Sunteți pe pagina 1din 99

Familia Enterobacteriaceae

Caractere generale:

enterobacterium = bacterie intestinală

• habitat: tractul intestinal om/animale

Caractere generale: • enterobacterium = bacterie intestinală • habitat: tractul intestinal om/animale

Caractere morfo-tinctoriale:

• Bacili Gram-negativ

• Mobili/imobili

Unii au capsulă: Klebsiella

pneumoniae

Nu formează endospori

Caractere de cultură:

• Facultativ anaerobe

Tulbură uniform mediul de cultură lichid

Au necesităţi nutriţionale reduse → se dezvoltă şi pe geloză nutritivă

• Colonii tip S

• Uneori colonii mucoase: Klebsiella pneumoniae

Medii selective, majoritatea au lactoză:

• Drigalski, Levin, Leifson, Istrate-Meitert, MacConkey

Mediul Levine

Categoria: Mediu selectiv şi diferenţial

Componente: geloză simplă + eozină + lactoză + albastru de metilen

Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli)

geloză simplă + eozină + lactoză + albastru de metilen • Utilizare: cultivarea enterobacteriilor (E.coli)

ADCL (Leifson)

Categoria: Mediu selectiv şi diferenţial

Componente: geloză simplă + săruri biliare + lactoză + roşu neutru

Utilizare: cultivarea shigelelor şi salmonelelor

geloză simplă + săruri biliare + lactoză + roşu neutru • Utilizare: cultivarea shigelelor şi salmonelelor

Caractere biochimice:

~ Încadrarea în familie pe baza a trei teste biochimice:

Fermenteză glucoza cu producere de acid şi gaz • Testul oxidazei negativ

Reduc nitraţii la nitriţi

~ Pe baza testelor biochimice şi a caracterelor antigenice → genuri specii variante serologice

OXIDAZA

• Scop: evidentierea citocromoxidazei

• Substrat: benzi indicatoare (alfanaftol- clorhidrat de dimetilparafenilendiamina)

• Tehnica:

- se umecteaza banda indicatoare cu apa distilata - se descaraca o colonie bacteriana cu ajutorul ansei pe banda indicatoare

• Interpretare: test+coloratie albastra

Testul oxidazei

Testul oxidazei

REDUCEREA NITRATILOR LA NITRITI

• Substrat: apa peptonata + KNO 3

• Incubare: 24h la 37 C

• Substanta indicatoare: ac sulfanilic/acid acetic, alfanaftilamina/ac acetic

• Interpretare: test + viraj spre rosu al indicatorului (Enterobacteriaceae)

Coprocultura

Izolarea

- Medii de cultură pentru enterobacterii

- Medii selective şi de diferenţiere *Drigalski *Levin *Leifson *Istrate-Meitert *MacConkey

Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram-negativ

Caractere morfo-tinctoriale Bacili Gram-negativ

Proprietăţi de cultură

•Colonii S •Lactozo-negative

Proprietati biochimice

TSI

Proprietati biochimice TSI
Proprietati biochimice TSI

UTILIZAREA CITRATULUI SIMMONS

• Substrat: mediu minimal cu citrat de sodiu solidificat in eprubeta in pozitia inclinata

• Tehnica: inocularea bacteriei de testat pe panta agarului. Incubare 18h la 37 C

• Interpretare: test +dezvoltarea coloniilor bacteriene si viraj verdealbastru al culorii mediului

testul citrat – mediul Simmons

testul citrat – mediul Simmons

UTILIZAREA CITRATULUI SIMMON’S

UTILIZAREA CITRATULUI SIMMON’S

Structura antigenică

- Aglutinări pe lamă cu seruri anti-O

Structura antigenică - Aglutinări pe lamă cu seruri anti-O

Teste de patogenitate

Testul Sérèny

Teste de patogenitate Testul Sérèny

Caractere morfo-tinctoriale

Bacili Gram-negativ Mobili (preparat nativ)

Caractere morfo-tinctoriale Bacili Gram-negativ Mobili (preparat nativ)
Caractere morfo-tinctoriale Bacili Gram-negativ Mobili (preparat nativ)

