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Formation

Bi ol ogi e mdi cal e


N 25
Mars 2002
LES MOISISSURES
DINTRT MDICAL
C A H I E R D E
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Ceci est la VERSION NUMERIQUE des CAHIERS BIOFORMA
dj parus et distribus l'ensemble
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LES MOISISSURES
DINTRT MDICAL
Ouvrage ralis par le Laboratoire de Parasitologie-Mycologie
du CHU dAngers 4, rue Larrey
49033 Angers cedex
I Dominique Chabasse
Professeur des Universits - Praticien Hospitalier
Chef de Service
I Jean-Philippe Bouchara
Matre de Confrence des Universits - Praticien Hospitalier
I Ludovic de Gentile
Praticien Hospitalier
I Sophie Brun
Assistante Hospitalo-Universitaire
I Bernard Cimon
Attach (Matre de Confrence des Universits IUT dAngers)
I Pascale Penn
Attache
L I S T E D E S AU T E U R S
S O MMA I R E
INTRODUCTION.......................................................................................................... 9
I - GNRALITS SUR LES CHAMPIGNONS ....................................................... 11
1 - Dfinitions, champignons et mycoses...................................................................... 11
2 - Classification des champignons dintrt mdical................................................... 12
2.1- Introduction....................................................................................................... 12
2.2- Taxinomie ......................................................................................................... 12
a - Les Mastigomycotina.................................................................................. 12
b - Les Zygomycotina ...................................................................................... 13
c - Les Ascomycotina ....................................................................................... 14
d - Les Basidiomycotina................................................................................... 15
e - Les Deuteromycotina .................................................................................. 15
II - CRITRES DIDENTIFICATION......................................................................... 17
1 - Examen macroscopique des cultures ....................................................................... 17
2 - Examen microscopique des cultures........................................................................ 18
2.1- Le thalle vgtatif ............................................................................................. 18
a - Le thalle siphon ou coenocytique.............................................................. 18
b - Le thalle sept ou cloisonn........................................................................ 18
2.2- La couleur des hyphes ...................................................................................... 18
2.3- Lorigine endogne ou exogne des spores ...................................................... 18
a - Spores endognes........................................................................................ 18
b - Spores exognes.......................................................................................... 19
2.4- Laspect des spores ........................................................................................... 19
2.5- La prsence de chlamydospores ....................................................................... 19
2.6- Les diffrents modes de formation des conidies .............................................. 19
2.6.1- Le mode thallique................................................................................... 19
a - Le type thallique solitaire ou terminal .................................................. 20
b - Le type thallique arthrique.................................................................... 20
2.6.2- Le mode blastique .................................................................................. 20
a - Le type blastique solitaire ........................................................................... 20
b - Le type blastique acropte .......................................................................... 20
c - Le type blastique synchrone........................................................................ 20
d - Le type blastique sympodial ....................................................................... 20
e - Le type blastique rgressif .......................................................................... 21
f - Le type blastique percurrent (ou blastique annellidique)............................ 21
g - Le type blastique phialidique...................................................................... 21
h - Le type blastique porique............................................................................ 21
2.7- Le mode de groupement des conidies .............................................................. 22
a - En grappes................................................................................................... 22
b - En masse ..................................................................................................... 22
c - En ttes ou balles .................................................................................. 22
d - En chanes basiptes ................................................................................... 22
e - En chanes acroptes ................................................................................... 22
2.8- Le mode dimplantation des cellules conidiognes.......................................... 22
2.8.1- Cellules conidiognes indiffrencies ou peu diffrencies.......................... 22
2.8.2- Cellules conidiognes diffrencies .............................................................. 22
2.9- La prsence de structures protectrices compactes............................................ 23
2.9.1- Dorigine asexue................................................................................... 23
a - Les pycnides.......................................................................................... 23
b - Les acervules......................................................................................... 23
2.9.2- Dorigine sexue..................................................................................... 23
a - Les gymnothces ................................................................................... 23
b - Les clistothces ................................................................................... 23
c - Les prithces........................................................................................ 24
3 - Dmarche diagnostique dune moisissure dintrt mdical ................................... 24
III - TUDE DES PRINCIPALES MOISISSURES DINTRT MDICAL.......... 35
1 - Les Mucorales .......................................................................................................... 36
1.1- Epidmiologie................................................................................................... 36
1.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 36
1.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 36
1.4- Morphologie microscopique............................................................................. 36
1.5- Genres prsents ............................................................................................... 37
Absidia............................................................................................................... 38
Mucor ................................................................................................................ 40
Rhizomucor........................................................................................................ 42
Rhizopus ............................................................................................................ 44
2 - Les Aspergillus ......................................................................................................... 46
2.1- Epidmiologie................................................................................................... 46
2.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 46
2.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 47
2.4- Morphologie microscopique............................................................................. 47
2.5- Espces prsentes............................................................................................ 48
Aspergillus fumigatus ........................................................................................ 52
Aspergillus flavus............................................................................................... 54
Aspergillus niger................................................................................................ 56
Aspergillus terreus ............................................................................................. 58
Aspergillus nidulans .......................................................................................... 60
Aspergillus versicolor ........................................................................................ 62
Aspergillus du groupe glaucus .......................................................................... 64
Aspergillus candidus.......................................................................................... 66
3 - Les autres Mucdins ou hyalohyphomyctes......................................................... 68
3.1- Epidmiologie................................................................................................... 68
3.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 68
3.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 69
3.4- Morphologie microscopique............................................................................. 69
3.5- Genres et espces prsents.............................................................................. 69
Acremonium (ex Cephalosporium) .................................................................... 70
Beauveria bassiana............................................................................................ 72
Chrysosporium keratinophilum.......................................................................... 74
Chrysosporium (Geomyces) pannorum.............................................................. 76
Fusarium ........................................................................................................... 78
Fusarium moniliforme ( F. verticillioides) ...................................................... 80
Fusarium oxysporum......................................................................................... 82
Fusarium solani................................................................................................. 84
Onychocola canadensis ..................................................................................... 86
Paecilomyces ..................................................................................................... 88
Penicillium......................................................................................................... 90
Scedosporium apiospermum.............................................................................. 94
Scopulariopsis brevicaulis ................................................................................. 98
Scytalidium hyalinum......................................................................................... 100
Trichoderma ...................................................................................................... 102
Trichothecium.................................................................................................... 104
4 - Les Dmatis (ou phaohyphomyctes) et les Coelomyctes ................................. 106
4.1- Epidmiologie................................................................................................... 106
4.2- Pouvoir pathogne ............................................................................................ 106
4.3- Caractres culturaux ......................................................................................... 106
4.4- Morphologie microscopique............................................................................. 107
4.5- Genres et espces prsents.............................................................................. 107
Alternaria ......................................................................................................... 108
Aureobasidium pullulans .................................................................................. 110
Bipolaris ........................................................................................................... 112
Cladosporium................................................................................................... 114
Curvularia ........................................................................................................ 116
Exophiala.......................................................................................................... 118
Phialophora...................................................................................................... 120
Scytalidium dimidiatum .................................................................................... 122
Ulocladium....................................................................................................... 124
Phoma............................................................................................................... 126
5 - Dmarche diagnostique au laboratoire .................................................................... 128
5.1- Prlvements..................................................................................................... 128
5.2- Examen direct ................................................................................................... 128
5.3- Culture .............................................................................................................. 128
5.4- Incubation ......................................................................................................... 129
5.5- Examen des colonies fongiques........................................................................ 129
5.6- Culture sur lame................................................................................................ 130
5.7- Interprtation..................................................................................................... 131
RFRENCES GNRALES CONSEILLES........................................................ 133
RFRENCES SPCIFIQUES ................................................................................... 133
GLOSSAIRE................................................................................................................... 145
ANNEXES....................................................................................................................... 155
1 - Eclaircissants............................................................................................................ 155
2 - Colorant des cultures................................................................................................ 156
3 - Milieux disolement ................................................................................................. 156
4 - Autres milieux utiliss en mycologie ...................................................................... 157
Les progrs en mdecine ont permis de mieux matriser lvolution de nombreuses
maladies jadis rapidement fatales. Le dveloppement des traitements immunodpresseurs
et lapparition de nouvelles maladies comme le syndrome dimmunodficience acquise
(SIDA), mais aussi la multiplication des facteurs iatrogniques et lextension des greffes
dorganes ou de tissus (moelle osseuse), lorigine de nombreuses infections nosoco-
miales, sont autant de circonstances qui expliquent lextension actuelle des mycoses.
La liste des nouveaux champignons mergeant en mdecine ne cesse de saugmenter.
Beaucoup despces, en particulier des champignons filamenteux appels
moisissures , issues du sol, de lair ou des plantes et jadis inconnues du biologiste, ou
qualifies de contaminants de laboratoire , sont rellement impliques dans un pro-
cessus pathologique.
Le but de cet ouvrage est dapporter au biologiste, confront un champignon, une
dmarche diagnostique pratique ainsi que les lments morphologiques ncessaires son
identification. Notre propos se limitera aux espces filamenteuses ou moisissures.
INTRODUCTION
9
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002

I 1. DFINITIONS, CHAMPIGNONS ET MYCOSES
Les champignons, appels aussi myctes, sont des organismes eucaryotes uni- ou pluri-
cellulaires, incluant des espces macroscopiques (macromyctes) et dautres
microscopiques (micromyctes), daspect filamenteux ou levuriforme.
Cosmopolites, ils sont retrouvs partout dans la nature. Ils jouent un rle essentiel de
recyclage des matires organiques en puisant leur nergie partir des sources carbones
externes (htrotrophie).
Dans la classification du monde du vivant, les champignons constituent aussi un rgne
part, distinct de celui des plantes ou des animaux.
Leur particularit morphologique est dtre troitement lis leur substrat nutritif grce
un rseau myclien trs dvelopp.
Sur un plan biochimique, les champignons sont caractriss par la prsence dune paroi
constitue essentiellement de polysaccharides, notamment des glucanes et de la chitine.
Lergostrol constitue le principal strol de leur membrane, et la synthse de la lysine
seffectue par la voie de lacide amino-adipique.
Une autre de leur caractristique remarquable est leur reproduction. Ils produisent en effet
un grand nombre de spores, ce qui leur assure un pouvoir de diffusion (et de
contamination) considrable. Ces spores sont issues de plusieurs modalits de
reproduction sexue ou asexue qui seront la base de leur classification.
Si les macromyctes sont bien visibles lil nu cause de leurs carpophores (organes
reproducteurs) abondants dans les sols certaines saisons, ils intressent peu les biologistes
mdicaux car ce ne sont pas des agents habituels de mycoses. En revanche, les micro-
myctes qui font lobjet de notre tude, peuvent tre lorigine dinfections humaines
parfois redoutables. Ces champignons, habituellement microscopiques, deviennent dans
certaines circonstances, visibles dans notre environnement. Cest ce que lon appelle
couramment les moisissures , vritables agglomrats de filaments mycliens et
dorganes fructifres recouvrant des substrats divers (fruits ou vgtaux en dcomposition,
vieux murs, tapisserie, ), et capables de produire des quantits extraordinaires de spores.
Les champignons, partout prsents, tablissent aussi avec les espces animales ou vgtales
des interactions qui vont du saprophytisme au parasitisme, en passant parfois par le
commensalisme, ou encore participent des phnomnes symbiotiques, traduction
vraisemblable de leur co-volution avec les vgtaux dune part, et les animaux dautre part.
Le pouvoir pathogne des champignons peut sexprimer de diverses faons. En produisant
des toxines, ils peuvent tre lorigine dintoxication alimentaire, ou de mycotoxicoses
11
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
I. GNRALITS
SUR LES CHAMPIGNONS
par laccumulation de ces toxines dans des vgtaux et leur consommation par lhomme
ou lanimal. Diffrent est le dveloppement du champignon dans lorganisme humain ou
animal (colonisation, invasion, dissmination) ; ce parasitisme est lorigine de maladies
appeles mycoses (car produites par des myctes).
Ce sont les principaux agents de mycoses produites par les micromyctes filamenteux qui
seront abords dans cet ouvrage.
I 2. CLASSIFICATION DES CHAMPIGNONS DINTRT GNRAL
2.1- Introduction
Le rgne des champignons comprend des divisions, elles-mmes subdivises en classes.
Celles-ci englobent les ordres qui rassemblent les familles.
Les noms se terminent par : mycotina pour les divisions, myctes pour les classes.
Le suffixe -ale est employ pour dsigner les ordres, le suffixe -aceae pour les familles
et le suffixe -adeae pour les sous-familles. Une famille comprend des genres qui
englobent des espces, celles-ci peuvent se subdiviser en varits. Chaque
champignon porte un nom qui suit les rgles de la nomenclature binomiale (genre et
espce) nonces par Carl Von Linn au 18
e
sicle.
Lidentification des champignons est essentiellement morphologique. Un micromycte
peut parfois se prsenter sous diffrentes formes : une forme sexue ou tlomorphe et
une forme asexue ou anamorphe, les deux formes portant des noms diffrents. Lorsque
plusieurs aspects coexistent pour la forme asexue, on parle de synanamorphes. Lorsque
lespce fongique existe dans la mme culture sous forme sexue et asexue, on parle
dholomorphe. En pratique, lorsquun champignon est dcouvert en culture, il portera le
nom de la forme isole. Lorsquil existe sous les deux formes (anamorphe et
tlomorphe), cest le nom de la forme sexue qui sera retenu en priorit.
2.2- Taxinomie
La classification de Hawksworth, Sutton et Ainsworth (1970) modifie par Kwon Chung
et Bennett (1992), puis par de Hoog (1995), est la plus utilise actuellement (Figure 1).
On diffrencie quatre divisions selon les modalits de la reproduction sexue : les
Mastigomycotina, les Zygomycotina, les Ascomycotina et les Basidiomycotina. En outre,
lorsque la reproduction sexue nest pas connue, la division est appele Deuteromycotina
ou Fungi imperfecti.
a - Les Mastigomycotina
Les Mastigomycotina qui sont trs rarement impliqus en pathologie humaine, se
rpartissent en deux classes : les Chytridiomyctes et les Oomyctes. Ils sont caractriss
par la prsence de spores munies de flagelles (un pour les Chytridiomyctes, deux pour
les Oomyctes). Cependant, aujourdhui la nomenclature ne retient dans le rgne des
champignons que les Chytridiomyctes, en raison de la prsence de chitine dans leur paroi
et de leur nutrition qui se fait par absorption.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Domaine : Eucaryotes
Rgne : Champignons
Division : Ascomycotina
(phylum) Basidiomycotina
Zygomycotina
Chytridiomycotina
(Deuteromycotina)
Figure 1 : Classification gnrale des champignons.
* Champignons connus seulement par leur stade asexu, en attente de classification.
** Actuellement les espces issues de cette division ne sont plus classes parmi les champignons vrais.
b - Les Zygomycotina
Cette division qui est caractrise par la production de spores sexues appeles zygospores,
comporte de nombreux pathognes : les Mucorales, agents des mucormycoses et les
Entomophthorales, agents des entomophthoromycoses (Figure 2). Ils sont considrs,
avec les Mastigomycotina, comme des champignons infrieurs. Deux caractristiques les
diffrencient des autres champignons dits suprieurs (Ascomycotina et
Basidiomycotina) : le myclium vgtatif est plus large, souvent dilat, peu ou pas
cloisonn et la reproduction asexue est dite endogne. Chez les Mucorales, par exemple,
les spores sont produites lintrieur dun sac appel sporocyste, do le nom de
sporocystophore donn aux filaments porteurs de ce sac. Chez les Entomophthorales, les
spores asexues sont produites lextrmit de filaments et sont habituellement projetes
distance, elles portent le nom de ballistospores.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Champignons
suprieurs
Champignons
infrieurs
Basidiomycotina
Champignons
Ascomycotina Zygomycotina
Chytridiomycotina
Oomycotina**
Deuteromycotina*
(champignons imparfaits)
Figure 2 : Classification des Zygomyctes.
Seuls les genres marqus d'une astrisque seront abords dans cet ouvrage.
c - Les Ascomycotina
Dans ce groupe qui comprend aussi un grand nombre de pathognes de lhomme (levures
ascospores, champignons filamenteux tels que les Aspergillus, les dermatophytes, ), les
spores issues de la reproduction sexue (appeles ascospores) sont produites de manire
endogne lintrieur dun sac appel asque. Ces asques, gnralement octospors, seront
libres (levures ascospores ou Hmiascomyctes) ou produits lintrieur dun organe
protecteur de forme variable appel ascocarpe (Ascomyctes vrais ou Euascomyctes).
Les Hmiascomyctes (levures ascospores) et les Ascomyctes filamenteux se
rpartissent en six ordres diffrents au moins :
1. Les Onygnales : Les ascospores sont produites principalement dans des gymnothces
et la reproduction asexue seffectue selon le type thallique solitaire.
2. Les Eurotiales : Les ascospores sont produites dans des clistothces, et la reproduction
asexue seffectue selon le type phialidique ou annellidique.
3. Les Microascales : Lascocarpe est clos, il contient des asques et des ascospores brunes
et la reproduction asexue seffectue selon le type annellidique.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Rgne CHAMPIGNONS
Phylum Zygomycotina
Classe Zygomyctes
Ordre Mucorales Entomophthorales
Famille Mucoraceae Cunninghamellaceae
Syncephalastraceae
Saksenaceae
Genre Mucor sp.*
Absidia sp.*
Rhizopus sp.*
Rhizomucor sp.*
4. Les Ophiostomatales : Les ascorcarpes sont des prithces et la reproduction asexue
seffectue selon le type sympodial.
5. Les Sordariales : Les anamorphes sont hyalins. Les ascocarpes sont des prithces, et
la reproduction asexue seffectue selon le type phialidique.
6. Les Dothidales : Les anamorphes sont mlaniss. Les ascocarpes sont des clistothces
ou des prithces.
NB : Pneumocystis carinii forme (ou varit) hominis est actuellement rattach aux
Ascomyctes. Sa position taxinomique prcise au sein de cette division est encore discute.
d - Les Basidiomycotina
Ils sont caractriss par la production de spores sexues (appeles basidiospores) formes
par bourgeonnement lapex de cellules allonges, les basides. Les Basidiomyctes ont
un thalle cloisonn avec prsence de boucles au niveau des cloisons. Les cloisons des
filaments mycliens ( clamp connexion ) comportent le plus souvent un pore central
unique de structure complexe appel dolipore.
La plupart des Basidiomyctes sont des saprophytes de lenvironnement ou parfois des
pathognes de plantes, mais ils sont peu impliqus en pathologie humaine. Ceux qui
vivent en parasite chez lhomme sont le plus souvent des Cryptococcus, notamment
C. neoformans dont la forme parfaite appartient au genre Filobasidiella. Dautres levures
appartenant aux genres Malassezia, Rhodotorula et Trichosporon dont les formes sexues
ne sont pas connues, ont des caractres communs avec les Basidiomyctes.
Les Basidiomyctes comprennent deux groupes principaux : les Htrobasidiomyctes
(Ustilaginales) basides divises ou ramifies et les Holobasidiomyctes basides simples.
Chez les Holobasidiomyctes qui sont essentiellement des macromyctes, deux ordres sont
exceptionnellement impliqus en pathologie humaine : les Aphyllophorales et les
Agaricales.
e - Les Deuteromycotina (champignons imparfaits ou Fungi imperfecti)
Cest dans cette division quon retrouvera le plus grand nombre de ces espces dintrt
mdical. Cet ensemble, trs htrogne, englobe toutes les espces se multipliant sur le
mode asexu. Des donnes rcentes reposant dune part sur la microscopie lectronique,
dautre part sur la biologie molculaire (comparaison des squences dADN ribosomique
par exemple), permettent dtablir des liens troits avec de nombreux Ascomyctes ou
Basidiomyctes. En pratique, le maintien de cette division savre utile car beaucoup
despces nexpriment pas en culture leur reproduction sexue.
Les Deuteromycotina sont diviss en trois classes (Figure 3) :
Les Blastomyctes qui regroupent lensemble des champignons levuriformes.
Les Hyphomyctes qui regroupent tous les champignons filamenteux thalle sept
dont les cellules conidiognes (productrices de spores ou conidies) sont libres.
Les Coelomyctes qui rassemblent les champignons filamenteux dont les cellules
conidiognes sont contenues dans des organes protecteurs appels pycnides ou acervules.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Schmatiquement, on oppose deux types dHyphomyctes : les hyalins ou clairs
(hyalohyphomyctes) appartenant la famille des Moniliaceae et les foncs ou noirs
appels Dmatis ou phaohyphomyctes appartenant la famille des Dematiaceae.
Cet ouvrage se propose de ne traiter que les champignons filamenteux dintrt mdical.
Les espces tudies vont appartenir principalement aux Deutromyctes, et le plus
souvent aux Hyphomyctes. Plus rarement, ils se recrutent parmi les Coelomyctes
producteurs de pycnides, ou parmi les Zygomyctes.
Figure 3 : Classification des Deutromyctes.
