Sunteți pe pagina 1din 14

Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice

BIOFIZICA N ANSAMBUL TIINELOR BIOLOGICE


Una din caracteristicile definitorii ale dezvoltrii contemporane a tuturor tiinelor este cercetarea
complex a obiectelor de studiu, cu metode ct mai diversificate i o abordare multipl. n particular, n
ceea ce privete tiinele biologice, cele mai ample eforturi sunt orientate n prezent spre descifrarea i
nelegerea aprofundat a intimitii mecanismelor vieii oricrui organism i ale existenei i devenirii
tuturor sistemelor biologice. Consecina fireasc a reprezentato afirmarea spectaculoas, mai ales n
ultimele decenii, a unor domenii tiinifice noi, situate la !grania" dintre tiinele tradiionale, n special
dintre biologie i c#imie, fizic, matematic, tiine te#nice.
$efinit succint, biofizica reprezint studiul fenomenelor fizice implicate n funcionarea
sistemelor biologice, tiin ce utilizeaz tehnici i concepte fizico-chimice, precum i aparatul
matematic asociat acestora, pentru cercetarea fenomenelor lumii vii. %flat n plin proces de maturizare
metodologic i conceptual, ca i de afirmare clar a implicaiilor i aplicaiilor sale practice, biofizica
este o tiin !tnr" numai n ceea ce privete vigoarea dezvoltrii sale, dar reprezint o certitudine a
progresului tiinific i te#nic contemporan, datorit contribuiilor aduse la nelegerea aprofundat a
numeroase fenomene biologic.
$efinirea de mai sus a termenului !biofizic" exprim principalele tipuri de probleme pe care le
abordeaz aceast tiin & studierea aspectelor fizice ale fenomenelor biologice, pentru cunoaterea
aprofunfat a acestor fenomene' cunoaterea efectelor biologice ale factorilor fizici ambiani' folosirea
te#nicilor fizice n abordarea unor probleme de biologie.()*
PROTEINELE. STRUCTUR GENERAL
+roteinele sunt constituieni c#imici ai organismelor vii cu cel mai nalt grad de complexitate, de
varietate molecular i care prezint specificitate de specie, de organ. $enumirea lor deriv de la
cuvntul grecesc !proteios" care nseamn !de prim rang, cel dinti". +roteinele sunt substane
macromoleculare de natur polipeptidic. ,a construcia proteinelor particip )- de aminoacizi
fundamentali, aceiai la toate vieuitoarele, de la cea mai simpl bacterie pn la om. +rin legare n
lanuri polipeptidice variate ca lungime i succesiune a unitilor se poate obine un numr nesfrit de
combinaii. Cu toat multiplicitatea posibilitilor de combinare a aminoacizilor n lanuri polipeptidice,
la un anumit organism nu se realizeaz dect anumite secvene, acelea care sunt specificate de
materialul genetic, de %$. parental. +roteinele sunt macromolecule informaionale, cu secvene
specifice de aminoacizi, sunt expresia epigenetic a genomului celular.
+roteinele au un rol structural ma/or, ele constituie materialul din care sunt construite toate
structurile celulare, membrane, organite celulare ca i materialul intercelular al esuturilor i organelor.
+roteinele exist ntro varietate molecular foarte mare i ele asigur diversitatea i specificitatea de
form a tuturor fiinelor vii. 0le exercit aciuni catalitice, determinnd varietatea nesfrit de reacii
bioc#imice i specificul transformrilor c#imice din organismele vii. +roteinele ndeplinesc funcii
reglatoare 1 ele pot stoca i transmite mesa/e c#imice diverse. $e asemenea , ndeplinesc funcii de
transport i de depozitare a unor compui c#imici ca ioni metalici, vitamine, oxigen dioxid de carbon.
2
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
+roteinele au sarcina de a apra organismul mpotriva unor corpi strini, macromolecule, virusuri,
bacterii. 3eaciile imunologice sunt mediate de o clas de proteine specializate 1 imunoglobulinele.
+roteinele au o structura polipeptidic. 4rania dintre structurile polipeptidice propriuzise i
proteine este arbitrar. ,a un anumit grad de complexitate a lanurilor polipeptidice apar nivele
superioare de organizare i caliti noi nentlnite la polipeptidele mai mici.
+roteinele, alturi de acizii nucleici, sunt macromolecule ce exist ntro varietate foarte mare.
5iecare tip de celul, fiecare individ, fiecare specie posed un set distinct de proteine. 6e estimeaz c
numrul de tipuri de proteine din ntreaga lume vie este de 7-
7-
7-
7)
i potenialul de diversitate nu este
epuizat. C#iar proteinele care ndeplinesc funcii similare la specii diferite sunt entiti distincte cu mase
i proprieti diferite.
C#imia proteinelor este deosebit de complex, ea presupune mai nti, nelegerea principiilor
generale de construcie a moleculelor proteice, a modului n care dintrun numr limitat de uniti
structurale se pot forma infinit de multe proteine i a factorilor care intervin n realizarea organizrii lor
spaiale. n al doilea rnd, studiul proteinelor necesit abordarea fiecrui tip de protein n parte,
stabilirea pentru fiecare specie molecular a constituiei c#imice, a ar#itecturii i a funciei 8sau
funciilor9 pe care le exercit.
