expresiei
genelor ce le posed iar secven$ele DC
6F
(de la 'responsi)e element) care fixeaz factori
transcripionali inducti#ili* acti)ai +n preala#il de ctre un stimul extracelular- Bormoni*
!M9c* ioni etc ;ltimul tip de sec)ene au o locali(are variabil (+n regiunea 5Y sau +n 6Y sau
+n introni) /i regleaz intensitatea transcripiei2 ele pot fi secven$e stimulatoare ale
transcripiei (enhancers) sau secven$e atenuatoare (silencers)4
0e poate spune c regiunile reglatoare ale unei gene sunt constituite dintr"o serie de
module pe care se fixeaz factorii de transcrip$ie realiznd o anumit combina$ie2 prin
interaciunea lor se produce o repliere a cromatinei care creeaz o structur spaial ce
permite !,% polimerazei s se po(i$ione(e lng situsul de iniiere a transcripiei /i s
declan/eze procesul de transcripie cu o anumit )itez
7iecare gen posed 'un sistem de reglare' alctuit din mai mul$i factori
transcrip$ionali care nu sunt +ns specifici unei singure gene %umrul lor este mic dar
aciunea lor particular este produs prin combina$ia specific a anumitori factori trans /i
elemente C sec)ene cis. 0ituaia este compara#il cu scrisul sau muzica +n care un numr
limitat de sim#oluri sau sunete permite o infinitate de com#inaii diferite
55 7!&@3,<< $. @,!%0&,<9J<. @,!%0",.4A!@3,<
7actorii de transcripie trans"reglatori sunt proteine reglatoare care se fixeaz pe
elementele cis"reglatoare ale !$% (de regul* +n marea +ncizur a du#lei elice a!$%) /i
interacioneaz cu ali factori de transcripie* controlnd iniierea transcripiei
65

@oate aceste proteine transcripionale conin un domeniu de fi2are la ADN prin
intermediul crora proteina recunoa/te att genele 'int' ct /i domeniul de transactivare
prin care interacioneaz cu ali factori de transcripie pentru a regla transcripia ;nele
proteine trans pot conine un al treilea domeniu care este un situs de fixare pentru Bormon*
ioni etc $omeniul de fixare la !$% are o structur particular de aminoacizi ce formeaz un
34
9entru a indica acti)atorul unui ,. se adaug o liter suplimentar- !,. pentru elementul de rspuns la
glucocorticoizi2 E,. pentru rspunsul al estrogeni* T,. pentru Bormonul tiroidian* A,. pentru androgeni* C,.
pentru rspunsul la !M9c etc
35
0e numesc 'trans' pentru c sunt proteine produse de alte gene dect cele asupra crora acioneaz
32
motiv structural specific2 +n funcie de alctuirea sa* exist mai multe tipuri de factori de
transcripie (figura F56)
%roteine cuHdegete de 'incH, +n care aminoacizii se dipun spaial su# forma unor degete de
mnu/ (5"16) la #aza crora se fixeaz (de cistein /iCsau Bistidin) un ion de _n
==
* indispensa#il
acti)itii proteinei2 din aceast categorie fac parte receptorii nucleari de Bormoni* proteina 0p1
care se fixeaz pe promotorul a numeroase gene "domestice" (mena1ere) 2
%roteine Ielice-cot-elice* +n care aminoacizii ce alctuiesc domeniul de fixare la !$%
formeaz dou elice unite +ntre ele printr"un 'cot' 2 acest tip de structur (numit /i
homeodomeniu) se +ntlne/te +ntr"o serie de proteine implicate +n dez)oltare* numite
homeoproteine7 proteinele H)O% ?)O etc8
%roteine Ielice-,ucl$-elice sunt proteine dimerice alctuii dintr"un domeniu de fixare
specific la !$%* o elice * o #ucl lateral /i o alt elice 2 cele dou molecule ce formeaz
dimerul se leag prin interaciuni ce se sta#ilesc +ntre zonele din elice2 astfel de structuri sunt
prezente la proteinele care stimuleaz sinteza de imunoglo#uline2
%roteine cu Ifermoar de leucin$H (!Neucin (ipper) sunt proteine dimerice* alctuite dintr"
un domeniu de fixare specific la !$% /i un domeniu +n elice* #ogat +n leucin* care
interacioneaz cu domeniul omolog al celeilalte catene2 exemple- proteina &,.E* produsele
oncogenelor UIN /i ;)?
