1

ef lucr.dr. Lavinia Noveanu

2012
CURSUL 5
Fiziologia

seriei

leucocitare
MEDIUL INTERN
SNGELE
UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE V.BABE TIMIOARA
DISCIPLINA DE FIZIOLOGIE
DEPARTAMENTUL DE TIINE FUNCIONALE
2
CUPRINS
1.

Clasificarea leucocitelor din sngele periferic
2. Rolul leucocitelor n aprarea organismului
3. Granulocitele neutrofile
4. Granulocitele eozinofile
5. Granulocitele bazofile
6. Sistemul monocito

macrofagic
7. Funciile limfocitelor n aprarea organismului
3
OBIECTIVE
Studentul

trebuie

s:

Enumere

criteriile

de clasificare a leucocitelor din sngele periferic

Defineasc aprarea nespecific i specific a organismului, s enumere
mecanismele implicate i s precizeze rolul leucocitelor

Descrie caracteristicile generale, proprietile, cinetica i funciile
neutrofilelor

Descrie

etapele fagocitozei

Descrie caracteristicile generale, cinetica i funciile eozinofilelor

Descrie caracteristicile generale, cinetica i funciile bazofilelor

i a
mastocitelor

Descrie caracteristicile generale, cinetica i funciile sistemului monocito-

macrofagic

Discute

rolul limfocitelor B, T citotoxice i a celulelor NK

Recunoasc principalele modificri ale leucogramei i s le asocieze cu
funciile principale ale leucocitelor
4
(a)CRITERIUL

MORFOLOGIC

segmentarea nucleului

prezena i afinitatea granulaiilor
citoplasmatice (MO), fa de un
amestec de colorani acizi i bazici)
1.CLASIFICAREA LEUCOCITELOR
DIN SNGELE PERIFERIC

POLINUCLEARE = granulocite

neutrofile

(NE)

eozinofile (EO)

bazofile

(BA)

MONONUCLEARE = agranulocite

monocite (MO)

limfocite (LY)
5
(b)CRITERIUL

FUNCIONAL

Microfagocite: NE

Macrofagocite: MO

Limfocite: B, T i celule NK

IMUNOCITE

aprare specific

FAGOCITE aprare nespecific
6
NR.TOTAL LEUCOCITE

Adult: 5.000 -

9.000/mm
3

Copil <

6 ani: 9.000

12.000/mm
3
|

numrului = LEUCOCITOZ
+

numrului = LEUCOPENIE
Tip Adult Copil <

6 ani
NE 56 -

68% 25

-

40%
EO 1 - 3% 1 4%
BA 0 -

1% 0 -

1%
LY 20 -

40

% 50

-

70%
MO 4

-

10% 4 - 8%
HISTOGRAM LEUCOCITAR

separarea leucocitelor

din
sngele periferic

n funcie de:

volum celular

grad

de segmentare a nucleului

densitatea

granulaiilor
citoplasmatice
FORMULA LEUCOCITAR
7
2. ROLUL LEUCOCITELOR N APRARE
APRAREA ORGANISMULUI

=

suma tuturor MECANISMELOR
care protejeaz individul de agresiunea microorganismelor invazive
APRAREA NESPECIFIC
nnscut, primitiv, cu eficacitate
medie, dar foarte prompt
APRAREA SPECIFIC
dobndit mpotriva unui antigen
specific (imunogen) cu eficacitate
mare, dar

cu laten

de cteva zile
NATURAL

Pasiv: prin

transfer
placentar de anticorpi

Activ:

prin boal
ARTIFICIAL

Pasiv: prin administrare de
antitoxine sau -globuline

Activ: prin vaccinare
8
(a) MECANISME DE APRARE NESPECIFIC
1. BARIERELE

NATURALE DEFENSIVE

mpiedic ataarea i penetrarea agenilor bacterieni

pielea intact prezint celule

epiteliale

cu jonciuni strnse

mucusul de la nivelul epiteliilor inhib dezvoltarea germenilor
2. FACTORI ANTIBACTERIENI DIN SECREII EXOCRINE

acidul clorhidric din secreia gastric

enzime digestive (pepsina, tripsina)

acizii biliari din secreia biliar

lizozimul din saliv i lacrimi
3. FACTORI FIZIOLOGICI

temperatura corpului 37C (febra este o reacie de aprare)

