LPDAT BUIANU VERGINIA (2002) Cercetri privind eficiena tehnic i
economic a nsmnrilor artificiale la suine. Tez de Doctorat, USAMV Bucureti
15. LICIU G., O.ROCA (1999) nsmnarea artificial la porcine. Ghid practic. Ed. Ceres, Bucureti 16. MAN C. (1986) MAN C. (1986) Lucrri practice la Zooigien. Tipo Afronomia, Cluj- Napoca 17. MAN A.C., I. IVAN, MARIA CIUPE (2002) Aspects consernant lelevage des suides dans les menages de la populations du departamend de Cluj. Buletin USAMV, 47, 96 18. MAN A.C., C.MAN, D.FORGACIU, MARIA CIUPE (2005) Influence of excesive temperature on nursing sows in farming system. Bull. USAMV Cluj-Napoca, vol.61, 394 19. MAN C. (2007) Zootehnie ecologic. Ed.Risoprint, Cluj-Napoca 20. MICLEA V., I.LADOI (1997) Biologia reproduciei animalelor de ferm. Ed. Bahai, Cluj-Napoca 21. ORGEUR P. (2002) La relation mere-jeune chez les porcins: de la naissance au sevrage. INRA, Prod.Anim, 15, 185-198 22. PRUNIER A., H.QUESNEL, M.MESSIAS DE BRAGANCA, A.Y.KERMABON (1996) Enironmental and seasonal influences on the return-to-oestrus after weaning in primiparous sows a review. Livest. Prod. Sci., 45, 103-110 23. RENAUDEAU D. (2001) Adaptation nutritionnelle et physiologique aux temperatures ambiantes elevees chez la truie en lactation. These Universite de Rennes, 1, 160 24. RENAUDEAU D., J.NOBLET, J.Y.DOURMAND (2003) Effect of ambient temperature on mammary gland metabolism in lactating sows. J.Anim.Sci. 81, 217-231 25. ROMAN M. (2003) Ameliorare i reproducie. Brour, 1 26. ROMAN M., L.HARGEAGA, ADRIANA OACHI (2003) nsmnarea artificial la animalele de ferm. Ed.Argonaut, Cluj-Napoca 27. ROCA O. (1994) Biotehnica reproduciei la porcine prin nsmnare artificial. Ed.Ceres, Bucureti 28. ARA A. (2001) Alimentaia animalelor de reproducie. Ed.Risoprint, Cluj- Napoca 29. STOICA ANGELA i colab. (1998) Rezultate practice privind valorile unor indici de reproducie la scroafe, Ed. Mirton, Timioara 30. STOICA ANGELA (2001) Factorii care influeneaz fertilitatea, fecunditatea natalitatea i prolificitatea la animale. Rev.Zoot.i Med.Vet, 2, 1-10 31. VIZCARRA J., J.FORD (2003) Validation of sperm mobility in boars and stallions. Theriogenology, 66, 1091-1097 32. WENIGER J.H. (1974) Orientation on the future of pig production. Livestock Production Science, vol II, 3 Insamantarile artificiale reprezinta o biotehnica a reproducerii animalelor, componenta a manipularilor genetice care asigura procesul genetic al efectivelor. Datorita cresterii semnificative a eficientei utilizarii materialului seminal prin aplicarea insamantarilor artificiale este posibila utilizarea la reproducere a celor mai valorosi genitori masculi testate dupa descendenta si cu insusiri morfo-productive care maresc presiunea de ameliorare a efectivelor. Astfel, un taur testat, poate avea pe durata vietii intre 100.000 si 200.000 produsi , vierul, peste 1.000 intr-un an, iar un armasar, peste 100 manji pe sezon. La speciile cu un interval mare intre generatii, asocierea insamantarii artificiale cu conservarea prin congelare a spermei permite crearea unor banci de material disponibile dupa finalizarea la taurii de 6 sau 7 ani, a testului de performare dupa prima lactatie normala a ficelor. In plus, peste 90% din caracterele morfo-productive, care au un determinism genetic, pot fi ameliorate prin folosirea insamantarii artificiale, dupa stabilirea indicilor de heritabilitate. Afluirea masculilor donatori in ferme specializate permite mentinerea lor in conditii optime de sanatate si intretinere cu productie seminala de calitate si indemna de boli cu transmitere venerica (bruceloza, tricomonoza , vibroza). Garantarea indemnitatii spermei fata de principalele boli infecto- contagioase face posibil schimbul interconditional de gene prin importul-exportul de material seminal congelat (M.S.C) fara suportarea inconvenientelor prilejuite de carantina. Derularea diferitelor etape de la insamantarea artificiala majoreaza substantial aportul factorului uman la procesul reproducerii, fapt care face necesara intocmirea si pastrarea unor evidente zootehnice complrte ,reducand prin acestea pericolul transmiterii in descendeta a unor boli genetice. Alte avantaje minore ale insamntarii artificiale se refera la reproducerea artificiala a unor specii monogene (vulpile) , hibridarea altor indivizi oportunand obtinerea unor specii cu talie si greutate corporala, care face posibila capulatia, reproducerea unor caini timizi sau care prezinta o erectie prematura a bulbilor perieni a Catelelor, care desi manifesta estru si ovulatie seminala, refuza sa accepte masculii. Dezavantajele insamantarii artificiale constau in posibilitatea interferarii erorilor umane in toate etapele prelucrarii, conservarii, transportului , depistarii esterului si inseminarea femelelor. Este necesara existenta unui personal inalt calificat, cu manulitate, cunostiinte si care sa intocmeasca riguros evidentele reproductiei. Prin neglijarea profiloxiei, bolilor genetice, insamantarile artificiale pot favoriza diseminarea unor boli, cum ar fii boala chistica, sindromul spastic, absenta libidoului si defecte de coformatie.
