4.

NUCLEUL
Nucleul (lat. nucleus i gr. karion = smbure) (nucleus) este
o component esenial caracteristic celulelor eucariote.
ndeplinete ca funcii principale: -stocarea informaiei genetice n
!"N-ul nuclear # reglarea i controlul tuturor acti$itilor celulare. n
organismele animale# e%ist i celule anucleate (&ematiile#
trombocitele)# care sunt incapabile s sinteti'e'e proteine#
acti$itiile lor metabolice fiind foarte restrnse.
(omponentele nucleului
"enumire (omponente )ormaiuni ultrastructurale
*embrana
nuclear
e%tern
!. *embrana
nuclear
( n$eliul
nuclear)
(isterna
perinuclear
(omple%ul por:
!nulus e%tern
!nulus intern
+ranul central
, granule proteice periferice
, conuri de proteine fibrilare
*embrana
nuclear
intern
-.
Nucleoplasma
.c&eletul
nuclear
*atricea fibrilar (granule i
matri%in )
/amina dens intern
(omple%ul lamina por
(omponenta fibrilar a
nucleolului
)raciune labil
(romatina 0ucromatina
1eterocromatina
(. Nucleolul (omponenta
filamentar
)ilamente de 2 nm
grosime345-65 nm lungime
(omponenta
granular
7recursori ribo'omiali
(omponenta
amorf
(romo'omial (romatina perinucleolar
(romatina intranucleolar
22
Nucleul a fost descoperit de )8N9!N!# n :,4:# care a
obser$at o formaiune o$oid n celulele epidermice. ;lterior#
-<8=N (:,44) a fost primul care a enunat conceptul de celul
nucleat# ca unitate structural# care intr n alctuirea plantelor#
concept ce a fost e%tins i la alcturiea corpului animalelor.
n alctuirea nucleului intr: nucleolema sau membrana
nuclear# nucleoplasma (matricea sau sucul nuclear)# nucleolii i
cromatina sau cromo'omii.
Nucleul reprezint centrul de comand, control i de
coordonare a celulei eucariote, funcionnd ca un computer chimic
prevzut cu un program (ADN-ul) i o memorie (AN-ul)! "n
calitate de centru informaional al celulei, nucleul coordoneaz
toate reaciile chimice legate de desfurarea proceselor vitale,
contrlnd att sinteza proteinelor enzime din celul, ct i sinteza
proteinelor de structur! (#ig!$!%!)
Fig.4.1. Rolul nucleului n circulaia informaiei genetice n celula eucariot.
Nucleul conine genomul (totalitatea genelor) celulei# format
dintr-un numr precis de gene. 8 gen este o sec$en de
nucleotide (255-:255)# care determin o sec$en de aminoaci'i#
mpreun cu elementele de control (un promotor# o sec$en lider
i un terminator. /a animalele domestice# gena ocup un loc
2>
specific n molecula de !"N care ntr n compo'iia
cromo'omului!
"ntr-o celul uman, lungimea total a moleculelor de ADN
este de cca! %,& m coninnd un potenial informaional imens,
estimat la apro'imativ ( ) %*
%%
+ii, ce corespunde informaiilor
cuprinse ,ntr-o +i+liotec cu %-*!*** volume (considerndu-se c
un cuvnt este evaluat ,n medie la .& +ii, iar ,n fiecare volum se
gsesc %/*!*** cuvinte)!
9otodat nucleul conine ec&ipamentul en'imatic necesar
pentru: repararea genomului# replicarea sa# transcrierea mesa?ului
n !<N i prelucrarea !<N-ului ( n !<N mesager# !<N de transfer
i !<N ribo'omal.
Fig.4.2. Forme de nuclei
:-@e'iculos (n neuron)A B-*ultilobat (neutrofil)A 4#::--ilobat (eo'inofil#
pseudoeo'inofil de pasre)A 6-!plati'at (adipocit)A 2-<eniform (monocit)A >-8$oidal
(eritrocit)A C-"iscoidal (celula caliciform)A ,-!lungit (leiocit)A D#:5-.feroidal sau o$oidal
(limfocit)
4.1. Caracterele morfologice ale nucleului
Rspndire. *a?orittea celulelor organismului pre'int
nucleu. 0%ist i e%cepii (&ematiile#celulele cristaliniene#
2C
trombocitele)# care repre'int stadii finale# n e$oluia unui tip
celular# cu e%isten limitat n timp# stadii speciali'ate la funcii
pasi$e. (elulele fr nucleu nu pot crete i nu se mai di$id.
Forma nucleilor este foarte $ariat#indicnd# de regul# pe
cea a celulei. Nucleul apare: - sferic-o$oidal (nucleus sphericus-
ovoideus)# n celulele i'odiametrice (sferice#cubice#poliedrice)A-
alungit (+acilliformis,fusiformis)# n celulele fusiforme (musculare)
sau columnare (prismatice)A - turtit#aplati'at (planus) n celulele
pa$imentoase (endoteliale)#n adipocite# n celulele caliciformeA
lobat (segmentalis s! moniliformis))# n celulele care trebuie s se
modele'e rapid.()ig.6.B.)
)orma nucleului este influenat de acti$itatea celulei.
"e$ine neregulat n celulele foarte acti$e. n acest mod se
produce o cretere a suprafeei prin care se reali'ea' sc&imburile
dintre nucleu i citoplasm. 9otodat nucleul pre'int o oarecare
plasticitate (deformabilitate) care i permite ca# n anumite condiii
spaiale intracelulare# s i modifice forma. !sfel# n monocite
nucleul apare reniform (nucleus reniformis)# dei celula este
sferic# deformarea datorndu-se pre'enei centriolului.

Fig.4.3. Poiia nucleului n diferite celule.
:-(entralA B-7erifericA 4-*edioba'alA 6#2--a'al.
Poziia. n cele mai multe ca'uri# nucleul ocup o po'iie
central# strategic pentru rolul de coordonator al acti$itii
celulare. 9otodat e%ist numeroase e%cepii# n care nucleul
ocup o po'iie: e'centric, n adipocite (celule care acumulea'
grsimi n citoplasm)A medio-+azal# n celulele secretoare din
pancreas sau parotidA +azal, n secretoare de mucus# n celulele
caliciforme. n general n celulele secretoare.()ig.6.4.)
Numr. (a regul general# o celul pre'int un nucleu.
0%cepiile sunt ns numeroase. !stfel# &epatocitele sunt
binucleate n proporie de C-,E# osteoclastele au 45-65 nuclei# iar
fibra muscular striat (rabdocitul) pre'int ntre B5-65 nuclei
pentru fiecare centimetru.
2,
"n condiii patologice, mai muli nuclei apar ,n0- celulele
gigante 1anghans (prezente ,n tu+erculoz, au cva zeci de
nuclei, dispui la periferia celulei, ,n coroan sau potcoav)2
-celulele gigante de corp strin, care apar ,n cazul ptrunderii ,n
organism a unor particule strine, nedigera+ile de ctre celule2 -
celulele tumorale.
3ultinuclearitatea se produce n dou moduri: :- prin
multiplicare nuclear repetat (cariokine')# fr di$i'iunea
citoplasmei (citodiere')#re'ultnd un plasmodiuA B-prin fu'ionarea
mai multor celule mononucleate# re'ultnd un sinciiu (cum este
ca'ul osteoclastelor# rabdocitelor#celulelor /ang&ans#etc.)
Fig.4.4. !ariaia dimen"iunilor nucleului n funcie de gradul de #oli#loidie
Dimensiunile nucleului. @aria' n limite mai strnse (ntre 2-
:2F) dect dimensiunile celulelor# di$ersitatea dimensiunilor
celulelor din organismul animal reali'ndu-se pe ba'a $ariaiei de
$olum a citoplasmelor.
*surarea dimensiunilor nucleului se numete cariometrie
i repre'int un domeniu de mare interes pentru biologia i
patologia celular. Nucleii pre'int $ariaii dimensionale funcionale
i patologice.
