TEMA: HEMOGRAMA DE SHILLING

Docente: QF. Dr. Juan Parreo Tipian.

Alumno: Luis Loayza Sosa.
Cdigo: 10040022.
Grupo: Viernes 10am 2pm.

2014



UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
(Universidad del Per, DECNA DE AMRICA)
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
EAP FARMACIA Y BIOQUMICA

CURSO: ANLISIS CLNICOS 1
PRACTICA N 4

ANLISIS CLNICOS I FFyB - UNMSM
1






I. INTRODUCCION

El trmino hemograma tiene su origen en la clasificacin de los neutrfilos en
subgrupos en funcin del nmero de lobulaciones realizada por J. Arneth en el
ao 1904. Posteriormente, en 1930 J. Schilling defini la desviacin a la
izquierda del hemograma como un aumento de los neutrfilos juveniles o en
banda, as como el procedimiento para el recuento de las diferentes
subpoblaciones leucocitarias. Por ello, la frmula leucocitaria realizada a 100
elementos se conoce con el trmino hemograma de shilling. A partir de 1980,
con la llegada de los analizadores hematolgicos automatizados, que
determinan otras magnitudes importantes e las clulas sanguneas
(concentracin de las diferentes clulas sanguneas y de hemoglobina (Hb),
hematocrito (Hto), volumen corpuscular medio (VCM), etc.), se ha denominado
hemograma a toda la informacin que proporcionan estos instrumentos.
El hemograma, junto al recuento diferencial manual de los diferentes
leucocitos o formula leucocitaria, es una de la pruebas diagnsticas ms
solicitadas dado que forma parte del estudio inicial de la gran mayora de los
pacientes y tiene una gran utilidad diagnstica no slo en las hemopatas, sino
tambin en muchas otras enfermedades (1).








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2

II. OBJETIVO

1. Hallar el recuento porcentual de las distintas clulas blancas en una muestra de sangre a travs
del hemograma de Shilling.
2. Diferenciar las caractersticas estructurales de los diversos tipos de leucocitos.
3. Aprender a realizar frotis sanguneos.

III. MARCO TERICO
3.1. Hemograma
Es un documento escrito o representacin grfica de un anlisis de sangre, tal como el anlisis de sangre
completo, o el recuento diferencial de leucocitos. (2)

Clsicamente se considera que un hemograma debiera incluir: el recuento de eritrocitos, la hemoglobina,
el hematocrito, los ndices corpusculares, el estudio de la morfologa eritrocitaria y, adems, el recuento
de leucocitos, la frmula leucocitaria, el recuento plaquetario, la morfologa plaquetaria. Otros ndices que
pueden incluirse son: recuento de reticulocitos, el ndice ictrico y la velocidad de eritrosedimentacin.

Sin embargo, el "hemograma completo" difiere en cuanto a informe, en los distintos laboratorios.
A travs del tiempo, el hemograma ha sido objeto de mltiples modificaciones en cuanto a los parmetros
que lo componen, la forma de obtenerlos, los grados de precisin y de exactitud y la manera de
interpretarlo. Para una mejor utilizacin de los parmetros que el hemograma aporta es de vital
importancia conocer el desarrollo que ha acompaado a la prueba y el laboratorio clnico debe
permanecer atento al desarrollo tecnolgico para incorporar los aspectos de mayor relevancia desde el
punto de vista clnico, como una herramienta de rutina que le permita tener pruebas cada vez ms
exactas, ms precisas, a un costo razonable y, sobretodo, de mayor utilidad clnica. (3)

3.2. Hemograma de Schilling: frmula leucocitaria o hemograma completo
El hemograma de Shilling constituye uno de los exmenes de laboratorio ms usados en el campo de la
hematologa. (1)
Se define como el recuento porcentual de las diferentes subpoblaciones leucocitarias. El hemograma
incluye la frmula leucocitaria y la determinacin de otras magnitudes celulares sanguneas, tales como
recuento de leucocitos, hemates y plaquetas, concentracin de hemoglobina, hematocrito y volumen
medio de los hemates entre otras. La determinacin de los parmetros hematolgicos bsicos mediante
contadores hematolgicos especializados, junto al examen morfolgico de los elementos sanguneos en
sangre perifrica, son de gran utilidad para la deteccin de alteraciones cuantitativas y cualitativas de
dichas clulas sanguneas, lo que contribuye al diagnstico de enfermedades hematolgicas y no
hematolgicas.Es una prueba que mide el porcentaje de cada tipo de glbulos blancos que un paciente
presenta en la sangre (3).
Normalmente, aparecen cinco tipos de glbulos blancos, tambin llamados leucocitos, en la sangre:
Neutrfilos
Linfocitos (Clulas B y T)
Monocitos
Eosinfilos
Basfilos
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Una mquina especialmente diseada o el mdico cuenta el nmero de cada tipo de clula. El examen
muestra si el nmero de clulas est en la proporcin apropiada entre s y si hay ms o menos cantidad
de un tipo de clula (3).
Los valores normales de las clulas blancas en sangre son las siguientes:

Neonatos 1ao Adultos
Neutrfilos en
banda
9% 600-3000 3% 50-700 2 -8 % 1800-7000
Neutrfilos 52% 3300-17000 28% 1800-4600 46 - 66 % 0-700
Eosinfilos 2 % 20-850 3 % 50-700 1 - 5 % 0-450
Basfilos 0 % 0-640 0 % 0-200 0 -1 % 0-200
Linfocitos 31 % 2000-11000 61 % 4000-10500 20 - 40 % 1000-4800
Monocitos 6 % 400-3100 6 % 50-1100 2 - 10 % 100-800
3.2.1. Utilidad clnica
Screeming de leucocitosis, leucopenias, infecciones.
Evaluacin de infeccin, inflamacin, intoxicacin, anemia, colagenosis, leucemia, desrdenes
mielo y linfoproliferativos, tumores, inmunosupresin de mdula sea, leucocitosis, leucopenias.
3.2.2. Variables pre analticas:
Aumento del nmero de linfocitos: linfocitosis fisiolgica de la infancia.
Aumento del nmero de monocitos: monocitosis fisiolgica del recin nacido.

3.2.3. Variables por enfermedad:

Las alteraciones de la frmula leucocitaria pueden clasificarse en dos grupos:

A. Alteraciones cuantitativas:

a) Aumento de un determinado tipo de leucocitos:
Aumento del nmero de neutrfilos (infecciones bacterianas, sndromes mieloproliferativos,
inflamaciones de origen no infeccioso, necrosis hstica, enfermedades metablicas, neutrofilia
congnita).
Aumento del nmero de eosinfilos (enfermedades alrgicas, parasitosis, enfermedades de la
piel, eosinofilia pulmonar, sndrome hipereosinoflico, neoplasias).
Aumento del nmero de basfilos (hipersensibilidad, mixedema, sndromes mielo-proliferativos
crnicos, cirrosis heptica, hemlisis, sndrome inflamatorio crnico).
Aumento del nmero de linfocitos (infecciones bacterianas, infecciones virales, linfoctica o
linfoblstica).
Aumento del nmero de monocitos (infecciones bacterianas de tipo crnico, enfermedad de
Hodgkin y otras neoplasias, enfermedad del colgeno).

b) Disminucin de un determinado tipo de leucocitos:

Neutropenia (enfermedad del colgeno, infeccin tipo crnico, neutropenia crnica idioptica).

Linfopenia (insuficiencia cardaca congestiva, estado inicial de la enfermedad de Hodgkin).

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Eosinopenia y basopenia (enfermedad de Cushing), enfermedades alrgicas (basopenia).

c) Presencia de clulas inmaduras en sangre perifrica:
1. Salida de elementos celulares pertenecientes a la lnea madurativa granulopoytica (infecciones
agudas, reaccin leucemoide, leucemia mieloide crnica, mielofibrosis idioptica).
2. Salida de elementos celulares de la serie eritroide: respuesta a estmulo extracelular (sndromes
hemolticos intensos y crnicos, eritroblastosis fetal); de origen medular (diseritropoyesis
congnita o adquirida, eritremias primarias o asociadas a distintos sndromes mieloproliferativos
agudos o crnicos).
3. Salida de clulas muy inmaduras (blastos) de una o ms series madurativas (leucemia aguda) o
de clulas linfoides en diferentes estados de maduracin (linfoma leucemizado).
B. Alteraciones cualitativas:
4. Polinucleares neutrfilos (alteraciones de granulacin: granulacin txica, cuerpos de Dohle,
anomalas de Alder Reilly, anomalas de Chediack-Higashi, desgranulacin de los polinucleares
neutrfilos).
5. Linfocitos (aumento de basofilia del citoplasma en infecciones vricas; aumento de tamao y
citoplasma azul claro (linfocitos T estimulados) en mononucleosis infecciosa y otras virosis).
6. Plaquetas (aumento de tamao: mielofibrosis, trombocitopenia esencial, dismorfia).
7. Hemates:
- Alteraciones del tamao (macro y microcitosis).
- Alteraciones de la forma (esferocitosis, rodocitos, drepanocitos, eliptocitos, equinocitos,
acantocitos, dacriocitos, esquizocitos).
- Alteraciones del color: hipocroma, policroma, anisocroma.
- Presencia de inclusiones intraeritrocitarias (punteado basfilo, granulacin azurfila, anillos
de Cabot, cuerpos de Howell Jolly, parsitos).