Istoricul insamantarilor artificiale S-a relatat despre obtinerea unui produs de la un armasar valoros (secolul XIV) dupa preluarea spermei cu un tampon de vata dupa manta unei iepe si intoducerea lui imediat in vaginul unei iepe in calduri. In 1677 Leevwenhock si Homm au observat pentru prima data celulele spermatice cu un dispozitiv optic de marire. Mai tarziu, in 1751, Spolozani demonstreaza capacitatea fecundanta a spermatozoizilor. Millois obtine produsi de la 15 din 19 catele insemintate artificial, intre anii 1884-1896. In 1907 Ivanor raporteaza obtinerea de rezultate positive prin inseminarea artificiala la iepe, vaci si oi, extinderea acestora in U.R.S.S , atingand in 1938 cifra de 120.000 vaci si 15 milioane de ovine. Dupa aceasta data S.U.A realizeaza reproducerea a 21% in 1956 si a 52% in 1969 di efectivele de taurine, prin aplicarea insamantarii artificiale. Danemarca, Japonia si Israel utilizeaza practice nuamai insamantarea artificiala la taurinle pentru lapte. La suine Metoda are extindere mare in Asia si Europa. 2.4. Recoltarea la vier Aplicarea pe scara larga a insamantarilor artificiale la porcine a intampinat si inampina dificultati din cauza unor greutati in conservarea spermei, in cunoasterea completa a fiziologiei genitale la scroafa si a timpului optim de inoculare a spermei. Din aceasta cauza, fecundalitatea care se obtine dupa insamantare este de 5-6% si este inca nesatisfacatoare in practica. Recoltarea spermei se face cu vagina artificiala, in functie de particularitatile anatomo- fiziologice ale organelor genitale la vier. In prezent se utilizeaza diferite metode de vagina artificiala (sovietic, norvegian, japonez, etc.); vagina artificiala de tip sovietic se utilizeaza si in tara noastra , cu mici modificari. Recoltarile mai dese, la intervale mai scurte determina scaderea concentratiei si viabilitatii spermatozoizilor.
PRINCIPIILE SI TEHNICA INLOCUIRII SPERMEI In executarea inocularii spermei trebuie sa tinem seama de urmatorii factori: - prin felul de introducere a spermei sa se asigure intalnirea spermatozoizului cu ovule in cele mai bune conditii , fara a diminua puterea de fecundare a spermei; - inocularea spermei sa se faca in momentul in care ovula este maturate, deci in apropierea momentului ovulatiei; Tipurile de insamantare artificiala. Metodele de introducere a spermai in organelle genitalefemele, variaza in functie de specia de animale.Insamantrea de tip vaginal este metoda prin care sperma este depusa in vagin. Are dezavantajul ca trebuie introdusa o mare cantitate de sperma pentru a asigura fecundatia. Aceasta metoda poate fii folosita la oile si vacile tinere, la care sperma nu poate fii inoculate in canalul cervical. Insamantarea de tip cervical este cea mai recomandata pentru oaie, vaca, capra. Sperma poate fii inoculate in partea anterioara a canalului cervical sau in partea profunda .
