1

Lucrare nr.3

Organitele unimembranare i bimembranare ale celulei

Materiale i reactive: micropreparate pregatite bazofilia n celulele
pancreasului, celule nervoase, mitocondrii n celulele ficatului de amfibie, frunz de
valisnerie, I
2
n KI microfotografii.
Organitele unimembranare sunt acoperite cu o singur membran biologic,
fiind reprezentate n celul prin reticulul endoplasmic, aparatul Golgi, lizozomi,
sferozomi i peroxizomi.

Reticulul endoplasmic (RE) este un
component citoplasmatic important, fiind
alctuit dintr-un sistem tridimensional de
canicule i vezicule, care formeaz o
reea ce mpnzete citoplasma de la
nucleu pn la plasmalem. Prin aceste
canalicule i vezicule circul diferite
substane organice (glucide, enzime). (
Din punct de vedere structural se
difereniaz reticul endoplasmatic rugos,
cnd pe fa extern a membranelor se
ataeaz ribozomi, fiind situat n
apropierea nucleului i reticul
endoplasmatic neted, lipsit de ribozomi,
fiind situat spre Complexul Golgi.
Fig. 3.1. Reticulul endoplasmatic
Funciile RE snt: sinteza glicoproteinelor i sinteza membranelor; RE joac rol
de organit colector, transportor i distribuitor de diferite substane; mai ndeplinete
funcia de nmagazinare, transform moleculele toxice n molecule netoxice naintea
eliminrii lor de ctre organism. (fig. 3.1)
Aparatul Golgi a fost descoperit n anul 1898 de ctre savantul italian Ca-
milio Golgi, n celulele nervoase sub form de reea, i numit dictiozom (de la
cuvntul grecesc dictes" reea).In plante abia in 1957 cu ajutorul microscopului
electronic de E.S. Perner..a.
Complexul Golgi este constituit din trei componeni:



Fig. 3.2. Aparalul Golgi





2
l. Zona dictiozomal (dictiozoma), alctuit din cisterne sacule , formaiuni
lamelare, membranare aezate n teancuri (pn la 20) i desprite de un strat subire
de hialoplasm. La periferie, n partea proximal a dictiozomei, cisternele snt
fenestrate, formnd o reea care prin diverse prelungiri unete saculii membranari (cu
grosimea membranelor de 6-7 nm) cu reticulul endoplasmic agranular i cel granular.
De menionat c membranele dictiozomei nu au ribozomi. (fig.3.3)
2. Macrovezicule (vacuole mari), ncrcate cu coninut secretoric se de-
sprind de pe marginea dictiozomilor din partea distal (funcional grosimea
membranei fiind de 10 nm) a aparatului Golgi.
3. Microvezicule (vacuole mici cu diametrul de 20-40 nm) ce se evideniaz
n partea proximal (regeneratoare) a aparatului Golgi (3.2.).


Fig. 3.3. Dictiozomii:
1 dictiozom n plan; 2 schema spaial a dictiozomei;
vezicula Golgi;
cisterna dictiozomei n plan;
polizoma.