$e menionat c factorii de transcripie diferii pot conine domenii similare de fixare la !$%
dar au domenii diferite de trans"acti)are2 +n acest caz @7 se fixeaz la aceea/i sec)en de
!$% dar acti)eaz transcripia +n mod diferit .xist /i situaia in)ers- @7 cu domenii
diferite de fixare la !$% si cu domenii identice de trans"acti)are
7actorii de transcripie se pot clasifica +n cinci grupe
(1) 7actori de transcripie generali (4@7 sau @7<<)2 se asam#leaz pe sec)ena @!@!2
(2) 7actori de transcripie comuni care se fixeaz la sec)enele &!!@ /i 4&2
(3) 7actori de transcripie inductibili care dup ce sunt acti)ai de ctre stimuli externi se
fixeaz pe sec)enele ,.* producnd o cre/tere a transcripiei genelor ce posed ,.2
(4) 7actori de transcripie specifici pentru anumite celule (de exemplu 9it"1* factorul
specific glandei Bipofize)2
(5) 9roteine acti)atoare sau represoare care se fixeaz pe acti)atori (enBancers) sau
atenuatori (silencers) /i intensific sau inBi# transcripia genei
;actorii de transcrip$ie generali (4@7) se asam#leaz pe @!@! #ox +ntr"o ordine
sec)enial pentru a forma comple2ul transcrip$ional ba(al care fixeaz* poziioneaz /i
acti)eaz !,% polimeraza << (de aceea se mai numesc @7 <<) (figura F5F !)
9rimul se fixeaz @7 <<$* un complex multiproteic) care se leaga la @!@! prin proteina @E92
apoi se fixeaz +n ordine- @7<<!*@$<<E*@7<<7C!,% polimeraza* @7<<. /i @7<<8 ;nii din
ace/ti factori au /i alte acti)iti- de Belicaz* de protein"Linaze* asemntoare ciclinelor* de
reparare a !$% (@7<<8)
;actorii de transcrip$ie comuni acti)eazCintensific asam#larea 4@7 /i !,%
polimerazei la miezul promotorului .i se fixeaz la sec)enele &!!@* 4&* 3&@ /i apoi
interacioneaz prin domeniul lor trans"acti)ator cu @7<<$ intensificnd asam#larea
complexului de iniiere al transcripiei $e eemplu* @7 0p1 se leag pe 4& prin intermediul
unui domeniu de fixare cu degete de zinc2 apoi domeniul de transacti)are recunoa/te o
component a @7<<$ /i"l acti)eaz (figura F5F E)
;actorii de transcrip$ie inductibili sunt acti)ai +n prezena unui stimul specific
(glucocorticoizi2 @9!2 estrogeni2 calciu2 metale grele) din mediul exterior /i apoi se fixeaz la
un element de rspuns (,.) specific (4,.2 @,.2 .,.2 &a
==
,.)* stimulnd transcripia !cest
mecanism funcioneaz +n anumite tipuri de gene
$e exemplu* @7 inducti#il !91 este sintetizat +ntr"o form inacti) (fosforilat)2 +n prezena
unui stimul G de tipul @9! (ester de for#ol)* factori de cre/tere* citoLine sau
neurotransmitori2 el acti)eaz cascada protein Linazei &* care produce defosforilarea !91 /i
33
acti)area sa2 aceasta +i permite s se fixeze la promotorii genelor care conin sec)ena @,.
$up fixarea la !$%* !91 interacioneaz cu complexul transcripional #azal /i cre/te rata de
iniiere a transcripiei ;n alt exemplu frumos de transcripie inducti#il este rspunsul
celulelor la Bormonii steroizi* un proces care implic fixarea Bormonului (8) la un receptor(,)
/i apoi fixarea 8", la un ,. specific (4,.* .,.* etc) (&astea F5)
&!0.@! F5
Controlul transcripiei mediat de receptori
8ormonii steroizi (gluco"* mineralo"* sex"steroizi) /i elementele similare (de
exemplu* )itamina $) controleaz cre/terea* dez)oltarea /i Bomeostazia corpului uman
0ecretai de celulele endocrine* steroizii a>ung prin snge la celulele `int 7iind
liposolu#ili* ei tra)erseaz mem#rana celular /i* a>un/i +n interiorul celulei* se fixeaz pe
un receptor Bormonal specific* prezent fie +n citoplasm (de exemplu* receptorii pentru
glucocorticoizi) fie +n nucleu (de exemplu* receptorii de androgeni) (figura F55)
,eceptorii Bormonilor steroizi sunt factori de transcripie care au un domeniu de fixare a
Bormonului /i un domeniu de fixare la !$% ce conine moti)e su# form de `degete de
zinc &omplexul acti) receptor steroid se fixeaz +n nucleu la situsurile ,.
corespunztoare (8,.) /i G prin interaciunea dintre receptor /i @7 din complexul #azal
de transcripie " este acti)at iniierea transcripiei unei clase specifice de gene (care au
8,.)