Insamantarile artificiale la iapa Aplicarea biotehnicii insamantarilor artificiale preznta uramatoarele avantaje si dezavantaje: - face posibila combaterea eficienta a durinei si anemiei infectioase - maximizeaza utilizarea la reproducere a genitorilor masculi deosebit de valorosi - prelevarea spermei la armasar este dificila si riscanta; - sperma armasarului are un aspect neomogen, componenta cu vascozitate inalta, secretate de veziculele seminale, trebuie indepartata inainte de prelucrare; - la temperatura camerei,spermatozoizii isi pierd capacitatea fecundate in 6 ore. - Durata mare a esterului face dificila aprecierea corecta a producerii ovulatiei sip e aceasta cale , insamantarea la timp optim. In conditiile prelucrarii proprii a spermei evitandu-se agitarea si scaderea temperaturii, sperma bruta poate fi folosita la insamantrea timp de o ora. Fractiunea spermatica cu vascozitate inalta se retine prin filtrare la recoltarea cu bazinul artificial , sau se indeparteaza mai tarziu cu o bagheta de sticla. Coborand treptat temperatura la 5 grade si diluand sperma bruta de 4 ori, capacitatea fecundata poate fi mentinuta timp de 3 zile. Pentru aceasta sperma se diminueaza initial 1:1, se asigura o racire la 5 grade in 90 minute; dilutiile ulterioare se fac tot la aceeasi temperatura. Indiferent de diluantul folosit inainte de congelare, sperma diluata trebuie concentrata prin centrifugare pentru a obtine o concentrare de 10 ori 20 mil.spermatozoizi/ml. Pentru asigurarea unei fecundalitati normale in uterul iepelor, trebuie depuse 1-2 miliarde spermatozoizi vii, cu un volum de 10-50 ml, in functie de talia iepelor. Inseminarea artificiala se poate face in a treia zi a caldurilor, cu repetarea dupa 48 ore, pana la incetarea caldurilor.Pregatirea femelelor in vederea insamantarii consta in contentia ca pentru monta, in bandajarea cozii si dezinfectarea vaginului perivulvare. Mana stanga acoprita cu o manusa si abundant lubrifiata se introduce in vagin, iar cervixul se tunelizeaza digital. Semileta din material plastic se aluneca in lungul mainii stangi, apoi se introduce in cervix; doza de insamantare se injecteaza cu o seringa.
Echipamentul necesar pentru inocularea spermei consta in : o seringa, un speculum si o lampa frontala. O alta metoda pentru inocularea spermei la iapa consta in folosirea unui flacon avand capacitatea de 50 cm, prevazut cu un dop de cauciuc, prin care trec doua tuburi de sticla. Unul din tuburi este mai lung si ajunge pana la fundul flaconului. De acest tub este atasat un cateter de cauciuc, lung de 75 cm. Al doilea tub de sticla este scurt si patrunde cu 1-2 cm sub dopul de cauciuc cu suflerie. Folosirea acestei metode evita introducerea aerului. In acest scop cateterul trebuie sa fie umplut complet cu sperma. Inocularea spermei: Iapa in calduri este cantentionata pentru a nu putea hevi. Se face toaleta regiunii perivulvare , spalandu-se cu apa si sapun si stergandu-se cu un prosop, sperma se injecteaza direct in uter. In acest scop seringa cu canula de sticla sau capatul cateterului atasat de flaconul cu suflorie se introduce la o adancime de 5-8 cm in gatul uterin, care in cazul caldurilor ramane deschis. Doza de sperma : Cantitatea de sperma necesara pentru o insamantre este de 15- 20 ml. Insamantarea se repeta la 48 ore, cat timp iapa prezinta calduri. In anotimpul rece, atat seringa , cat si celelalte instrumente folosite la insamantare trebuie incalzite la temperatura camerei (18- 25C ) , inainte de a fi introduse in organele genitale ale iepei. Sperma de armasar se poate folosi cu jumatate de ora de la recoltare , cu conditia sa fie tinuta la temperatura de 18- 25C. Folosirea spermei in capsule de gelatina la iepe: pentru a se evita fezionarea mucoasei uterine prin instrumente rigide, la iapa se poate folosi de asemenea sperma in capsule de gelatina. Se confectioneaza din gelatina capsule cilindrice cu o capacitate de 10 ml si se umple cu sperma diluata. Capsula se introduce cu mana in cervix si apoi se impinge in uter. La iapa se pot introduce mai multe capsule (3-4 bucati ) . Inainte de operatie mana tehnicianului trebuie sa fie dezinfectata si unsa cu vaselina. In cazul folosirii spermei conservate , aceasta trebuie adusa inainte de insamantare la temperatura de 18- 25C si apoi controlata prin examen microscopic. Dupa aceea , tinand seama de gradul de dilutie, se inoculeaza o cantitate ce trebuie sa contina circa 15 ml sperma bruta. Daca dilutia a fost, de exemlu, 1;2- 1;3 se vor inocula 30- 50 ml sperma diluata. O doza de sperma este necesar sa contina in medie 600- 800 milioane spermatozoizi. Timpul optim de insamantare : La iapa, deoarece este greu de precizat durata estrului, se recomanda insamantarea la fiecare trei zile, sau din doua in doua zile . Fecundatia iepelor insamantate artificial este destul de scazuta, ca si dupa monta naturala. Dupa primul ciclu de calduri poate ajunge la 70- 85%. Iepele se manifesta insa normal, caldurile raman insa greu fecundate, se poate folosi cu rezultate bune stimularea hormonala cu substante gonadotrope luteinizante. Prin administrarea pe cale subcutanata a 1.000 - 1.200 U.I gonadotrofina corionica se stimuleaza maturarea foliculara si ovulatia. Acest tratament se aplica in prima zi a caldurilor si dupa 24- 48 ore se produce ovulatia.
