06/04/2013

1
ENZIME
Definiie dpdv funcional si structural
Proprietile generale ale catalizatorilor
Proprietile specifice enzimelor
Caracterizare structural
Centrul activ
Specificitatea pentru substrat
Specificitatea de reacie
Clasificare
Nomenclatur
Factorii care influeneaz viteza reaciilor enzimatice
Concentraia enzimei
Concentraia substratului
pH-ul
Temperatura
Prezena activatorilor & inhibitorilor
Enzime - Definiie
Dpdv funcional
= catalizatori ai reaciilor care au loc n organismele vii
= biocatalizatori.
Dpdv structural
= apoenzim + cofactor enzimatic = holoenzim

protein ion anorganic sau
micromolecul organic
06/04/2013
2
Catalizatori Proprieti generale
Reduc energia de activare (E
a
) i consecutiv
mresc numrul ciocnirilor eficace dintre reactani
=> mresc viteza de reacie
Ea = 18 Kcal/mol n absena catalizatorului
Ea = 11,7 Kcal/mol n prezena platinei
Ea = 5,5Kcal/mol n prezena catalazei
H
2
O
2
+ H
2
O
2
H
2
O + O
2
Efectul catalizatorului asupra reactiei exoterme X + Y Z
n prezena catalizatorului se parcurge o cale diferit, care corespunde la o energie de activare (E
a
) mai mic
Rezultatul final si variatia energiei libere (G) sunt aceleasi.
Ex.
Catalizatori Proprieti generale
n cazul reaciilor reversibile mresc, n aceai msur, viteza
reaciilor de sens contrar, deci crete viteza de atingere a
echilibrului fra a se modifica poziia lui.
A B
100
10
10
= =
8
6
2
1

k
k
K
100
10
10
= =
4
2
2
1

k
k
K
n absena catalizatorului n prezena catalizatorului
n prezena catalizatorului echilibrul se atinge de 10
4
ori mai repede.
k
1
k
2
06/04/2013
3
Particip direct la reacie
La sfritul reaciei se regsesc n forma i
cantitatea iniial
Sunt necesari n cantitate mic
Catalizatori Proprieti generale
Enzime Proprieti specifice
Capacitate catalitic superioar catalizatorilor clasici
H
2
O
2
+ H
2
O
2
H
2
O + O
2
Ea = 5,5Kcal/mol n prezena catalazei
Ea = 11,7 Kcal/mol n prezena Pt
Ea = 18 Kcal/mol n absena catalizatorului.
Mresc viteza reaciilor > 10
6
ori.
CO
2
+ H
2
O
H
2
CO
3
Viteza reactiei catalizate de anhidraza carbonica creste de 10
7
ori,
Fiecare molecul de enzim sintetizeaz 10
5
molecule de H
2
CO
3
per secund
06/04/2013
4
Catalizeaz un anume tip de reacie
=> prezint specificitate de reacie
Acioneaz asupra unui anume compus chimic (substrat), => prezint
specificitate pentru substrat
Sunt specifice att n raport cu reactantul ct i cu produsul de
reacie =>nu se formeaz produi secundari
Acioneaz n condiii blnde (t<100
0
C, P 1atm, pH 7),
randamentul reaciilor fiind limitat doar de punctul de echilibru al reaciei
catalizate
Enzime Proprieti specifice
Enzime Proprieti specifice
Realizeaz cuplarea reaciilor exergonice cu reaiile endergonice
CH
2
OPO
3
H
2
O
OH
OH
OH
HO
CH
2
OH
OH
OH
OH
O
+ ATP + ADP
Glucoza Glucozo-6-fosfat
Acid adenozintrifosforic Acid adenozindifosforic
Se asociaz sub forma unor complexe multienzimatice n vederea
creterii vitezei de desfurare a unei succesiuni de reacii
CH
3
C COOH
O
+ CoA + NAD
+
CH
3
C
O
CoA+ CO
2
+ NADH+ H
+
Complexul PyDH =
piruvat decarboxilaza + dihidrolipoil transacetilaza + dihidrolipoil dehidrogenaza
PyDH
06/04/2013
5
Activitatea lor este reglabil, poate fi mrit sau micorat
prin aciunea unor substane diferite de substratele lor,
numite activatori, respectiv inhibitori
Pot cataliza transformarea unui tip de energie n alt tip
de energie
Ex.
Transformarea energiei chimice (nmagazinat sub form de ATP) n
energie mecanic (contracia muscular)
Enzime Proprieti specifice
Enzime Caracterizare structural
Caracterizarea apoenzimei
Are o structur tridimensional (conformaie nativa) globular la nivelul creia se disting
aminoacizii de contact, care alctuiesc centrul activ
Regiunea din apoenzim responsabil de legarea i transformarea substratului se
numete centru activ
Unele enzime au pe lng centrul activ i unul sau mai muli centrii allosterici care
dei nu intervin direct n cataliz pot influena activitatea catalitic a enzimei (vezi enzime
allosterice)
Caracterizarea cofactorului enzimatic
Din punct de vedere structural poate fi anorganic (ion metalic) sau organic
Cofactorul organic este denumit coenzim sau grupare prostetic, n funcie de tipul
legturii cu apoenzima
Coenzim legtura cu apoenzima = slab i tranzitorie
Grupare prostetic legtura apoenzima = puternic i permanent
06/04/2013
6
Enzime - Centrul activ
Definitie
Centrul activ = o zon din structura spaial a apoenzimei care este responsabil de legarea i
transformarea substratului.
Caracterizare
- reprezint o parte relativ mic din volumul total al apoenzimei (< 10 Aa)
- este o entitate tridimensional (format din Aa situai n diferite zone ale secvenei apoenzimei)
Ex. Lizozim = 129 Aa
centrul activ = Aa din poziiile 35,52,62,63 i 101
=> c prin distrugerea structurii spaiale a apoenzimei (denaturare) enzima se inactiveaz.
- uneori poate fi alcatuit din radicali ai Aa care aparin mai multor lanuri polipeptidice adiacente.
- majoritatea radicalilor aminoacizilor sunt nepolari. Ei formeaz un buzunar hidrofob, cu o
constant dielectric mic, care faciliteaz interaciunile de tip electrostatic ntre puinele grupri
ionice ale centrului activ i substrat.
- este alctuit din centrul de legare (Aa implicai n legarea substratului) i centrul catalitic (Aa
polari implicai n transformarea substratului)
- poate avea o conformaie rigid, complementar conformaiei S (modelul Fischer lock & key),
sau flexibil, care se adapteaz conformaiei S (modelul Koshland induced-fit)
Formarea complexului ES
Modelul Fischer cheie-broasc
Centrul activ are o conformaie rigid, complementar conformaiei S
06/04/2013
7
Formarea complexului ES
Modelul Koshland potrivire indus
Centru activ are o conformatie flexibil, care se adapteaz conformaiei S