;actorii de transcrip$ie specific tisulari sunt deseori reprezentai de sec)enele
activatoare sau atenuatoare (inhibitorii)4 $e exemplu- acti)atorii genelor imunoglo#ulinelor
funcioneaz numai +n limfocitele E2 represorul neural restrictive silencer element (%,0.)
inBi# acti)itatea unor gene +n toate esuturile* exceptnd esutul ner)os2 aici un factor de
transcripie specific* ,.0@* produce #locarea elementului %,0. !lteori inter)in sec)ene /i
factori de transcrip$ie specifici anumitor esuturi $e exemplu* @7 specifici celulelor eritroide
(%7".5 sau 4!@!) se fixeaz pe sec)ene specifice de !$% din promotor /i iniiaz
transcripia anumitor gene +n eritro#last2 @7 specifici pentru celulele pancreatice #eta (9$11) se
fixeaz pe sec)enele !1*!5*!6 ale promotorului insulinei
;actorii de transcrip$ie care se fi2ea( pe activatori sau atenuatori ridic o pro#lem
interesant- cum pot controla transcripia unei gene sec)ene situate la mii de p# de gen* +n
amonte sau +n a)al de situsul de iniiere (deci indiferent de orientare) <poteza cea mai
pro#a#il presupune c @7 fixat pe sec)ena acti)ator interacioneaz cu o component a
complexului #azal de trascripie /i determin formarea unei bucle a ADN care aduce cele dou
sec)ene +n strns apropiere (figura F5F #)
56 ,.4A!,.! @,!%0&,<9J<.< &! ,f09;%0 A! 0.M%!A.
.1@,!&.A;A!,. (.19,.0<! <%$;&@<E<Af ! 4.%.A3,)
3 )arietate de mecanisme realizeaz reglarea transcripional ca rspuns la semnale
JL
(stimuli) e2tracelulari% numii generic ligan'i2 ace/tia produc o modificare temporar i
reversibil a transcripiei unor gene (expresia inductibil a genelor) <ndiferent de
mecanism* punctul final +n acest tip de reglare este acela/i- un factor de transcripie iniial
inactiv este acti)at specific de ctre calea de semnalizare /i apoi se fixeaz la sec)enele
36
0e deose#esc patru tipuri de semnalizare celular- (1) 0emnalizarea direct* celul"celul- un semnal de pe
suprafaa unei celule (de exemplu* factor de cre/tere) este fixat de un receptor specific al altei celule2 (5)
0emnalizarea endocrin- Bormonii se fixeaz pe receptori specifici +n celulele int2 (6) 0emnalizarea paracrin-
o molecul eli#erat de o celul (de ex* un neurotransmitor) acioneaz local asupra celulelor )ecine2 (F)
0emnalizarea autocrin- o molecul produs de o celul acioneaz asupra celulei respecti)e
34
reglatoare specifice (numite elemente de r$spuns2 0,.) din promotorul genelor int*
acti)nd transcripia lor 9entru a rspunde imediat la un stimul* factorul transcripional
necesar tre#uie s fie de>a pre(ent &n celul sub o form inactiv !cti)area sa se poate face
prin mai multe procese
a2. Acti#area transcripiei printr-un ligand inducti,il
0controlul hormonal al transcripiei2
Hormonii Bidrofo#i cu molecul mic (de exemplu* Bormonii steroizi) sau unele
morfogene (de exemplu* acidul retinoic) difuzeaz prin mem#rana celulelor"int /i se fixeaz
pe un receptor intracelular* citoplasmatic sau nuclear2 ei funcioneaz ca factori de
transcripie inducti#ili (figura F55) 7ixarea ligandului la receptor produce acti)area lui2
complexul ligand (Bormon) receptor se fixeaz pe !$% la ,. (elementul de rspuns) (4,.*
@,.* .,.* !,.) localizat +n promotorul mai multor gene int /i acti)eaz transcripia lor
,eceptorii steroizi fac parte din superfamilia receptorilor nucleari de hormoni4 !ce/ti
receptori au o structur glo#al identic* fiind alctuii din mai multe domenii- domeniul ! de
lungime )aria#il /i specific de receptor2 domeniul E cu o structur &n degete de (inc% foarte
asemntoare la diferii receptori* prin care receptorul se fi2ea( la ADN2 domeniul &2
domeniul $ (relati) asemntor) unde se fi2ea( hormonul
,2. Acti#area transcripiei prin transducia semnalului.
