Microbiologia bolii parodontale

Boala parodontal - cea mai frecvent

condiie inflamatorie cu caracter distructiv
din patologia uman.
Infecie produs de specii bacteriene care
interacioneaz cu esuturile i celulele
gazdei ducnd la eliberarea de citokine
si ali mediatori ai inflamaiei, avnd
drept consecin distugerea structurilor
parodontale.
Not: imaginile preluate de pe internet, fr surs
bibliografic au fost terse pentru a nu exista nici un
aspect care s fie asociat plagiatului. LS Iancu
Clasificarea bolii parodontale
1999 ADA (American Dental Association)
1.Gingivita
asociat cu biofilmul bacterian
neasociat cu biofilmul bacterian
2.Parodontita cronic (PC)
localizat
generalizat - >30% din dini sunt
afectai
Clasificarea bolii parodontale
3. Parodontita agresiv (PA)
localizat
generalizat >30% din dini sunt afectai;

Severitatea se apreciaz pe baza adncimii pungii (PD =
periodontal pocket depth) i a pierderii de ataament gingival
(CAL = clinical attachment level):
uoar 1 ~2 mm;
medie 3 ~ 4 mm;
sever 5 mm;

4. Parodontita din bolile sistemice
5. Boala parodontal necrozant (BPN)
gingivita ulceronecrotic
parodontita ulceronecrotic
Clasificarea bolii parodontale
6.Abcese ale esutului periodontal
abces gingival
abces parodontal
abces pericoronal

7.Parodontita asociat cu leziuni
endodontice

Clasificarea bolii parodontale
Modificri aduse de aceast clasificare:
parodontita adultului a fost nlocuit cu
parodontita cronic;
eliminarea termenilor de parodontit
recurent i parodontit refractar;
nlocuirea termenului de parodontit cu
debut precoce cu parodontita agresiv;
nlocuirea termenului de parodontit
ulcero-necrozant cu boala parodontal
ulcero-necrozant

Biofilmul dentar asociat cu boala
parodontal

nceputul secolului trecut - consecina
acumulrii plcii subgingival i a diminurii
rspunsului imun, precum i a creterii
susceptibilitii odat cu vrsta.
Etiologia bolii parodontale
Teoria nespecific - boala parodontal
este rezultatul elaborrii de produi toxici
de ctre ntreaga flora a plcii.
Teoria specific - anumite tipuri de
plac sunt patogene iar patogenitatea
depinde de prezena sau de numrul mare
al unor microorganisme specifice.

Teoria ecologic
boala parodontal este rezultatul modificrilor
habitatului (nutrieni, pH, potenial redox):
selecia bacteriilor patogene este
influenat direct de schimbrile de mediu;
boala nu are o etiologie specific; orice
specie cu anumite caracteristici poate
contribui la evoluia bolii.


Teoria ecologic
Astfel semnificaia clinic a speciilor nou
descoperite poate fi stabilit pe baza
caracterelor fiziologice ale fiecreia dintre ele.
Boala poate fi prevenit nu numai prin atacul
intit asupra patogenilor parodontali ci i prin
interferarea cu presiunea selectiv a factorilor
de mediu responsabili de nmulirea lor.
Grupurile de bacterii din biofilmul dentar
subgingival
Grup Specii bacteriene
Grupul violet Veillonella parvula
Actinomyces odontolyticus
Grupul galben Streptococcus spp.
Grupul verde Eikenella corrodens
Capnocytophaga spp.
Grupul
portocaliu
P. intermedia/ nigrescens
Micromonas micros
Campylobacter rectus
Fusobacterium nucleatum
Grupul rou Porphyromonas gingivalis
Tannerella forsythia, Treponema denticola
Criterii de identificare a patogenilor
parodontali
Potenialul patogen trebuie:
s fie asociat cu boala, prin creterea ca
numr n situs-ul afectat de boal;
s fie eliminat sau s scad ca numr n
situs-urile cu evoluie clinic bun sub
tratament;
s duc la apariia unui rspuns imun din
partea gazdei;
Potenialul patogen trebuie:

s fie capabil s produc boala la un
animal de laborator;
s aib factori de virulen responsabili de
distrugerea esutului parodontal;
n lipsa inoculrii de patogeni parodontali
la animalele germ free nu trebuie s apar
gingivite sau parodontite.