3.3.4. Variables por drogas

A. Aumento de un determinado tipo de leucocitos:
Aumento del nmero de neutrfilos: administracin de haloperidol, litio, barbitricos.
Aumento del nmero de eosinfilos: ingesta de medicamentos.
B. Disminucin de un determinado tipo de leucocitos:


Linfopenia: administracin de corticosteroides (3).

Foto 1: Maduracin del leucocito
neutrfilo




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Foto 2: Leucocitosis
polimorfonuclear con
granulaciones txicas








Foto 3: Mononucleosis
infecciosa





Foto 4: Linfocitos en la neumona viral








Foto 5: Linfocitos en leucemia granulocitica
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Foto 6. Frotis sanguneo, humano
- Tincin de Leishman










IV. METODOLOGA

4.1. Materiales, reactivos y equipos:

Lancetas estriles.
Guantes.
Algodn.
Alcohol.
Porta objetos.
Colorante de Wright.
Pizetas con agua destilada.
Recipiente de plstico para colocar portaobjetos.
Microscopio.

4.2. Tcnica operatoria

1) Obtencin de la muestra de sangre:
Con una lanceta estril hacer, previa desinfeccin con alcohol, una puncin en el pulpejo de un
dedo. Colocar una gota de sangre en la parte extrema de un porta objetos. Con otro
portaobjetos se procede de la manera siguiente:
- Ponerlo delante de la gota de sangre hasta que su borde toque la gota.
- Deslizarlo sobre toda la superficie del primer portaobjetos de manera que se pueda
obtener una fina pelcula de sangre (Esto se llama frotis) (4
-
2) Tincin de Wright

Es una tcnica de tincin derivada del mtodo de Romanowsky que se utiliza principalmente para el
coloreo de muestras de frotis sanguneos. Permite diferenciar cualitativamente y cuantitativamente los
principales elementos formes de la sangre. El colorante de Wright contiene:
- Un colorante aninico (eosina).
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- Un colorante catinico (azul de metileno) ambos disueltos en metanol.






Estos colorantes se encuentran en estado no ionizado mientras se mantienen en solucin de alcohol
metlico. Al aadir el agua destilada se ionizan y se unen selectivamente a los constituyentes celulares
precipitando como sales insolubles.
Fundamento:
Los componentes celulares de naturaleza aninica (cida) se unen selectivamente a los tintes catinicos
tindose en variados tonos de azul. Estos componentes son llamados BASFILOS (ADN, mitocondrias,
ribosomas y citoplasma de clulas ricas en ARN). Los componentes celulares de naturaleza catinica
(bsico) se unen selectivamente al tinte cido eosina, tindose en variados tonos de naranja y rojo. A
estos elementos se les denomina ACIDFILOS o EOSINFILOS. Este es el caso de la hemoglobina y de
las protenas contenidas en las granulaciones de los EOSINFILOS.
Los componentes que tienen afinidad por ambos tipos de colorantes se denominan NEUTRFILOS y se
tien de variados tonos de violeta.
Coloraciones obtenidas:
Ncleos: aparecen de colores que van del color azul al prpura-negro.
Citoplasma de las clulas maduras: aparecen de un color
violeta muy plido o marrn muy plido.
Eritrocitos ricos en hemoglobina: colores rosados y beige.
Grnulos de neutrfilos: colores entre violeta y marrn.
Grnulos de eosinfilos: color naranja.
Grnulos de basfilos: colores entre azul y negro.
Grnulos de linfocitos: color prpura.

Componentes del colorante de Wright:
Colorante de Wright. 0,3 gr.
Azul de metileno y eosina Tiozina Eosinato.
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Metanol 97 mL.
Glicerol 3 mL.