Seuls les genres marqus dune astrisque seront abords dans cet ouvrage.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Rgne CHAMPIGNONS
Phylum Deuteromycotina
(Fungi Imperfecti)
Classe Blastomyctes Coelomyctes Hyphomyctes
Ordre Cryptococcales Moniliales
Moniliaceae Dematiaceae
Famille (hyalohyphomyctes) (phaohyphomyctes)
Genre Candida sp. Nattrassia sp. Acremonium sp.* Alternaria sp.*
Cryptococcus sp. Phoma sp.* Aspergillus sp.* Aureobasidium sp.*
Malassezia sp. Beauveria sp.* Bipolaris sp.*
Trichosporon sp. Chrysosporium sp.*
Cylindrocarpon sp.
Cladosporium sp.*
Curvularia sp.*
Fusarium sp.* Exophiala sp.*
Onychocola sp.* Phialophora sp.*
Paecilomyces sp.* Scytalidium sp.*
Penicillium sp.* Ulocladium sp.*
Scedosporium sp.*
Scopulariopsis sp.*
Scytalidium sp.*
Trichoderma sp.*
Schmatiquement, lidentification dune espce repose sur des critres macroscopiques
(aspect gnral des colonies) et microscopiques (tude des filaments vgtatifs, des
organes de fructification et des spores). Certaines donnes (temprature, vitesse de pousse,
sensibilit au cycloheximide) seront des complments utiles lidentification.
I 1. EXAMEN MACROSCOPIQUE DES CULTURES / MORPHOLOGIE
MACROSCOPIQUE
La vitesse de pousse est dj une bonne orientation. Elle peut tre rapide comme chez les
Aspergillus et les Mucorales, plus lente chez les dermatophytes (non traits ici) et certaines
Dmatis, ou mme trs lente comme chez Onychocola canadensis, agent donyxis. La
vitesse de pousse varie aussi en fonction de la richesse de linoculum. Elle est en effet
dautant plus rapide que linoculum est important. Les cultures issues du revtement
cutan poussent habituellement bien 25-30 C, celles issues de prlvements profonds
37 C. Une atmosphre humide est favorable la pousse et laration des tubes ou des
botes doit tre correcte (ne pas visser fond les tubes).
Laspect des colonies est galement un bon critre dorientation. Les champignons
levuriformes donnent des colonies lisses, glabres, humides, daspect brillant ou mat,
parfois rugueuses. A loppos, les filamenteux dont il sera essentiellement question ici, ont
une texture diffrente : duveteuse, laineuse, cotonneuse, veloute, poudreuse ou
granuleuse. Parfois certaines colonies de filamenteux peuvent avoir une apparence glabre
en raison de labsence ou de la pauvret du myclium arien. Le relief des colonies (plates,
plisses, crbriformes, ), tout comme leur consistance, est aussi observer. Elles
peuvent en effet tre molles, friables, lastiques, cartonnes ou dures.
Il convient de prciser aussi la taille des colonies, petites, tendues, voire envahissantes
comme chez les Mucorales.
La couleur de la colonie est galement un lment pertinent dorientation ainsi que la
prsence dun pigment dans la glose bien que ces derniers critres sont soumis aux
conditions de culture. En gnral, les hyalohyphomyctes restent clairs : colonies
blanches, mais aussi crmes ou colores (vertes, brunes, oranges, violettes, grises, ).
Par contre, les phaohyphomyctes deviennent rapidement foncs ou noirs. Le pigment et
sa couleur, diffusible ou non dans la glose, doivent tre nots. Enfin lobservation
macroscopique des cultures devra rechercher en surface, et surtout au centre de la culture,
les structures de fructification sexue (clistothces) ou asexue (pycnides) ainsi que des
amas mycliens ou mches (cormies).
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
II - CRITRES
DIDENTIFICATION
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
I 2. EXAMEN MICROSCOPIQUE DES CULTURES / MORPHOLOGIE
MICROSCOPIQUE
Un ou mieux plusieurs fragments de culture seront prlevs lose pour les cultures
glabres, ou au scotch (test du drapeau) pour les cultures filamenteuses et poudreuses, et
ensuite dposs dans une goutte de bleu lactique entre lame et lamelle.
Plusieurs prlvements au centre et en priphrie de la colonie sont parfois ncessaires.
De mme, il faut savoir rpter les montages afin de saisir le meilleur moment (cultures
ni trop jeunes, ni trop ges) pour observer la conidiognse.
On analysera successivement :
2.1- Le thalle vgtatif
Tous les champignons possdent un appareil vgtatif constitu de filaments (ou hyphes),
lensemble est appel thalle ou myclium. On distingue schmatiquement :
a - Le thalle siphon ou coenocytique
Il est constitu dlments tubulaires peu ou pas ramifis, de diamtre large et irrgulier
(5 15 m en moyenne) et non cloisonns. Ces filaments caractrisent les champignons
infrieurs (Zygomyctes, Chytridiomyctes). En pratique mdicale, ils orientent, sous nos
climats, vers un diagnostic de Mucorales.
b - Le thalle sept ou cloisonn
Il correspond aux champignons dits suprieurs : Ascomyctes, Basidiomyctes et
Deutromyctes filamenteux. Ces filaments ont un diamtre troit (2 5 m) et rgulier :
leurs bords sont parallles. Ils sont diviss par des cloisons ou septa en articles uni ou
pluricellulaires.
2.2- La couleur des hyphes
La paroi des hyphes peut tre mlanise (ou fonce). Les Hyphomyctes dont les
filaments restent clairs (ou hyalins) sont appels Mucdins ou hyalohyphomyctes. En
revanche, les Hyphomyctes qui ont une paroi pigmente ou fonce seront appels
Dmatis ou phaohyphomyctes.
2.3- Lorigine endogne ou exogne des spores
On peut mettre en vidence deux modes de formation des spores asexues :
a - Spores endognes
Ces spores (ou endospores) sont produites lintrieur dun sac ferm port par un
filament spcialis. Ainsi chez les Mucorales, les spores asexues naissent lintrieur de
sacs appels sporocystes (ou sporanges) et seront libres par dchirement de la paroi du
sporocyste maturit.
b - Spores exognes
Chez les Basidiomyctes, les Ascomyctes et les Deutromyctes, les spores asexues sont
formes de manire exogne, gnralement par bourgeonnement partir dune cellule
spcialise appele cellule conidiogne. On appelle les spores ainsi produites des conidies.
2.4- Laspect des spores
La forme des spores et leurs modalits ventuelles de septation taient initialement la
base de la classification des Deutromyctes. Selon leur aspect, on distinguait cinq
groupes de spores chez les champignons dintrt mdical :
les amrospores : spores unicellulaires de petite taille (exemples : Penicillium,
Aspergillus)
les didymospores : spores bicellulaires (exemple : Trichothecium)
les phragmospores : spores pluricellulaires cloisons transversales (exemples :
Drecheslera, Bipolaris, Curvularia)
les dictyospores : spores pluricellulaires cloisons transversales et longitudinales
(exemples : Alternaria, Ulocladium)
les scolcospores : spores troites, effiles, souvent incurves et cloisonnes
transversalement (exemple : Fusarium)
Ces critres ont aujourdhui une importance secondaire dans la classification, et en
pratique seuls les termes de dictyospores, et un degr moindre de phragmospores, restent
utiliss.
2.5- La prsence de chlamydospores
Les chlamydospores sont des spores de rsistance qui sont formes partir dun article du
filament myclien ou son extrmit. Elles ont une paroi paisse.
Contrairement aux autres spores, elles ne possdent pas de mcanisme de libration
permettant leur dissmination maturit.
Bien que peu spcifiques puisquelles se retrouvent chez pratiquement toutes les espces
lorsque les conditions sont dfavorables (culture trop ge, appauvrissement du milieu
nutritif), elles peuvent cependant constituer une aide au diagnostic lorsquelles
apparaissent prcocement (par exemple chez certaines espces du genre Fusarium).
2.6- Les diffrents modes de formation des conidies
Chez les Deutromyctes (ou champignons imparfaits), une cellule (ou article)
spcialise ou non du thalle devient une cellule conidiogne (cellule produisant les
conidies). Cette cellule peut tre issue directement des filaments vgtatifs ou bien porte
par un filament spcialis appel conidiophore. Deux grands modes de conidiognse
doivent tre diffrencis.
2.6.1- Le mode thallique
Ici la formation des spores seffectue partir dlments prexistants du thalle. On en
distingue deux variantes principales :
19
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
a - Le type thallique solitaire ou terminal (holothallique)
Un article (ou groupe darticles) latral ou terminal de lhyphe sindividualise en une
spore unicellulaire (ou pluricellulaire) appele aleurie (exemples : les dermatophytes, les
Chrysosporium et Scedosporium).
b - Le type thallique arthrique
Le filament (ou lhyphe) se diffrencie en spores de manire progressive et rtrograde
(depuis le sommet jusqu la base), puis les spores ainsi formes, daspect rectangulaire,
sont libres. Ces conidies sont appeles arthrospores (exemples : Geotrichum sp. et
Scytalidium hyalinum pour les hyalohyphomyctes, Scytalidium dimidiatum pour les
phaohyphomyctes).
2.6.2- Le mode blastique
Dans ce cas, les spores sont formes par bourgeonnement partir de cellules conidiognes
diffrencies ou non, puis une cloison se forme lmergence du bourgeon et la cellule
fille (ou spore) se spare de la cellule mre.
Ce mode de conidiognse est le plus rpandu. On en distingue galement plusieurs
variantes :
a - Le type blastique solitaire
Cest lexemple des levures appeles aussi blastospores. Une spore est produite partir
de la cellule mre par simple bourgeonnement (exemples : Candida, Malassezia, ). Dans
ce mode de conidiognse, chaque site de bourgeonnement ne fonctionne quune seule
fois. Cependant une mme blastospore peut produire plusieurs cellules filles, de manire
successive et en des sites diffrents mais contigus.
b - Le type blastique acropte
Chaque cellule mre bourgeonne une ou plusieurs conidies qui leur tour produisent de
nouvelles conidies et ainsi de suite. Les conidies restent accoles les unes aux autres
formant une chane de spores dite acropte, la plus jeune des spores (dernire produite)
tant situe lextrmit de la chane. En outre, cette chane est plus ou moins ramifie,
puisquune mme cellule mre peut bourgeonner plusieurs cellules filles de manire
successive et en des sites diffrents, mais contigus (exemples : Cladosporium, Alternaria).
On visualise facilement le point dattache des conidies entre elles (cicatrices de
bourgeonnement) lorsquelles sont libres.
c - Le type blastique synchrone
Il y a alors bourgeonnement simultan de plusieurs conidies partir dune cellule
conidiogne qui est renfle sa partie apicale (exemple : Botrytis, non trait ici).
d - Le type blastique sympodial
Les conidies naissent toujours par bourgeonnement, mais aprs chaque bourgeonnement,
la cellule conidiogne reprend sa croissance latralement. Cette alternance de
phnomnes de bourgeonnement terminal et de reprise de croissance latrale se traduit
20
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
par un aspect en sympode ou en zig-zag de la cellule conidiogne o chaque angle
correspond un site de bourgeonnement (exemples : Beauveria et Sporothrix schenkii,
agent de la sporotrichose).
e - Le type blastique rgressif
Ici les conidies sont formes la fois dlments prexistants du thalle et dlments
noforms. Elles sont produites en effet lune aprs lautre par bourgeonnement au
sommet de la cellule conidiogne. Mais ces bourgeonnements successifs saccompagnent
dune fragmentation progressive et rtrograde de la cellule conidiogne. La cellule
conidiogne se raccourcit au fur et mesure de son fonctionnement. Les conidies
apparaissent par ailleurs bicellulaires et disposes en grappes (exemple : Trichothecium
roseum).
f - Le type blastique percurrent (ou blastique annellidique)
La cellule conidiogne (appele annellide), parfois peu diffrencie du filament, produit
son extrmit apicale une conidie, puis reprend sa croissance son sommet. Elle forme
ensuite une deuxime conidie qui repousse la premire, et ainsi de suite.
Les spores restent ainsi accoles les unes aux autres en chanes basiptes, la plus jeune
tant la base de la chane, chane non ramifie puisque les spores sont issues dune
cellule conidiogne site de bourgeonnement unique. Cependant, cet difice est fragile,
et se dissocie souvent au montage. De plus, les reprises de croissance successives
induisent au sommet de la cellule conidiogne une succession danneaux peu visibles,
llaboration de la nouvelle paroi seffectuant lors de ces reprises de croissance seulement
partir des couches paritales internes de la cellule conidiogne (exemple :
Scopulariopsis).
g - Le type blastique phialidique
La cellule conidiogne, appele phialide, apparat souvent bien diffrencie. Elle a une
forme de bouteille renfle au milieu avec une base troite et une partie apicale effile, et
se termine parfois par une collerette plus ou moins visible.
Les phialides sont poses directement sur des hyphes vgtatifs (exemple : Phialophora),
ou au contraire, sur un filament spcialis appel conidiophore, plus ou moins ramifi. Les
conidies formes par bourgeonnement sont accoles les unes aux autres en chanes
basiptes, la plus jeune tant la base (exemples : Aspergillus, Penicillium), ou glissent les
unes sur les autres pour se rassembler en amas ou balle au sommet de la phialide
(exemple : Acremonium).
h - Le type blastique porique
La conidie quand elle se dtache du filament porteur (conidiophore), laisse sur ce dernier
une empreinte visible, en forme de dpression, le pore, do le terme de porospores
donn aux spores ainsi produites (exemples : Alternaria, Stemphylium, Ulocladium,
Bipolaris, Curvularia).
21
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
2.7- Le mode de groupement des conidies
On peut observer plusieurs modalits de groupement des conidies lextrmit des
cellules conidiognes :
a - En grappes
Les grappes de spores rsultent de la production de conidies solitaires par une cellule
conidiogne qui saccrot (type blastique sympodial ; exemple : Beauveria) ou se
raccourcit (type blastique rgressif ; exemple : Trichothecium roseum) au fur et mesure
de son dveloppement.
b - En masse
Ce mode de groupement sobserve chez les espces dont les conidies sont produites sur le
type blastique synchrone (Botrytis).
c - En ttes ou balles
A lextrmit apicale de certaines phialides, les conidies produites restent agglomres par
une substance adhsive qui maintient lensemble au sommet de la phialide (Acremonium,
Trichoderma).
d - En chanes basiptes
Type blastique percurrent chez les hyalohyphomyctes (Scopulariopsis)
Type blastique phialidique avec des phialides disposes en ttes aspergillaires
(Aspergillus) ou organises en pinceau (Paecilomyces, Penicillium)
e - En chanes acroptes
Type blastique acropte chez les phaohyphomyctes (Cladosporium, Alternaria)
2.8- Le mode dimplantation des cellules conidiognes
Les cellules conidiognes peuvent natre de structures plus ou moins labores issues du
myclium vgtatif.
2.8.1- Cellules conidiognes indiffrencies ou peu diffrencies
Certaines sont intgres dans les hyphes, intercalaires ou situes en position terminale
(Aureobasidium). Dautres naissent latralement, mais restent peu diffrencies des
filaments vgtatifs (Exophiala).
2.8.2- Cellules conidiognes diffrencies
a - directement insres sur les filaments vgtatifs (Acremonium, Fusarium)
b - bien distinctes des filaments vgtatifs, portes par des conidiophores disperss sur le
thalle vgtatif :
regroupes lextrmit dilate du conidiophore, formant une tte aspergillaire
(Aspergillus)
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
regroupes en verticille au sommet du conidiophore : pinceau (Penicillium)
disposes en verticilles le long du conidiophore (Verticillium)
c - bien distinctes des filaments vgtatifs, portes par des conidiophores groups :
conidiophores disposs paralllement les uns aux autres, agrgs en une gerbe sporifre
appele cormie ou synnema (Graphium, Scedosporium)
conidiophores agrgs en coussinets superficiels appels sporodochies (Myrothecium,
non trait ici)
2.9- La prsence de structures protectrices compactes, issues de la reproduction
asexue ou sexue
2.9.1- Dorigine asexue
En pratique, seules les pycnides peuvent tre observes sur les milieux de culture utiliss
en mycologie mdicale, les acervules ne se formant que dans les tissus de lhte vgtal.
a - Les pycnides
Ce sont des nodules mycliens (parfois visibles lil nu), creux, composs dune paroi
paisse forme par un feutrage compact de filaments mycliens. La face interne de la paroi
est tapisse de conidiophores produisant des conidies. Les pycnides ont un petit orifice
(ostiole) qui souvre maturit pour librer les spores (Phoma). Ils caractrisent, au sein
des Coelomyctes, les Sphaeropsidales.
b - Les acervules
Ce sont des agrgats de filaments mycliens enchevtrs, solidement attachs sur un
vgtal dlimitant une cavit avec une ouverture. A lintrieur, on retrouve une assise de
conidiophores produisant les conidies. Ce mode de groupement des conidiophores
caractrise, au sein des Coelomyctes, les Mlanconiales.
2.9.2- Dorigine sexue
Dans de rares cas, on peut observer pour les moisissures dintrt mdical la forme
parfaite du champignon. Si celle-ci apparat ds lisolement, le champignon prendra le
nom de sa forme sexue. Dans la plupart des cas, ce sont des Ascomyctes qui produisent
des asques renfermant maturit 8 ascospores. Une structure, lascocarpe, protge les
asques. On en distingue plusieurs types :
a - Les gymnothces
Lascocarpe clos est entour dun rseau dhyphes pridiens priphriques lches :
dermatophytes du genre Nannizzia (Microsporum) ou Arthroderma (Trichophyton). En
pratique, ce type dascocarpe nest pas rencontr chez les moisissures dintrt mdical.
b - Les clistothces
Lascoscarpe est arrondi et lisse, mais il ny a pas de rseaux mycliens priphriques. Il
est clos et sa paroi se fissure maturit pour librer des asques sphriques contenant
chacun 8 ascospores (Emericella nidulans, Pseudallescheria boydii).
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
c - Les prithces
Lascocarpe est voisin du clistothce, mais prend une forme de bouteille avec,
lextrmit rtrcie, une ouverture appele ostiole. Il renferme des asques allongs,
entours dune paroi simple membrane (unituniqus) ou deux membranes (bituniqus)
et contenant chacun 8 ascospores (exemples : Chaetomium, Sordaria, non tudis ici).
I 3. DMARCHE DIAGNOSTIQUE DUNE MOISISSURE
DINTRT MDICAL
Les cls didentification qui vont suivre ont pour objet de faciliter la dmarche du
diagnostic morphologique afin darriver au genre (ou espce).
Aprs un arbre dcisionnel bas sur les caractristiques des filaments mycliens, sont
prsentes des cls didentification correspondant aux diffrents groupes tudis dans cet
ouvrage : Mucorales, Mucdins, Dmatis et Coelomyctes (Figures 4 8).
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Figure 4 : Dmarche gnrale du diagnostic dune moisissure.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Champignons microscopiques
ou micromyctes
Filaments mycliens cloisonns
= Septomyctes
Filaments mycliens siphons
= Siphomyctes
Zygomyctes
Ascomyctes
Basidiomyctes
Deutromyctes
Thalle sept
Conidies produites
lintrieur de pycnides ou dacervules
Coelomyctes
Thalle sept
Pas dorganes protecteurs
des cellules conidiognes
Hyphomyctes
Filaments mlaniss
(brun fonc noirs)
Dmatis
Filaments hyalins
(clairs ou incolores)
Mucdins
Deutromyctes
Thalle levuriforme
Blastomyctes
Figure 5 : Cl didentification des Mucorales.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Filaments larges, irrguliers,
non cloisonns
(Siphomyctes)
Spores produites dans un sporocyste
(Mucorales)
Prsence dune columelle
Sporocystes renfermant de nombreuses spores maturit
(Mucoraceae)
Absidia sp. Rhizopus sp.
Large apophyse conique
+
chlamydospores
peu nombreuses ou absentes
Courte apophyse anguleuse
+
rhizodes bien visibles
la base des sporocystophores
Absence dapophyse
Rhizodes difficilement visibles
la base des sporocystophores
Absence de rhizodes
(tranglement du sporocystophore
la base de la columelle)
Rhizomucor sp. Mucor sp.
Figure 6 : Cl didentification des Mucdins.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Filaments septs,
fins et rguliers, hyalins
(Mucdins)
1. Conidies issues dlments prexistants du thalle
1.1. Conidies solitaires (aleuries)
1.2. Conidies en chanes (arthrospores)
2. Conidies produites par bourgeonnement
2.1. Conidies disposes en grappes
2.2. Conidies disposes en ttes ou balles
2.3. Conidies disposes en chanes basiptes
1.1. Mucdins produisant des aleuries
Chrysosporium sp.
Aleuries unicellulaires
terminales ou latrales
Scedosporium sp.
Aleuries unicellulaires
ovodes ou claviformes,
sessiles ou lextrmit de courts
conidiophores
(+ cormies dannellides)
Dermatophytes
(non traits dans cet ouvrage)
Prsence daleuries
intercalaires
(parfois de rares spores
bicellulaires)
Prsence de
macroconidies
(pas daleuries
intercalaires)
Figure 6 (suite) : Cl didentification des Mucdins.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
1.2. Mucdins produisant des arthrospores
Geotrichum sp.
(non traits dans cet ouvrage)
Arthrospores unicellulaires
paroi lisse
dabord rectangulaires, puis les
angles smoussent
Arthrospores uni ou bicellulaires
paroi verruqueuse
et dapparitition tardive
(chanes articules angle droit)
Arthrospores uni ou bicellulaires
paroi lisse
et dapparition prcoce
Scytalidium hyalinum Onychocola canadensis
2.1. Mucdins conidies disposes en grappes
Beauveria sp.
