Ao Moduladoura da Crioterapia na concentrao srica de CK em

Jovens Atletas de futebol

Introduo
A crioterapia o mtodo que utiliza a reduo da temperatura local como recurso auxiliar no
processo de regenerao de tecidos lesionados. Os objetivos da crioterapia so: reduzir o
edema causado na regio da leso, diminuir o processo inflamatrio, diminuir o espasmo
muscular, provocar analgesia local e causar uma hiperemia no local para que seja oferecida a
clula aporte de nutrientes para sua reconstruo aps as micro-rupturas (HARRELSON et al.
2000; KITCHEN, 2003).
descrito que o exerccio induz microleses no tecido muscular esqueltico. Durante todo o
ciclo de contrao (fases excntrica e concntrica) as tenses geradas na fibra muscular podem
levar a micro rupturas no sarcolema e lamina basal, sendo que a fase excntrica se comparada
concntrica proporciona maior quantidade de micro leses musculares (HORTOBGYI et al.,
1998; WILLOUGHBY et al., 2003). Essas leses podem ser observadas diretamente por
microscopia ou verificadas indiretamente por marcadores de leso tecidual (HORTOBGYI et
al., 1998; NOSAKA e NEWTON, 2002; WILLOUGHBY et al., 2003). A ruptura do sarcolema
permite o extravasamento do contedo intracelular, causando o aparecimento de enzimas,
protenas e fragmentos de protena no sangue. Entre estes marcadores de leso tecidual
destacam-se a creatina quinase (CK), lactato desidrogenase (LDH), mioglobina, troponina I e
fragmentos de miosina. Sendo assim verificar o aparecimento destas enzimas no sangue serve
como indicador de leso tecidual (NOSAKA e NEWTON, 2002).
O tecido lesionado precisa ser reconstitudo para que o funcionamento adequado do msculo
esqueltico seja recuperado. Estas rupturas no tecido so reconstrudas, pois h sinalizao do
on Ca++ do retculo sarcoplasmtico para que haja sntese de hormnios, por exemplo IGF-I.
Esses hormnios vo sinalizar aos ncleos da fibra muscular a sntese de novas protenas como
cadeia pesada de miosina (MHC) e protenas do citoesqueleto da fibra muscular (WILLOUGHBY
e PELSUE, 2000). Desta maneira a clula muscular reconstituda, ir adaptar-se ao exerccio
sintetizando um nmero maior de protenas, promovendo assim o processo de hipertrofia
muscular (ELIAKIM et al., 1998; WILLOUGHBY e PELSUE., 2000; CHEVION et al., 2003).
As microleses provocadas no sarcolema induzem liberao de prostaglandinas e por um
processo de quimiotaxia h a atrao de clulas do sistema imune como macrfagos,
neutrfilos, eosinfilos ocorrendo assim uma resposta inflamatria (STUPKA et al. 2001; CHEN e
HSIEH, 2001; WILLOUGHBY, et al. 2003).
Postula-se que a crioterapia capaz de diminuir a resposta inflamatria, reduzindo o edema
causado na regio da leso, diminuindo o espasmo muscular e provocando analgesia. Espera-se
que estas respostas fisiolgicas restaurem as condies normais do tecido lesionado
(HARRELSON et al., 1998; KITCHEN, 2003).
Zoppi et al. (2003) verificaram que atividade fsica aumenta os marcadores sricos de
estresse oxidativo e de leso msculo-esqueltico durante perodo de competio em atletas de
futebol. A seqncia de jogos em uma competio leva os atletas a seguidos estresses
mecnicos (microleses) e metablicos (estresse oxidativo) que se no forem recuperados
rapidamente podem lev-lo a um futuro estado de sobretreinamento (BUDGETT et al., 2000).
Objetivando acelerar o processo de regenerao tecidual, equipes desportivas de vrias
modalidades usam a imerso em gua fria (crioterapia).
O objetivo deste trabalho verificar o efeito da imerso em gua fria (crioterapia) sobre os
marcadores sricos de leso muscular aps serem induzidas micro rupturas no sarcolema
atravs do exerccio.