!numii factori extracelulari (Bormoni peptidici* citoLine* neurotransmitori) pot
declan/a transcripia unor gene fr a intra +n celule (nu pot trece prin mem#rana plasmatic)
.i se fixeaz pe un receptor specific de pe suprafaa celulei (cu acti)itate Linazic sau care
poate acti)a Linaze intracelulare) care* dup fixarea ligandului* +/i scBim# conformaia
spaial /i de)ine acti)2 +n aceast stare el transmite semnalul ligandului altor molecule din
celul 9rin acti)area transcripiei unor gene specifice* acest proces* numit transducia
semnalului, >oac un rol important +n controlul di)iziunii celulare* cre/terii /i diferenierii
.xist dou mecanisme posi#ile de transducie-
Eransduc$ia direct cnd receptorul (`cu un pasa> mem#ranar) dotat cu acti)itate tirozin"
Linazic (recepor ,@:) recunoa/te semnalul extracelular /i +l traduce el &nsui* declan/nd
autofosforilarea unei molecule de tirozin (@Sr) din segmentul su intracitoplasmatic2
Eransduc$ia indirect +n care receptorul (`cu /apte pasa>e mem#ranare) este cuplat cu un
o protein care* prin interaciuni cu alte proteine* transmite semnalul efectorului* +n cazul
de fa unui factor de transcripie inacti)* situat +n citoplasm sau nucleu
012. Calea direct$ de transmitere a semnalului prin cascada 1ina'elor
,eceptorul ,@: (receptor cu acti)itate TSr"1inaz) este alctuir dintr"un domeniu
extracelular care are situsul de recunoa/tere al ligandului* un domeniu transmem#ranar /i un
domeniu intracitoplasmatic dotat cu proprieti enzimatice de @Sr"Linaz .xist o mare
di)ersitate de ,@: dintre care +n figura F56 sunt reprezentate cele mai importante clase
(receptorii pentru .47* <nsulin* 9$47* 747)
7ixarea unui ligand pe receptorul (cu un pasa> mem#ranar) acestei ci declan/eaz o
serie de reacii intracelulare +n lan care )or duce +n final la transcripia genelor implicate +n
di)iziunea celular (figura F5O) 7ixarea ligandului produce o dimeri(are a ,@: care
stimuleaz acti)itatea @: intrinsec receptorului /i declan/eaz autofosforilarea Eyr situat +n
domeniul intracitoplasmatic @Sr fosforilat este recunoscut de proteina
6O
'D6= (de la
gro"th factor receptor bound) legat cu proteina ?)?2 'D6= este deci un adaptor +ntre ,@:
/i ?)?2 care poziioneaz o protein ?)? 9roteina ?)? este acum poziionat la extremitatea
su#stratului su* care este proteina A=, (codificat de gena DA?)% o protein ancorat pe faa
37
.ste )or#a de un tip special de proteine * cu domenii 085C086 care au ni/te `#uzunare ce recunosc specific o
@Sr fosforilat
35
intern a mem#ranei celulare2 sos faciliteaz astfel acti)area A=, DA?3'DA 9roteina DA?*
acti)at prin legarea cu 4@9 (graie lui 030)* poate aciona asupra mai multor tipuri de
efectori2 cel mai cunoscut este Linaza DA;3, care (su# aciunea 951",!0"4@9) sufer o
modificare a localizrii sale (o translocare)* a>ungnd +n contact cu mem#rana celular*
fosforilat /i acti)at .a )a determina activarea &n cascad a altor Linaze* M.: /i M!9: ?n
final M!9: acti)at este translocat +n nucleu unde fosforileaz mai muli factori de
transcripie ca fos, Jun, mKc, care )or controla e2presia genelor implicate &n divi(iunea
celular4
$e precizat c domeniul citoplasmatic al ,@: posed mai multe molecule de Eyr care
se pot autofosforila independent2 aceasta )a face ca fiecare molecul @Sr fosforilat s fie
recunoscut de alt protein (diferit de 4,E5) producnd rspunsuri biologice diferite +n
tipuri celulare diferite <n)ers* dou ,@: diferite (de ex* .47", /i 9,47",) pot a)ea o
aceia/i molecul @Sr ce se )a fosforila* acti)nd o aceea/i cale de semnalizare
0<2. Calea direct$ de transmisie a semnalului prin 1ina'a LMa1H
8N
3 cale mai scurt de transmisie a semnalului (folosit de unii factori de cre/tere sau
citoLine) implic proteinele UAV (figura F58) 7ixarea ligandului la ,@: acti)eaz UAV,%o
@Sr"Linaz citoplasmatic* care la rndul ei fosforileaz o @Sr a unui factor de transcripie
?EAE (de la signal transducer and activator of transcription) !cest factor acti)at patrunde +n
nucleu /i stimuleaz transcripia unor gene* +n special a genei c-fos.
082. Calea indirect$ de transmitere a semnalului, prin receptorii de suprafa$ cu -apte
pasaJe mem,ranare, cuplai cu proteine !