3


Fig.3.4. Reprezentarea microscopic a RE i Aparatul Golgi:1 - nucleu; 2 - por
nuclear; 3 - reticul endoplasmatic rugos; 4 - reticul endoplasmatic neted; 5 - ribozom
aflat pe RE rugos; 6 - proteine transportate; 7 - vezicule de transport; 8 - aparat Golgi;
9 - faa Cis a aparatului Golgi; 10 - faa Trans al aparatului Golgi; 11 - cisternele
aparatului Golgi.
Aparatul Golgi are funciile de segregare i concentrare a produselor excre-
toare, de modificare a proteinelor, de eliminare a produselor secretoare, de regenerare
a membranei plasmatice, de formare a lizozomilor primari, de sintez a unor
polizaharide, inclusiv a anvelopei celulare la plante.
Lizozomii snt corpusculi sferici cu diametrul de 0,3-1 m, acoperii cu o
membran dens. Au fost descoperii de Cristian de Diuve n 1953 n matricea lor se
afla circa 40 de fermeni hidrolitici, 20% din care snt inclui n membran, temporar
inactivi, iar 80% n matricea lizozomial. Se clasific n lizozomi primari,
secundari, telolizozomi (corpusculi reziduali) i autolizozomi.
Lizozomii primari snt vezicule mici cu coninut de fermeni hidrolitici, care se
formeaz din veziculele aparatului Golgi.
Lizozomii secundari snt un rezultat al contopirii lieterofagozomilor (vacuole
digestive formate prin fagocitoz sau pinocitoz) cu lizozomii primari (fig.3.3.).
Telolizozomii snt corpusculi reziduali ce se formeaz ca rezultat al descom-
punerii incomplete al substratului. Cu vrsta, n telolizozomii celulelor creierului,
ficatului se depun pigmeni numii de mbtrnire" lipofuscina.
Autolizozomii snt lizozomii secundari care nglobeaz fragmente de organite
sau chiar poriuni de celule. Astfel are loc curirea celulelor de organile defectate, de
aceea snt considerai sanitari ai celulei. Autolizozomii apar ca rezultat al digestiei
intracelulare numit autofagia (fig. 3.5.).
Peroxizomii snt organite generatoare de peroxid de hidrogen (H
2
O
2
), descrise de
I. Rodhin (1954) i denumite peroxizomi de savantul belgian Cristian de Diuve
(1966). Conin fermeni-catalaze care scindeaz peroxidul de hidrogen.
n celulele
4


Fig, 3.5. Sistemul litic al celulei:
1 - formarea lizozomilor primari (veziculele golgiene), 2 - material exogen (A). Vacuolele
digestive sau lizozomii secundari se formeaz prin fuziunea de lizozomi primari i de vacuole de
pinocitoz (pc) i de fagocitoz (fg), 3 -- material endogen (B). Poriunile de citoplasm snt
nconjurate de REn ce conin hidrolaze; se constituie astfel o vacuol autofagic, 4 - formarea de
corpi reziduali prin formarea de produi nedigerabili, 5 - eliminarea eventualelor reziduuri n
mediul extracelular prin exocitoz (ex), D - dictiozomi, pl - plasmalema, RE - reticul endoplasmic
(Toma i alii, 1995)

n celulele vegetale, peroxizomii intervin n efectuarea ciclului glioxilarului,
produs al fotosintezei, deci snt implicai n fotorespiraie.
Glioxizomii conin enzime ce produc oxidarea complicat a acizilor grai pn
la succinat.
Sarcina 1. Cercetai substana bazofil n celulele nervoase. In seciunea
transversal a mduvei spinrii se observ o substan cenuie, concentrat n form
de aripi de fluture", nconjurat de o substan alb. Corpul celulelor nervoase
formeaz substana cenuie, n timp ce fibrele nervoase substana alb. De la
neuroni pornesc cteva ramificaii. Una din acestea se numete axon, iar toate celelalte
dendrite. Observai c citoplasma n neuroni, dac se aplic colorantul bazic
(toluidin) e de culoare albastr sub form de aglomerri. Formarea lor este cauzat
de prezena ARN-ului i e denumit substan tigroid.
Particulele de tigroid snt repartizate prin toate dendritele, lipsesc numai la baza
axonului. Prezena bazofiliei n citoplasm este determinat de sinteza intens a
proteinelor n aceste zone ale celulelor nervoase.
Sarcina 2. Privii bazofilia citoplasmei n celulele pancreasului de obolan.
Preparatul e colorat cu hematoxilin dup Heidenhain. Analizai preparatul n
pictura de ulei de imersie. Observai c celulele snt mai late n partea bazal i mai
nguste n partea apical. Mai aproape de partea bazal a celulei se afl nucleul.
Structurile bazofile ale reticulului endoplasmic se observ mai mult n partea bazal
a celulei, sub nucleu, unde s-a acumulat o cantitate mare de ARN. Desenai o celul
5
cu structur bazofil, redai culoarea, forma celulei i a preparatului n
ntregime.(fig.3.6)
A B C