Microbiologia bolii parodontale
Numrul total al bacteriilor din placa
subgingival este de 2 ori mai mare n
starea de boal comparativ cu starea de
sntate, rspunsul imun fiind crescut n
prima situaie.
i morfotipurile bacteriene difer n cele 2
situaii: n starea de sntate sunt mai
puine spirochete, bacili gram negativi
dect n starea de boal.
Patogen Sntate PA PC BPN
Streptococcus +++ + + +
Actinomyces +++ + + +
Veillonella + + + +
Aggregatibacter
actinomycetemcomitans
- ++ + ?
Capnocytophaga +/- +/- +/- +/-
Treponeme orale +/- +++ +++ +++
Porphyromonas gingivalis - + ++ +/-
Prevotella intermedia +/- + ++ ++
Tannerella forsythia - ++ ++ ?
Fusobacterium nucleatum + + ++ ++
Concluzie:
- biofilmul dentar subgingival al strii de
sntate poate gzdui n cantiti
foarte mici patogeni parodontali, ei fiind
incapabili s concureze cu bacteriile
gram pozitive zaharolitce dominante.

La acumularea biofilmului, rspunsul inflamator
care apare duce la creterea fluxului lichidului
crevicular gingival cu alterarea status-ului
nutriional local
acesta duce la nmulirea bacteriilor proteolitice
gram negative, creterea pH-ului i scderea
potenialului redox.
Proteazele interfer cu controlul gazdei asupra
rspunsului inflamator, agravat i prin creterea
continu a masei bacteriilor gram negative.

Biofilm subgingival stare de sntate
domin bacterii gram pozitive zaharolitice;
Biofilm subgingival inflamaie domin
bacteriile gram negative proteolitice.
Trecerea de la gingivit la parodontit
depinde de 3 factori:
susceptibilitatea gazdei;
prezena bacteriilor patogene;
prezena bacteriilor protectoare;
Motivele care fac ca etiologia bolii
parodontale s nu fie pe deplin
elucidat:
diversitatea speciilor bacteriene din placa
subgingivala asociat bolii parodontale,
variaiile n compoziia florei de la un
individ la altul,
diferenele n rspunsul gazdei la aciunea
diferitelor specii bacteriene, etc.


Asocierea bacteriilor suspectate cu boala parodontal
Foarte puternic
Puternic Moderat
Aggregatibacter
actinomycetemcomitans
Fusobacterium
nucleatum

Streptococcus
constellatus
Porphyromonas gingivalis Prevotella
intermedia
Parvimonas micra
Tannerella forsythia Campylobacter
rectus
Actinomyces
viscosus
Treponema denticola

Eikenella
corrodens
Actinomyces
odontolyticus


www.topleyonline.com
Microbiologia bolii parodontale
Microbiota parodontal sistem ecologic
complex, cu multe interaciuni structurale
i fiziologice ntre bacteriile rezidente i
ntre bacterii i gazd.
Nivele crescute ale unor bacterii
consecina bolii.
Lipsa leziunii numr mic de bacterii,
susceptibilitate sczut a gazdei, diferene
de virulen intraspeciii.
Microbiologia bolii parodontale
Bacteriile protectoare:
ocup spaiul vital ce ar putea fi populat
de bacteriile patogene;
inhib aderena bacteriilor la parodoniu;
inactiveaz anumii patogeni.
Rolul virusurilor n boala
parodontal
Citomegalovirusul (CMV) i virusul Epstein-
Barr (VEB):
efect citopatic pe fibroblati, celule
epiteliale, celule inflamatorii;
supresia mecanismelor de aprare a
parodoniului care permite multiplicarea
patogenilor parodontali;
alterarea micromediului care devine propice
pentru nmulirea patogenilor parodontali;
Mecanisme patogenice n
boala parodontal
Adeziunea, coagregarea, invazia;
Producerea de exotoxine;
Constituienii celulari;
Producerea de enzime;
Eludarea rspunsului imun;
Metode de diagnostic microbiologic n boala
parodontal
Microscopia optic:
cu fond luminos
cu fond negru
cu contrast de faz
Cultivarea
Tehnici PCR
Teste imunoenzimatice ELISA, BANA
Imunofluorescena
Gaz lichid cromatografie
Alte teste
Diagnostic microbiologic
1. Recoltare:
Proba biofilm bacterian subgingival;
Etape:
izolarea dintelui;
ndeprtarea mecanic a plcii supragingivale;
uscare;
recoltarea probei cu ajutorul conurilor de hrtie
de filtru.

