Alergologie LP.3.

EVALUAREA BIOLOGIC A PACIENTULUI ALERGIC

A. Hipersensibilitatea de tip imediat

1. Determinarea IgE serice
2. Determinarea triptazei serice
3. Testul de degranulare a bazofilelor
B. Hipersensibilitatea de tip ntrziat
1. Testul de transformare limfoblastic
A.1. Determinarea IgE serice
reprezint sub 0,001% din totalul Ig serice = 0,1-0,4 g/ml
nivel seric foarte pot fi puse n eviden doar prin metode radio-imunologice sau imunoenzimatice
timp de njumtire 3 zile
concentraia seric boli alergice i parazitare
IgE serice totale
IgE serice specifice
dozarea lor din snge prezint:
Sensibilitate - 89%
Specificitate - 91%
niveluri de IgE totale probabilitate redus de boal clinic
niveluri de IgE specifice la un alergen corelaie bun cu afeciunea clinic
Msurarea IgE circulante ofer o evaluare obiectiv a prezenei sensibilizrii la un alergen.
IgE serice totale
cantitatea total de IgE circulante din snge
apar n urma sensibilizrii la alergeni
utile n diagnosticarea bolilor alergice IgE-mediate
concentraie seric dependent de vrst n copilrie valorile atinse n jurul vrstei
de 10 ani tind s se menin i n viaa adult
IgE
totale

1-6
luni

6-12
luni

1-5
ani

6-9
ani

10-15
ani

adult

(UI/ml)

1,5

15

60

90

200

150

IgE serice specifice

cantitatea de IgE alergen-specifice prezente n snge
apar n urma sensibilizrii la un alergen specific evaluare obiectiv a sensibilizrii la un
anumit alergen

IgE specifice
Nivel nedetectabil
Nivel sczut
Nivel moderat
Nivel semnificativ crescut
Nivel crescut
Nivel foarte crescut
Nivel extrem de crescut

Titru (UI/ml)
< 0,34
0,35 0,69
0,70 3,49
3,50 17,49
17,50 - 50
50 - 100
> 100

Clasa
0
1
2
3
4
5
6

Valoarea clinic
IgE serice totale
valori crescute doar la 30-40% dintre pacienii cu rinit alergic
IgE serice specifice
valoare diagnostic similar cu pricktest-ul
paradoxal sensibilitate mai mic dect testele cutanate
se utilizeaz n locul pricktest-ului n urmtoarele situaii:
lipsa extractelor standardizate pentru alergenul suspicionat
pozitivarea controlului negativ
imposibilitate ntreruperii terapiei antihistaminice
prezena de leziuni cutanate generalizate
Un test NEGATIV nu exclude existena unei sensibilizri alergice
1. Evalueaz stadiul de SENSIBILIZARE prin detectarea timpurie a nivelurilor de IgE, naintea
dezvoltrii tabloului clinic
2. Ofer suport n explicaia progresiei afeciunilor alergice MARUL ALERGIC
3. Stabilete SENSIBILIZAREA SPECIFIC LA ALERGENII implicai n dezvoltarea
simptomelor alergice
4. Ofer o orientare clar n stabilirea MANAGEMENTULUI BOLII

Identificarea alergenilor implicai

Elaborarea unor sfaturi individualizate reducerea expunerii la alergeni
Optimizate planurilor terapeutice individuale (doz, durat, step up/down)
Stabilirea indicaiei de imunoterapie specific
Aprecierea dezvoltrii toleranei imune (alergii alimentare, imunoterapie specific)

A.2. Determinarea triptazei serice

principala component proteic coninut n granulaiile mastocitare
principala surs de triptaz mastocitele activate n urma unei reacii de hipersensibilitate de tip I
dou forme de triptaz seric:
-triptaza - secretat de ctre toate mastocitele
- reflect numrului total de mastocite
- n mastocitoza sistemic
-triptaza matur - secretat doar de ctre mastocitele activate
- se coreleaz cu activarea mastocitar
- n anafilaxie
majoritatea laboratoarelor determin triptaza total ( + )
nivelul seric de triptaz:

 atinge un vrf la 30-60 min. de la debutul reaciei anafilactice

timp de njumtire 2 h
valorile se menin crescute 4-6 h
Momentul optim de recoltare este la 30 min. 3 h de la debut
VN: triptaza total: < 11,4 ng/ml
-triptaza matur: < 1 ng/ml
VP: triptaza total >11,4 ng/ml
-triptaza matur > 2 ng/ml
triptaza total > 20 ng/ml se asociaz cu mastocitoz sistemic

A.3. Testul de degranulare a bazofilelor

evaluarea in vitro a activrii bazofilelor n urma contactului cu un alergen:

Reacii IgE-mediate
Reacii nonIgE-mediate (pseudo-alergii degranulare celular produs n mod direct)