Conidies unicellulaires
de petite taille
sur une cellule conidiogne
croissance sympodiale
Trichothecium sp.
Conidies bicellulaires
de grande taille
disposes en grappes
au sommet de la cellule conidiogne
Figure 6 (suite) : Cl didentification des Mucdins.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
2.2. Mucdins conidies disposes en ttes ou en balles
au sommet de phialides
Conidies hyalines
Conidies vertes maturit
Fusarium sp. Acremonium sp.
Conidies unicellulaires ovales
et conidies pluricellulaires
falciformes
+
phialides cylindriques
solitaires ou groupes
Conidies unicellulaires ovodes
ou oblongues
+
phialides aciculaires
directement inseres
sur les filaments vgtatifs
Conidies unicellulaires globuleuses
+
phialides en forme de quille,
en verticilles sur des conidiophores
ramifis angle droit
ou sur leurs branches latrales
Trichoderma sp.
Figure 6 (fin) : Cl didentification des Mucdins.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
2.3. Mucdins conidies unicellulaires disposes en chanes basiptes
Conidies produites par des phialides
inserres lextrmit
dilate dun conidiophore large
et non cloisonn
(disposition en tte aspergillaire)
Conidies produites par des phialides
groupes en verticilles lextrmit
non dilate dun conidiophore fin et cloisonn
(disposition en pinceau)
Conidies ampulliformes
(aspect de mongolfire)
produites par des annellides solitaires
ou groupes lextrmit
dun conidiophore court, fin et cloisonn
Phialides col peu dvelopp
disposes en pinceaux serrs
Phialides col effil
disposes en pinceaux divergents
Penicillium sp. Paecilomyces sp.
Aspergillus sp. Scopulariopsis sp.
Figure 7 : Cl didentification des Dmatis.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Filaments septs, fins et rguliers,
brun fonc noirs
(Dmatis)
1. Dictyospores (spores pluricellulaires
cloisonnes transversalement et longitudinalement)
2. Phragmospores (spores pluricellulaires multiseptes
cloisonnes seulement transversalement)
3. Spores unicellulaires disposes en amas
4. Spores unicellulaires ou bicellulaires disposes
en chanes
1. Dmatis produisant des dictyospores
Ulocladium sp.
Dictyospores solitaires
dpourvues de bec
Alternaria sp.
Dictyospores en chanes
ou bec marqu
Figure 7 (suite) : Cl didentification des Dmatis.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
2. Dmatis produisant des phragmospores
Curvularia sp.
Spores lgrement incurves
(cellule centrale
volumineuse et fonce)
Spores fusiformes
(parfois un tube germinatif
dans laxe de la conidie)
Bipolaris sp.
3. Dmatis produisant des spores unicellulaires disposes en amas
Phialophora sp.
Spores en amas au sommet
de phialides collerette
plus ou moins marque
Exophiala sp.
Spores hyalines ou brun ple
saccumulant lextrmit
des annellides peu diffrencies
ou glissant le long de leur paroi
Figure 7 (fin) : Cl didentification des Dmatis.
Figure 8 : Cl didentification des Coelomyctes.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Spores asexues produites
dans des pycnides
(Coelomyctes)
Nattrassia mangiferae
(ex Hendersonula toruloidea)
Synanamorphe de Scytalidium dimidiatum
(arthrospores brunes uni ou bicellulaires)
Pycnides brun fonc noires
souvent groupes
+
spores hyalines ou brunes
bicellulaires
(10-14 x 4-5 m) m)
Pycnides brunes
le plus souvent isoles
+
spores hyalines
unicellulaires
(2-7
Phoma sp.
Cladosporium sp.
Blastospores
en chanes acroptes
(renforcement de coloration
aux extrmits)
Arthrospores hyalines ou brunes
solitaires ou en chanes
rectangulaires ou en tonnelet
Scytalidium dimidiatum
Arthrospores brunes
et blastospores hyalines
en grappes le long
dhyphes pais
Aureobasidium pullulans
4. Dmatis produisant des spores uni ou bicellulaires disposes en chanes

Ce chapitre prsente de faon synthtique les principaux genres et espces de moisissures
susceptibles dtre incrimines dans un processus pathologique.
Seront abords successivement :
les Mucorales
les Aspergillus
les autres Mucdins
les Dmatis et les Coelomyctes.
Chaque champignon est prsent sous forme dun fiche illustre comportant, outre sa
description morphologique, des renseignements pidmiologiques et cliniques utiles
linterprtation.
Ce chapitre sera complt par une prsentation de la dmarche diagnostique au laboratoire.
35
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
III - TUDE DES PRINCIPALES
MOISISSURES
DINTRT MDICAL
36
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
I 1- LES MUCORALES
1.1- pidmiologie
Les Mucorales sont des champignons cosmopolites trs rpandus. Saprophytes du sol o
ils se nourrissent partir de vgtaux, des crales ou des excrments, ils contaminent
frquemment les denres alimentaires (fruits, lgumes, ). Certaines espces sont
pathognes de plantes.
1.2- Pouvoir pathogne
Redoutables opportunistes, les Mucorales sont des agents de zygomycoses (Rhizopus
oryzae, Rhizomucor pusillus, Absidia corymbifera, Mucor circinelloides, ), notamment
chez les sujets diabtiques et les patients atteints dhmopathies. Ils sont lorigine
datteintes rhinocrbrales, cutanes (chez les grands brls) et viscrales (pulmonaires,
digestives, rnales, ).
1.3- Caractres culturaux
Ces zygomyctes se dveloppent bien sur tous les milieux utiliss en mycologie. Leur
croissance rapide est cependant inhibe par le cycloheximide (Actidione

). Les tempratures
optimales de croissance varient de 20 C pour les Mucor ou 20-25 C pour les Rhizopus,
36 C pour les Absidia, mais les espces incrimines dans les zygomycoses humaines sont
trs thermophiles et prsentent des tempratures maximales de croissance plus leves
(40 C). Dune manire gnrale, la croissance en culture est rapide et extensive sur glose
de Sabouraud ou PDYA (Peptone-Dextrose-Extrait de levure-Agar). Les colonies prsentent
un dveloppement arien souvent important, en particulier chez les Rhizopus, et envahissent
de manire quasi-totale les botes de culture en 5 7 jours.
1.4- Morphologie microscopique
Le thalle est constitu de filaments siphons (coenocytiques), non (ou peu) cloisonns, de
diamtre large (5-15 m) et irrgulier. Le champignon met gnralement des stolons qui
courent la surface du support glos et adhrent au substrat par des sortes de racines
appeles rhizodes (Figure 9). Des stolons partent des filaments dresss, les
sporocystophores (aussi appels sporangiophores), filaments porteurs des organes de
reproduction, les sporocystes (ou sporanges). La partie apicale du sporocystophore se dilate
en une vsicule, appele columelle, qui fait saillie lintrieur du sporocyste daspect
globuleux ou piriforme selon les espces. Ce sont dans ces sporocystes que sont produites
les spores (spores internes parfois appeles sporocystospores ou sporangiospores). Ces
spores surface lisse, strie ou granuleuse selon les espces, sont libres maturit par
dchirement de la paroi du sporocyste. La paroi peut, cependant, persister autour de lapex
du sporocystophore (au niveau de la columelle) sous forme dune collerette. Chez certains
genres (Absidia, Rhizopus, ...), le sporocystophore prsente son extrmit un largissement
plus ou moins marqu juste au-dessous du sporocyste, quon appelle apophyse. A linverse,
chez les Mucor, un tranglement du sporocystophore est souvent observ sous la columelle.
On observe parfois des chlamydospores, terminales, intercalaires ou en chanes.
La diffrenciation des familles au sein de cet ordre se fera sur un ensemble de critres :
lexistence ou non de ramifications sur les sporocystophores, la forme des sporocystes,
la prsence dune columelle faisant saillie dans le sporocyste et labondance des spores
dans les sporocystes maturit. Quant la diffrenciation des genres au sein de la
famille des Mucoraceae (qui comprend la plupart des Mucorales dintrt mdical), elle
se fera sur laspect des sporocystophores et leur groupement ventuel, sur la forme de
la columelle et les caractristiques de sa surface, mais surtout sur la prsence ou non
dune apophyse et sa taille, la prsence ou non de rhizodes, et labondance des
chlamydospores.
1.5- Genres prsents
Absidia sp.
Mucor sp.
Rhizomucor sp.
Rhizopus sp.
Figure 9 : Appareil reproducteur des Mucorales.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Spores
Sporocyste
Columelle
Apophyse
Sporocystophore
Rhizodes
Stolons
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Absidia
(Cohn) Saccardo et Trotter (1912)
Espce type : Absidia corymbifera
I Caractres culturaux
Colonies croissance rapide, envahissant rapidement la bote ou le tube, et de texture
floconneuse.
Couleur grise en surface, incolore au verso.
Pousse plus rapidement 37 C qu 25 C (croissance possible jusqu 48 52 C).
I Morphologie microscopique
Filaments larges (5 15 m) peu ou pas septs.
Sporocystophores isols ou groups, fixs au milieu des stolons et ramifis en grappe
ou en corymbes. Ils se terminent par une large apophyse conique (vasement en forme
dentonnoir).
Sporocystes de 10 120 m de diamtre, daspect piriforme avec une columelle
hmisphrique.
Spores cylindriques lisses, jauntres, de 3,4 4,6 m de long sur 2,8 3,8 m de large.
Rhizodes peu nombreux, situs sur les stolons distance des sporocystophores.
Chlamydospores absentes ou peu nombreuses, contrairement au genre
Chlamydoabsidia non dcrit dans cet ouvrage.
I Commentaires
Absidia corymbifera est, au sein du genre Absidia, la seule espce reconnue comme
pathogne. Cette espce qui peut pousser jusqu 50 C, est implique dans des infections
opportunistes chez limmunodprim avec atteintes pulmonaires, neuromninges,
rnales ou cutanes.
Les Absidia se distinguent des Mucor, Rhizopus et Rhizomucor par leur apophyse bien
dveloppe (en forme dentonnoir).
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3
Absidia sp. :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Sporocystophore ramifi termin par une columelle faisant saillie dans le sporocyste
globuleux (3, objectif 4). Aprs dchirement du sporocyste, la collerette permet de
visualiser la large apophyse conique (4, objectif 100).
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Mucor
Micheli ex Fries (1832)
Espces types : Mucor circinelloides
Mucor plumbeus
I Caractres culturaux
Les colonies croissance trs rapide et extensive, ont une texture laineuse.
La couleur varie du gris au brun en surface, le verso est incolore.
La temprature optimale de croissance de ces champignons est de 25 C.
I Morphologie microscopique
Filaments larges peu ou pas septs.
Pas de stolons ni rhizodes.
Sporocystophores issus le plus souvent du thalle vgtatif. Ils se terminent par une
columelle ovode sans apophyse et prsentent souvent un retrcissement sous la
columelle.
Sporocystes globuleux.
Spores rondes ellipsodales, lisses ou ornementes de spicules.
Chlamydospores parfois prsentes et abondantes
I Commentaires
Les champignons du genre Mucor sont trs rarement impliqus comme agents de mycoses
(mucormycoses).
Ils se distinguent des Absidia par labsence dapophyse et des Rhizopus par labsence de
rhizodes. Par rapport aux Rhizomucor, thermophiles, avec lesquels la confusion est
possible, la plupart des Mucor ne poussent pas 37 C, et ils ne possdent pas de
rhizodes.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Mucor sp. :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Sporocystophore portant un sporocyste globuleux (3, objectif 40 et 4, objectif 10)
dpourvu d'apophyse (5, objectif 40 et 6, objectif 20). Notez la prsence de
chlamydospores (3) et l'tranglement du sporocyste sous la columelle (3, 5, 6).
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3
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Rhizomucor
(Lucet et Constantin) Wehmer ex Vuillemin (1936)
Espce type : Rhizomucor pusillus
I Caractres culturaux
Les colonies croissance trs rapide et extensive, ont une texture laineuse.
Les colonies sont brun ple au dpart, devenant brun sombre en vieillissant ; le verso
reste incolore.
Loptimum thermique est de 37 C, mais la croissance est possible jusqu 54 C.
I Morphologie microscopique
Filaments larges peu ou pas septs.
Les rhizodes et les stolons sont prsents, mais parfois difficiles reconnatre.
Les sporocystophores sont assez courts, avec des ramifications subterminales en
sympodes.
Les sporocystes sont foncs (noirs), recouverts dasprits.
La columelle est bien dveloppe, mais il ny a pas dapophyse.
Les spores sont globuleuses (3 4 m de diamtre), lisses et hyalines.
I Commentaires
Seul Rhizomucor pusillus est considr actuellement comme un pathogne opportuniste.
Ce champignon thermophile est lorigine de mucormycoses rhinofaciales, crbrales,
pulmonaires et gnralises. Le terrain de prdilection est le patient leucmique.
Les Rhizomucor diffrent des Mucor par la prsence de rhizodes (pas toujours bien
dvelopps), et par leur thermophilie (temprature maximale 54 C), la temprature
optimale de croissance des Mucor tant de 25-30 C. Par ailleurs, contrairement aux
Absidia, ils nont pas dapophyse. Enfin, par rapport aux Rhizopus, les sporocystophores
sont bien ramifis et les rhizodes moins dvelopps.
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Rhizomucor sp. :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Rhizodes et court sporocystophore ramifications subterminales (3, objectif 4).
Aprs rupture du sporocyste, on visualise une columelle bien dveloppe sans
apophyse (4, objectif 40).
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Rhizopus
Ehrenberg (1820)
Espces types : Rhizopus oryzae et Rhizopus rhizopodiformis
I Caractres culturaux
Les colonies croissance trs rapide et extensive, ont une texture cotonneuse.
Les colonies, blanches au dpart, deviennent grises et fonces en vieillissant.
Loptimum thermique est de 25 C ou 37 C selon les espces, mais la croissance est
possible jusqu 50 C pour R. rhizopodiformis.
I Morphologie microscopique
Filaments larges non ou peu septs.
Stolons, rhizodes et sporocystophores sont bien diffrencis. Ces 3 lments naissent
dune mme origine : le nud.
Les sporocystophores bruns sont isols ou disposs en bouquets de 2 6 lments.
Les sporocystes sont globuleux avec une columelle globuleuse ou cylindrique et une
apophyse courte et anguleuse. Aprs rupture du sporocyste, la columelle saffaisse sur
le sporocystophore (aspect en parapluie).
Les spores sont ovodes.
Des chlamydospores peuvent tre prsentes, isoles ou disposes en chanes.
I Commentaires
Rhizopus oryzae et Rhizopus rhizopodiformis sont les principaux agents des
mucormycoses. Thermophiles, ils dterminent des atteintes rhinocrbrales, mais aussi
pulmonaires et intestinales. Les patients rceptifs sont les diabtiques en acidoctose, les
grands brls, les patients atteints dhmopathies malignes ou sous-aliments
(kwashiorkor, ).
En rgle gnrale, on diffrencie bien les Rhizopus des autres Mucorales par la prsence
de rhizodes bien dvelopps, situs au niveau des nuds et par la disposition frquente
des sporocystophores en bouquets.
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4
3
2 1
Rhizopus sp. :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Rhizodes situs au niveau du noeud (3, objectif 10). Aprs rupture du sporocyste, la
collerette permet de visualiser une courte apophyse, puis la columelle se replie en para-
pluie sur le sporocystophore (R. oryzae, 4 et 5, x 40; R. rhizopodiformis, 6, x 20).
I 2- LES ASPERGILLUS
2.1- pidmiologie
Les Aspergillus sont des champignons cosmopolites, trs rpandus dans le milieu
extrieur. Ce sont des champignons ubiquistes : on les rencontre aussi bien en milieu rural
(silos grains, foin, paille tasse et humide, crales ou fruits moisis, matires organiques
en dcomposition) quen milieu urbain, et aussi bien lextrieur qu lintrieur des
habitations (poussires accumules derrire les meubles, cadres, faux plafonds, conduits
daration, plantes en pots, ).
Les diffrentes enqutes aromycologiques rvlent que les spores aspergillaires se situent
au 4
e
rang des spores fongiques de lair (aprs les spores dAlternaria, de Cladosporium et
de Penicillium).
2.2- Pouvoir pathogne
Aspergillus fumigatus est lespce la plus pathogne, responsable denviron 80 90 % des
aspergilloses humaines. Dautres espces sont aussi impliques. Par ordre dcroissant de
frquence, citons A. flavus, A. niger, A. terreus, A. nidulans.
Les Aspergillus sont des pathognes opportunistes. Leur dveloppement chez lhte
ncessite lexistence de conditions favorables, locales (caverne tuberculeuse, cancer
broncho-pulmonaire, broncho-pneumopathie chronique obstructive, emphysme,
dilatation des bronches, mucoviscidose, ) ou gnrales (corticothrapies prolonges,
hmopathies malignes, chimiothrapie aplasiante, SIDA, ). En outre, des facteurs
environnementaux (abondance des spores aspergillaires dans lair inhal lors de la
manipulation du fumier, du foin moisi) ou lis au champignon (taille des spores
aspergillaires, thermotolrance, facteurs de virulence) contribuent la frquence de la
pathologie aspergillaire.
Les Aspergillus sont ainsi lorigine de diverses mycoses : des otomycoses, des kratites,
des onyxis, des atteintes cutanes, ou encore des mycoses profondes rsultant dune
inoculation traumatique des spores. Toutefois, les Aspergillus sont principalement des
pathognes respiratoires, linfestation seffectuant par inhalation des conidies vhicules
par le vent. On les rencontre lorigine de sinusites ou de surinfections bronchiques au
cours des broncho-pneumopathies chroniques obstructives et de la mucoviscidose. Mais
la pathologie aspergillaire chez le sujet non immunodprim est domine par
laspergillome, qui est li au dveloppement du champignon dans une bronche ou dans le
parenchyme pulmonaire, sous forme dune boule fongique appele truffe aspergillaire. Le
dveloppement du champignon seffectue alors dans une cavit le plus souvent
prexistante (caverne tuberculeuse, bulle demphysme, ) et se traduit par des troubles
respiratoires avec hmoptysies et, sur le plan radiologique, par limage classique en grelot.
Les formes les plus graves sont cependant observes chez les patients fortement
immunodprims, notamment chez les patients sous chimiothrapie aplasiante pour
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
prparation la greffe de moelle osseuse. Linfection revt alors un caractre invasif, et
prsente une volution trs rapide et souvent fatale.
2.3- Caractres culturaux
Ces champignons prsentent une croissance rapide sur milieu de Sabouraud additionn
dantibiotiques. Ils sont cependant, pour la plupart, inhibs par le cycloheximide. Aprs 24
48 h de culture, on observe des colonies plates, formes de courts filaments ariens
blancs. Cest en effet avec la maturation des structures conidiognes (48 96 h selon les
espces) que ces colonies vont prendre leur teinte caractristique, brune, verte, jaune ou
noire selon les espces.
La couleur de la culture permet ainsi une orientation rapide du diagnostic despce. Au
recto, les colonies sont gris-vert pour A. fumigatus, vert-jaune pour A. flavus et les espces
du groupe glaucus, vert fonc chamois pour A. nidulans, brun cannelle pour A. terreus,
chamois clair, jaunes et roses pour A. versicolor, jaunes puis noires pour A. niger. Elles
restent blanches pour A. candidus. Le revers de la colonie est incolore jaune, il peut aussi
brunir ou rougir avec lge (A. nidulans).
Les Aspergillus se dveloppent habituellement bien sur les milieux classiques de
mycologie comme le milieu de Sabouraud. Si ncessaire, leur fructification peut tre
stimule par repiquage de la colonie sur glose au malt ou sur milieu de Czapek qui
constituent les milieux de rfrence pour ces champignons. Enfin, les Aspergillus poussent
22-25 C et 37 C pour les espces thermophiles (A. fumigatus).
2.4- Morphologie microscopique
Les Aspergillus sont caractriss par un thalle vgtatif form de filaments mycliens
hyalins, de diamtre fin et rgulier, septs et ramifis. Lidentification du genre
Aspergillus reposera sur la mise en vidence des ttes aspergillaires lexamen
microscopique des colonies. Sur les filaments vgtatifs, prennent en effet naissance des
filaments dresss, non cloisonns. Ces derniers, quon appelle conidiophores, se
terminent par une vsicule de forme variable sur laquelle sont disposes les cellules
conidiognes ou phialides. La conidiognse seffectue en effet sur le mode blastique
phialidique, par bourgeonnement lapex des phialides dune srie de spores ou conidies
qui restent accoles les unes aux autres en chanes non ramifies, basiptes, la plus jeune
tant la base de la chane.
Les spores, toujours unicellulaires, sont de forme variable, globuleuses, subglobuleuses ou
elliptiques. Diversement pigmentes, elles peuvent tre lisses ou recouvertes dasprits
plus ou moins marques.
Les phialides peuvent tre insres directement sur la vsicule (ttes unisries), ou
portes par des petits articles insrs sur la vsicule, les mtules (ttes bisries).
Lensemble vsicule (mtules) phialides conidies constitue la tte aspergillaire qui
caractrise le genre Aspergillus.