Proprietăţi de cultură

Colonii S Geloză nutritivă

Proprietăţi de cultură Colonii S Geloză nutritivă

Proprietăţi de cultură

Mediul Drigalski Colonii lactozo-negative

Proprietăţi de cultură Mediul Drigalski Colonii lactozo-negative

Proprietăţi de cultură

- lactozo-negativ

- Agar EMB (Levin)

Proprietăţi de cultură - lactozo-negativ - Agar EMB (Levin)

Proprietăţi de cultură

- Agar McConkey

Proprietăţi de cultură - Agar McConkey

Proprietati de cultura

Geloza Hektoen

H

2 S

Proprietati de cultura Geloza Hektoen H 2 S
Proprietati de cultura Geloza Hektoen H 2 S
Proprietati de cultura Geloza Hektoen H 2 S

GENUL SALMONELLA

ADCLADCL--HH 22 SS

GENUL SALMONELLA ADCLADCL--HH 2 2 SS AGARAGAR CROMOGENICCROMOGENIC

AGARAGAR

CROMOGENICCROMOGENIC

GENUL SALMONELLA ADCLADCL--HH 2 2 SS AGARAGAR CROMOGENICCROMOGENIC

Genul Salmonella

peste 2200 serotipuri

Infecţii (salmoneloze):

~ Febra tifoidă S.typhi

~ Febra paratifoidă S.paratyphi A, B

~ Toxiinfecţii alimentare şi enterite (copii)

S.typhymurium S.enteritidis S.paratyphi B S.panama

~ Stări septico-piemice

S.paratyphi C S.choleraesuis

Clasificarea serotipurilor de Salmonella

1. Adaptate la om

S.schottmuelleri

S.typi

S.paratypi A,B

S.hirschfeldii

S.paratypi C

2. Adaptate la gazde altele decât omul

• exc. tulpini → boli om

S.dublin

S.choleraesuis

3. Fără adaptate la o gazdă specifică

S.enteritidis

>2000 serotipuri → gastroenterite

Caractere generale:

~ bacili Gram-negativ

~ mobili (flageli peritrichi)

~ lactozo-negativi

~ identificarea antigenelor O, H, Vi reacţii de aglutinare

Recoltarea produselor patologice:

1)

Febre tifo- paratifoide:

– S1

hemocultură

S2 urocultură, coprocultură

2) Gastroenterite

coprocultură

– lichid de vărsătură

– alimente

Teste biochimice

H2S

Teste biochimice H2S
Teste biochimice H2S

Teste biochimice

Creste pe mediul Simmons, cu citrat

Teste biochimice Creste pe mediul Simmons, cu citrat

Proprietăţi antigenice

- Schema de identificare antigenică Kauffmann-White Ag “O” caracteristică de GRUP Ag “H” - caracteristică de TIP (variaţie de fază) Ag Vi <=> Ag K – de suprafaţă Serotip = enumerarea completă a Ag O, Vi şi H 1,2

Reacţia Widal

- r. aglutinare în tuburi

- Febre tifo-paratifoide

- Creşterea titrului de anticorpilor aglutinanţi anti-O şi anti-H

Enterobacterii oportuniste

Escherichia

Klebsiella – Enterobacter – Hafnia – Serratia

Proteus – Providencia – Morganella

Arizona – Edwarsiella – Citrobacter

Enterobacterii oportuniste

Escherichia coli

~ 80% flora normală a colonului

~ bacili Gram-negativi

~ lactozo-pozitivi

~ luciu metalic – mediul Levin

Escherichia coli

~ Tipuri de îmbolnăviri:

~ boli diareice

~ infecţii urinare

~ infecţii ale plăgilor

~ septicemii

Escherichia coli

Tulpini care produc boli diareice:

~ ETEC (E.coli enterotoxigen)

~ EIEC (E.coli enteroinvaziv)

~ EPEC (E.coli enteropatogen)

~ EHEC (E.coli enterohemoragic)

~ VTEC (E.coli produce toxină Shiga-like) O157:H7

GENUL ESCHERICHIA

E. coli – non

E.

coli – non

pathogen

E. coli - EPEC

E.