@ariaiile funcionale ale dimensiunilor nucleului sunt n
legtur cu: G@rsta, nucleul fiind mai mare n celula tnr#
dect n celula mbtrnit# n ca'ul aceluiai tip celularA
G 4ioritmul, e%istnd diferene de $olum de pn la B5E#
ntre 'i i noapte# la &epatocite#neuroni# nefrocite#etc.A
G 5radul de poliploidie (numrul de seturi cromo'omale
pre'ente n nucleu). (u ct gradul de poliploidie este mai mare cu
att nucleul este mai mare. !stfel# nucleii megacariocitelor sunt
mult mai $oluminoi dect cei a &epatocitelor. "in acest punct de
$edere n &epatocite se pot ntlni : : - nuclei mici (cu diametru de
:5 Fm)# diploi'i (Bn)# ntlnii la cca.,5E din &epatociteA B - nuclei
medii (cu diametru de :2 Fm)A - tetraploi'i (6 n)# ntlnii la :>E din
&epatocite i uneori octaploi'i. .-a constatat c suprafaa nuclear
2D
crete proporional cu gradul de poliploidie# fapt ce e%plic
nmugurirea nucleilor poliploi'i.
"n patologie, variaii ale dimensiunilor nucleului se ,ntlnesc
,n to'icoze, ,n +oala de iradiere i ,n cancer! "n celulele
neoplazice, nucleii apar de talie mare, cu morfologie e'trem de
variat ,n acelai cmp microscopic, putnd prezenta uneori
aspect monstruos!6
ntre $olumul nucleului i $olumul citoplasmei se stabilete
un raport nucleo-citoplasmatic (N78)# a crei $aloare $aria' n
limite foarte largi (:34 - :3B5)# de obicei situndu-se ntre :3C - :3:5.
!tunci cnd $olumul citoplasmei crete mai mult dect
$olumul nucleului# raportul N3( $a fi refcut fie prin di$i'iune
celular# fie printr-o cretere a $olumului nuclear. n ca'ul n care
$olumul nu poate fi refcut# funcionarea normal a celulei este
perturbat. n condiii patologice# raportul N3( poate fi complet
modificat# a?ungndu-se la in$ersarea raportului# n celulele
tumorale.
9scozitatea nucleoplasmei este mai mic dect a
citoplasmei# e%cepie fcnd o$ocitul. 5reutatea specific a
nucleului este influenat de coninutul n ap i de starea
fi'iologic a celulei# descrescnd n urmtoarea ordine: nucleol#
cromatin# nucleoplasm.
:h-ul nuclear este uor alcalin (C#6-C#2). 9otodat# n nucleu
se reali'ea' diferene de potenial ntre membrana nuclear (cu
sarcini electrice negati$e) i nucleoli sau cromo'omi# ce au sarcini
electrice po'iti$e.
(omponentele nucleului sunt: membrana nuclear#
nucleoplasma#cromatina i nucleolul.
4.2. $em%rana nuclear
*embrana nuclear (nucleolema sau carioteca)
(nucleolemma s! ;ar<oteca) este o structur lipoproteic# cu o
grosime de ci$a 'eci de nanometri# caracteristic eucariotelor
care mparte celula n dou compartimente: - nucleul ce conine
genomul# structurile implicate n transcripie i n prelucrarea
produsului transcripticA - citoplasma ce cuprinde organitele
celulare. n celulele $ii# apare ca o pelicul fin# cu indice de
refracie i densitate mai mare dect restul nucleului. n celulele
fi%ate# se colorea' ba'ofil# iar $i'ibilitatea cromatic se datorete
condensrii i coagulrii unor componente ale carioplasmei care
se depo'itea' pe faa intern a membranei.
/a microscopul electronic# nucleolema apare format din
dou foie (una intern i alta e%tern)# fiecare trilaminat#
>5
lipoproteic# groase de >5-:55 # separate printr-un spaiu
perinuclear sau cisterna perinuclear# de :25 H 455 # plin cu o
substan amorf.
Fig.4.&.$em%rana '$N( nuclear ) re#reentare tridime"ional
:-*N i relaiile sale cu reticulul endoplasmic (<0)A B-*N# la microscopul electronic#
cu grosisment redusA 4-9rilaminaritatea celor dou *NA 6-8rgani'area molecular a *NA
2-;ltrastructura *N .
a-NucleulA b-*embrana nuclearA c-(itoplasmaA d-7orA e-<eticul endoplasmicA f-ribo'omi.
3em+rana nuclear e'tern (mem+rana nuclearis e'terna)
pre'int o fa citoplasmatic# ornat cu ribo'omi# are un contur
mai fle%ibil i 'one acti$e de formare a $e'iculelor.
3em+rana nuclear intern (me+rana nuclearis interna) este
lipsit de ribo'omi i ader fie la nucleoplasm# care poate
diferenia o lamin dens# fie la cromatin.
8isterna perinuclear (cisterna nucleolemmae) apare ca un
spaiu tridimensional# aflat n continuitate cu spaiul reticulului
endoplasmatic. n acest spaiu s-au pus n e$iden proteine#
en'ime.(a
BI
.()ig.6.2)
>:
Nucleolema sau n$eliul nuclear este ntrerupt (fenestrat)
de orificii circulare# denumite pori circulari# la ni$elul crora cele
dou membrane se afl n raporturi de continuitate. Numrul de
pori de pe o unitate de suprafa este legat de intensitatea
sc&imburilor nucleo-citoplasmatice. !sfel# la celulele n cretere pot
e%ista :5 pori3Fm
B
. .e ntlnesc $ariaii n numrul# frec$ena i
distribuia porilor de la un tip de nucleu la altul. 7orii sunt n fapt
JporileJ folosite de macromolecule i de ansamblurile
macromoleculare (proteine# !<N m# subuniti ribo'omale#etc.)
pentru a intra sau iei din nucleu. ()ig.6.>)
Fig.4.*. +tructura #orului nuclear.
Porul (porus nuclearis) mpreun cu structurile adiacente
formea' comple%ul porului.
Complexul por (comple'us pori) cuprinde: a - dou inele sau
anuli # ase'ate pe ambele fee ale porului (nuclear i
citoplasmatic)# fiecare inel (anulus pori) fiind compus din granule
proteice sferoide cu diametrul de :5-B2 nm# care sunt dispuse n
form de octagonA b - opt conuri# orientate dinspre peretele porului
ctre lumenul su# considerate a fi agregate de fibrileA c - o
particul central# n form de granul sau bastona# inconstant
pre'entA d - pac&ete de filamente nucleoplasmatice de 6-, nm#
care se inser cu oe%tremitate de inelul intern# iar cu cealalt
e%tremitate se prinde pe formaiuni intra nucleare (e$entual pe
nucleol).
"up unii autori# diferitele structuri care apar n centrul
porului (diafragma porului# granula central# filamentele) par a fi
mai curnd materiale surprinse n timpul trecerii prin por dect
structuri pemanente.
>B
Fig.4.,.+c-ema com#le.ului #or.
:-*N e%ternA B-*N-internA4-.paiu cisternalA 6-)ilament internA 2-)ormaiune conicA >-
+ranul-anulus e%ternA C-+ranul-anulus internA ,-+ranul central.
#unciile mem+ranei nucleare sunt: : - delimitea'
coninutul nucleului de cel al citoplasmeiAB - reglea' sc&imburile
dintre nucleu i citoplasmA 4 - formea' membranele reticulului
endoplasmic# repre'entnd re'er$a de citomembrane n celule
care se di$id rapidA 6 - menine i stabili'ea' cromatina# care se
ataea' de faa sa internA 2 - rol mecanic n susinerea
organitelor# acestea fiind legate de faa sa e%tern prin fibrile de :,
nm.()ig.6.,.)
Fig.4./. 0iagrama cilor de tran"locare a matrialului din nucleu '1( n cito#la"m '2(.
:-9ransport prin micro$e'iculeA B-9ransport transmembranar4-9ransport combinatA
6-9ranslocare prin poriA 2-0%tru'are prin delimitarea unor saci din n$eliul nuclear.
>4
4.3.Nucleo#la"ma
Nucleoplasma# matricea nuclear sau sucul nuclear
(nucleoplasma) repre'int acea parte a nucleului# aparent lipsit
de structuri (la microscopul optic i la cel electronic#de grosisment
redus). /a ni$elul molecular apare structurat# nct denumirea de
suc nuclear apare impropie# fiind mai adec$at denumirea de
matrice nuclear. Nucleoplasma se pre'int ca un mediu de
natur proteic care n care JplutescJ nucleolii i cromatina. !re rol
esenial n organi'area nucleului# determinndu-i forma# n sinte'a
de !"N i !<N# n medierea semnalelor &ormonale (ale
steroi'ilor).(onine di$erse en'ime# ce inter$in n glicoli'a
anaerob i n reali'area unor legturi macroergice.
