n mod particular, au fost dezvoltate vaccinurile subunitare ca o alternativ la

vaccinurile convenionale bazate pe virusuri vii sau pe microorganisme patogene active. S-a
dovedit c rspunsul imun al unui organism fa de un anumit patogen poate fi indus prin
utilizarea unor polipeptide similare celor din structura epitopilor
1
agenilor etiologici (Vior,
2000). Din vreme ce aceste vaccinuri subunitare sunt bazate pe molecule non-infecioase, cum
ar fi proteine sau polipeptide, acestea sunt sigure.
Vaccinul subunitar ideal ar trebui s fie eficient, producerea sa s nu aib cost ridicat,
uor de depozitat i transportat i aplicabil pe cale oral. Dei vaccinurile subunitare care se
administreaz pe cale oral au avantajul mijlocului de administare care este foarte simplu,
totui unul din dezavantajele majoritii vaccinurilor administrate pe cale oral l reprezint
necesarul unei cantiti relativ mari n comparaie cu vaccinurile parenterale. n mare parte ,
aceast cantitate mare este necesar deoarece vaccinurile vor fi expuse mediului acid i
proteolitic de la nivelul tractului digestiv. Prin urmare, producia de sisteme care vor furniza
pregtirea vaccinurilor administrate pe cale oral convenabile din punct de vedere comercial
reprezint o provocare. Acest lucru este valabil mai ales n cazul rilor srace unde costul
vaccinurilor este mare i mpreun cu lipsa unor infrastructuri adecvate n serviciul sanitar,
mpiedic punerea n aplicare a programelor de imunizare n mas. Programele de vaccinri la
nivel mondial vor necesita modificri n modul n care vaccinurile sunt produse, distribuite i
administrate.
n scopul de a satisface unele dintre aceste provocri, Arntzen i colab. (Arntzen,
1998) au introdus conceptul de plante transgenice ca sisteme de producie i de livrare a
vaccinurilor subunitare. Acest concept se bazeaz pe generarea de plante care s aib gena de
interes a vaccinului integrat n genom. Exist mai multe puncte de atracie cu privire la
utilizarea plantelor transgenice n producia de vaccinuri sau de proteine terapeutice.
n primul rnd, producia ar putea fi la scar agricol pentru a permite dezvoltarea la
scara larg i cu un cost de producie sczut. Deoarece plantele sunt una dintre cele mai ieftine
surse de proteine, ele sunt, de asemenea o potenial surs ieftin de proteine recombinante.
Generarea plantelor transgenice a devenit n prezent o rutin i milioane de hectare de culturi
transgenice alimentare i nealimentare sunt cultivate n ntrega lume.
n al doilea rnd, seminele liniilor de plante transgenice ar putea oferi un mijloc
simplu de distribuire a culturilor transgenice n ntreaga lume, unde ar putea fi cultivate n
infrastructura agricol deja existent. Pentru vaccinurile administate pe cale oral, utilizarea
culturilor transgenice comestibile pot simplifica foarte mult administrarea. Un avantaj n plus
oferit de producerea vaccinurilor subunitare utiliznd plantele transgenice este reprezentat de
lipsa contaminrii cu patogeni animali sau produse de origine animal. Absena garantat a
contaminrii cu virusuri patogene fiind unul dintre avantajele cele mai importante oferite de
vaccinurile produse de plante.


1
Epitopi parte a moleculei de antigen la nivelul creia se leag anticorpul specific, fiind determinat antigenic,
sunt gruprile unui antigen care sunt recunoscute de organism ca non-self.
Producerea vaccinurilor orale n plantele transgenice

Gena de interes care codific antigena este izolat din agentul patogen i poate fi
manipulat n dou moduri diferite:
- virusul adecvat plantei este modificat genetic astfel nct s exprime
proteinele/peptidele de interes. Virusul recombinant este apoi inoculat n plant.
Un numr mare din acest tip de plante sunt cultivate i din acestea virionul himeric
este extras i purificat. Vaccinurile comestibile rezultate din plante sunt utilizate n
scop imunologic.
- ntr-o alt abordare, gena de interes este integrat cu ajutorul unui vector prin
transformare. O varietate de tehnici au fost folosite pentru a introduce gena de
interes n celula vegetal.

Aceste tehnici ar putea fi grupate n urmtoarele categorii:
1. Transferul de gene mediat de Agrobacterium. Bacteriile Agrobacterium tumefaciens i
Agrobacterium rhizogenes realizeaz ceea ce adeseori numim inginerie genetic
natural. Aceste bacterii sunt capabile s transfere n esutul vegetal, un fragment de
ADN-ul propriu, ADN-T de pe plasmida Ti (tumor inducing) n cazul Agrobacterium
tumefaciens sau Ri (root inducing) n cazul speciei Agrobacterium rhizogenes, care se
integreaza n genomul plantei. Ca urmare bacteria A. tumefaciens determin formarea
tumorilor la nivelul coletului iar A. rhizogenes determin formarea de rdcini firoase.
Astfel, gena corespunztoare este introdus n regiunea T a plasmidului Ti slbit de
Agrobacterium. ADN-ul recombinant este introdus n Agrobacterium; un agent
patogen care este co-cultivat cu celulele plantelor sau esuturi pentru a fi transformate.
Dezavantajul acestei metode este faptul c are randament sczut iar procesul este lent.
Aceast metod a funcionat cel mai bine pentru plantele dicotiledonate cum ar fi
cartofii, roii, tutun.
2. Transformarea biolistic sau particle gune o metod ce utilizeaz microproiectile de
tungsten sau de aur coloidal care sunt acoperite cu ADN i propulsate n celulele int
prin acceleraie. Celulele vegetale care preiau ADN-ul sunt lsate s creasc formnd
plante noi, care apoi sunt clonate pentru a produce un numr mare de culturi identice
genetic. Aceast metod este destul de atractiv deoarece ADN-ul poate fi administrat
n celulele plantelor care fac transferul genelor independent de abilitatea de regenerare
a speciilor.
Electroporare aici are loc introducerea ADN-ului n celule prin expunerea acestora pentru o
scurt perioad de timp la un impuls electric de nalt tensiune pentru a induce pori tranzitorii
n plasmalem. Peretele celular prezint o barier eficient pentru ADN, prin urmare, acest
rezisten trebuie slbit prin tratamente enzimatice uoare, care s permit ptrunderea ADN-
ului n citoplasma celulei