3.5. Inocularea spermei la scroafa Se acorda o deosebita atentie depistarii scroafelor in calduri si aplicare insamantarii in momentul cel mai favorabil pentru fecundatie. In acest scop unii autori recomanda utilizarea vierilor incercatori. Insamantarea scroafelor in calduri se face in functie de momentul ovulatiei, care se produce cu incepere de la 18 ore de la inceputul caldurilor si dureaza pana la 46- 54 ore. Insamantarea se va face deci in a doua zi si in a treia zi a caldurilor. In alegerea scroafelor in ca;lduri se vatine seama de comportarea animalului. Scroafa se opreste pe loc si nu mai inainteaza, chiar daca este impinsa de ingrijitor. Ingrijitorul facand apasari pe trenul posterior, animalul sta pe loc si se produce o tensiune musculara a corpului, insotita de redresarea urechilor. Simdromul este asemanator cu lordoza, reflex ce se observa la soboloance in calduri. Simptomul de imobilitate se observa la majoritatea scroafelor, 84% insa sunt si femele la care predomina starea de agitatie, insotita de grohaituri si inapetenta. Reflexul de imobilitate dureaza intre 13,5 si 44 ore in perioada de estrus. Inocularea spermei: Echipamentul pentru inocularea spermei diluate sau nediluate se compune dintr-un cateter de cauciuc semirigid, sau de ebonita, material plastic, etc. , lung de 50 cm, care poate fi atasat fie la o seringa cu o capacitate de circa 100 ml, la un vas de sticla cu sufferie, fie la o sticla de material plastic cu peretii etansi. In prealabil, scroafa in calduri este introdusa intr-un stand de monta , sau in lipsa acestuia fixata cu ajutorul unei frangii de maxilarul superior si tinuta de catre un ingrijitor. Cateterul lubrifiat cu parafina lichida si sterilizat, se introduce usor in vagin si apoi in cervix si in uter. Inocularea spermei se efectueaza cu multa atentie, pentru a nu refula in vagin. In acest scop, cateterul trebuie sa fie apropiat ca diametru de lumenul canalului cervical. Unele catetere sunt prevazute la extremitatea lor cu o manseta sau rondea din cauciuc sau material plastic, care impiedica refularea spermei dupa inoculare. Sperma introdusa in uter este supusa unui proces de resorbtie si se produce in decurs de 5 ore. Fecundatia va fi asigurata de spermatozoizii care in acest interval de timp ajung si trec de jonctiunea utero-tubara , fara a fi supusi procesului de liza din uter. Pentru ase evita liza unui numar mare de spermatozoizi in uter este necesar ca ei sa treaca cat mai repede prin uter si sa ajunga in portiunea incipienta a oviductelor. In acest scop KVATSHITKI a elaborat o metode de inoculare fractionata a spermei. Se inoculeaza initial sperma in uter si apoi imediat se inoculeaza o cantitate de 80-100 ml ser fiziologic, sau diluant in cavitatea uterina. Aceasta cantitate de lichid stimuleaza contractiile uterului, grabind trecerea spermatozoizilor in oviducte. Doza de sperma: Doza de sperma necesara pentru fecundatie variaza dupa calitatea ei. Se recomanda pentru inoculare o doza in medie de 40- 50 ml si cand sperma este de calitate superioara din punctul de vedere al concentratiei in spermatozoizi se poate inocula 30 ml. La stabilirea dozei de sperma trebuie sa tinem seama de numarul spermatozoizilor, iar o doza de sperma diluata sau nediluata sa contina peste 2 miliarde spermatozoizi. Rezultatele obtinute in urma insamantarilor artificiale la porcine nu sunt insa satisfacatoare 66%. In unele experiente efectuate in U. R.S.S, japonia, Anglia, etc. , s-a obtinut o fecunditate de 80% . Aceste rezultate ne fac sa credem ca printr-o perfectionare continua a tehnicii de insamantare artificiala la porcine se vaputea spori fecunditatea si prolificitatea pana la cea obisnuita prin metoda naturala. Timpul optim de insamantre ste in a 2-a si a 6-a zi a estrului.