$atorit compoziiei, fiind formate exclusiv din aminoacizi se ntlnesc alturi de ali compui
importani de tipul poliza#aridelor, lipidelor i acizilor nucleici ncepnd cu structura virusurilor, a
organismelor procariote, eucariote i terminnd cu omul. +ractic nu se concepe via fr proteine.
+roteinele pot fi enzime care catalizeaz diferite reacii bioc#imice n organism, altele pot /uca un rol
important n meninerea integritii celulare 8proteinele din peretele celular9, n rspunsul imun i
autoimun al organismului.
Complexitatea proteinelor a fcut necesar introducerea mai multor trepte de organizare structural
denumite structur primar, secundar, teriar i structur cuaternar.(:*
SINTEZ CHIMIC
+roteinele scurte pot fi sintetizate c#imic, printro metod cunoscut sub numele de sintez
peptidic, care se bazeaz pe te#nici de sintez organic, cum ar fi ligarea c#imic pentru producerea de
peptide cu randament ridicat. (2* 6inteza c#imic permite introducerea de aminoacizi nenaturali n
lanurile polipeptidice, cum ar fi prin fixarea de sonde fluorescente la nivelul lanurilor laterale de
aminoacizi. (;* %ceste metode sunt utile n laboratorul de bioc#imie i de biologie celulara, dar nu i
pentru aplicaii comerciale. 6inteza c#imic este ineficient pentru polipeptidele cu mai mult :-- de
aminoacizi i proteinele sintetizate nu pot asuma cu uurin structura lor teriar. Cele mai multe
metode c#imice de sinteza ncep de la Cterminal la .terminal, invers fa de reacia biologic. (<*
STRUCTUR PRIMAR
+rima protein a crei structur primar a fost stabilit este insulina 86anger, 7=;:9, protein mic
cu ;7 resturi de aminoacizi 8fig.79. $up aceasta a urmat ribonucleaza cu 7)2 aminoacizi.
Cunoaterea structurilor primare are o importan deosebit pentru nelegerea rolurilor
proteinelor, ea a desc#is orizonturi noi n toate tiinele biologice &
7. +rin studii de secvenializare sa stabilit definitiv c o protein dat are o structur unic, nu este
o colecie de specii moleculare diferite 8 cum este cazul polimerilor de sintez9'
;
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
). 6tructurile primare ale proteinelor constituie baza nelegerii la nivel molecular a activitii lor
biologice'
:. +rin compararea structurilor primare a proteinelor care ndeplinesc funcii omoloage la
organisme diferite se poate stabili gradul de varietate structural compatibil cu o anumit
funcie i aceste comparaii permit urmrirea istoriei evolutive a proteinei. $ou sau mai multe
proteine omoloage pot varia la nivelul structurilor lor primare. %desea aceste deosebiri rezult
prin nlocuirea unui aminoacid dintro grup cu un altul aparinnd aceleiai grupe 8de ex. >al cu
,eu sau %rg cu ,?s9. %stfel de substituii sunt denumite conservative. nlocuirea unui aminoacid
dintro anume poziie cu altul aparinnd altei grupe 8substituie nonconservativ9 poate altera
ntro mare msur funcia proteinei'
2. 6ecvena aminoaizilor ntro protein este veriga ntre mesa/ul genetic nscris n %$. i expresia
acestui mesa/'
;. 6tudiile de secvenializare au dus la descoperirea unor specii de proteine anormale 8proteine
mutante9 ca expresie a unor modificri la nivelul genomului' aceste proteine anormale se pot
manifesta sub forma unor boli 8boli moleculare9'
<. 6ecvenializarea unui numr din ce n ce mai mare de proteine a scos n eviden fenomenul de
polimorfism molecular. @ protein cu o anumit funcie, la o aceeai specie, poate exista sub
forme mmoleculare diferite.(:*
Fig.1 Structur i!"u#i!$i.
Aormon pancreatic secretat de
celulele ,anger#ans, cu rol de reglare
a nivelului glucozei. n stnga este
redat monomerul insulinei, cela care
se crede ca este activ biologic.
Carbonul verde, #idrogenul alb,
oxigenul rou, iar azotul albastru.
+artea dreapt reprezint #examerul,
forma de stocare. Unitatea
monomerului este format din lanul %
8albastru9 i lanul B cian.4albenul
reprezint punile disulfurice, iar
sferele violet, ionii de zinc.(C*
5iecare protein, fiecare lan polipeptidic are o structur tridimensional specific 8fig.)9 care este
reprodus cu fidelitate de milioane i milioane de ori n cursul vieii organismului i dea lungul
generaiei. 5orma specific a unei molecule proteice este determinat de structura sa primar, unic
pentru fiecare tip de protein. %ran/amentul spaial pe care un lan polipeptidic l adopt ntro soluie
este impus de constrngeri termodinamince, este rezultanta tuturor interaciunilor necovalente care se
pot stabili n cuprinsul moleculei astfel ca nivelul su energetic s fie minim. %ceste interaciuni
necovalente de energie /oas 87C DcalEmol sau 2)= D/Emol9, au energii de activare mici, se stabilesc cu
viteze foarte mari i nu necesit intervenia unor catalizatori. 0le devin eficiente numai prin nsumarea
efectelor unui numr foarte mare de legturi.