*atricea nuclear cuprinde dou componente: matricea
nuclear propiu-'is i fraciunea labil a matricei.
3atricea nuclear propiu-zis sau scheletul nuclear
repre'int ec&i$alentul citosc&eletului la ni$el nuclear#fiind format
dintr-o reea de proteine stabile cu greutatea molecular mare..e
poate i'ola dup e%tragerea cromatinei i nucleolului. 0ste
format din trei componente: matricea fibrilar# componentele
fibrilare (nemembranoase) ale n$eliului nuclear i componenta
fibrilar a nucleolului.
3atricea fi+rilar apare ca o reea de fibrile intranucleare#
ntins n toat masa nucleului. 0ste format din granule sau
particule matriceale# electronodense# cu diametru de :2-B5 nm i
din fibrile matriceale (sau matri%in)# cu diametru de 2 nm#dispuse
n pac&ete. *atricea fibrilar conine proteine (B5E din totalul
proteinelor nucleare)# !"N (:#BE)# !<N (5#2E) i fosfolipide# n
cantitate redus. /ipsesc proteinenele &istonice# n timp ce
proteinele non&istonice ocup :,#BE# predominnd cele acide.
8omponentele fi+rilare (nemem+ranoase) ale ,nveliului
nuclear sunt o form speciali'at a citosc&eletului nuclear#fiind
repre'entate de lamina dens intern (sau lamina fi+rosa) i de
comple'ul por.
1amina dens intern este situat pe faa nuclear a
membranei interne a n$eliului nuclear. !re aspectul unei reele
de fibrile legate pe de o parte la reeaua matricei nucleare i pe de
alt parte la componentele fibrilare ale comple%ului por.
8omple'ul por este format din structuri inelare (matricea anular
sau anulii)# din granule centrale i din filamente radiare.
/amina dens intern mpreun cu comple%ul por formea'
o component a sc&eletului nuclear# denumit comple' lamina-por!
!cest comple% conine B-4E din totalul proteinelor din nucleu (D2E
>6
din ele fiind ne&istonice# predominent acide). 7e faa intern a
comple%ului lamina-por a fost identificat o nucleo'id trifosfata'#
implicat n transportul !<N ctre citoplasm.
8omponenta fi+rilar nucleolar (matricea nucleolilor) este
repre'entat de o reea de filamente ce ocup aria ce corespunde
prii fibroase i prii granuloase din nucleol.0ste format din
polipeptide asemntoare celor din sc&eletul nuclear i are rol de
suport pentru depo'itarea granulelor ribo'omale.
)unciile matricei nucleare sunt: :- menine forma nucleului
i stabilitatea acestuia n interfa'A B-asigur fle%ibilitatea
nucleului# fapt ce permite reali'area unor modificri structurale
legate de organi'area cromatinei# replicarea !"N# transcripia i
transportul intranuclear de !<NA 4- contractilitatea# independent
de !97# dar influenat de ionii bi$aleni ((a
BI
#*g
BI
) ce permite
reali'area unor $ariaii ale $olumlui nuclearA 6- suport pentru
depo'itarea granulelor ribo'omale.
4.4. Cromatina
8romatina nu este o substan c&imic# ci o noiune
biologic# fiind repre'entat de materialul intranuclear care se
e$idenia' cu colorani ba'ici. 0ste forma de e%isten a
cromo'omilor n interfa' # n celula aflat ntre dou di$i'iuni.
(romatina i cromo'omii sunt dou forme de organi'are ale unuia
i aceluiai material genetic (!"N-ul).
8ompoziia chimic a cromatinei cuprinde !"N# proteine
&istonice# mici cantiti de !<N i proteine ne&istonice.
(antitatea de ADN din nucleu este constant pentru o
anumit specie i repre'int genomul speciei respecti$e. 0ste dat
de numrul i dimensiunile moleculelor de !N".
=istonele sunt proteine ba'ice# pre'ente numai n genomul
eucariotelor. n funcie de coninutul n arginin i li'in e%ist cinci
tipuri de &istone# denumite 1
:
# 1
B!
# 1
B-
# 1
4
# 1
6
. /a rndul su
fiecare tip pre'int mai multe subtipuri.
1istonele pre'int mai multe particulariti: :- au mas
molecular micA B- sunt puternic ba'ice# datorit coninutului mare
(:5-B5E) de aminoaci'i ba'ici (li'ine i arginine)A 4- sunt
purttoare de sarcini electrice po'iti$e# care le permit s se lege de
sarcinile negati$e ale gruprilor fosfat din !"NA 6-sunt proteine cu
e$oluie filogenetic molecular definiti$.
1istonele ndeplinesc un rol ma?or n mpac&etarea !"N-ului
n nucleu# n reali'area organi'rii supramoleculare a !"N-ului sub
>2
form de nucleo'omi. n cursul ciclului celular# &istonele sufer o
serie de modificri c&imice ( acetilri#fosforilri# metilri).
n spermato'oid# &istonele sunt nlocuite de protamine.
7rotaminele au o greutate molecular foarte mic (6B55 daltoni)# o
lungime medie de numai 44 aminoaci'i i sunt foarte ba'ice#
coninnd mult arginin. "nlocuirea histonelor are loc ,n timpul
trecerii de la spermatid la spermatozoid, permind realizarea
unui ,nalt grad de condensare i compactare a cromatinei, pentru
,mpachetarea ADN-ului ,ntr-un volum foarte mic, cum este cel al
capului spermatozoidului!
Fig.4.3. 1"#ecte ale cromatinei nucleare
K. /a microscopul optic: :-(rusteA B-+ranuleA 4-Ne$uriA 6-Nucleu &ipercromaticA
2-Nucleu &ipocromatic.
KK. /a microscopul electronic: :- (romatin perifericA B-(romatin insularA 4-
(romatina asociat nucleoluiA 6-NucleolA 2-*embran nuclearA >-.paiu
perinuclearA C-7ori.
Aspectele histologice ale cromatinei! "atorit coninutului
bogat n !"N#comple%at cu &istone# cromatina se colorea' ntens
cu colorani ba'ici (&emato%ilin#albastru de tripan)# putnd
pre'enta aspecte $ariate: granule# grme'i neregulate# reele de
filamente# corpusculi cromocentrici (sau cario'omi). !spectul
morfologic al cromatinei este asemntor n nucleii aparinnd
aceluiai tip celular# dar $aria' n funcie de tipul celular i de
>>
stadiul funcional#fiind un criteriu important pentru identificarea
celulelor la microscopul optic.
4.4.1. Eucromatina
>ucromatina (euchromatinum) repre'int cromatina
funcional# acti$# purttoare de gene structurale# pe care se face
transcripia mesa?ului genetic. 7oate fi de dou feluri: :-
eucromatin activ, pecare transcripia se efectuea' continuu#
asigurndu-se defurarea normal a $ieii celuleiA B-
eucromatin permisiv # potenial acti$# de$enindacti$ n
momentul n care acionea' semnale specific modulatoare (de
e%emplu: &ormonii).
<eglarea conformaiei genetice se reali'ea' pe
eucromatin# prin inter$enia unor ageni bioc&imici# n principal
proteine ne&istonice# ce pot aciona ca represori sau derepresori#
modulnd transcriptibilitatea materialului genetic acti$ i nu
structura acestuia.
<aportul dintre eucromatin i &eterocromatin se e%prim
funcional prin raportul dintre transcriptibil i netranscriptibil#
permind# n fapt# reali'area relaiei dintre genotip i fenotip.
!stfel# prin genotip se nelege totalitatea materialului genetic
cuprins n cromatina interfa'ic# deci eucromatina mpreun cu
&eterocromatina. #enotipul repre'int e%presia unei pri din
genotip# care a fost transcris din eucromatin n interfa'#
totalitatea trsturilor (nsuirilor morfologice#fi'iologice#etc.)
e%primate din noianul de informaii nscrise n genotip.
4.4.2. 4eterocromatina
=eterocromatina (heterochromatinum) este cromatina
condensat# netranscriptibil# inacti$ metabolic.0%ist dou tipuri
de &eterocromatin: constituti$ i facultati$.