Quant au diagnostic despce, il sera port sur un ensemble de critres macroscopiques et
microscopiques (Figures 10 12).
critres macroscopiques :
la vitesse de pousse
laspect des colonies maturit : surface (duveteuse, veloute, poudreuse ou
granuleuse), relief (colonies planes ou surleves), couleur au recto et au verso
critres microscopiques :
la taille du conidiophore, la prsence ou non dune pigmentation ou dchinulations
la taille et la forme de la vsicule
laspect gnral de la tte aspergillaire qui est li limplantation des phialides sur la
vsicule : tte en colonne si les phialides sont disposes seulement sur la partie
suprieure de la vsicule ; tte ronde, radie, si elles sont insres sur tout le pourtour de
la vsicule
la prsence ou non de mtules
la pigmentation, la taille et la surface des conidies
lexistence ou non dune reproduction sexue : prsence ou non de clistothces, et de
cellules en noisette ou Hlle cells .
En effet, pour certaines espces, apparaissent parfois en culture des formations sexues
(stade tlomorphe). Ce sont des clistothces contenant des asques arrondis renfermant
chacun 8 ascospores. Les Hlle cells , ou cellules en noisette, sont des formations
arrondies, rfringentes paroi paisse qui accompagnent souvent les formes sexues, mais
quon peut galement observer isolment, indpendamment de la reproduction sexue.
2.5- Espces prsentes (par ordre dimportance en mycologie mdicale)
Aspergillus fumigatus
Aspergillus flavus
Aspergillus niger
Aspergillus terreus
Aspergillus nidulans
Aspergillus versicolor
Aspergillus du groupe glaucus
Aspergillus candidus
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Figure 10 : Appareil reproducteur des Aspergillus.
Figure 11 : Cl didentification des Aspergillus prsents.
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Conidies
Phialides
Mtules
Vsicule
Conidiophore
(large, non cloisonn)
Cellule podale
Filament vgtatif
)
Ttes toujours unisries
(phialides insres directement sur la vsicule)
Ttes radies
ou en colonnes divergentes
Vsicule ronde ou en massue
Aspergillus du groupe glaucus
et
Ttes en colonnes
compactes
Vsicule hmisphrique
A. fumigatus
et
Figure 11 (suite) : Cl didentification des Aspergillus prsents.
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Colonies
de couleur variable
Ttes toujours bisries
(phialides insres sur la vsicule par lintermdiaire de mtules)
Ttes radies
A. versicolor
Colonies
noires
A. niger
Ttes en colonnes
Colonies vert cresson
(+ cellules en noisette)
A. nidulans
Colonies beiges marron
(pas de cellules en noisette)
A. terreus
Ttes unisries ou bisries
(phialides insres directement sur la vsicule ou par
lintermdiaire de mtules)
A. flavus
Colonies vert jaune Colonies blanchtres
A. candidus
Figure 12 : Organes de fructification des Aspergillus.
1 et 2 : Morphologie des ttes aspergillaires. En fonction des modalits dimplantation
des phialides sur la vsicule, on distingue des ttes unisries (1) ou bisries (2), et des
ttes en colonne (1) ou radies (2).
3-5 : organes de reproduction sexue chez Emericella nidulans (tlomorphe
dAspergillus nidulans) : clistothce (3), asques et ascopores (4) et cellules en
noisette (5).
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Aspergillus fumigatus
Fresenius (1863)
I Caractres culturaux
Recto : colonies blanches, puis bleu-vert, virant ensuite au vert-fonc gris noirtre.
Verso : incolore, jaune, vert ou brun-rouge suivant les souches.
Croissance trs rapide 37 C (24 48 h).
Optimum thermique : 40-42 C (mais il se dveloppe trs bien 45 C et pousse
jusqu 57 C).
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : court, 300 m, lisse et incolore
avec vasement progressif au sommet
vsicule : hmisphrique, 20 30 m
phialides : directement portes par la vsicule, dresses, densment groupes
conidies : globuleuses, vertes, chinules, petites (2,5 3 m de diamtre)
tte aspergillaire : unisrie, en colonne compacte, assez grande (jusqu 100 m de long)
Pas de reproduction sexue connue
Pas de Hlle cells
I Commentaires
Aspergillus fumigatus est lagent le plus frquent des aspergilloses humaines et animales.
Sur le plan morphologique, il se distingue des autres Aspergillus par la couleur de ses
colonies maturit, par lvasement progressif du conidiophore son sommet, et par ses
ttes unisries en colonnes. Contrairement aux autres espces, il se dveloppe bien
45 C.
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Aspergillus fumigatus :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Ttes aspergillaires l'objectif 20 (3) et 40 (4), avec un vasement progressif du
conidiophore et des phialides densment groupes sur une vsicule hmisphrique.
Aspergillus flavus
Link (1809)
I Caractres culturaux
Recto : colonies duveteuses poudreuses, dabord blanches, puis jaunes, puis vert-
jaune.
Verso : incolore, ros ou brun-rouge fonc.
Croissance rapide (2 3 jours).
Optimum thermique : 37 C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : long, 1 mm et parfois jusqu 2,5 mm, hyalin, verruqueux avec des
asprits (surtout visibles prs de lapex, mais inconstantes)
vsicule : sphrique, 25 45 m
phialides : directement insres sur la vsicule ou portes par des mtules
conidies : globuleuses subglobuleuses, vert ple, chinules, 3,5 4,5 m de
diamtre
tte aspergillaire : unisrie ou bisrie, 300 400 m de long, radie, puis se scindant
en plusieurs colonnes sporales mal individualises
Pas de reproduction sexue connue
Pas de Hlle cells
I Commentaires
Aspergillus flavus est un agent daspergillose pulmonaire ou gnralise chez limmuno-
dprim.
Sur le plan morphologique, il se distingue des autres espces dAspergillus par la couleur
vert-jaune de ses colonies et par ses conidiophores paroi verruqueuse.
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Aspergillus flavus :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Ttes aspergillaires bisries visualises l'objectif 40 (3 et 4), et caractrises par leur
aspect radi et leur vsicule sphrique. Les spores sont globuleuses subglobuleuses, de
couleur vert ple.
Aspergillus niger
Van Tieghem (1867)
I Caractres culturaux
Recto : colonies dabord blanches, puis jaunes, et enfin granuleuses noires.
Verso : incolore jaune ple.
Croissance rapide (2 3 jours).
Optimum thermique : 25-30 C (mais il peut pousser jusqu 42 C).
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : lisse, hyalin ou bruntre dans sa moiti suprieure, trs long (1,5
3 mm)
vsicule : globuleuse, 30 100 m (en moyenne 45 75 m)
phialides : insres sur la vsicule par lintermdiaire de mtules disposes sur
tout le pourtour de la vsicule
conidies : globuleuses (3,5 5 m de diamtre), brunes, chinules trs
verruqueuses, souvent disposes en chanes
tte aspergillaire : bisrie radie, noire maturit
Pas de reproduction sexue connue
Pas de Hlle cells
I Commentaires
Aspergillus niger peut provoquer chez le sujet non immunodprim des aspergillomes,
mais aussi des otites, voire des sinusites. Il est plus rarement rencontr chez
limmunodprim, lorigine dinfections cutanes, pulmonaires ou gnralises.
Sur le plan morphologique, il est caractris par ses ttes aspergillaires radies, bisries,
noires maturit.
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Aspergillus niger :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Ttes aspergillaires visualises lobjectif 4 (3), 20 (4) et 40 (6). Notez la longueur du
conidiophore et l'aspect radi des ttes aspergillaires noires maturit. 5, dtail des
spores (objectif 100).
Aspergillus terreus
Thom (1918)
I Caractres culturaux
Recto : colonies duveteuses poudreuses, de teinte beige brun noisette ou cannelle.
Verso : jaune brun orange.
Croissance rapide (3 5 jours).
Optimum thermique : 25-30 C (mais il pousse aussi 37 C).
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : lisse, incolore, de 100 250 m de long
vsicule : globuleuse
phialides : portes par des mtules insres surtout sur la partie suprieure de la
vsicule
conidies : de petite taille (1,5 2,5 m), lisses, globuleuses lgrement
elliptiques,
parfois associes des aleuries solitaires, rondes ou ovales, de 6
7 m de diamtre, base tronque, formes latralement sur le
myclium vgtatif, en profondeur
tte aspergillaire: bisrie, en colonne vase (aspect dventail)
Pas de reproduction sexue connue
Pas de Hlle cells
I Commentaires
Aspergillus terreus peut tre lorigine daspergilloses pulmonaires et crbrales chez
limmunodprim. Ce champignon est galement souvent isol des expectorations chez
les patients atteints de mucoviscidose.
Sur le plan morphologique, il se distingue des autres Aspergillus par la couleur brune ou
cannelle de ses colonies, ses ttes aspergillaires en colonne et parfois lexistence de
conidies solitaires base tronque produites directement sur le myclium.
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Aspergillus terreus :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Ttes aspergillaires bisries visualises l'objectif 10 (4) et 40 (3), avec une disposition
en colonne vase (aspect en ventail).
1 2
3
4
Aspergillus nidulans
(Eidam) Winters (1884)
I Caractres culturaux
Recto : colonies duveteuses poudreuses de couleur habituellement vert fonc ou vert
cresson, jauntre pour les souches productrices de clistothces.
Verso : rougetre, pourpre.
Croissance rapide (3 5 jours).
Optimum thermique : 25 30 C (mais il pousse aussi 37 C).
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : brun, lisse, sinueux, trs petit (75 100 m de long en moyenne, ne
dpassant pas 300 m)
vsicule : sphrique
phialides : portes par des mtules insres sur la partie suprieure de la vsicule
conidies : rondes, vertes, chinules, 3 3,5 m de diamtre, souvent disposes
en chanes
tte aspergillaire : bisrie en colonne, courte et compacte (65-100 30-35 m)
Reproduction sexue : Emericella nidulans
Prsence de clistothces globuleux, de 100 300 m de diamtre. Brun-orang
maturit, ils ont une paroi bien dlimite, et renferment de nombreux asques globuleux,
octospors. Les ascospores (3-4,5 2-3,5 m), rouges maturit, prsentent deux crtes
quatoriales.
Prsence de Hlle cells :
Cellules arrondies (10 20 m de diamtre), paroi trs paisse et rfringente, disposes
autour des clistothces ou parses sur le myclium vgtatif.
I Commentaires
Ce champignon qui peut occasionner des sinusites ou des infections pulmonaires chez
limmunodprim, se distingue des autres Aspergillus par ses colonies vert fonc revers
rougetre, ses conidiophores courts et bruns, ses ttes en colonne bisries et la prsence
de Hlle cells.
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Aspergillus nidulans :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Ttes aspergillaires bisries visualises lobjectif 10 (5), 20 (3) et 100 (4), associes
sur la figure 5 des Hlle cells. Clistothces (6), asques sphriques octospors et
ascopores rouges (7) visualiss lobjectif 4 (6) ou 100 (7).
Aspergillus versicolor
(Vuillemin) Tiraboschi, 1929
I Caractres culturaux
Recto : colonies peu extensives dabord blanches, puis de couleur varie, rose,
jauntre, ocre ou verte, parfois sur une mme colonie.
Verso : incolore ou variant du jaune au brun rougetre.
Certaines souches sont rsistantes au cycloheximide.
Croissance lente (5 7 jours).
Optimum thermique : 25-30 C (il peut cependant pousser de 4 C 40 C).
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : lisse, jauntre, gnralement long mesurant de 500 700 m
vsicule : ovale, 12 16 m de diamtre
phialides : portes par des mtules insres sur tout le pourtour de la vsicule
conidies : globuleuses, de 2 3,5 m de diamtre, chinules
tte aspergillaire : bisrie, radie
En outre, on peut noter pour cette espce, cot des ttes aspergillaires, la prsence de
pinceaux voquant un Penicillium (bouquets de 2 3 phialides disposs en verticilles
lextrmit de conidophores courts, fins et cloisonns).
Pas de reproduction sexue connue
On peut retrouver parfois des Hlle cells semblables aux cellules en noisette
dEmericella nidulans
I Commentaires
Il est exceptionnellement retrouv dans des tissus profonds chez limmunodprim. Par
contre, il est frquemment isol dans des prlvements de peau et de phanres, parfois en
tant quagent donychomycoses.
Sur le plan morphologique, il se distingue des autres Aspergillus par la polychromie de ses
colonies et la prsence de pinceaux associs aux ttes aspergillaires.
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Aspergillus versicolor :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Ttes aspergillaires bisries observes l'objectif 40 (3 et 5) et 100 (4), associes sur
la figure 5 des formes de type Penicillium .
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Aspergillus du groupe glaucus
Link (1809)
I Caractres culturaux
Recto : colonies peu extensives, planes, poudreuses, de couleur verte. Des tches jaune
vif peuvent apparatre lorsque les cleistothces sont produits en grand nombre.
Verso : jaune orang brun fonc.
Croissance rapide (3 5 jours).
Optimum thermique : 25-30 C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : lisse, incolore
vsicule : ronde ou en massue
phialides : courtes, trapues, directement insres sur la vsicule
conidies : globuleuses ou ovales, grandes (6-8 3-5 m de diamtre), le plus
souvent finement rugueuses
tte aspergillaire : unisrie, radie ou en forme de colonnes lches
Reproduction sexue : Eurotium
Prsence de clistothces de 75 200 m de diamtre. De couleur jaune maturit, ils
prsentent une paroi bien dlimite, et renferment de nombreux asques globuleux,
octospors. Les ascospores unicellulaires sont de couleur jaune ple, de forme lenticulaire
avec ou sans crtes quatoriales.
Pas de Hlle cells
I Commentaires
Peu ou pas pathogne, on signale cependant de rares observations datteintes pulmonaires
ou gnralises chez des patients immunodprims.
Sur le plan morphologique, les espces appartenant au groupe glaucus se caractrisent par
des colonies de couleur verte (lie la conidiognse) avec un centre jaune (li la
prsence de clistothces).
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Aspergillus candidus
Link (1809)
I Caractres culturaux
Recto : colonies poudreuses blanches crme.
Verso : incolore ou jaune ple.
Croissance lente (5 7 jours).
Optimum thermique : 25-30C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative :
conidiophore : lisse, incolore
vsicule : globuleuse
phialides : insres sur la vsicule par lintermdiaire de larges mtules, chacune
portant 1 ou 2 phialides (directement sur la vsicule pour les ttes
jeunes)
conidies : globuleuses et lisses
tte aspergillaire : bisrie (unisrie pour les ttes jeunes), radie se scindant en
plusieurs colonnes
Pas de reproduction sexue connue
Pas de Hlle cells
I Commentaires
Aspergillus candidus est trs rpandu dans la nature. On le rencontre souvent dans des
crales stockes (farine, graines, ). Rarement pathogne, il est parfois impliqu dans
dauthentiques onyxis des orteils.
Sur le plan morphologique, il se distingue des autres Aspergillus par sa couleur, puisque la
colonie reste blanche.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Aspergillus candidus :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Ttes aspergillaires bisries visualises l'objectif 100 (3 et 4), et caractrises par
leur aspect radi, et leur vsicule globuleuse. Le conidiophore est lisse et incolore et
les conidies sont globuleuses, hyalines.
1 2
4
3
I 3- LES AUTRES MUCDINS OU HYALOHYPHOMYCTES
3.1- pidmiologie
Les hyalohyphomyctes sont des micromyctes cosmopolites appartenant la famille des
Moniliaceae. Ils vivent pour la plupart en saprophytes, dans le sol ou sur des vgtaux en
dcomposition. Dautres espces colonisent plus volontiers des substrats telluriques divers
comme les dbris kratiniques pour les Chrysosporium. Enfin, certains sont des
pathognes de plantes (surtout les espces appartenant au genre Fusarium), ou dinsectes
comme Beauveria bassiana.
A partir de leur habitat naturel, ces champignons dispersent leurs spores qui, vhicules
par le vent, seront prsentes dans lair de manire permanente. Cest le cas, par exemple,
des spores de Penicillium qui se situent en 3
e
position des spores fongiques
atmosphriques.
3.2- Pouvoir pathogne
Le biologiste sera souvent confront ces champignons frquents dans lenvironnement,
qui seront donc avant tout des contaminants des cultures . Cest le cas des Beauveria,
des Trichoderma, des Cylindrocarpon, mais aussi de Chrysosporium (Geomyces) pannorum
et de Trichothecium roseum. On ne dcrit pour ces champignons telluriques que de trs
rares atteintes cutanes (intertrigos interorteils ou herps circin dtermins par
Chrysosporium keratinophilum), des onyxis Chrysosporium pannorum, et des kratites
Beauveria bassiana. Lintrt de leur tude rside en fait dans leurs ressemblances
morphologiques avec des pathognes classiques comme les dermatophytes.
Les Penicillium, qui sont rencontrs habituellement comme simples contaminants des
cultures, sont eux aussi exceptionnellement responsables de mycoses systmiques. Seul
Penicillium marneffei, champignon dimorphique, savre un redoutable opportuniste chez
limmunodprim, notamment le patient atteint de SIDA en Asie du Sud-Est.
Les champignons du genre Acremonium ou du genre Fusarium prsentent un pouvoir
pathogne plus marqu. Ces espces opportunistes sont de plus en plus frquemment
signales dans la littrature mdicale comme agents de mycoses humaines. Ils peuvent
dterminer des onyxis, principalement des leuconychies superficielles, ainsi que des
atteintes oculaires (kratites, endophtalmies) ou cutanes (myctomes grains blancs)
rsultant de linoculation traumatique de spores. Les gommes constituent une autre forme
clinique de la pathologie cutane Acremonium. Il sagit de nodules sigeant
principalement au niveau de la face ou du cou qui vont sulcrer, et dans lesquels le
dveloppement du champignon seffectue sous forme de filaments libres. On rencontre
galement les Fusarium comme agents de surinfection de plaies et de brlures ou
datteintes dissmines chez des patients fortement immunodprims (leucmiques en
aplasie).
Dautres hyalohyphomyctes prsentent aussi un pouvoir pathogne chez le sujet non
immunodprim. Ainsi Scopulariopsis brevicaulis, espce type du genre Scopulariopsis,
est souvent isol datteintes sous-unguales distales comparables celles dtermines par
les dermatophytes. Cependant, son rle dans la constitution de ces lsions unguales reste
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
discut, notamment en cas de prsence simultane avec un dermatophyte. Dautres
espces ont galement un pouvoir kratinophile assez marqu pouvant entraner, comme
les dermatophytes, des lsions superficielles de la peau et des phanres (ongles) : il sagit
des pseudodermatophytes, Scytalidium hyalinum et Onychocola canadensis.
3.3- Caractres culturaux
Ces hyalohyphomyctes se dveloppent bien sur tous les milieux utiliss en mycologie.
Leur croissance rapide est cependant inhibe gnralement par le cycloheximide. La
temprature optimale de croissance varie selon les espces entre 20 et 30 C. Seules les
espces isoles de prlvements profonds poussent 37 C.
3.4- Morphologie microscopique
Le myclium vgtatif reste clair ou hyalin.
Les filaments sont identiques ceux des Aspergillus, seule lorganisation conidiogne
change et varie selon les espces.
On observe parfois une reproduction sexue (clistothces chez Pseudallescheria
boydii), ou asexue (pycnides de Nattrassia mangiferae).
3.5- Genres et espces prsents
Acremonium sp. (A. strictum)
Beauveria sp. (B. bassiana)
Chrysosporium keratinophilum
Chrysosporium pannorum
Fusarium sp.
Fusarium moniliforme ( F. verticillioides)
Fusarium oxysporum
Fusarium solani
Onychocola canadensis
Paecilomyces sp. (P. variotii)
Penicillium sp.
Scedosporium apiospermum
Scopulariopsis brevicaulis
Scytalidium hyalinum
Trichoderma sp.
Trichothecium sp.
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Acremonium (ex Cephalosporium)
Link (1809)
Espce type : Acremonium strictum
I Caractres culturaux
Ils poussent sur tous les milieux de mycologie en labsence de cycloheximide. Les
colonies sont parfois finement poudreuses, ou le plus souvent humides, muqueuses. La
couleur varie du blanc au rose orang. La temprature optimale de croissance varie de
25 C 37 C, et la croissance est restreinte.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Le thalle vgtatif est constitu de filaments septs, isols ou disposs paralllement les
uns aux autres.
Les phialides naissent directement des filaments vgtatifs. Elles sont fines et
cylindriques, plus troites lextrmit apicale qu la base (phialides aciculaires). Elles
sont solitaires, plus rarement groupes par 2 ou 3.
Les conidies cylindriques ou elliptiques (3,5 m de long sur 1 2 m de large) sont
regroupes en amas lextrmit des phialides. Elles sont gnralement unicellulaires
(parfois bicellulaires) et hyalines.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
La plupart des Acremonium isols au laboratoire sont des contaminants des cultures. Trs
rarement, ils peuvent causer des myctomes grains blancs, des kratites, des gommes
cervico-faciales, ou des atteintes profondes chez limmunodprim (mningites,
endocardites, pneumopathies, ). Parfois, ils peuvent tre responsables donyxis du gros
orteil.
Sur le plan morphologique, ils produisent des colonies volontiers glabres, humides,
croissance restreinte dont le diamtre ne dpasse gure 2 cm en une semaine. La confusion
se produit habituellement avec certains isolats de Fusarium dpourvus de macroconidies,
mais ces derniers ont une texture laineuse et une croissance plus rapide. De plus, les
Acremonium produisent des phialides longues et effiles alors que les phialides des
Fusarium sont plus courtes et trapues.