,egturile necovalente care se manifest n cadrul moleculelor proteice, ca i alte categorii de
biomolecule, sunt legturile de #idrogen, legturile polare i interaciunile #idrofobe.(:*
<
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
STRUCTUR SECUN%AR
+auling i colab. ncepnd din anul 7=:- au ntreprins
studii sistematice, prin cristalografie cu raze F, de
msurare a distanelor interatomice a ung#iurilor de
legtur dintre aminoacizi, din peptide. 6a stabilit c n
gruparea peptidic are loc o con/ugare Gp, legtura 3A
C@ capt un caracter parial de legtur dubl, rotaia
liber n /urul acestei legturi fiind astfel mpiedicat.
%tomii CH vor adopta poziii rigide fa de planul dublei
legturi.n peptidele naturale se ntlnete numai
configuraia trans, mai stabil dect aceea cis. (:*
Cele mai ntlnite tipuri de structur secundar sunt
alp#a #elixul i lanurile beta.
%lte #elixuri cum ar fi #elixul :7- i #elixul G sunt
din punct de vedere energetic favorabile formrii
legturilor de #idrogen, dar sunt rareori observat n
proteinele naturale exceptnd prile terminale ale #elixului
H n timpul formrii sc#eletului proteic 8de obicei centrul
#elixului9. %minoacizii au un comportament diferit visa
vis de posibilitatea formrii structurii secundare. +rolina i
glicina sunt cunoscui ca aa numiii I#elix
breaDersI8sprgtori de #elix9, deoarece afecteaz
configuraia sc#eletului proteic' ambii aminoacizi au
abiliti conformaionale neobinuite i de regul se gsesc
n colurile sc#eletului proteic.
%minoacizii care prefer s adopte conformaia
#elixului proteic fac parte din aa numita serie J%,0K
8 codurile formate din 7 liter a aminoacizilor& metionin,
alanin, leucin, acid glutamic i lizina9' prin contrast
aminoacizii aromatici 8triptofanul, tirosina i fenilalanina,
dar i aminoacizii cu legare prin carbonul beta 8izoleucina,
valina i treonina, adopt configuraia L. (M*
Fig.& Structur tri'i($!"i)!#* (=*
C
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
6tructura secundar cunoate cteva ipoteze privind formarea ei&
7. Neoria polipeptidic formulat de ctre 0. Aoffmeister n 7=-) i dezvoltat ulterior de ctre 0.5isc#er,
are la baz conceptul conform cruia moleculele proteice sunt formate din lanuri polipeptidice foarte
lungi. Neoria are cteva dezavanta/e&
nu explic diferenierea biologic a anumitor proteine'
unele proteine sunt rezistente la aciunea enzimelor proteolitice.
). Neoria plierii i rsucirii lanului polipeptidice a fost elaborat de ctre Core? i +auling n 7=2: i a
fost confirmat prin spectrele de difracie cu raze F, microscopului electronic , prin msurarea ung#iurilor
de valen, a distanelor interatomice, au confirmat faptul c lanul polipeptidic se gsete sub form
pliat.
:. 6tructura n foaie pliat 8fig.:9. +lierea catenei are loc prin formarea legturilor de #idrogen ntre
gruparea carboxilic a unui aminoacid i gruparea aminic a aminoacidului vecin. ,anul polipeptidic
pliat se prezintz ca o panglic ndoit alternativ la dreapta i la stnga, plierea avnd loc n dreptul
carbonilor metinici. Jai multe lanuri pliate polipeptidice pliate dau natere unei reele, ntre aceste
lanuri pliate putnduse de asemenea forma legturi de #idrogen, acestea fiind n numr mai mare cnd
gruprile terminale a ) lanuri sunt aran/ate diferit 8.A) i C@@A, sau A@@C i .A)9. Catenele
polipeptidice pliate predomin n proteinele fibrilare i mai puin n cele globulare. $up valoarea
perioadei de identitate se cunosc mai multe tipuri de proteine cu structur pliat. +rin perioada de
identitate se nelege distana cea mai mic la care se repet aminoacizii identici din molecul.
2. 6tructura H elicoidal, ipotez lansat de Core? i +auling, ipotez conform creia lanul polipeptidic se
poate prezenta i nfurat sub form de spiral. n acest model, fiecare
spir conine de obicei )C aminoacizi, iar distana ntre spire este de ;,22
%
-
. 5iecare aminoacid mrete spira cu 7,2C %
-
. n faa fiecrei grupri
C@ va apare la o distan de ),M %
-
o grupare .A de la al treilea
aminoacid. ntre aceste grupri se stabilesc punile de #idrogen care
asigur stabilitatea H #elixului. n acest model lanul polipeptidic se
prezint sub forma unui urub cu pasul fie spre dreapta, fie spre stnga. n
cazul proteinelor naturale, acestea datorit coninutului n ,aminoacizi,
pasul #elixului va fi spre dreapta, catenele laterale ies n afara corpului
propriuzis putnd reaciona fie cu moleculele solventului fie cu alte
catene polipeptidice. Canalul format n interiorul #elixului este foarte
ngust, n el nu poate ptrunde molecula solventului. ,egturile peptidice
sunt plane, iar ) planuri consecutive C@.A formeaz un ung#i de
7M-
-
, rotirea lanului se face la carbonul H8metinic9. (M*
M
Fig. +. A#,-.-$#i/. 0licea
alp#a se formeaz prin rotaia unui
lantt lan polipeptidic n /urul
propr propriei axe. (7-*
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
STRUCTUR TERIAR
%cest nivel de organizare nglobeaz structura secundar i definete raporturile dintre segmentele
de Helice i structura , modeul de mpac#etare a lanului polipeptidic. 5actorii determinani ai structurii
teriare ai unei proteine sunt interaciunile necovalente ntre radicalii 3 de la CH , fie c acetia se afl n
regiuni cu structur secundar H sau , fie c sunt cuprini n segmentele neorganizate. ,a nivelul de
organizare teriar molecula proteic dobndete forma sa specific. ntre diveri radicali ai aminoacizilor
se pot stabili urmtoarele tipuri de legturi necovalente&
puni de #idrogen ntre radicalii cu grupri alcoolice 8din resturi seril, treonil9, fenolice 8din resturi
tirozil9, amidice 8din resturi glutaminil i asparaginil9'
legturi ionice, saline, ntre radicalii cu sarcin sau interaciuni polare ntre radicalii polari, fr sarcin'
interaciuni #idrofobe ntre resturile aminoacizilor nepolari ca valin, leucin, izoleucin, fenilalanin,
alanin.
