Biosinteza proteinelor - translaia

Gena (fragment AND) conine informaia pt ARN

Se copiaz (transcripie) ARNm codoni
n citoplasm + ribozomii, dirijeaz sinteza proteinei,
Se folosesc AA ntr-o succesiune controlat de informaia din gen.
ARNt recunoate, leag, activeaz i transport aminoacizii din citoplasm
la complexul de sintez.
Fiecare ARNt transport un singur tip de aminoacid, dar un singur AA poate
fi transportat de mai multe tipuri de ARNt (32 ARNt la om).
Fiecare ARNt are n bucla a 2-a o triplet caracteristic numit anticodon.
(complementar cu codonii din ARNm).
ARNr are rolul de constituire al ribozomilor, de orientare a moleculelor de
ARNt, de fixare i derularea ARNm.
Ribozomii reprezint sediul sintezei proteice. Sunt:
1) Independeni sintetizeaz proteine de structur:
2) Legai de reticulul endoplasmic cu care formeaz reticulul endoplasmic
rugos sintetizeaz proteine de secreie.
Fiecare ribozom este constituit din 2 subuniti :
- subunitatea mic (30 S la procariote, 40 S la eucariote)
- subunitatea mare (50 S la procariote, 60 S la eucariote).
Subunitatea mare - leag ARNt i prezint 3 situsuri numite
- aminoacil (A),
- peptidil (P)
- eliminare (E)
- ARNr 23S - peptidiltranferaza
Subunitatea mic fixeaz ARNm; fixarea este lax ca banda unei maini de
scris, permind derularea acestuia i ncadrarea codonilor din secvena ARNm
n situsurile aminoacil, peptidil i de eliminare din constituia subunitii
ribozomale mari.
Comparaie ntre structura ribozomilor n procariote, eucariote i mitocondrie
Bacterie (70S) Eucariot (80S) Mitocondrie (55S)
Subunitate mare 50S 60S 39S
ARNr
(1din fiecare)
23S (2904 nt) 28S (4700 nt) 16S (1560 nt)
5S (120 nt) 5S (120 nt)

5.8S (160 nt)
Proteine 33 ~49 48

Subunitate mic 30S 40S 28S
ARNr 16S (1542 nt) 18S (1900 nt) 12S (950 nt)
Proteine 21 ~33
Etapele biosintezei la procariote

1. Activarea AA din citoplasm i formarea complexelor AAARNt
2. Iniierea sintezei proteice
3. Alungirea catenei polipeptidice
4. Terminare sintezei i eliberare proteinei
Activarea aminoacizilor
n citoplasm i este catalizat de aminoacil-ARNt- sintetaz ce prezint 3
situsuri active:
pentru legarea ATP
pentru legarea AA la secvena ACC de la captul 3 al ARNt
pentru legarea ARNt
un proces consumator de energie, energie furnizat de hidroliza a dou
legturi macroergice dintr-o molecul de ATP.
Legtura ARNt aminoacid nou format este o legtur macroergic