PO
2

ridicat inhib dezvoltarea germenilor anaerobi
Stomacul = bazin

de
sterilizare

a alimentelor
9
4. SUBSTANE PREFORMATE

sistemul complementului seric
5. FAGOCITOZA

granulocite NE

bacterii

macrofage

bacterii, parazii i celule tumorale

grup de proteine plasmatice
(C
1

C
9

) activate n cascad

asigur opsonizarea

necesar fagocitozei
(fragmentul C3b)

efect bactericid i tumoricid
Complexul de atac
membranar

(C
9

)
| permeabilitii pentru
Na
+

i ap
CITOLIZ
10
(b)

MECANISME DE APRARE SPECIFIC
RSPUNSUL IMUN SPECIFIC -

declanat de ptrunderea n
organism a unei

structuri non -

self

antigenic i imunogen
Rspunsul imun

UMORAL
activarea limfocitelor B

n plasmocite i
formarea de AC neutralizeaz AG
Rspunsul imun

CELULAR
activarea limfocitelor T citotoxice

i a celulelor
NK

elimin

celulele

purttoare

de AG
11
1. PRIMAR: la primul contact

cu AG specific

laten

mai

lung

(

>

7 zile)

activarea limfocitelor B naive
anticorpi

de tip IgM

n

cantitate

mic
formarea limfocitelor B cu memorie
imunologic
2. SECUNDAR: la

al

doillea

contact

cu AG
specific

laten

mai

scurt

(2

-

4 zile)

activarea limfocitelor B cu

memorie
imunologic
anticorpi

de tip IgG

n

cantitate

mare
rspuns imunologic RAPID i AMPLU
TIPURI DE RSPUNS IMUN UMORAL
12
3. GRANULOCITELE NEUTROFILE

(NE)
CARACTERISTICI GENERALE

Numr
adult: 56-68% (3000

7000/mm
3
)
copii: 25-40%

Durata de via

~

15 zile

Morfologie

Proprieti

mobilitate

marginaie

diapedez

chemotaxie


Funcii
1. Fagocitoz

(bacterii)
2. Secretorie

Reacia

inflamatorie

diametru 10-15

m

nucleu

segmentat (2-5 lobi)

citoplasm

palid (slab acidofil)

granulaii

citoplasmatice neutrofile
(a)

Marginaie:

aderarea PMN la
endoteliul vascular

etape:

rolling

leucocitar

rostogolirea

PMN pe suprafaa

endoteliului

adeziune ferm

la endoteliul

vascular

contacte strnse ntre
PMN i endoteliu

realizat prin activarea
moleculelor de adeziune de pe
PMN

i

endoteliu
(b) Diapedez: traversarea
peretelui vascular (la nivelul
venulelor

postcapilare)
PROPRIETILE NEUTROFILELOR (PMN)
13
(c) Mobilitate: emitere de pseudopode
(d)

Chemotaxia: micarea

orientat,
direcionat ctre un focar inflamator

prin emiterea de pseudopode

pe
direcia de naintare

n sensul gradientului chemotactic

Factori chemoatractani

pozitivi

bacterii i produse bacteriene

produi de degradare tisular

mediatori ai inflamaiei (chemokine)

Factori chemoatractani

negativi

cortizon
14
1. Etapa MEDULAR: 6 - 9 zile

producie 1 x 10
11
NE/zi

stocate n MOH Nr.de

10 x mai
mare dect n circulaie
2. Etapa SANGVIN: 4 - 9 ore

NE mature (segmentate) -

95%

NE imature (nucleu n band) -

5%
3. Etapa TISULAR: 4 - 5 zile

NE migreaz

n zone de maxim

expunere

la bacterii
CINETICA NEUTROFILELOR
15

piele

mucoase

ci respiratorii

tract

digestiv

tract

urinar
16
(a) FAGOCITOZA

este funcia

principal

a neutrofilelor

nglobarea i distrugerea
agenilor patogeni

extracelulari

NE reprezint

prima linie celular

de aprare nespecific a
organismului
FUNCIILE NEUTROFILELOR

Agent patogen


bacterii

particule inerte

Etape


Opsonizarea

Ataarea

Inglobarea

(ingestia)