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Acremonium sp :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Conidiognse visualise l'objectif 10 (3) et 100 (4). Les phialides aciculaires
prennent naissance sur les cts des filaments vgtatifs disposs paralllement les uns
aux autres, et produisent des conidies unicellulaires, disposes en amas.
Beauveria bassiana
Vuillemin (1912)
Espce type du genre Beauveria
I Caractres culturaux
Ce champignon se dveloppe bien sur les milieux de mycologie, mme en prsence de
cycloheximide. Sa croissance est assez rapide 20-25 C, conduisant des colonies le
plus souvent blanches et floconneuses, parfois poudreuses (notamment en priphrie),
laineuses ou veloutes. En vieillissant, elles deviennent jaune ple, avec un verso incolore,
jauntre ou parfois rougetre.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Initialement solitaires ou disposes en petits bouquets de 2 5 lments le long des
filaments vgtatifs ou sur de courtes ramifications, les cellules conidiognes apparaissent
trs rapidement agrges en bouquets denses. Ces cellules croissance sympodiale
prsentent une partie basale lgrement dilate, ampulliforme, de 3 6 m de long sur 2,5
3,5 m de large. Lapex de la cellule conidiogne est trs troit (20 25 m de long sur
1 mm de large) et prsente un aspect plus ou moins gnicul et denticul.
Les conidies, unicellulaires, sont hyalines et lisses. Globuleuses subglobuleuses, elles
mesurent 2 3 m de long sur 2 2,5 m de large.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Les espces du genre Beauveria ne sont que trs exceptionnellement incrimines en
pathologie humaine (kratites, pneumopathies chez limmunodprim). Ce sont
essentiellement des contaminants de culture.
Sur le plan morphologique, les cellules conidiognes en amas et les conidies peuvent
voquer, par leur morphologie et leur disposition, un Trichophyton mentagrophytes. Il
convient de bien rechercher les cellules conidiognes renfles la base avec une extrmit
effile en zig-zag, aspect li la croissance sympodiale des cellules conidiognes.
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Beauveria sp. :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Conidies unicellulaires disposes en grappes au sommet de cellules conidiognes
croissance sympodiale, solitaires ou disposes en bouquets denses sur les filaments
vgtatifs (3, objectif 40 et 4, objectif 100).
4
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3
Chrysosporium keratinophilum
Corda (1833)
I Caractres culturaux
Champignon kratinophile et kratinolytique, C. keratinophilum se dveloppe bien sur
tous les milieux de mycologie, mme en prsence de cycloheximide.
La croissance est rapide, conduisant des colonies duveteuses, floconneuses, ou encore
poudreuses. Elles sont blanches, avec un verso brun clair.
La temprature optimale de croissance est de 22 30 C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Le myclium vgtatif donne naissance des conidies (aleuries) terminales ou latrales.
Les aleuries sont unicellulaires, ovodes ou ampulliformes, et prsentent une large base
dimplantation. Elles mesurent 5 22 m de long sur 3,5 6 m de large et leur paroi est
lisse. On observe galement des aleuries intercalaires (6 9 m de long sur 2 3 m de
large), cylindriques ou en forme de tonnelet, et tronques leurs deux extrmits. La
prsence de ces deux types daleuries caractrise le genre Chrysosporium.
Pas de reproduction sexue connue
Il existe cependant une espce trs proche appele Aphanoascus fulvescens (ex Anixiopsis
stercoraria), qui prsente en culture au bout de 4 semaines dabondants clistothces aux
ascopores chinules.
I Commentaires
Chrysosporium keratinophilum est un champignon tellurique trs rpandu, colonisant de
prfrence les substrats kratiniques (dbris de poils, plumes, fragments de sabots ou
carapaces dinsectes). Il colonise aussi le pelage ou la fourrure de nombreux mammifres.
Chez lhomme, on lisole parfois de lsions de la peau ou des phanres sans quil y soit
formellement impliqu en tant que pathogne. Sa rsistance au cycloheximide, laspect
macroscopique et la production daleuries peuvent prter confusion avec les
dermatophytes dautant quil est capable de produire in vitro des organes perforateurs
comme T. mentagrophytes.
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Chrysosporium (Geomyces) pannorum
Corda (1833)
I Caractres culturaux
Chrysosporium pannorum se dveloppe bien sur les milieux usuels, mme en prsence de
cycloheximide. Toutefois, la croissance est gnralement assez lente et peu extensive, les
colonies mesurant rarement plus de 1 cm de diamtre aprs une semaine de culture sur
glose de Sabouraud.
Les colonies sont plates ou en forme de dme, de texture glabre, floconneuse, granuleuse ou
finement poudreuse, et prsentent une couleur variable, blanche, grise ou brune. Le verso est
brun ou orang, et parfois on observe un pigment jaune qui diffuse dans la glose.
Loptimum thermique est de 20-25 C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Le myclium vgtatif donne naissance des aleuries terminales, latrales ou
intercalaires, souvent disposes en chanes de 2 4 lments et spares par des articles
vides. Elles naissent sur des branches latrales du myclium vgtatif, ramifies angle
aigu et disposes en verticille.
Les aleuries sont unicellulaires, paroi paisse, dabord lisse, puis verruqueuse. Les
aleuries terminales ou latrales (2 6 m de long sur 2 4 m de large) sont typiquement
cuniformes, parfois globuleuses, piriformes ou claviformes. Les aleuries intercalaires (3
6 m de long sur 2,5 3,5 m de large) sont cylindriques ou en forme de tonnelet.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Chyrososporium pannorum est un champignon tellurique et cellulolytique. Un seul cas de
chrysosporiose profonde C. pannorum a t dcrit chez limmunodprim. Par contre,
cest un contaminant frquent des cultures.
Sur le plan morphologique, la croissance en prsence de cycloheximide, la petite taille des
aleuries et leur disposition en chanes sur de courts conidiophores ramifis peuvent
voquer un T. mentagrophytes. Toutefois, les aleuries sont disposes en courtes chanes
avec des ramifications 45 du rameau principal (et non angle droit). Par ailleurs,
contrairement aux dermatophytes, les Chysosporium produisent des aleuries intercalaires.
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Chrysosporium pannorum :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Aleuries unicellulaires terminales ou intercalaires, disposes en courtes chanes et spares
par des articles vides (3, objectif 100). Elles naissent sur des branches latrales du myclium,
ramifies angle aigu et disposes en verticilles (4, objectif 100).
Fusarium
Link (1809)
I Caractres culturaux
Les Fusarium poussent sur milieu de Sabouraud sans cycloheximide, mais se dveloppent
mieux sur glose au malt ou sur milieu PDA.
La temprature optimale de croissance varie entre 22 et 37 C.
Les colonies duveteuses ou cotonneuses sont de couleur variable (blanche, crme, jaune,
rose, rouge, violette ou lilas) selon les espces.
Un pigment peut diffuser dans la glose.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Du thalle vgtatif naissent des conidiophores courts et souvent ramifis. Ils portent des
phialides qui peuvent avoir un ou plusieurs sites de bourgeonnement pour la production
des conidies. Le plus souvent, les phialides prsentent un site de bourgeonnement unique
(monophialide) situ lextrmit dun col allong (F. solani) ou court et trapu (F.
oxysporum). Chez dautres espces comme F. proliferatum, les phialides prsentent
plusieurs sites de bourgeonnement (polyphialides).
Les conidies produites par les phialides sont de 2 types. On distingue :
des micronidies : conidies uni (ou bi) cellulaires, de 4 8 m de long, allonges, ovales
ou cylindriques, isoles, solitaires ou groupes, disposes en verticilles ou plus rarement
en chanettes (F. moniliforme).
des macroconidies : conidies pluricellulaires cloisons seulement transversales. Elles
mesurent de 18 80 m de long, et sont souvent groupes en paquets. Elles sont
fusiformes, courbes, assez pointues aux extrmits, avec une cellule podale formant une
sorte de talon plus ou moins visible.
Enfin, des chlamydospores sont parfois prsentes, terminales ou intercalaires (au sein des
filaments ou dformant une macroconidie).
Le diagnostic despce repose sur laspect des colonies (pigmentation), mais surtout sur
la morphologie microscopique : prsence dun seul type ou de deux types de spores,
disposition en chane ou en amas des microconidies, taille des phialides et nombre de sites
de bourgeonnement (monophialides, polyphialides), taille des macroconidies et nombre
de logettes, aspect de la cellule podale, abondance des chlamydospores,
Reproduction sexue
Possible pour certaines espces, mais pas dans les milieux habituellement utiliss en
mycologie mdicale. Les formes sexues appartiennent aux Ascomyctes, genres
Gibberella, ou Nectria.
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I Commentaires
Les Fusarium sont des champignons cosmopolites. On distingue prs de 40 espces
largement rpandues dans la nature et vivant en saprophytes. Certaines sont
phytopathognes et beaucoup sont capables de produire de dangereuses toxines
contaminant les denres alimentaires, et provoquant des maladies graves chez les animaux
(et parfois chez lhomme) qui les consomment (Mycotoxicoses).
Le pouvoir pathogne chez lhomme est vari. Certaines espces sont lorigine de
kratites (suite un traumatisme), donyxis des mains ou des pieds, parfois de myctomes
en zone tropicale. Certaines espces peuvent coloniser des lsions de brlures tendues.
Dautres sont impliques dans des infections systmiques (F. solani, F. moniliforme) chez
les sujets atteints dhmopathies malignes, ou sont lorigine de pritonites chez les
patients dialyss.
Sur le plan morphologique, la principale confusion porte sur les Acremonium pour les
espces ne produisant pas ou peu de macroconidies sur les milieux utiliss en routine.
Cependant, linverse des Acremonium, les colonies de Fusarium se dveloppent
rapidement et atteignent un diamtre gal ou suprieur 3 cm en une semaine. La texture
des colonies est galement plus laineuse. Autres champignons proches des Fusarium, les
Cylindrocarpon qui produisent comme les Fusarium des macroconidies, mais elles restent
droites ou peu recourbes sans talon la base.
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Fusarium moniliforme
Fusarium verticillioides
Sheldon (1904)
I Caractres culturaux
Les colonies sont dallure cotonneuse, duveteuse parfois poudreuse, blanches au dpart,
puis roses violettes. Le verso est pourpre fonc.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les conidiophores sont simples ou verticills, courts.
Les phialides (monophialides) sont longues et fines (20 30 m de long sur 2 3 m
de large).
Les macroconidies rares sont allonges et comprennent 3 5 cellules (31 58 m de long,
2,7 3,6 m de large).
Les microconides sont nombreuses, ovodes ou claviformes, disposes en pseudo-ttes ou
constituant de longues chanes au sommet des phialides.
Il ny a pas de chlamydospores.
Reproduction sexue :
Gibberella fujikuroi nest pas isol sur les milieux usuels de mycologie mdicale.
I Commentaires
Fusarium moniliforme est un agent de fusarioses dissmines chez les patients infects par
le VIH, mais aussi de kratites et dendophtalmies.
Il se distingue de F. solani et F. oxysporum par les chanes de microconidies lextrmit
des monophialides et labsence de chlamydospores.
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Fusarium moniliforme :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Microconidies ovodes disposes en pseudo-ttes ou constituant de longues chanes au
sommet de monophialides longues et fines (3 et 4, objectif 40).
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Fusarium oxysporum
Schlechtendahl (1824)
Emend. Snyder et Hansen (1940)
I Caractres culturaux
Les colonies sont duveteuses floconneuses, blanches au dpart, puis devenant roses
pourpres. Le verso est fonc.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les conidiophores qui naissent sur le myclium vgtatif sont courts et ramifis.
Les phialides (monophialides) sont courtes et solitaires (8 20 m de long sur 3 5 m
de large).
Les macroconidies peuvent tre abondantes, discrtement incurves, avec une cellule
basale bien marque ; elles contiennent 3 5 logettes (23 54 m de long sur 3 4,5 m
de large).
Les microconides sont nombreuses, unicellulaires, daspect ellipsodal ou cylindrique,
droites ou lgrement courbes (5 12 m de long sur 2,3 3,5 m de large), disposes
en fausses ttes .
On observe aussi frquemment de nombreuses chlamydospores.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
F. oxysporum est un agent donyxis, mais aussi de kratites, dendophtalmies, de
pritonites et dinfections dissmines. Il se distingue de F. solani et F. moniliforme par des
monophialides courtes portant leur extrmit apicale des microconidies disposes en
fausses ttes .
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Fusarium oxysporum :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Microconidies asymtriques, lgrement incurves, disposes en amas l'extrmit de
monophialides solitaires (3, objectif 10 et 4, objectif 40). Des chamydospores sont
parfois observes (5, objectif 10).
3
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Fusarium solani
(Martius) Saccardo (1881)
I Caractres culturaux
Les colonies sont duveteuses ou cotonneuses, blanches crme avec un verso ple.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les conidiophores sont simples ou disposs en verticilles ; ils portent de longues
monophialides daspect cylindrique.
On observe prcocment (en 48 heures) de nombreuses microconidies oblongues,
unicellulaires ou bicellulaires (8 16 m de long sur 2 4 m de large) disposes en
fausses ttes ou glissant le long des phialides. Plus tardivement (en 12-14 jours),
apparaissent des macroconidies en forme de fuseau asymtrique de 6 cellules au
maximum.
Les chlamydospores sont prsentes et souvent en abondance. Elles sont isoles ou en
courtes chanes, terminales ou intercalaires.
Reproduction sexue
La forme sexue appele Nectria haematococca var. brevicona, nest pas retrouve sur les
milieux utiliss en mycologie mdicale.
I Commentaires
F. solani est lespce la plus communment implique dans les fusarioses rencontres chez
limmunodprim et les patients diabtiques. Il peut galement dterminer des ulcres
cornens. Le diagnostic est port sur la couleur de la colonie qui reste blanche ou crme
et les trs longues monophialides portant leur extrmit apicale des microconidies
groupes en fausses ttes .
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Fusarium solani :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Microconidies oblongues, en fausses ttes, l'extrmit de monophialides (3, objectif 20).
Nombreuses chlamydospores disposes en courtes chanes et macroconidies en fuseau (4,
objectif 40).
Onychocola canadensis
Sigler et Congly (1990)
I Caractres culturaux
Les colonies se dveloppent trs lentement sur milieu de Sabouraud 25 C, mais
rsistent au cycloheximide. Aprs 15 jours environ, on observe des colonies de petite
taille, de couleur blanchtre, glabres au dpart, devenant en 5 6 semaines duveteuses,
cotonneuses. Avec lge, les cultures deviennent bruntres et le verso fonc.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Au dpart, les colonies ne montrent que des filaments fins, hyalins, lisses sans aucune
fructification. Cest sur des cultures tardives (aprs 4 semaines) que certains filaments
deviennent torulodes et verruqueux, formant des chanes darthrospores souvent articules
angle droit. Ces dernires sont ovales cylindriques (2,5 4 m de diamtre), uni ou
bicellulaires. Ces arthrospores se rvlent plus abondantes sur des milieux pauvres (eau
glose 2 %, milieu de Takashio, milieu PDA). Sur les vieilles cultures, on observe sur la
paroi de certains filaments des protubrances sombres.
Reproduction sexue
La forme appele Arachnomyces nodosetosus, est difficile obtenir.
I Commentaires
Onychocola canadensis a t isol pour la premire fois donychopathies au Canada en
1990. Il a t dcrit ensuite en Nouvelle-Zlande, puis en France. Le rservoir,
probablement tellurique, est encore inconnu.
Il est lorigine donychomycoses et dintertrigos des pieds chez les personnes ges
ayant souvent des troubles vasculaires des membres infrieurs. Les lsions ressemblent
une dermatophytie (pseudodermatophyte).
La frquence de cette espce est probablement sous-estime du fait de sa croissance lente
et de labsence de fructification prcoce. Il faut au moins 4 6 semaines pour obtenir les
arthrospores caractristiques et souvent le champignon doit tre repiqu sur un milieu
pauvre pour les observer.
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Onychocola canadensis :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 3 semaines (1 et 2).
Chanes d'arthrospores ramifies angles droits (3 et 5, objectif 40). Notez l'aspect
verruqueux de certaines arthrospores (4, objectif 100).
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Paecilomyces
Bainier (1907)
Espce type : Paecilomyces variotii
I Caractres culturaux
Ces champignons ont une croissance rapide sur milieu de Sabouraud sans cycloheximide
qui inhibe la croissance de la plupart des souches.
Ils se dveloppent bien 25 C, mais peuvent pousser jusqu 50 C.
Les colonies rapidement poudreuses, sont de couleur brun ple brun rouille (P. variotii),
parfois lilas (P. lilacinus). Le verso est incolore.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes septs, hyalins, portent des conidiophores qui se ramifient en verticilles.
Les phialides extrmit allonge et effile sont regroupes en pinceau lextrmit du
conidiophore. Elles sont divergentes les unes par rapport aux autres. Certaines restent
solitaires, disposes le long des hyphes.
Les conidies (3,2 5 m de long sur 2 4 m de large) sont hyalines jaunes,
cylindriques ou fusiformes, disposes en longues chanes lextrmit des phialides.
Des chlamydospores sont parfois prsentes.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Les Paecilomyces sont rarement des pathognes humains. On dcrit cependant des
kratites associes limplantation de lentilles cornennes, des endocardites (suite un
remplacement de valves), des pritonites, des sinusites et des pneumonies. Dans
lenvironnement, ils sont souvent impliqus dans la dgradation des produits alimentaires
(vgtaux, crales, conserves), mais aussi du cuir et du papier.
Sur le plan morphologique, ils se distinguent des Penicillium par leurs phialides
extrmit effile qui ont tendance diverger. A linverse, chez les Penicillium, les phialides
sont moins effiles et orientes paralllement les unes aux autres en ensembles serrs. En
outre, les colonies de Paecilomyces ne sont jamais vertes ou bleu-vert.
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Paecilomyces variotii :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Conidies ovalaires ou fusiformes disposes en chanes et produites par des phialides
groupes en pinceaux (3, objectif 40). Ces phialides sont caractrises par une
extrmit effile.
1 2
3
Penicillium
Link (1809)
I Caractres culturaux
Ces champignons poussent facilement sur les milieux utiliss en mycologie, mais sont
inhibs par le cycloheximide.
Leur croissance est rapide, la colonie est habituellement duveteuse, poudreuse, de couleur
variable, le plus souvent verte, mais parfois grise, jaune ou rose. Le revers est incolore ou
fonc. Un pigment diffuse parfois dans la glose.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes septs, hyalins, portent des conidiophores simples ou ramifis, parfois
regroups en buisson ou cormie.
Les phialides sont disposes en verticilles lextrmit des conidiophores. Elles sont
insres directement (Penicillium monoverticills) ou par lintermdiaire dune range de
mtules (Penicillium biverticills) ou de deux ranges successives de mtules (Penicillium
triverticills) sur les conidiophores. Les phialides sont serres les unes contre les autres,
lensemble donne une image de pinceau (ou pnicille).
Les phialides donnent naissance des spores unicellulaires disposes en chanes (chanes
basiptes, non ramifies). Les conidies sont rondes ovodes, hyalines ou pigmentes,
lisses ou chinules, mesurant de 2 4 m de diamtre.
Reproduction sexue
Certaines espces ont une reproduction sexue (Ascomyctes, famille des
Trichocomaceae).
I Commentaires
Sur le plan morphologique, les Penicillium se distinguent des Aspergillus par leur
organisation en pinceau. Ils se diffrencient par ailleurs des Paecilomyces par leurs
phialides qui sont moins effiles et qui restent serres les unes contre les autres. Enfin, ils
se distinguent des Scopulariopsis par leurs conidies qui ne possdent pas de base tronque.
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Penicillium spp. :
Cultures sur glose de Sabouraud ges de 8 jours : Penicillium chrysogenum (1 et 2),
Penicillium expansum (3 et 4) et Penicillium piccum (5 et 6). Notez la diversit des
aspects culturaux.
1
2
3
4
5 6
Ces champignons sont des contaminants frquents de laboratoire. Ce sont de saprophytes
trs rpandus dans lenvironnement, lorigine de la dgradation de denres alimentaires.
Ils sont aussi trs utiliss dans lindustrie, notamment dans lindustrie agro-alimentaire
(affinage du fromage et du saucisson) et pharmaceutique. Rappelons que Fleming en 1928,
a t lorigine de la dcouverte de la pnicilline partir dune souche de P. notatum.
Par contre, rares sont les espces incrimines en pathologie humaine. Il convient de mettre
part Penicillium marneffei, champignon dimorphique rencontr exclusivement en Asie du
Sud-Est (Chine du Sud, Thalande, Laos, Birmanie, ). Ce champignon, particulirement
redoutable pour limmunodprim, notamment les patients infects par le VIH, est
lorigine dinfections systmiques touchant la peau et les organes profonds (foie, rate,
ganglions, os, ).
Cette espce prsente un dimorphisme bien marqu. La forme parasitaire in vivo, obtenue
galement in vitro sur glose Brain Heart 37 C, est trs diffrente de la forme
saprophytique rvle en culture 25 C.