AA + ATP + Enz Enz AMP - AA + PPi (PPi 2 Pi + energie)
Enz AMP AA + ARNt Enz + AMP + ARNt-AA
Iniierea sintezei
Sinteza - de la captul N captul C
Aminoacidul ce iniiaz sinteza este:
ntotdeauna formil metionin la procariote
metionin - la eucariote.
Acest aminoacid se leag de un ARNt special (ARNt de iniiere). Acesta va
fi recunoscut de un factor de iniiere specific numit IF2.
n afara procesului de biosintez ribozomii se gsesc sub form disociat a
celor dou subuniti, reasocierea lor fiind realizat de ctre ARNm.
Se formeaz complexul de preiniiere la care particip :
Subunitatea ribozomal 30S ce se fixeaz la captul 5 al moleculei
ARNm, ncadrnd codonul AUG care leag ARNt-formil-Met.
Factorii de iniiere, ce acioneaz n modul urmtor:
IF1 leag subunitatea mare (50S);
IF2 recunoate i leag ARNt-formil-Met;
IF3 leag subunitatea ribozomal mic (30S) de ARNm
Fixarea subunitii ribozomale mari de subunitatea ribozomal mic se face
n aa fel nct ARNt-formil-Met s fie ncadrat concomitent cu codonul
AUG al ARNm n locusul peptidil (P).
Procesul consum energie - GPT
Locuri partiale
E P
A
IF 1
IF 2
IF 3 30 S
f Met
ARN
m
GTP
f Met
ARN
m
5'
3'
AUG NNN
Subunitatea 50 S Legarea
subunitatii mari
GDP+P
i
IF 1
IF 3
IF 2
30 S
IF1,IF2,IF3
E P A
50 S
ARN
m
30 S
5'
3'
AUG NNN
f Met
Elongarea
n A liber se va fixa ARNt - AA2
Necesit factor de elogare (EF-Tu) i hidroliza unei molecule GTP.
Dup fixare, enzima peptidil transferaza hidrolizeaz AA-ARNt din P i l
leag de AA2 din (A) printr-o legtur peptidic.
vor fi: un ARNt liber n poziia P i un dipeptid (H
2
N-formil-Met AA2) n
poziia A.
formil Met va constitui captul N-terminal al viitoare proteine.
sub aciunea unui factor de elongare EF-G (translocaz) i cu consumul
GTP are loc micarea ribozomului (translocarea) de-a lungul ARNm pe
direcia 5 3, pe o distan de un codon.
ARNt liber din P ajunge n E de unde va fi eliberat. n acelai timp ARNt-
dipeptid din poziia A ajunge n poziia P. n A, devenit liber este ncadrat
acum urmtorul codon pe direcia 5 3 din ARNm.
n A se va fixa ARNt-AA3.
Dup aceast fixare peptidil transferaza detaeaz dipeptidul (H
2
N -
formil-Met AA2) din poziia P i l leag printr-o legtur peptidic de AA3
formndu-se tripeptidul H
2
N - formil-Met AA2 AA3.
Procesul se repet, urmnd aceleai etape, fiecrui codon din sectorul
codant al ARNm fiindu-i ataat cte un aminoacid transportat de ARNt cu
anticodon complementar.
Terminarea sintezei i eliberarea proteinei
Semnalul de terminare - codoni non-sens (UAA, UAG, UGA) n secvena
ARNm ce ajunge la citire n A
intervin 3 factori de eliberare (RF1 i RF2 ce recunosc codonii stop, iar RF3
i o molecul GTP elibereaz proteina i disociaz complexul de iniiere n
elementele componente)
n general de o molecul ARNm se ataeaz simultan mai muli ribozomi,
complexul numindu-se polizom.
sintetizeaz concomitent acelai tip de protein.
Diferene ale procesului de translaie la eucariote
Primul AA din complexul de iniiere al translaiei este metionina i nu formil-
Met.
ARNm nu are secvena de recunoatere pentru fixarea ribozomilor,
deoarece ARNm nu se leag de ARNr ci doar de proteine ribozomale.
Ribozomul ncepe translaia la codonul AUG care este localizat ntr-o
secven specific numit secven de consens Kozak (CAAAAUG).
Factorii de iniiere se numesc eiF i sunt n numr de cel puin 6.
Energetica procesului de translaie
Legarea unui AA necesit consumul a 4 legturi macroergice
Efectul Wobble
Legarea complementar codon ARNm - anticodon-ARNt nu este perfect
constatndu-se c este obligatorie complementaritatea doar a primelor
dou nucleotide din codon, n timp ce pentru cea de-a 3-a exist mai
multe variante.
De exemplu 3 codoni pentru glicin (GGU; GGC; GGA) din ARNm pot fi
recunoscui i legai de un singur tip de ARNt cu secvena anticodonului
CCI.
Acest efect, descoperit de Crick, este cuplat cu degenerarea codului
genetic, ambele avnd ca scop limitarea efectului mutaiilor. Datorit
efectului Wobble, dac mutaia afecteaz doar a 3-a nucleotid dintr-un
codon ARNm, ea nu va avea repercusiuni asupra structurii proteice.
Fidelitatea procesului de translatie
Rata de eroare este de un aminoacid greit ncorporat la 10
4
aminoacizi ncorporai
corect, conform secvenei ARNm, ceea ce nseamn c aproximativ 1 din 25
molecule proteice de mrime medie (400 aminoacizi) poate s conin o eroare de
sintez.
depinde de acurateea celor dou mecanisme de adaptare: legarea fiecrui
aminoacid de molecula de ARNt corespunztoare i complementaritatea
perechilor de baze din codonii ARNm cu anticodonii ARNt.
Celulele i-au dezvoltat mecanisme de reparare proofreading pentru a reduce
numrul de erori din aceste dou etape cruciale ale sintezei proteice.
Realizarea conformaiei finale a proteinelor (folding)
n sinteza proteinelor mari adoptarea conformaiei este un proces asistat.