&ea mai mare familie de receptori mem#ranari (cte)a sute) este constituit din
receptorii cu /apte pasa>e transmem#ranare (receptori pentru proteine* amine* cationii de &a
==
*
fotoni etc) 0egmentele transmem#ranare delimiteaz o ca)itate unde se gase/te de o#icei
situsul de legare ,eceptorii sunt cuplai cu intermediari (de o#icei proteine '
heterotrimerice) +ntre receptorul care prime/te semnalul /i efectorul (factorul de transcripie
inacti)) responsa#il de aciune (,o##ell /i 4ilman* 9remiul %o#el 1PPF)
!cti)area transcripiei pe aceast cale folose/te dou mecanisme ce permit
transmiterea rapid a semnalului de la receptorii de suprafa la nucleu* am#ele implicnd
fosforilarea proteinelor
?n primul mecanism* receptorul cuplat cu o protein 4 (de la !@9G#inding regulatorS
proteins) acti)eaz anumite protein Linaze care apoi sunt translocate din citoplasm &n
nucleu unde fosforileaz factorii de transcripie int .xemplul cel mai edificator este
semnali'area hormonal$ pe cale AM% ciclic4
9rin fixarea Bormonului la receptorul cuplat cu proteina 4 (Beterotrimeric " d*U*V" +n care su#unitatea d este
legat la 4$9) se produce o modificare conformaional care permite acti)area /i disocierea su#unitii d a
proteinei 4 (figura F5P !)2 su#unitatea d=4@9 )a acti)a adenilat"ciclaza* fixat de mem#ran* care )a
sintetiza (din !@9) !M9 ciclic* mesagerul secund al diferitor Bormoni /i altor molecule de semnalizare
!M9c )a acti)a* prin intermediul protein Linazei !* un factor specific de transcripie* &,.E (de la &,."
#inding protein)* care se )a fixa pe elementul de rspuns al !M9c numit &,. si situat +n promotorul unor
gene* declan/nd transcripia lor
?n al doilea mecanism* factorii de transcripie inactivi se gsesc &n citoplasm /i* dup
acti)area lor prin fosforilare* ei sunt translocai +n nucleu* unde declan/eaz transcripia
;n exemplu pentru acest mecanism este activarea N;36 pe calea de semnali(are a
protein ina(ei < (figura F5P E)
%7"LE este un factor de transcripie implicat +n acti)area diferitelor gene ale imunitii* care se gse/te +n
citoplam su# form inacti) datorit cuplrii cu <LE $up fixarea ligandului (un factor de cre/tere) la un
receptor cuplat cu o protein Linaz se produce acti)area fosfolipazei &* legat /i ea la receptor*care
con)erte/te apoi 9<95 (fosfatidilinositol #ifosfat) +n <96 (inositol"trifosfat) /i diacilglicerol $iacilglicerolul
38
$enumirea `a!: pro)ine de la `aanus Linase /i face aluzie la aanus* zeul roman cu 5 fee* care era zeul
porilor
36
)a acti)a protein Linaza & care la rndul ei acti)eaz %7"LE (prin degradarea <LE) care este translocat +n
nucleu /i acti)eaz transcripia unor gene int

5F 0.A.&@!,.! 9,3M3@3,<A3,
;nele gene umane au doi sau mai muli promotori /i prin folosirea lor alternati) se
pot produce diferite isoforme ale unei proteine* cu proprieti diferite- sinteza +n esuturi
diferite sau perioade diferite de dez)oltare* localizarea su#celular sau capacitatea funcional
)ariat 9romotorii au fore inegale* determinnd tipul /i cantitatea de mesager transcris
!legerea promotorilor nu se face la +ntmplare ci prin aciunea unor factori trans"regulatori*
dintre care unii sunt specifici unui esut2 acest fapt explic de ce unele esuturi exprim un tip
de mesager iar alte esuturi un alt tip (exemplu* d"amilaza2 figura F6I) ;n exemplu frec)ent
citat de selecie a promotorilor pri)e/te gena gigant a distrofinei (5F M#2 OP exoni) care are
cel putin opt promotori2 patru sunt situai +n regiunea reglatoare 5Z /i sunt specifici pentru
cortexul cere#ral* mu/cBi* cere#el* limfocite2 se produc patru isoforme mari de distrofin*
diferite prin captul amino"terminal* datorit folosirii alternati)e a exonului 1 !li patru
promotori sunt interni* +n structura zonei centrale a genei2 transcripia care +ncepe de la
ni)elul acestor promotori )a folosi numai o parte din exoni* rezultnd isoforme mici de