2.Transport:

- maxim 30 minute;
- mediu de transport : bulion thioglicolat cu
resazurin.
3. Incubare - 37C n anaerobioz, 5-7 zile.
Examenul microscopic
Frotiuri colorate Gram
rapid, ieftin i util
pentru pacient;
rol n stabilirea
prognosticului;
justific continuarea
investigaiei microbio-
logice.

Microscopia cu fond negru i
contrast de faz


Nu diferentiaz ntre treponeme patogene i
comensale
- Frotiul Gram: placa bacterian asociat cu starea
de sntate parodontal este compus din coci, Gram
pozitive.
- O cretere relativ a numrului de bacili Gram
negativi, de form i dimensiuni variabile este legat
de apariia gingivitei iar flora abundent constituit
din bacili Gram negativi la care se asociaz un
numr mare de spirochete se asociaz la rndul
su cu parodontita adultului.
- Prezena spirochetelor este direct proporional cu
adncimea pungii parodontale, acestea fiind teoretic
absente n cazul unui parodoniu sntos.
Recoltarea probele din pungile parodontale de la pacieni cu
diagnostic clinic de parodontit marginal cronic.
Recoltarea se face cu conuri de hrtie sterile de 20 de mm ce au
fost meninute timp de 30 secunde n punga parodontal dup
ndeprtarea prealabil a plcii bacteriene supragingivale, pentru a
se evita contaminarea probei cu flora supragingival.
Conurile se descarc n tuburi sterile cu 0,5 ml ser fiziologic steril.
b. Examinarea microscopic
Din suspensia obinut n ser fiziologic, se prelev volume
standardizate cu ajutorul unei anse calibrate de 10l, volume care
se folosesc pentru prepararea frotiurilor.
Frotiurile se coloreaz Gram i se examineaz la microscop.
Aspectele oferite de examinarea unui frotiu colorat Gram folosite
drept criterii de evaluare pot fi:
ncrctura bacterian a probei;
prezena florei Gram negative (bacili);
prezena treponemelor orale.


Alte sisteme de identificare
Detectare de enzime preformate (constitutive)
cu substrate cromogene sau fluorogene
Rapid ANA, Rapid ID 32 A, BBL Crystal, API
ZYM
CDC Presumpto plates I, II, III agar
Lombard Dowell
Microbe Lynx System spectroscopie de mas
TOPAS (Toxic OralPathology Assay) este
produs de catre ALT Bioscience U.S.A. i
reprezint un test de toxicitate bisecven-
ial, colorimetric, care se face extempora-
neu, n cabinet i care se bazeaz pe
detectarea a doi markeri ai infeciei
bacteriene la nivelul fluidului crevicular
gingival. Sursa slide-uri 34-40: REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE
VOL. LIV, NR. 2-3, AN 2008 121


Iniial, testul TOPAS este desemnat s detecteze prezena toxinelor
bacteriene din lichidul anului gingival.
Aceste toxine sunt produi de metabolism ai bacteriilor anaerobe
patogene ce apar la nivelul siturilor bolnave, active, de la nivelul anului
gingival i al feei dorsale a limbii i includ compui volatili ai sulfului
(hydrogen sulfurat i metil-mercaptan) i poliamide (putresceina i
cadaverina), toxine ce au fost artate a se afla n concentraii extrem de
mari la nivelul siturilor parodontale infectate i active.

Principiu
Acest test se bazeaz pe reacia dintre toxinele microbiene i un
amestec de reactivi chimici din care rezult un produs de culoare
galben a crei intensitate colorimetric este direct proporional
cu concentraia de toxine microbiene din mostra recoltat.
Cea de-a doua parte a testului TOPAS este desemnat s detecteze
nivelul crescut al proteinelor totale din lichidul crevicular.
Aceste proteine totale includ att proteine bacteriene, ct i proteine
inflamatorii de tipul anticorpilor i proteinelor serice umane
(albumina seric) i asta se datoreaz faptului c infecia bacterian
crete nivelul acestor proteine pe msur ce lichidul anului gingival
se transform dintr-un transsudat seric srac n proteine ntr-un
exudat seric bogat n proteine, aceast cretere provenind att de la
gazd, ct i de la microorganismele ce se dezvolt n numr mare
la nivelul sitului infectat.
Cu ct nivelul proteinelor totale este mai mare, cu att reacia de
culoare albastr va fi mai intens; trebuie remarcat faptul c
sngele sau saliva pot contamina mostrele recoltate i afecta
rezultatele testului n sensul indicrii unui nivel mai crescut de
proteine.

