Este etapa ciclului celular n care se produce distribuirea materialului genetic la
:
cele dou celule-fiice care iau natere prin scindarea celulei-mam. Se descriu dou tipuri de diviziune celular: diviziunea direct (sau amitoza) i diviziunea indirect (care poate fi de dou feluri: mitoza i meioza).
DIVIZIUNEA DIRECTA (AMITOZA) Se caracterizeaz prin lipsa aparatului mitotic, este ntlnit la organismele unicelulare, fiind considerat o form inferioar de reproducere celular. Dei s- a descris i la organisme superioare i la om, n condiii patologice n esuturi n regenerare i n tumori, este discutabil dac n aceste condiii exist ntr-adevr o diviziune direct sau nu s-a observat fusul de diviziune.
DIVIZIUNEA INDIRECTA Este caracterizat prin modificri sincrone citoplasmatice i nucleare, care duc la distribuirea egal a materialului genetic la cele dou celule fiice.
MITOZA Se ntlnete la toate celulele somatice, fiind caracterizat prin faptul c celulele fiice au acelai numr de cromozomi ca i celula mam (fiind celule diploide). Durata mitozei la om este de circa 60 min. Clasic se descriu patru faze ale mitozei: - profaza (30 min, sau 50% din durata total), - metafaza (8 min sau 13,4%), - anafaza (4 min sau 6,60%) - telofaza (18 min sau 30%). De obicei ntre profaz i metafaz se mai descrie o faz intermediar, prometafaza.
Profaza Tranziia de la faza G2 la faza M nu este un eveniment bine delimitat. Se caracterizeaz prin fenomene citoplasmatice i nucleare caracteristice. n citoplasm ca prim semn al intrrii celulei n diviziune devine vizibil cel de al doilea centru celular (Centrozom, MTOC). Urmeaz apoi n deprtarea treptat a celor doi centri celulari spre polii celulei, iar ntre cei doi centrozomi apar filamente dispuse sub forma unui fus (aa-numitul fus de diviziune format din microtubi). Fenomenele nucleare din profaz constau n dispariia nucleolului i condensarea cromatinei nucleare, sub forma unui ghem, numit spirem, din care apoi apar cromozomii sub form de bastonae.
Prometafaza Este caracterizat prin dispariia nveliului nuclear i nceperea interaciunii cromozomilor cu fibrele fusului de diviziune. Cromozomii execut micri oscilatorii agitate, prin care se produce deplasarea lor spre mijlocul fusului de diviziune.
Metafaza Cromozomii sunt aranjai la ecuatorul fusului de diviziune, cu axa lung a cromozomului perpendicular pe axa fusului. Este aa numita plac metafazic, n care se produce despicarea longitudinal a cromozomilor, prin care se despart cele dou cromatide. Prin aceast clivare longitudinal se dubleaz numrul de cromozomi (deci la om din 46 cromozomi rezult 92)
Anafaza Const n deplasarea cromozomilor spre polii celulei: jumtate din numrul de cromozomi se deplaseaz spre un pol, iar cealalt jumtate spre polul opus.
Telofaza In momentul cnd cele dou grupe de cromozomi au ajuns la cei doi poli ai celulei, cromozomii aparent fuzioneaz n cte un spirem, n jurul cruia se formeaz cte o membran nuclear. Apoi nucleul i recapt structura din interfaz, cromatina captnd aspectul de reea i granule, de asemenea reapare nucleolul. In final se produce despicarea citoplasmei la nivelul plcii ecuatoriale, fenomenul fiind numit citodierez. Prin mitoz se formeaz dou celule-fiice, fiecare avnd o cantitate de ADN egal cu celula mam. Se descriu, ns patru forme de mitoze dup gradul de asemnare al celulelor- fiice cu celula mam: - mitoza homoplastic (homotipic) sau mitoza egal: in aceasta cele dou celule-fiice sunt asemntoare ntre ele i cu celula-mam; se ntlnete numai la celulele nedifereniate (foarte tinere); - heteroplastic (heterotipic): cele dou celule care iau natere sunt similare ntre ele, dar sunt mai mature, mai difereniate dect celula mam; de aceea se mai numete i mitoz de difereniere; - homoheteroplastic (asimetric): una din celulele-fiice seamn cu celula mam, cealalt este diferit; - mitoza de dedifereniere (de ntinerire): celula care se divide d natere la celule tinere; aceasta se ntlnete la limfocit.