coli - EPEC

- EHEC

- EIEC

- ETEC

pathogenpathogen

GENUL ESCHERICHIA E. coli – non pathogen E. coli - EPEC - EHEC - EIEC -

GENUL ESCHERICHIA

E.E. colicoli CulturaCultura purapura

GENUL ESCHERICHIA E.E. colicoli CulturaCultura purapura

E.E. colicoli --ADCLADCL

E.E. colicoli --ADCLADCL

LEVINELEVINE

E.E. colicoli

DRIGALSCHIDRIGALSCHI

LEVINELEVINE E.E. colicoli DRIGALSCHIDRIGALSCHI

Fermentarea lactozei pe geloză lactozată

Fermentarea lactozei pe geloză lactozată

E.E. colicoli

MEDIUMEDIU CROMOGENCROMOGEN COLONIICOLONII ROZROZ

E.E. colicoli MEDIUMEDIU CROMOGENCROMOGEN COLONIICOLONII ROZROZ

Escherichia coli Identificare biochimică

IMViC

~ Testul indol

~ Testul roşu metil

~ Reacţia Voges-Proskauer

~ Testul citrat

OXIDATIE-FERMENTATIE

OXIDATIE-FERMENTATIE MEDIUMEDIU NEDAGRADATNEDAGRADAT DEGRADAREDEGRADARE MIXTAMIXTA

MEDIUMEDIU NEDAGRADATNEDAGRADAT

DEGRADAREDEGRADARE MIXTAMIXTA

OXIDATIE-FERMENTATIE MEDIUMEDIU NEDAGRADATNEDAGRADAT DEGRADAREDEGRADARE MIXTAMIXTA

TESTE REZULTATE DIN TIPURILE DE FERMENTATIE

• TESTUL ROSU-METIL

• TESTUL VOGES-PROSKAUER

TESTUL ROSU-METIL

• Scop: fermentarea substratului si scaderea pH-ului sub 5

• Tehnica:

– tulpina bacteriana testata se insamanteaza in apa peptonata glucozata.

– Incubare 18h la 37 C.

– Developare cu solutie rosu fenol

• Interpretare:

– Test + culoare rosie (pH<5): E. coli

– Test - culoare galbena (pH>5): Klebsiella

TESTUL VOGES-PROSKAUER

• Scop: evidentierea fermentatiei acetoinice

• Tehnica:

– tulpina bacteriana se insamanteaza in apa peptonata glucozata.

– incubare 18h la 37 C.

– Se alcalinizeaza.

– Developare cu alfanaftol.

• Interpretare:

– test +inel rosu-violaceu la interfata de contact: Klebsiella

– Test - : E.coli

TESTUL VOGES-PROSKAUER

TESTUL VOGES-PROSKAUER

TESTUL INDOL

• Scop: evidentiaza prezenta triptofanazei

• Tehnica:

– cultura bacteriana de 24h in apa peptonata

– benzi indicatoare cu reactiv indol.

• Interpretare:

– test +culoare rosu-violaceu (E.coli)

TESTUL INDOL

TESTUL INDOL

Grupul Klebsiella – Enterobacter – Hafnia – Serratia

Klebsiella pneumoniaeGrupul Klebsiella – Enterobacter – Hafnia – Serratia Klebsiella rhinoscleromatis Enterobacter cloacae Enterobacter

Klebsiella rhinoscleromatisEnterobacter – Hafnia – Serratia Klebsiella pneumoniae Enterobacter cloacae Enterobacter aerogenes Hafnia alvei

Enterobacter cloacae– Serratia Klebsiella pneumoniae Klebsiella rhinoscleromatis Enterobacter aerogenes Hafnia alvei Serratia marcescens

Enterobacter aerogenes– Serratia Klebsiella pneumoniae Klebsiella rhinoscleromatis Enterobacter cloacae Hafnia alvei Serratia marcescens

Hafnia alveiSerratia Klebsiella pneumoniae Klebsiella rhinoscleromatis Enterobacter cloacae Enterobacter aerogenes Serratia marcescens

Serratia marcescens– Serratia Klebsiella pneumoniae Klebsiella rhinoscleromatis Enterobacter cloacae Enterobacter aerogenes Hafnia alvei