3esturile cisteinil din multe proteine formeaz legturi disulfurice care leag covalent regiuni mai
deprtate ale lanurilor polipeptidice. +oziiile acestor legturi depind i de totalitatea factorilor care
asigur conformaia nativ a proteinei. 3ibonucleaza 87-2 resturi aminoacidice9 cuprinde patru puni
disulfurice ntre resturile C?s;M C?s77- i C?s<; C?sC). $in multitudinea de combinaii posibile, ntre cele
M resturi cisteinil, n proteina nativ se realizeaz una singur. Un lan polipeptidic adopt, n msura n
care i permite structura sa primar, configuraii de Helice i de structur i prin pliere, mpac#etarea
lanului caut s satisfac i afinitile radicalilor 3. 3ezultanta tuturor acestor interaciuni determin
conformaia moleculei proteice. %ceast conformaie este de fapt un compromis nu se pot realiza toate
legturile de #idrogen posibile, nu toate poriunile nepolare a/ung s fie ncon/urate de un mediu pur
#idrofob, nu orice grupare 89 a/unge la vecintatea uneia 8O9, dar este compromisul cel mai favorabil din
punct de vedere energetic, cel mai stabil. 5actorul ultim care determin conformaia unei proteine este
structura sa primar. Pnformaia genetic tradus n secvene de aminoacizi, prin /ocul forelor fizico
c#imice, se transform spontan n edificii tridimensionale specifice. +rima protein a crei structur
tridimensional a fost stabilit n cele mai mici detalii, preciznduse poziia n spaiu a tuturor atomilor
componeni este mioglobina 8KendreQ i colb. 7=;C9. Jioglobina 8fig.29, este o protein abundent n
muc#i, n special la mamiferele cufundtoare, avnd rolul de rezervor tisular de oxigen. 0ste o protein
cuprinznd aproximativ 7;- aminoacizi i o grupare neproteic denumit #em. (:*

Fig.0 I(gi!$ #1 -$#i/uri#)r (i)g#)2i!$i, a crei structur
a fost determinat de ctre Jax +erutz i 6ir Ro#n CoQder?
KendreQ n 7=;M folosind cristalografia cu raze F. (77*
=
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
n mioglobin C; S din lanul polipeptidic formeaz Helice. Cuprinde M segmente elicoidale
8denumite %, B,...A9 cuprinznd ntre C 8segmentul $9 i )2 resturi aminoacidice 8segmentul A9.
3egiunile elicoidale sunt separate de segmente neelicoidale la nivelul crora lanul polipeptidic i
sc#imb direcia. n patru puncte de terminare a elicelor se afl prolina. n celelalte regiuni ntreruperea
rsucirii elicoidale este determinat de ali factori. +rin aceste sc#imbri ale direciei lanului polipeptidic,
molecula devine extrem de compact 82;x:;x); T9. Pnteriorul moleculei cuprinde numai aminoacizi cu 3
nepolar, cu excepia a dou resturi #istidil anga/ate n legarea gruprii #em. 3esturile treonil i tirozil au
gruprile #idroxilice orientate superficial, pe cnd poriunile nepolare ale acestor aminoacizi sunt
ngropate n interior. 6uprafaa extern a moleculei cuprinde toate resturile polare i cu sarcin electric,
presrate printre radicalii nepolari. n prezent sunt cunoscute structurile teriare ale multor proteine.
