Ensayo de ingeniera de Biorreactores

En el siguiente ensayo se hablara acerca del Biorreactor y las funciones que este
desempea de acuerdo al producto que se quiera obtener, as como los diseos
que este presenta con respecto al tipo de cultivo, tipo de agitacin, etc.
Los Biorreactores
1
son equipos donde se realiza el cultivo de microorganismos, el
diseo de estos debe ser tal que asegure un ambiente uniforme entre los
componentes del sistema y condiciones optimas para el crecimiento microbiano y
la obtencin del producto deseado. Alguna de las tareas que lleva acabo el
bioreactor son
1
:
Biorreactor Funciones que lleva acabo:






I. Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el
volumen de cultivo.
II. Mantener constante y homognea la temperatura.
III. Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
IV. Suministrar oxgeno a una velocidad tal que satisfaga el
consumo.
V. El diseo debe ser tal que permita mantener el cultivo puro.

Fig. 1. Se observa un Biorreactor y las funciones que este suele llevar acabo.
Los biorreactores de acuerdo a su geometra o la cantidad de agua se pueden
clasificar en:
Biorreactores

A continuacin se describir cada uno.
Biorreactores agitados
2
Este tipo de biorreactor suele ser empleado en laboratorios as como en la
industria de fermentacin ya que lleva acabo procesos en los que se exigen altas
velocidades de transferencia de masa y calor, en el caldo de cultivo. Este suele
Agitados
Columna
Circulacin
consistir de un cuerpo cilndrico con tapas elipsoidales, semiesfricas adems
posee un motor al que se acopla la flecha de transmisin que contiene a su vez
los impulsores que agitan el lquido. Dependiendo del tamao del reactor, el motor
puede colocarse en la tapa superior o en la inferior y para la aireacin se realiza a
travs de tubos perforados, efectundose la dispersin del aire en las zonas
cercanas a los impulsores. Estos se suelen utilizar para clulas superiores, al igual
para enzimas.


Fig. 2: Esta imagen muestra un biorreactor agitado.





De igual forma dependiendo del volumen que pueda contener el equipo existen
parmetros geomtricos los cuales suelen ser:






En esta tabla se presentan los parmetros para reactores de 7 y 35 L, los cuales se pueden adaptar para
otros volmenes.
Biorreactores de columna
3

Estos no poseen un sistema de transmisin mecnica para poder mezclar el caldo
de cultivo. El mezclado lo llevan acabo mediante la inyeccin de aire en el lquido
desde el fondo del recipiente, ya que al dispersarse el aire en burbujas y al
ascender estas causan la turbulencia en el lquido. Si las columnas son grandes
se pueden emplear platos perforados para la redispercion de las burbujas de gas.
A diferencia de los agitados estos generalmente se emplean en fermentaciones de
baja viscosidad. Y pueden ser de columna de burbujeo simple, columna de
burbujeo mltiple con platos perforados o distribuidor de gas, columnas de
burbujeo con aireacin por tubos de inyeccin, etc.








Fig. 3: En la siguiente imagen se muestra un biorreactor de columna de burbujeo simple.

Biorreactores de circulacin

Estos suelen ser definidos de acuerdo al patrn de circulacin del lquido del
reactor. Se clasifican en dos grandes grupos: de circulacin externa o interna.
Externa si el lquido circula por los brazos laterales conectado al cuerpo
principal del biorreactor en su parte inferior y superior.
4

Interna si el lquido circula en forma definida sin salir del cuerpo principal del
reactor.
5

Los primeros solo se han empleado a nivel experimental, mientras que los
segundos se han llegado a utilizar a nivel industrial, generalmente en el
tratamiento de aguas residuales, donde se emplean hongos o microalgas.







Fig. 4: Biorreactor de circulacin externa Fig. 5: Biorreactor de circulacin interna
Los biorreactores suelen estar equipados con distintos instrumentos, los cuales se
utilizan para facilitar el registro y anlisis de variables de operacin y de
parmetros especficos que sirven para mantener las condiciones de la
biorreaccin con fines de mejorar la productividad y garantizar el xito de la
biorreaccin, los parmetros mas importantes para medir en un biorreactor y los
instrumentos que los miden, se muestran en la siguiente tabla:

Tabla 2: Instrumentos presentes en un bioreactor.
Instrumentos de medicin Parmetros a medir
Electrodo de vidrio colocado en forma
asptica, en el bioreactor y que est
directamente en contacto con el caldo de
fermentacin.