Grupul KEHS Tipuri de îmbolnăviri:

~ Dobândite în spital

~ Infecţii cu localizări <=> E.coli

~ Cauze imp. de bacteriemii

~ Klebsiella pneumoniae inf. pulmonară

~ Majoritatea → tulpini cu rezistenţă multiplă la antibiotice

Klebsiella pneumoniae

~ cantităţi moderate în intestinul omului /animalelor

~ infecţii respiratorii, urinare, otite

~ bacili Gram-negativi

~ capsulă polizaharidică

~ colonii mari mucoase , fenomen de cameleonaj

KLEBSIELLAKLEBSIELLA

KLEBSIELLAKLEBSIELLA
KLEBSIELLAKLEBSIELLA

Frotiu coloratia tuş de China

Frotiu coloratia tu ş de China

Klebsiella pneumoniae

Klebsiella pneumoniae
Klebsiella pneumoniae

KLEBSIELLAKLEBSIELLA

ColoniiColonii mucoasemucoase

KLEBSIELLAKLEBSIELLA ColoniiColonii mucoasemucoase
KLEBSIELLAKLEBSIELLA ColoniiColonii mucoasemucoase

KLEBSIELLA

ProprietatiProprietati biochimicebiochimice

KLEBSIELLA ProprietatiProprietati biochimicebiochimice

Proteus vulgaris, P.mirabilis

~ saprofiţi (materie organică în descompunere)

~ flora intestinală normală

~ infecţii urinare, alte tipuri de infecţii

~ bacili Gram-negativi, mobili

~ lactozo-negativi

~ invadează suprafaţa mediilor gelozate

GENUL PROTEUS

ProteusProteus

vulgarisvulgaris

FlageliFlageli

GENUL PROTEUS ProteusProteus vulgarisvulgaris FlageliFlageli

GENULGENUL PROTEUSPROTEUS -- migrare

GENULGENUL PROTEUSPROTEUS -- migrare
GENULGENUL PROTEUSPROTEUS -- migrare

PROTEUS

PROTEUS
PROTEUS

Proteus spp.

Proteus spp.

PRODUCEREA DE H2S

PRODUCEREA DE H2S

TESTUL UREAZEI

• Scop : evidentierea ureazei, enzima ce scindeaza ureea cu formare de amoniac

• Substrat: mediu de cultura ce contine uree si indicator colorimetric (de Ph).

• Tehnica:

– tulpina bacteriana testata se inoculeaza in mediu.

– Se incubeaza 18h la 37 C.

• Interpretare:

– test+viraj corespunzator al zonei bazice: Proteus

Proteus spp.

Ureaza +
Ureaza +
Proteus spp. Ureaza + H 2 S

H 2 S

TESTUL FENILALANINDEZAMINAZEI

• Scop: evidentierea prezentei FAD

• Substrat: agar inclinat ce contine fenil-alanina

• Tehnica:

– tulpina bacteriana se insamanteaza pe panta agarului. – Developarea reactiei cu FeCl3

• Interpretare: test+aparitia culorii verzi (Proteus)

TESTUL FENILALANINDEZAMINAZEI

TESTUL FENILALANINDEZAMINAZEI

Yersinia pestis

~ ciuma (pesta)

~ bacili Gram-negativ

~ capsulă proteică

Yersinia

enterocolitica

~ Sdr. Diareic febril

Yersinia

pseudotuberculosis

~ Inf. la păsări, rozătore, rar om

~ Lez. tipică: noduli asemănători celor tbc în intestin, org. parenchimatoese

Bacili Gram negativi aerobi glucozo- nefermentativi

Pseudomonade

- bacili Gram negativi

- strict aerobe, metabolism oxidativ

- catalazo-pozitivi si oxidazo-pozitivi

Bacili Gram negativi aerobi glucozo-nefermentativi

Pseudomonade

specii fluorescente, care produc pigmenti difuzibili fluorescenti:Gram negativi aerobi glucozo-nefermentativi Pseudomonade aeruginosa (bacilul piocianic) P. putida, P. fluorescens; P.

aeruginosa (bacilul piocianic)fluorescente, care produc pigmenti difuzibili fluorescenti: P. putida, P. fluorescens; P. specii non-fluorescente:

P.

putida,difuzibili fluorescenti: aeruginosa (bacilul piocianic) P. P. fluorescens; P. specii non-fluorescente: alcaligenes, P.