Bactericidia

+ Digestia

Exocitoza
1. OPSONIZAREA

fixarea

agentului patogen pe

opsonine

(IgG

sau

C3b)

pregtire pentru nglobare
2.ATAAREA

receptori specifici de pe membrana
NE

fixeaz opsoninele

declaneaz nglobarea
3. NGLOBAREA (INGESTIA)

membrana celular emite
pseudipode

care nconjoar
particula opsonizat

nglobare n
vezicula fagocitar

=

FAGOZOM
17
18
4. BACTERICIDIA i DIGESTIA

lizozomii

fuzioneaz

cu fagozomul

= FAGOLIZOZOM

distrugerea agentului patogen
4.1. MECANISM O
2

dependent (respiratory

burst)

eliberare rapid a speciilor reactive ale O
2
SOD = superoxid

dismutaza
MPO = mieloperoxidaza
Acid hipocloros (HOCl)
O
2
Anion superoxid

(O
2
-.
)
H
2

O
2
NADPH oxidaz
SOD
MPO
19
5 . EXOCITOZA FRAGMENTELOR NEDIGERATE

eliminarea resturilor nedigerabile prin

exocitoz

drenate limfatic

bacterii vii/moarte + NE moarte + lichid tisular

globul de

puroi
4.2. Mecanism O
2

independente

enzime

lizozomale

hidrolaze acide

sisteme

bactericide

neoxidante

proteine cationice

distrug
matricea fosfolipidic

lizozim

hidrolizeaz

glucidele
dinperetele

bacterian

lactoferin

fixeaz i sustrage

fierul bacterian
20
(b) FUNCIA SECRETORIE

degranularea

PMN

exocitoza

granulaiilor citoplasmatice

enzime lizozomale,
metabolii ai acidului arahidonic, IL -1 (factor pirogen),

etc.

eliberarea extracelular a speciilor reactive ale O
2

:

asociate fagocitozei

rspuns inflamator n focarul bacterian

prin fixarea pe complexe AG/Ig

leziuni tisulare

n bolile
autoimune
21
CARACTERISTICI GENERALE

Numr

adult: 1

-

3% (100

400/mm
3
)

copii: 1

4%

Durata de via ~

12

zile
4. GRANULOCITELE

EOZINOFILE (EO)
diametru 10-15

m
nucleu

bilobat

n desag
citoplasm intens acidofil
numeroase granulaii

acidofile
1. Secretorie

citotoxicitate
antiparazitar

reacie alergic
2. Fagocitoz +

(bacterii)

Morfologie

Proprieti


Funcii

diapedez

chemotaxie
CINETICA EOZINOFILELOR

Etapa

medular: 6-9

zile

Etapa sangvin:

6 ore

Etapa tisular:

8-12 zile
EO

recunoate:

paraziii opsonizai

de IgE

mediatori ai inflamaiei

factorul chemotactic

al eozinofilelor
produs de mastocit
EO

prsete

circulaia prin diapedez

i migreaz n zone de maxim

expunere

la

parazii

i

alergeni

piele, ci respiratorii, tract

digestiv
22
23
Factorii eozinofilici

secretai prin

DEGRANULARE:

factori antiparazitari

aprarea antiparazitar

histamina (alturi de mastocite)

reacia alergic

metabolii ai acidului arahidonic

speciile reactive ale O
2
FUNCIA SECRETORIE A EOZINOFILELOR
Mastocit
(MA)
Eozinofil
(EO)
Parazit opsonizat

de IgE
Degranularea

EO i MA

inflamaia alergic
24
FACTORII ANTIPARAZITARI EOZINOFILICI

Proteina bazic major (MBP)