Para la medicin y control del de pH.
Sensores RTD (resistance temperature
devices)
.

Medicin de la temperatura.
Controladores de oxigeno disuelto.

Medicin y control del oxigeno disuelto.
1. Rompedor mecnico.
2. Adicin de antiespumante
Medicin y control de la espuma.
Caudalimetros de aire.

Flujo volumtrico del aire.
Rotmetros Nivel de agitacin.
viscosmetros Nivel de viscosidad
Vlvulas de presin.

Presin existente en el biorreactor.

Existen otras propiedades comunes que se miden en un biorreactor las cuales
son:
1. Nivel o Volumen de medio de cultivo
2. Concentracin celular
3. Concentracin de sustrato
4. Concentracin de producto
Estas son medidas y registradas mediante programas computarizados, creados de
acuerdo al microorganismo utilizado y el producto de inters.

De igual manera los bioreactores se pueden clasificar en base al cultivo celular:

Biorreactores



De los cuales nos enfocaremos en los biorreactores para clulas inmovilizadas, ya
que los de clulas libres son biorreactores normales en los cuales el cultivo celular
se encuentra disperso por todo el recipiente para mantener un mayor contacto
interfacial. La inmovilizacin es el proceso de confinamiento de un biocatalizador,
enzimtico o celular, dentro o sobre una matriz solida para favorecer la liberacin
del producto y la reutilizacin del propio catalizador, esto trayendo grandes
beneficios a la industria, debido a que se reduciran los costos del biocatalizador.
En este proceso se utilizan 3 tipos de biorreactores los cuales son:

1. Biorreactor con agitacin mecnica para clulas inmovilizadas
6
: este
posee una turbina o propela con la que le permite homogeneizar todos los
componentes que se encuentran dentro del equipo, ya sean las clulas
inmovilizadas, sustrato, etc.
2. Biorreactor de lecho fluidizado
6
: este cuenta con un sistema de
operacin en modo continuo, su diseo se basa en proveer agitacin y
aireacin por flujo forzado de aire proveyndolo por la parte del cilindro a
travs de una bomba. En este se suelen utilizar polmeros sintticos, as
como tambin microesferas de cermica, que cuenten con perforaciones
Clulas libres
Clulas inmovilizadas
Agitacin mecnica
Lecho Fluidizado
Lecho empaquetado
que permitan tener una eficiente inmovilizacin de las clulas en el soporte
con el medio de cultivo.
3. Bioreactor de lecho empaquetado
6
: El empaquetamiento celular es una
forma de inmovilizacin. Un lecho empacado es una matriz de soporte
slido que retiene las clulas, bien por geometra (dentro de los espacios
huecos de la matriz), bien por afinidad (paso o adherencia selectiva). Un
biorreactor con este propsito debe contener un lecho de soporte slido,
sumergido en el medio de cultivo.












La eleccin del tipo de reactor y de la estrategia de operacin define la produccin
a obtener y la pureza del producto. Tambin determina si se puede lograr un
producto de calidad constante y una operacin confiable, debido a esto, los
biorreactores tambin se pueden clasificar en:


Bioreactores



Bioreactores continuos
Son equipos donde se agrega un medio con nutrientes frescos de manera
continua. Estos poseen cultivos continuos que proveen un medio constante para el
crecimiento de las clulas y para la formacin de productos con calidad uniforme.

Fig. 6: en esta imagen se
muestran los bioreactores por
agitacin mecnica, de lecho
empaquetado y lecho fluidizado
para clulas inmovilizadas.

Continuos (quimiostato)
Lote alimentado o Semicontinuos (fed- batch)
Lote o Discontinuous (Batch)
En ellos se suelen retirar los productos y parte de las clulas en forma contina,
por ello suelen ser llamados biorreactores de sistema abierto. Algunos sistemas
para lograr cultivos continuos son:

1. Quimiostato
7
: este permite crecimientos de biomasa balanceados
restringidos, debido a que este crecimiento suele estar controlado por un
nutriente o sustrato presente en concentraciones suficientemente bajas
como para limitar la densidad de la poblacin. Las condiciones qumicas del
medio suelen mantenerse constantes.