TOPAS este calibrat folosind hidrogenul sulfurat (H2S)
astfel nct standardele de toxicitate variaza de la 0mM (nu
exist toxicitate) i pn la 2 mM (toxicitate sever).
n plus fa de H2S, TOPAS detecteaz i prezena altor
compui sulfhidrici de tipul mercaptanului (CH3 SH),
dimetilsulfidelor (CH3 S CH3) i dimetildisulfidelor (CH3 SS
CH3) precum i toxine fungice ce reacioneaz cu thiolul,
de tipul gliotoxinei.
n plus, TOPAS reacioneaz cu poliamide de tipul
cadaverinei i putresceinei, producnd o coloraie galben.
TOPAS este de asemenea desemnat s detecteze nivele crescute
de proteine de la nivelul lichidului anului gingival i care
sunt caracteristice siturilor parodontale active; aceste proteine
provin din surse microbiene, surse locale produse de factori ai
organismului gazd (de tipul anticorpilor, albuminei serice, aspartat
aminotrans-ferazei, betagluconidazei i fosfatazei alcaline) i din
protein serice.
Aceast a doua faz a TOPAS se bazeaz pe colorarea acestor
proteine cu pigmeni albatri, intensitatea culorii fiind direct
proporional cu cantitatea de proteine de la nivelul lichidului an-
ului gingival.
TOPAS este calibrat n acest sens folosind albumina seric uman ca
standard proteic, cu nivele de la non-detectabil (<5 microgr.) pn
la abundent (>50 microgr.) i asta deoarece albumina seric este
considerat ca fiind cea mai abundent protein de la nivelul
lichidului anului gingival, att la nivelul situsurilor sntoase, ct i
la nivelul celor bolnave.



a. Recoltarea
Determinrile cu testul TOPAS se fac obligatoriu nainte de orice alt
procedur terapeutic dentar.
Se usuc situs-ul din care se va face recoltarea cu mee sterile
sau cu un jet de aer de la unitul dentar, cu scopul de a ndeprta
orice posibilitate de contaminare extern fluid cu saliv nainte de
recoltare.
Se scot conurile de hrtie din pachetul steril.
Dac suntem interesai de statusul unui anume dinte, atunci
recoltarea mostrelor de lichid crevicular gingival se va face la nivelul
anului att mesiovestibular ct, i mesiolingual. Dac suntem
interesai de o anumit pung parodontal, atunci recoltarea se va
face de la nivelul acesteia.
Se inser conurile de hrtie n interiorul anului gingival, respectiv
al pungii parodontale, direcionnd vrful conului de hrtie apical
pn cnd se simte o rezisten uoar. Se las conul de hrtie pe
loc timp de 1 minut, dup care se agit uor tubul cu capacul
galben pentru determinarea toxicitii n scopul aezrii reactivului
din interior pe fundul acestuia. Se desface capacul i se aaz n
poziie vertical n stativ.


b. Determinarea propriu-zis
Dup 1 minut se plaseaz imediat conul de hrtie n tubul cu reactiv asigurndu-ne c
vrful conului este submers n totalitate n reactivul respectiv.
Se nchide tubul cu capacul pentru a mpiedica evaporarea eventualelor toxine
volatile, dup care se agit uor tubul n vederea amestecrii compuilor din lichidul
anului gingival cu soluia de reactiv. Se las tubul n repaus timp de 5 minute pn
cnd se formeaz culoarea galben de reacie, dup care se msoar cu ajutorul
scalei de toxicitate; cu ct culoarea galben este mai intens, cu att nivelul de
toxine bacteriene din lichidul anului gingival este mai ridicat.
Apoi se deschide capacul albastru de la tubul cu reactiv pentru proteine i se toarn
n tubul cu capac gaben, cel cu reactiv pentru toxine. Se pune din nou capacul
albastru i se agit viguros coninutul tubului, se las timp de 2 minute pentru a se
produce colorarea.
Este necesar cronometrarea exact la 2 minute, deoarece colorarea continu n timp
i depirea termenului poate s duc la obinerea de rezultate false!
Dac mostra de lichid crevicular conine proteine, soluia va vira de la o
culoare aquamarine (albastru deschis) la o culoare albastru nchis; cu ct
mostra conine mai multe proteine, cu att reactivul va avea o culoare mai intens de
albastru nchis iar determinarea se va face cu ajutorul scalei de proteine.