Formula Relativa: %
Hemograma de Schilling
Formula Leucocitaria o Recuento diferencial (5).

Frmula Absoluta:


Procedimiento:
En el frotis de la muestra de sangre se agrega colorante Wright. Fijarla durante un minuto (soplando),
aadirle agua destilada, mezclar (soplando), dejar por 4 minutos y llevar finalmente a chorro de agua para
eliminar los excesos.

3) Lectura de un frotis
Para la frmula relativa se cuentan 100 leucocitos con el fin de obtener el porcentaje de cada tipo de
leucocito, siendo necesario que estos se encuentren uniformemente distribuidos en el extendido. En los
frotises generalmente los leucocitos de mayor dimetro (granulocitos) ocupan las zonas ms perifricas
del frotis. Los de menor dimetro se ubican en el centro (linfocitos). Se recomienda utilizar el mtodo
recomendado por Von Schilling, que consiste en tomar 4 puntos equidistantes recorriendo el campo en
zigzag desde la zona de frotis menos densa hacia la ms densa. Se debe tambin observar los eritrocitos
y las plaquetas.
















Recuento de leucocitos x %
100
Observar en el
microscopio a 10 x
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V. DIBUJO DE LOS ELEMENTOS FORMES EN UN FROTIS COLOREADO.

1. GRANULOCITOS

1.1. Neutrfilos
segmentados: 7
1.2. Neutrfilos cayado:
12










1.3. Eosinfilos: 0
1.4. Basfilo: 4

















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2. Agranulocitos
2.1. Linfocitos: 23













2.2. Monocitos: 4





















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VI. RESULTADOS

1. Formula relativa

Tipo de clula Formula relativa Valores normales
Neutrfilo cayado 14% 3-5%
Neutrfilo segmentado 24% 55-65%
Eosinfilos 0% 2-4%
Basfilo 8% 0-1%
Monocito 8% 4-8%
Linfocito 46% 20-30%


2. Formula absoluta
Recuentro leucocitario = 8000/mm
3


Tipo de clula Formula absoluta Formula absoluta promedio
Neutrfilo cayado 1120/mm
3
125/mm
3

Neutrfilo segmentado 1920//mm
3
4250/mm
3

Eosinfilos - 270/mm
3

Basfilo 640/mm
3
50/mm
3

Monocito 640/mm
3
450/mm
3

Linfocito 3680/mm
3
2850/mm
3



VII. CONCLUSIONES

1. Con el hemograma de Schilling se midi el porcentaje de los diferentes tipos de clulas
blancas presentes en la muestra de sangre referencial.
2. Se diferenci morfolgicamente y estructuralmente los diferentes tipos de clulas blancas.
3. El frotis de sangre sigue siendo una herramienta diagnstica importante.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

(1) Merino, Ana. Valores normales del hemograma: Cundo hay que alarmarse? Servicio de
hemoterapia-hemostasia. Hospital Clnica (IDIBAPS). JANO. Barcelona. Espaa. 2008; 1 (709):
42-46.

(2) Muoz Zambrano, Mara E.; Morn Cortijo, Cecilia G. Manual de procedimientos de laboratorio
en tcnicas bsicas de hematologa. MINISTERIO DE SALUD - INSTITUTO NACIONAL DE
SALUD. Lima, Per. 2005

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(3) Merino, Ana. Criterios para la realizacin de la frmula leucocitaria manual. Servicio de
hemoterapia-hemostasia. Hospital Clnica (IDIBAPS). Universidad de Barcelona. Barcelona.
Espaa, 2009. Ed Cont Lab Coln; 13: 49-58.

(4) Portal Informatica.com. Acceso 13/04/2014.l Disponible en:
http://www.infobioquimica.com/wrapper/CDInterpretacion/te/bc/192.htm

(5) Disponible en:
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/ies_torre_del_aguila/webccnn/praclab/formula%20leuco
citaria.htm

(6) Portal MedlinePlus, informacin de salud para usted. Acceso 13/04/2014. Disponible en:
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003657.htm

(7) Portal Citologa e histologa. Acceso 13/04/2014. Disponible en:
http://citologiaehistologiatm2.blogspot.com/2009/04/tejido-epitelial-cubico-estratificado.html

(8) Portal Microscopio virtual, recursos docentes de hematologa a travs de internet. Acceso
13/04/2014. Disponible en : http://griho2.udl.es/carles/medicina/sp/leucos.html