P. fluorescens;fluorescenti: aeruginosa (bacilul piocianic) P. putida, P. specii non-fluorescente: alcaligenes, P.

P.

specii non-fluorescente:fluorescenti: aeruginosa (bacilul piocianic) P. putida, P. fluorescens; P. alcaligenes, P. pseudoalcaligenes. P.

alcaligenes,aeruginosa (bacilul piocianic) P. putida, P. fluorescens; P. specii non-fluorescente: P. pseudoalcaligenes. P.

P.

pseudoalcaligenes.fluorescenti: aeruginosa (bacilul piocianic) P. putida, P. fluorescens; P. specii non-fluorescente: alcaligenes, P. P.

P.

Pseudomonas aeruginosa (b. piocianic)

• patogen nosocomial (10% din totalul infectiilor nosocomiale)

Bacterie oportunistă

Habitat:

sol, apă Poate coloniza tubul digestiv şi pielea persoanelor sănătoase

Pseudomonas aeruginosa (b. piocianic)

• ITU

• infectii de tract respirator

• infectii ale plagilor, suprainfectii ale arsurilor

• bacteriemie, septicemie, infectii sistemice, mai ales la pacientii imunocompromisi

• otite externe la inotatori ;

• infectii oculare dupa interventii chirurgicale

Pseudomonas aeruginosa (b. piocianic)

Proprietati microscopice:

• bacili Gram negativi

• mobili

Pseudomonas aeruginosa (b. piocianic)

Proprietati de cultura:

• pigment difuzibil fluorescent de mai multe tipuri:

* piocianina, albastra, cu proprietati antibacteriene fata de alte specii bacteriene

* pioverdina, galben-verde culoarea verde, stralucitoare

* piorubina, rosie, ocazional *piomelanina, bruna, ocazional

• cultura degaja o aroma caracteristica, aromata, asemanatoare cu florile de tei, iasomie, mere verzi

• strict aeroba

Pseudomonas spp.

Bacil Gram-negativ, mobil

Nefermentativ

spp. ► Bacil Gram-negativ, mobil ► Nefermentativ ► Se dezv oltă pe medii simple, geloză nutritivă

Se dezvoltă pe medii simple, geloză nutritivă → producere de pigment difuzibil

mobil ► Nefermentativ ► Se dezv oltă pe medii simple, geloză nutritivă → producere de pigment
mobil ► Nefermentativ ► Se dezv oltă pe medii simple, geloză nutritivă → producere de pigment

Pseudomonas aeruginosa (b. piocianic)

Antibiograma – obligatorie

• foarte rezistenta la antibiotice;

• are rezistente naturale multiple, datorate structurii peretelui celular.

• Carbapenemi

• Penemi

• Unele Cefalosporine gen. III; gen. IV

• Quinolone

• Aminoglicozide

• Polimixine.

• In caz de monoterapie dezvolta rapid rezistenta.

Genul Vibrio

Genul Vibrio bacterii Gram-negative foarte mobile (cil polar) formă de bastonaş încurbat facultativ anaerob

bacterii Gram-negativeGenul Vibrio foarte mobile (cil polar) formă de bastonaş încurbat facultativ anaerob majoritatea speciilor saprofite,

foarte mobile (cil polar)Genul Vibrio bacterii Gram-negative formă de bastonaş încurbat facultativ anaerob majoritatea speciilor saprofite,

formă de bastonaş încurbatVibrio bacterii Gram-negative foarte mobile (cil polar) facultativ anaerob majoritatea speciilor saprofite, unele

facultativ anaerobfoarte mobile (cil polar) formă de bastonaş încurbat majoritatea speciilor saprofite, unele produc îmbolnăviri

majoritatea speciilor saprofite, unele produc îmbolnăviri uşoare îmbolnăviri uşoare

