Curs Biofizica MG 2010-2011 Elemente de fotobiologie

1

Radiaii. Noiuni generale. Elemente de fotobiologie

Radiaie = propagarea n spaiu a unor cmpuri de fore sub form de unde sau a
unor fluxuri de particule.

Clasificarea radiaiilor
Se face dup mai multe criterii:
1. n funcie de natura lor:
- Radiaii electromagnetice (EM) propagarea sub form de unde transversale a
undelor electromagnetice
- Elastice: propagarea sub form de unde longitudinale a vibraiilor unui mediu elastic
- Corpusculare: fascicule de particule de mare energie
2. n funcie de energie, n raport efectul lor asupra substanei cu care interacioneaz:
- Ionizante cele care sunt capabile s produc ionizarea, datorit energiei mari
- Neionizante radiaii de energie mic, incapabile s produc ionizarea.

Dualismul und - corpuscul
Unda reprezint propagarea n spaiu a variaiei unui parametru fizic. Poate fi
declanat de o micare oscilatorie a unor particule materiale, dar se propag n spaiu la
distan, particulele rmnnd s oscileze n jurul unor poziii fixe. Prin intermediul
interaciunilor fizice specifice, unda determin micri oscilatorii sau alte efecte asupra
particulelor aflate n calea ei.
Undele pot fi transversale (oscilaia se propag perpendicular pe direcia de naintare
a undei; de exemplu lumina und electromagnetic transversal) sau longitudinale
(oscilaia se propag paralel cu direcia de naintare a undei; de exemplu unda sonor
und mecanic longitudinal). Viteza de propagare a undei difer de viteza de oscilaie a
particulelor materiale.
Pornind de la incapacitatea fizicii clasice de a explica unele fenomene, de exemplu
efectul fotoelectric sau radiaia corpului negru, fizica cuantic modern asociaz fiecrei
unde o particul fr masa de repaus (fotonul pentru unda electromagnetic) dualitatea
und - corpuscul. Manifestrile ondulatorii sunt evidente la frecvene joase, cele corpusculare
la frecvene nalte.


Interaciunea radiaiilor cu substana
La interaciunea cu substana, radiaia cedeaz o parte din energia sa, n general
conform unei legi de absorbie exponeniale:

I = I
0
e
-kd

unde I
0
reprezint intensitatea incident, I intensitatea emergent, d grosimea stratului de
substan strbtut, k coeficient specific de atenuare (acesta depinde de natura radiaiei i
de caracteristicile substanei)
Energia cedat se transform n alte forme de energie, producnd efecte diferite cu
att mai importante cu ct energia absorbit de substan este mai mare.
Interaciunea radiaie - substan se realizeaz la diferite nivele de organizare a
materialului absorbant:
- La nivel molecular efecte termice, excitri vibraionale i rotaionale ale moleculelor,
reacii chimice;
- La nivel atomic, producnd excitri ale ionilor sau ionizri;
- La nivel nuclear excitri ale nucleului sau declanarea unor reacii nucleare.
Curs Biofizica MG 2010-2011 Elemente de fotobiologie
Generarea i propagarea radiaiilor electromagnetice
Radiaiile electromagnetice pot fi produse de micri oscilatorii ale unor sarcini
electrice. Cmpul electrostatic produs n jurul unei sarcini electrice Q, aflate n repaus, la
distana r are valoarea:
2
4 r
Q
E

=
n cazul n care sarcina efectueaz o micare oscilatorie, intensitatea cmpului electric
variaz. Simultan, datorit sarcinii electrice n micare apare i un cmp magnetic a crui
inducie B este orientat perpendicular pe directia cmpului electric E. Prin urmare, o sarcin
electric oscilant creeaz un cmp electric i un cmp magnetic reciproc perpendiculare.
Maxwell a artat c cele dou cmpuri se propag n spaiu cu vitez constant (viteza
luminii n vid) pe o direcie perpendicular pe cei doi vectori (Fig. 1) und electromagnetic
transversal.

Parametrii caracteristici undelor electromagnetice transversale
Mrimile caracteristice undelor sunt perioada T (timpul dup care oscilaia se repet),
lungimea de und (spaiul parcurs ntr-un interval de timp egal cu o perioad T) i frecvena
(inversul perioadei T). Relaiile care exist ntre mrimile caracteristice undelor sunt
urmtoarele:

unde c reprezint viteza de propagare a undei.
Undele electromagnetice sunt unde transversale care au component magnetic i o
component electric, vectorii electric i magnetic fiind perpendiculari unul pe cellalt i pe
direcia de propagare (Fig. 1). Din punct de vedere al caracteristicilor ondulatorii spectrul
radiaiilor electromagnetice se ntinde de la undele radio lungi caracterizate prin frecvene
mici i lungimi de und mari (km) pn la razele de mare energie, de frecvene mari i
lungimi de und mici () (Fig. 2). Conform relaiei lui Planck, energia unei unde
electromagnetice este:
E = h = hc/

unde h = 6,62 10
-34
Js, constanta lui Planck, iar c = 3 10
8
m/s, viteza luminii n vid.