Fig. 3.6. Formarea vacuolilor autofage:
A - prin ncercuire, B - prin nglobare, C - prin fuzionare, AG - aparat Golgi, cr - corp
rezidual, f- formare, gs - granul de secreie, lp - lizozom primar, vd - vacuol digestiv
(Toma i alii, 1995)

Studiai structura submicroscopic a reticulului endoplasmic pe
microfotografia electronic. Observai regiuni ale citoplasmei celulelor ficatului, care
corespund zonelor bazofile, cisternele paralele ale reticulului endoplasmic, pe
suprafaa membranelor acestora aflndu-se ribozomii.

Mitocondriile i plastidele snt organite bimembranare tipice pentru celulele
eucariote. Aceste dou organite au multe trsturi comune. Ele snt desprite de
hialoplasm prin dou membrane extern i intern. Membrana intern formeaz
invaginaii n interiorul matricei (criste i tilacoizi). Pe suprafaa acestor formaiuni
se localizeaz centre active anabolice i catabolice, care determin fosforilarea
oxidativ pentru mitocondrii i fosforilarea fotosintetic pentru cloroplaste. n plastide
i mitocondrii se sintetizeaz moleculele de ATP, ce reprezint donatori de energie
pentru orice proces metabolic celular. Organitele bimembranare conin molecule de
ADN, toate tipurile de ARN i ribozomi cu coeficientul de sedimentare 70 S, de aceea
snt considerate ca semiautonome. n celulele procariote, la microscopul electronic, se
observ nite corpusculi specifici, asemntori dup funcie cu mitocondriile, numii
mezozomi.
Mitocondriile snt caracteristice pentru celulele aerobe animale i vegetale.
Pn nu demult mitocondriile se numeau condriozomi, condriomi, biublaste aproape
50 de sinonime. n 1890, acest organit este descris de ctre K. Altmann, fiind denumit
bioblast, iar n 1902, K. Benda l-a numit mitocondrie (de la cuvntul grecesc mitos"
fir, chondros" grunte). Cu aceast denumire ele au fost descrise n celulele
vegetale de F. Meves n 1908. n celulele vii mitocondriile se mic, se unesc unele
cu altele.


6
Cercetarea mitocondriilor in vivo" este nsoit de multe dificulti, fiindc
ele snt foarte mici, incolore i au un mic coeficient de refracie. Pentru mitocondrii se
folosesc urmtorii colorani; hematoxilin de Fe, fuxin acid, metilen albastr. Mai
larg rspndit este colorarea dup metoda lui Altmann.
Forma mitocondriilor este foarte variat: granular, fire, bastonae i altele.
Forma lor celular se modific la schimbarea pH al mediului, presiunii osmotice,
temperaturii. Mrimea mitocondriilor este de 0,1-7 u.m, iar celulelor filamentoase
pn la 20 um. Forma i dimensiunile mitocondriilor se schimb chiar n limita unei
celule. Numrul de mitocondrii n celulele ficatului ajunge pn la 1000, iar suprafaa
tuturor mitocondriilor dintr-o celul de ficat este de 4-5 ori mai mare dect suprafaa
membranei plasmatice. Foarte multe mitocondrii snt n oocite (300000), n cilii
zoosporilor, n muchi. Localizarea mitocondriilor n celul este diferit, de obicei ele
se concentreaz n acele pri ale celulei, unde apare necesitatea de ATP. De exemplu,
n muchii striai ele se gsesc n apropierea miofibrilelor, n spermatozoizi n jurul
axei flagelului.
La microscopul electronic, mitocondriile se prezint ca nite granule sau
bastonae scurte complet structurale, limitate de cte o membran dubl sau
anvelop, ce nchide un spaiu numit matrice sau camer intern. (fig.3.7)