+roteinele solubile, citoplasmatice sau acelea prezente n plasm sau n lic#idele interstiiale sunt proteine
globulare care au etalate pe suprafa gruprile polare i pe acelea care poart sarcini electrice. 3adicalii
nepolari sunt orientai n interiorul moleculei. 5orma sferic sau elipsoidal a moleculei depinde de
raportul dintre numrul resturilor aminoacidice cu 3 ncrcat i numrul resturilor cu 3 #idrofob. n anii
din urm a fost descris un alt nivel intermediar de organizare structural a proteinelor, organizare
domenial sau suprastructur secundar. %cest nivel de organizare este ntlnit mai ales la proteinele mai
mari. Un domeniu al unei proteine multidomeniale corespunde unei poriuni continue n structura primar
a lanului polipeptidic care este mpac#etat ntro entitate funcional i are o organizare proprie secundar
i teriar. $omeniile sunt separate ntre ele prin poriuni de lan mai puin organizat, flexibil, ceea ce
asugur posibilitatea deplasrii unui domeniu n raport cu altul 8dinamica domeniilor9. 3elaiile dintre
domenii sunt deosebit de variate, zonele de contact, de interaciune pot fi mai reduse sau mai ntinse. $e
asemenea, dimensiunile domeniilor structurale variaz ntre limite largi, de la cteva zeci de resturi
aminoacidice, la sute 8cel mult 2--9. @rganizarea domenial a proteinelor se ntlnete la multe proteine i
domeniile structurale sau dovedit a fi uniti fundamentale ale evoluiei i diversificrii proteinelor. (:*
STRUCTUR CUATERNAR
Julte proteine sunt alctuite din mai multe lanuri polipeptidice, de regul un numr mic i perec#e
8proteine oligomere9. ,anurile individuale sunt denumite protomeri sau subuniti. ,a aceste proteine pe
lng structurile primar, secundar i teriar ale fiecrui protomer, apare un nivel superior de organizare
structura cuaternar. %ceasta definete natura, numrul i modul de asociere a protomerilor. 5uncia
specific a unei proteine oligomere se manifest numai la nivelul structurii cuaternare, protomerii separai
sunt inactivi. %samblarea protomerilor, structura cuaternar, se realizeaz numai prin fore slabe
necovalente i asocierea devine stabil, permanent, numai dac suprafeele de contact sunt complementare
i un numr ct mai mare de atomi se apropie pn la nivelul razelor lor van der Uaals 8raze de contact9.
Complementaritatea suprafeelor de contact asigur un grad foarte nalt de precizie i de specificitate a
structurilor cuaternare. +rotomerii unor proteine omoloage de la specii diferite nu se asociaz.
Pnteraciunile prin suprafee complementare prezint fenomenul de cooperare, primele interaciuni
favorizez formarea celorlalte. ,a nceput, moleculele se /uxtapun prin cteva puncte dup care celelalte
grupri i gsesc mai uor partenerii.
Capacitatea de interaciune a moleculelor prin suprafee complementare explic nu numai formarea
proteinelor oligomere, a unor structuri supramoleculare, dar i modul n care proteinele cu structur
cuaternar i ndeplinesc funciile caracteristice de transport etc.
6tructurile cuaternare permit funcionarea unor mecanisme fine de reglare a activitii proteinelor.
@ perturbaie care are loc la nivelul unui protomer 8 de exemplu combinarea sa cu un compus oarecare9,
7-
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
poate fi transmis n restul moleculei, fiind resimit la nivelul contactului dintre protomeri, structura
cuaternar este alterat i totodat i funcia proteinei. %cest mecanism de reglare este denumit reglare
alosteric.
Aemoglobina 8fig. ;9 este o protein oligomer. Aematiile normale cuprind mai multe specii
moleculare de #emoglobin. Componenta principal din sngele adultului este #emoglobina %78Ab %79
alturi de care se afl o cantitate mic Ab %) . ,a embrion exist o Ab 0 iar la ft i nou nscut Ab 5. Noate
speciile de #emoglobin cuprind patru lanuri polipeptidice de cte dou tipuri. Aemoglobina %7 are
structura H) ) . Celelalte specii de #emoglobin cuprind n locul lanurilor , lanuri , , &
Ab %7 V H) )
Ab %) V H) )
Ab 5 V H) )
Ab 0 V H) )
5iecare protomer este legat de cte o grupare #em i activitatea de transport a oxigenului se
manifest numai la nivelul tetramerului.
,anul H cuprinde 727 resturi aminoacidice, iar cel , 72< resturi. 6tructurile teriare ale acestor
lanuri sunt similare cu ale mioglobinei , cu care are similitudini i de compoziie amnioacid. 5ragmentele
proteice pot suferi transformri n structura cuaternar, transformri care se reflect fie n structurile
individuale fie n reorientrile fiecrei subuniti proteice. .umrulsubunitilor din oligomerice sunt
denumite prin adugarea sufixului mer 8grecescul pentru subunitate9, precedat de numele subunitii. (:*
Fig. 3 4$'$r$ + % -$()g#)2i!$i & cele 2 subuniti rou
i galben, iar unitatea #emic verde' numele de
#emoglobin este format din #em i globin , denumire ce
denot faptul c #emoglobina are la baz proteine
globulare cuplate cu o grupare #em. (7)*
77
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
PROTEINE %E CUPLA5
Aormonii din clasa #ormonilor #idrosolubili 8peptidici, catecolamine9 nu ptrund n celule, ci
interacioneaz cu receptori membranari. 5ixarea #ormonului pe receptor activeaz un sistem transductor
care transform semnalul extern 8mesager prim9 ntrunul intracelular 8mesager secund9. Jesagerul
secund acioneaz n interiorul celulei iniiind evenimente care duc la activarea sau inactivarea enzimelor,
secreie, contracie, sintez de noi proteine.
.umrul mesagerilor secunzi este mic& %J+c, 4J+c, diacil glicerolul, inozitolul fosfai,
calciucalmodulin. %J+c e mediator pentru substane paracrine 8glucagon, catecolamine, parat#ormonul,
N6A, gonadotropine, %CNA9.
