A efectuat: Calugareanu

Valentin gr.2202
Profesor: Elena Zariciuc


Apa este un factor indispensabil existentei si
continuitatii vietii pe planeta noastra.In conditii
naturale, apa nu exista niciodata in stare pura, in
apa gasindu-se intotdeauna o anumita cantitate de
substante dizolvate sau aflate in suspensie.
Compozitia naturala a apei, avand in
vedere diversitatea si continutul acestor
substante in apa, evidentiaza prezenta
urmatoarelor grupe de elemente
componente : gaze dizolvate ( O2, CO2,
H2, H2S), substante minerale si organice
dizolvate, coloidale sau aflate in suspensie
cat si saprofita propriei apei.Apa pura se
obtine din apa naturala prin distilare
repetata in conditii in care sa nu poata
dizolva gaze din aer sau substante solide
din recipientele in care este conservata

Conditii de potabilitate a apei

Pentru a fi potabila apa trebuie sa indeplineasca anumite conditii:

Organoleptice (gust, miros)
Fizice (temperatura, turbiditate, culoare, pH,
radioactivitate, conductibilitate electrica)
Chimice (substante organice, anorganice,
subst.ce dau duritatea apei saruri de Ca si Mg)
Bacteriologice


Conditii bacteriologice
Flora proprie = germeni psihrofili (criofili)
germeni care se dezv.la 22C (saprofiti)

Flora mezofila germeni care se dezv. la
37C (germeni de provenienta umana si
animala)
Indicatori bacteriologici de contaminare a
apei
1) Nr. total de germ. la 37C / 1 ml apa
2) Nr. probabil de germeni colli
3) Nr. probabil de Streptococi intestinali
(enterococi de grup D) saprofiti ai omului
4) Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia
colli, anti-Salmonella thyphi)
5) Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii)
6) Det. germ. care se dezv. La 22C
Analizele curente si obligatorii: 1), 2) si 3)
Metode de recoltare
Apa se recolteaza in recipiente de sticla
sterilizate la 180C
Daca se recolteaza apa de robinet se
sterilizeaza flaconul cu tiosulfat care neutraliz.
Cl din apa
Transp.flacoanelor: in conditii izoterme la +4C
Analiza microbiologica se face la max.6-8 ore
din momentul recoltarii probelor.
Determinarea NTG la 37C
din proba de apa se fac dilutii zecimale;
din fiecare dilutie se insamanteaza cate 1 ml
pe o placa Petri peste care turnam geloza
simpla; se fac miscari de rotatie in plan
orizontal pt.ca geloza sa inglobeze apa
insamantata.
se incubeaza la 37C, 48 ore
NTG 37C / ml = n x d , n= nr.colonii
N d= inversul dilutiei
N= nr.placi

Determinarea bacteriilor coliforme
Sursa cea mai important de poluare
bacterian a apei o constituie reziduurile,
excrementele umane i animale, care pot
conine germeni patogeni.
Metoda pentru determinarea bacteriilor
coliforme include teste prezumtive, de
confirmare, bazate in primul rnd pe
capacitatea bacteriilor de a fermenta lactoza
cu producere de acid lactic, CO
2
, H
2
, n timp
de 48 ore la 35C.

Nr. probabil de germeni colli
2 teste : a) de prezumtie
b) de confirmare
a) intr-o eprubeta cu un mediu lichid cu lauryl
sulfat + lactoza in care se aseaza un tub de
fermentatie Durham cu gura in jos (rol:
capteaza gazul care se form.prin fermentarea
lactozei)
Se incub. la 37C, 48 ore (test de imbogatire)

Reactie (+) virarea culorii in galben

Nr. probabil de germeni colli

b) Confirmarea prezentei germ.colli: insamantare
cu ansa din tubul Durham (+) la testul anterior
pe un mediu solid Levine specific pt.colli
Se incub. la 37C, 24 ore
Confirmare colonii de germ.colli in picaturi
de fuxina (rosii-violet in centru, cu irizatii spre
periferie)
! Caracteristic pt.germ.colli: aparitia unui reflex
verde-metalic la supraf.mediului

Nr. probabil de enterococi (Streptococi
fecali)
Germ.saprofiti ai intestinului
Se gasesc in nr. mult mai mic decat colli
(10%, restul colliformi)
Rezista mai mult in apa decat colli riscul
transmiterii enterovirusurilor
Evidentiati prin 2 teste:
a) de prezumtie: se insamanteaza apa pe
bulion cu azida de sodiu; se incub. la 37C,
48 ore
Reactie (+) aparitia unui sediment alb care la
agitare nu se descompune
Nr. probabil de enterococi (Streptococi
fecali)
b) Testul de confirmare: strapungem cu ansa
sedimentul format, insamantare pe acelasi
mediu de cultura + indicator de culoare =
brom-crezol (violet); se incub. la 44,5C, 24
ore
Confirmare virarea culorii de la violet la
galben si aparitia de sediment
Analize complementare
- in epidemii hidrice sau cand se alege o noua sursa de apa
Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia
colli, anti-Salmonella thyphi)

Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii)

Det. germ. care se dezv. la 22C


Determinarea bacteriofagilor enterici
Rezista in apa mai mult decat bacteriile
Se pot evidentia chiar daca germ.respectiv a
disparut
Proba de apa se insamanteaza cu ansa dintr-
o cultura de Esherichia colli, apoi pe geloza
simpla, se incub. la 37C, 24 ore
Daca in proba de apa exista bacteriofagi
zone de liza a coloniilor (liza clara completa,
liza incompleta, liza in plaja) apa nepotabila !
Determinarea germ.sulfitoreducatori
(Clostridii)
Anaerobi sporulati cu dubla provenienta: naturala de
pe sol si intestinala.
Prezenta lor in apa contaminare f.veche
Se foloseste un mediu solid cu sulfit de Na si FeCl2
care se toarna in eprubete; se insamanteaza cate 1
ml apa, se incub.la 37C
Reactie (+) aparitia de colonii negre (se formeaza
FeS)
Confirmare: insamantare cu ansa din coloniile negre pe
un mediu cu lapte; se incub.la 37C in conditii de
anaerobioza formarea unui cheag = prezenta
Cl.perfringens in apa

Determinarea germ.la 22C
Se gasesc in mod natural in apa,
determinarea florei saprofite arata gradul de
poluare: cand apa are germ.supraadaugati
flora saprofita e inhibata.
Normal flora supraadaugata: endogena = 3:1
Se insamant.pe geloza simpla, incub.la 22C

NTG 22C / ml = n x d
N
Determinarea numrului total de germeni

Numrul total de germeni reprezint
numrul de colonii care se dezvolta in urma
insamantarii de 1cm
3
de apa in mediu de
cultura, dup 48 ore de termostatare la 37C.
n cazul in care se consider c apa
reprezint un grad ridicat de contaminare
mai mare se fac nsmnri din diluii
(schema I) coloniilor se face din plcile cu
30-300 colonii.