Membrana dubl sau anvelopa
mitocondrial, cu grosimea de
aproximativ 25 nm, este format dintr-
o membran extern i o membran
intern, ambele simple, elementare,
tristratificate, groase de 7,5 nm,
separate de un spaiu clar, gros de 10
nm, numit spaiu inter membranar.
Membrana extern, permeabil pentru
aproape toate moleculele mici, este
neted.
Fig. 3.7 Structura mitocondriei.
Membrana intern se invagineaz n form de criste, cu ajutorul crora se
mrete foarte mult suprafaa ei. Numrul de criste variaz n funcie de activitatea
fiziologic a celulei. Ele snt mai puin numeroase i puin dezvoltate n celulele
meristematice, iar numrul lor creste pe msura specializrii acestora, regresnd n
celula btrn.
Matricea reprezint un gel ce conine 50% de proteine, granule dense i
neregulate de fosfat de calciu, ribozomi i ADN mitocondrial.
Mitocondriile se disting de celelalte organite citoplasmatice prin faptul c
fiziologia lor este n principal orientat spre o funcie, i anume producerea de ATP,
rezervor de energie pentru celul, ca s-i ntrein activitile (fig.3.5.).
Plastidele, fac parte i ele din grupa organitelor bimembranare. Au fost des-
coperite de ctre A. Leeuwenhoek n 1676. El a observat cromatofori n celulele
algelor (fig. 3.8.) i cloroplaste n frunza de graminee. Studierea detaliat a plastidelor
a nceput odat cu apariia lucrrii lui Schimper n 1885, care a descris trei tipuri de
7
plastide: leucoplaste, cloroplaste i cromoplaste. Repartizarea plastidelor n celul,
forma, dimensiunile i numrul, componena, capacitatea de sintez maxim depinde
de specificul celulelor. Ele conin clorofila A i B, carotinoixi (xantofil i carotenul),
care mpreun cu proteinele membranelor formeaz o grup deosebit de compui
chimici, care se numesc cromoproteide. n cloroplaste pigmenii se gsesc ntr-un
anumit raport molar: clorofila A clorofila B xantofil carotenul 9-3-4-2. Pe
lamelele granelor au fost gsii corpusculi de 10-20 nm, numii cuantozomi,
asemntori cu oxizomii mitocondriilor. n comparaie cu mitocondriile, plastidele n
urma centrifugrii se sedimenteaz i pot fi studiate la diferite nivele.
Cnd vorbim de plastide, avem n vedere n primul rnd cloroplastele. Rolul lor
biologic este primordial, pentru c ele asigur transformarea energiei luminoase,
efectueaz sinteza glucidelor plecnd de la bioxid de carbon i ap, degajnd n cursul
activitii oxigen, care a modificat n mod considerabil nveliul terestru al planetei
noastre. Exist i alte funcii plastidiale, al cror rol nu este neglijabil. Amidonul, de
exemplu, principala surs energetic n alimentaia uman, este un produs plastidial.



Fig. 3.8. Tipuri de cromatofori la alge:
A - Spirog/fa, B - Zygnerna, C - Draparnaldia, D -Oedogonium, n - nucleu, chr - croma-
tofor, pir-pirenoid, am amidon

Acizii aminici i proteinele, indispensabile structurii i funcionrii
organismelor animale, provin, n mare parte, de la cloroplastele consumate de
erbivore. Culorile foarte vii ale mediului nostru nconjurtor snt, cel mai adesea,
furnizate de plastide.
La microscopul fotonic, cloroplastele au fost descoperite de H. Meyer (1883) i
W. Schimper (l 885). n 1948, A. Frey-Wyssling, utiliznd microscopul polarizant, a
demonstrat c granulele prezente n cloroplaste au o structur lamelar. La
microscopul electronic, cloroplastul apare limitat de o anvelop (membran dubl) ce
nvelete substana fundamental stroma, n strom membrana intern formeaz
un ansamblu de membrane (lamele) orientate paralel cu axa mare a organitului, care
conin pigmeni i formeaz sacule nchise sau tilacoizi de dou feluri: unii discoidali,
dispui n teanc ca monedele, formnd grana (tilacoizi granari); ceilali, etalai n
strom, leag granele (tilacoizi intergarnari sau stromatici). n strom se mai
ntlnesc i diverse incluziuni: granule de amidon, globule osmiofile, plastoglobule,
fibrele de ADN plastidial i ribozomi. Cele dou membrane ale anvelopei difer din
8
punct de vedere biochimic i fiziologic. Ca i n cazul mitocondriilor, ntre
membrana extern a anvelopei i cea intern se afl un spaiu intermembranar