Metodologia
Sujeitos
Homens entre 14-20 anos, atletas de futebol, que no utilizavam nenhum tipo de
suplementao diettica, esterides anabolizantes e que no apresentavam leses osteo-mio-
articulares. Foram divididos randomicamente em dois grupos, controle (CONT; n = 10) e
experimental (CRIO; n = 9). Posteriormente estes mesmos atletas foram subdivididos de
acordo com a faixa etria: CRIO17- e CONT17- constitudo de atletas com menos que 17 anos,
CRIO16+ e CONT16+ com atletas com mais que 16 anos .
Os sujeitos ou os responsveis assinaram um termo de participao consentida em que havia
a descrio dos procedimentos a que seriam submetidos conforme a resoluo n 251, de
07/08/1997 do CONSELHO NACIONAL DE SADE e na resoluo nmeros 196, de 10/10/1996
que so as diretrizes e normas regulamentadoras de pesquisa envolvendo seres humanos.

Procedimentos
Inicialmente os sujeitos passaram por uma avaliao antropomtrica que consistiu de: Massa
Corporal Total (MCT) e dobras cutneas (trceps, suprailca e coxa). A MCT foi obtida em
balana Lightex (Brasil) e as dobras cutneas em adipmetro cientfico (CESCORF - Brasil) que
possibilitou calcular o percentual de gordura (%G) pelo protocolo de Pollock de 3 dobras e a
Massa Corporal Magra (MCM) dos sujeitos.
Os indivduos realizaram um treinamento de corrida contnua com velocidade variada de
trabalho (CCVV) alm dos treinamentos normalmente realizados. O campo de futebol foi
delimitado em uma rea de 50 m2 conforme descrito em Bassini et al. (2005), onde foram
realizados tiros de 5, 10, 20, 30 metros reproduzindo deslocamentos realizados em uma partida
real de futebol. Entre cada tiro em alta velocidade o intervalo de tempo para recuperao ativa
de 80 segundos. Os atletas no tiveram conhecimento prvio do nmero ou distribuio dos
tiros, como tambm no foram informados sobre a ordem de execuo. A freqncia e ordem
de execuo de cada tiro foram feitas de forma randmica no teste, o tempo total foi de 50 min
(PlotPilot 2.02, TaffySoft, USA).
O grupo experimental foi submetido em seu primeiro dia (0h) a uma coleta de sangue,
mensurando os nveis basais de CK e logo em seguida os sujeitos realizaram o CCVV. Aps 8
min da realizao do exerccio os sujeitos imergiram os membros inferiores em uma caixa com
gua e gelo onde a temperatura se manteve em aproximadamente 8 C (termmetro
Inconterm - Brasil). O tempo total de imerso foi de 15 min. Os atletas foram submetidos
nova coleta de sangue 24, 52 e 76 h aps o CCVV. Com o grupo controle (CONT) foi
desenvolvido o mesmo programa do grupo experimental, porm sem a imerso aps os
exerccios, no mesmo perodo os atletas permaneceram no mesmo ambiente e fizeram um
repouso passivo. importante ressaltar que todos os atletas participaram de exerccios de
aquecimento geral e especfico antes de realizar o CCVV (Figura 1).

Figura 1 - Desenho experimental. Todos os atletas foram submetidos inicialmente a antropometria e a coleta de sangue (0h).
Imediatamente aps iniciaram o exerccio (Aquecimento + CCVV), repousaram por 8 minutos e foram submetidos imerso em
gua a 8C (CRIO) ou repouso passivo (CONT) durante 20 min. Aps 24h foram coletadas amostras de sangue para dosagem
de CK, novas coletas foram realizadas 52 e 76h.

Amostras sangneas
A amostra (aproximadamente 5 ml) foi imediatamente depositada e homogeneizada em um
tubo heparinizado seguido de centrifugao a 3000 rpm (1600 G) por 20 min. Para anlise da
atividade de CK foi utilizado mtodo enzimtico (CK-NAC UV otimizado - Biodiagnstica - Brasil)
em espectrofotmetro Specord M500 (Zeiss - Germany) a 37C.

