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AGROINDUSTRIAL
CURSO : MICROBIOLOGÍA
TEMA : MICROCOCCUS
CICLO : VI
FECHA : 02-11-2009
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INDICE.
INTRODUCCION………………………………………………... Pag.2
- PRUEBAS BIOQUÍMICAS
- PRUEBA DE LA COAGULASA
- PRUEBA DE UTILIZACION DE GLUCOSA
- EN MEDIO HUGH-LEIFSON (OF)……………………………. Pag.9
- CARACTERÍSTICAS BIOQUÍMICAS:
- Son catalasa positiva…………………………………………….. Pag.10
- Son no fermentadores de glucosa.
- USOS INDUSTRIALES
- HIPÓTESIS
- IDENTIFICACION DE MICROCOCCUS
EN QUESO ARTESANAL………………………………….. Pag.12
- PROCEDIMIENTO
- Preparación de la muestra
- Cultivo de la Muestra………………………………………. Pag.13
- RESULTADOS
- CONCLUSIONES
- BIBLIOGRAFIA…………………………………………… Pag.14
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INTRODUCCION
Los Micrococcus son células bacterianas esféricas de diámetro comprendido entre 0,5 y 3
micrómetros que típicamente aparecen dispuestas en tétradas. Son Gram positivas,
aerobias estrictas.
La importancia del estudio de los micrococos en alimentos nos permite conocer que
algunas desdoblan las proteínas con producción de ácidos. Por esta capacidad proteolítica
actúan contaminantes de alimentos cárnicos, otras especies toleran concentraciones
elevadas de sal, también son capaces de crecer en salmueras, Otras producen
pigmentaciones y coloraciones anormales en la superficie de los alimentos, afectando su
calidad, por ejemplo M. luteus produce un pigmento amarillo, mientras que M. roseus
produce un pigmento rosado.
Los micrococcos son débilmente fermentadores, forman parte de la flora inocua que
contamina la leche cruda, tiene poca actividad enzimático por lo tanto son de muy poca
importancia como agentes adulteradores en leche. Sin embargo por ser la flora más
abundante en leche cruda y tener cierta capacidad proteo lítica pueden llegar a ser
constantes de alteraciones en leche pasteurizadas mal almacenada.
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1.- ESTUDIO DE BACTERIAS DEL GENERO MICROCOCCUS
2.- PROBLEMA:
3.- OBJETIVOS:
Los Micrococcus son células bacterianas esféricas de diámetro comprendido entre 0,5 y 3
micrómetros que típicamente aparecen dispuestas en tétradas. Son Gram positivas,
aerobias estrictas. Taxonómicamente pertenecen a:
Dominio: Bacteria
Filo: Actinobacteria
Clase: Actinobacteria
Subclase: Actinobacteridae
Orden: Actinomycetales
Suborden: Micrococcineae
Familia: Micrococcaceae
Género: Micrococcus
Micrococcus tiene una gruesa pared celular que puede abarcar el 50% del material
celular. Su genoma es rico en guanina y citosina (65 al 75%). A menudo contienen
plásmidos que proporcionan al organismo características útiles.
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que puede producir infecciones pulmonares y en raras ocasiones bacteriemia recurrente,
Shock séptico, endocartidis o neumonía.
• Algunas especies desdoblan las proteínas con producción de ácidos. Por esta
capacidad proteolítica actúan como contaminantes de alimentos cárnicos.
• Otras especies toleran concentraciones elevadas de sal, son capaces de crecer en
las salmueras.
• La mayoría son mesófilos. Algunas especies son termodúricas, resisten al
tratamiento comercial que se aplica a la leche (M. varians). Algunos micrococos
son psicrofilas y son capaces de crecer a temperaturas próximas o inferiores a los
10°C.
• Otras producen pigmentaciones y coloraciones anormales en la superficie de los
alimentos, afectando su calidad, por ejemplo M. luteus produce un pigmento
amarillo, mientras que M. roseus produce un pigmento rosado.
A.-COLORACIÓN GRAM:
B.1.- Medio de cultivo AGAR SANGRE: Crece bien en agar sangre, tras 48h de
incubación en aerobiosis, forma colonias que miden aproximadamente 1 ó 2 mm de
diámetro y tienen un aspecto mate.
No produce hemólisis (hemólisis gamma γ)
AGAR SANGRE
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Es un medio enriquecido, constituido por una combinación de un medio base (agar
nutritivo) mas el agregado de 5 % de sangre ovina, también puede usarse sangre humana.
El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento.
Suspender 40 g del polvo del medio base en un litro de agua destilada. Mezclar muy bien
hasta obtener una suspensión homogénea. Calentar en baño María con agitación frecuente
hasta disolver muy bien el polvo. Esterilizar 20 minutos a 121°C.
FUNDAMENTO
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B.2.- Medio de cultivo AGAR MANITOL SALADO: Los Micrococcus crecen bien en
este medio.
Forman colonias rojas, relativamente grandes, elevadas, cupuliformes y opacas, de
consistencia cremosa, a las 18-24 horas de incubación a 35-37 °C, en aerobiosis.
No fermentan el manitol.
Suspender 111 g de polvo por litro de agua destilada. Mezclar muy bien hasta obtener
una suspensión homogénea. Calentar en baño María con agitación frecuente hasta
disolver muy bien el polvo. Esterilizar 15 minutos a 121°C. Distribuir en placas.
Características del medio: Medio preparado: color rojo
FUNDAMENTO
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C.- PRUEBAS BIOQUÍMICAS:
1. Con un asa de siembra de punta recta transferir una pequeña cantidad del centro
de una colonia bien aislada a la superficie de una lamina portaobjeto.