=eterocromatina constitutiv este genetic inacti$# lipsit de
gene structurale. 7e ea nu se face transcripie niciodat# rmnd
ntotdeuna condensat n interfa'. (onine !"N repetiti$ sau
satelit# un !"N n care anumite sec$ene nucleotidice sunt
repetate de un numr foarte mare de ori. /a mamifere# !"N-ul
repetiti$ repre'int :2E din cantitatea total de !"N. 0%ist dou
tipuri de !"N repetiti$::- !"N nalt repetiti$ (:5E)# n care
sec$enele se repet de sute de mii de oriA B-!"N mediu repetiti$
(2 E)# n care sec$enele se repet de :55 ori# de :555 ori sau de
'eci de mii de ori.
>C
7e cromo'omii omologi (care formea' o perec&e)#
&eterocromatina constituti$ se locali'ea' identic# de regul# n
imediata $ecintate a centromerului# putnd fi detectat prin
te&nica de bandare a cromo'omilor.
<olul &eterocromatinei constituti$e este incomplet elucidat#
atribuindu-se o semnificaie de JprotecieJ sau de JsuportJ#
sugerndu-se ipote'a c ea determin specificitatea centromeric#
respecti$ po'iia centromerului n cromo'omi.
=eterocromatina facultativ este o cromatin condensat#
care conine gene structurale represate (inacti$e) pe care nu se
face transcripia. 7e aceste gene# transcripia s-a efectuat sau nu
ntr-o perioad anterioar# sau se $a putea efectua# dac se
transform n eucromatin# sub influena unui agent derepresor.
!stfel# transformarea unei pri din &eterocromatina auto'omal n
eucromatin determin sinte'a de imunoglobuline i transformarea
limfoblastic a limfocitelor.
n funcie de cromo'omi n care se gsete#
&eterocromatina poate fi: :-autozomal (autosoma)# pre'ent n
perec&ile de cromo'omi auto'omi# sub forma poriunilor
condensate# &eterocromatice# ce conin lanuri de gene# inacti$e
transcripionalA B-gonozomal (gonosoma)# pre'ent numai n
cromo'omii ce determin se%ul # repre'entat de cromatina L# la
femel i de corpusculul M# la mascul.

Fig.4.15. 1"#ectele cromatinei 6
:-.atelit nucleolarA B-"rumstickA 4-(orpuscul cromocentric
8romatina ) sau corpusculul 4arr a fost descris de
*./.-!<< i de 0.+.-0<9<!* n :D6D# n neuronii din nucleul
ner$ului &ipoglos la pisic. 0ste folosit ca marker genetic pentru
recunoaterea se%ului genetic. Kn mod normal este pre'ent numai
n nucleii celulelor somatice ale femelelor sub forma unui
corpuscul cromatidian# denumit corpuscul -arr. !cesta repre'int
condensarea interfa'ic a unuia din cei doi gono'omi L. 7rin
condensare# eucromatina se transform n &eterocromatin
>,
facultati$ inacti$. n situaia n care ambii gono'omi L ar fi acti$i
(transcripionabili)# n celulele femelei ar trebui s e%iste o cantitate
dubl de en'ime# controlate de genele situate pe cromo'omul L.
(romatina L este pre'ent i detectabil la toate femelele
mamiferelor# cu e%cepia femelei de opussum (mamifer marsupial)#
unde este pre'ent la ambele se%e. /ipsete la toi masculii
normali.
(orpusculul -arr are un diametru de cca. :Fm i poate
pre'enta forme diferite: plan-con$e%# con$e%-conca$# bicon$e%#
triung&iular. 7o'iia sa $aria' dup tipul celular# aprnd situtat
adiacent membranei nucleare interne ( n celulele epidermale i
ale epiteliului mucoasei bucale) sau ataat nucleolului (n unii
neuroni). n neutrofilele femelelor este pre'ent o formaiune
ec&i$alent corpusculului -arr# denumit# dup aspectul su Jb
de tobJ (drumstick)# format dintr-un cap cu diametrul de :#2Fm#
ataat printr-un filament cromatic e%trem de subire la unul din lobii
nucleului. )rec$ena drumstick-ului est de C3255 neutrofile# sau
c&iar mai mult.
8romatina ? sau corpusculul # se poate obser$a n nucleii
celulelor pro$enite de la masculii normali# e%aminate n lumin
ultra$iolet# dup colorare cu fluorocrom. !re aspectul unui
corpuscul intens fluorescent. ! fost descpoperit de 70!<.8N# n
:DC5 i repre'int e%presia citologic a cromo'omului M. /a
indi$i'ii ce pre'int doi cromo'omi M se obser$ doi corpusculi ).
n acest mod se pot diagnostica unele anomalii cromo'omiale
(trisomia LLM) la masculi# care predispun la un comportament dur#
nrit.
4.4.3. Cromoomii
(romo'omii (8hromosoma) sunt structuri celulare cu numr#
forme i mrimi caracteristice pentru fiecare specie. 0i de$in $i'ibili
la microscopul optic n celulele care se pregtesc pentru di$i'iune
sub forma unor filamente lungi# cu mare afinitate pentru colorani
ba'ici# de unde i trag denumirea# croma nsemnnd n limba
greac culoare# iar soma - corp. ()ig.6.::.)
n funcie de posibilitile de a fi obser$ai la microscopul
optic# cromo'omii pot fi clasificai n : - cromozomi interfazici,
necondensai i neobser$abili la microscopA -cromozomi mitotici#
uor obser$abili la microscop# mai ales n cursul metafa'ei i de
aceea denumii cromozomi metafazici! .tructura cromo'omilor
metafa'ici cuprinde: cromatidele# centromerul# kinetocorii#
constriciile secundare i sateliii.
>D
8romatidele (chromatidea) sunt cele dou ?umti
longitudinale# genetic identice ce formea' fiecare cromo'om
metafa'ic. )iecare cromatid corespunde unei molecule de !"N.
Fig.4.11. Cromoomi interfaici 7i cromoomi mitotici
0%tremitile terminale ale cromatidelor se numesc telomere
(telomerus) i sunt absolut necesare pentru structura i
funcionarea normal a cromo'omilor# deoarece pre$in fu'iunea i
menin o anumit ordine a cromo'omilor interfa'ici n interiorul
nucleului prin ataarea lor la membrana nuclear intern.
8entromerul (centromerus ) sau constricia primar este regiunea
cea mai ngust din lungimea cromo'omului# unde cele dou
cromatide se unesc. (entromerul este slab colorat sau acromatic#
a$nd un coninut sc'ut de !"N. n $ecintatea centromerului se
gsete &eterocromatina constituti$. (ei mai muli cromo'omi
sunt monocentrici ( cromosoma monocentricum)# pre'entnd un
singur centromer. n ca'ul unor anomalii cromo'omiale apar
cromo'omi dicentrici ( cromosoma dicentricum) sau policentrici
(cromosoma pol<centricum)!
@inetocorii (;inetocorus, i) sunt n numr de doi pentru
un cromo'om i repre'int locul prin care fiecare cromatid se
ataea' de microtubulii fusului de di$i'iune. /a microscopul
electronic un kinetocor are forma unui o$al cu dimensiunile de 23B2
nm. (fig.6.:B.)
C5
Fig.4.12.Ultra"tructura cromoomului
:-(entromerA B-(romatideA 4-(romonemeA 6-(romomere.
8onstriciile secundare sunt 'one ale cromo'omilor ce nu
rein colorantul ba'ic. .er$esc drept criteriu morfologic de
indi$iudali'are a cromo'omilor. n comparaie cu constriciile
primare# la ni$elul costriciilor secundare nuse produc de$iaii
angulare ale segmentelor pe care le unesc. ;nele din 'onele de
constricie secundar sunt legate de formarea nucleolilor i se
numesc 'one nucleolare sau organizatori nucleolari! iar
cromo'omii care particip la formarea nucleolilor sunt denumii
cromo'omi nucleolari (chromosoma nucleolare)!