Inseminarea artificiala (IA) de porcine este practicata pe scara larga in tarile cu o crestere intensiva a porcilor. In Europa de Vest, mai mult de 90% din scroafe sunt inseminate IA de mai mult de doua decenii. Introducere Comparativ cu imperecherea naturala, IA-ul este un instrument foarte util de a introduce gene superioare in efectivele de porci, cu un risc minim de boala. Rezultatul IA in mare masura depinde de calitatea materialului seminal si procedura de inseminare. In practica, materialul seminal proaspat, diluat pentru inseminare intracervicala este cel mai des folosit la porci. Materialul seminal se obtine de la vieri in ferme specializate sau de la Centre IA, prea puin prezente in Romania. in vest, acesta din urma ofera o diversitate de rase si linii genetice si distribuie materialul seminal gata de utilizare. Poate o soluie viabila de a relansa cresterea porcilor in Romania ar fi si implicarea medicului veterinar in realizarea unor astfel de centre locale sau regionale, dar aceasta este o alta discuie. in IA trei aspecte importante ar trebui sa fie luate in considerare. In primul rand, ar trebui sa fie utilizat numai materialul seminal de la vierii sanatosi. Vierii bolnavi pot sa ejaculeze sperma, care poate fi contaminata cu germeni patogeni. Materialul seminal contaminat ar putea conduce, prin urmare, la o transmisie rapida a agentilor patogeni si a focarelor de boli in efectivele de scroafe. in aceste condiii trebuie sa adoptam reguli foarte stricte de control al bolilor la vieri si mai ales a celor cu transmitere sexuala. Cel de-al doilea aspect este capacitatea de fertilizare a dozelor de material seminal produs. Potentialul de fertilizare al unei doze de material seminal este in mod inerent legat de calitatea spermatozoizilor in sine . Examinarea ejaculatului este necesara. Un al treilea aspect important al IA este procedura de prelucrare a materialului seminal. Acest lucru nu este important doar pentru a garanta o prezenta scazuta a microorganismelor, ci chiar mai mult, pentru a obine sperma de calitate, spermatozoizi viabili gata de utilizat in dozele de material seminal care pot fi utilizate mai multe zile. Procedura de dilutie si de manipulare a materialului seminal, proprietatile soluiilor folosite si micromediul pentru celulele spermatice pot influenta supra - vietuirea si longevitatea spermatozoizilor. Vom incerca sa analizam si sa abordam critic diferitele etape pe parcursul intregului IA. La porci, vom aborda procedura de colectare a materialului seminal, dilutia si prelucrarea, urmata de metode si tehnologii pentru a evalua calitatea materialului seminal, conditiile de depozitare si de caracteristicile soluiilor aspecte care sunt necesare pentru a mentine ridicata calitatea materialului seminal. in ultima parte vom aborda diferite strategii IA. 2. Colectarea de materialului seminal, dilutie si prelucrare Desi sistemele automate de colectare a materialului seminal au fost elaborate cu muli ani in urma, o practica eficienta poate fi si colectarea cu o mana inmanusata sau o vagina artificiala, de la un vier instruit pentru a monta o scroafa inactiva. Scroafele manechin, daca se utilizeaza, trebuie sa fie solide din constructie, fara margini ascutite si situate intr-o camera linistita, speciala de colectare a materialului seminal, cu o podea ne-alunecoasa. Un recipient preincalzit (38 C) va fi pregatit pentru colectare. Partea de sus a recipientului se va acoperi cu un tifon steril pentru a filtra materialul seminal. Capatul penisului este prins ferm cu o mana inmanusata si procesul de colectare este initiat cu presiune ferma pana la sfarsitul spiralei penisului, cu mana, astfel incat penisul sa nu se poata roti. Acest proces imita presiunea aplicata de forma "tirbuson" a vaginului scroafei.
