Sunteți pe pagina 1din 10

1

ADENOVIRIDAE
Dr Linda Stannard, University of
Cape Town, South Africa
Adapted from Fields et al., Fundamental Virology (1996).
GENERALITI
virusuri numeroase
la psri, mamifere, marsupiale, amfibieni
afeciuni
sindroame febrile
sindroame respiratorii
faringo-conjunctivite
gastroenterite
primul izolat n 1953
Rowe i colaboratorii
din esut adenoidian i amigdalian uman adenovirus
CLASIFICARE
familia Adenoviridae
genul Mastadenovirus
mamifere, om, maimu, ecvine, bovine, canine, porcine,
ovine
genul Aviadenovirus
psri
rae, curcani, gte, fazani, gini
GENUL MASTADENOVIRUS
clasificate n
6 serogrupe sau subgenuri (A F) pe baza
proprietilor hemaglutinante
proprietilor oncogene la roztoare
omologiei ADN
49 serotipuri umane: mai frecvente 18; 11, 21,
35, 37, 40
serotipurile 40, 41
ncadrate n grupul F
patogeni enterici
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
form sferic
dimensiuni 70 80 nm
fr nveli extern
2
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
GENOMUL VIRAL
dimensiuni de 20 30 x 10
6
Da
ADN
bicatenar
liniar
structuri constitutive majore:
6 regiuni distincte ale genelor timpurii E (early)
E1A, E1B, E2A, E2B, E3, E4,
5 regiuni ale genelor trzii L (late)
L1, L2, L3, L4, L5
rol n sintezele tardive virale
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
CAPSIDA
capsida icosaedric
252 capsomere
240 hexoni
12 pentoni
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
CAPSIDA
la vertex - fiecare penton
proiecii exterioare = FIBRE
9-31 nm
baz de ataare de penton
buton terminal (4 nm)
determin specificitatea de
gazd
toxice pt. celule rotunjire,
moartea celulelor prin inhibarea
sintezei proteinelor
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
CAPSIDA
hexonii
trimeri cu aspect:
prismatic n partea superioar
pseudohexagonal n partea
inferioar
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
PROTEINE CONSTITUENTE
proteine structurale capsidale
proteina II str. hexoni
proteina III baza pentoni
proteina IV proiecii fibroase
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
PROTEINE CONSTITUENTE
proteine asociate capsidei
proteina IX
pe feele centrale
stabilizeaz contactele hexon-
hexon
proteina IIIa
pe muchii
leag faetele diacente ale hexonilor
proteina VI
pe faa intern a capsidei
legtur ntre capsid i centrul viral
proteina VIII
pe faa intern a capsidei
3
CARACTERE MORFOSTRUCTURALE
PROTEINE CONSTITUENTE
proteine asociate
centrului viral
menin condensat ADN-ul
viral
proteina intern V
proteina intern VIII
proteina intern X
STRUCTURA ANTIGENIC
HEXONII CONIN
Ag comun de grup (subgen)
pe faa intern a capsidei, la baza hexonului
determin reacii ncruciate
nu induce Ac protectori
Ag specific de tip
n partea superioar a hexonului
induce Ac neutralizani
STRUCTURA ANTIGENIC
PENTONII CONIN
Ag solubil comun de grup
FIBRELE
Ag specific de tip
induce Ac neutralizani
ANTIGENELE T (tumorale)
2 Ag codificate de regiunea genomic E1A
2 Ag codificate de regiunea genomic E1B
VARIABILITATE GENETIC
genomul se modific continuu
recombinrile frecvente
importan
aspecte clinice i epidemice diferite
vaccinuri
PROPRIETI BIOLOGICE
PROPRIETI HEMAGLUTINANTE
prin ataarea fibrelor la receptorii
eritrocitari
aglutineaz hematii de
maimu Rhesus
obolan
om
cine
oarece
subgrupe I - IV
PROPRIETI BIOLOGICE
PROPRIETI TOXICE
n culturi celulare
e.c.p. de tip toxic
exercitat de pentoni
rotunjire, desprindere rapid a monostraturilor (24-48 ore)
inhibarea sintezei macromoleculelor gazdei de ctre
fibrele pentonice
ADN, ARN, proteine
4
PROPRIETI BIOLOGICE
PRORIETI ONCOGENE
demonstrate la animale
in vivo
adenovirusuri A nalt oncogene
adenovirusuri B slab oncogene
celelalte subgenuri nu induc tumori
in vitro
toate adenovirusurile induc transformarea celulelor
nepermisive de hamster
n celulele transformate ADN viral integrat
n tumori umane NU s-a identificat ADN adenoviral
ACIUNEA AGENILOR
FIZICI I CHIMICI
stabili la aciunea agenilor fizici i
chimici supravieuire i rspndire
se conserv la
+40C luni de zile
-20C -70C ani de zile
distruse de cldur
+56C n 30 min.