Ca faz obligatorie a ciclului celular (n situaia n care s-iau depit punctele de restricie) i ca o consecin a dublrii masei! i componentelor celulei, mitoza este declanat de factori nc insuficient precizai. Totui se descriu trei grupe de asemenea factori: - generali: temperatur, lumin, hormoni (tiroidieni, hipofizari), vitamine; - intracelulari: modificarea raportului nucleocitoplasmatic i nucleolo-nuclear (ca i cum volumul crescut al citoplasmei nu mai poate fi controlat de nucleu i este necesar diviziunea celulei); - extracelulari: sunt probabil cei mai importani. Cum n esuturi exist un raport bine stabilit ntre celulele mature n stare de funcionare, celulele uzate i cele care se divid, ori de cte ori moare un grup de celule, printr-un mecanism de retroaciune (feed-back") se declaneaz diviziunea altui grup de celule, astfel ca raportul ntre cele trei categorii de celule s rmn aproximativ acelai. Despre factorii ce determin mitozele se va mai aminti la capitolul privind proliferarea celular.
Evenimente moleculare n cursul mitozei la nivelul centriolilor, fusului de diviziune i al plasmalemei A. Al doilea centrozom, care devine vizibil n citoplasm la nceputul profazei, este format, ca i cel preexistent, din doi centrioli aranjai perpendicular unul pe altul. Dublarea perechii de centrioli nu se face prin diviziunea celor vechi, ci prin asamblarea unor noi centrioli din depozitul de tubuline al citoplasmei. Polimerizarea tubulinei pentru formarea noilor centrioli are loc nc din perioada S a ciclului celular. B. Mecanismul formrii i dispariiei fusului de diviziune i al deplasrii cromozomilor n cursul mitozei a fascinat pe biologi aproape 100 de ani. Dei nc nu a fost elucidat pe deplin, n ultimii ani, s-au nregistrat progrese nsemnate. Fibrele fusului de diviziune sunt alctuite fiecare dintr-un mnuchi de circa 100 de microtubuli pe care se mai afl i proteine asociate microtubulilor. Exist un echilibru dinamic ntre microtubulii din fus i moleculele solubile de tubulin din citoplasm. Este necesar meninerea echilibrului pentru a se putea desfura mitoza i pentru a se putea deplasa cromozomii. Att inhibarea depolimerizrii tubulinei (prin plasarea celulelor n ap grea sau prin tratare cu taxol) i deci stabilizarea microtubulilor, ct i blocarea polimerizrii tubulinei (prin colchicin, temperatura sczut sau presiune hidrostatic mare), ceea ce duce la dezasamblarea fusului de diviziune, au ca rezultat imposibilitatea deplasrii cromozomilor i deci este oprit desfurarea mitozei. Depolimerizarea fusului de diviziune prin administrarea de vinblastin sau vincristin st la baza tratamentului cancerului cu aceste citostatice. n fusul mitotic exist dou feluri de fibre, dup modul de ancorare la capete: a) fibrele polare, cele mai numeroase se ndreapt de la cei doi poli ai fusului dinspre ecuatorul su; b) fibre cinetocorice: suntt ataate la un capt de cinetocorul fiecrei cromatide i au cellalt capt ndreptat spre polii fusului. S-a considerat mult vreme c centriolii coordoneaz formarea fusului de diviziune. Se tie azi c de fapt centrul organizator al micrbtubulilor, care determin asamblarea fusului de :
diviziune, este materialul pericentriolar (aflat ntr-o zon nebuloas n jurul centriolului). Cinetocorul este structura specializat n ancorarea cromozomului de fusul de diviziune. Cromozomul din metafaz const din cele dou cromatide surori unite la nivelul centromerului. La sfritul profazei, pe fiecare din cele dou fee, opuse ale centromerului se dezvolt cte un cinetocor; la microscopul electronic acesta apare ca o structur multistratificat, dar nu se cunoate compoziia sa. La nceputul prometafazei pe cinetocor apar fibrele cinetocorice ale fusului de diviziune, formate din mnuchiuri de microtubuli ce radiaz n direcii opuse de pe cele dou regiuni cinetocorice ale fiecrui cromozom. Fibrele cinetocorice servesc la aezarea in poziie a cromozomilor, att n placa metafazic, ct