distrofin* prezente +n rinicBi* retin* celulele 0cBDann
3. REGLAREA POSTTRANSCRIPIONAL.
,eglarea expresiei genelor se poate face /i prin mecanisme ce pot inter)eni post"
transcripional* modificnd calitati) sau cantitati) formarea !,%m matur Mai frec)ent este
)or#a de matisarea sau poliadenilarea alternati) prin care o gen codific mai multe proteine2
mai rar se +ntlne/te editarea !,% !ceste mecanisme* deseori com#inate* implic
recunoa/terea unor sec)ene specifice din !,% de ctre proteine sau molecule de !,%
reglatoare Hom prezenta cte)a din mecanismele mai cunoscute
61 M!@<0!,.! !A@.,%!@<Hf 0!; $<7.,.%J<!Af
<n procesul de maturare celula* printr"un mecanism 'de alegere' (ce implic factori de
transcripie specifici de esut)* elimin din !,%m precursor nu numai intronii* ci /i unii exoni
codani2 prin acest proces de matisare /iCsau poliadenilare alternati)* dintr"un transcript
primar se formeaz mai multe molecule diferite de !,%m matur /i* prin translaie* aceea/i
gen poate produce mai multe proteine diferite (figura FP) ;neori acestea au funcii analoge
(sunt "isoforme")* a/a cum este cazul genei mielinei* sau cu localizri tisulare sau
intracelulare diferite (genele pentru imunoglo#ulina M* tropomiosina* receptorul Bormonului
de cre/tere* eritropoietina etc). !lteori se produc proteine complet diferite ca structur /i
funcie2 exemplul de>a clasic este reprezentat de gena calcitoninei care* +n celulele & din
tiroid produce calcitonina (un Bormon ce asigur Bomeostazia &
5=
circulant) iar +n
Bipotalamus* un peptid &nrudit cu calcitonina (&4,9)* cu funcii neuromodulatoare /i trofice
7enomenul de selecie a exonilor Cmatisare alternati) se +ntlne/te la numeroase gene umane*
explicnd pro#a#il c prin utilizarea a circa 65III de gene se pot sintetiza peste 1IIIII de
tipuri diferite de proteine 9entru moment mecanismele de control al acestui proces nu se
cunoa/te prea #ine2 inter)in pro#a#il regulatori ai matisrii* proteine din familia 0, (ce conin
un domeniu de fixare la !,%* alctuit din serin"arginin) sau ri#onucleoproteine nucleare
Beterogene (!,%Bn) 0pecificitatea tisular a acestui proces implic existena cert a unor
molecule reglatoare diferite
65 93A<!$.%<A!,.! !A@.,%!@<Hf
%umeroase gene conin la ni)elul regiunii lor 6Y;@, dou sau mai multe semnale de
poliadenilare /i* ca urmare* pot suferi procese de adenilare alternati)* cu specificitate tisular
37
<n alte cazuri* matisarea alternati) poate sa e)identieze un asemenea situs alternati) de
adenilare (ca +n cazul genei pentru calcitonina si &4,9 mentionat anterior)
66 M3$<7<&!,.! 0@,;&@;,<< 9,<M!,. ! !,% m (!DNA CD+E+N')
.ditarea !,% este o form rar de procesare post"translaional a !,%m +n care se
produc modificri enzimatice specifice (su#stituia* inseria sau deleia) unui nucleotid Aa om
au fost descrise- su#stituia & ( ; (+n gena pentru apolipoproteina E)* su#stituia ! ( <
(<nositol) (+n gena pentru receptorul glutamat E)* su#stituia ; ( & (+n gena b@1) ?n felul
acesta* acela/i !,%m* +n esuturi diferite* poate suferi o modificare a structurii primare
producnd proteine diferite prin lungimea lor 0pre exemplu* !,%m pentru apolipoproteina E
produce +n ficat Apo-B1?? /i +n intestinul su#ire o protein mai mic* Apo-B4N* care are o
sec)en de aminoacizi identic cu prima parte a !po E"1II2 explicaia acestei translaii
diferite este 'simpl'- +n intestin* +n codonul 5155 al !,%m* & este +nlocuit cu ; /i aceast
modificare transform codonul sens +ntr"un codon stop /i opre/te translaia !,%m la amino
acidul F8
6F M3$<7<&!,.! 0@!E<A<@fJ<< ($;,!@.< $. H<!Jf) ! !,% m
<ntensitatea sintezei unei proteine depinde de concentraia (cantitatea) !,%m
corespunztor iar aceasta de durata lui de )ia $e exemplu* !,%m produs de genele c3
*W< sau c3;)? are o sta#ilitate anormal crescut /i determin o sintez excesi) a
proteinelor corespunztoare* care intensific proliferarea celular &re/terea sta#ilitii este
determinat de lungimea sec)anei poliadenilice din regiunea 6Y ;n alt exemplu- sinteza de