MULTIPLICARE VIRAL
I. ADSORBIE
prin proteinele fibrei
II. PTRUNDERE
endocitoz
III. DECAPSIDARE
deplasarea pentonilor i hexonilor
ajutorul integrinelor celulare
eliberat centrul viral n citoplasma celulei
Adapted from Zinsser Microbiology 20th Ed.
MULTIPLICARE VIRAL
eliberat centrul viral n citoplasma celulei
decapsidarea complet n membrana nuclear
ADN viral intr n nucleul celulei declaneaz
sintezele virale
IV. BIOSINTEZELE VIRALE
ETAPE TIMPURII de tranziie i translaie
REPLICAREA GENOMULUI
ETAPE TRZII de tranziie i translaie
MULTIPLICARE VIRAL
ETAPE TIMPURII de tranziie i translaie
a. transcrierea ARNm precoce
are loc pe genele E1A
duce la sinteza proteinelor precoce funcionale
controleaz i activeaz etapele ulterioare de sintez viral
inhib sinteza macromoleculelor gazdei
activeaz transcrierile timpurii
se pot lega de oncogenele myc i mib
5
MULTIPLICARE VIRAL
ETAPE TIMPURII de tranziie i translaie
b. transcrierea ARNm timpurii
pe genele E1B, E2A, E3, E4
duce la sinteza proteinelor timpurii
la 2-3 ore de la infecie
transportul ARNm specific n citoplasm
la nivelul poliribozomilor
rol n
replicarea ADN
sinteza proteinelor tardive
MULTIPLICARE VIRAL
REPLICAREA GENOMULUI
n nucleul celular
anterioar sintezei proteinelor trzii
necesit proteine virale i enzime celulare
MULTIPLICARE VIRAL
ETAPE TRZII de tranziie i translaie
transcriere ARNm tardiv
dup replicarea ADN genomic
pe regiunile L1-L5
sinteza a 13 proteine
structurale: hexoni, pentoni, fibre
nestructurale: pt. asamblarea capsidei
Schema transcriptiei unui adenovirus. Genele timpurii apar n rou. Genele trzii apar n
verde. Liniile albastre indic ADN.
Square brackets indicate the promotors. Missing regions indicate removal of introns.