i n timpul deplasrii lor spre centrozomi n anafaz. Prin, micrile dezordonate i oscilatorii ale cromozomilor n prometafaz se ajunge la un moment dat ca fibrele cinetocorice de pe o parte a cromozomului s se angajeze n spaiul dintre fibrele polare dinspre un centrozom. Este ca i cum un set de fibre polare captureaz un cinetocor, dup care i cellalt cinetocor se asociaz cu fibrele polare, ce pleac de lng centrozomul opus Aflat n placa metafazic, cromozomul pare s se afle n repaus. De fapt ns, este o linite aparent", fiindc dinspre ambii poli asupra cromozomului se exercit o tensiune. Studii de microscopie electronic seriat a fusului de diviziune au relevat faptul c la ecuatorul fusului de diviziune fibrele polare din cele dou jumti ale fusului se suprapun parial. In timpul anafazei microtubulii antiparaleli din aceste dou seturi de fibre polare se ndeprteaz dar n acelai timp ele se alungesc prin polimerizarea tubulinei la capetele microtubulilor dinspre ecuator. Acestea sunt capetele (+), deci acelea la care este favorizat polimerizarea tubulinei. Dimpotriv, fibrele cinetocorice au capetele (+) blocate n cinetocor i au capetele (-) libere. Deplasarea cromozomilor n anafaz este rezultatul a dou evenimente independente: a) micarea spre poli a fibrelor cinetocorice ce trag cu ele cromatidele ataate i b) alungirea i alunecarea unele peste altele a fibrelor polare ce mping cei doi poli ndeprtndu-i unui de altul Care snt forele ce genereaz micrile? Se pare c alunecarea fibrelor polare se face prin mecanismul microtubul-dinein, deoarece inhibitorii dineinei o blocheaz. Deplasarea spre poli a cromatidelor se face probabil prin depolimerizarea capetelor () ale microtubulilor din fibrele cinetocorice aflate spre centrozomi. Pe msur ce are loc depolimerizarea tubulinei, fibrele cinetocorice se scurteaz i astfel cromozomii smt atrai spre poli. C. Dezasamblarea nveliului nuclear n prometafaz se face prin fragmentarea celor dou membrane, prin dezasamblarea laminei nucleare i prin dezasamblarea complexelor porilor. Se pare c rolul esenial l joac fosforilarea celor trei proteine din lamina nuclear, care duce la dezasamblarea ntregului nveli. Ca o consecin rezult fragmente de membrane ce nu se pot distinge de reticulul endoplasmic, dei rmn vizibile n jurul fusului nuclear. Refacerea nveliului nuclear n telofaz are loc n urma defosforilrii proteinelor laminare, la nceput fragmentele de membran mbrcnd incomplet fiecare cromozom, dup care fragmentele fuzioneaz i se reface ntreg nveliul. Dup aceea rencepe sinteza ARN-ului i prin aceasta reapare nucleolul. D. Scindarea citoplasmei n cursul citodierezei (citokinezei) ncepe prin apariia unui an pe suprafaa celulei, care se poate vedea la microscopul electronic cu baleiaj. Pe fundul anului se pot observa cute, ceea ce denot c membrana este tras spre interiorul celulei. De fapt, sub plasmalem, exist un inel contracii format dintr-un mnuchi de filamente de actin, oare ncepe s fie asamblat nc de la nceputul anafazei. Acest inel se contract prin mecanismul molecular actin-miozin, dar spre, deosebire de celelalte micri ce au la baza lor acest mecanism, pe msur ce se contract, inelul i micoreaz diametrul, prin depolimerizarea filamentelor sale. Cele dou celule-fiice au suprafaa total mai mare dect a celulei mam. De aceea biogeneza plasmalemei celulei animale se intensific naintea diviziunii. De fapt, vzut la microscopul electronic cu baleiaj, suprafaa celulei devine tot mai proas", deci cu tot mai muli microvili, pe msur ce o celul parcurge ciclul celular. In momentul citodierezei cele dou celule-fiice au puini microvili. Este ca i cum celula mam i-a fcut o rezerv de haine spre a mbrca celulele-fiice. Meioza Meioza se ntlnete numai n procesele prin care se formeaz gameii (spermatozoidul i ovulul), deci n spermatogenez i ovogenez. Caracteristic pentru meioza este faptul c se njumtete numrul de cromozomi, deci plecnd iniial