Fig. 1 Componentele undei electromagnetice transversale

2
Curs Biofizica MG 2010-2011 Elemente de fotobiologie

Fig. 2 Spectrul radiaiilor electromagnetice


Clasificarea radiaiilor electromagnetice
Din punct de vedere al energiei transportate, radiaiile electromagnetice se clasific n:
I. Radiaii neionizante
II. Radiaii ionizante
La interacia cu substana, radiaiile electromagnetice cedeaz energie atomilor i
moleculelor. Efectele interaciei pot fi:
- creterea energiei de agitaie termic a atomilor i moleculelor
- excitarea atomilor i moleculelor (electronii ce intr n alctuirea acestora pot trece
pe nivele de energie superioare, tranziiile fiind cuantificate)
- ionizarea atomilor i moleculelor (extragerea electronilor din nveliurile electronice
ale acestora).


Elemente de fotobiologie
Fotobiologia studiaz interaciunea radiaiilor electromagnetice neionizante cu
sistemele biologice.
Energia de ionizare a principalilor atomi care intr n structura biomoleculelor este:
13,54 eV pentru hidrogen, 13,17 pentru oxigen, 11,24 pentru carbon i 14,51 pentru azot
(1 eV = 1,6 10
-19
J). Se observ c energia cea mai mic de ionizare este cea pentru carbon.
Se poate calcula lungimea de und a radiaiei care are energia suficient pentru a produce
ionizarea carbonului:
E = hc/ = hc/E = 6,62 10
-34
3 10
8
/11,241,6 10
-19
= 110 nm
n spectrul radiaiilor electromagnetice, numai radiaiile X i ndeplinesc condiia ca
lungimea de und s fie mai mic de 100 nm, deci numai acestea pot produce ionizri ale
principalilor atomi din componena materiei vii. De aceea, radiaiile X i se numesc radiaii
ionizante. Radiaiile cu lungimea de und mai mic de 100 nm , ncepnd cu UV (radiaii
ultraviolete) extrem (100-190 nm) i mergnd spre undele radio lungi sunt radiaii
neionizante.
Radiaiile neionizante din domeniul radiaiilor vizibile i ale celor cu lungimi de und
apropiate de acestea i interacia lor cu substana constituie obiectul de studiu al
3
Curs Biofizica MG 2010-2011 Elemente de fotobiologie
4
fotobiologiei. Ele sunt radiaii cu care aproape toate sistemele vii convieuiesc i sunt
absorbite selectiv de ctre moleculele componente ale sistemelor vii.


Interaciunea radiaiilor neionizante cu substana
Se realizeaz prin:
1. Transferul energiei undelor electromagnetice ctre molecule. Energia total a acestora va
crete:
E = E
e
+ E
v
+ E
r
E
e
energia electronilor
E
v
energia de vibraie
E
r
energia de rotaie
Prin creterea energiilor de rotaie i vibraie are loc nclzirea substanei (creterea agitaiei
termice):
E = E
v
+ E
r
Radiaiile infraroii (IR) pot mri numai energiile de vibraie i rotaie ale moleculelor,
pe cnd radiaiile ultraviolete pot mri toate tipurile de energie.

2. Transferul energiei undelor electromagnetice ctre electronii periferici ai atomilor i
moleculelor, (Ee. Prin acest transfer se produce excitarea atomilor i moleculelor, respectiv
trecerea lor pe nivele de energie superioare. Conform principiului de incertitudine al lui
Heisenberg, electronii nu pot rmne mult timp n stare excitat (10
-8
10
-6
s n starea de
singlet cu spinii orientai antiparalel i 10
-3
100 s n starea de triplet cu spinii orientai
paralel). Dup aceste interval de timp, electronii se dezexcit, iar dezexcitarea poate fi de
dou feluri:
a dezexcitare radiativ
b dezexcitare neradiativ.
Dezexcitarea radiativ este numit i fotoluminescen. Absorbia fotonului este
urmat de emisia unui foton cu o lungime de und mai mare sau egal cu cea a fotonului
absorbit. Exist dou tipuri de fotoluminescen: fluorescena (reemisia din starea singlet) i
fosforescena (reemisia din starea triplet). Atunci cnd lungimea de und n reemisie este
egal cu cea a fotonului absorbit, fluorescena se numete de rezonan. Durata
fluorescenei este foarte mic, practic emisia se face n acelai timp cu excitarea. n
fosforescen emisia continu i dup ncetarea excitrii.