GLC gaz lichid cromatografie
Evideniaz produi finali ai metabolismului
bacterian:
acizi grai cu lan scurt
acizi grai cu lan lung



Tehnici
de
biologie
molecular

real time PCR
Micro-Ident


Micro-Ident
- Testul micro-IDent A face posibila determinarea celor cinci
markeri importanti parodotogeni: Aggregatibacter actino-
mycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, Prevotella
intermedia, Bacteroides forsythus si Treponema denticola).
- In unele cazuri de parodontita spectrul de diagnostic poate fi
largit prin determinarea altor 6 germeni: Peptostreptococcus
micros, Fusobacterium nucleatum/periodonticum, Eikenella
corrodens, Campylobacter rectus, Eubacterium nodatum si
Capnocytophaga spp (testul micro-IDent B).
Testele micro-IDent sunt utile pentru:
- identificarea zonelor cu risc si recunoasterea precoce
a recidivelor;
- alegerea antibioticului adecvat si documentarea
succesului terapeutic;
-evaluarea riscului de implant nereusit inaintea
tratamentului.

Sursa slide-uri 44 46: REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE
VOL. LIV, NR. 2-3, AN 2008 121

Specimen recoltat prelevarea probei se face de ctre medicul
stomatolog cu ajutorul beioarelor de hrtie coninute in trusa de
recoltare, obligatoriu naintea tratamentului mecanic sau cu
antibiotice.
-Cu ajutorul unei pense sterile se introduce un beior in punga
parodontala pn la baza acesteia (adncimea pungii parodontale
trebuie sa fie de cel puin 4 mm).
- Beiorul va rmne pe loc timp de 10 secunde, dupa care va fi
retras si introdus in intr-un tub de transfer.
-Se pot recolta maxim 4 probe din pungi parodontale diferite.
-Toate betioarele provenite de la acelasi pacient vor fi introduse
intr-un singur tub de transfer.
-Tubul va fi plasat in trusa albastra de recoltare mpreuna cu o fi
care contine datele pacientului.
-Transportul catre laborator nu ridic probleme, fiind vorba de
determinarea ADN.
Stabilitate proba 1 sptmna la 2-8C. (http: synevo.ro)
Interpretarea rezultatelor
In cazul deteciilor ADN pozitive, pentru fiecare
bacterie patogen rezultatul va fi raportat astfel:
-slab pozitiv,
-pozitiv,
-intens pozitiv.
Aceste moduri de comunicare se coreleaza cu
cantitatea de germeni identificati in prob.
ELISA
BANA
Test colorimetric
Testul pozitiv indic prezena
Treponema denticola, Porphyromonas
gingivalis, Bacteroides forsythus n
prob.
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, July 1990, p. 1551-1559
WALTER J. LOESCHE, et all
Treponema denticola, Porphyromonas (Bacteroides)
gingivalis, and Bacteroides forsythus are among the
anaerobic species frequently associated with adult forms
of periodontal disease.
These organisms hydrolyze the synthetic peptide
benzoyl-DL-arginine-naphthylamide (BANA), and such
enzyme activity can be detected in the plaque and
related to clinical disease and the presence of
spirochetes.