de la celule diploide se ajunge la gamei haploizi, care conin numai cte un cromozom din fiecare pereche de omologi i numai un cromozom de sex. Acest lucru este foarte important, fiindc prin fuziunea ovulului cu spermatozoidul ia natere ovocitul, deci din dou celule haploide se ajunge la o celul diploid, din care se poate dezvolta n mod normal ntregul organism. Dac gameii ar fi celule diploide, ovocitul ar fi tetraploid i nu ar putea fi viabil. Deci meioza are o semnificaie profund. njumtirea numrului cromozomilor nseamn njumtirea materialului genetic, ceea ce se realizeaz prin dou diviziuni indirecte ce se succed fr ca ntre ele s se mai produc sintez de ADN. Deci ADN-ul replicat o singur dat (naintea primei diviziuni) se mparte de dou ori. Cele dou diviziuni se numesc meioza I i meioza II, iar la mamifere meioza I este diviziunea reducional, pe cnd meioza II este o mitoz homoplastic.
Astfel, din fiecare celul diploid care intr n meioza rezult n final patru celule haploide. Ceea ce distinge n mod clar meioza I de mitoze este c n anafaz migreaz spre polii celulei cromozomi ntregi duplicai i nu jumti ale lor (cromatide). Prin urmare, cnd celula meiotic se divide, fiecare fiic primete cte un cromozom ntreg (duplicat) din fiecare pereche de omologi, sau altfel spus, dou copii de ADN provenind numai de la unul din cei doi omologi. Abia n meioza II cromatidele surori se despart ca n oricare mitoz.
Meioza I este un proces foarte complicat, n care fenomenele caracteristice acestui tip de diviziune indirect se petrec n profaz. De altfel profaza I este foarte lung. Meioza I poate dura zile, luni i ani de zile (n funcie de specie) i profaza I ocup 90% din aceste durate. De pild la om celulele germinative primordiale (gonocitele) apar n ziua a 20-a a gestaie i migreaz spre gonadele embrionului n sptmnile urmtoare. La femei, ele formeaz oogoniile, fiecare fiind nconjurat de celule foliculare formnd foliculul primordial. n ovare oogoniile se divid prin mitoze, pn cnd, n luna a treia a vieii intrauterine, oogoniile devin oocite primare, care ncep meioza I. De fapt, oogonia devine oocit primar n momentul cnd ncepe meioza I. La natere ovarul conine circa 2 milioane oocite primare care i-au nceput deja meioza I fiind oprite n profaza I. Ele rmn n profaza I pn la pubertate; De acum nainte, timp de circa 40 ani, ct dureaz viaa reproductiv a femeii, n fiecare lun, sub aciunea unei descrcri de hormon de luteinizare (LH), un oocit primar i completeaz meioza formnd un corp polar i un oocit secundar. Acesta intr n meioza numai dup fertilizare (adic fuziunea sa cu spermatozoidul) Numai circa 400500 din oocite i completeaz meioza I n viaa unei femei. Majoritatea ovocitelor primare (99,9% din foliculii primordiali) degenereaz, la pubertate rmnnd numai circa 300.000 oocite primare. La brbai gonocitele primare migreaz n gonade n viaa intrauterin i snt apoi ncorporate n tubii seminiferi. Acetia conin spermatogoniile, care intr n meioza la pubertate. Un ciclu complet de spermatogenez dureaz circa 24 zile dintre care profaza I dureaz 1314 zile. In contrast cu oogeneza, spermatogenez continu la brbat pn la o vrst avansat. In fiecare ciclu meiotic snt formai patru spermatozoizi dintr-o spermatogonie. Transformarea spermatidelor n spermatozoizi maturi se produce printr-un proces complex numit spermioggnez
Profaza I este mprit n cinci stadii Leptoten, faz n care se produce condensarea cromatinei i cromozomii devin vizibili ca filamente lungi, cu diametrul neuniform, ce se ataeaz cu ambele capete de nveliul nuclear, la nivelul structurilor numite plci de ataare. Dei cromozomii sunt duplicai i constau din dou cromatide surori, acestea sunt strns ataate, nct apar ca un cromozom unic. Acesta are o structur special: n lungul cromozomului, pe o parte a sa, se formeaz o lam proteic numit ax, iar cromatina este dispus sub form de bucle care proemin din cromozom de partea opus axei.