INDICAII
Evaluarea reaciilor alergice de tip imediat n cazurile n care istoricul bolii, prick-testul i determinarea
nivelului seric de IgE nu sunt suficient de sugestive pentru conturarea unui diagnostic.
veninuri de insecte
medicamente
acarieni, scuame de animale
latex, formaldehid i alte substane chimice
alimente
materiale dentare i ali alergeni profesionali
AVANTAJE
Metod rapid de diagnostic (1 h)
Nu prezint riscuri pentru pacient
Test funcional ce reproduce rspunsul imun in vitro
Sensibilitate bun
Specificitate
Nu necesit ntreruperea tratamentului antihistaminic
DEZAVANTAJE
Necesit celule viabile neactivate
Necesit aparatur performant
TEHNIC
1. Izolarea bazofilelor din sngele recoltat
2. Stimularea cu extract alergenic
3. Evaluarea flow-citometric a expresiei CD63
INTERPRETARE
Test POZITIV: Creterea expresiei CD63 > 10% comparativ cu martorul negativ (activare spontan a
bazofilelor).
Obs. Un test NEGATIV nu exclude existena unei reacii de hipersensibilitate de tip imediat

B.1. Testul de transformare limfoblastica (LTT)

singura metod de evaluare in vitro a hipersensibilitii de tip IV
PRINCIPIU
Limfocitele sensibilizate anterior fa de un anumit Ag prolifereaz i se transform n blati la o nou
expunere la acelai Ag.
Momentul optim de efectuare LTT - 10 zile 6 sptmni de la episodul alergic
INDICAII
1. Evaluarea hipersensibilitii de tip IV la medicamente, metale, materiale dentare, alimente
2. Evaluarea unor defecte sau tulburri funcionale ale imunitii celulare
3. Evaluarea reactivitii limfocitare fa de anumii ageni infecioi
AVANTAJE
Nu prezint riscuri pentru pacient
Relevan mai mare comparativ cu patch testul
Nu necesit ntreruperea tratamentului antihistaminic
DEZAVANTAJE
Metod costisitoare de diagnostic
Sensibilitate 60-70%
Specificitate - 85%
Testul nu este standardizat pentru orice alergen i necesit experien
Necesit - control pozitiv excluderea toxicitii induse de medicamente
- control negativ excluderea activrii non-specifice
TEHNIC
1. Izolarea limfocitelor din sngele venos periferic
2. Resuspendarea celulelor n mediu de cultur specific
3. Stimularea limfocitelor cu extracte alergenice
4. Adugarea n ziua 6 de cultur de timidin marcat cu 3H, care se va ncorpora n celulele-fiic
ale limfocitelor activate (n urma replicrii ADN)
5. Cuantificarea sintezei noi de ADN induse de alergen prin msurarea ratei de incorporare a 3Htimidinei direct proporional cu rata de proliferare limfocitar
Pe baza ratei de incorporare a a 3H-timidinei se calculeaz idexul de stimulare (SI)
SI = radioactivitatea ncorporat n culturile cu alergen / radioactivitatea ncorporat n culturile fr alergen
INTERPRETARE
Test NEGATIV
SI < 2 nu exist sensibilizare de tip IV fa de alergenul testat
Test POZITIV
2 < SI < 3 intens sugestiv pentru o reacie pozitiv
SI > 3 rezultat net pozitiv
Test NECONCLUDENT
Nu s-au ntrunit criteriile de validare a testului:
Invalidare controlului pozitiv (lipsa de activare policlonal a limfocitelor)
Invalidarea controlului negativ (proliferare spontan crescut)
Obs. Un test NEGATIV nu exclude existena unei reacii de hipersensibilitate mediat celular

Eozinofilele
VN: 1-4 %
< 350/mm3
Creterea numrului de eozinofile > 4%
eozinofilie
> 500/mm3
Afeciuni alergice
Parazitoze
Neoplazii
Boli inflamatorii autoimune
> 1500/mm3 sindrom hipereozinofilic

Activitatea diaminoxidazei (DAO)

alimente cunoscute a conine un nivel ridicat de histamin - supuse fermentaiei microbiene n cadrul
procesului de fabricaie: histidin (aa coninut n toate proteinele) histamin
alimente care stimuleaz eliberarea de histamin n mod fiziologic : albu de ou nefiert, crustacee,
pete, ciocolat, cpuni, roii, ananas, alcool
Intolerana la histamin consecina dezechilibrului dintre cantitatea de histamin acumulat n
organism i capacitatea de degradare a acesteia de ctre enzima DAO
Deficitul DAO este dobndit:
afeciuni gastrointestinale care producia sa
inhibarea activitii enzimatice prin consum de alcool, medicamente
NU este o afeciune IgE-mediat testarea cutanat i IgE serice specifice NEGATIVE
INDICAII
Pacieni cu suspiciune clinic de intoleran la histamina (prezena a 2 simptome tipice cu rspuns
favorabil la dieta fr alimente cu coninut n histamin)
VN: 14-33 UI/ml
INTERPRETARE
activitatea DAO capacitate enzimatic de degradare a histaminei
activitatea DAO proces alergic activ