Adapted from Broker, T.R. In Processing of RNA. (Apirion, D ed) 181-212, 1984
Adenovirus DNA replication by a displacement mechanism
MULTIPLICARE VIRAL
V. ASAMBLAREA VIRAL
n nucleul celulei
proteinele etapei timpurii i
tardive transportate din nou n
nucleu
asamblarea capsomerelor n
capsid, a ADN n virion
exces de ADN viral n nucleul
celulei formaiuni paracristaline,
incluzii bazofile
6
MULTIPLICARE VIRAL
VI. ELIBERAREA VIRIONILOR DIN CELUL
prin dezintegrarea celulei
CULTIVARE
CULTURI DE CELULE
ANIMALE
CULTURI DE CELULE
linii celulare
HeLa, KB, Hep-2, A
549
culturi primare de rinichi embrionar uman
culturi diploide WI38, MRC5
CULTURI DE CELULE
ecp
la 4-6 zile de la inoculare
la periferia monostratului
rotunjire, aglomerri n ciorchine
desprinderea
modificri nucleare
creterea n dimensiuni a nucleului
incluzii intranucleare eozinofile apoi bazofile
ADN i proteine virale
ANIMALE
obolanul de bumbac (Sigmodon hispidus)
oareci
infecii inaparente la
hamsteri, cobai, iepuri, purcei, cini
ASPECTE CLINICE
afeciuni respiratorii
afeciuni oculare
afeciuni gastro-intestinale
afeciuni uro-genitale
afeciuni ale sistemului nervos
7
ASPECTE CLINICE
AFECIUNI RESPIRATORII
subgenurile
B tipuri 3, 7, 14, 21, 34, 35
C tipuri 1, 2, 5, 6
E tipul 4
infecie respiratorie acut
faringit acut febril
pneumonie
febra faringo-conjunctival
infecia respiratorie acut infecia respiratorie acut infecia respiratorie acut infecia respiratorie acut
simptome
febr
stare general alterat
faringit
tuse
tineri militari boala recruilor
durata 10 zile
tip 4, 7, rar 3, 11, 14, 21
faringita acut febril faringita acut febril faringita acut febril faringita acut febril
simptome
febr
stare general alterat
faringit
tuse
copii
tip 1, 2, 5, 6
complicaii
bronit
broniolit
crup
pneumonia pneumonia pneumonia pneumonia
simptome
febr
stare general alterat
faringit
tuse
copii
evoluie fatal (8-10%)
tip 7, 3
febra faringo febra faringo febra faringo febra faringo- -- -conjunctival conjunctival conjunctival conjunctival
incubaie 1 8 zile
simptome
febr
stare general alterat
faringit
tuse
conjunctivit
adenopatie
hipertrofie amigdalian
uneori diaree
tip 3, 7, 14
din apa contaminat a
bazinelor
swimming pool conjunctivitis
AFECIUNI OCULARE
adenovirusuri A i E
conjunctivita folicular
tip 4, 8, 9
keratoconjunctivita epidemic
tip 8, 19, 37
incubaie 8-10 zile
edem pleoape, dureri oculare, fotofobie, infiltraii corneene
subepiteliale, hipertrofia ggl preauriculari, cervicali,
submaxilari
conjunctivita hemoragic acut
tip 11, rar 21 (grup B)
8
AFECIUNI
GASTROINTESTINALE
gastroenterita acut gastroenterita acut gastroenterita acut gastroenterita acut
copii
diaree, deshidratare
subgen F (40, 41); A (31); C (2)
enterocolita acut necrozant enterocolita acut necrozant enterocolita acut necrozant enterocolita acut necrozant
apendicita apendicita apendicita apendicita
intususcepia intususcepia intususcepia intususcepia
telescoparea poriunii inferioare a intestinului
ocluzie intestinal
cauza: hipertrofia structurilor limfoide intestinale
AFECIUNI UROGENITALE
cistita hemoragic acut cistita hemoragic acut cistita hemoragic acut cistita hemoragic acut
subgrup B (11, 21)
biei
hematurie, disurie, poliurie
uretrita uretrita uretrita uretrita
brbai
serotip 37
cervicita cervicita cervicita cervicita
femei