Pt. proteinele mari ce conin puni S-S, dei informaia este controlat de structura
primar, totui obinerea conformaiei nu se face n mod spontan.
s-a constatat c n cazul ocului termic asupra celulelor cresc foarte mult un tip de
proteine ce au fost denumite proteine de oc termic (Hsp = Heat shock proteins).
proteine ce asist adoptarea conformaiei corecte la sinteza proteinelor mari.
Chaperone
cuca lui Anfinsen Chaperon-ele fixeaz captul N-terminal i proteina n
sintez ca ntr-o cuc de protecie, ferind proteina de interaciuni
proteina i dezvolt conformaia corect dictat de structura primar.
La acest proces asistat de mpachetare (folding) particip dou tipuri de enzime:
Protein-disulfitizomeraza (PDI) care rupe punile S-S incorecte i le reface n
locurile corecte. Concentraia PDI este crescut n RE unde sunt sintetizate
proteinele de secreie.
Peptidil-prolin-izomeraza (PPI) care aranjeaz resturile de prolin n poziiile
cis i trans.
Dirijarea i secreia proteic
Cnd lungimea polipeptidului n curs de sintetizare n complexul
ribozom ARNm ajunge la aproximativ 30 de aminoacizi, captul su
N-terminal poate urma una din alternativele:
1. Importul cotranslaional - caracteristic proteinelor de secreie.
Polipeptidul se va asocia cu membrana reticulului endoplasmic i va
fi transferat prin membran n lumenul reticulului endoplasmic, acest
proces desfurndu-se n paralel cu sinteza proteic.
La terminarea sintezei, polipeptidul fie rmne n RE, fie va fi
transportat de ctre diverse vezicule, complex Golgi sau o alt
destinaie final.
Proteinele membranare de structur sunt inserate dup sintez n
membrana reticulului endoplasmic (majoritatea lor), iar o mic parte
sunt transportate n lumen.
2. Importul posttranslaional - este destinat proteinelor intracelulare
sinteza sa se va desfura numai n citosol.
Cnd sinteza polipeptidului este complet, acesta este eliberat de
ctre ribozom n citosol unde va rmne sau va fi transportat n
organite apropiate prin import posttranslaional.
Modificri posttranslaionale
Forma final a unei proteine, fixarea i funcionarea acesteia sunt
rezultatul unor procese multiple i complexe, n care catena
polipeptidic nou sintetizat sufer modificri chimice, de mrime i
conformaie. Dintre aceste procese se pot enumera:
1. La prokariote, gruparea iniiatoare N-formil-metionina este
nlturat ntotdeauna din proteina matur. La eucariote deseori
metionina i cteodat aminoacizi N-terminali sunt ndeprtai
din structura produsului proteic final.
2. Scindri ale catenei polipeptidice - se elimin fragmente ce
menineau proteina n stare inactiv sau fragmente cu rol
temporo-spaial ce au dirijat transportul i inserarea proteinei n
structura celular final. Ex. insulina
3. Procesul de splicing proteic (analog cu splicing-ul ARN),
nltur inteinele (analogi proteici ai intronilor din ARNm) i
ataeaz exteinele (analogi proteici ai exonilor din ARNm)
pentru a realiza secvena proteinei mature.
4. Modificri chimice ale AA
n cursul sau dup sintez proteinele sufer modificri chimice care:
sunt indispensabile realizrii activitii lor biologice
sunt predecesoare inactivrii i distrugerii lor.
Modificrile pot fi : - enzimatice / neenzimatice
- reversibile / ireversibile
A. Modificri neenzimatice
Racemizarea aminoacizilor, ei trecnd din forma L n D
Glicarea (glicozilarea) se refer la legarea neenzimatic printr-o legtur
ceto-amidic a glucozei de gruprile amino ale proteinelor plasmatice. Ex.
glicolizarea hemoglobinei.
Carbamilarea - realizat de ureea din snge asupra proteinelor plasmatice.
Oxidarea catenelor laterale ale aminoacizilor din proteine. Acest fenomen
afecteaz n proporie de 30-40% proteinele parial distruse i nefuncionale
de la persoanele n vrst.
B. Modificri enzimatice
ataarea de resturi glucidice glicoproteine
acilarea proteinelor
formarea de legturi intra sau intercatenare
a. Ataarea de resturi glucidice cu obinerea de glicoproteine
Afecteaz mai ales proteinele de secreie i proteinele membranare.
Ataarea de glucide asigur:
realizarea structurilor necesare pentru funcia biologic
protecie mpotriva proteazelor
Rezult 2 tipuri de glicozilri : a) N-glicolizarea modificare
cotranslaional (Asn)
b) O-glicolizarea modificare
posttranlaional(Ser, Thr)
b. Acilarea proteinelor (lipidarea)
acilarea gruprilor amino ale resturilor de AA bazici cu acizi grai (miristic, palmitic).
N-miristoilarea la captul N-terminal al proteinei proteina se leag de faa
extern a membranei plasmatice.
Gliptarea la captul C se fixeaz o molecul complex ce conine glicero-
fosfo-inozitol (fosfatidil-inozitol).
Palmitoilarea n care restul palmitoil se leag de AA hidroxilai sau de Cis. i
aceast legare permite ancorarea de partea extern a membranei plasmatice.
Izoprenilarea legarea de Cis de la captul C-terminal. Proteinele izoprenilate
(Ras) se fixeaz de partea intern a membranei plasmatice.