histone este intens +n timpul replicrii !$% /i foarte sczut +n alte momente din )iaa
celulei2 acest fenomen este rezultatul modificrii sta#ilitii mesagerului pentru Bistone
65 M3$<7<&!,.! 0@3&!a;A;< !,% m
0toca>ul post"transcripional al moleculelor de !,%m +n nucleu sau +n citoplasm /i
distri#uia C disponi#ilitatea lor +n momentul translaiei este cert o modalitate de reglare a
sintezei proteinelor $e exemplu* unii stimuli Bormonali pot produce o intensificare rapid a
sintezei de proteine prin eli#erarea !,%m de>a stocat /i nu prin stimularea transcripiei
Mecanismele prin care se "decide i se reali(ea(" stocarea anumitor mesageri nu sunt
cunoscute
66 <%@.,H.%J<! M3A.&;A.A3, $. !,% <%@.,7.,.%@ (!,%i)
&onform 'dogmei centrale' a geneticii emis in anii Y5I* fluxul informaiei genetice se
desfa/oara +n directia !$% (!,%(proteine $e atunci* numeroase studii au do)edit c
!,% este mai mult decat un simplu intermediar 7oarte recent au fost descrise +ns cte)a
clase de molecule !,% care ar putea modifica complet )iziunea asupra acestor molecule
&onform unor date ma>oritatea moleculelor de !,% sunt 'actori principali' +ntr"o ade)arat
reea molecular implicat +n reglarea expresiei genice 9rintre asemenea clase noi de
molecule !,% fac parte /i moleculele de !,%i (interferent) .le sunt codificate de gene care
pot a)ea di)erse localizari cromosomice /i* odat transcrise* adopt o conformaie #icatenar
0u# aciunea unor enzime (precum enzima Dicer) asemenea molecule de !,% #icatenar sunt
fragmentate +n piese scurte de 51"56 nucleotide* monocatenare* care se pot fixa pe #aza de
complementaritate la moleculele de !,%m !tunci cand complementaritatea este perfect*
rezultatul poate fi impiedicarea translaiei &nd legturile pe #az de complementaritate sunt
imperfecte efectul de inBi#iie a translaiei poate fi redus sau nul 9rima gen din acesata clas
a fost identificat la om +n anul 5III (gena A.@"O)* iar analiza sec)enei sale a permis
e)idenierea rapid a mai multor gene identice la ni)elul ctor)a cromosomi
4. REGLAREA TRANSLAIONAL.
38
F1 ,.4A!,.! @,!%0A!J<3%!Af &! ,f09;%0 A! !&J<;%.! ;%3,
7!&@3,< .1@.,%<
.xist cu certitudine o reglare translaional a sintezei de proteine dar aceasta este
puin cunoscut 9ro#a#il c unele mecanisme care produc acest tip de reglare influeneaz
stoca>ul mesagerilor* descris mai sus !lte mecanisme implic recunoa/terea specific a unor
sec)ene cis3reglatoare din regiunile netranslate 5Z;@, sau 6Z;@, din !,%m* de ctre
anumite proteine trans3reglatoare &el mai cunoscut exemplu de reglare translaional este
reglarea sintezei de feritin (protein ce fixeaz /i transport 7e
5=
) +n funcie de ni)elul
fierului- cre/terea ni)elului de fier stimuleaz producia de feritin /i in)ers ?n regiunile
5Z;@, /i 6Z;@, se gse/te un element cis3reglator (+n form de ac de pr)* numit <,. (de
la <ron ,esponse .lement)* pe care +n a#sena 7e
5=
se fixeaz o protein ce opre/te temporar
sinteza pe matria de !,% /i o prote>eaz
;n alt mecanism de reglarea a translaiei implic modularea activit$ii unor factori de
ini$iere ai transla$iei* precum <7"5 <7"5 acti)at prin cuplarea sa cu 4@9 are rolul de a fixa
prima molecul de !,%t (metionil"!,%t) la ni)elul ri#osonului .li#erarea sa ulterioara este
insoit de Bidroliza 4@9* cu transformarea consecuti) +n 4$9 9entru a participa la un nou
ciclu de initiere* este ne)oie de scBim#ul 4$9 cu o noua molecul de 4@9 !cest ni)el s"a
do)edit a fi un punct critic de reglarea a translaiei +n o serie de celule 7osforilarea <7"5
#locBeaza 4$9 /i impiedic scBim#ul su cu 4@9 ;n tip de celula +n care apare aceasta
fosforilarea este reticulocitul* celula dedicat in principal sintezei Bemoglo#inei !tunci cnd
cantitatea de Bem nu este suficienta* este acti)at o proteinLinaz care induce fosforilarea <7"5
/i #locBeaz astfel translaia
!u fost e)ideniate /i alte ni)eluri la care poate inter)eni reglarea translaional*
precum factorul de iniiere <7"F. care se leag la structura 'cap' a !,%m
F5 &3%@,3A;A @,!%0A!@<3%!A !A .19,.0<.< 4.%<&. <% &;,0;A
$._H3A@!,<< .ME,<3%!,. 9,.&3&.
