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El documento describe los compuestos nitrogenados no proteicos como la urea y la creatinina, incluyendo sus niveles normales, métodos de análisis y uso clínico. La urea es el principal compuesto nitrogenado en el plasma y su nivel aumenta con daño renal o hepático. La creatinina se forma en los músculos y su nivel en suero refleja la función renal. Ambos compuestos se miden comúnmente usando métodos enzimáticos colorimétricos para monitorear la función renal.
El documento describe los compuestos nitrogenados no proteicos como la urea y la creatinina, incluyendo sus niveles normales, métodos de análisis y uso clínico. La urea es el principal compuesto nitrogenado en el plasma y su nivel aumenta con daño renal o hepático. La creatinina se forma en los músculos y su nivel en suero refleja la función renal. Ambos compuestos se miden comúnmente usando métodos enzimáticos colorimétricos para monitorear la función renal.
El documento describe los compuestos nitrogenados no proteicos como la urea y la creatinina, incluyendo sus niveles normales, métodos de análisis y uso clínico. La urea es el principal compuesto nitrogenado en el plasma y su nivel aumenta con daño renal o hepático. La creatinina se forma en los músculos y su nivel en suero refleja la función renal. Ambos compuestos se miden comúnmente usando métodos enzimáticos colorimétricos para monitorear la función renal.
Mora Martnez Hugo Pliego Porras Gisela Vsquez Garca Ma. Maribel
Q.F.B. 702 11 Septiembre 2013 BIOQUMICA CLNICA Los azoados son compuestos nitrogenados no proteicos que se encuentran en bajas concentraciones en suero y en altas concentraciones en la orina.
En el plasma existen ms de 15 compuestos nitrogenados no proteicos (NPN) diferentes con una concentracin total de nitrgeno de 250-400 mg/l. Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana. La urea es el principal compuesto nitrogenado no proteico del plasma, el cual representa aproximadamente un 45% del total.
Otros constituyentes principales en orden decreciente de contribucin de nitrgeno son los aminocidos, cido rico, creatinina, creatina y amoniaco.
Como consecuencia de una baja funcin renal se observan mayores concentraciones de varios de los componentes principales, por ejemplo, urea, cido rico y creatinina.
ngel M.G/M.R, Interpretacin clnica del laboratorio, (1996), Bogot (Colombia), Panamericana La enfermedad heptica puede provocar una disminucin del metabolismo de los aminocidos con un incremento correspondiente del nitrgeno derivado de los aminocidos en el plasma.
Cuando se lesiona el tbulo se pierde la capacidad de secrecin de la urea y creatinina (secrecin tubular), por lo que aumenta en la sangre, por lo tanto en los padecimientos tubulares hay aumento de azoados.
Cuando hay aumento de azoados en la sangre indica que hay dao en el glomrulo o en el tbulo y se produce un sndrome llamado sndrome ureico.
Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana. Azoemia es una designacin bioqumica que se refiere a cualquier aumento significativo de la concentracin plasmtica de compuestos nitrogenados no proteicos, principalmente urea y creatinina. La azoemia muchas veces se clasifica como prerrenal, renal y posrenal. La azoemia prerrenal es el resultado de una perfusin inadecuada de los riones y, por tanto, de una menor filtracin glomerular en presencia de una funcin renal normal. Amadeo J.P, Qumica Clnica Mtodos, (1990) Buenos Aires (Argentina), Panamericana. Es el producto final del metabolismo proteico
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
Sintetizada por el hgado, pasa al torrente sanguneo, se distribuye a todos los lquidos intra y extracelulares, y se excreta la mayor parte por los riones Todo esto indica que una concentracin aumentada de urea no es obligatoriamente signo de disfuncin renal (insuficiencia renal), ya que otros muchos factores pueden influirla. Se excreta en cantidades mnimas en la sudoracin y es degradada por las bacterias intestinales Las nefronas renales pueden concentrar urea con un gradiente hasta 50 veces mayor que en plasma
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
PRINCIPIO DEL ANALISIS Y USO ACTUAL
La medicin analtica de la urea an se denomina convencionalmente nitrgeno ureico en sangre (BUN), la determinacin de la urea se practica en suero o plasma.
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
Los valores de BUN pueden ser convertidos en concentraciones de urea de la siguiente manera:
Peso atmico del nitrgeno = 14 g/mol; peso molecular de la urea = 60.06 g/mol
La urea contiene dos tomos de nitrgeno por molcula. El nitrgeno de urea constituye el 46.6 % de su peso (28 dividido por 60.06)
En consecuencia: 10 mg/L de BUN dividido por 0.466 = 21.46 mg/L de urea = 0.36 mmol/L de urea mg de urea N/L x 2.146 = mg de urea/L mg de urea N/L x 0.036 = mmol de urea/L.