c. Formarea de legturi intra sau inter catenare
Formarea de puni de Sulf, puni ditirozin, legturi Gln-Liz, metilarea catenei laterale
la Arg, His, Liz, -carboxilarea Glu, iodinarea Tir.
Controlul expresiei genice
controlul sintezei proteice este de fapt controlul expresiei genelor.
Teoretic - la nivelul tuturor etapelor procesului gen ARNm
proteine.
n general controlul are loc majoritar la nivelul transcripiei, procesul
oferind economicitate i rapiditate.
Controlul este diferit pentru procariote i eucariote.
La procariote este de tip negativ (inhibiie);
la eucariote este de tip pozitiv (activare).


Controlul expresiei genelor la procariote

majoritar la nivelul transcripiei. (Jacob i Monod - premiul Nobel in 1962 - teoria
operon-ului).
genele ce contribuie la aceeai cale metabolic sunt situate mpreun, fiind reglate
mpreun.
segmentul de gen corespunztor sintezei unei catene polipeptidice se numete
cistron.
Mai multe cistroane aezate n tandem vor constitui o gen structural care va
codifica enzimele unei ntregi ci metabolice.
n amonte gen reglatoare proteine represor a genei reglate. Aceast
protein se leag la o poriune din gena structural, aflat ntre promotor i genele
codante i numit operator.
Secvena de ADN ce cuprinde promotorul, operatorul i poriunea codant se
numete operon.
n lipsa inductorului proteina represor sintetizat de gena reglatoare se fixeaz
specific de gena operator blocnd astfel gena promotor i mpiedicnd transcripia. n
aceste condiii nu va avea loc sinteza proteinei.
Introducerea inductorului face ca aceasta s se lege de proteina represor blocnd
legarea acesteia de gena operator. n aceste condiii gena promotor se deblocheaz
iniiind transcripia genelor structurale cu sinteza proteinelor implicate n metabolismul
enzimei respective.
n cadrul acestui mecanism de reglaj avem doar 2 laturi : inducia i represia.