Sarcina 3. Privii microfotografiile electronice, care demonstreaz structura
submicroscopic a mitocondriilor. Mitocondriile snt delimitate de 2 membrane,
ntre aceste membrane se gsete un spaiu numit perimitocondrial. Membrana
intern formeaz criste invaginaii. Pe microfotografii se vd criste care formeaz
spaii ntrerupte, substana matricial circulnd liber prin mitocondrii, de-a lungul
cristelor. Membrana intern a mitocondriilor este acoperit cu particule globulare cu
dimensiunea de 8-10 nm. Fiecare globul este situat pe un picioru, cu ajutorul
cruia se fixeaz de membrana mitocondriei. Aceste particule snt uniti structurale
elementare ale mitocondriilor, numite ATP-zome, ce conin ATP-sintetaze i iau
parte la cuplarea procesului de oxidare i fosforilare. Dou mitocondrii snt apropiate
una de alta prin numeroase criste, formnd chiar jonciuni mitocondriale. Un numr
mare de mitocondrii se afl n fibra muscular, de aceea ea formeaz o cantitate mare
de ATP, necesar pentru contractare. Pe baza microfotografiilor electronice au fost
alctuite schemele structurii submicroscopice ale mitocondriilor (fig. 3.9; 3.10.).





Fig. 3.9. Evoluia ultrastructurii mitocondriilor n cursul diferenierii celulare:
A - mitocondrie dintr-o celul meristematic (ci - cristele interne puin dezvoltate); B -
mitocondrie dintr-o celul n curs de difereniere (ci - cristele interne ocup toat matricea -
mx), C - mitocondrie dintr-o celul medular difereniat, slab structurat i prevzut cu
tubuli(t)



Fig. 3.10. Ultrastructura (A) i structura schematic a unei mitocondrii (B -
reprezentare tridimensional, D - seciuni, C - detaliu al unei criste mitocondriale)
9
(evideniind particule elementare cu ATP-aze): gr - granul osmiofil, mrb - mitorobozom,
me - membran extern, mi - membran intern, mx - matrice, ira - spaiu
intermembranar

Sarcina 4. Privii cloroplastele n celulele frunzei de Elodea canadensis (fig.
3.11). Observai forma, localizarea, numrul lor n celul, n celule se poate constata
amidonul de asimilaie. Pentru aceasta se ia frunza, care a fost inut la lumin i se
introduce ntr-o soluie de iodur de caliu. O poriune de frunz se studiaz la
microscop. Iodul acioneaz asupra amidonului asimilat n cloroplaste, colorndu-1 n
albastru-violet. Desenai cteva celule.

Fig. 3.11. Micarea de rotaie n celulele deElodea canadensis;
c - citoplasm, cl cloroplast, lm - lamel median, m - meat, n - nucleu, ne - nucleol, p - perete,
pl - plasmalem, t - tonoplast, v vacuol
Evaluare:

1. Numii organitele unimembranare?
2. Care sunt organitele bimembranare?
3. Definii organitele amembranare?
4. Care este funcia reticolului endoplazmatic?
5. Care este funcia Aparatului Golgi?
6. Enumerai componentele de baza ale Aparatului Golgi?
7. Cate tipuri de lizoomi cunoatei?
8. In ce an i de cine au fost descoperite plastidele i mitocondriile
9. Structura mitocondriei i cea plastidelor?
10. Care este funcia mitocondriilor i plastidelor ?


10