%ciuea #ormonilor este mediat intern de sisteme transductoare ale mesa/erol externe n mesa/e
intracelulare. 6istemele transductoare sunt receptori membranari citoplasmatici, nucleari. 6istemele
transductoare sunt& receptorul membranar, sistemul de cuplare a complexului #ormonreceptor cu sistemul
efectro care genereaz mesagerul intracelular, funcia de cuplare o deine o clas de proteine denumite
proteina 4, sistem efector care genereaz %J+c. %denilat ciclaza genereaz %J+c i fosfolipaza C ce d
natere la diacilglicerol i inozitol 1 fosfai. %J+c i diacilglicerolul acioneaz similar activnd protein 1
Dinaze, %J+c activeeaz proteinDinaza %, diacil glicerolul activeaz proteinDinaza C.
3eceptorii cuplai cu proteina 4 83C+49 constituie cea mai mare familie de receptori celulari de
suprafa. 3+C4 sunt proteine intramembranare monomerice cu C domenii transmembranare avnd
fiecare o structur n H#elix, fiind legate prin trei bucle externe i trei bucle interne. +utem clasifica
3C+4 n : grupe 8P, PP, PPP9 deferena dintre ele o constituie absena analogiei secvenelor lor primare de
aminoacizi.
+rima grup conine marea ma/oritate a 3C+4. 0a se caracterizeaz prin prezena unei secvene de
tip $3W 8aspartil 1 arginil 1 tirozil9 la bucla P). %ceast grup este submprit n : subgrupe Pa, Pb, Pc dup
localizarea posibil a situsului de legare a agonitilor& ntre domeniile transmembranare pentru Pa, mai spre
exterior i implicnd domeniul .terminal pentru Pb i la nivelul .terminal pentru Pc. 3eceptorii grupei PP
se disting de grupa P prin absena analogiei de secven i prin faptul c nu are localizat situsul de legtur
al agonitilor. 4rupa PPP are situsul de recunoatere a ligandului la nivelul domeniului .terminal.
PROTEINE G OLIGOMERICE
Celulele animale conin un numr de proteine 4 diferite 8proteine ce leag 4N+9. 5iecare tip de
protein 4 leag un anumit tip de receptor cu un anumit efector enzimatic sau canal ionic. +roteinele 4
pot fi clasificate n mai multe grupe pe baza structurii i funciei acestora. +roteinele 4 sunt izolate sub
form de #eterotrimeri, compui din subunitile H, L i X. 6ubunitatea H conine situsul de legare pentru
4N+ i de activitate catalitic responsabil de #idroliza acestei nucleotide. %ceast subunitate conine de
asemenea situsuri de interaciune cu complexul LX, cu receptorul i cu enzima efectoare sau canalul ionic.
@ serie de experimente arat c fiecare subunitate 8H, L sau X9 a proteinelor 4 este ataat la faa
citoplasmatic a membranei plasmatice. .ici una dintre subuniti nu conine secvene transmembranare.
6ubunitatea H este ataat la membran printrun rest de cistein acilat, n apropierea captului carboxi al
lanului polipeptidic. Una dintre funciile subunitilor L i X, care prezint att secvene #idrofile ct i
#idrofobe, ar fi cea de ancorare subunitii H n membrana plasmatic.
7)
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
6ubunitile H ale diverselor proteine 4 au secvene i greuti moleculare puin diferite. %ceste
mici diferene structurale ale subunitilor H par a fi n principal responsabile de proprietile diferite ale
proteinelor 4 oligomerice 8tab.P9. 0xist totui un nalt grad de omologie c#iar ntre subunitile H 8H s, H i
H/9 i ras. 3egiunea subunitii H care pare a interaciona cu lanul polipeptidic al receptorului este o
regiune elicoidal de tip a amfipatic, localizat la nivelul captului carboxi al subunitii H. Un situs
probabil a interaciona cu complexul LX este o secven de aminoacizi de la captul amino.
TABELUL I
Pr),ri$t*6i#$ ,r)t$i!$#)r G )#ig)($ric$ 71+8
F(i#i
U!ii ($(2ri
i 1(i#i$i
Su2u!i.t*6i#$ 9 Fu!c6ii
I 4s Hs
%ctiveaz adenilat ciclaza'
%ctiveaz canalele de Ca
)O
II
4olf Holf %ctiveaz adenilat ciclaza n neuronii olfactivi
4i Hi
Pn#ib adenilat ciclaza'
%ctiveaz canalele de K
O
'
4o Ho
%ctiveaz canalele de K
O
'
Pnactiveaz canalele de Ca
)O
'
%ctiveaz fosfolipaza CL
4t Ht %ctiveaz fosfodiesteraza 4J+c n bastonae
III 4Y HY %ctiveaz fosfolipaza CL
+roteinele 4 sunt oligomerice i monomerice. +roteina 4 are rol i n amplificarea semnalului
biologic.
n modelul clasic, cu trei parteneri, evenimentele iniiale ale activrii proteinelor 4 sunt
reprezentate de formarea complexului agonistreceptor i interaciunea acestui complex cu oligomerul
inactiv H
4$+
LX. %ceast interaciune induce nlocuirea 4$+ cu 4N+ i disocierea oligomerului HLX n H
4$+
i complexul LX. 0tapa limitant a procesului este disocierea 4$+. n timpul acestei secvene de procese
subunitatea H sufer o transformare conformaional la o form HZ care interacioneaz cu enzima
efectoare i induce o modificare a conformaiei i activitii acesteia. Conformaia activ a subunitii H
este convertit la conformaia inactiv prin #idroliza 4N+. %ceast reacie este catalizat de subunitatea H
nsi i este urmat de combinarea H
4$+
cu complexul LX pentru a reforma H
4$+
LX. 5iecare molecul H
Z4N+
se gsete probabil n conformaia activ timp de cteva secunde nainte ca 4N+ s fie #idrolizat.