..In this investigation, the liquid BANA assay was
compared with a commercially developed BANA assay
which employed a paper format and which could be read
after a 15-min incubation.
TESTUL BANA este o adaptare a testului de hidroliza BANA
conceput de Dr. Walter Loesche (Univ. Michigan) care se bazeaza
pe detectarea unei enzime care este secretata de Porphyromonas
gingivalis, Treponema denticola si Bacteroides forsythus, cele trei
bacterii anaerobe frecvent asociate cu parodontita adultului sau cu
halena fetida.
-Din 60 de specii subgingivale studiate [Manabu M, 2001] doar
acestea trei secreta aceasta enzima capabila sa hidrolizeze peptidul
sintetic benzoil-DL-argininnaftilamida (BANA) cu care este
mbibata banda test.
-Daca oricare din aceste trei specii este prezenta se produce
hidrolizarea enzimei BANA si apare culoarea albastra, indicatorul
testului pozitiv.
- Cu ct este culoarea mai intensa cu att concentraia microorganis-
melor BANA pozitive este mai mare.
-Testul BANA poate detecta simultan prezenta uneia, a doua sau a celor
trei microorganisme, cu aceeasi acuratee ca si sondele ADN, testul
ELIZA sau imunofluorescenta indirecta [Loaesche WJ, 1992]. -
Sensibilitatea acestor trei metode este de 90-96 % iar acuratetea de 83-
92 %.
-n acelasi studiu comparativ efectuat de Loesche metoda detectarii
acestor microorganisme prin culturi microbiene a avut o acuratete de 50-
62%.


Imunofluorescena
Alte tehnici
FISH (Fluorescence in situ
hybridization) hibridizare fluorescent
in situ
Electroforez n gel de poliacrilamid
duodecil sulfat
http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/fish.php
Metoda FISH (fluorescence in situ hybridization)- este utilizat pentru
analiza ADN prin vizualizare direct pe preparate microscopice celulare sau
cromosomiale.
Se vizualizeaz simultan caracteristicile genotipice i fenotipice a celulelor
i alecromosomilor.
Se ultilizeaz molecule de ADN monocatenar specific marcat radioactiv sau
chimic (unnucleotid fluorescent) cu fluorocromi= sonda ADN- sonda ADN
are capacitatea de a se ataa de secvena ADN complementar indiferent
undeeste situat aceasta n genom.
Sonda marcat poate fi asociat cu anticorpi monoclonali=> utilizarea mai
multor fluorocromi, creterea intensitii semnalului (ADN = antigen).
Poate marca: cromozomi metafazici; nuclei interfazici; cromozomi elongati;
fibra de cromatin.


Sursa slide-uri 55- 56: REVISTA ROMN DE STOMATOLOGIE VOL. LIV, NR. 2-3, AN
2008 121

SDS-PAGE (PAGE = poliacrilamid gel electroforeza)
Electroforeza constituie o metoda rapida de cuantificare,
comparare si caracterizare a puritatii proteinelor, ADN-ului
sau ARN-ului.
Principiul electroforezei: moleculele incarcate (proteine,
acizi nucleici) se deplaseaza de-a lungul unui gel intr-un
camp electric.
Gelul este asemeni unei site moleculare care permite
moleculelor mai mici sa se deplaseze mai rapid, iar celor
mai mari sa inainteze mai lent.
Amestecurile de proteine sunt separate prin intermediul
SDS-poliacrilamid electroforezei (eng. SDS = sodium
dodecyl sulfate - dodecil sulfatul de sodiu). Tehnica a fost
introdusa de Shapiro si colaboratorii in 1967.
Acizii nucleici sunt separati de obicei folosind geluri de
agaroza.
Concluzii
Cultivarea i PCR cele mai folosite.
Nici o metod nu poate fi considerat per
se de referin.
Combinarea de teste cea mai buna
metod.
Antibiograma


Antibiograma ATB ANA (BioMerieux) nu mai este
acceptat

EX: ATB ANA susceptibility test. The ATB ANA strips (bioMrieux, Marcy
lEtoile, France) permit determination of the susceptibility of anaerobic bacteria
to antibiotics in a semisolid medium under conditions similar to those used for
the agar dilution method. A suspension of no. 3 McFarland standard was
prepared by homogenizing without shaking C. difficile colonies in 0.85% saline
buffer, and 200 l was transferred into an ampoule of ATB-S medium; 135 l
was then distributed into each cupule of the strip containing dehydrated
antimicrobial agents. The strips were incubated for 24 h at 37C in an anaerobic
atmosphere. The turbidimetries of the cupules were observed by visual reading,
and interpretation was performed according to the manufacturers
recommendations. The breakpoints to be used for interpretation of the results
were as follows: 1 to 4 g/ml for erythromycin, 2 g/ml for clindamycin, 8 g/ml
for tetracycline, 4 to 16 g/ml for rifampin, and 16 g/ml for chloramphenicol.
Sistemul Vitek si E-Test