Specia tip: Vibrio cholerae

două biotipuri holerigene: holerigene:

cholerae clasic El Tor

V. cholerae O139 "Bengal" (1992, Bangladesh derivate din biotipul El Tor

mai multe biotipuri neholerigene (sindroame diareice benigne)► cholerae clasic ► El Tor V. cholerae O139 "Bengal" (1992, Bangladesh → derivate din biotipul

Habitat: apa de mare, apa de suprafaţă

Contaminare:

apă, alimente contaminate

fecal-orală

Infecţie:

Holera = infecţie acută, intestinală

diaree

deshidratare masivă

stare generală alterată

evoluţie severă

Structuta antigenică

variaţia antigenică rol în epidemiologia holerie şi virulenţa vibrionilor holerici

Ag H (flagelar) → specificitate largă specificitate largă

Ag O (somatic) → strict specific strict specific

Şase serogrupuri O1 → O6 serogrupuri O1 O6

Vibrionii holerigeni = serogrup O1 conţin trei factori antigenici: A, B, C trei factori antigenici: A, B, C

3 serotipuri:

Ogawa (AB)

Inaba (AC)

Hikojima (ABC)

Fiecare serotip poata exprima fenotip „clasic” sau El Tor

V. cholerae O139 "Bengal" este singurul serotip non-O1

Recoltarea produselor patologice

Materii fecale mediu de transport Cary-Blair

Lichid de vărsătură

Apă potabilă, alimente

Izolare

apă peptonată alcalină (mediu de îmbogăţire)

mediu cu săruri biliare (BSA)

a) Caractere morfo-tinctoriale:

bacili Gram-negativi încurbaţi

a) Caractere morfo-tinctoriale: bacili Gram-negativi încurbaţi

b) Caractere de cultură:

Mediul BSA:

Colonii tip S, transparente

b) Caractere de cultură: ► Mediul BSA: Colonii tip S, transparente

c) Caractere antigenice:

vibrionii holerigeni aglutinează cu ser

anti-O1

vibrionii neholerigeni nu aglutinează cu ser anti-O1 (neaglutinabili – NAG)

d) Caractere de patogenitate:

testul ansei ligaturate

Tratament

reechilibrare hidro-elecrolitică elecrolitică

antibiotice: ex. TetraciclinăTratament reechilibrare hidro- elecrolitică

Genul Helicobacter

• bacili Gram negativi, incurbati pana la spiralati

• mobili prin unul/mai multi flageli

• microaerofili

• speciile gastrice se caracterizeaza prin producerea de ureaza in cantitati mari.

Helicobacter pylori

Recoltarea produselor patologice: biopsie din mucoasa gastrica (endoscopie); prelevarea de probe multiple=>4 fragmente din antru, regiunea fundica.

• Important: cel putin o luna fara tratament inainte de recoltarea probei. un fragment plasat direct in mediu cu uree si indicator de pH (rosu fenol)+ureaza preformata a HP =>virarea indicatorului de pH in galben; examen histopatologic

Helicobacter pylori

Recoltarea produselor patologice: biopsie din mucoasa gastrica (endoscopie); prelevarea de probe multiple=>4 fragmente din antru, regiunea fundica. frotiu: bacili Gram negativi, incurbati; IF pentru diagnostic diferential cu Campylobacter cultura: colonii mici, transparente, apar in 3-7 zile; permite testarea sensibilitatii la antibiotice.

Helicobacter pylori

Metode neinvazive:

• testul respirator cu uree marcata :

– ingerare uree marcata cu C13 (neradioactiv) sau C14 (radioactiv) => intensa activitate a ureazei, daca exista HP in stomac => eliberare de CO2 marcat, absorbit in circulatia sanguina si eliminat prin respiratie => detectat si cuantificat in aerul expirat (spectroscopie de masa); – dezavantaj: este foarte costisitor.

Helicobacter pylori

• detectarea anticorpilor specifici, in special de tip IgG;

• ELISA;

• cost relativ scazut,

• indicat preferential in studii epidemiologice.

Helicobacter pylori - Tratament

• Macrolide (Claritromicina),

• Amoxicilina,

• Metronidazol,

• Quinolone.