2. Añadir 1 a 2 gotas de peroxido de hidrogeno al 3%.
3. Realizar la lectura.
Se puede usar como control positivo una cepa de Staphylococcus aureus y como
control negativo a Streptococcus sp.
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Las especies del Genero Micrococcus son coagulasa negativa.
Interpretación:
POSITIVA NEGATIVA
FUNDAMENTO
Los ácidos formados por degradación oxidativa de la glucosa son sumamente débiles y
para su detección se requiere un medio de oxido fermentación mas sensible, como el de
Hugh y Leifson (medio OF).
Interpretación:
La producción de acido por metabolismo oxidativo se detecta en el medio por la
aparición de color amarillo. En el caso de organismos oxidativos la producción de color
se puede notar primero cerca de la superficie del medio, en caso de los organismos
fermentativos la acidez se produce en el fondo del tubo. El siguiente cuadro indica las
reacciones:
En tubo abierto Tubo cubierto Tipo de metabolismo
Acida Alcalina oxidativo
(Amarillo) (Verde)
Acida Acida fermentativo
(Amarillo) (Amarillo)
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Prueba de la Catalasa en lámina portaobjeto.
1.- Con un asa de siembra de punta recta transferir una pequeña cantidad del centro de
una colonia bien aislada a la superficie de una lamina portaobjeto.
2.- Añadir 1 a 2 gotas de peróxido de hidrogeno al 3%.
3.- Realizar la lectura.
Se puede usar como control positivo una cepa de Staphylococcus aureus y como control
negativo a Streptococccus ssp.
Los micrococos son bacterias gram positivas que necesitan oxígeno para vivir. Son
células esféricas que a menudo se encuentran solas o por pares. Se dividen típicamente en
más de un plano, produciendo tétradas, paquetes cúbicos irregulares de cuatro células. No
forman esporas y muchas de ellas no son móviles.
El género Micrococcuss tiene varias especies, algunas de ellas con movimiento M.luteus
se caracteriza por la producción de un pigmento amarrillo y M. Roseus por la de uno
rojizo. La pared celular de M. Luteusse caracteriza por contener unidades peptídicas de L-
lisina. Las bacterias pertenecientes a este género tienen sistemas multienzimáticos de
transporte de electrones ligados a la membrana celular, estos sistemas contienen
citocromos a, b y c y pigmentos carotenoides amarrillos y rojizos. La temperatura óptima
para muchas especies de Micrococcus es de unos 30º C.
5.- HIPÓTESIS:
6.1.- MATERIALES
Cuchillo
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6.2.- PROCEDIMIENTO:
Preparación de la muestra:
- En esterilidad se pesa 3gr. de la muestra (queso).
- Se coloca en un mortero estéril y luego se agrega Solución salina
estéril y se va desmenuzando hasta disgregar completamente el queso.
- Luego, homogenizamos la muestra, agitamos hasta que se observe un
líquido lechoso, el cual se pasa a un tubo de prueba estéril.
Cultivo de la Muestra:
- A partir de la muestra contenida en el tubo (liquido lechoso) coger un
inoculo (asada) con el asa de siembra estéril y sembrar por estrias en una placa que
contiene el medio de cultivo Agar Manitol salado. Incubar a 35-37 ºC por 24h.
- Pasado el tiempo de incubación, realizamos la lectura de la placa. Se buscan colonias
características: colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color rojo o púrpura,
no fermentan el manitol.
- De las colonias sospechosas (presuntamente Micrococcus), se escoge una colonia y a
partir de esta se siembra en 3 tubos que contienen Agar Manitol que debe estar a una
temperatura de 50 ºC (por técnica de punción haciendo llegar el alambre de siembra
hasta el fondo del tubo introduciendo en forma de espiral), luego inmediatamente se
enfría colocando en un recipiente con hielo hasta que el medio se solidifique y se
incuba a 35 ºC por 24 h.
- El Agar Manitol presenta un color lila a morado, antes de la siembra. Tiene como
indicador de pH a purpura de bromocresol.
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7.- RESULTADOS:
-En Agar Manitol salado: crecen colonias rojas rodeadas de una zona del mismo color
rojo o púrpura, no fermentan el manitol.
-En Agar Manitol: se obtiene el siguiente resultado:
En los tres tubos se observaron: color amarillo en la superficie y morado en el fondo
(se produce oxidación en la superficie del medio) lo que indica que la bacteria
posiblemente sea Micrococcus.
- Se obtuvo el siguiente resultado en las pruebas de diferenciación bioquímica:
- Prueba de la Catalasa : positiva
- Prueba de la oxidasa : positiva
- Prueba de Resistencia a la Furazolidona: positiva
- Prueba de Resistencia a la Bacitracina: negativa
8.- CONCLUSIONES:
La bacteria aislada a partir de la muestra de queso artesanal se trata del Género
Micrococcus.
Tanto en el medio de aislamiento como en los medios de diferenciación bioquímica el
comportamiento de la bacteria que se aisló indica que se trata del genero Micrococcus.
9.- BIBLIOGRAFÍA:
http://www.slideshare.net/pedritopacheco/micrococcus.
Greenblat, C.L., Baum, J., Klein, B.Y., Nachshon, S., Koltunov, V., Cano, R.J., (2004).
“Luteus del micrococo”. Ecología microbiana 48: 120–127.
http://www.cepis.org.pe/bvsaidis/resisoli/iii-131.pdf.
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/ciencia/v01_n2/flavonoides.htm.
http://www.cybertesis.edu.pe/sisbib/2003/alcantara_lj/pdf/alcantara_lj-TH.3.pdf.
http://bvs.minsa.gob.pe/php/decsws.php?tree_id=B03.510.400.500.500&lang=es.
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