Estatstica
O teste t de "Student" foi utilizado para avaliar a hiptese nula de que as mdias de cada
caracterstica do grupo controle eram iguais s do grupo experimental, versus a hiptese
alternativa de que as mdias eram diferentes. O nvel de significncia adotado foi de 5% (a =
0,05). Para os dados com medidas repetidas foi utilizado ANOVA e, caso necessrio, teste post
hoc de Tukey, ainda com nvel de significncia de 5%. O tratamento estatstico foi realizado em
SPSS 13.0 for Windows (LEAD Technologies, 2004).

Resultados
O perfil antropomtrico dos sujeitos foi avaliado com objetivo de verificar possveis
heterogeneidades entre os grupos estudados e distores que pudessem comprometer o
resultado do estudo. Os grupos no apresentaram diferenas em nenhuma das medidas
antropomtricas (MCT e %G) e a randomizaao dividiu os sujeitos em grupos de idades
estatisticamente iguais (p>0,05). Estes dados podem ser vistos na tabela 1.

Tabela 1 - Caractersticas antropomtrica dos sujeitos e concentrao basal de CK. Antes do experimento todos os sujeitos
foram avaliados antropometricamente e aps as randomizao as mdias foram comparadas para verificar se os grupos
permaneciam homogneos. Os valores representam as mdias e os respectivos valores, apresentamos tambm a variao da
populao. Nenhum dos parmetros analisados apresentou estatstica entre o grupos (p>0,05). (CONT) grupo controle; (CRIO)
grupo crioterapia; (CONT17-) ou (CRIO17-) idade abaixo de 17 anos; (CRIO16+) ou (CONT16+) idade entre 16 e 20 anos;
(MCT) massa corporal total; (%G) percentual de gordura.
As concentraes basais de CK (0h) tambm eram homogneas entre os grupos. Como
todos os sujeitos eram atletas em atividade, a concentrao de CK apresentava-se alta. O grupo
CRIO apresentava concentrao mdia de 398 79 U/L, o valor referncia para populao de
at 180 U/L. O grupo CONT apresentou valores de 389 49 (Tabela 1).
Analisando o grupo total de atletas, verificamos que CONT no apresentou diferena na
variao percentual da concentrao de CK entre os intervalos de coleta de amostras (p>0,05).
Porm CRIO apresentou concentraes 2 vezes maiores de CK aps 24h da realizao do
exerccio (p < 0,05). Nos outros momentos de coleta no houve diferena na concentrao de
CK em relao 0h (Figura 2).


Figura 2 - Variao normalizada da concentrao de CK (mdia erro padro). Os valores individuais de CK foram
normalizados de acordo com 0h e representados graficamente em relao ao tempo. A concentrao de CK no grupo CONT no
sofreu alteraes durante todo o procedimento (p>0,05). (*) diferente de 0h e diferente de CONT (p<0,05).
Como os atletas eram na sua maior parte adolescentes, subdividimos os grupos em dois. A
concentrao de CK variou no grupo CRIO17- (atletas com menos que 17 anos que foram
submetidos a crioterapia; n = 4) aumentando 2,4 vezes a concentrao de CK nas primeiras
24h, enquanto o grupo CONT17- (n = 7) manteve a concentrao de CK semelhante a basal
(Figura 3). Nas dosagens subseqentes ambos os grupos apresentaram concentraes mdias
de CK idnticas as de 0h (p>0,05).
A mesma cintica de aparecimento de CK ocorreu com CRIO16+ (n = 6). A concentrao de
CK aumentou 2,2 vezes 24h aps o CCVV (p<0,05). As concentraes das dosagens
subseqentes e as concentraes do grupo CONT16+ mantiveram-se em patamares idnticos a
0h (Figura 4).

Figura 3 - Variao normalizada da concentrao de CK nos atletas com menos que 17 anos (mdia erro padro). Os
sujeitos foram sub-divididos de acordo com a faixa etria. Os valores individuais de CK foram normalizados de acordo com 0h e
representados graficamente em relao ao tempo. (*) diferente de 0h e diferente de CONT (p<0,05).