Aatelitul (satelles chromosomalis) este un corpuscul sferic#
cu diametrul egal cu al cromo'omului sau mai mic# ataat de
restul cromo'omului printr-un filament (filum satellitis) subire de
cromatin de lungime $ariabil. (romo'omii ce pre'int satelit se
numesc AAB-cromozomi (chromosoma satellitiferum).
n funcie de po'iia centromerului# cromo'omii se clasific
n: :-telocentrici (chromosoma telocentricum), la care centromerul
este situat la o e%tremitate a cromo'omului#lipsindu-i braele
scurteA B-acrocentrici (chromosoma acrocentricum)# cu brae
scurte abia $i'ibile# centromerul fiind situat n apropierea
e%tremitii cromo'omuluiA4-su+metacentrici (chromosoma
su+metacentricum)# la care centromerul este situat n apropierea
C:
mi?locului lungimii cromo'omului# pre'entnd un bra scurt i un
bra lungA 6- metacentrici (chromosoma metacentricum), cu braele
apro%imati$ egale# centromerul fiind situat la mi?locul lungimii
cromo'omului.
Fig.4.13. +c-ema unui cromoom.8i#uri de cromoomi.
:-(entromer: B-(onstricie secundarA 4-.atelitA
a-(romo'om telocentricA b-(romo'om acrocentricA
c-(romo'om submetacentricAd-(romo'om metacentric.
Dimensiunile cromo'omilor sunt cuprinse ntre :#2-:5 Fm#
lungime i 5#B-B Fm diametru# putndu-se ntlni cromo'omi
gigani i cromo'omi pitici.
Numrul cromo'omilor apare constant pentru aceiai specie#
e%istnd: >5 cromo'omi la bo$ine# 26 la o$ine# 4, la suine# >6 la
cabaline# >4 la catr# 4, la felide# C, la canide i 6> la primate.
(elulele se%uale sau gameii sunt haploide (&aplos= simplu)#
coninnd un singur set de cromo'omi# notat cu JnJ#fa de celulele
somatice care sunt diploide (diplos=dublu) i conin dou seturi
(Bn) de cromo'omi (un set matern i altul patern). )iecare
cromo'om dintr-un set are n setul opus un cromo'om
complementar# identic structurat morfologic i genetic# alctuind o
perec&e de cromo'omi omologi. !sfel# taurinele pre'int 2,
cromo'omi auto'omi (BD perec&i) i B cromo'omi de se%
( &eterocromo'omi sau gono'omi). 9aurinele femele au n celulele
somatice doi cromo'omi L# #iar formula cromo'omial este >5#LL.
*asculii taurinelor au formula cromo'omial >5#LM i pre'int n
celulele somatice un cromo'om L i altul M. n formula
cromozomial# prima cifr indic numrul total de cromo'omi#
dup $irgul fiind indicai cromo'omii de se% (gono'omii). /a
taurine# fiecare din cele BD perec&i de cromo'omi autosomi este
format din B cromo'omi omologi# cu aceiai morfologie i
dispunere a genelor. 1eterocromo'omii ( gono'omii) nu sunt
omologi. /a taur# diferena de form ntre cromo'omul L i cel M
CB
este e$ident# cromo'omul M fiind un cromo'om submetacentric
mic. /a $aci# cei doi cromo'omi L submetacentrici nu sunt
omologi# deoarece numai unul este acti$ genetic# iar cellalt este
inacti$# rmne condensat n interfa' i formea' cromatina
se%ual (corpusculul -arr). "iferenierea celor doi cromo'omi L n
unul acti$ i altul inert genetic se face ntr-un stadiu precoce al
de'$oltrii embrionare.
8ompoziia chimic a cromo'omilor include !"N# proteine
(&istonice i non&istonice) i o cantitate redus de !<N.
=istonele sunt proteine cu greutate molecular redus
(:5.555- B5.555 dal)# cu coninut mare (:5-B5E) de aminoaci'i
ba'ici (li'in i arginin)# purttori de sarcini electrice po'iti$e# ce
le permite s se lege de sarcinile negati$e ale gruprilor fosfat din
!"N. /a eucariote e%ist cinci clase de &istone# ce difer dup
coninutul lor n li'in i arginin: 4
1
# 4
21
# 4
22
# 4
3
i 4
4.
. n timp ce
&istonele 1
B!
# 1
B-
# 1
4
i 1
6
sunt cele mai constante din punct de
$edere al sec$enei aminoaci'ilor la di$erse specii# &istonele 1
:
pre'int o $ariabilitate a sec$enelor.
:roteinele nonhistonice sunt de foarte multe tipuri# de la
proteine ce intr n structura cromo'omilor sau care se leag de
!"N# inter$enind n e%primarea genelor i pn la proteine en'ime
ce inter$in n sinte'a de !"N i !<N sau n scindarea lor.
7roteinele ce inter$in n reglarea e%primrii genelor sunt
rare# aprnd ntr-un e%emplar la 4555 de nucleo'omi. 0%ist# ns
i proteine ne&istonice mult mai abundente# precum grupul de
proteine cu mobilitate mare (1*+-&igt mobilitN group)# care fiind
mici i cu multe sarcini electrice migrea' rapid n cursul
electrofore'ei. "in acest grup# proteinele 4$9
14
i 4$9
1,
se
gsesc n toate celulele de la mamifere# legndu-se de
nucleo'omii asociai cu genele acti$e.
AN-ul se gsete n cantitate redus n cromo'omi# fiind
repre'entat de !<N-ul nascent# care se formea' pe matria de
!"N n procesul de transcriere.
4.4.3.1. Carioti#ul
(ariotipul este repre'entat de totalitatea caracterelor
morfologice (numr# mrime# form# po'iia centromerului#
constriciile ) ale cromo'omilordintr-o celul diploid. +rafic poate fi
pre'entat printr-o J&artJ numit cario- sau idiogram# n care
perec&ile de cromo'omi omologi sunt ae'ai n ordinea
C4
descrescnd a lungimii. (romo'omii se%uali sunt cromo'omi L
submetacentrici i cromo'omul M# submetacentric mic.
(ariotipul unei specii se obine prin fotografierea
cromo'omilor metafa'ici# obinui din metafa'ele limfocitelor din
culturi# stimulate s se di$id cu fito&emaglutinine i blocate n
metafa' prin adaus de colc&icin# un alcaloid ce mpiedic
asamblarea fusului de di$i'iune. "in fotografiile obinute se
decupea' cromo'omii i se aran?ea' n cariotip# putndu-se
identifica grupele de cromo'omi# fra a se putea preci'a cu
certitudine perec&ea.
Kdentificarea fiecrei perec&i se face prin folosirea tehnicilor
de +andare, te&nici care permit punerea n e$iden a unor ben'i
trans$ersale de-a lungul cromo'omilor# ben'i care sunt
caracteristice pentru fiecare cromo'om.
.e folosesc dou categorii de te&nici de bandare: :- tehnici
cu fluorescen prin care se obin ben'ile JOJ ( de la Puinacrin)
fluorescenteA B -te&nici ba'ate pe tratarea cromo'omilor cu diferii
ageni fi'ici i c&imici# urmate de coloraia 5iemsa prin care se
e$idenia' trei feluri de ben'i : +enzile 5 (+iemsa)# care apar
intens colorate i corespund ben'ilor fluorescente OA -+enzile
(re$erse band)# cu o dispunere in$ers ben'ilor +# nct ben'ile <
intens colorate# corespund ben'ilor + palideA- ben'ile (# apar
numai n regiunea centromerului sau n apropiere ei i corespund
locali'rii &eterocromatinei constituti$e.
"eterminarea cariotipului are o mare importan n practica
medical# pentru: a-diagnosticul unor boli congenitale# precum
trisomia perec&iii B:# care produce boala "oQn (idioia
mongoloid)A b- sfatul genetic i diri?area mperec&erilor la
animaleA c-aprecierea statusului genetic la populaiile cu mare risc
geneticA d-diagnosticul diferenial al unor anomalii se%uale# cu
determinare genetic# precum sindromul 9urner (L8# n loc de LL)#
ce produce sterilitate# o$are $estigiale i sindromul Rleinfelter
(LLL# n loc de LM)# ce se manifest prin testicule atrofiate#
sterilitate# ginecomastieA e-diagnosticul unor boli ale sngelui#
precum leucemia mieloid# unde apare un cromo'om marker
anormal (cromo'omul 7&-7&iladelp&ia)A f - pentru diagnosticul de
paternitate# prin msurarea lungimii cromo'omului M# care trebuie
s fie aceiai la ft ca i la presupusul tatA g- pentru diagnosticul
diferenial ntre unele tumori benigne i alte maligne# ce modific
cariotipul. "e asemenea stabilirea locusului pe care l ocup ogen
ntr-un cromo'om permite reali'area &rilor cromo'omiale# un
domeniu de cercetare de mare actualitate.