El margen de referencia para el BUN est alrededor de 6-20 mg/100 dL (2.1- 7.1mmol/l)
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METODOS
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M E T O D O S sangre o suero o muestra de orina o en un filtrado de protenas.
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
AMBAS REACCIONES COLORIMTRICAS La reaccin de Berthelot (mtodo 2) entre el amoniaco y el fenolNaOCl (HIPOCLORITO DE SODIO) produca un complejo de azul de indofenol con un mximo de absorcin en 630 nm . Esta reaccin se realizaba a menudo con nitroferricianuro de sodio como catalizador. El mtodo ms comn para determinar la concentracin de urea en suero u orina es la medicin del amoniaco formado en la reaccin con la ureasa, que emplea un sistema enzimtico acoplado y una reaccin NAD/NADH indicadora (mtodo 3). Esas reacciones se miden en a 340 nm.
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
MUESTRA
El suero y plasma heparinizado pueden ser empleados en los mtodos de diacetilmonoxima, ureasa/GLDH y conductimtrico.
Mediante estos tres mtodos es posible analizar orina en diluciones 1:20 a 1:50, dependiendo del mtodo y del instrumento empleados. Dada la susceptibilidad de la urea a la degradacin bacteriana, las muestras de orina y suero debe conservarse entre 4 a 8 C hasta su anlisis.
Tambin puede conservarse las muestras de orina a un ph menor de 4. 2
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
INTERVALO DE REFERENCIA Los intervalos de referencia para el BUN srico varan segn el mtodo. Estadsticamente se observan valores ms elevados en los hombres y en grupos etarios mayores. Para los adultos estas diferencias carecen de importancia clnica. Los nios pequeos tienen valores en suero algo ms bajos que los nios mayores y que los adultos. Las variaciones individuales en los valores de BUN tambin dependen de los hbitos dietticos del individuo, las personas que consumen menor cantidad de protenas poseen una menor concentracin de urea en suero.
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
La uremia es un sndrome clnico que puede producirse con una intensa azoemia prolongada y comprende acidosis, desequilibrio hidroelectroltico, nauseas, vmitos y otras manifestaciones incluyendo el coma. La azoemia posrenal suele ser el resultado de una obstruccin del tracto urinario, de forma que se reabsorbe urea a la circulacin. 1
1 Amadeo J.P, Qumica Clnica Mtodos, (1990) Buenos Aires (Argentina), Panamericana. La masa de creatina se encuentra fundamentalmente en el musculo por tanto la cantidad en plasma es reflejo de la propia masa muscular. Se forma en el musculo partir de creatina. Mediante la creatina quinasa se convierte en fosfocreatina. Alrededor del 2% se convierte diariamente en creatinina. Excretada por los riones y en minora por las heces. 3 Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana. La determinacin de creatinina se realiza principalmente para estimar la funcin renal.
En general el nivel en suero o plasma es el ms empleado para controlar esta funcin.
Los valores plasmticos junto con la velocidad de excrecin urinaria pueden ser usados para determinar la velocidad de filtracin glomerular (VFG). 3
3 Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana. Valores normales de creatinina en plasma Hombres Mujeres
No modifica su nivel en el suero con la dieta, ejercicio, edad y procesos catablicos.
4 ngel M.G/ngel M.R, Interpretacin clnica del laboratorio, (1996), Bogot (Colombia), Panamericana Por ello los valores de referencias son distintos entre varones y mujeres. MTODOS ENZIMTICOS MUESTRA
Es posible analizar suero, plasma u orina diluida esta ultima debe llevarse a una concentracin final de creatinina de unos 34 a 68 mg/l.
Los mtodos enzimticos requieren la separacin rpida de suero y el anlisis inmediato para reducir la produccin de amoniaco in vitro. 2
4 ngel M.G/ngel M.R, Interpretacin clnica del laboratorio, (1996), Bogot (Colombia), Panamericana Uno de los ms utilizados se basa en la funcin de la accin de la creatininasa y creatinasa. 4 ngel M.G/ngel M.R, Interpretacin clnica del laboratorio, (1996), Bogot (Colombia), Panamericana DEPURACIN DE CREATININA
Se inicia haciendo evacuar la vejiga al paciente al comienzo de un periodo de 24 hrs. Se recoge la orina durante todo el periodo, se vaca nuevamente la vejiga al final y se extrae una muestra de sangre.