distruge parazii

stimuleaz degranularea

mastocitar

determin leziuni tegumentare

Proteina cationic eozinofilic

(ECP)

aciune antiparazitar de 8

x mai mare

stimuleaz degranularea

mastocitar

aciune neurotoxic

Peroxidaza eozinofilic

distruge parazii, bacterii, cel.tumorale
|

producia speciilor reactive ale O
2
25
EOZINOFILIA reactiv (creterea Nr.EO)

infestare cu parazii intestinali

ex: trichinella

spiralis

infestare cu protozoare intestinale

ex: giardia intestinalis

dermatita

alergic

(urticaria)

astmul

alergic
Trichinella

spiralis Giardia intestinalis
Urticarie
5. GRANULOCITELE

BAZOFILE (BA)
CARACTERISTICI GENERALE

Numr

adult: 0 -

1% (20-50/mm
3
)

copil: 0

1 %
Durata de via

~

10 zile
26
Mastocite

Morfologie

Funcie

Forme

diametru 10

-

12 m

nucleu segmentat, fr lobi

granulaii

mari

bazofile

care

acoper

citoplasma

i

nucleul

circulant = BAZOFIL

tisular = MASTOCIT

Secretorie

reacia alergic

coagulare
27
CINETICA BAZOFILELOR

Etapa

medular:

3 -

7

zile

Etapa sangvin:

cteva ore

Etapa tisular: sptmni luni
BAZOFIL
ESUTURI
INT
Chemotaxie
MASTOCIT

alergeni

mediatori ai inflamaiei

Piele

Ci respiratorii

Tract

digestiv
RSPUNS ALERGIC
28
DEGRANULARE declanat de fixarea complexelor alergen/IgE

Eliberare de HEPARIN

factor anticoagulant care
mpiedic activarea
factorilor plasmatici ai
coagulrii
FUNCIA SECRETORIE A MASTOCITELOR

Eliberarea de HISTAMIN (alturi de EO)

astmul

alergic

rinita alergic

conjunctivita alergic

reacia anafilactic
29
6. SISTEMUL MONOCITO-MACROFAGIC
CARACTERISTICI GENERALE

Numr

adult: 4 -

10% (100

700/mm
3
)

copil: 4 -

8%

Funcii

diametru 14 -

24 m

nucleu

reniform

citoplasm intens bazofil

fr granulaii vizibile la MO

Durata de via

~

luni (macrofag)

Morfologie
Macrofage

Forme


circulant = MONOCIT

tisular = MACROFAG
1. Macrofagocitoz
2. Secretorie

Celul
prezentatoare de
antigen (APC)

Postmaturare

sub influena micromediului

local

creterea dimensiunilor de 5 x

creterea capacitii de fagocitoz
CINETICA MONOCITAR
30

Etapa medular:

5 -

6 zile

Etapa sangvin:

3 zile

Etapa tisular:

cteva luni
MONOCIT
ESUTURI
germeni patogeni
celule distruse
citokine
Plmn, Ficat, Piele, esut nervos, esut osos
Chemotaxie
MACROFAG
31
macrofagele

alveolare

plmni
celulele

Kupffer

ficat
celulele

Langerhans

piele
microgliale

esut nervos
osteoclaste esut osos
Microglial

Cell
Langerhans

cell
MACROFAGELE TISULARE: reprezint o populaie heterogen
32
FUNCIILE SISTEMULUI MONOCITO-MACROFAGIC
(a) MACROFAGOCITOZA
Macrofage +
mycobacteria

TBC
Macrofage +

fungi (drojdie)

bacterii (ex: mycobacteria

TBC)

parazii

(ex: plasmodium

falciparum)

fungi (ciuperci)

celule neoplazice

Aprarea nespecific
Monocit +
plasmodium

falciparum
33
Macrofage + eritrocite Macrofage + trombocite

resturi celulare

bacterii moarte

detrisuri

tisulare

ndeprtarea celulelor
sangvine mbtrnite

Reparare tisular
(necrofagocitoza)

funcia macrofagelor

endoteliale

de la
nivelul

splinei, MOH

i

ficat (sistemul
reticulo

endotelial)
34
MHC = molecule de histocompatibilitate
CD = molecul de citodifereniere
APC = celul prezentatoare de AG