C6
4.4.3.2. :rganiarea molecular 7i "u#ramolecular a
cromoomilor la eucariote.
/a microcopul electronic# cromo'omii metafa'ici apar ca
nite g&eme de cromatin# nfurate foarte neregulat. )iecare
cromatid conine o singur molecul de !"N ce se organi'ea'
sub forma unei fibre de cromatin# cu grosimea de :5 nm# foarte
sinuoas# mpac&etat compact# pre'entnd 'one de eucromatin
i &eterocromatin. mpac&etarea !"N-ului i a &istonelor n
cromo'om este absolut necesar pentru ca o molecul de !N" co
greutate molecular de >:5
:5
daltoni i o lungime de 4 cm s
ncap ntr-un cromo'om lung de 2 Fm ( 5#5552 cm).
mpac&etarea se facecu a?utoul nucleo'omilor# care sunt uniti
fundamentale repetiti$e de organi'are a comple%ului !N" -&istone#
deci a cromatinei. ()ig.6.:6).
Fig.4.14.$odaliti de #licaturare a fi%rei de cromatin n cromoom
:-7licaturare trans$ersalA B-7licaturare longiutdinalA
4-7licaturare combinatA 6-.tructur cuaternar.
4.4.3.3. Nucleoomii
(onceptul de nucleozom a fost elaborat de RS<N-0<+# n
anii :DC2-:DCC. ;n nucleo'om este un octamer &istonic de forma
unui cilindru scurt # cu un diametru de :: nm i o nlime de 2#2
nm# pe care duple%ul de !N" l ncon?oar de dou ori.()ig.6.:2.)
C2
Fig.4.1&.1lctuirea nucleoomului Fig.4.1*.Poiia -i"tonei 41
8ctamerul &istonic este format din opt molecule de &istone#
cte dou molecule de 1
B!
# 1
B-
# 1
4
i 1
6
. 9etramerul de &istone -
(1
4
)B i (1
6
)B - bogate n arginin formea' mie'ul
nucleo'omului i determin nfurarea duple%ului de !"N. (ei doi
dimeri de &istone bogate n li'in# - (1
B!
)B i (1
B-
)B - sunt
ataai mie'ului nucleo'omului. Nucleo'omul nu conine proteine
non&istonice.
=istona =
%
nu intr n structura nucleo'omului# fiind siutat
lateral de acesta# n contact cu intrarea sau ieirea !"N-ului din
nucleo'om. 1istona 1
:
se leag de !"N-ul linker prin fore ionice#
pre'entnd o poriune ( (carbo%il) terminal# legat direct de !"N
i o poriune N (amino-)# ce nu se ataea' de !"N# dar ofer
locusuri de legare pentru proteinele ne&istonice 1*+
:
i 1*+
B
.
1istona 1
:
este implicat n spirali'area )ibrei de cromatin.
()ig.6.:>).
*olecula de !"N este continu de-a lungul cromo'omului#
pre'etnd poriuni nfurate pe nucleo'omi i poriuni ce fac
legtura dintre doi nucleo'omi succesi$i# denumite ADN-lin;er sau
internucleozomic! "e !"N-ul linker se leag o molecul de &iston
1
:
# amplasat ntre doi nucleo'omi. .e reali'ea'# asfel# o niruire
a nucleo'omilor unul dup altul# ca mrgele pe a# formndu-se
filamentul subire de cromatin# cu diametrul de :: nm# care se
poate obser$a la microscopul electronic# numai dac cromatina
este JntinsJ n mod artificial. n celula $ie# fibra de cromatin are
un diametru de 45 nm# rsucit ntr-o structur &elicoidal (un
solenoid sau o bobin) cu pasul elicei de :: nm. /a fiecare tur de
spir se inser ase nucleo'omi. <ata de mperec&ere a !"N-ului
pe nucleo'om este de circa :53:. apro%imati$ >5 nm de !"N fiind
nfurai pe un cilindru nucleo'omic nalt de 2#2 nm. !poi#
dispunerea nucleo'omilor sub form de bobin (solenoid) cu
C>
diametru de 45 nm permite reali'area unui raport de mpac&etare
de cca. 253:. 0ucromatina corespunde filamentului de cromatin
de :5 nm# iar &eterocromatina corespunde solenoidului (bobinei)
de 45 nm.()ig.6.:C)
Fig.4.1,.Formarea filamentului "u%ire de cromatin
!-1istona 1:A --Nucleo'omA (-)ilamentul de cromatinA
:-7oriunea globular a &istonei.
mpac&etarea duple%ului de !"N pe nucleo'om i a
nucleo'omilor n fibra de cromatin de 45 nm ar permite ca ntr-un
cromo'om ipotetic de : mm lungime# s ncap un !"N lung de 4
cm. /a rndul ei# fibra de cromatin de 45 nm se plia' formnd
bucle de mrimi $ariabile# ce permite s se reduc lungimea
JfiruluiJ de !"N de la : mm la :55 Fm.
7entru a JncapeJ n cei 2 Fm lungime ai unui cromo'om
metafa'ic sunt necesare nc dou ordine de condensare a
cromatinei# care se reali'ea' probabil prin mpac&etarea
elicoidal a buclelor de cromatin# nct aglomerarea lor n
anumite 'one determin apariia ben'ilor $i'ibile n cromo'omul
metafa'ic. .e pare c superspirali'area solenoidului se reali'ea'
cu a?utorul unor proteine ne&istonice. !stfel# fosforilarea proteinelor
ne&istonice ar declana superspirali'area solenoidului# n
momentul trecerii de la +
B
la mito'# iar defosforilarea lor ar
induce despirali'area# n momentul trecerii de la mito' la +
:
.
!lturi de &istone# n procesele de mpac&etare a nucleo'omilor n
fibra de cromatin# nter$ine ionul de *g
BI
.()ig.6.:,.)
CC


C,
Fig.4.1/.+tructura fi%rei de cromatin de 35 nm '1( 7i nucleoomului '2(.
:- *ie'ul &istonicA B- !"N linker.
Kn timpul di$i'iunii celulare# condensa-rea cromatinei
corespunde mpac&et-rii compacte n spaiu a fibrei de cromatin
de 45 nm# odat cu reali'area structurii cromo'omului metafa'ic.
()ig.6.:D.)
.-a calculat c# !"N-ul nfurat pe un nucleo'om este prea
scurt pentru a corespunde unei gene structurale# nct nu e%ist o
concordan ntre o gen# ca unitate de informaie genetic i un
nucleo'om# ca unitate de mpac&etare a !"N-ului.
+ena este format din apro%imati$ :555 perec&i de
nucleotide (perec&i de ba'e)# n timp ce !"N-ul nfurat pe un
nucleo'om are B55 perec&i de ba'e. ;nele gene de la eucariote
apar discontinui# pre'entnd sec$enele din !"N care codific
aminoaci'i (e%oni)# separate ntre ele prin sec$ene de !"N care
nu codific aminoaci'i (introni).(fig. 6.:D)
Fig.4.13.Eucromatina 7i -eterocromatina Fig.4.25.Eta#ele realirii "tructurilor
cromoomilor eucariotici
CD
:-!"N linker !-"uple% de !"NA
:IBH0ucromatinA --)ilament de cromatinA
4-.olenoid de 45 nm - &eterocromatin (-)ibra de cromatinA
"--ucle de cromatinA
0--and condensatA
)-(romo'om n metafa'.

0%ist mai multe ipote'e asupra mecanismului prin care
genele structurale din !"N-ul nfurat pe nucleo'om sunt
acti$ate pentru transcripie. (ea mai larg acceptat ipote' (emis
n :D,B) susine c acti$area genelor se face ca urmare a
inter$eniei proteinelor ne&istonice 1*+
:6
i 1*+
:C
# care fie c
nlocuiesc proteinele 1*+
:
i 1*+
B
de pe locurile lor de legare pe
&istona 1
:
#fie c nlocuiesc nsi &istona 1
:
de pe !"N-ul linker
internucleo'omic.()ig.6.B5.)
Kn acest fel# regiunile din filamentul nucleo'omic n care
inter$in proteinele 1*+
:6
i 1*+
:C
i $or modifica conformaia
bioc&imic# de$enind regiuni acti$e transcripional.