Se determina el nivel de creatinina en suero y se mide el volumen recolectado de orina.
4 ngel M.G/ngel M.R, Interpretacin clnica del laboratorio, (1996), Bogot (Colombia), Panamericana El intervalo para la depuracin de creatinina en personas sanas corregido para una superficie corporal de 1.73 mts 2
es de 90-120 ml/min. Se calcula la depuracin de creatinina mediante la siguiente formula: 4 ngel M.G/ngel M.R, Interpretacin clnica del laboratorio, (1996), Bogot (Colombia), Panamericana *Una elevacin en los niveles de creatinina de la sangre es observada cuando hay un marcado dao en las nefronas.
*Por lo tanto esta prueba no es conveniente para detectar estados tempranos de enfermedad del rin.
*Una mejor valoracin de la funcin del rin es dada por la prueba de depuracion de creatinina.
*La separacin de creatinina puede ser calculada con precisin usando la concentracin de la creatinina del suero y alguna o todas las variables siguientes: sexo, edad, peso, y raza con una recoleccin de orina de menos de 24 horas.
*Algunos laboratorios calcularn el ClCr si est indicado en la forma de solicitud de la patologa; y la edad, el sexo, y el peso necesarios son incluidas en la informacin del paciente. *Es el producto del catabolismo de las purinas Rangos normales
En los hombres est comprendido entre 3.4 a 7 mg/dL En las mujeres entre 2.4 a 5 mg/dL
Solamente el 15% de pacientes afectados de gota se encuentran con niveles elevados (de 6 a 9.5 mg/dL).
Puede emplearse suero o plasma, deben evitarse el EDTA y fluoruro. Tambin son tiles las alcuotas de orina de 24 horas Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana MUESTRA SANGUINEA
La dosificacin se verifica en suero y el paciente debe estar en ayunas de 10 horas en promedio.
Rangos normales urinarios
En orina de 24 horas recogida en recipiente con adicin de 15 g de acido brico y guardada en refrigeracin, las cifras promedio estn comprendidas entre 250 a 750 mg/24 horas. Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana DETERMINACIN METODOS ENZIMATICOS +3 Ac. bromofenol La incubacin de cido rico con uricasa se lleva a cabo en buffer Tris a pH de 8.5 a 37C. la cantidad de cido rico en la muestra es directamente proporcional a la absorbancia de la coloracin. La reaccin se mide por la disminucin de la absorbancia a 283 nm. Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana RELACIN ACIDO URICO-CREATININA
Esta determinacin se realiza en la primera orina de la maana y se empela como prueba discriminatoria para la deteccin del sndrome de Lesch-Nyhan.
La relacin tambin ha sido aplicada a muestras de orina de 24hrs. de pacientes adultos con gota para detectar la deficiencia parcial de dicha enzima.
Los valores normales de la relacin acido rico creatinina En pacientes sanos oscilan entre 0.21 y 0.59 En pacientes con gota van de o.15 a 0.73
Gonzalez B.J.M, Bioqumica Clnica (1998) Espaa, Mcgraw-Hill Interamericana Algunas enfermedades, alteraciones fisiolgicas, cambios bioqumicos se asocian a modificaciones de la concentracin del acido rico en el plasma. El aumento de la concentracin del acido rico es ms frecuente y clnicamente ms significativo.
Entre las etiologas ms comunes de la hiperuricemia se trata de un fallo renal, tiene una relacin positiva con la hiperlipidemia, obesidad, hipertensin.
La gota es un trastorno del metabolismo de las purinas o de la excrecin renal del acido rico.
Correlacin Patolgica Solamente el 15% de los pacientes afectados de gota se encuentran niveles elevados. La mayora de los gotosos estn entre los niveles de 6mg/dL a 9.5 mg/dL. 1
Los varones constituyen ms del 90% de todos los casos, mientras que la gota no es comn en las mujeres antes de la menopausia. La edad ms probable de aparicin es en la quinta dcada y la enfermedad es muy infrecuente antes de los 20 aos. 1
1 Bernard H.J, Diagnstico y Tratamiento Clnicos por el laboratorio, (2000), Barcelona (Espaa), Masson
Automated and manual direct methods for the determination of blood urea WH Marsh, B Fingerhut, H Miller - Clinical chemistry, 1965 - Am Assoc Clin Chem
Mtodos directos automticos y manuales para la determinacin de urea en sangre.