7:
Fig :. M)'u# ;! cr$ ,r)t$i!$#$ 1u!c6i)!#$ ,)t
1i cu,#t$ 1u!c6i)!# ,ri! i!t$r($'iu# ,r)t$i!$i G" . 7108
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
Complexul agonisi receptor ar aciona
ca i catalizator n timpul activrii proteinelor
4, astfel nct la nivel molecular, un complex
ar interaciona cu mai muli oligomeri HLX pe o
durat de cteva secunde. n membranele
plasmatice ale unor tipuri celulare numrul
moleculelor subunitii H depesc cu mult
numrul moleculelor complexului LX. n
aceste sisteme, un complex LX ar putea cataliza
legarea %N+ la mai multe subuniti H. n plus,
fiecare H
Z4N+
ar putea interaciona cu mai muli
efectori pe durata existenei sale. Unele date
experimentale arat c subunitile H
Z4N+
sunt
eliberate din membrana plasmatic n spaiul
citoplasmatic ca urmare a cuplrii unui agonist
la receptorul su. %stfel, n plus fa de acti
varea enzimelor efectoare ataate suprafeei
citoplasmatice membranare, H
Z4N+
eliberate de
la nivelul membranei plasmatice ar difuza n
spaiul citoplasmatic i ar interaciona cu alte
enzime efectoare localizate n acest spaiu
8fig.<9. Notui, dovezile n acest sens nu sunt
foarte puternice.
Pnteraciunea H
Z4N+
cu proteinele
efectoare a fost studiat cel mai mult n dou
sisteme& activarea fosfodiesterazei
dependente de 4J+C de ctre lumin i
reglarea activitii %C de ctre #ormoni i
neurotransmitori. %bsorbia luminii modific
conformaia rodopsinei, astfel nct o parte a
domeniului citoplasmatic al acestei molecule
interacioneaz cu transducina. %ceast
interaciune catalizeaz la rndul ei activarea
subunitii H a transducinei. Conformaia
activat a subunitii H, H
Z4N+
, activeaz
fosfodiesteraza dependent de 4J+C.
n cele mai multe celule, %C se
poate cupla cu receptori diferii, unii
crescnd formarea %J+C, alii scznd formarea %J+C. %ceast cuplare este realizat prin intermediul
proteinelor 4s sau 4i. Pn#ibarea de ctre un agonist este aproape ntotdeauna observat n prezena unui al
doilea agonist care stimuleaz %C. n cele mai multe membrane, cantitatea de 4i, este mult mai mare dect
cea a 4s. 6pecia molecular care interacioneaz cu %C este Hs
Z4N+
. 0tapa iniial a mecanismului prin care
agonitii in#ib %C este disocierea Hi
Z4N+
LiXi. %ceasta elibereaz subunitatea H n conformaia activat, Hi
Z4N+
,
i complexul LiXi. Pn#ibiia %C se produce probabil prin dou mecanisme. Complexele LiXieliberate din HiLiXi
72
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
sar putea cupla cu Hs
Z4N+
i ar in#iba activarea enzimei prin intermediul acestei subuniti. %C ar putea fi
in#ibat de asemenea direct de ctre Hi
Z4N+
.
Jodelul clasic, cu trei parteneri, pentru funcionarea proteinelor 4, a fost recent completat cu un al
patrulea partener. %cesta este un membru al unei noi familii de proteine denumite 346 reglator al
semnalizrii proteinelor G!. +rima protein descris a acestei noi familii a fost 4%P+ 8proteina ce
interacioneaz cu 4H9, fiind asociat cu 4i:H. +roteinele 346 includ actualmente cel puin "# membri 8la
mamifere9, toate prezentnd un domeniu central de 7:- resturi foarte bine conservat 8domeniul 3469,
responsabil de interaciunea cu subunitile 4H. +roteinele 346 se comport ca reglatori negativi ai
semnalizrii dependente de proteinele 4, accelernd activitatea 4N+azic a subunitilor 4H. 3olul lor este
astfel analog celui al proteinelor 4%+ 8proteine activatoare ale 4N+azei9, ce intervin n ciclul de inactivare
al proteinelor 4 mici 8monomerice9, de tip ras. +roteinele 346 accelereaz de 7-- pn la 7--- ori
#idroliza 4N+ de pe subunitile 4H i prezint o specificitate de aciune fa de acestea. $e exemplu, 346
cel mai bine caracterizate 8346 l i 34629 funcioneaz ca activatori ai activitii 4N+azice a subunitilor
4-, 4z, 4, i 4Y, dar nu au nici o aciune asupra subunitilor 46 i 47) 8fig. C9.
