Antigene, Anticorpi,

Molecule HLA
Curs farmacie
Antigene
antigen, imunogen, epitop
Antigen (Ag)
STRUCTURI MACROMOLECULARE NON-SELF

sistemul imun (limfocitul B / T) hotrte dac o molecul e self sau non-self
Imunogen
Ag sunt recunoscute de sistemul imun ca non-self dar nu toate declaneaz rspuns imun
un Ag care declaneaz rspuns imun se numete imunogen sau antigen complet
un Ag poate fi recunoscut ca non-self dar s nu declaneze rspuns imun dect n anumite
condiii (ex. hapten - carrier), este aadar un antigen incomplet
Epitop
un Ag nu este recunoscut n totalitate de limfocite
partea imunologic activ, care se cupleaz cu receptorii specifici
ai limfocitelor se numete epitop sau determinant antigenic
sunt n general secvene moleculare mici care protruzioneaz din
conformaia Ag
Ag pot avea unul (monovalente) sau mai muli epitopi
(multivalente)
Epitopi
Structur primar Structur secundar Structur teriar Structur cuaternar
Lys
Ala
Gly
Lys
Val
Leu
Antigene
Factori care determin imunogenitatea
Dependeni de antigen
Diferena biochimic fa de structurile self - distana filogenetic ntre specii
Mrimea (conteaz!) - moleculele sub 5 kDa nu sunt n general imunogene
Complexitatea biochimic - ex. peptidele polimerice sunt mai puin imunogene, la aceeai
mrime, dect cele care posed aminoacizi aromatici
Organizarea conformaional - cu ct e mai complex, cu att mai imunogen
cele mai eficiente imunogene - peptidele
mai puin eficiente - polizaharidele
n general neimunogene - lipidele, acizii nucleici
Antigene
Factori care determin imunogenitatea
Dependeni de organism
Vrsta - administrarea aceluiai antigen n diferite perioade de via genereaz efecte diferite
la ft, nou nscut - toleran (sistemul imun imatur)
la adult - rspuns imun manifest (sistem imun matur, eficient)
la btrn - rspuns imun diminuat, aberant (sistem imun degenerat)
Genotipul - rspuns diferit la acelai Ag, la persoane diferite
diferene de ras / diferene individuale
Dependeni de modul de administrare
Doza de administrare - exist o doz optim de stimulare a sistemului imun
doze prea mici - toleran de zon joas
doze prea mari - toleran de zon nalt
Numrul de administrri - rspunsul imun crete n intensitate la administrri repetate
Calea de administrare - este determinant pentru intensitatea i viteza rspunsului imun
cele mai eficiente ci - intravenoas, subcutanat, intraperitoneal
mai puin eficient - calea oral
Antigene
Epitopi
Clasificarea epitopilor proteici
Epitopi liniari
un segment continuu de AA din structura unei proteine
pot fi expui (accesibili permanent) sau ascuni (accesibili doar prin denaturare)
Epitopi conformaionali
sunt formai din AA aflai la distan n structura primar a proteinei
aceti AA sunt adui n apropierea prin mpachetarea panglicii proteice

Caracteristicile recunoaterii epitopilor de ctre limfocite
Limfocitele B
sunt de tip proteic, polizaharidic, mai rar fosfolipide sau lipoproteine
epitopii sunt hidrosolubili, liniari (expui) sau conformaionali
Limfocitele T
sunt de tip proteic (8-9 AA la LTc, 13-18 AA la LTh)
epitopii sunt doar liniari
Antigene
Clasificarea epitopilor proteici
Denaturare Denaturare
Proteoliz
Epitopi
conformaionali
Epitopi
liniari
Accesibili
Inaccesibili
Pierderea epitopilor
prin denaturare
Ig se fixeaz doar de epitopii
proteinelor denaturate
Ig se fixeaz de epitopii
proteinelor native i denaturate
Antigene
Clasificare
Antigene timoindependente
determin producia de anticorpi fr a necesita intervenia limfocitelor T helper
sunt n general structuri polimerice care cupleaz simultan un mare numr de receptori ai
limfocitului B (BCR) i l stimuleaz masiv, fr a mai fi necesar ajutorul limfocitelor T
sunt polizaharide din capsula bacteriilor (ex. LPS)
genereaz apariia de IgM, nu induc formarea de celule B de memorie (RI secundar)

Antigene timodependente
marea majoritate a antigenelor
necesit intervenia limfocitelor T helper pentru a genera rspuns imun
genereaz apariia Ig de toate clasele, induc formarea celulelor B de memorie (RI
secundar)
Anticorpi
Definiie
Anticorpii sunt proteine serice aflate n fraciunea gama-globulinelor
Se mai numesc imunoglobuline, deoarece sunt globuline cu rol de aprare imun