3. Transferul energiei undelor electromagnetice ctre molecule, avnd drept rezultat
creterea reactivitii chimice a acestora ori producerea unor reacii fotochimice. Dintre
aceste reacii fotochimice se pot meniona: izomerizri i rearanjri interne ale moleculei,
polimerizri sau combinri ntre molecule, fotosensibilizri.

Exemple
Reacia cu o alt molecul, reacie care altfel nu s-ar fi produs (M* - molecula
fotoexcitat):
M* + A D
Reacia de dimerizare:
M* + M MM
Fotosensibilizarea - energia absorbit de M este transferat speciei N care devine
reactiv:
M* + N M + N*
Radiaiile respective sunt absorbite de ctre grupri speciale ale unor molecule,
grupri care se numesc cromofori.
Exemple de grupri cromofore: - N = N - , = C = O, - N = O
Curs Biofizica MG 2010-2011 Elemente de fotobiologie
5
Legile fotochimiei
1. Legea Grotthus-Draper: radiaia trebuie s fie absorbit de o molecul nainte ca reacia
fotochimic s aib loc; dac substana iradiat nu absoarbe radiaii, nu se produce reacia
fotochimic.
2. Legea Stark-Einstein: radiaia absorbit nu duce n mod obligatoriu la o reacie
fotochimic, dac totui se produce reacia, pentru fiecare molecul transformat este
necesar un singur foton. n legtur cu aceasta se definete randamentul cuantic :
= N
m
/N
f
N
m
numrul de molecule (respectiv moli) care au reacionat
N
f
numrul de fotoni (respectiv Einsteini) care au fost absorbii
1 Einstein = N
A

*
h
3. Legea Bunsen-Roscoe: cantitatea de substan (Q) care intr ntr-o reacie fotochimic
este proporional cu fluxul de energie radiant () i cu timpul de iradiere (t)
Q=kt
Rezult c viteza unei reacii fotochimice este proporional cu fluxul incident.

n sistemele biologice efectele la nivel molecular determin efectele la nivel celular
sau la cel al organismului.


Efectele radiaiilor vizibile
Fotosinteza
Const n conversia energiei radiante n energie chimic folosit n sinteza unor
molecule complexe. Celulele plantelor verzi conin organite celulare numite cloroplaste, n
care se afl pigmeni clorofilieni i carotenoizi. Clorofilele sunt molecule complexe care conin
grupri cromofore n sisteme de duble legturi conjugate. Prin absorbia luminii de ctre
gruprile cromofore se produce excitarea electronilor pe nivele superioare de energie.
Revenirea lor pe nivelul fundamental se face n trepte, de-a lungul lanului transportor de
electroni. n fiecare treapt are loc o reacie de fosforilare a ADP cu formare de ATP. Astfel,
energia luminoas este transformat n energie chimic nmagazinat n ATP. Fotosinteza
se realizeaz prin dou tipuri de reacii:
- reacii la lumin, direct dependente de energia luminoas (fotoliza apei)
- reacii la ntuneric, n absena luminii

ntr-o variant foarte simplificat, reaciile la lumin sunt cele de fotoliz a apei, de
formare a NADPH (nicotinamid-adenin dinucleotid-difosfat) i a ATP, n timp ce n reaciile la
ntuneric are loc reducerea CO
2
cu formarea de polimeri hexozici. Bilanul n sinteza
moleculei de glucoz este:
h
6H
2
O + 6CO
2
CH
12
O
6
+ 6O
2
Aceste reacii se produc n nite structuri lamelare (discuri lipoproteice) ale cloroplastelor
numite membrane tilacoide sau tilacoizi.

Fotorecepia cu ajutorul pigmenilor rodopsinici
Rodopsinele vizuale, rodopsina i iodopsinele, fac parte din clasa proteinelor
retinale, al cror cromofor este aldehida vitaminei A numit retinal. Sub aciunea radiaiilor
luminoase vizibile se produce izomerizarea retinalului din configuraia 11-cis n cea all-trans
i desprinderea acestuia de opsin. n acest mod se produce activarea rodopsinei i se
declaneaz ciclul de reacii biochimice la ntuneric. Energia radiaiei luminoase este utilizat
pentru declanarea excitaiei vizuale. Pentru ntreaga cascad de reacii biochimice ce
Curs Biofizica MG 2010-2011 Elemente de fotobiologie
6
urmeaz, i care se ncheie cu nchiderea canalelor de Na i Ca i hiperpolarizarea
membranei, este utilizat energia metabolic.

Efectele radiaiilor ultraviolete (UV)
Radiaiile UV se situeaz n spectru dincolo de radiaiile vizibile de lungime de und
mic (violet) i din punct de vedere al efectelor biologice sunt clasificate astfel:
UV-A, cu lungimea de und cuprins ntre 315-400 nm
UV-B, cu lungimea de und cuprins ntre 280 - 315 nm
UV-C, cu lungimea de und mai mic de 280 nm.