Figura 4 - Variao normalizada da concentrao de CK para atletas com mais que 16 anos (mdia erro padro). Os valores
individuais de CK foram normalizados de acordo com 0h e representados graficamente em relao ao tempo nos atletas com 16
ou mais anos. A concentrao de CK no grupo CONT16+ no sofreu alteraes durante todo o procedimento (p>0,05). (*)
diferente de 0h e diferente de CONT (p<0,05).

Discusso
A partir dos dados obtidos nos grupos controle (CONT, CONT17- e CONT16+), verifica-se
que o CCVV no foi capaz de provocar micro rupturas suficientes a ponto de alterar a
concentrao relativa dos marcadores sricos de leses musculares. Levando em considerao
que os atletas estavam em treinamento e que suas concentraes de CK eram elevadas em 0h
(389 49 U/L), haveria necessidade de exerccios mais intensos do que aqueles realizados nos
treinamentos habituais para alterar o perfil de microleses (STUPKA et al., 2001).
Segundo Oksa et al. (2002), indivduos que realizam exerccios repetitivos e que so
expostos ao frio produzem maior atividade eletromiogrfica e fadiga que os indivduos que
realizam somente exerccio em condies de temperatura normal. A maior atividade
eletromiogrfica denota maior atividade muscular, desta forma desenvolvendo altos nveis de
tenso e conseqentemente microleses. Desta forma foi postulado que a baixa temperatura
causaria modificaes nas estruturas proticas que compunham a fibra muscular. Sugere-se
que aumento da tenso observado no grupo exposto baixa temperatura foi maior (SWEITZER
e MOSS, 1990).
A troponina C (TnC) reguladora da contrao muscular atravs da mudana
conformacional sofrida por esta protena ao ser ligada ao clcio (para reviso ver BERCHTOLD
et al., 2000). Fibras musculares isoladas de coelhos e ratos submetidos reduo de
temperatura (entre 10 e 22 C) apresentaram maior afinidade da TnC ao Clcio, fazendo com
que as contraes musculares apresentassem maior tenso. Esta afinidade aumentava em
proporo inversa a temperatura, sugerindo que a baixa temperatura atua como moduladora do
controle local da contrao muscular (SWEITZER e MOSS, 1990). A hiptese levantada por
Sweitzer e Moss (1990) corroborada pelos experimentos de Foguel et al. (1995).
Nesse estudo foi observado que aps alguns minutos de imerso, os sujeitos realizaram
contraes involuntrias. Conforme descrito anteriormente o frio induz a uma resposta contrtil
involuntria para aumentar o metabolismo local e aumentar a temperatura. Neste caso, as
contraes induzidas pela imerso aumentaram o estresse muscular local causando micro-
rupturas e aumentando a concentrao srica de CK nos sujeitos submetidos a crioterapia.
Dados apresentados na literatura mostram que o pico da concentrao de CK se d 48h aps
a realizao do exerccio. Neste estudo os picos apareceram aps 24h, Estes dados corroboram
os achados de Lee et al (2005) em que a crioterapia no contribui para prevenir o aparecimento
das leses, porm aumenta a velocidade de reparao tecidual.
Na literatura tcnica encontram-se diferentes maneiras de aplicao do frio para reparao
tecidual e diminuio de inflamaes (HARRELSON et al, 2000). A imerso realizada neste
experimento no foi benfica aos atletas, verificamos aumento na concentrao de CK,
indicando maiores leses nos sujeitos submetidos ao procedimento. Merrick et al (1999)
mostrou em modelo animal que a colocao de bolsas de gelo para resfriamento da regio
afetada conduziu a menor aparecimento de marcadores de leso tecidual.

Concluso
Os resultados dos grupos CRIO evidenciaram que a imerso em gua fria provocou aumento
na concentrao relativa de CK 24h aps o exerccio. Podemos inferir a partir destes dados que
a crioterapia, nas condies realizadas neste experimento, induz microleses de forma
semelhante ao exerccio intenso. Contudo, os sujeitos submetidos a crioterapia tiveram uma
reduo na meia vida da CK srica.

Agradecimentos
Agradecemos ao CENTROLAB (lvaro Dutra) pela ajuda na coleta das amostras; Mrcio
Monzato que nos disponibilizou os atletas; Altamiro Bottino e Adriana Bassini pela contribuio
nas informaes sobre o CCVV.