Iniierea

rspunsului

imun

specific
Macrofagul = APC
1. nglobarea

i prelucrarea

AG
2. expunerea

fragmentului AG
mpreun cu MHC clasa II
3. recunoaterea

AG de ctre

limfocitele

T helper

(CD4
+
)
35
(b) FUNCIA SECRETORIE

~

100 de substane

Activitate bactericid
mecanism O
2

independent (enzimele lizozomale)
mecanism O
2

dependent (speciile reactive ale O
2

)

Activitate tumoricid - proteine cu proprieti antitumorale

factorul de necroz al tumorilor (TNF)

Inflamaie i febr

metabolii ai acidului arahidonic

i IL-1

Reparaie i reorganizare tisular
factorul de stimulare al

angiogenezei

(formare de noi vase)
factorul de stimulare al

fibroblastelor

(refacere zonei lezate)
proteine ale matricei intercelulare (fibronectina)
factori chemotactici

pentru miofibroblati
36
Reglarea creterii celulare
EPO eritrocite
interleukina

-

6 (IL-6) celula stem pluripontent

(CSP)
factori de cretere celular (CSF) leucocite
Reglarea activitii limfocitelor
interferon

-

(IFN -

)
interleukina

1 (IL-1)
Producia de proteine transportoare
transferina

fier
ciancobalamina

vitamina B
12
Reglarea echilibrului fluido-coagulant
coagulare V, VII, IX, X, tromboplastina tisular (III)
fibrinoliz

activatorul tisular al plasminogenului

(t-PA)
37
(a) LIMFOCITELE B
7. FUNCIILE LIMFOCITELOR N
APRAREA ORGANISMULUUI

IgG:

75

85% din Ig

circulante

IgM: aglutininele antiAB

IgA: - se fixeaz la nivelul pielii i a mucoaselor
-

se secretat n saliv, suc intestinal, secreie lactat

IgD:

receptor pentru AG

al limfocitelor B

IgE: se fixeaz n esuturi pe receptori specifici de la nivelul
mastocitelor

i stimuleaz eliberarea de histamin

exprim

receptori specifici (BCR) fa de AG

se difereniaz n

plasmocite

splin, gg.limfatici

produc 5 clase de Ig

efectorii imunitii umorale
38
(b) LIMFOCITELE T citotoxice (CD8
+
)

exprim

receptori specifici (TCR) care
recunosc antigenul prezentat

de APC

distruge APC prin eliberare de

perforine

i granzime
APC

=

celul infectat viral, proprie
devenit non

self, celul tumoral,
Expune AG celular
mpreun cu MHC clasa I
RSPUNS IMUN CELULAR
39
(c) CELULELE NATURAL KILLER (NK)

polimerizeaz tubular

se inser n membrana celulei int

formnd un por

necroza celulei

induc

apoptoza (moartea
celular programat)
Mediaz citotoxitatea

anticorp - dependent

celule proprii infectate viral

celule proprii devenite non-self

celule tumorale
Contactul cu AG exprimat de celula int:

fr MHC clasa I

fixat pe AC
Eliberare de enzime citolitice
PERFORINE GRANZIME
1. FIZIOLOGICE
Nr.L NE EO BA LY MO
- copii | + |
2. PATOLOGICE
- infecii bacteriene acute | | +
- parazitoze
- alergii
- afeciuni dermatologice
N,| |
- mononucleoz infecioas | ++ || ||
- infecii virale acute
- TBC
| + | |
- boli infecto-contagioase N |
LEUCOGRAMA
|

Nr.L = leucocitoz, Leucocitoza <

30.000/mm
3
= reacie leucemoid
|

NE = neutrofilie, |

EO = eozinofilie, |

BA = bazofilie
| LY = limfocitoz, | MO = monocitoz
+

NE = neutropenie, +

LY = limfopenie 40