Cea mai mic energie o au radiaiile UV-A i cea mai mare UV-C. Energia radiaiilor
UV se afl n domeniul 3-7 eV, deci este mai mic dect energia de ionizare a principalilor
atomi constitueni ai biomoleculelor. Radiaiile UV pot produce ruperi de legturi chimice i
reacii fotochimice. Dintre efectele radiaiilor UV se pot meniona urmtoarele:
- Dimerizarea unor perechi de baze azotate (ex. dimerizarea timinei) cu sudura
lanurilor de ADN n locul respectiv. Aceast sudur mpiedic copierea informaiei de pe
ADN pe ARN. Una din consecinele dimerizrii este aciunea bactericid a UV ndeprtat
(lungimi de und mai mici dect 300 nm), prin mpiedicarea transcripiei este oprit diviziunea
celular. Demonstrarea acestui lucru se poate face prin fotoreactivare: bacteriile iradiate cu
UV sunt imediat iradiate cu radiaii vizibile (380-450 nm). Se activeaz prin aceasta o enzim
care desface dimerii timinei. Reactivarea nu se face ns 100%, eficacitatea procesului fiind
determinat prin intermediul unei curbe doz-efect.
- Efecte asupra ADN: formare de dimeri, hidratarea bazelor pirimidinice, ruperea
legturilor de H, ruperea lanului de ADN, formarea unor legturi cu proteinele (ADN-protein
cross-links).
- Producere de eritem (arsuri tegumentare) UV-B (290-320 nm). Locul de aciune se
presupune a fi fosfolipidele din membranele organitelor celulare care conin hidrolaze, n
special lipozomii din celulele epidermice. Tot n aceast zon se observ i efectul
cancerigen al radiaiilor UV, 91% din cancerele pielii, n special melanoamele, se afl n zone
cu expunere solar mare. Cele mai periculoase sunt radiaiile cu 300 nm.
- Pigmentarea pielii (UV-A, 320-420 nm) se datoreaz creterii concentraiei de
melanin din piele, sectretat de melanocite. Melanocitele deriv, din punct de vedere
embriologic, din sistemul nervos i au prelungiri dendritice prin care injecteaz melanina n
celelalte celule ale epidermei. Melanina provine din oxidarea tirozinei, catalizat de
tirozinaz. Spectrul de aciune se consider a fi 300 420 nm, acestui domeniu
corespunzndu-i ns numai oxidarea unui leucoderivat al melaninei, care d o pigmentare
lejer i precoce. Spectrul de formare a melaninei coincide cu spectrul de aciune al
eritemului. Pigmentarea datorat melaninei este mult mai intens i mai tardiv reprezentnd
o protecie eficient mpotriva eritemului. Dup 10-12 zile de expunere la soare 90% din
radiaiile UV sunt absorbite.
- Transformarea ergosterolului n vitamina D
2
(antirahitic). Spectrul de aciune are un
maximum la 280 nm. Iradierea n UV este folosit pentru prevenirea rahitismului, fiind
suficient o doz de 1/20 din cea eritemal, aplicat zilnic pe o suprafa a pielii de 200 cm
ptrai.
- Inflamaia corneei numit keratit putndu-se ajunge la cecitate tranzitorie sau chiar
definitiv. Oftalmia este dat de UV reflectate de zpad, chiar i pe vreme ceoas, la mare
altitudine, de aceea se recomand ochelari din sticl special pentru protecie.
Protecia cea mai important fa de aciunea nociv a UV de energii mari este
realizat prin stratul de ozon (O
3
) din partea superioar a atmosferei. Oxigenul absoarbe
radiaiile UV-C i se produc reaciile:
O
2
+ h O

+ O

O

+ O
2
O
3
Curs Biofizica MG 2010-2011 Elemente de fotobiologie
7
Ozonul rezultat absoarbe radiaiile UV-B cu lungimi de und mai mici de 300 nm care
sunt foarte dunatoare pentru organismele vii, conform reaciei
h + O
3
O
2
+ O

Fotoproduii rezultai reintr n reaciile anterioare. n acest fel radiaiile UV duc la

formare de ozon n straturile superioare ale atmosferei.
Cea mai bun protecie se realizeaz prin evitarea expunerii la UV. Se pot folosi
ecrane protectoare cum ar fi ochelarii speciali din substane absorbante (colir) pentru
protecia ochilor i creme pentru piele. Principalele substane folosite sunt acidul
paraaminobenzonic (absoarbe ntre 290 i 315 nm), benzotenona care absoarbe ntregul
spectru UV sau preparatele opace pe baz de oxid de zinc sau de titan care asigur o
protecie total.