4.&. Nucleolul

Nucleolul (nucleolus) este o component intranuclear# cu
aspect corpuscular (corpusculum nucleare)# pre'ent n interfa'#
a crei funcie principal const n biogene'a ribo'omilor (cu
e%cepia ribo'omilor mitocondriali. 8cup o po'iie c&eie n
circuitul intracelular al informaiei# fiind sediul unui considerabil
trafic de molecule. n el se desfoar principalele procese care
au loc n nucleu (replicare# transcripie# transport)# ?ucnd rolul unui
intermediar ntre cromo'omi i citoplasm. 0ste pre'ent ($i'ibil sau
nu ) n toate celulele eucariote. Nu e%ist nucleu fr nucleol# iar
celulele care i perd nucleolii nu mai sunt $iabile.
n timpul di$i'iunii celulare se de'integrea' i reapare dup
terminarea acesteia. n structurarea nucleolului# un rol deosebit
re$ineorgani'atorilor nucleolari# pre'eni n unii cromo'omi#
adiacent constriciei secundare.
"ei a fost obser$at nc din :,4> de ctre @!/0N9KN# ca o
granul dens n interiorul nucleului# rolul su a fost de'legat mult
mai tr'iu# abia n :D>5# preci'ndu-se rolul esenial pe care l are
n biogene'a ribo'omilor.
0%aminat la microscopul pre'int un aspect omogen#
puternic ba'ofil# bine delimitat. 7rin impregnri argentice# au fost
e$ideniate dou componente n structura nucleolului: :-
nucleolonema (nucleolonema), o formaiune filamentoas#
rsucit ca un g&emA i B- o component astructurat sau amorf
(pars amorpha). Nu este delimitat de o membran.
,5
n celulele $ii# e%aminate n contrast de fa'# nucleolul apare
ca un corpuscul puternic refringent# datorit coninutului redus de
ap# &eterogen i cu contur neregulat.
Numrul nucleolilor! n nucleii celulelor somatice e%ist# n
mod obinuit doi nucleoli# cte unul pentru #fiecare set
cromo'omial. Numrul nucleolilor crete n raport direct cu gradul
de poliploidie. !stfel# n &epatocite e%ist B nucleoli# n celulele
diploide# 6 n cele tetraploide i , n cele octaploide.
Dimesiunile nucleolilor sunt ntre :-B Fm# ocupnd circa
45E din $olumul nucleului. 0le $aria' n funcie de implicarea
celulelor n sinte'a de proteine. (elulele care sinteti'ea' cantiti
mari de proteine (neuronii# celulele embrionare# limfocitele
stimulate antigenic) au ne$oie de muli ribo'omi#ceea ce face ca
nucleolii s aib dimensiuni mari. n celule n care sinte'a de
proteine este redus (n spermato'oi'i)# nucleolii au dimensiuni
mai mici. Nucleolul apare &ipertrofiat n anabolism# n perioada de
difereniere embrionar i se reduce n catabolism i n inaniie.
aportul nucleolo 7 nuclear! Numrul i $olumul nucleolilor
depind de starea funcional a celulei. (u ct celula este mai
acti$ n sinte'a proteinelor# cu att raportul nucleolo3nuclear este
mai mare. !cest raport este folosit drept criteriu pentru aprecierea
$rstei celulelor. !stfel celula tnr pre'int un nucleu mare
eucromatic# cu un nucleol mare# cu o citoplasm redus i
ba'ofil# iar o celul adult pre'int un nucleu mai mic# &ipercrom#
cu nucleoli mici i o citoplasm abundent.
Fig.4.21. Forma 7i #oiia nucleolului
!-)orma: :-.feroidal-o$oidalA B-"iscoidalA 4-9riung&iularA 6-Neregulat.
--7o'iia: :-!lipit membranei nucleolareA B-(entralA 4-0%centric.
,:
#orma nucleolilor! Nucleolii pre'int# de cele mai multe ori# o
form sferic-o$oidal# care pe msura mbtrnirii celulei de$ine
neregulat.
Densitatea nucleolilor este mare (:#42)# nucleolul fiind cea
mai dens structur din celul# datorit concentraiei ridicate n
substan uscat i a cantitii foarte mici de ap.
Dispunerea nucleolilor n nucleu este n ma?oritatea ca'urilor
central sau paracentral# putnd $aria n raport cu mometul
funcional. .-au obser$at i descris micri ale nucleolului n
interiorul nucleului i stabilirea unor contacte cu n$eliul nuclear#
locali'are eficient pentru descrcarea de material biologic n
citoplasm.
4.&.1. Ultra"tructura nucleolului
;ltrastructura nucleolului e$idenia' patru componente n
alctuirea nucleolului: componenta filamentar (pars filamentosa)#
componenta granular (pars granulosa)# componenta
cromo'omial (pars cromosoma) i componenta astructurat (pars
amorpha).
8omponenta filamentar cuprinde filamente de 2nm grosime
i 45-65nm lungime# dispuse n pac&ete ntretiate# formnd o
reea. (onine !"N-ul pe care se sinteti'ea' !<N-ul ribo'omal i
produsul primar al acestei sinte'e (!<N de 62 .). ()ig.6.BB.)
8omponenta granular este domi-nant# fiindalctuit din
granule cu diametru de :2-B5 nm# asemntoare# dar nu identice
cu ribo'omii citoplasma-tici. !ceste granule repre'int precursorii
ribo'omilor.
8omponenta cromozomial# dispus la periferia nucleolului
(cromatina perinucleolar) sau a$ansnd spre interiorul nucleolului
sub form de ben'i (cromatin intranucleolar) este alctuit din
filamente de :5 nm.
,B
Fig.4.22.Ultra"tructura nucleolului.
:-(omponenta filamentarA
B-(omponenta granularA
4-(omponenta cromo'omialA
6-(omponenta astructurat.
8omponenta astructurat apare omogen i cu densitate
medie la flu%ul de electroni. ;mple spaiul dintre granule i fibre#
fiind considerat# de unii autori# cariolimf# iar de ali autori un gen
de matrice pentru celelalte componente nucleolare.
(ele patru componente nucleolare se pot distinge n acelai
nucleol numai n ca'uri rare. aporturile cantitati$e i topografice
dintre ele $aria' n funcie de tipul celulei i de momentul
funcional al acesteia. !sfel# n &epatocitul uman# componentei
,4
filamentoase i re$ine :2 E# celei granulare C5E# iar componentei
cromo'omiale 2E din $olumul nucleolului. n celulele acti$e#
componenetele nucleolare pot segrega# dnd natere unui
corpuscul nucleolar (corpusculum nucleare)!
Nucleolul nu conine membrane i nu este delimitat de
membrane.(omponenta filamentoas i ce granular se pot
asocia formnd ben'i ce apar# la microscopul optic# ca nucleolem.
iar poriunea periferic a componentei cromo'omiale corespunde
cromatinei asociate nucleolului.
n funcie de criteriile ultrastructurale# e%ist mai multe tipuri
de nucleoli: nucleoli reticulari# cei mai comuni# cu cele patru
componente distincteA nucleoli compaci# n care nu se disting
componentele# ntlnii la cte$a tipuri celulare# ca de e%emplu la
limfociteA nucleoli inelari# n care copmponenetele filamentoas i
granular formea' un inel periferic# care ncon?oar o lacun
central.
8ompoziia chimic a nucleolului $aria' n funcie de tipul
celular i de momentul funcional# principalele componente c&imice
fiind: !"N-ul (4 E)# !<N-ul (CE) i proteinele (D5E din greutatea
uscat). /a aceasta se mai adaug cantiti mici foarte mici de
lipide i minerale (magne'iu# calciu# 'inc# cobalt# etc.).
!"N-ul din nucleol este repre'entat de organi'atorii
nucleolari ce ptrund ca nite bucle de !"N n nucleol.
!<N-ul din nucleol este n principal !<N ribo'omal aflat n
di$erse fa'a de maturare. .e presupune c nucleolul este o staie
intermediar obligatorie n tran'itul spre citoplasm al !<N-ului
mesager i al celui de transfer.n nucleol e%ist diferite tipuri de
!<N# ce difer dup coeficentul lor de sedimentare (e%primat n
uniti .$edberg)# precum !<N 62 .# !<N 6: .# !<N B5 .# !<N
B, .# !<N 4B .. !ceste tipuri corespund diferitelor etape de
maturare a !<N-lui.