Abstract:
Abstract. The aim of the present investigation was to determine the
susceptibility of Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis,
Fusobacterium and Peptostreptococcus micros to metronidazole in vitro.
Two methods were applied on each isolated strain: agar dilution and
epsilometer Etest. A total of fifty three wild test strains (13 P.intermedia,
14 P.gingivalis, 14 F.spp and 12 P.micros) were isolated from patients with
periodontitis. The Etest appears to be a simple, rapid and reliable method
for the metronidazole susceptibility testing. The results show that all
P.intermedia, P.gingivalis and F.spp strains were susceptible to
metronidazole. The mean values of minimal inhibitory concentration
obtained with the agar dilution method were, respectively, 0.98 g/ml,
0.122 g/ml and 0.242 g/ml. For P. micros, the minimal inhibitory
concentration was of 12.14 g/ml. Comparatively to break points, only 60%
of P.micros strains seem to be susceptible, in vitro, to metronidazole. This
study demonstrated the excellent activity of metronidazole against
P.intermedia, P.gingivalis, F.spp except perhaps for P.micros.
Keywords: metronidazole; minimal inhibitory concentration; anaerobic
bacteria; periodontal disease; human study
Terapia cu antibiotice
Antibiotice beneficiu versus folosire n
exces cu afectarea ecologiei orale.
Scop: controlul biofilmului, nu eliminarea
lui.
Sensibilitatea la antibiotice a patogenilor
parodontali variaz considerabil, terapia
empiric este, deci, dificil.
Sensibilitatea bacteriilor componente ale
biofilmului difer de cea a bacteriilor n
stare planctonic din cauza:
penetrabilitii sczute a antibioticelor n
structura biofilmului;
bacteriile din biofilm pot avea intele de
atac ale antibioticelor modificate, sau chiar
pot lipsi;
straturile profunde ale biofilmului pot
constitui un mediu nefavorabil aciunii
antibioticelor.

Categoriile de pacieni ce pot beneficia
de antibioterapia sistemic:
pacienii cu parodontite agresive;
pacienii cu parodontite cronice severe;
pacienii cu parodontit cu manifestri sistemice;
parodontite cu pierderi progresive de ataament
dup tratament corect;
abces parodontal cu extinderea n lojile
nvecinate i adenopatie sever;
boala parodontal necrozant cu starea general
influenat.
Cum alegem un antibiotic?
n funcie de identitatea patogenilor
parodontali.
n funcie de sensibilitatea in vitro a
patogenilor parodontali.
Terapia sistemic cu antibiotice
Metronidazol: 3x500mg, 7-10 zile
Amoxicilin: 3x500mg, 7-10 zile
Amoxicilin + acid clavulanic: 3x500mg, 7-
10 zile
Clindamicin: 4x300mg, 7-10 zile;
Metronidazol+amoxicilin+acid clavulanic;
Terapia cu antibiotice
Penicilina, amoxicilina:
bactericide;
50% din bacilii gram negativi anaerobi
produc lactamaze.
asocierea cu acid clavulanic.

Terapia cu antibiotice
Clindamicina:
aciune foarte bun pe anaerobi;
Toate tulpinile de Eikenella corrodens i
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
sunt rezistente;

Terapia cu antibiotice
Tetraciclina:
spectru larg;
bacteriostatic;
multe tulpini de anaerobi au dobndit
rezisten;
Terapia cu antibiotice
Metronidazol:
antibioticul de elecie n infeciile produse
de anaerobi;
nu acioneaz pe facultativi anaerobi (E.
corrodens, A. actinomycetemcomitans).
Tratament local
Produse cu eliberare controlat de
tetraciclin, metronidazol (geluri, polimeri,
fibre).
Antiseptice: hipocloritul de sodiu,
clorhexidina, compui cationici biguanidici,
hyaluronan, triclosan (n geluri, sprayuri,
ape de gur, paste de dini, gume de
mestecat)
Tratamentul local cu antibiotice
apare rapid rezistena;
are mai puine reacii adverse dect
terapia sistemic;
compliana este bun;
mai scump dect terapia sistemic;


Tratamentul cu antibiotice nu nlocuiete
tratamentul mecanic stomatologic.
Combinarea tratamentului mecanic cu
antibioterapia sistemic sau local d
rezultate statistic mai bune dect fiecare
din ele luate separat.