2. Turbidistato
8
: en este la concentracin de clulas se mantiene constante.
La alimentacin suele ser regulada mediante el monitoreo de la densidad
ptica del cultivo y se alimenta con medio fresco cuando la turbidez supera
un limite prefijado. El volumen se tiene que mantener constante retirando
una cantidad de fluido equivalente a la que se agrega.






Fig. 7: La siguiente imagen representa un Quimiostato, y
como esta conformado.

Fig. 9: en esta figura se presenta las partes que posee un
tubidistato tpico utilizado en el laboratorio.
Biorreactores semicontinuos
10
Estos son equipos en los cuales los reactivos se cargan inicialmente de forma
continua o intermitente y no se extrae ningn producto durante la reaccin,
despus se obtiene un derrame constante de producto de reaccin, por lo que
suelen ser llamados biorreactores de sistema semicerrado. Y se utilizan para una
distribucin regular del producto en reacciones homogneas.







Biorreactor discontinu o de sistema cerrado
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En ellos se suele llevar acabo una fermentacin discontinua o batch. Al inicio del
proceso se aade la solucin esterilizada de nutrientes y se inocula con el
microorganismo, esto permitiendo que se lleve a cabo la incubacin en
condiciones ptimas de fermentacin. Y a lo largo del proceso no se aade mas
nutrientes, excepto oxgeno (en forma de oxigeno), en algunas ocasiones un
agente antiespumante y cidos o bases para controlar el pH de la fermentacin.
La composicin del medio de cultivo, la concentracin de la biomasa y la
concentracin de metabolitos cambia generalmente como resultado del
metabolismo de las clulas.



Fig. 10
Fig. 11: En esta imagen se pueden
observar diferentes biorreactores de lote o
batch, los cuales difieren en los equipos
auxiliares que poseen.
Tambin se tiene que tomar en cuenta el desempeo de los biorreactores, los
cuales casi depende en su totalidad del microorganismo que se selecciona para
obtener el producto de inters. Debido a que la produccin suele estar relacionada
con la poblacin de microorganismos empleada en el proceso, esto quiere decir
que se tiene que mantener un ambiente constante y homogneo, por ello
asimismo los biorreactores se clasifican en:


Biorreactores


Biorreactores de agitacin mecnica
12
Primero cabe mencionar que la agitacin mecnica es una operacin la cual tiene
como objetivo la mezcla de dos o ms lquidos as como el aumento del rea
interfacial entre un lquido y un gas o de mantener una mezcla casi perfecta, esto
con ayuda de impulsores mecnicos, de esta manera podemos definir que un
biorreactor de agitacin mecnica, no es mas que un recipiente el cual contiene un
agitador, el cual proporcionara una mezcla homognea de los componentes. Este
tipo de biorreactor tambin es utilizado para reacciones con clulas inmovilizadas,
siendo uno de los equipos mas empleado en la industria.







Agitacin mecnica: equipo
mecnico
Agitacin neumtica: gas a
presin
Fig. 12: en la siguiente imagen se muestra un
biorreactor con agitador, y la formacin del vrtice
y remolino
El agitador es el componente principal en estos equipos y suele dividirse en dos
clases aquellos que forman corrientes paralelas al eje del agitador y los que dan
origen a corrientes en direccin tangencial o radial. Los primeros se llaman
agitadores de flujo axial
13
y los segundos agitadores de flujo radial
13
. De los
ms utilizados en la industria son: de hlice, de paletas, y de turbina.







1. Hlice
14
: Son empleados en lquidos poco viscosos y son de flujo axial. De
estos los ms pequeos giran a 1.150-1.750 rpm y los ms grandes giran a
400-800 rpm. Las corrientes de flujo, que parten del agitador, se mueven a
travs del lquido en una direccin determinada hasta que son desviadas
por el fondo o las paredes del tanque. Las palas de la hlice cortan
vigorosamente el lquido. Debido a la persistencia de las corrientes de flujo,
los agitadores de hlice son eficaces para reactores de gran tamao.