Acest tip de reglare este posibil deoarece timpul de njumtire a ARNm este
foarte scurt (de ordinul minutelor).
transcriptie
ARN
m
translatia
proteina represoare
1
2
3
P I
P O Z Y A
P I
P O Z Y A
transcriptie
ARN
m
2
translatia
proteina represoare
lactoza ( )
3
represor inactivat
4
ARN
m
5
beta-galactozidaza
permeaza
acetilaza
Modelul lac operon
-galactozidaza
permeaza
-acetilaza
Controlul expresiei genelor la eucariote
mult mai complex datorit cantitii mult mai mari de ADN, organizrii superioare a
acestuia, a localizrii n nucleu a ADN-ului i a timpului de njumtire al ARNm mult
mai lung.
La om doar 2-5% din ADN este transcris sub form ARNm.
reglajul se realizeaz prin activarea unor gene cu ajutorul unor proteine
activatoare i nu prin blocarea activitii genelor, ca la procariote.
Este un tip de reglaj pozitiv deoarece este mai avantajos s activezi 2% din
materialul genetic dect s inhibi 98%.
Diversitatea celular nu este produsul pierderii unor gene n cursul diferenierii
celulare ci al modificrilor expresiei genelor. Acest lucru se demonstreaz simplu,
injectnd ntr-o celul ou anucleat de mamifer nucleul unei celule difereniate de
mamifer adult, oul astfel rezultat genernd un animal sntos, identic cu cel de la
care a provenit nucleul (clonare).
Proteinele reprezint reflexia final a expresiei genelor; se clasific astfel:
proteine comune tuturor celulelor dintr-un organism cum ar fi: proteine
structurale din cromozomi, ARN polimeraze, enzime de reparaie ale ADN,
proteinele ribozomale, proteine din citoschelet, etc.
proteine caracteristice unor anumite esuturi. De exemplu, hemoglobina se
gsete doar n seria eritrocitar.
Celulele umane produc n medie ARNm corespunztor a 10 - 20000 de gene dintr-un
total estimat de 30000 - 40000 gene.
Modificrile post transcripionale i post translaionale fac posibil ca o gen s
genereze o ntreag familie de proteine.
Reglarea se face prin 2 tipuri de mecanisme:
1) Reglaj genetic pe termen scurt sau reversibil n urma crora
se modific activitatea unor gene, fapt exprimat prin fluctuaii n
sinteza de ADN, ARN i proteine.
2) Reglaj genetic pe termen lung (ireversibil), ce implic
mecanisme legate de diferenierea celular i care au loc n
cursul dezvoltrii ontogenice. Acest tip de reglaj este ntiprit n
secvena ADN.
Nivelele la care controlul expresiei genelor este realizat :
controlul transcripional, ce regleaz unde, cnd i ct este
realizat transcrierea genei.
controlul procesrii ARN
controlul transportului i localizrii ARN
controlul translaional
controlul degradrii ARNm
controlul activitii proteinelor
Puncte de control al reglajului expresiei genelor
Controlul la nivelul transcripional
forma predominant n reglare expresiei majoritii genelor.
1. Represia transcriptiei este un mecanism esenial n controlul expresiei
genice. Procesul este realizat de proteine represoare care acioneaz asupra
genelor int direct, prin domeniile de legare a ADN, sau indirect prin interaciunea cu
proteinele legate de ADN.
Pentru a inhiba procesul transcripional, o protein represor realizeaz:
mascarea unui domeniu de activare a transcriptiei
blocheaz interacia dintre un activator i alte elemente ale complexului de
transcripie
ndeprteaz un activator de ADN.
Metilarea ADN - la nivelul resturilor de citozin din promotor, necesare legrii
factorilor generali de transcripie. Cromatina activ transcripional este nemetilat.
Factorii de transcripie cis au situsuri de legare bogate n GC i din acest motiv
metilarea resturilor de citozin din formaiile dinucleotidice CG va anula capacitatea
de legare a acestora i implicit va bloca transcripia. Metilarea CG este realizat de
ADN metil transferaze.
n celulele normale, metilarea ADN exist predominant n regiunile repetitive, cum ar
fi ADN satelit sau elemente transpozabile (LINES, SINES). Regiunile CG din
promotorii genelor sunt n general nemetilate, asigurnd astfel transcripia acestora.
Reducerea metilrii regiunilor repetitive creeaz instabilitate genomic,
favoriznd apariia de mutaii,
Metilarea CG din promotorii genelor represeaz transcripia.
Dac acest proces inhib transcripia genelor represoare de tumori, atunci se
creeaz condiii de dezvoltare a procesului neoplazic.
Influena metilrii ADN n reglarea transcripiei genelor tumor supresoare
2. Controlul vitezei de iniiere a transcripiei este realizat
prin factorii amplificatori sau inhibitori ce cresc sau reduc viteza de
transcripie prin formare complexului de iniiere. Reglarea prin
fosforilare-defosforilare a unor factori de iniiere a translaiei, de
exemplu eIF-2, este o aciune de rspuns fa de diferii factori de
mediu (temperatur, factori de cretere sau alimentari, infecii, etc.)
3. Splicing alternativ. Cel puin 1/3 gene umane produc
proteine multiple utiliznd acest mecanism. Reglarea splicing-ului
ARN genereaz diferite versiuni ale aceleiai proteine n diferite
esuturi. Reglarea se face pe baza competitivitii situsurilor de
splicing, obinut prin aciunea proteinelor reglatoare.
4. Situsuri alternative de iniiere sau de terminare a
transcripiei ARN (puncte de start sau stop diferite). Unele gene sunt
transcrise pornind de la puncte de start diferite i transcrierea se
termin n segmente de poliadenilare diferite.
Ca urmare ARNm rezultat va avea capete 3 sau 5 diferite.
De ex. glucokinaza din hepatocite i cea din celulele
pancreatice au dimensiuni diferite, deoarece ntre ARNm
corespunztor celor dou forme enzimatice exist diferene de
26 000 nucleotide.
5. Modificri de editare ale ARN. n general exist o colinearitate
ntre exonii din gen, ARNm, protein. Exist cazuri n care ARNm dup
maturare este modificat enzimatic n nucleu. La mamifere acestea constau
de obicei n modificarea unei baze azotate din structura ARNm n timpul
transcripiei, rezultatul fiind modificarea unui codon din structura ARNm.
De exemplu enzima ARN-adenozin dezaminaz transform un rest de
adenin hipoxantin, fapt ce modific Glu Arg n viitoarea protein ce
regleaz un canal ionic din creier, proteina implicat n dezvoltarea
creierului.
n nucleele celulelor intestinale, ARNm pentru apolipoproteina B este
supus aciunii enzimei citidindezaminz care modific citidina din codonul
CAA care se transform n UAA (codon stop) ceea ce va bloca sinteza
proteinei la acest nivel. Din acest motiv spre deosebire de apolipoproteina B
din ficat (4536 AA) numit ApoB 100, n intestin vom avea ApoB 48 ce
conine 2152 AA.
6. Reglarea transportului ARN din nucleu n citoplasm. Se
consider c doar 1/20 din totalul ARN sintetizat n nucleu trece n
citoplasm. Majoritatea ARN este degradat n nucleu de un complex
proteic numit exozom: principalul criteriu fiind un proces incomplet de
splicing.
7. Localizare ARNm n diferite regiuni ale citoplasmei este n
funcie de diferite secvene semnal ce se gsesc n segmentul terminal 3 al
ARNm, ntre codonul stop i secvena terminal 3 poli A. De exemplu
ARNm pentru actin este localizat n fibroblaste la nivelul unei zone bogate
n filamente de actin.
Controlul la nivel translaional