serotip 37
infecii persistente ale infecii persistente ale infecii persistente ale infecii persistente ale
rinichiului rinichiului rinichiului rinichiului
subgen B (11, 14, 15)
AFECIUNI ALE SISTEMULUI
NERVOS
meningoencefalita meningoencefalita meningoencefalita meningoencefalita
subgen B i C (3, 5, 6, 7, 12, 32
sindrom Reye sindrom Reye sindrom Reye sindrom Reye
rar, la copii
adenoviroze n imunodeficien
evoluii grave, mortalitate ridicat
IMUNITATE
umoral
rol major n protecie
Ac neutralizani
transmii transplacentar (6-11 luni protectivi)
Ac fa de Ag specifice de tip
seroneutralizani
hemaglutinoinhibani
persist ani de zile
Ac anti-Ag comun de grup
fixatori de complement
nu sunt protectori
persist 6 12 luni
IMUNITATE
celular
limfocite T cu receptori CD4 i CD8
interferon
TNF-
IL-2
9
EVITAREA RSPUNSULUI
IMUN
inhibarea prezentrii i recunoaterii Ag
modularea apoptozei
EPIDEMIOLOGIE
rspndire global
caracter
sporadic
endemo-epidemic
sezonier: iarna, primvara, nceputul verii
sursa: omul bolnav
transmitere: fecal-oral; aerogen; ap
contaminat, mn murdar,
susceptibilitate general, rezisten la reinfecie
PROFILAXIE
MSURI GENERALE
igiena individual, sterilizare instrumentar,
clorinarea apei
PROFILAXIE SPECIFIC
vaccinuri vii atenuate mono-, bi-, trivalente
sc, oral
uniti militare
vaccinuri subunitare
ncercri
conin hexoni sau/i fibre
TRATAMENT
INEFICIENT
DIAGNOSTIC DE
LABORATOR
A. EXAMEN DIRECT
1. evidenierea virionului
ME
pe seciuni tisulare fixate i colorate
coloraie negativ concentrate de urin,
secreii respiratorii, materii fecale
IME
iruri paralele cristaline n nucleul celulei
DIAGNOSTIC DE
LABORATOR
A. EXAMEN DIRECT
2. evidenierea Ag virale
pe preparate celulare prin:
IF cu seruri antihexon sau antivirion
IF optimizat TR-FIA
time-resolved immunofluoroassay
cu Ac marcai cu europium
teste imunoenzimatice ELISA
cu Ac monoclonali
RIA
contraimunoelectroforeza
10
DIAGNOSTIC DE
LABORATOR
A. EXAMEN DIRECT
3. detectarea ADN-ului viral
pt tipurile 40, 41
n materiile fecale
tehnica
amplificare genomic PCR
hibridizare ADN
DIAGNOSTIC DE
LABORATOR
B. IZOLARE I IDENTIFICARE
numai n culturi celulare
primare de origine uman rinichi embrionar
dipliode umane WI 38, MRC 5, FT (amigdale fetale)
linii continui HeLa, KB, Hep-2, A 549
serotip 40, 41
cultivare dificil
culturi teriare de celule renale cynomolgus
culturi derivate din linia HEK
DIAGNOSTIC DE
LABORATOR
B. IZOLARE I IDENTIFICARE
e.c.p.
la 4-6 zile de la inoculare
rotunjire, creterea refringenei, creterea volumului
celulei, focare de celule aglomerate
degenerarea monostratului n 14-16 zile
n lichidul de cultur eliberate
Ag virale solubile
Ag hemaglutinante
virus
DIAGNOSTIC DE
LABORATOR
B. IZOLARE I IDENTIFICARE
optimizarea izolrii :
centrifugare imediat dup inocularea culturii
identificarea, n etape
1. ncadrare n adenovirusuri: IF, ELISA, TR-FIA, RFC, latex-
aglutinare
2. ncadrare n subgen:
HA cu hematii de obolan, maimu, om
teste complementare: IF, EIA, RFC cu seruri specifice
antihexon sau Ac monoclonali antihexoni
3. serotipajul izolatului: SN, HAI
DIAGNOSTIC DE
LABORATOR
D. DIAGNOSTIC SEROLOGIC
probe duble de ser la 2-4 sptmni
RFC
Ag supernatante de cultur / preparate semipurificate de
hexoni
sensibilitate mic
EIA mai sensibile
HAI
determin Ac specifici de tip
SN
determin Ac specifici de tip