ANTICORPI (Ac) = IMUNOGLOBULINE (Ig) = GAMAGLOBULINE
Se prezint sub 2 forme:
membranar prezente doar pe membrana
limfocitului B, formeaz receptorul specific de antigen
(BCR), cu rol n recunoaterea antigenului
secretat rol n eliminarea antigenelor (funcia
efectorie a sistemului imun)
Au forma literei Y
n centru - regiune balama, asigur mobilitatea braelor
braele superioare - Fab (fragment antigen-binding)
regiunea inferioar - Fc (fragment cristalizabil)

Balama
Fab
Fab
Fc
Anticorpi
Structur primar
O molecul de imunoglobulin prezint 4 lanuri:
2 lanuri grele H (heavy) identice - , , o, o sau c
formate din circa 400 - 500 AA
tipul de lan greu determin clasa de imunoglobuline - IgG, IgM, IgA, IgD i IgE
2 lanuri uoare L (light) identice - k sau
formate din circa 200 AA
Fiecare lan Ig prezint 2 regiuni:
variabil (VH sau VL)
constant (CH sau CL), cuprinde
regiunea balama
Fiecare regiune are domenii:
VH - domeniul VH
CH - domeniul CH
1
, CH
2
, CH
3
+ CH
4
VL - domeniul VL
CL - domeniul VL
Regiunea
variabil

Situsul de legare al Ag
Puni disulfidice
Regiunea
constant
Regiunea
variabil
Anticorpi
Structur tridimensional
domeniile variabile (VH i VL) formeaz situsul de legare cu Ag
acesta are form variabil, n funcie de forma antigenului
suprafeele Ag i Ac sunt complementare - principiul cheii n broasc
cu ct cele dou suprafee se potrivesc mai bine, Ac are afinitate mai mare pentru Ag
Anticorpi
Funcii
Funciile regiunii variabile - cuplarea Ag
formarea situsului de legare cu antigenul
aceste regiuni se numesc variabile deoarece secvena AA difer mult de la o Ig la alta
astfel, diversitatea structural asigur o enorm varietate de Ig, fiecare destinat unui
anumit Ag

Funciile regiunii balama - mobilitate
funcioneaz ca un pivot
permite celor 2 situsuri de legare de pe cele 2 brae s cupleze Ag la distan variabil

Funciile regiunii constante - eliminarea Ag
domeniile CH1 i CL au rol de a prelungi braele superioare ale Ig, permind cuplarea a 2
Ag aflate la distan mai mare
domeniile CH2 (CH3) au rol de activare a complementului, pentru a distruge Ag
domeniile CH3 (CH4) au rol de cuplare cu receptori specifici de pe macrofage, neutrofile,
celule NK etc., ceea ce ajut de asemenea la eliminarea Ag
Anticorpi
Ig membranare / Ig secretate
Ig membranare ale limfocitului B sunt utilizate ca receptor specific de antigen (BCR)
prezint suplimentar, n continuarea regiunii constante, 2 regiuni:
o regiune transmembranar
o regiune citoplasmatic
fiecare limfocit B are pe membrana sa un singur tip de Ig, cu o anumit secven de AA
n regiunea variabil (o anumit form a situsului de legare cu Ag) destinat s cupleze
doar un anumit Ag
dac acel Ag apare n circulaie, el se cupleaz cu Ig membranare
limfocitul B este activat, se divide rapid i se difereniaz n plasmocite (cu ajutorul LTH)
plasmocitele produc o mare cantitate de Ig pe care le elimin n lichidul nconjurtor
Ig secretate produse de plasmocite sunt identice ca structur cu Ig membranare iniiale,
dar le lipsete segmentul transmembranar i citoplasmatic
ele ajung prin lichide n toate regiunile organismului i se cupleaz cu Ag specific
dup cuplare, activeaz complementul i se leag de receptorii unor celule distructive,
determinnd astfel eliminarea Ag

Anticorpi
Generarea diversitii Ig
fiecare om are, la un moment dat, sute de milioane de tipuri de Ig

acestea difer ntre ele prin forma situsului de legare cu Ag

limfocitele B, n cursul maturrii din mduva hematogen, efectueaz un proces numit
recombinare genic, prin care se genereaz aceast uria varietate de Ig

dup ntlnirea cu Ag, n organele limfoide secundare, limfocitele B activate sufer
procese de mutaie frecvent a genelor imunoglobulinice, pentru a genera Ac tot mai
eficieni

tot n aceast faz are loc schimbarea clasei de Ig, de la IgM la IgG (Ac mai eficieni),
cu pstrarea specificitii antigenice

toate aceste metode determin, n final, apariia unor molecule de tip Ig care cupleaz Ag
cu mare afinitate

Anticorpi
Clasele de imunoglobuline

Imunoglobulina G
80% din Ig serice
monomeri
prezint 4 subclase, notate IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4
cele mai eficiente Ig, apar n rspunsul imun secundar
trec prin placent (protecia ftului)
Imunoglobulina M
10% din Ig serice
pentameri
domeniul CH2 - rol de balama
prezint puni disulfidice ntre monomeri
prezint lan J
apar n rspunsul imun primar
nu trec prin placent
Puni
disulfidice
Lan J
Anticorpi
Clasele de imunoglobuline