1. Blocarea situsului de start al translaiei de ctre proteine supresoare,
reglate de efectul fiziologic al proteinei translatate. Astfel o fero-protein blocheaz
translaia ARNm al feritinei (protein de stocare a fierului) atunci cnd concentraia
celular a Fe
2+
crete.
2. Centre interne multiple ale ARNm pentru iniierea sintezei proteice. Aceste
centre iniiaz sinteza, srind peste iniierea prin codon AUG + factor de iniiere a
translaiei. Acest mecanism este utilizat de virusuri ce blocheaz sinteza proteic a
gazdei i orienteaz sinteza pe proteine virale ce posed centre interne diferite
pentru iniierea sintezei.
3. Controlul stabilitii ARNm. Principala cale utilizat n degradarea ARN
este scurtarea cozii de poliadenin (pe direcia 3 5), iar cnd mai rmn
aproximativ 30 resturi adenin este ndeprtat i protecia de la captul 5 i ARNm
este degradat rapid. Fiecare ARN are n segmentul terminal loci (secvene specifice)
pentru legarea de proteine ce cresc sau scad viteza de scurtare a regiunii
poliadenin.
O cale de prelungire a vieii ARNm este lungirea poliadeninei cu noi uniti. De
exemplu estradiolul crete durata de via a ARNm a vitelogeninei (ou) de la 30 ore la
200 ore; mecanismul se desfoar printr-o poliadelinare la nivelul citoplasmatic;
prolactina favorizeaz lactaia prelungind durata de via a ARNm pentru cazein.
4. Controlul factorilor ce intervin n translaie (factori de iniiere, elongare
i terminare). Factorii de translaie pot fi blocai sau activai prin aciunea unor
inhibitori sau a unor procese de fosforilare / defosforilare.
Controlul expresiei genelor prin molecule ARN
98% din ARN obinut prin transcripie provine din zona necodant (98% din
totalul ADN) pentru proteine.
Funciile acestor tipuri de ARN sunt de:
legare i blocare a ARNm (inhibitori translaie)
legare i blocare a ADN (control transcripie) interferen ARN
legare i blocare proteine (blocare transcripie).