Modificrile suferite de cromosomi n timpul profazei I i a meiozei
Zigoten, este o faz care se caracterizeaz prin faptul c cromozomii omologi din setul matern i din setul patern) se apropie i se alipesc (fr a fuziona), fenomen numit conjugarea cromozomilor sau sinaps. Aceasta ncepe adeseori prin venirea n contact a capetelor cromozomilor omologi ataate nveliului nuclear, dup care alipirea se produce ca la nchiderea unui fermoar, de la ambele capete. Alteori sinapsa ncepe n regiunile mijlocii ale cromozomilor i se ntinde spre capete. Prin conjugare se realizeaz alinierea perfect a genelor din perechea de cromozomi omologi care constituie acum cromosomul bivalent, numit i tetrad, deoarece fiecare cromozom omolog din alctuirea sa este compus de fapt din dou cromatide (deci sunt patru cromatide n total). Cei doi cromozomi omologi sunt alturai prin dispunerea paralel a celor dou axe n interiorul tetradei, n timp ce buclele de cromatin proemin n afara cromozomului bivalent. Pachiten este o faz care ncepe n momentul n care sinapsa este complet i celula poate rmne aa timp de mai multe zile. Caracteristic pachinemei este fenomenul de crossing over, cu ruperea unei cromatide materne i a unei cromatide paterne. n aceeai poziie n lungul cromozomului i unirea ncruciat a fragmentelor. Deci un fragment ce a fost iniial pe un cromozom poate ajunge pe cromozomul omolog matern i invers. Acest schimb de gene ntre cromozomii omologi, are un rol extrem de important n_ereditate, deoarece gametul unui individ, va avea n final gene ce provin de la ambii prini. Aceste noi combinaii de gene, care sunt transmise la generaia urmtoare fac ca fiecare copil s fie diferit de ali frai sau surori (cu excepia gemenilor monozigoi care sunt identici genetic) i de asemenea s moteneasc nsuiri, caractere genetice, de la ambii prini i de la bunici. Diploten este faza n care cromozomii omologi ncep s se despart (desinapsa), rmnnd ns legai n locurile n care s-a produs crossing-over-ul, locuri numite chiasmei. Diakineza este faza n care nceteaz sinteza ARN-uiui i cromozomii se condenseaz, se ngroa i se detaeaz de nveliul nuclear. Acuma de-abia se observ clar c fiecare bivalent conine patru cromatide, cromatidele surori fiind unite la nivelul centromerilor In esen fenomenele importante i caracteristice profazei I sunt: condensarea cromozomilor, conjugarea sau sinapsa i crossing-over-ul (schimbul de gene ntre cromatide nesurori).
Prometafaza I se caracterizeaz prin dispariia nveliului nuclear i formarea fusului de diviziune. n metafaza I cromozomii se ataeaz de fibrele fusului de diviziune i se formeaz placa metafazic (sau ecuatorial). Anafaza I const n deplasarea cte unui cromozom ntreg (avnd dou cromatide surori) din fiecare cromozom bivalent ctre un pol al celulei, pe cnd cellalt cromozom se deplaseaz spre polul opus. Deci spre deosebite de mitoz nu se despart cromatidele surori, ci ele rmn legate la nivelul centromerului. Telofaza I: se caracterizeaz prin reasamblarea nucleilor i citodierez
Dup meioza I urmeaz o scurt interfaz fr sinteza de ADN, dup care se succed meioza II. Abia acum se despart cromatidele surori la nivelul centromerului i are loc deplasarea lor spre polii celulei. Meioza II const din cele patru faze ale diviziunii indirecte, fr diferene fa de o mitoz obinuit.