Sur glose de Sabouraud sans cycloheximide, Penicillium marneffei produit 25 C, des
colonies duveteuses de couleur jaune brun-vert rougissant avec le temps, et prsentant
un revers rouge vif. Il conviendra donc, dans un contexte particulier, denvisager ce
diagnostic devant un Penicillium produisant un pigment rouge diffusant dans la glose.
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3
1
Scedosporium apiospermum
Saccardo
(ex Castellani et Chalmes) (1919)
I Caractres culturaux
Ce champignon pousse bien sur tous les milieux usuels de mycologie, mais sa croissance
est souvent freine en prsence de cycloheximide.
Les colonies sont cotonneuses, laineuses, de couleur blanchtre au dbut, devenant grises
en vieillissant ; le verso est fonc, presque noir.
La croissance est possible jusqu 40 C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
La reproduction asexue peut seffectuer selon deux modalits distinctes.
La conidiognse seffectue essentiellement sur le mode thallique solitaire avec
formation daleuries naissant directement sur les cts des filaments vgtatifs ou
lextrmit de conidiophores fins, dresss angle droit sur le thalle vgtatif. Ces conidies
ovodes ou claviformes, brunes, mesurent 6 14 m de long sur 5 6 m de large.
Lautre mode de conidiognse fait intervenir des annellides groupes en cormies (stade
Graphium) donnant naissance des conidies hyalines, plus fines, allonges, mesurant 5
7 m de long sur 2 3 m de large.
Reproduction sexue : Pseudallescheria boydii
La forme sexue, obtenue parfois aprs trois semaines de culture ou sur des milieux
pauvres, est caractrise par des clistothces jaunes bruns, arrondis, de 140 180 m
de diamtre, contenant des asques sphriques octospors de teinte cuivre.
I Commentaires
Champignon tellurique, prsent dans les sols enrichis de dbris organiques (litires
animales, fumiers) et dans les eaux boueuses et pollues, Scedosporium apiospermum
prsente un rle pathogne rel.
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Scedosporium apiospermum :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Aleuries unicellulaires hyalines, terminales ou latrales, produites l'extrmit de
courts conidophores ou directement sur les cts des filaments vgtatifs (3, objectif
40).
3
1 2
Scedosporium apiospermum dtermine par inoculation traumatique de spores, des
myctomes grain blanc, mais aussi des lsions cutanes ou sous-cutanes et des arthrites
touchant le genou, parfois les articulations des doigts, des poignets ou des pieds. On relve
aussi dans la littrature des atteintes oculaires (kratites, endophtalmies) ou profondes
(endocardites, mningites, ostomylites et abcs crbraux). Ces lsions peuvent tre
rencontres indpendamment de facteurs favorisants vidents.
En outre, ce champignon peut tre lorigine de pathologies respiratoires (sinusites,
myctomes pulmonaires Pseudallescheria boydii, surinfections bronchiques dans la
mucoviscidose, le plus souvent en association avec un Aspergillus dans ce contexte).
Le diagnostic diffrentiel se pose surtout avec Scedosporium prolificans, espce voisine
dont les cellules conidiognes apparaissent nettement largies ou renfles leur base avec
un aspect de bouteille. Par ailleurs, il nexiste pas pour S. prolificans de forme Graphium.
En outre, S. prolificans est thermophile, il pousse encore 45 C, linverse de
S. apiospermum. Enfin, il est inhib par le cycloheximide.
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Scedosporium apiospermum/Pseudallescheria boydii :
Forme Graphium caractrise par la prsence d'annellides au sommet de
conidiophores groups en cormies (1, objectif 10 et 2, objectif 40).
Clistothces d'abord hyalins (3, objectif 20), puis brun fonc (4, objectif 40) et
ascospores brunes (4).
4
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1
3
Scopulariopsis brevicaulis
Bainier (1907)
I Caractres culturaux
Scopulariopsis brevicaulis pousse bien sur les milieux usuels de mycologie, mais sa
croissance est freine en prsence de cycloheximide.
En labsence de cycloheximide, les colonies sont extensives, veloutes, devenant vite
poudreuses ou granuleuses.
Initialement blanchtres, elles deviennent ensuite beiges brun-noisette (caf au lait
clair). Le revers est crme bruntre.
La temprature optimale de croissance est comprise entre 25 et 30 C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les cellules conidiognes (annellides), cylindriques, plus ou moins renfles leur base,
sont isoles ou groupes lextrmit de conidiophores courts, septs et hyalins. Elles
sont insres soit directement, soit par lintermdiaire de mtules. Lensemble voque un
pnicille (pinceau de Penicillium). Les annellides prsentent leur sommet des cicatrices
lies aux reprises de croissance terminale, et produisent des conidies globuleuses base
tronque (forme dampoule, de mongolfire) disposes en chanes basiptes. Ces conidies,
initialement lisses, puis verruqueuses maturit, mesurent 5 8 m de long sur 5 m de
large.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Champignon tellurique, Scopulariopsis brevicaulis est un contaminant des cultures assez
frquent. Il est rarement lorigine de mycoses profondes (atteintes sous-cutanes,
sinusites, pritonites, pneumopathies, ) chez limmunodprim. Cest par contre un
agent assez frquent donychomycose, en particulier du gros orteil. Latteinte est
habituellement sous-unguale disto-latrale.
Sur le plan morphologique, il ressemble aux Penicillium, mais produit des conidies
ampulliformes typiquement tronques la base. Il existe dautres espces de
Scopulariopsis qui se diffrencient de S. brevicaulis par la couleur de leur culture :
S. candida reste blanc, S. fusca devient brun vineux noir, et S. brumptii donne des
colonies gris souris brun fonc.
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Scytalidium hyalinum
Campbell et Mulder (1989)
I Caractres culturaux
Scytalidium hyalinum pousse rapidement 25 C sur milieu de Sabouraud sans
cycloheximide.
Il produit des colonies extensives, laineuses ou cotonneuses avec un myclium arien
important.
La couleur est blanche gris clair, et le verso est ple.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes sont rguliers, septs, hyalins. Ils produisent au dpart des arthroconidies
unicellulaires de 5 12 m de long sur 2,5 3,5 m de large. Puis, tardivement, ces
arthroconidies peuvent slargir (4-6 m de large) et prsenter une cloison centrale.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Scytalidium hyalinum est un saprophyte du sol des rgions tropicales ou subtropicales,
mais son habitat prcis est inconnu.
Il est lorigine de lsions voisines de celles occasionnes par les dermatophytes et par
Scytalidium dimidiatum, cest--dire des onyxis des ongles des mains ou des pieds, ainsi
que des hyperkratoses palmaires ou plantaires.
Sur le plan morphologique, S. hyalinum est diffrencier des Geotrichum qui produisent
des colonies glabres ou lisses.
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Scytalidium hyalinum :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Arthroconidies visualises l'objectif 20 (3) et 100 (4). Les filaments vgtatifs,
d'abord rguliers, se dissocient de manire progressive et rtrograde en arthrospores
uni ou bicellulaires, hyalines.
1 2
3
4
Trichoderma
Persoon (1801)
I Caractres culturaux
Ces champignons ont une croissance trs rapide et extensive sur milieu de Sabouraud
25 C.
Ils produisent des colonies laineuses, de couleur blanche au dpart, puis apparaissent en
vieillissant des touffes verdtres isoles ou disposes en anneaux concentriques sur le
milieu de culture.
Le verso reste incolore.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Sur des hyphes septs hyalins apparaissent des petits conidiophores bien diffrencis
simples ou ramifis. Ils portent des phialides, galement de petite taille, en forme de
quille. Renfles leur base, solitaires ou groupes par 3, les phialides sont fixes angle
droit sur les conidiophores.
Les conidies, lisses ou chinules, globuleuses, mesurent de 2,5 3 m de diamtre. Elles
se rassemblent en amas au sommet des phialides, et forment ainsi des fausses ttes .
Reproduction sexue
Les formes sexues appartiennent au genre Hypocrea (Ascomyctes, Dothidales).
I Commentaires
Les Trichoderma sont des saprophytes du milieu extrieur (bois en dcomposition).
Habituellement contaminants des cultures et classiquement dnus de tout pouvoir
pathogne, on signale cependant de rares cas de mycoses Trichoderma (otites,
pneumopathies et pritonites chez limmunodprim).
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Trichoderma sp. :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Amas de conidies visualiss au sommet des phialides l'objectif 10 (3). Les phialides
en forme de quille sont disposes en verticilles sur des conidiophores ramifis angle
aigu, l'ensemble prsentant un aspect pyramidal (4, objectif 100).
4
1 2
3
Trichothecium
Link (1809)
I Caractres culturaux
Champignons croissance rapide 25 C sur milieu de Sabouraud sans cycloheximide.
Ils produisent des colonies poudreuses ou granuleuses, de couleur blanche au dpart,
devenant rose-orange ou saumon par la suite.
La pousse est inhibe 37 C.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont hyalins. Ils produisent des conidiophores simples, non ramifis,
portant leur extrmit des conidies piriformes ou ellipsodales.
Les conidies, lisses, sont bicellulaires (une cloison transversale) et de grande taille (16
20 m de long sur 8 12 m de large). Elles sont formes selon le mode blastique
rgressif et sont donc disposes en grappes lextrmit du conidiophore.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Les Trichothecium sont des espces saprophytes isoles du sol et de nombreux vgtaux
en dcomposition. On ne leur connat pas de pouvoir pathogne chez lhomme.
Sur le plan morphologique, la prsence de conidies bicellulaires en massue peut prter
confusion avec des macroconidies de Microsporum ou des spores de Chrysosporium.
Parmi les Microsporum, il ne faut pas confondre avec les macroconidies de M. nanum qui
restent solitaires alors que les conidies de Trichothecium sont disposes en grappes. De
mme, une confusion est possible avec certains Chrysosporium dont C. keratinophilum,
mais chez ce dernier les conidies sont habituellement unicellulaires.
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3
Trichothecium roseum :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Spores bicellulaires disposes en grappe au sommet du conidiophore (3, objectif 10).
4, fort grossissement (objectif 100) montrant la disposition en zig-zag des spores lie
leur production sur le mode blastique rgressif.
2
4
1
I 4. LES DMATIS (OU PHAOHYPHOMYCTES)
ET LES COELOMYCTES
4.1- Epidmiologie
Les Dmatis sont des moisissures issues du sol, de la terre ou de vgtaux en
dcomposition. Ils sont parfois parasites de plantes et certains sont de vritables
opportunistes chez lhomme.
Leur caractristique commune est de produire des pigments de type mlanine qui
imprgnent la paroi des filaments, do laspect fonc ou noir des colonies en culture et
des filaments dans les tissus parasits.
4.2- Pouvoir pathogne
Certaines espces de Dmatis sont adaptes au parasitisme et rvlent in vivo une
morphologie parasitaire aisment reconnaissable, comme les cellules fumagodes des
agents de chromomycose ou les grains noirs des myctomes fongiques. Beaucoup en
revanche ne montrent que des filaments mycliens paroi plus ou moins pigmente,
visibles lexamen direct du prlvement ou sur coupes anatomo-pathologiques, associs
ou non des lments levuriformes. Cest dans cette dernire situation quAjello a
propos le terme de phaohyphomycoses pour dsigner les mycoses superficielles ou
profondes causes par ces champignons noirs appartenant le plus souvent au groupe
des Dmatis. Parmi les espces dintrt mdical, citons :
Le genre Cladosporium avec notamment Cladosporium carrionii qui est un des
principaux agents de chromomycose. Son caractre opportuniste est par contre limit.
Cladosporium bantianum est en revanche plus redoutable. Thermophile et neurotrope,
il dtermine des abcs crbraux au pronostic sombre.
En France, cest le genre Alternaria (A. alternata, A. tenuissima, ) qui donne les
phaohyphomycoses les plus frquentes. Les atteintes cutanes et sous-cutanes sont
les plus nombreuses.
Le genre Phialophora est plus rarement impliqu en France mtropolitaine.
Le genre Exophiala, avec E. jeanselmei, principale espce incrimine dans des lsions
sous-cutanes, est prsent dans les pays tropicaux, mais aussi temprs. Le
champignon pntre habituellement lors dun traumatisme transcutan (clat de bois,
charde, ) et la rtention du vgtal est un facteur prdominant dans le
dclenchement des lsions. Exophiala dermatitidis savre aussi un redoutable
Dmati. Jadis agent classique de chromomycose, il est de plus en plus incrimin dans
des atteintes superficielles (conscutives un traumatisme) ou profondes, notamment
crbrales, cardiaques et pulmonaires, chez limmunodprim.
4.3- Caractres culturaux
Les phaohyphomyctes se dveloppent bien sur tous les milieux utiliss en mycologie.
Leur croissance rapide est le plus souvent inhibe par le cycloheximide. Les tempratures
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optimales de croissance sont comprises entre 25 et 30 C. Seules quelques espces isoles
de prlvements profonds poussent 37 C.
4.4- Morphologie microscopique
Les filaments vgtatifs, initialement hyalins, brunissent en vieillissant, mais certains
restent incolores. Ces champignons se reproduisent en gnral seulement sur le mode
asexu, et lorganisation conidiogne varie selon les espces. En outre, si les spores sont
souvent fonces ou noires pour ces champignons, dautres produisent des spores hyalines.
4.5- Genres et espces prsents
Alternaria sp.
Aureobasidium pullulans
Bipolaris sp.
Cladosporium sp.
Curvularia sp.
Exophiala sp.
Phialophora sp.
Scytalidium dimidiatum
Ulocladium sp.
Concernant les Coelomyctes, hormis Nattrassia mangiferae, synanamorphe de
Scytalidium dimidiatum, peu despces sont rencontres ltat parasitaire chez lhomme.
Seul le genre Phoma sera abord ici car produisant exclusivement des pycnides.
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Alternaria
Nees ex Friess (1816)
I Caractres culturaux
Les colonies sont de croissance rapide sur milieu de Sabouraud 25-30 C.
La croissance est habituellement inhibe 37 C, comme en prsence de cycloheximide.
La colonie, blanc-gris au dpart, devient rapidement fonce (vert fonc noire) au recto
comme au verso.
La texture est duveteuse laineuse.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont ramifis et tardivement certains filaments sont pigments en brun.
Les conidiophores sont cloisonns, bruns, septs, simples ou ramifis, plus ou moins
droits ou flexueux (gniculs).
Les conidies ou porospores sont brunes, pluricellulaires, daspect piriforme ou ovode,
avec une partie basale arrondie et une extrmit apicale allonge en bec plus ou moins
important. Ce sont des dictyospores. A maturit, elles prsentent la fois des cloisons
transversales, obliques ou longitudinales. Ces spores paroi lisse ou verruqueuse et de
taille importante (50-100 m x 3-16 m), sont souvent disposes en chanes.
En labsence de bec marqu, cest la disposition en chanes des dictyospores qui
caractrise le genre Alternaria.
Reproduction sexue
Les formes sexues, rarement rencontres, sont des Ascomyctes.
I Commentaires
Les Alternaria sont des saprophytes ou des parasites de plantes trs rpandus. Chez
limmunodprim, ils sont impliqus dans des lsions de phaohyphomycoses cutanes ou
sous-cutanes, plus rarement profondes (sinusites). Ce sont trs rarement des agents
donychomycoses.
Sur le plan morphologique, ils se distinguent des Ulocladium dont les conidies sont
ovodes, dpourvues de bec et presque toujours solitaires, des Curvularia qui produisent
des conidies toujours solitaires, pluricellulaires et cloisonnes seulement
transversalement, et des Stemphylium dont les conidies naissent lextrmit de
conidiophores renfls leur extrmit.
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Aureobasidium pullulans
Viala et Boyer (1891)
I Caractres culturaux
Colonies croissance rapide sur milieu de Sabouraud sans cycloheximide.
Loptimum de croissance est de 22-25 C, et le champignon est inhib 37 C.
La texture des colonies est mucode ; elles sont de couleur rose ple au dpart devenant
brunes noires avec lge.
Le revers est incolore.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont hyalins au dpart, devenant brun fonc avec lge. Certains
filaments (produisant des arthroconidies et des chlamydospores) sont plus pais et bien
foncs.
Ce champignon produit 2 types de spores : les unes petites, incolores (hyalines), se
dveloppant en grappe de faon synchrone partir de cellules conidiognes peu
diffrencies, intgres dans les filaments ou disposes en position terminale, les autres
plus grandes produites sur le mode thallique arthrique (arthroconidies), uni ou
bicellulaires, devenant rapidement fonces.
Reproduction sexue
Rarement observe en pratique, la forme sexue appartient au genre Polyspora
(Ascomyctes, Dothidales).
I Commentaires
Les Aureobasidium sont des saprophytes ou parasites des vgtaux (feuilles) parfois
incrimins chez lhomme comme agents de phaohyphomycoses cutanes ou sous-
cutanes (lsions verruqueuses). Ils sont galement responsables de kratites et de lsions
profondes chez limmunodprim.
Sur le plan morphologique, ils sont trs proches des espces du genre Hormonema (H.
dematioides), mais les blastospores chez Aureobasidium sont produites de faon
synchrone et disposes en grappe, alors quelles sont produites de faon successive partir
darthroconidies hyalines ou pigmentes chez H. dematioides.
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Aureobasidium pullulans :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Filaments hyalins, devenant brun fonc et produisant des arthroconidies ou des
chlamydospores (3 et 4, objectif 40). Conidies unicellulaires, hyalines, formes
partir de cellules conidiognes intgres dans les filaments (5, objectif 20).
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Bipolaris
Shoemaker (1959)
Espce type : Bipolaris australiensis
I Caractres culturaux
Colonies croissance rapide sur milieu de Sabouraud sans cycloheximide.
Loptimum thermique est de 22-25 C.
Les colonies sont duveteuses, de couleur blanchtre devenant brun fonc noire, avec un
verso fonc.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, deviennent rapidement brun fonc.
Les conidiophores, simples, sont bruns, gniculs, croissance sympodiale.
Les conidies (porospores) naissent de part et dautre de la partie terminale du conidiophore.
Elles sont oblongues en fuseau, et pluricellulaires. Cloisonnes seulement transversalement,
elles comprennent de 3 6 cellules et mesurent 14 40 m de long sur 6 11 m de large.
A la suite de leur libration, on observe une petite protubrance leur base.
Certaines conidies mettent des tubes germinatifs qui naissent partir des deux cellules
terminales, et sallongent dans laxe de la spore.
Reproduction sexue
Rarement observe en pratique, la forme sexue est appele Cochliobolus australiensis
(Ascomyctes, Dothidales).
I Commentaires
Les Bipolaris sont des saprophytes des zones tempres ou tropicales pouvant parasiter les
Gramines. Chez lhomme, ils peuvent tre lorigine de phaohyphomycoses
superficielles (kratites) ou profondes (sinusites, pritonites, endocardites, ostomylites,
mningo-encphalites).
Sur le plan morphologique, les Bipolaris se distinguent des Exserohilum. Ces derniers ont
une cicatrice hilaire trs protubrante la base de la conidie. Les Drechslera sont eux
aussi proches des Bipolaris, mais ils produisent des tubes germinatifs partir de nimporte
quelle cellule de la conidie, perpendiculairement son axe.
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Cladosporium
Link (1815)
I Caractres culturaux
Les Cladosporium ont une croissance lente modrment rapide sur tous les milieux de
mycologie. Ils ne sont pas inhibs par le cycloheximide.
Ils ne poussent gnralement qu 20-25 C, mais certaines espces comme C. carrionii
et C. bantianum sont thermophiles.
Les colonies ont une texture veloute ou floconneuse, parfois poudreuse.
La couleur va du vert olive au brun noir trs fonc, et le revers est brun noir.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont pigments. Ils produisent des conidiophores (encore plus foncs)
de longueur variable.
Les premires conidies formes lextrmit des conidiophores sont de grande taille, uni
ou pluricellulaires ; les suivantes sont plus petites et unicellulaires. Lensemble forme de
longues chanes acroptes, ramifies, ralisant des arbuscules fragiles qui se dissocient
lors du montage. La paroi des conidies, de forme gnralement elliptique cylindrique,
est lisse ou finement verruqueuse et prsente souvent aux extrmits des cicatrices de
bourgeonnement ou de libration.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Les Cladosporium sont largement retrouvs dans le sol et sur de nombreux vgtaux. Ils
sont souvent isols de lair ambiant, et de ce fait ce sont de frquents contaminants de
laboratoire.
Certaines espces sont cependant incrimines dans des lsions humaines. Cladosporium
carrionii, rebaptis Cladophialophora carrionii, est le principal agent de la
chromomycose. Cladosporium bantianum, rebaptis Cladophialophora bantiana,
thermophile, est un redoutable pathogne du systme nerveux central. Enfin, dautres
espces comme Cladosporium cladosporioides et C. sphaerospermum sont des agents
occasionnels de phaohyphomycoses opportunistes.
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Curvularia
Boedijn (1933)
Espce type : Curvularia lunata
I Caractres culturaux
Colonies croissance rapide sur milieu de Sabouraud 25 C sans cycloheximide.
Leur texture est laineuse, de couleur blanche au dpart, puis brun olive.
Le verso est fonc.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont rapidement foncs. Les conidiophores sont bruns, simples ou
ramifis, gniculs leur extrmit.
Les conidies (porospores) sont brunes, pluricellulaires et lgrement incurves.
Cloisonnes seulement transversalement, elles comprennent plusieurs cellules dont une
centrale plus grosse et trs pigmente.