Manusile de vinil se pot folosi, atenie, nu de latex, deoarece acestea sunt toxice pentru materialul seminal. Prima parte a ejacularii (presperm) trebuie aruncata. Este lichid apos clar si nu conine spermatozoizi (~ 25 ml), dar poate avea un numar mare de bacterii. Fractia spermatica bogata ar trebui sa fie colectata imediat (4-10 ml). Este foarte albicioasa in aparenta si contine 80-90% din toate celulele spermatice din ejaculat. Dupa ce fractiunea sperma-bogata este completa, restul de ejaculare este din nou mai clar, lichid apos, si nu ar trebui sa fie colectat (70-300 ml). Dupa colectare, filtru ar trebui sa fie aruncat si recipientul de colectare ar trebui sa fie plasat in apa calda. Materialul seminal ar trebui sa fie prelucrat in termen de 15 min. dupa colectare. Ejacularea dureaza pana la 5 - 8 min, dar poate continua pana la 15 min. Se poate colecta astfel aproximativ 100 pana la 300 ml de material seminal. Material seminal se poate colecta de la vierii in centre IA, in condiii optime fara a stresa masculul, de aproximativ 2 ori pe saptamana. Procesul de prelucrare ar trebui sa fie facut intr-o camera calda, cu echipament curat si steril. Soluiile care se adauga la materialul seminal trebuie sa evite socul rece prin diminuarea treptata a temperaturii. Un ejaculat normal contine, de obicei, sperma suficienta pentru a fi inseminate 15-25 de scroafe folosind tehnicile de IA conventionale. Fiecare doza trebuie sa contina 2-3 miliarde spermatozoizi in 80 -100 ml. 3. Evaluarea calitaii materialului seminal 3.1 Evaluarea concentratiei de spermatozoizi in ejaculat Numarul de spermatozoizi intr-o doza de material seminal este importanta pentru procesul de fertilizare. Pe de alta parte, centrele de IA au tendinta de a dilua ejaculatul cat mai mult posibil pentru a maximiza producia de material seminal. Variatia numarului de spermatozoizi intr-un ejaculat a fost descrisa frecvent intre diferitele rase de porci de ex Landrace, Duroc si Yorkshire, care este un prim factor care influenteaza doza de material seminal produsa. Nu numai diferentele in numarul de spermatozoizi, dar, si in volumul de spermei, variind astfel de la 100 la 300 ml, aspect care influeneaza si concentratia spermei. Variatia individuala in cadrul unei rase, de asemenea, este foarte importanta, demonstrandu-se o diferenta la fatare de 0.09 la 1.88 purcei atunci cand scroafele sunt inseminate cu 2*109 sau 3*109 spermatozoizi. Diferentele intre cele doua doze de material seminal au fost in mare masura dependente si de variatii individuale intre vieri. Un alt studiu arata ca utilizand 2 * 109 spermatozoizi pe doza apare o rata mai scazuta de fatare. Cert este ca rezultatele de fertilitate sunt mult mai mici atunci cand doze de material seminal utilizate sunt prea diluate. Un sfat general pentru numarul de spermatozoizi de buna calitate intr- o doza material seminal a fost setata la 3 * 109 spermatozoizi pe doza. Numarul de spermatozizi ar trebui sa fie adaptat si in funcie de caracteristicile morfologice sau motilitatea. Prin inmultirea volumului total de gel fara ejaculare (ml) ori concentratia de spermatozoizi pe ml rezultand numarul total de spermatozoizi. Volumul este in mod curent masurat prin cantarirea ejaculatului luand in considerare 1 gram egal cu 1 ml. Valorile de obtinute, totalul numarului de spermatozoizi sunt un bun indicator pentru a evalua spermatogeneza. Datele de mai sus indica in mod clar importanta unei determinari exacte a concentratiei de spermatozoizi in lichidul ejaculat. 3.1.1 Inspectia ejaculatului Evaluarea vizuala a opacitatii ejaculatului ofera o idee asupra concentraiei spermei. Cu toate acestea, aceasta metoda este foarte subiectiva si, prin urmare, nu este recomandata. 3.1.2 Camere de numarare Camerele de sticla utilizate pentru numararea spermatozoizilor pot fi de diferite tipuri, putand contoriza celule in general utilizand metoda volumului cunoscut. Hemocitometre, cum ar fi Neubauer, Thoma si camera Brker sunt camere de sticla reutilizabile cu volumul fix utilizate pentru numararea spermatozoizilor dintr-o granulaie. Camerele Makler sunt utilizate pentru evaluarea concentrarii, precum si motilitatea. Precizia camerelor de numarare este diferita si depinde de modul in care camera este umpluta.