Fig. 13: Flujo radial y flujo axial.
Fig. 14: Tipos de hlices
2. Paletas
15
: Estas son utilizadas para mezclados sencillos. Suelen girar a
bajas o moderadas velocidades en el centro del tanque, impulsando el
lquido radial y tangencialmente. Las corrientes que generan se desplazan
hacia fuera hasta la pared del tanque y despus hacia arriba o hacia abajo.
Si los reactores son profundos se les puede instalar varias palas, unas
sobre otras, en un mismo eje, asimismo en algunos diseos las palas se
adaptan a la forma de las paredes del recipiente y pasan sobre ella con una
pequea holgura, estas palas suelen recibir el nombre de agitador de
ancora
16
.








3. Turbina
17
: suelen estar constituidas por un componente impulsor con ms
de cuatro hojas, montadas sobre el mismo elemento y fijas a un eje
rotatorio. Son eficaces para un amplio rango de viscosidades. Las hojas
pueden ser rectas o curvas, inclinadas o verticales. Un ejemplo es la
turbina Rushton
18
. Las paletas de hlices Rushton son planas y colocadas
verticalmente a lo largo del eje de agitacin, produciendo un flujo radial en
una sola direccin; por lo comn son utilizadas en la fermentacin de lneas
celulares que requieren altas tasas de oxgeno tales como la levadura,
bacterias y algunos hongos.


Fig. 15: tipos de agitadores de paletas.
Fig. 16: Reactor con agitador de ancora.






Entonces esto quiere decir que para procesos microbiolgicos slo se pueden
utilizar tipos especficos de agitadores desarrollados para la tecnologa qumica.
Seleccionados de acuerdo al microorganismo y el producto de inters.

Biorreactores de agitacin neumtica
Son reactores en forma tubular o tipo columna y son agitados por gas a presin,
en estos las clulas son susceptibles de dao. Segn sus caractersticas estos
pueden ser:
1. Biorreactores de columna de burbujeo: estos ya fueron mencionados
con anterioridad, suelen ser recipientes de geometra tubular y el mezclado
de componentes se lleva acabo desde el fondo del recipiente, por inyeccin
de aire en el lquido.
2. Biorreactores airlift
19
: es un recipiente de lquido dividido en 2 zonas, de
las cuales solo en una se dispersa el gas. Esto provoca que la retencin de
gas en ambas zonas sea diferente, as causando que la circulacin del
fluido en el biorreactor sea por una accin de desplazamiento o empuje por
el gas. La parte del reactor que contiene el flujo gas-lquido ascendente es
el elevador o tubo de ascenso y la regin que contiene el fluido
descendente se denomina bajante o tubo descendente. Este suele ser
utilizado para clulas superiores ya sean de clulas animales o vegetales.
Fig. 17: Tipos de turbinas, a) turbina de palas rectas, b)
turbinas de disco con palas, c) turbina de palas curvas
a) b) c)
Fig. 18: Turbina Rushton.






En cuanto a esta clasificacin se presenta una comparacin en la siguiente tabla:
Tabla 3: Comparacin entre la agitacin mecnica y neumtica.







Con esto se puede concluir que los biorreactores son equipos que suelen llevar
acabo procesos qumicos que involucran microorganismos y sustancias derivadas
de dichos organismos, el diseo de estos puede variar conforme a ciertos criterios
entre los cuales se encuentran; la funcionalidad durante numerosos das, permitir
una mayor rea contacto entre las fases bitica y abitica del sistema, un
consumo de energa mnimo, entradas y salidas de nutrientes, etc. Por ello que
los mas utilizados a escala industrial suelen estar provistos de mecanismos, ya
sean de agitacin, aireacin as como sistemas para controlar pH, temperatura,
etc. Asimismo que los biorreactores suelen ser optimizados para obtener la
mxima concentracin de productos de la fermentacin, como son la biomasa y/o
metabolitos en un tiempo mnimo y a menor costo de produccin, trayendo
consigo grandes ventajas a la industria y al rea de la investigacin.
Fig. 19: Tipos de biorreactores airlift. A) reactor
airlift, b) Airlift con tubo interno, c)Airlift con loop
externo
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