Reproduction sexue
Rarement observe en pratique, la forme sexue est appele Cochliobolus lunatus
(Ascomyctes, Dothidales).
I Commentaires
Les Curvularia sont des espces cosmopolites, saprophytes ou parasites facultatifs de
plantes.
Ils peuvent tre responsables de lsions de phaohyphomycoses chez lhomme aussi bien
chez le sujet sain que chez le sujet immunodprim. On dcrit des kratites, des sinusites,
des pneumonies, des endocardites et des abcs crbraux.
Sur le plan morphologique, ils se distinguent des Alternaria par leurs conidies
pluricellulaires cloisons seulement transversales, lgrement incurves avec leur cellule
centrale plus volumineuse et trs fonce.
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Exophiala
Carmichael (1966)
I Caractres culturaux
Colonies croissance lente sur milieu de Sabouraud 25 C. Les espces isoles en
pathologie humaine poussent 37 C et parfois au-del, donnant alors des colonies
daspect levuriforme. Les cultures sont habituellement inhibes par le cycloheximide.
La texture des colonies est en gnral mucode devenant veloute.
La couleur est brun fonc noire, et le verso est fonc.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont brun ple, mais au dbut des cultures prdominent des petites
levures uni ou bicellulaires.
Sur les filaments naissent des petites annellides cylindriques ou lgrement gonfles avec
une extrmit effile. Ces cellules conidiognes sont peu diffrencies des filaments
vgtatifs. Elles produisent des conidies hyalines ou brun ple, ovales cylindriques, uni
ou bicellulaires, saccumulant lextrmit des annellides ou glissant parfois le long des
annellides partir de leur sommet.
Reproduction sexue
Rarement observe, la forme sexue appartient au genre Capronia (Ascomyctes,
Dothidales).
I Commentaires
Les Exophiala sont des saprophytes du sol, des bois en dcomposition. Certaines espces
sont rencontres en pathologie humaine. Exophiala werneckii est lagent de la Tinea nigra
des rgions tropicales. Dautres sont incrimines dans des lsions de myctomes ou de
phaohyphomycoses sous-cutanes et profondes comme E. jeanselmei.
Sur un plan morphologique, ils sont distinguer des Phialophora. Ces derniers produisent
des phialides (et non des annellides) dont lextrmit apicale se termine par une collerette
plus ou moins marque.
Exophiala spinifera diffre de E. jeanselmei (principale espce dimportance mdicale)
par ses annellides allonges en forme dpines, poses sur des conidiophores cloisonns.
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Phialophora
Medlar (1915)
I Caractres culturaux
Champignons croissance lente sur milieu de Sabouraud, inhibe par le cycloheximide.
Loptimum de croissance est de 20-25 C.
Les colonies ont une texture veloute laineuse, de couleur gris fonc, brun olive noire,
parfois rostre.
Le revers est noir.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes septs, hyalins bruns, portent des phialides solitaires (directement insres
sur les hyphes) ou bien groupes sur de courts conidiophores parfois ramifis.
Les phialides sont en forme de bouteille, ou cylindriques, soulignes leur extrmit
apicale par une collerette plus ou moins marque selon les espces.
Les conidies sont globuleuses elliptiques, hyalines ou fortement noirtres, unicellulaires
et lisses. Elles saccumulent typiquement en amas lextrmit des phialides.
Pas de reprodution sexue connue
I Commentaires
Les Phialophora sont des saprophytes de lenvironnement habituellement isols du bois
en dcomposition. Certaines espces sont incrimines en pathologie humaine (comme P.
verrucosa, agent des chromomycoses). Dautres sont responsables, en particulier chez
limmunodprim, de phaohyphomycoses sous-cutanes (kystes) ou profondes (arthrites,
ostomylites, ).
Sur le plan morphologique, les Phialophora se diffrencient des Exophiala par leurs
phialides collerette tandis que chez les Exophiala, lextrmit des cellules conidiognes
(annellides) est effile.
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Phialophora sp. :
Culture sur glose de Sabouraud ge de 8 jours (1 et 2).
Conidies unicellulaires, hyalines, disposes en amas l'extrmit de phialides
collerette (3-5, objectif 100). Les phialides cylindriques (3) ou en forme de bouteille
(4 et 5) sont insres directement sur les hyphes, septs, hyalins bruns.
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Scytalidium dimidiatum
(Penz) Sutton et Dyko (1989)
I Caractres culturaux
Ce champignon pousse bien sur milieu de Sabouraud 25 C sans cycloheximide. La
croissance est cependant plus rapide 37 C.
Il produit des colonies extensives, duveteuses ou floconneuses, ariennes, grises au dpart
devenant noirtres ensuite.
Au verso, les colonies sont fonces avec un pigment noir diffusible.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont de deux types : certains sont hyalins, troits, de 2 3 m de
diamtre, alors que dautres, plus larges, ont une paroi paisse et pigmente. Ces derniers
produisent des arthrospores uni ou bicellulaires, rectangulaires ou en forme de tonnelet
(de 4 16 m de long sur 8 m de large environ).
Parfois on obtient des pycnides de 200 300 m de diamtre, surtout partir de cultures
anciennes (6 8 semaines) exposes aux rayons UV. A maturit, ces pycnides produisent
des spores hyalines ou brunes, uni ou bicellulaires de 4 6 m de long sur 3 5 m de
large. Lorsque les pycnides sont prsentes, le champignon prend le nom de Nattrassia
mangiferae.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
S. dimidiatum est un parasite de plantes et darbres fruitiers, trs frquent dans les rgions
tropicales ou subtropicales, et absent en zone tempre.
Latteinte clinique chez lhomme est superficielle (peau, ongles, ). Les lsions simulent
une dermatophytie (do lappellation parfois donne cette espce de
pseudodermatophyte). Elles sigent surtout au niveau des pieds, espaces interdigitaux,
ongles (onyxis) et plantes des pieds (hyperkratose plantaire), plus rarement au niveau des
mains. Les patients vus en France sont surtout originaires dAfrique noire ou des Antilles.
Le diagnostic est habituellement ais par laspect des filaments vgtatifs pais se
dissociant en arthrospores. Il existe un variant blanc non pigment appel Scytalidium
hyalinum.
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Ulocladium
Preuss (1851)
I Caractres culturaux
Champignons croissance modrment rapide sur milieu de Sabouraud sans
cycloheximide. Loptimum de croissance est 25 C.
Les colonies prsentent une texture laineuse, duveteuse poudreuse.
La couleur est brun olive noire et le recto est noir.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Des hyphes septs, bruns, naissent de courts conidiophores septs, non ramifis, fortement
gniculs.
Les conidies (ou porospores) sont brunes, ovodes, paroi lisse ou rugueuse. Produites
isolment (rarement en chanes), elles mesurent 13 30 m de long sur 6 19 m de large
et sont cloisonnes la fois longitudinalement et transversalement (dictyospores). Elles
sont plus larges la partie distale qu la partie proximale o se trouve la cicatrice de
libration.
Pas de reproduction sexue connue
I Commentaires
Les Ulocladium sont des saprophytes cosmopolites isols de nombreux vgtaux. Ils sont
trs rarement isols de lsions de phaohyphomycoses.
Sur le plan morphologique, ils se distinguent des Alternaria par des conidiophores courts
fortement gniculs, des conidies sans bec et presque toujours solitaires. Ils se
diffrencient, par ailleurs, des Curvularia et des Bipolaris par leurs conidies cloisonnes
dans les deux sens (dictyospores).
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Phoma
Saccardo (1880)
I Caractres culturaux
Champignons croissance rapide et extensive sur milieu de Sabouraud sans
cycloheximide.
Les colonies prsentent une texture glabre initialement, puis duveteuse et enfin poudreuse.
La couleur passe du gris olive au brun ros.
Le revers est brun fonc. Chez certaines espces on observe parfois un pigment brun rouge
diffusant dans la glose.
Au bout dune quinzaine de jours de culture, on peut observer lil nu de petits grains
foncs la surface des colonies.
I Morphologie microscopique
Multiplication vgtative
Les hyphes, septs, sont dabord hyalins, puis bruns.
Les pycnides sont les seuls organes de fructification. Ce sont des lments arrondis ou
piriformes (visibles en surface des colonies), bruns noirs, avec un orifice (ostiole). En
cassant la pycnide, on observe les conidies hyalines, dallure cylindrique, unicellulaires de
3 5 m de long sur 2 3 m de large. Elles sont produites sur de courtes phialides
difficiles observer lintrieur des pycnides.
Reproduction sexue
Les formes sexues appartiennent au genre Pleospora (Ascomyctes, Dothidales).
I Commentaires
Les Phoma sont des Coelomyctes saprophytes ou des parasites de vgtaux colonisant de
nombreux substrats. Ils sont rarement impliqus en pathologie humaine. Quelques cas de
phaohyphomycoses sous-cutanes ont t observs.
Sur le plan morphologique, la confusion peut se produire avec les Ascomyctes produisant
en culture des ascocarpes (clistothces, prithces) comme les Chaetomium et
Pseudallescheria boydii.
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I 5. DMARCHE DIAGNOSTIQUE AU LABORATOIRE
5.1- Prlvements
Squames, ongles, cheveux, fragments de biopsies, scrtions, produits dexpectorations,
de lavages et autres liquides biologiques.
5.2- Examen direct
Lutilisation dun claircissant facilite souvent la visualisation des lments fongiques
pour les prlvements de peau ou de phanres.
5.3- Culture
Les produits pathologiques sont dposs sur le milieu de culture en plusieurs points
distincts et enfoncs lgrement dans la glose. Outre un ensemencement plus ais,
lutilisation de gloses en botes de Ptri facilite lisolement de lagent pathogne et les
montages partir des colonies obtenues (Figure 13). Des repiquages sur milieux spciaux
sont parfois ncessaires pour favoriser la conidiognse et la pigmentation.
Figure 13 : Culture sur glose en bote de Ptri.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
5.4- Incubation
Habituellement 22-25 C pour les prlvement de peau ou de phanres, 37 C pour les
prlvements issus des liquides biologiques et des tissus profonds.
5.5- Examen des colonies fongiques
a - Avec un vaccinostyle
Un fragment de la colonie est prlev avec un peu de glose laide dun vaccinostyle et
dpos sur une lame porte-objet dans une goutte de colorant (bleu coton, bleu leau, ).
Il est ensuite dissoci, puis recouvert dune lamelle couvre-objet qui crase la prparation.
b - Avec un morceau de cellophane adhsive transparente ou scotch
Un petit morceau de scotch est appliqu par sa face collante sur la colonie laide dune
pince (Figure 14), puis dpos sur une goutte de bleu coton sur une lame porte-objet. Une
deuxime goutte (plus rduite) est alors dpose sur la face suprieure du scotch qui est
ensuite recouvert dune lamelle couvre-objet. Il convient dliminer lexcs de colorant
autour de la lamelle avec une feuille de papier buvard.
Figure 14 : Prlvement dune moisissure laide de cellophane adhsive.
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5.6- Culture sur lame
a - Objectif
Examiner les organes de fructification, souvent difficiles observer sur les montages
classiques.
b - Prparation du matriel
Dposer une tige de verre en U dans le fond dune bote de Ptri de 9 cm de diamtre. Sur
ce chevalet, placer une lame porte-objet strile et fixer dessus un petit carr de glose de
Sabouraud denviron 5 mm dpaisseur.
c - Ensemencement
Inoculer les cts du bloc de glose avec de petits fragments de la culture examiner.
Recouvrir lensemble dune lamelle couvre-objet strile. Puis, verser un peu deau
distille strile dans le fond de la bote, refermer la bote de Ptri et placer le tout ltuve,
habituellement 20-25 C (Figure 15).
Figure 15 : Culture sur lame pour observation des organes de fructification.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
d - Lecture
Lorsque la culture est sporule, prlver la lamelle couvre-objet et la dposer sur une
goutte de bleu coton pose sur une lame porte-objet. Si la culture est optimale, liminer le
bloc de glose ; dposer alors sur la lame une goutte de bleu et recouvrir le tout dune
lamelle. Pour une meilleure conservation, les prparations entre lame et lamelle peuvent
tre scelles avec du vernis ongle.
5.7- Interprtation
Elle revient toujours au biologiste. En dehors dun prlvement profond ou de lisolement
dun pathogne classique partir dun prlvement superficiel, les critres de
pathognicit sont actuellement bien codifis :
1. Examen direct positif (prsence du champignon dans le prlvement ltat
parasitaire).
2. Isolement du champignon plusieurs reprises partir dun mme site.
3. Isolement du champignon en culture pure et/ou partir de plusieurs points
densemencement.
4. Rponse une thrapeutique spcifique. Toutefois, ce critre nest pas obligatoire pour
affirmer le caractre pathogne de lisolat.
Dans toutes les situations, linterprtation sera facilite par la lecture et lanalyse du
dossier mdical du patient. La confrontation clinico-biologique, et donc le dialogue avec
le clinicien, prennent ici toute leur valeur.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002

RFRENCES GNRALES CONSEILLES
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144
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
A
Acervule Organe de reproduction asexue rencontr chez certains champignons
phytopathognes, dans les tissus de lhte. Il renferme de multiples petits
conidiophores, agglomrs les uns aux autres, porteurs des cellules
conidiognes.
Aciculaire Rectiligne et effil, en forme daiguille.
Acropte Se dit dun mode de reproduction asexue conduisant par bourgeon-
nement la formation dune chane de spores dont la plus jeune est au
sommet (exemple : Cladosporium).
Actidione Nom commercial du cycloheximide, antibiotique antifongique, qui, inclu
dans les milieux de culture, inhibe la pousse de nombreuses moisissures.
Agar ou agar-agar Polymre de lagarose qui rentre dans la composition des milieux de culture
solides en microbiologie. Aussi appel glose.
Aleurie (= aleuriospore) Spore asexue externe forme latralement ou lextrmit dun filament,
partir dlments prexistants du thalle (filament vgtatif, courte
ramification).
Ampulliforme En forme dampoule.
Anamorphe Se dit dun tat de fructification asexu (ou imparfait) rencontr chez un
champignon.
Annellide Cellule conidiogne caractrise par un site de bourgeonnement unique qui
fonctionne de manire itrative, et par des reprises de croissance terminale
aprs chaque bourgeonnement. Elle produit des spores disposes en chanes
basiptes. De plus, chaque reprise de croissance engendre la formation au
niveau du col de la cellule conidiogne dune cicatrice dessinant un anneau.
Annellospore Spore asexue produite par une annellide.
Apex Terme utilis en mycologie pour dfinir lextrmit terminale dun
filament.
Apophyse vasement plus ou moins marqu de la partie terminale du sporo-
cystophore au dessous du sporocyste, que lon rencontre chez certaines
espces de Mucorales.
Arthrospore Spore asexue issue de la fragmentation progressive et rtrograde dun
filament au niveau des septa. Aussi appele arthroconidie.
Article Chez les septomyctes, partie dun hyphe (ou filament) comprise entre
deux cloisons successives, et contenant un ou plusieurs noyaux.
Ascomyctes (aussi appels Ascomycotina) Champignons thalle levuriforme ou sept
dont la reproduction sexue est assure de manire endogne, par production
dascospores lintrieur dun asque.
145
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
GLOSSAIRE
Ascospore Spore sexue produite de manire endogne lintrieur dun asque et
caractristique des Ascomyctes.
Asque Formation sexue chez les Ascomyctes, soit arrondie (asque protuniqu)
soit allonge avec une seule paroi (asque unituniqu) ou deux parois
(asque bituniqu). Elle renferme maturit les ascospores.
B
Baside Cellule spcialise chez les Basidiomyctes, produisant par bourgeonnement
son sommet des spores sexues (basidiospores).
Basidiomyctes (aussi appels Basidiomycotina) Champignons thalle levuriforme ou
sept dont la reproduction sexue est assure par bourgeonnement de
spores sexues (basidiospores) lextrmit de cellules spcialises
appeles basides.
Basidiospore Spore sexue forme lextrmit dune baside, caractristique de
certains Basidiomyctes.
Basipte Se dit dune chane de spores dont la plus jeune est la base. Les spores
disposes en chanes basiptes sont produites sur le mode blastique
phialidique (Aspergillus, Penicillium, ) ou sur le mode blastique
percurrent (Scopulariopsis).
Binomial Qui comporte 2 noms : selon la classification Linenne, une espce
comprend un nom de genre et une pithte spcifique.
Bisri Terme utilis chez les Aspergillus. Il traduit la prsence de mtules
supportant les phialides et assurant leur insertion sur la vsicule, au
sommet du conidiophore.
Blastomycte Classe des Deuteromycotina qui regroupe les levures asexues ou
imparfaites.
Blastospore Terme dsignant au sens strict toutes les spores asexues produites par
bourgeonnement. En pratique, il est rserv aux spores produites sur le
mode blastique solitaire (levures), sur le mode blastique synchrone
(Paracoccidioides, ) ou sur le mode blastique acropte (levures,
Cladosporium, ).
Bote de Ptri Rcipient plat en verre ou en plastique avec base et couvercle permettant
de couler les milieux de culture en microbiologie (milieu de Sabouraud
notamment).
Bourgeonnement Mode de reproduction asexue le plus frquent, rencontr souvent chez
les levures. Cela aboutit la production de cellules filles issues de la
cellule initiale par sparation dune excroissance de cette dernire appele
cellule mre.
C
Cellule conidiogne Cellule productrice de spores asexues externes (bourgeonnement).
Cellule en noisette (aussi appele Hlle cell ) Cellule rfringente, paroi paisse, de
forme variable, observe chez certaines espces du genre Aspergillus.
Cellule podale Cellule basale des macroconidies de Fusarium prsentant une sorte de
talon plus ou moins visible.
146
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Champignon (en Anglais Fungi) Vient dun vieux mot franais, champignuel, du latin
campagniolus : qui vit dans les champs. Au sens littraire (Larousse, Petit
Robert), il dsigne un vgtal form dun pied surmont dun chapeau
correspondant de nombreuses espces comestibles ou vnneuses. Sur un
plan scientifique, il dfinit tout organisme appartenant au rgne des
Myctes.
Champignons imparfaits Voir Deutromyctes.
Chlamydospore Forme de rsistance produite par les champignons lorsque les conditions
deviennent dfavorables et caractrise par une paroi trs paisse. Elle se
forme partir dun article du filament myclien (ou parfois dun article
dune spore pluricellulaire, chez les Fusarium). Il ne sagit pas rellement
dune spore car il ny a pas de mcanismes de libration.
Claviforme En forme de massue.
Clomyctes Champignons filamenteux thalle sept, se multipliant sur le mode
asexu, et dont les cellules conidognes sont rassembles dans des
organes protecteurs de type pycnides (Sphaeropsidales) ou acervules
(Mlanconiales).
Cnocytique Se dit des filaments peu ou non cloisonns, de diamtre large et irrgulier,
caractristiques des Zygomyctes.
Collerette Fragment de la paroi du sporocyste qui persiste de part et dautre de la
columelle aprs dchirement du sporocyste (exemple : Absidia). Ce terme
est aussi utilis pour dsigner une structure en forme de coupe, lapex des
phialides chez certain Phialospors.
Columelle Renflement cylindrique, globuleux ou hmisphrique lextrmit du
sporangiophore qui fait saillie dans le sporocyste.
Commensalisme Se dit dun organisme (ici un champignon) qui vit chez un autre
organisme vivant sans lui occasionner de troubles particuliers ;
littralement parasitisme bien tolr.
Conidie Spore asexue externe. Chez les champignons produisant plusieurs types
de conidies, on peut y ajouter selon leur taille les prfixes micro- (spores
souvent unicellulaires) ou macro- (spores souvent pluricellulaires).
Conidiognse Ensemble des mcanismes intervenant dans la production des spores
asexues ou conidies.
Conidiophore Filament porteur des cellules conidiognes. Pour certains champignons
dmatis, ce terme dsigne un filament spcialis dans la production des
conidies.
Contaminant Terme utilis par les biologistes pour dsigner un microorganisme (ici un
champignon) qui souille accidentellement le milieu de culture. Ce terme
exclut en consquence un caractre pathogne.
Cormie Faisceau de conidiophores disposs paralllement les uns aux autres,
ralisant ainsi une gerbe sporifre.
Cuniforme En forme de coin ou de clou.
D
Dematiaceae (aussi appels Dmatis) Famille des Deutromyctes Hyphomyctes
dont les filaments (et souvent les spores) sont pigments. Ces
147
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
champignons donnent des colonies fonces noires, et produisent des
spores souvent fonces noires.
Deutromyctes (aussi appels Deuteromycotina) Champignons thalle levuriforme ou
sept se multipliant sur le mode asexu (aussi appels champignons
imparfaits ou Fungi imperfecti). Ils se rpartissent en 3 classes : les
Blastomyctes, les Hyphomyctes, les Clomyctes.
Dictyospore Spore pluricellulaire cloisonne la fois transversalement et
longitudinalement. Ce type de spores caractrise certains Dmatis
(exemple : Alternaria)
Dimorphisme Aptitude de nombreux champignons pathognes se prsenter sous deux
stades morphologiques distincts selon quils sont ltat parasitaire ou
saprophyte. Cet tat parasitaire peut tre reproduit in vitro dans certaines
conditions de culture (milieu de culture, temprature dincubation, teneur
en CO
2
).