Fig <. M$"g$rii ,ri(i= ($"g$rii "$cu!>i i i!1)r(6i$i c$#u#r$ ?i 1$!)($!$#$
($t2)#ic$ r$",)!"2i#$ '$ r*",u!"u# c$#u#r @$!>i($#$ c6i)!t$ ,ri(r A $!>i($ $1$ct)r$
A "u!t "u2#i!it$B. Pr)t$i!$#$ G "$ c#"i1ic*C G" @r$",)!"2i#$ '$ "ti(u#r$ '$!i#t cic#>$iB=
Gi @cr$ i!-i2* '$!i#t cic#>= ,r)t$i!$#$ GD @cr$ "ti(u#$>* 1)"1)#i,> CB. 71+8
7;
agonist 1 proteine 1 proteine reglatoare
receptoare 4s sau 4i
%denilat ciclaza, %J+c
+roteinDinaza %
3spuns celular
agonist 1 proteine 1 proteine reglatoare
receptoare 4Y
fosfolipaza C, inozitol trifosfat,
diaciglicerol
Ca
)O
Eproteine specifice
proteinDinaza C,
proteinDinaza CaEproteindependent
3spuns celular
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
TABELUL II
Pri!ci,#$#$ ,r)t$i!$ G cu,#t$ cu r$c$,t)ri ($(2r!ri 71+8
Pr)t$i!#$ G R$c$,t)rii cr$ #$ cu,#$>* E!>i($#$ ?i c!#$#$
($(2r!r$ c6i)!t$
G" r. adrenergici beta
r. dopaminergici $7, $;
r. serotoninergici ;AN2
r. Aistaminergici A7
[%c\[%J+c,
[ curent Ca
)O
Gi r. muscarinici J7
r. adrenergici alfa)
r. dopaminergici $), $:, $2
r. serotoninergici ;AN7
r. opioizi
]%c\]%J+c,
[ curent K
O
GD r. muscarinici J7
r. adrenergici alfa7
r. dopaminergici $7
r. serotoninergici ;AN)
r. #istaminergici A)
[+,C\[P+:, $%4\[Ca
)O
8[+,$, [+,%)9
G) r. muscarinici J7, J), J:
r. adrenergici alfa)
r. dopaminergici $), $:, $2
r. opioizi
[Curent Ca
)O
6ubstane cu efect terapeutic care acioneaz asupra proteinei 4 sunt& oxotremarina, pirenzepina,
metocramina, #exa#idroxidifenidol, fenilefrin, metoxamin, prozosin, clonidin, oximetazolin, io#imbin,
dobutamin, metoprolol, terbutalina, spiperon, #aloperidol, risperidin, domperidon, clozapin,
apomorfin, pirebidil, bromocriptin. (7:*
7<
Proteinele G i rolul lor n transducia semnalelor biologice
STRUCTURA MICILOR PROTEINE MONOMERICE G
I INTERACIUNEA ACESTORA CU MEMBRANA
PLASMATIC
+roteinele 3as conin un numr important de 4N+uri monomerice ntlnite n special la suprafaa
membranei plasmatice' acestea sunt elemente c#eie n procesul complex, dar vital al avertizrilor de la nivel
celular. Cteva tipuri din aceast categorie de proteine includ 3as, 3ap7, 3ap), 33as, 3al, 3#eb, J3as i
NC)7 care toate semnaleaz tipuri distincte de semnale. 0le devin comutatoare de semnal la nivelul
membranei plasmatice i rolul lor fundamental se realizeaz prin cuplarea stimulilor externi cu date
existente la nivel de citoplasm i nucleu. n felul acesta, ele pot regla activitatea profilactic a celulelor.
Celulele mammalian conin trei gene foarte similare celor 3as& Aras, .ras, and Kras. ,a nivel proteic,
3as este prezent n toate celulele, dei apariia lor este mai mare n celulele profilactice. 6emnalizarea
corect a genelor 3as la nivel de membran plasmatic necesit o serie de modificri posttranslaionale ale
proteinelor Cterminale. (7;*
INTERACIUNILE PROTEIC.LIPI%ICE ALE
CELULELOR HETEROMETRICE
+recum proteinele periferice ale membranei, proteinele 4 interacioneaz cu partea interioar a
membranei plasmatice i particip la semnalele n cascad, activate de receptorii cuplai ai proteinei 4
84+C3 4 proteincoupled receptors9. %ceti receptori sunt cuprini n trei subuniti 4H, 4L i 4X, care
sunt adesea asociai cu domeniile intracelulare ale 4+C3urilor. Pminena unui stimul negativ extracelular
activeaz receptorii cuplai ai proteinei 4, inducnd o modificare conformaional n structura proteinei care
conduce la activarea proteinei 4 #eterometrice corespunzatoare. $rept consecin, unitatea 4H a
complexului #eterometric realizeaz sc#imburi de legturi 4$+ pentru 4N+ i n cele din urm se disociaz
de 4LX, favoriznd ca ambele entiti moleculare s coordoneze activitatea specific de efector. n timpul
acestui proces, proteinele 4 pot fi afectate de interaciunea lipidoproteic n mai multe moduri. n primul
rnd, la fel ca toate proteinele asociate membranei, poziionarea i funcionarea proteinelor 4 este
influenat de proprietile biofizice ale membranei cu care ele interacioneaz. n al doilea rnd, apropiata
interaciune a proteinelor 4 cu membrana le determin s i moduleze mediul lipid aflat n apropiere,
aadar modificnd structura i organizarea lipidic a membranei care, drept rspuns, moduleaz legatura
proteinelor 4 cu membrana. n al treilea rnd, pentru a putea s asigure legatura strns cu membrana,
unitile diferite ale proteinei 4 sufer anumite sc#imbri n timpul i n urma proceselor de modificri
lipidice. .atura implicrii pariale a lipidelor n acest proces dicteaz cerinele necesare pentru mediul
lipidic optim necesar pentru localizare i activitate aferent. Complexitatea legturii i a multitudinilor de
procese ce au loc n proteina 4, mediaz semnalele tansducionale. (7;*
7C