:roteinele nucleolare pro$in din citoplasm i sunt
repe'entate n cea mai mare parte de en'ime implicate n sinte'a
i maturarea !<N r (ribo'omal)# precum !<N-polimera'a-!"N
dependent (sau !<N-polimera'a K)# con$erta'a# metila'a#etc.
-a'ofilia nucleolului repre'int principala sa caracteristic#
$i'ibil la microscopul optic i se datorete coninutului relati$ mare
de !<N i !N".
4.&.2.2iogenea nucleolilor
Nucleolul este $i'ibil numai n interfa'#disprnd n profa'
i reaprnd n interfa'. ;n rol esenial n biogene'a nucleolului
,6
i re$ine organi'atorului nucleolar#care este o 'on cromo'omial
distinct# slab colarabil (&eteropicno' negati$)# situat n
$ecintatea constriciei secundare# a$nd un grad mai redus de
nfurare a fibrei de cromatin. Numrul cromo'omilor care
pre'int organi'atori nucleolari este limitat i $ariabil n funcie de
specie. /a &ominide e%ist cinci perec&i de cromo'omi autu'omi#
purttori de organi'atori nucleolari (perec&ile :4# :6# :2#B: i BB ).
()ig.6.B4.)
/a microscopul optic# organi'atorii nucleolari corespund
cromatinei asociat nucleolului# ce poate fi e$ideniat prin reacia
)eulgen# aprnd colorat rou-$iolaceu. /a microscopul
electronic# organi'atorii nucleolari corespund componentei
cromo'omiale# iar funcional cu !"N r (genele care codific !<N r)
ce cuprinde cistronii responsabili de transcripia !<N r.
Fig.4.23. :rganiatorii nucleolari.
:-n$eliul nuclearA B-NucleolA 4- (romo'omi cu orani'atori nucleolariA 6-
-ucle de cromatin cu gene pentru !<N r.

Kpote'ele clasice pri$ind biogene'a nucleolului susin: a-
continuitatea sau persistena nucleolului n cursul di$i'iunii celulare
sub form de granule sau filamente fine (denumite corpusculi
,2
nucleolari)# ataate de cromo'omi# mpreun cu care se
reparti'ea' n celulele fiice# dup care sunt asamblai de
organi'atorii nucleolariA b-formarea de novo# deoarece materialul
nucleolar se de'integrea' complet n cursul mito'ei# fr a fi
incorporat n noii nucleoli.
(oncepia actual a reali'at un compromis raional din punct
de $edere molecular# ntre ipote'ele clasice (a continuitii i a
formrii de no$o)# n sensul c componeneta cromo'omal
respect continuitatea# iar celelalte componente (filamentoas#
granular i amorf) sunt neoformate rapid n fa'a +
:
a ciclului
celular# cnd cistronii sunt reacti$ai pentru transcripie.
4.&.3. Funciile nucleolului
Nucleolul ndeplinete funcii legate de: - sinte'a !<N r i
biogene'a ribo'omilorA -reglarea sinte'ei de !<N rA - transferul
!<Nm i !<Ns n citoplasmA pregtirea mito'ei.
n sinte'a de !<Nr# !"N-ul nucleolar ?oac rolul de matri#
repre'entnd organi'atorul nucleolar. !"N nucleolar conine
cistroni# denumii !"Nr# responsabili pentru transcripia !<Nr#
separai ntre ei prin segmente de spaiere i terminare# formate
din !"N care nu codific. !"Nr este transcris prin inter$enia
!<N-polimera'ei K# re'ultnd un !<N de 62 . care repre'int
precursorul !<N-ribo'omal. n nucleolii &epatocitelor se
sinteti'ea' :555 de molecule de !<N-62. pe minut. 8 parte din
molecula de !<N de 62 . este ndeprtat de o endonuclea' i
,>
apare un !<N de 6: .# care prin inter$enia unei con$erta'e este
scindat n !<N de B5 . i !<N de 4B .. ()ig.6.B6.)

Fig.4.24.Rolul nucleolului n "intea de 1RNr 7i n %iogenea ri%oomilor
ARN-ul de 20 S sufer inter$enia unei metila'e# care
ndeprtea' un fragment molecular# transformndu-se n forma
matur de :, .. !<N-ul de :, . prsete nucleolul i se combin
cu proteine $enite din citoplasm# dup care este trecut n
citoplasm prin porii membranei nucleare sub form de particule
ribonucleoproteice# care repre'int subunitatea ribo'omal mic
de 65 .# ce apare n citoplasm la 45 minute de la nceperea
sinte'ei.
ARN-ul de 2 S este i el metilat i se transform n forma
,C
matur de !<N de B, .# dup ce a pierdut un fragment din
molecul. !<N-ul de B, . mpreun cu !<N-ul de 2 . ( de origine
nuclear# dar e%tranucleolar) i cu proteine formea' o particul
ribonucleoproteic# care repre'int subunitatea ribo'omal mare
(de >5 .). .ubunitatea ribo'omal mare trece prin porii n$eliului
nuclear# aprnd n citoplasm la o or de la debutul sinte'ei. (ele
dou subuniti ribo'omale se ataea' de !<Nm# n momentul
nceperii sinte'ei de proteine# formnd ribo'omii. )ibrilele din
componenta filamentoas sunt filamente de !<N de 62 .# iar
granulele din componenta granular sunt subuniti ribo'omale
mari.
-iogene'a ribo'omilor
0tape Knter$in: <e'ultat
(opierea cistronilor
!"Nr
!<N-
polimera'a K
.inte'a de !<N 62 .
7relucrarea !<N 62
.
0ndonuclea'a !<N 6: .
7relucrarea !<N
6:.
(on$erta'e !<N B5 .
!<N 4B .
7relucrare !<N B5 . *etila'e !<N :, .
7relucrare !<N 4B . *etila'e !<N B, .
7relucrare !<N :, . 7roteine
ribo'omale
.ubunitatea ribo'omala
mica 65 .
7relucrare !<N B, . 7roteine
ribo'omale
.ubunitatea ribo'omala
mare >5 .
eglarea sintezei de ANr n nucleol se reali'ea' printr-un
mecanism de feed-back. 0%istea unui e%ces de ribo'omii
acionea' ca in&ibitor al genelor !"N r# care determin sinte'a de
!<Nr. Kn$ers# distrugerea ribo'omilor $a declana ncetarea
in&ibiiei i creterea sinte'ei de !<Nr# cu formarea de noi
ribo'omi.
Bransferul de AN mesager (!<N m)# deci a mesa?ului
genetic i de !<N de transport (!<N t) din nucleu n citoplasm
nu poate a$ea loc dect n pre'ena unui nucleol funcional# fapt
demonstrat e%perimental rpin distrugerea selecti$ anucleolului cu
un fascicul laser. .e crede c nucleolul ?oac rolul de staie
intermediar n tran'itul !<N m-ului i !<N t-ului spre citoplasm.
:regtirea i desfurarea mitozei nu pote a$ea loc fr
pre'ena nucleolului n interfa'. "istrugerea acestuia produce
blocarea celulei n fa'a +
B
# care precede mito'a.
,,
4.&.4. ;m#licarea nucleolului n cito#atologie.
!spectul nucleolului poate fi folosit pentru recunoaterea
celulelor canceroase. n celulele canceroase# nucleolul pre'int
modificri de $olum#numr i form# care sunt o consecin a
maligni'rii i nu cau'a acesteia.
1ipertrofia nucleolar apare ca o caracteristic aproape
constant n celulele neopla'ice (canceroase)#iar creterea
numrului de nucleoli i neregularitile de form sunt relati$
frc$ente. 1ipertrofia nucleolar nu este acompaniat i de o
&ipertrofie proporional a nucleului nct $aloarea raportului
nucleolo-nuclear este mai ridicat n celulele neopla'ice fa de cele
normale (depind $aloarea de :34). +radul de &ipertrofie a
nucleolului reflect capacitatea proliferati$ a celulei fiind
proporional cu gradul de malignitate a tumorii.
Numrul nucleolilor este mai mare n celulele maligne dect
n celulele normale# fiind uneori proporional cu gradul de
malignitate a tumorii. !sfel# n unele adenocarcinoame din o$ar# au
putut fi obser$ati B6 nucleoli ntr-o celul.
)orma nucleolilor este neregulat n celulele maligne# ea
putnd $aria de la o celul la alta n cadrul aceleiai tumori.
,D