E
Echinul Se dit dune paroi fongique (spores ou filaments) qui est recouverte
dasprits plus ou moins marques. Synonyme : verruqueux.
Endospore Spore interne, produite lintrieur dune structure ferme, sporocyste ou
sphrule.
F
Filament myclien Voir hyphe.
Filamenteux Qualificatif courant en mycologie pour dsigner les champignons qui
produisent des filaments par opposition aux levures au thalle unicellulaire.
Flore Pour le microbiologiste, terme gnral dsignant lensemble des
microorganismes cohabitant dans un mme biotype. Exemple : flore
intestinale.
Fongique Qui se rapporte aux champignons.
Fungi imperfecti Voir Deutromyctes.
Fusiforme En forme de fuseau, cest--dire renfl au centre et effil chaque
extrmit. Exemple : macroconidie de Fusarium.
G
Glose Voir agar.
Gnicul Qualifie une cellule conidogne (ou un conidiophore) qui, par sa
croissance sympodiale, acquiert une forme en zig-zag o chaque angle
correspond un site de bourgeonnement.
Genre Unit de classification des tres vivants qui se situe entre lunit de base
qui est lespce et un niveau taxonomique plus lev qui est la famille.
Dans la dnomination binomiale des tres vivants, le premier nom qui
commence toujours par une majuscule dsigne le genre. Exemple :
Aspergillus fumigatus, genre Aspergillus, espce fumigatus.
Glabre Se dit dune culture ou dune structure dpourvue de poil.
148
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
H
Htrotrophe Mode nutritionnel des tres vivants appartenant au rgne animal et celui
des champignons qui, incapables de synthtiser les composs organiques,
utilisent pour leur nutrition des matires organiques prformes, produites
par dautres organismes vivants.
Hlle Cell Voir cellule en noisette.
Hyalin Terme utilis en mycologie pour caractriser les spores ou les filaments
dont la paroi est non pigmente, et apparat donc incolore ou transparente.
Hyalohyphomyctes (aussi appels Mucdins) Hyphomyctes dont les filaments sont hyalins.
Ces champignons donnent des colonies dabord blanches, et cest
seulement avec la maturation des structures conidiognes que ces colonies
prendront leur teinte caractristique (pigmentation des conidies).
Hyalohyphomycoses Terme dsignant les mycoses dtermines par des Hyalohyphomyctes.
Hyphe (aussi appel filament myclien) Structure lmentaire du thalle des
champignons filamenteux, daspect tubulaire, sept ou non (dans ce
dernier cas, on parlera dhyphes siphons comme chez les Zygomyctes).
Hyphomyctes Champignons filamenteux thalle sept, se multipliant sur le mode
asexu, et ne produisant pas dorganes protecteurs des cellules
conidognes.
K
Kratine Sclroprotine complexe, soufre, de consistance dure, impermable, trs
rpandue dans le monde animal et parfois prsente dans la paroi de
certains champignons. Chez lhomme, la kratine est abondante dans
lpiderme (cornocytes) et les phanres (cheveux, poils, ongles).
Kratinophilie Tropisme plus ou moins marqu de certains champignons pour la kratine
animale ou humaine. Dans le sol, la kratine est aussi prsente (fragment
de plumes doiseaux, de carapaces dinsectes, ). Les champignons
kratinophiles peuvent tre isols du sol par une technique de pigeage
appele technique de Vanbreuseghem. Cette dernire consiste dposer
des cheveux striles la surface de la terre prleve. En quelques
semaines, les champignons kratinophiles du sol (appartenant aux genres
Microsporum, Trichophyton, Chrysosporium, ) se dveloppent sur les
cheveux.
Kratinolytique Proprit quont certains champignons kratinophiles de dgrader, laide
denzymes, la kratine humaine ou animale et dutiliser certains de ses
composants pour assurer leur croissance. Exemples : les dermatophytes et
des espce proches comme Chrysosporium keratinophilum, Aphanoascus
(Anixiopsis) fulvescens.
L
Logette Se dit des cellules constitutives des macroconidies, principalement chez
les dermatophytes et les Fusarium.
149
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
M
Macroconidie (aussi appele macroaleurie) Conidie de grande taille, habituellement
pluricellulaire (avec plusieurs logettes), produite sur le mode thallique
solitaire.
Macromyctes (aussi appels champignons macroscopiques) Champignons classs pour
la plupart parmi les Basidiomyctes. Habituellement visibles, ces
champignons, non abords dans cet ouvrage, possdent un carpophore.
Certains sont comestibles (bolet, girolles, ), dautres sont toxiques ou
vnneux.
Membrane Structure biologique forme de feuillets comportant une bicouche
lipidique o sont insres diverses protines.
Mtule Article strile, allong, permettant linsertion des phialides lextrmit
du conidiophore (Aspergillus bisris, Penicillium bi ou triverticills,
Paecilomyces).
Microconidie Conidie de petite taille, habituellement unicellulaire, produite sur le mode
thallique solitaire.
Micromyctes (aussi appels champignons microscopiques) Ce sont les espces tudies
ici qui intressent les mycologues mdicaux. Habituellement, pour les
observer, il faut les cultiver sur des milieux appropris (habituellement le
milieu de Sabouraud). Ces espces peuvent se voir dans des endroits
humides (moisissures observes dans les caves, les pices confines, )
propices leur dveloppement et une observation macroscopique. Leur
appareil vgtatif est le thalle qui peut tre unicellulaire (levure) ou
filamenteux (myclium).
Moisissure Terme dusage courant dsignant des champignons filamenteux issus du
sol o ils vivent habituellement en saprophytes. Certains dentre eux
peuvent cependant se comporter, chez lhomme ou lanimal, en
pathognes opportunistes.
Moniliforme Se dit dun filament myclien en forme de chapelet ou de collier du fait
de la succession rapproche des cloisonnements de lhyphe. Certaines
espces, comme lAscomycte Neurospora sitophila, produisent
spontanment des hyphes moniliformes.
Monomorphe Se dit dun champignon qui ne prsente quun seul aspect morphologique
in vivo comme in vitro quelles que soient les conditions de culture.
Mucorales Principal ordre des Zygomyctes caractris par la production dendospores
formes lintrieur dun sporocyste ou sporange. Ces champignons
cosmopolites sont parfois pathognes pour lhomme (opportunistes).
Mucormycose Affection dtermine par les Mucorales. Certaines espces sont lorigine
de mycoses systmiques svres chez les sujets dbilits (hmopathies,
greffes, diabtes, grands brls, ).
Myclium Ensemble des hyphes constitutifs de lappareil vgtatif des
champignons.
Myctes Un des cinq rgnes du monde vivant selon la classification de Wittaker
(1969). Ce sont des organismes eucaryotes, htrotrophes, constitus dun
thalle unicellulaire ou filamenteux, et vivant en saprophytes ou parfois en
parasites.
150
Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Mycose Manifestation provoque par la prsence dun champignon microscopique
dans lorganisme. On distingue les mycoses superficielles et les mycoses
profondes ou systmiques.
Mycosique Qui se rapporte une mycose.
Mycotoxine Toxine produite par un champignon microscopique.
Mycotoxinose (aussi appelee mycotoxicose) Intoxication dorigine alimentaire provoque
par une toxine produite par un micromycte au cours de son dveloppement
dans un aliment (crales, par exemple). Exemple : lergotisme est d
lingestion dune farine provenant de grains parasits par lergot de seigle,
Claviceps purpurea.
N
Nud Chez les Mucorales, site dinsertion des sporocystophores sur les stolons.
Nosocomial Infection contracte au cours dune hospitalisation.
O
Oblongue Allonge.
Onychomycose Infection des ongles cause par un champignon.
Opportuniste Se dit dune espce fongique qui profite dune opportunit pour exprimer
son pouvoir pathogne. Cette opportunit est lie la diminution ou
leffondrement de la rsistance de lhte.
Organe de fructification Se dit chez les champignons des organes ou structures spcialiss dans la
production des spores sexues ou asexues.
Organe perforateur Cest un hyphe spcialis chez les champignons kratinolytiques
(dermatophytes et assimils) qui provoque, en pntrant dans un cheveu
ou un poil, une destruction en forme de clou de part et dautre de la tige
pilaire. Leur recherche est parfois ralise in vitro pour identifier certains
dermatophytes.
Ostiole Ouverture dans la paroi dune pycnide ou dun prithce permettant la
libration des spores.
Otomycose Mycose du conduit auditif interne.
Ovode En forme duf, avec une partie large la base.
P
Parasite Etre vivant (animal, vgtal, champignon) qui vit aux dpens dune autre
espce vivante appele hte. Suivant les modalits dinstallation du
parasite chez son hte, on distingue :
les parasites de blessure, ces derniers pntrent et simplantent en
profitant des tissus endommags,
les parasites facultatifs ou permanents,
les parasites obligatoires : il leur est impossible de vivre en dehors de
leurs htes,
les parasites opportunistes qui ne peuvent infecter leurs htes que si ces
derniers sont affaiblis ou immunodprims.
Parasitisme Comportement propre aux parasites vis--vis de leurs htes.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Parfait Terme dsignant la forme sexue ou tlomorphe dun champignon.
Paroi Structure plurilamellaire doublant la membrane plasmique des cellules
fongiques, mais aussi des cellules vgtales et des bactries. Les cellules
animales, par contre, sont dpourvues de paroi.
Pnicille Groupement de phialides disposes en verticilles au sommet dun
conidiophore fin et cloisonn, caractristique des Penicillium. Aussi
appel pinceau.
Peptone Mlange de peptides issus dune hydrolyse enzymatique ou chimique de
viandes (ou de vgtaux) et entrant dans la composition de certains
milieux utiliss en mycologie.
Percurrent Se dit dun mode de formation des spores. Ces dernires naissent partir
dune cellule conidiogne caractrise par un site de bourgeonnement
unique qui fonctionne de multiples fois, et par une alternance de
bourgeonnement terminal et de reprise de croissance terminale.
Prithce Ascocarpe globuleux prsentant un orifice (lostiole) qui permet la
libration des asques et ascospores maturit.
Phaohyphomycose Mycose due des champignons foncs appartenant la famille des
Dematiaceae.
Phialide Cellule conidiogne spcialise, gnralement en forme de bouteille avec
une extrmit apicale rtrcie. Elle prsente le plus souvent un site de
bourgeonnement unique (plusieurs sites pour les polyphialides de certains
Fusarium), qui fonctionne de manire itrative, et produit ainsi de
nombreuses spores asexues.
Phialospore Spore asexue produite par une phialide.
Phragmospore Spore pluricellulaire cloisonne seulement transversalement.
Piriforme En forme de poire.
Pinceau Voir pnicille.
Porospore Spore asexue laissant dans la paroi de la cellule conidiogne, la suite
de sa libration, un pore (trou dans la couche de mlanine qui tapisse la
face externe de la paroi de la cellule conidiogne).
Pseudodermatophyte Champignon kratinophile proche des dermatophytes par son pouvoir
pathogne (attaque de la kratine). Exemples : Scytalidium sp.,
Onychocola canadensis.
Pseudomyclium (aussi appel pseudofilament) Chez les levures, chane de blastospores qui
restent accoles les unes aux autres voquant ainsi un filament myclien.
Pycnide Organe globuleux, muni dun orifice (lostiole), lintrieur duquel se
forment des spores asexues. Les pycnides sont caractristiques des
Clomyctes.
R
Revers (= verso) Envers dune culture.
Reproduction Action de se reproduire en mettant en uvre des processus sexus ou
asexus. Elle permet lespce de se perptuer. Cest sur les modes de
reproduction quest base la classification des champignons.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Rhizode Filament myclien ressemblant une racine qui fixe le thalle sur son
substrat, chez certaines Mucorales.
S
Sabouraud Milieu de culture habituel en mycologie, il contient de la glose (agar-
agar), de la peptone, du glucose et de leau distille. On y ajoute souvent
des antibiotiques (chloramphnicol, gentamicine), ainsi quun
antifongique (cycloheximide) pour inhiber la pousse de certaines
moisissures et levures indsirables.
Saprophyte Se dit dun organisme vivant qui se nourrit partir de substrats organiques
en dcomposition (matire morte).
Septation Formation de cloisons ou septa dans un filament ou une spore.
Septum Cloison sparant deux articles dun filament (ou dune spore).
Siphomycte Champignon filamenteux thalle cnocytique.
Sporange Organe de fructification asexue chez les Mucorales. Globuleux et clos, il
renferme de nombreuses spores maturit.
Sporangiospore Spore asexue endogne, produite lintrieur dun sporange.
Spore (= propagule) lment issu de la reproduction sexue ou asexue des champignons et
destin assurer la survie du champignon et sa propagation.
Sporocyste Voir sporange.
Sporocystophore Filament arien porteur des organes de reproduction (sporocystes) chez
les Zygomyctes.
Sporodochie Structure conidiogne asexue, la forme de coussinet, constitue dun
agrgat de filaments vgtatifs et de conidiophores portant les cellules
conidiognes.
Sporulation Aptitude dun champignon produire des spores. Synonyme :
fructification.
Stipe Voir conidiophore
Stolon Filament rampant la surface du substrat et joignant deux groupes de
sporocystophores chez certaines Mucorales.
Sympode Disposition particulire des spores sur la cellule conidiogne lie aux
reprises successives de croissance latrale de la cellule aprs chaque
bourgeonnement de spore.
Sympodial Se dit dun mode de formation des spores. Ces dernires naissent partir
dune cellule conidiogne qui reprend sa croissance latralement aprs
chaque bourgeonnement, et acquiert ainsi une forme en zig-zag o chaque
angle correspond un site de bourgeonnement.
Sympodulospore Spore asexue forme sur le mode blastique sympodial.
Synanamorphe Appellation des diffrents stades dun champignon imparfait prsentant
plusieurs modes de reproduction asexue.
Synnema Voir cormie.
T
Tlomorphe Stade sexu (forme parfaite) dun champignon.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Tellurique En relation avec la terre, le sol.
Thalle Ensemble de lappareil vgtatif et reproducteur dun champignon. Il peut
tre unicellulaire (levure) ou filamenteux.
Thallique Mode de conidiognse rsultant de la diffrenciation en spores
(accumulation de rserves dans le cytoplasme, diffrenciation de la paroi,
puis libration) de filaments prexistants qui se fragmentent au niveau des
cloisons. Les spores ainsi produites (aleuries, arthrospores) sont
caractrises par une base tronque.
Torulode Se dit dun filament vgtatif ou dun conidiophore prsentant une srie
de renflements.
Tronqu Se dit dune structure qui semble ampute de sa partie terminale.
Exemple : conidie tronque (base aplatie).
U
Unisri Terme utilis chez les Aspergillus. Il traduit une insertion directe des
phialides sur la vsicule, au sommet du conidiophore (absence de
mtules).
V
Verruqueux Voir chinul.
Verticille Regroupement de conidiophores ou de phialides inserrs en un mme
niveau sur un filament, donnant ainsi laspect dun bouquet.
Vsicule Selon les sens quon lui donne en mycologie :
la partie dilate dun filament,
la partie apicale du conidiophore chez les Aspergillus,
une cellule ou un article dilat contenant des endospores.
Virulence Aptitude dun microorganisme dterminer chez lhte des
manifestations morbides.
Z
Zygomyctes (aussi appels Zygomycotina) Champignons filamenteux thalle
cnocytique dont la reproduction sexue aboutit la formation de
zygospores.
Zygospore Spore sexue caractrisant les Zygomyctes.
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
1 - claircissants
Les claircissants sont indiqus pour les examens directs (on peut aussi acclerer lclaircis-
sement de la prparation en passant les montages sur lame dans la flamme de la veilleuse du
bec Bunsen quelques secondes sans faire bouillir).
Tous ces produits sont conserver en flacons bruns labri de la lumire, de prfrence au
rfrigrateur.
Lactophnol dAmann
Phnol cristallis pur 10 g
Acide lactique 10 g
Glycrine 20 g
Eau distille 10 ml
Dissoudre le phnol et lacide lactique dans un peu deau avant de faire le mlange.
Chloral-lactophnol
Hydrate de chloral 20 g
Phnol cristallis pur 10 g
Acide lactique 10 g
Dissoudre le phnol et lacide lactique dans un peu deau avant de faire le mlange.
Potasse 10 %
Hydroxyde de potassium 10 g
Eau distille 90 ml
Quantit dH
2
eau distille
La solution de potasse peut tre ralise plus forte concentration (20 ou 30 %).
Solution de noir chlorazole E
Dissoudre 5 g dhydroxyde de potassium dans 90 ml deau distille.
Paralllement, dissoudre 100 mg de noir de chlorazole E (Sigma) dans 10 ml de dim-
thylsulfoxyde.
Verser le noir de chlorazole dans lhydroxyde de potassium.
claircit et colore en mme temps
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
ANNEXES
Blankophor (lecture au microscope fluorescence avec un filtre bleu 400-440 nm)
Hydroxyde de potassium (KOH) 1 g
Eau distille 7,5 ml
Ajouter :
Blankophor P Flssig (Bayer) 10 ml
Ethanol 90 2,5 ml
claircit et colore en mme temps
2 - Colorant des cultures
Bleu au lactophnol
Phnol cristallis pur 10 g
Acide lactique 10 g
Glycrine 20 g
Bleu Coton C4B (ou Bleu de mthyle) 0,25 g
Eau distille 10 ml
3 - Milieux disolement
Sabouraud-chloramphnicol
Peptone 10 g
Glucose 20 g
Agar 20 g
Chloramphnicol 0,5 g
Eau distille q.s.p 1000 ml
pH : 5 5,6
Sabouraud-chloramphnicol-actidione

Peptone 10 g
Glucose 20 g
Agar 20 g
Chloramphnicol 0,5 g
Cycloheximide (Actidione

) 0,5 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
pH : 5 5,6
Le cycloheximide est dissout dans 10 ml dactone.
Chloramphnicol et cycloheximide sont thermostables.
Milieu lextrait de malt (pour isolement des moisissures)
Extrait de malt 15 g
Agar 15 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
pH : 6,2 6,5 pour les levures, 7 pour les champignons filamenteux
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
4 - Autres milieux utiliss en mycologie
Milieu DTM (de Taplin) (commercialis sous le nom de DTA)
Phytone 10 g
Glucose 10 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
Faire bouillir
Ajouter une solution de rouge de phnol : 40 ml (0,25 g rouge de phnol 0,75 ml
NaOH 1 N eau distille q.s.p. 50 ml)
HCl 0,8 N 6 ml
Cycloheximide (Actidione

) 0,5 g
Chloramphnicol 0,5 g
pH : 5,5
Tous les dermatophytes font virer le milieu de Taplin (mais galement de nombreux
saprophytes).
Milieu de Borelli (Lactrimel)
Miel pur 7 g
Farine de bl 14 g
Lait crm en poudre 14 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
Chloramphnicol 0,5 g
Cycloheximide (Actidione

) 0,5 g
Striliser 10 mn 105 C
Favorise la sporulation et la pigmentation (M. canis, T. rubrum).
Brain-Heart infusion agar
Brain-Heart Infusion (bio-Mrieux) 37 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
pH : 7,4
Favorise la croissance de T. verrucosum.
Milieu PDA
Potato Dextrose Agar (Difco) 39 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
pH : 5,6
Favorise la production du pigment (T. rubrum, M. canis, M. langeronii).
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Cahier de Formation - Les moisissures dintrt mdical - 2002
Milieu pepton 3 % (Sabouraud conservation)
Peptone 30 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
Ncessaire pour diffrencier M. persicolor de T. mentagrophytes : la colonie prend une
couleur rose, alors quelle est blanc-crme pour T. mentagrophytes.
Milieu de Baxter (Milieu au Lab-Lemco)
Lab-Lemco (Oxod) 2,5 g
Glucose 5 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
Favorise la fructification et le pigment de la plupart des dermatophytes.
Milieu de Takashio (Sabouraud dilu)
Glucose 2 g
Nopeptone 1 g
MgSO
4
1 g
KH
2
PO
4
1 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
pH : 6,2
Favorise la sporulation. Excellent milieu pour obtenir la forme sexue du complexe
T. mentagrophytes.
Eau glose 2%
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
Milieu pauvre, leau glose 2 % favorise la sporulation pour de nombreuses moisissu-
res.
Corn-Meal agar
Corn-Meal Agar (Difco) 17 g
Agar 7 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
pH : 6,0
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Milieu de Czapek (identification des Aspergillus)
Saccharose 30 g
NaNO
3
3 g
K
2
PO
4
1 g
MgSO
4
, 7H
2
O 0,5 g
KCl 0,5 g
FeSO
4
, 7H
2
0 0,01 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
pH : 7,3
Milieu pommes de terre - glucose
Pulpe de pommes de terre 200 g
Glucose 10 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
Ramollir la pulpe de pommes de terre dans 300 ml deau distille en chauffant. Ajouter
ensuite le glucose et lagar. Porter bullition pour solubiliser lagar, puis filtrer sur gaze,
et complter un litre avec de leau distille.
Milieu pommes de terre - carottes
Pulpe de pommes de terre 20 g
Pulpe de carottes 20 g
Agar 20 g
Eau distille q.s.p. 1000 ml
Faire macrer les pulpes de pommes de terre et de carottes dans 300 ml deau distille
pendant une heure, puis ajouter lagar. Porter bullition pour solubiliser lagar, puis fil-
trer sur gaze, et complter un litre avec de leau distille.
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