Inhibitori naturali i chemoterapeutici ai expresiei genelor
1. Inhibitori ai transcripiei
Sunt n general inhibitori ai ARN polimerazei.
la procariote rifampicin antibiotic selectiv.
utilizare n tratamentul TBC, acest antibiotic blocnd dezvoltarea
Mycobacterium tuberculosis.
Avantajul tratamentului este toxicitatea redus.
-Amanitina este o toxin din ciuperca
Amanita phaloides, care blocheaz selectiv
ARN polimeraza II (ce sintetizeaz ARNm)
de la eucariote. Din acest motiv produce
intoxicaii grave la om.


2. Inhibitori ai translaiei

Penicillium produce inhibitori antibacterieni - antibiotice.
aceste antibiotice sunt selective fie pentru procariote (streptomicina,
tetraciclin, eritomicin), fie pentru eucariote (cicloheximid, puromicin).
Multe antibiotice afecteaz funcionarea ribozomilor la bacterii:
Aminoglicozidele (streptomicin, neomicin, tobramicin, gentamicin,
amikacin) se leag ireversibil de subunitatea 30S a ribozomilor bacterieni,
blocnd activitatea peptidil transferazei.








streptomicina gentamicina
Tetraciclinele (tetraciclin,
doxiciclin, demeclociclin) se
leag reversibil la subunitatea
30S, inducnd modificri
conformaionale ce mpiedic
alinierea codonilor ARNm cu
anticodonii ARNt.



Macrolidele (eritromicin,
azitromicin, claritromicin) se
leag reversibil de subunitatea 50
S i inhib activitatea peptidil
transferazei.




Streptograminele (quinupristin,
dalfopristin) mpiedic legarea
ARNt de subunitatea 50 S.






cloramfenicolul blocheaz
peptidil transferaza la procariote






puromicina este asemntor unui
aminoacid-ARNt interfer cu
transferul peptidei n structura
50S, provocnd ntreruperea
prematur a sintezei proteice.
(Eucariote)

Toxine
ricina, o protein produs de
Ricinus communis, catalizeaz
ruperea subunitii 60S
ribozomale, fiind extrem de toxic
pentru eucariote.

Cicloheximida inhib peptidil
transferaza la eucariote. Datorit
toxicitii nu mai este folosit ca
antibiotic pentru tratamentul
uman, eventual ca antifungic n
agricultur.

toxina difteric - o protein
produs de microorganismul
Corynebacterium difterie.
Toxina blocheaz factorul de
elongare EF-2 (translocaz) de la
eucariote, blocnd astfel
regenerarea celular.