The actual process of artificial insemination in a mare is not complicated, and can be learned very quickly. Unlike artificial insemination in cattle, which involves guiding the insemination pipette through the cervix via manipulation per rectum, equine AI is carried out completely vaginally. The equine rectum is not as durable as a bovines', and it is for this reason that rectal palpation by the lay person is not encouraged by most veterinarians and teaching facilities. In countries where international movement of cooled semen is easily achieved, all necessary health status documentation should be reviewed prior to insemination, and universally it is important to ensure that accompanying paperwork and/or semen identification confirms the identity of the stallion as being the correct one booked to breed the mare about to be inseminated - collection and shipping mix-ups do happen!! The mare is preferably secured in a palpation chute (breeding stocks), and her tail is wrapped and deflected to one side where it should remain throughout the whole insemination process to avoid contamination of the scrubbed area. Insemination per vaginum does mean that one of the most important parts of the process is the preparation, during which the perineal area may be cleansed as for surgery most commonly using an iodine preparation such as "Betadine". There are however arguments to be made against the use of anti-bacterial agents, or even just soap. It has been shown that such washing of the stallion's penis with antibacterial agents or soap may result in removal of natural protective flora and result in a subsequent overgrowth of opportunistic pathogens (Bowen, J.M., Tobin, N., Simpson, R.B., Ley, W.B., Ansari, M.M. (1982) Effects of washing on the bacterial flora of the stallion's penis. Journal of Reproduction and Fertility, Suppl. 32:41-45). The same effect was subsequently seen following washing of the mare's perineum (Ley, W.B.), so in mares that are to be bred multiple times during a cycle, we recommend washing solely with clean water. This philosophy may also be extended to all mares being bred. The perineal area is scrubbed using a surgical preparation scrub technique, starting centrally, and working outwards. Once the outer (unscrubbed) section is reached, the disposable paper towel or cotton is discarded, and a new piece used to return to the center to scrub outwards again. The final scrub should involve a little greater pressure to remove any surplus surface scrub liquid remaining, so that it may not carried into the vagina during AI. The region may be blotted dry using a single pat with clean paper towel.
Once the mare is prepared, the semen is removed from the shipping container and the insemination sample is slowly drawn through the insemination pipette into the syringe. As elsewhere with the process, sterility is important here too. Note that nobody is touching the pipette, which once the syringe is filled will be placed back into its sterile packaging until it is later introduced into the mare's vagina in order to inseminate. If a "disaposable shipper" is being used, it is likely that the semen is shipped in a syringe, and all that needs to be done is to remove the sealing cap from the tip of the syringe and attach a pipette. Note that syringes used for insemination or shipping of semen should be all-plastic rather than having a rubber plunger, as with some stallions that rubber plunger or the lubricant covering it may be spermicidal. Using a sterile lubricated gloved arm (a single-packaged sterilized glove may be used, or a glove from a regular box of gloves having been reversed to ensure maximum cleanliness), the inseminator will introduce their arm into the mare's vagina and identify the cervix - which should be found on the ventral (bottom) surface of the cranial (head- ward) portion of the vagina. The gloved thumb is placed over the end of the pipette prior to its introduction into the vagina. This prevents the pipette from picking up any contaminants which may subsequently be inseminated into the uterus along with the semen. The closer the mare is to ovulation, the more relaxed the cervix is likely to become. In the center of the cervix will be found a small depression, which is the opening to the uterus. One of the most apt descriptions of a cervix is that it is like a "small volcano" in shape protruding into the vagina. The inseminator will gently introduce the tip of the index finger through this depression, and then using the finger as a guide, slide the insemination pipette along it and into the uterus. It is important not to force the pipette at any point, as internal damage may occur if that is done, nor in most cases does the finger need to be introduced further than about the top knuckle (i.e. approximately 1 cm). With the tip of the pipette introduced into the uterus approximately and inch, or as far as possible without any resistance being met (whichever is less), the plunger of the syringe is slowly depressed introducing the semen. Before removal of the pipette, the syringe may be unhooked and rehooked so that 2 cc of air may be introduced behind the semen in order to clear the pipette of the remaining semen (prior to drawing up the semen into the syringe, the plunger can be withdrawn slightly to achieve this effect, thereby preventing the need to unhook the syringe later). It is important that excess air is not introduced into the uterus, and a very small portion of the semen should remain at the very end of the pipette when it is removed from the uterus. The arm should then be slowly withdrawn from the vagina. Procesul actual de