Imunoglobulina A
10-15% din Ig serice, marea majoritate a Ig din secreii
dimeri
2 forme: seric i secretorie
forma secretorie prezint o structur numit component
secretorie care protejeaz molecula de digestie
Imunoglobulina D
0,2% din totalul Ig, rol redus
Imunoglobulina E
0,01% din totalul Ig serice
rol esenial n fenomenele alergice
IgE se fixeaz pe membrana mastocitelor
cnd apar Ag (alergene), determin degranularea
mastocitelor cu eliberarea de mediatori
Lan J
Puni
disulfidice
Mastocit
Molecule HLA
Definiie
ansamblu de molecule membranare care mediaz prezentarea Ag i fenomenele imune
determin tolerana / rejetul grefelor, de aceea formeaz
COMPLEXUL MAJOR DE HISTOCOMPATIBILITATE
(Major Histocompatibility Complex - MHC)
d.p.d.v. istoric, la om s-au descoperit iniial pe leucocite, de aceea se mai numesc
antigene leucocitare umane (Human Leucocyte Antigen - HLA)
molecule MHC = molecule HLA
trei clase de molecule HLA
clasa I
clasa a II-a
clasa a III-a
codificate de gene situate pe cr. 6
motenim jumtate din genele HLA de la mam i jumtate de la tat

Molecule HLA
Rol
Legarea antigenelor proteice (peptide)
HLA clasa I:Antigene endogene
HLA clasa II: Antigene exogene
Prezentarea acestor antigene limfocitelor T
HLA clasa I: limfocite T CD8+ (limfocite T citotoxice)
HLA clasa II: limfocite T CD4+ T (limfocite T helper)

Limfocit T
Receptor de
Antigen
Molecula
HLA
Peptid
Molecule HLA
HLA clasa I
Structur
un lan o cu 3 domenii o1, o2 i o3
domeniile o1 i o2 idelimiteaz situsul de legare
|-2 microglobulina
Tipuri
3 tipuri de HLA clasa I: A, B, C
Distribuie
Toate celulele nucleate din organism
Nu au HLA I: eritrocitele, neuronii, spermatozoizii,
celulele trofoblastice
Funcii
Se cupleaz n interiorul celulei cu segmente din
proteinele sintetizate n acea celul
Prezint, la exteriorul celulei, aceste peptide la
limfocitul T citotoxic
Dac peptidele sunt non-self (cel. infectate viral,
cel. tumorale) activeaz LTC i astfel celula e
distrus

Situsul de legare
al peptidului
|-2 microglobulina
Regiune
transmembranar
Peptid
Regiune
citoplasmatic
Regiune
extracelular
Molecule HLA
HLA clasa a II-a
Structur
un lan o cu 2 domenii o1 i o2
un lan | cu 2 domenii |1 i |2
domeniile o1 i |1 idelimiteaz situsul de legare
Tipuri
mai important este DR, mai exist DQ, DP, DO
etc.
Distribuie
numai pe celulele prezentatoare de antigen
(macrofage, celule dendritice, limfocite B)
Funcii
se cupleaz n interiorul celulei prezentatoare de
antigen cu peptide rezultate din procesarea
antigenelor exogene
Prezint, la exteriorul celulei, aceste peptide la
limfocitul T helper
LTH se activeaz astfel i stimuleaz alte celule
imune (limfocitul B, limfocitul T citotoxic)

Situsul de legare
al peptidului
Regiune
transmembranar
Peptid
Regiune
citoplasmatic
Regiune
extracelular
Molecule HLA
Implicarea HLA n recunoaterea Ag

Interaciune
peptid - TCR
Interaciune
MHC - TCR
Interaciune
MHC - peptid
Situsul de legare a
peptidului
Molecule HLA
Diversitate
Exist zeci - sute de variante HLA din fiecare tip, notate cu litera corespunztoare tipului
i numrul alelei (ex. HLA A3, A66, B7, B27, C3, C9, DR3, DR4 etc.)
Fiecare om are, pe suprafaa celulelor sale, 2 tipuri distincte de molecule HLA clasa I de
tip A, 2 de tip B, 2 de tip C i 2 de tip DR cte una motenit de la mam i de la tat
Astfel, exist foarte multe posibiliti de combinaie a diferitelor tipuri de HLA, ceea ce
face ca fiecare om s aib practic o combinaie HLA distinct

Datorit recunoaterii HLA de ctre limfocitele T citotoxice, aceste molecule determin
tolerana sau rejetul grefelor
Cu ct combinaia de HLA este mai asemntoare ntre donor i recipient, ansa de
supravieuire a grefei este mai mare
Determinarea combinaiei de molecule HLA i identificarea unui donor compatibil este
esenial pentru efectuarea unui transplant reuit (mai ales transplant de rinichi, mduv)