Fermenta ia asistat de ultrasunete cre te productivitatea bioetanolului

Introducere
Prezentul studiu este preocupat de cre terea produc iei de bioetanol din lactoz indus
prin ultrasunete, cu folosirea drojdiei Kluyveromyces marxianus.
Ultrasunetele, sau sunetele de frecven 20 kHz sunt n eneral asociate cu deteriorarea
celulelor i sunt folosite pe scar lar n protocoalele de laborator pentru ruperea pere ilor
celulelor n scopul eliberrii produselor intracelulare!"#. $e tie c enzi%ele i alte
%acro%olecule fraile sunt predispuse la deteriorare de ctre ultrasunete !2#. &otu i,
ultrasunetele aplicate corespunztor pot cre te productivitatea bioproceselor ce i%plic celule vii
i enzi%e bioactive !'("0#.
)fectele sonicrii din perspectiva cre terii productivit ii au fost raportate anterior
pentru anu%ite bacterii !',*,+,""("+#, funi fila%ento i !,,-,",# i celule veetale !"-#. $e pare
c drojdia de panifica ie .Saccharomyces cerevisiae/ a fost sinura drojdie studiat la un anu%it
nivel n fer%enta iile iradiate cu ultrasunete !"0(22#.
1ercetrile anterioare privind fer%enta iile sonicate pentru producerea bioetanolului sunt
relevante pentru acest studiu i, prin ur%are sunt trecute n revist n acesta. 2proape toate
cercetrile din aceast perspectiv s3au centrat pe drojdia S. cerevisiae. Intensitatea ultrasunetelor
care este de altfel neletal pentru S. cerevisiae, pare s afecteze interitatea vacuolei celulei i s
rearanjeze con inuturile intracelulare. !2'# Ultrasunetele de dianostic de %ic putere, cu
frecven e de "("04Hz sunt considerate n eneral %ai pu in duntoare pentru celule dec5t
ultrasunetele puternice .cu frecven e de 20("00 kHz/6 totu i, ultrasunete de 2,24Hz aplicate
continuu la o putere electric de intrare de "78 la un volu% de bulion de +7%9 au distrus 2*:
din celulele de S. cerevisiae e;puse ti%p de +0 %in !2'#. $onicarea continu la "4Hz i "0,*8
c%
32
a in<ibat fer%enta ia S. cerevisiae, ns sonicarea inter%itent la aceea i intensitate a
produs %ai pu ine daune !"0#.
=n produc ia de vin, bere i sake din za<aruri solubile folosind celule i%obilizate de
S.cerevisiae, sonicarea de foarte %ic intensitate la 0.'%8c%
>2
i 7'kHz au sti%ulat fer%enta ia
reduc5nd ti%pul de fer%enta ie cu *03+7: !20#. $3a sus inut c ultrasunetele .20 kHz/ folosite
la intensit i de 0,2, 0,7 i 0,- 8c%
2
accelereaz cre terea S. cerevisiae ntr3un %ediu ce
con ine doar nutrien i dizolva i !22#, dar datele nu au dovedit clar aceast supozi ie. $3au
observat %bunt iri secundare ale S. cerevisiae la e;punerea controlat la ultrasunete de %are
putere de ctre 9anc<un et al. !2"#.
Unele fer%enta ii ale bioetanolului necesit pre3tratarea substratului. =n pre3tratarea
a%idonului, s3a de%onstrat n %od repetat c sonicarea n absen a enzi%elor i
%icrooranis%elor spore te produc ia de za<aruri fer%entabile !27(2+# i i%plicit produc ia de
etanol ntr3o fer%enta ie ulterioar nesonicat. 2cest efect este, binen eles, o consecin pur
fizic a rupturii ranulelor de a%idon indus prin sonicare i nu i%plic nicio activitate
bioloic. Un feno%en si%ilar a fost observat n fer%enta iile bacteriene pentru ob inerea
etanolului. ?e e;e%plu, o cre tere de 20: a produc iei de etanol a fost constatat prin sonicarea
inter%itent a pastei de <5rtie, ce a fost <idrolizat enzi%atic i fer%entat ntr3un proces
co%binat de za<arificare3fer%entare care a folosit bacteria Klebsiella oxytoca !"7#. 1re terile de
productivitate au fost revendicate de sonicare i n alte fer%enta ii cu S. cerevisiae !2,#. $3a
sus inut c ultrasunetele de %are putere cresc per%eabilitatea celulelor de S. cerevisiae la
proteaze !2-# i 1a2@ !20#.
Prezentul studiu a folosit cunoscuta drojdie K. marxianus ca siste% de referin pentru a
cerceta rei%urile de sonicare ce pot fi folosite pentru a spori cre terea celulelor i produc ia de
etanol din lactoz, un substrat co%plet solubil. K. marxianus a fost anterior %en ionat ca
Kluyveromyces fragilis !'0('2#. K. marxianus a fost folosit pe scar lar pentru ob inerea
etanolului din %edii ce con in lactoz !'"(70#, dar n fer%enta ii conven ionale, nesonicate.