inseminare artificial ntr-un cal nu este complicat, i poate fi nvat foarte repede. Spre deosebire de inseminare artificiala la bovine, care implic ghidarea pipeta de inseminare prin colul uterin prin manipulare pe rect, cabaline AI este realizat complet vaginal. Rectul ecvin nu este la fel de durabil ca un bovine ", iar acesta este motivul pentru care palpare rectal de laic nu este ncurajat de cele mai multe medici veterinari i faciliti de predare. n rile n care circulaia internaional a materialului seminal rcite este uor de realizat, toate documentele starea de sntate necesare ar trebui s fie revizuite inainte de inseminare, i universal este important s se asigure c nsoete documente i / sau a materialului seminal identificare confirm identitatea armasarului ca fiind cea corect rezervat la rasa iapa pe cale de a fi inseminate - colectare si transport mix-up-uri se intampla !! Mare este, de preferin, fixat ntr-un jgheab de palpare (stocuri de cretere), iar coada ei este nfurat i deviat ntr-o parte n cazul n care acesta ar trebui s rmn pe parcursul ntregului proces de inseminare pentru a evita contaminarea zonei frecat. Inseminarea pe transvaginal nu nseamn c unul dintre cele mai importante pri ale procesului este pregtirea, n care zona perineala poate fi curit ca pentru o interventie chirurgicala cel mai frecvent folosind un preparat de iod, cum ar fi "Betadine". Exist ns argumente pentru a fi adus mpotriva utilizrii de ageni anti-bacterieni, sau chiar doar spun. Sa demonstrat c o astfel de splare a penisului armsar despre ageni antibacterieni sau spun poate duce la eliminarea din flora protectoare naturale i duce la o cretere excesiv ulterioar de ageni patogeni oportuniti (Bowen, JM, Tobin, N., Simpson, RB, Ley, BM , Ansari, MM (1982) Efectele de spalat asupra florei bacteriene ale penisului Jurnalul armasar de reproducere i fertilitate, Suppl 32:.. 41-45). Acelai efect a fost ulterior observate dup splarea perineului iapa lui (Ley, BM), astfel nct n iepele care vor fi crescute de mai multe ori n timpul unui ciclu, se recomand numai splare cu ap curat. Aceast filozofie ar putea fi, de asemenea, extins la toate iepe fi crescute. Zona de perineu este splat folosind o tehnic chirurgical exfoliant preparat, pornind de la nivel central, i de lucru spre exterior. Dup seciunea de exterior (unscrubbed) este atins, prosop de hrtie de unic folosin sau bumbacul este aruncat, i o nou pies folosite pentru a reveni la centrul de la frecarea spre exterior din nou.Frecarea final ar trebui s implice o presiune puin mai mare pentru a ndeprta orice lichid exfoliant excedent de suprafa rmas, astfel nct acesta nu poate transportate n vagin n timpul AI. Regiunea poate fi ters uscat folosind un singur pat cu un prosop de hrtie curat. Odat iapa se prepar, sperma este scos din containerul de transport i proba inseminare este tras ncet prin pipeta inseminare n sering. Ca n alt parte cu procesul, sterilitatea este important aici. Reinei c nimeni nu se atinge pipeta, care odat seringa se umple va fi pus napoi n ambalajul su steril, pn cnd acesta este introdus mai trziu n vagin Mare, n scopul de a inseminate. n cazul n care se folosete un "expeditor disaposable", este probabil ca sperma este livrat ntr-o sering, i tot ce trebuie fcut este de a elimina capacul de etanare din vrful seringii i ataai o pipet. Reinei c seringile folosite pentru inseminare sau transport de material seminal ar trebui s fie toate din plastic, mai degrab dect cu un piston din cauciuc, ca nite armsari cu care piston din cauciuc sau lubrifiantul acoperire, poate fi spermicid. . Folosind un bra steril lubrifiat nmnuat (o singur ambalate mnu sterilizate pot fi folosite, sau o mnu de la o cutie regulat de mnui fiind inversat pentru a asigura o curenie impecabil), inseminator va introduce braul n vaginul iapa si identifica colul uterin - care ar trebui s fie gsite pe ventral (partea de jos), suprafaa craniului (cap-Ward) parte a vaginului.Mnu degetul mare este plasat peste captul pipetei nainte de introducerea sa n vagin. Acest lucru previne pipeta de la ridicarea oricror contaminani care pot fi ulterior inseminate in uter, mpreun cu materialul seminal.Mai aproape de iapa este de ovulaie, mai relaxat de col uterin este probabil s devin. In centrul cervixul se va gsi o mica depresiune, care este deschiderea catre uter. Una dintre cele mai detaliate descrieri apt de o col uterin este c acesta este ca un "vulcan mic", n form de proeminente n vagin.Inseminator va introduce uor vrful degetului arttor, prin aceast depresie, i apoi folosind degetul ca un ghid, glisai pipeta de inseminare a lungul ei i n uter. Este important s nu forai pipeta n orice moment, aa cum se poate produce daune interne n cazul n care se face, nici n cele mai multe cazuri este nevoie degetul pentru a fi introduse n continuare dect despre ciolan de sus (de exemplu, aproximativ 1 cm) Cu vrful pipetei introdus n uter de aproximativ i inch, sau, pe ct posibil, fr nici o rezisten ndeplinite (oricare dintre acestea este mai mic), pistonul seringii este apsat ncet introducerea spermei. nainte de ndeprtare a pipetei, seringa poate fi fara fir si rehooked astfel nct 2 cc de aer poate fi introdus n spatele materialul seminal, n scopul de a terge pipeta a materialului seminal rmase (nainte de elaborarea materialului seminal n sering, pistonul poate fi retrase uor pentru a obine acest efect, prevenind astfel necesitatea de a desprinde seringa mai trziu). Este important ca aerul n exces nu este introdus n uter, i o foarte mic parte din materialul seminal trebuie s rmn la captul pipetei cnd este scos din uter. Braul trebuie apoi retrase ncet din vagin.