amestecurilor in componente pentru a analiza, a indentifica, a purifica si/sau cuantifica amestecului sau acomponentele. separare Analiza Identificare Purificare Cuantificare Componente amestec APLICATIILE CROMATOGRAFIEI Cromatografia este utilizata pentru :
Analiza examinarea amestecului, a componentelor sale si relatiile dintre acestea Identificare determinarea unui amestec sau componente pe baza unor componente deja cunoscute Purificare separarea componentelor pentru a izola unul dintre ele ce prezinta interes pentru studii ulterioare Cuantificare determinarea cantitatii amestecului si/sau a componentelor prezente in proba
APLICATIILE CROMATOGRAFIEI Exemple din viata cotidiana in care este aplicata cromatografia: Companii farmaceutice determinarea cantitatii fiecarui component chimic din noile produse Spitale depistarea drogurilor sau a nivelului de alcool din sangele pacientilor Medicina legala compararea unei probe gasite la locul crimei cu proba prelevata de la suspect Protectia mediului determinarea nivelului de poluare din sursele de apa Aplicatii industriale pentru a purifica un precursor DEFINITIA CROMATOGRAFIEI Definitia complexa: Cromatografia este o tehnica de laborator ce separa componentele dintr-un amestec folosind afinitatea specifica a componentelor pentru faza mobila si mediul de absortie stationar prin care trec.
Terminologie: Specific cu o anumita particularitate Afinitate atractie naturala sau forta dintre diferite elemente Mediu Mobil gaz sau lichid ce transporta componentele (faza mobila) Mediu Stationar partea instalatiei care nu se deplaseaza cu proba (faza fixa)
Definitie abreviata: Cromatografia separa componentele unui amestec pe baza afinitatii specifice fata de faza mobila si faza fixa.
Explicatii: Componentul este plasat in faza fixa Faza mobila trece prin faza fixa Faza mobila solubilizeaza componentele Faza mobila deplaseaza individual componentele pe o anumita distanta in faza fixa,in functie de atractia lor specifica fata de cele doua faze
DEFINITIA CROMATOGRAFIE ILUSTRAREA CROMATOGRAFIEI Componente Afinitate pentru faza stationara Afinitate pentru faza mobila Albastru ---------------- Insolubil in faza mobila Negru Rosu Galben Amestec Componente Separare Faza fixa Faza mobila Cromatografie lichida separa probe de lichid cu un solvent lichid(faza mobila) si cu o coloana compusa din microsfere solide(faza fixa) Cromatografia gazoasa separa probe de vapori cu un gaz transportor(faza mobila) si o coloana de microsfere lichide sau solide(faza fixa) Cromatografia pe hartie separa probe de lichide uscate cu un solvent lichid(faza mobila) si o banda de hartie(faza fixa) Cromatografie in strat subtire separa probe de lichide uscate cu un solvent lichid(faza mobila) si o farfurie de sticla acoperita cu un strat subtire de alumina sau silica gel. Types of Chromatography (A) Utilizeaza sarcini, (B) utilizeaza pori, si (C) utiizeaza legaturile covalente pentru a crea afinitatea specifica printre componentele amestecului pentru faza fixa. PRINCIPIILE CROMATOGRAFIEI PE HARTIE Fenomenul de capilaritate miscarea lichidului printre spatiile unui material poros datorita fortelor de adeziune,coeziune si tensiunii superficiale.Lichidul poate ascensiona pe foaia de filtru deoarece atractia fata de sine este mai mare decat forta gravitationala.
Solubility gradul cu care un material(solvit) se dizolva intr-un solvent.Solvitii se dizolva in solventi cu proprietati similare.Acest lucru permite solvitilor sa fie separati prin diferite combinatii de solventi.
Separarea componentelor depinde atat de solubilitatea lor in faza mobila cat si de afinitatea specifica fata de faza mobila si cea fixa. EXPERIMENTUL CROMATOGRAFIEI PE HARTIE
Ce culoare are markerul? REZUMATUL EXPERIMENTULUI Scop: Pentru a initia studentii in principiile si terminologia cromatografiei si pentru a demonstra separarea colorantilor din markere cu metoda cromatografiei pe hartie.
Timpul necesar: Timpul de pregatire: 10 minutes Durata experimentului: 45 minutes
Costuri: Mai putin de 30RON MATERIALE NECESARE 3 pahare Berzelius 3 capace Apa distilata Izopropanol Cilindre gradate 3 filtre de hatie Marker de diferite culori Creion Rigla Foarfec Banda adeziva PREPARAREA SOLUTIEI DE IZOPROPANOL Se prepara 15ml din fiecare concentratie de izopropanol din fiecare pahar etichetat 50% , 70%, 100% PREPARAREA BENZILOR DE CROMATOGRAFIE Se taie 3 benzi de hartie de filtru. Se traseaza o linie cu creionul la 1cm deasupra marginei inferioare. Se eticheteaza fiecare banda conform solutiei corespunzatoare. Se deseneaza un punc cu fiecare marker pe linia trasata anterior. DEVELOPAREA CROMATOGRAMELOR Plasarea benzilor in paharele Berzelius Se asigura ca solutia nu depaseste linia de start Paharele Berzelius se tin acoperite Se lasa benzile in pahare pana cand faza mobila migreaza pana la 2 cm de marginea superioara a fazei stationare. Se scot benzile si se lasa la uscat. INTERPRETAREA CROMATOGRAMELOR COLORANTUL NEGRU 1. Colorantul separat mov si negru 2. Insolubil in concentratii mici de izopropanol 3. Solubil in concentratii de izopropanol >50% COLORANTUL ALBASTRU 1. Colorantul separat albastru 2. Putin solubil in contratii scazute de izopropanol 3. Solubilitate maxima in contratii mari de izopropanol COLORANTUL PORTOCALIU
1.Colorantul separat portocaliu 2.Solubil in concentratii mici de izopropanol. 3.Partial solubil in concentratii izopropanol>70%