Aungimea cozii poliadenilice are un rol important +n cursul dez)oltrii em#rionare
precoce $upa fertilizare* nici o molecul de !,%m nu este nou sintetizat pn +n stadiul de
em#rion cu F"8 celule ?n citoplasma o)ocitului se gasesc numeroase molecule de !,%m de
origine matern care au o coada poliadenilic scurt* de aproximati) 5I nucleotide !ceste
molecule sunt doar stocate* iar translaia lor +n cursul unor faze specifice ale dez)oltarii este
consecina unor mecanisme care implic adiia a noi adenine numai +n cazul +n care sunt
identificate +n amonte sec)ene poliuridilice specifice* precum /i interaciunea acestei cozi cu
o serie de proteine specifice
F6 A3&!A<_!,.! <%@,!&.A;A!,f ! !,%m
!numite sec)ene ale !,%m localizate la ni)elul extremitilor 5Y si 6Y (regiunile
;@,) pot determina localizarea intit a acestor molecule la ni)elul anumitor compartimente
ale celulelor ;n asemenea mecanism pare a fi mai eficient dect intirea ulterioar a
proteinelor prin ata/area unor sec)ene semnal- o singur molecul de !,%m poate fi
suficient pentru sinteza a mii de molecule proteice +n compartimentul celular dorit
!semenea mecanisme au fost descrise +n special +n cazul unor celule cu dimensiuni
considera#ile* precum neuronii $e exemplu* moleculele de !,%m pentru proteina mielinica
#azicsunt transportate cu a>utorul Linezinei direct la ni)elul prelungirilor oligodendrocitelor2
!,%m pentru proteina tau sunt transportate direct la ni)elul protiunilor proximale ale
axonilor
.4TE"4ET
1. $icionar de #iologie celular- Bttp-CCDDD mla#glaacuLC >ulianC$ictBtml
39
2. 4enetic medical " ;ni)ersitS of ;taB 0cBool of Medicine- Bttp-CCmedgengeneticsutaBedu
3. 4ene amprentate2 Bttp-CCDDDmguBarmrcacuLCimprinting
4. 9rincipii de genetic "<ndiana ; ni)ersitS EiotecBnologS- Bttp-CC#iotecBcBemindianaedu
5. %ational 8uman 4enome ,esearcB <nstitut- Bttp-CCDDDnBgri niBgo)
6. %ational &enter for EiotecBnologS <nformation- - Bttp-CCDDDnc#i nlm niBgo)
7. bBiteBead 4enome <nstitute at tBe MassacBusetts <nstitute of @ecBnologS- Bttp-CCDDD"genomeDimitedu
Bi,liografie specific$ selecti#$
1.!LasBi 8 'ene e2pression and molecular evolution &urr 3pin 4enet $e)* 5II1211-
66I"666
2.Eass EA DNA editing by adenosine deaminases that act on DNA !nnu ,e) EiocBem*
5II52O1-81O"8F6
3.Eird* ! DNA methylation patterns and epigenetic memory 4enes $e)* 5II5216- 6"51
4.Erannan &<* Eartolomei M0 *echanisms of genomic imprinting4
&urr3pin4enet$e)* 1PPP2 P-16F"1OI
5.$aS $!* @uite M7 Aost3transcriptional gene regulatory mechanism in euaryote7 on
overvie"4 a.ndocrinol* 1PP82 15O-661"6O1
6.$e)er @. 'ene3specific regulation by general translation factors4 &ell 5II521I8-5F5"
556
7.8annon 4a DNA interference %ature* 5II52F18-5FF"551
8.8artl 7;* 8aSer"8artl* M *olecular chaperones in the cytosol7 from nascent chain to
folded protein 0cience 5II525P5-1855"1858
9.8irose K* ManleS A DNA polymerase ++ and the integration of nuclear events 4enes
$e)elop* 5III21F-1F15"1F5P
10.aenuDein @* !llis &$ Eranslating the histone code 0cience 5II125P6-1IOF"1O8I
11.aones 9! Ehe DNA methylation parado24 @rends 4enet* 1PPP215-6F"6O
12.:olman a!* 0temmer* b9 Directed evolution of proteins by e2on shuffling %at
EiotecBnol* 5II121P-F56"F58
13.:2ein>an $a* )an 8eSningen H Aosition effect in human genetic disease4
8umMol4enet* 1PP82O-1611"1618
14.Ai . <hromatin modification and epigenetic reprogramming in mammalian
development %at ,e) 4enet* (5II5) 6* 665"6O6
15.ASon M7 O3chromosome inactivation4 &urrEiol* 1PPP2 P-,565"56O
16.9aulsen M* 7erguson"0mitB !&4 DNA methylation in genomic imprinting % development
and desease4 a 9atBol* 5II121P5- PO"11I
17.,o#erts 4&* 0mitB &b Alternative splicing7 combinatorial output from the genome
&urr 3pin &Bem Eiol* 5II52 6-6O5"686
18.@ilgman 0M Ehe sins of the fathers and mothers7 genomic imprinting in mammalian
development &ell* 1PPP2 P6-185"1P6
40